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Criopreservação de sêmen de galos / Roosters sperm cryopreservationLaan, Guilherme Martino Van Der 30 November 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-11-30 / Adding extenders to poultry semen is currently used in artificial insemination
programs to optimize the management of genetically superior males. Fresh semen
fertility usually declines after 1 hour of collection, raising the need to use diluents and
low temperatures to store semen for longer periods. Low density lipoprotein (LDL),
extracted from the egg yolk, is used as a component of various mammalian semen
diluents, however its application on poultry semen has not been evaluated.
Regarding cryopreservation, different methodologies have been developed during
the past years. One alternative is to use dimethylacetamide (DMA) as a
cryoprotectant. The best results with DMA are obtained when semen is subjected to
ultra-fast freezing, in pellets, and to a fast thawing at 60ºC. The objective of this work
was to establish protocols to preserve rooster sperm, focusing on the use of LDL as
a component of the refrigeration diluent, and on DMA as a internal cryoprotectant for
freezing. To reach these objectives, the effect of adding different levels of LDL
liposomes to the cooling diluent, upon the quality characteristics of semen
refrigerated at 5 °C, was evaluated. The quality of semen frozen with DMA, packed
in straws or pellets, and thawed in three different temperatures was also evaluated.
The results obtained allow to conclude that: adding 6% of LDL liposomes to the
cooling diluent preserves the general sperm quality, suggesting that improvements
on fertility could be obtained if a limit in lipoprotein supplementation is imposed; body
temperature (40°C) is most suitable for thawing sperm frozem with DMA; and packing
sperm in straws is more efficient than packing in pellets. This last observation is of
great value, since storing semen in straws is more appropriate due to sanitary
reasons, and more convenient for ejaculates identification, especially for field
application of genetic banks. / A adição de diluentes ao sêmen de aves é uma prática rotineiramente
empregada em programas de inseminação artificial para melhorar o manejo de
machos geneticamente superiores. A fertilidade do sêmen fresco normalmente decai
1 hora após a coleta, por isso a necessidade do uso de diluentes e temperaturas
hipotérmicas para o armazenamento do sêmen por períodos mais prolongados. A
Lipoproteína de Baixa Densidade (LDL), extraída da gema de ovo, tem sido utilizada
na composição de diversos diluentes de sêmen para mamíferos, porém, ainda não
tinha sido avaliada a sua aplicação em diluentes de resfriamento para sêmen de
aves. Em relação ao congelamento, diversos métodos foram desenvolvidos ao longo
dos anos. Uma das alternativas é o uso da Dimetilacetamida (DMA) como
crioprotetor. Os melhores resultados obtidos com DMA ocorrem quando o sêmen é
submetido ao congelamento ultra-rápido na forma de pellets e a um rápido
descongelamento à 60ºC. O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de
protocolos de preservação de sêmen de galos, enfocando o uso de Lipoproteínas de
Baixa Densidade (LDL) como um componente do diluente para resfriamento, e a
Dimetilacetamida (DMA) como crioprotetor interno para o congelamento. Para isto,
foi verificado o efeito da adição de diferentes níveis de lipossomas de LDL na
composição do diluente de resfriamento, sobre as características de qualidade do
sêmen resfriado à 5 °C. Também foi avaliada a qualidade do sêmen congelado
utilizando DMA como crioprotetor, envasado em palhetas ou pellets, e
descongelados em três diferentes temperaturas. Os resultados obtidos nestes
estudos nos permitiram concluir que: a adição de lipossomas de LDL ao diluente de
resfriamento mantém a qualidade geral dos espermatozóides quando adicionado na
proporção de 6%; sugerindo que melhorias na fertilidade podem ser obtidas desde
que seja respeitado um limite de adição desta lipoproteína ao diluente; a
temperatura corporal (40°C) foi a mais apropriada para descongelamento de sêmen
criopreservado com DMA; e ainda, o envase em palhetas é mais eficiente em
relação ao pellet. Esta última observação é de grande valor, visto que o
armazenamento do sêmen em palhetas é mais adequado por razões sanitárias, e
mais conveniente para a identificação dos ejaculados, especialmente para a
aplicação a campo de bancos genéticos.
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Efeito dos métodos de vitrificação, OPS e SSV, com adição de bloqueador sintético de gelo, sobre a viabilidade de oócitos de camundongos e bovinos / Effect of the vitrification methods OPS and SSV, with inclusion of a synthetic ice blocker, on the viability of mice and bovine oocytesSantos, Elisa Caroline da Silva 09 May 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-05-09 / Oocyte vitrification is a valuable tool for preservation of genetic material. This study
compared the effects of vitrification in OPS and SSV, with addition of SupercoolTM X-
1000 (copolymer), on the viability of mature murine oocytes and immature bovine
oocytes. Oocytes were vitrified in OPS and SSV, with addition of 0.1%, 1.0%
copolymer and without copolymer, besides a control group with no vitrification.
Murine oocytes were evaluated for membrane viability, in the first experiment, and for
cleavage rate, in the second experiment. Results were superior with the
concentration of 0.1% copolymer, for both methods, in the first experiment. In the
second experiment, the SSV method without copolymer presented lower cleavage
rate (9.2%) than the control group (26.6%). In the third experiment, bovine oocytes
were vitrified and evaluated for maturation and membrane viability, but the results
were numerically inferior than those for the control group, for both methods. Those
results indicate that both vitrification methods can be used with inclusion of 0.1% of
copolymer, for mature murine oocytes, considering membrane viability, but the SSV
method without copolymer should not be used due to its low cleavage rate. However,
the procedures tested in this study are not recommended for cryopreservation of
bovine oocytes. / A vitrificação de oócitos é uma metodologia valiosa para a conservação de material
genético. Este trabalho comparou o efeito dos métodos de vitrificação OPS e SSV,
com adição de copolímero SupercoolTM X-1000 (copolímero), sobre a viabilidade de
oócitos maturos murinos e oócitos bovinos imaturos. Os oócitos foram vitrificados em
OPS e SSV, ambos com as concentrações de copolímero: 0%, 0,1% e 1% e o
controle não foi vitrificado. No primeiro experimento, os oócitos maturos murinos
vitrificados foram avaliados quanto à viabilidade de membrana e no segundo
experimento, quanto à clivagem. A concentração 0,1% de copolímero foi superior
(P>0.05) em ambos os métodos no primeiro experimento. No segundo experimento,
o tratamento SSV 0% apresentou resultado inferior (P<0.05) (9,2%) ao controle
(26,6%). No terceiro experimento, oócitos bovinos imaturos foram vitrificados e
avaliados quanto à taxa de maturação e viabilidade de membrana. Aparentemente,
segundo observações numéricas, os resultados de todos os tratamentos parecem
ser inferiores ao controle. Os resultados desta pesquisa indicam que ambos os
métodos podem ser utilizados com a concentração 0,1% de copolímero, na
vitrificação de oócitos murinos maturos. No entanto, a vitrificação, seguindo os
protocolos utilizados nesta pesquisa, não é indicada para a criopreservação de
oócitos bovinos imaturos.
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Efeito do jejum e da insulina exógena sobre parâmetros metabólicos e expressão gênica do receptor do hormônio do crescimento (GH) e fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-I), no folículo préovulatório de ovelhas / Effects of fasting and exogenous insulin on metabolic parameters and gene expression of growth hormone receptor (GHR) and insulin like growth factor I (IGF-I), in the pre-ovulatory follicles of ewesSchneider, Augusto 28 November 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-11-28 / In non-ovarian tissues GHR expression is regulated by insulin concentrations and is
correlated to IGF-I expression. In the ovary IGF-I expression is also related to insulin
levels, however no correlation with GHR was demonstrated until now. The aim of this
study was to investigate the effect of fasting or insulin administration on blood
concentrations of glucose, nonsterified fatty acids, insulin, insulin like growth factor I
(IGF-I) and estradiol and on follicular expression of growth hormone receptor (GHR)
and IGF-I mRNA in ewes. Fifteen ewes received an intravaginal progesterone
releasing device that was removed 6 days later (Day 0). In Day -2 the ewes were
divided in: control group, which received maintenance diet, insulin group, which
received insulin injections every 12 hours from Day -2 to 2 and fasting group, which
was submitted to fasting from Day -2 to 2. The results of the current study revealed
that insulin administration or fasting during the development of a follicular wave did
not affect (P=0.22) follicular diameter, although insulin injection increased (P=0.02)
estradiol production. There was no difference among groups for GHR or IGF-I mRNA
expression in granulosa (P=0.62, 0.43) or theca cells (P=0.92, 0.43). For fasting
group there was a positive correlation between glucose and estradiol (r=0.97,
P=0.006) and granulosa cell IGF mRNA (r=0.96, P=0.03). For insulin group estradiol
was positive correlated to follicular diameter (r=0.93, P=0.02) and granulosa cell
GHR (r=0.87, P=0.05) and IGF-I mRNA (r=0.79, P=0.10). In conclusion, exogenous
insulin or fasting did not affect follicular diameter and expression of GHR and IGF-I
mRNA in the pre-ovulatory follicle, although exogenous insulin increased estradiol
production. / Em tecidos não ovarianos a expressão do receptor do hormônio do crescimento
(GHR) é regulada pelas concentrações de insulina e está correlacionada a
expressão de fator de crescimento semelhante a insulina tipo I (IGF-I). No ovário a
expressão de IGF-I também está relacionada aos níveis de insulina, porém ainda
não foi demonstrada sua correlação com a expressão de GHR. O objetivo deste
estudo foi investigar o efeito do jejum ou administração de insulina nos níveis de
glucose, ácidos graxos não esterificados, uréia, IGF-I, insulina e estradiol e na
expressão folicular de RNAm para GHR e IGF-I em ovelhas. Quinze ovelhas
receberam um dispositivo intravaginal liberador de progesterona, que foi removido
após seis dias (Dia 0). No Dia -2 as ovelhas foram dividas em: grupo controle, que
recebeu uma dieta de manutenção; grupo insulina, que recebeu injeções de insulina
a cada 12 horas do Dia -2 ao Dia 2 e grupo jejum, que foi submetido à dieta hídrica
do Dia -2 ao Dia 2. Os resultados revelaram que a administração de insulina ou o
jejum durante o desenvolvimento de uma onda folicular não influenciaram (P=0,22) o
diâmetro folicular, no entanto a administração de insulina aumentou (P=0,02) a
produção de estradiol. Não houve diferença entre os grupos para a expressão de
RNAm para GHR e IGF-I nas células da granulosa(P=0,62; 0,43) ou teca (P=0,92;
0.43). Para o grupo jejum houve uma correlção positiva entre glucose e estradiol
(r=0,97, P=0,006) e RNAm IGF-I nas células da granulosa (r=0,96, P=0,03). Para o
grupo insulina o estradiol foi positivamente correlacionado ao diâmetro folicular
(r=0,93, P=0,02) e expressão de RNAm para GHR (r=0,87, P=0,05) e IGF-I (r=0,79,
P=0,10)nas células da granulosa. Em conclusão, a insulina exógena ou o jejum não
afetaram o diâmetro folicular e a expressão de mRNA para GHR e IGF-I no folículo
pré-ovulatório, apesar da insulina exógena ter aumentado a produção de estradiol.
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Eficiência de duas doses de D-cloprostenol para sincronização de estro em bovinos nas diferentes fases do ciclo estral / Efficiency of two doses of D-cloprostenol for synchronization of estrus in bovines in the different phases of the estrous cycleCembranelli, Marcello de Aguiar Rodrigues 02 August 2005 (has links)
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Marcello de Aguiar Rodrigues Cembranelli.pdf: 194658 bytes, checksum: 96ad43f9ea940a3c13431279e5bdc24b (MD5)
Previous issue date: 2005-08-02 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / The synchronization of estrus in bovines through the administration of luteolytic agents as prostaglandin F2 (PGF2) or its analogues has been widely used in reproductive programs of embryos transfer (ET) The luteolytic agents cause lysis of the corpus luteum resulting in the manifestation of estrus It is a practical and less expensive method when compared to other synchronization techniques and exhibits fertility indexes which are similar to the natural ones since there is no interference of factors such as bodily condition and nutrition among others The purpose of this paper was to verify the efficiency of the intramuscular administration of different doses (normal and reduced) of a luteolytic agent in different phases of the estrous cycle (dioestrus) and the responsivity time (interval administration-estrus) The experiment was carried out in Água Limpa farm in the city of Fama State of Minas Gerais Brazil in the period between November 2004 and January 2005 Two-hundred and eighty-eight applications of sodic D-cloprostenol were made whit the aim of synchronizing the estrus in crossbred heifers used as receptors in an embryo-transfer program The animals were observed in the natural estrus classified and grouped in accordance with the day of the cycle Group A corresponded to the animals injected on the 6th-8th day of deoestrus day 0 being considered as estrus Group B on the 9th-11th day Group C on the 12th-14th day and Group D the heifers on the 15th-17th day of dioestrus All the groups were subdivided into two some animals received 75 g (1ML) of sodic d-cloprostenol by intramuscular injection others received 150 g (2ML) As for total efficiency the 2ML dose showed a better response (p<0,01) 77,15% than the 1ML dose 50,55% Groups A (6 to 8) and B (9 to 11) showed nearly equal values (p<0,05) for total efficiency 66,67% for 2ML and 36.36% for 1ML in Group A and 78.43% and 56.67% respectively for Group B Groups C (12 to 14) and D (15 to 17) showed no differences (p<0,05) in efficiency between groups or doses 73.58% (2ML) and 52.00% (1ML) for Group C and 73.58% and 52.00% respectively for Group D For interval application to the beginning of estrus the following results were found Group A presented an average interval of 58 hours significantly differing (p<0,05) from the other groups 73.43 hours for Group B 79.06 hours for Group C and 75.23 hours for Group D The present study demonstrated that the dose of 1ML of D-cloprostenol is similar to the dose of 2ML as of the 12th day of the cycle Therefore a subdose may be an alternative to reduce costs in an ET program since one knows the stage of the estral cycle of the females / A sincronização do estro em bovinos através da aplicação de agentes luteolíticos como prostaglandina F2 beta (PGF2 beta) ou seus análogos tem sido amplamente utilizadas em programas reprodutivos e de transferência de embriões (TE)Os agentes luteolíticos causam lise do corpo lúteo resultando na manifestação de estro Consiste de um método prático e de menor custo quando comparado a outros métodos de sincronização e apresenta índices de fertilidade comparados ao natural desde que não haja interferências de fatores como condição corporal nutrição entre outros O objetivo deste trabalho foi o de verificar a eficiência da aplicação de diferentes doses (normal e reduzida) de um agente luteolítico via intramuscular em diferentes fases do ciclo estral (diestro) bem como o tempo de responsividade (intervalo aplicação-estro) O experimento foi realizado na fazenda Água Limpa no município de Fama-MG no período de novembro de 2004 a janeiro de 2005 Foram realizadas 288 aplicações de D-Cloprostenol sódico visando à sincronização de estro em novilhas mestiças utilizadas como receptoras num programa de transferência de embriões Os animais foram observados em estro natural classificados e distribuídos para o experimento de acordo com o dia do ciclo O grupo A correspondeu aos animais que estavam no dia da aplicação do 6° ao 8° dia do diestro considerando dia 0 como o estro O grupo B do 9° ao 11° dia do diestro O grupo C do 12° ao 14° dia do diestro e o grupo D as novilhas do 15° ao 17° dia do diestroTodos os grupos foram subdivididos em dois onde alguns animais receberam 75 miligramas (1ML) de D-cloprostenol sódico via intramuscular e o restante recebeu 150 miligramas (2ML) de D-cloprostenol sódico também intramuscular Para eficiência total a dose de 2ML apresentou melhor resposta (p<0,01) de 77,15% contra 50,55% da dose de 1ML Os grupos A (6 a 8) e B (9 a 11) apresentaram resultados próximos (p<0,05) da eficiência total sendo de 66,67% para 2ML e 36,36% para 1ML no grupo A e 78,43% e 56,67% respectivamente para o grupo B Portanto com melhor eficiência para o grupo que recebeu 2ML Os grupos C (12 a 14) e D (15 a 17) não mostraram diferença (p<0,05) na eficiência entre os grupos ou entre as doses com os seguintes resultados 73,58% (2ML) e 52,00% (1ML) para o grupo C e 73,58% e 52,00% respectivamente para o grupo D Para intervalo aplicação ao início do estro encontraram-se os seguintes resultados o grupo A apresentou intervalo médio de 58 horas diferindo significativamente (p<0,05) dos demais grupos que resultaram em 73,43 horas para o grupo B 79,06 para o grupo C e 75,23 para o grupo D O presente estudo mostrou que a utilização da dose de 1ML de D-cloprostenol sódico é semelhante à dose de 2ML a partir do decimo segundo dia do ciclo Portanto a utilização da subdose pode ser mais uma alternativa para se reduzir custos em um programa de TE desde que se conheça o momento da fase do ciclo estral das receptoras envolvidas no programa
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"Avaliação andrológica e criopreservação de sêmen de Ateles (macaco-aranha) mantidos em cativeiro"SILVA, Klena Sarges Marruaz da 19 December 2005 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-02-26T17:41:00Z
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Dissertacao_AvaliacaoAndrologicaCriopreservacao.pdf: 583263 bytes, checksum: 2c984e9b23730bb3ded92177091696eb (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-02-27T14:34:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2
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Previous issue date: 2005 / A biotecnologia aplicada à reprodução é uma ferramenta também importante para conservação de espécies ameaçadas de extinção. Algumas espécies de primatas não-humanos neotropicais têm sido amplamente agredidas por ações antrópicas, ocasionando a inclusão de 26 espécies brasileiras na lista oficial de animais ameaçados de extinção do IBAMA. As espécies de primatas não humanos Ateles belzebuth e Ateles paniscus, participantes do gênero
Ateles, popularmente chamados de macaco-aranha, encontram-se particularmente ameaçadas. Poucos estudos são realizados acerca do status populacional destas espécies e menos ainda
sobre dados reprodutivos e reprodução assistida. O presente trabalho pretendeu avaliar as características andrológicas de exemplares de primatas não humanos do gênero Ateles em
cativeiro e comparar a performance dos diluentes TES e CEBRAN II, este último à base de ringer lactato, como criopreservadores de sêmen destas espécies. O experimento foi realizado utilizando 06 exemplares machos de primatas não humanos do gênero Ateles (02 exemplares
de Ateles marginatus e 04 exemplares de Ateles paniscus) mantidos sob as mesmas condições
de cativeiro no Centro Nacional de Primatas (CENP-SVS/MS), em Ananindeua, Pará. Os
animais utilizados foram submetidos a exame clínico-andrológico e biometria testicular, antes
da colheita seminal realizada por eletroejaculação. Foram realizadas avaliações físicoquímicas
e de patologias espermáticas, além de avaliação de motilidade e vigor no sêmen a
fresco e pós-diluição com os diluentes TES e CEBRAN II. As alíquotas de sêmen diluídas
com os dois diluentes, na proporção 2:1, foram envasadas em minitubos com capacidade para
0,25 ml e criopreservados em nitrogênio líquido. Após descongelação, as doses envasadas
foram avaliadas em teste de termo-resistência (T.T.R.). As médias de volume e concentração
espermáticas obtidas foram, respectivamente, 1,94 ml (± 0,83) e 3.020.000 sptz/ml (±275,97).
O pH 8 foi observado em todas as amostras e todos os exemplares apresentaram coagulação
seminal. O índice de patologias espermáticas encontrados foi alto (69,8% ± 9,05) indicando
que pode haver influência da sazonalidade reprodutiva nas características seminais
encontradas nos animais deste experimento. Os resultados de avaliação de motilidade e vigor
do sêmen a fresco, diluído e no T.T.R. não puderam ser analisadas estatisticamente, pois
somente o sêmen de 03 animais demonstrou espermatozóides viáveis pós-descongelação, com
resultados que sugerem que o diluente TES apresenta melhor eficiência na preservação de
sêmen de Ateles do que o diluente CEBRAN II. / Biotechnology reproductive is a tool also important for conservation of endangered species.
Some neotropicals no humans primates no-humans have been attacked thoroughly by human
activities, causing the inclusion of 26 brazilian species in the official list of endangered
animals of IBAMA. The species of primates Ateles belzebuth and Ateles paniscus,
participants of the genus Ateles, popularly called spiders monkeys are particularly threatened.
Few studies are accomplished concerning the population status of these species, mainly about
reproductive data and assisted reproductive techniques. The present study intends evaluate
andrologic characteriscs of non human primates of genus Ateles in captive and compare the
performance of the diluentes TES and CEBRAN II, this last one to the base of ringer lactato,
as cryopreservatives of semen of these species. The experiment was accomplished using 06
male monkeys of primates no humans genus Ateles (02 Ateles marginatus and 04 Ateles
paniscus) maintained in the same captivity conditions in the National Center of Primates
(CENP-SVS/MS), Ananindeua, Pará. These animals were submitted to clinical and
andrological exams and testicular measurements, before the seminal collection by
eletroejaculation. Physiochemical evaluations were accomplished and spermatic abnormalities
too, besides motility and forward movement evaluation in the fresh semen and semen dilution
with the diluents TES and CEBRAN II. The ejaculates diluted with the two diluents
(2:1proportion) and were packed in plastic straws with capacity for 0,25 ml, cryopreserveds in
liquid nitrogen. After thawing, the packed ejaculates were appraised in term-resistance test
(T.T.R.). The volume averages and concentration obtained were, respectively, 1,94 ml (0,83)
and 3.020.000 sptz/ml (275,97). THE pH 8 was observed in all of the samples and all animals
presented seminal coagulation. The index of abnormalities spermatics found was loud (69,8%
9,05) indicating that can have influence of the seasonal breeding in the seminal
characteristics found in the animals of this experiment. The results of motility evaluation and
forward movement of the fresh and diluted semen and in T.T.R. could not be analyzed by
statistical method, because only the semen of 03 animals demonstrated viable spermatozoids
in thawing, with results that suggest that the TES diluent presents better efficiency in the
preservation of semen of Ateles than CEBRAN II.
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Análise bacteriológica de sêmen de catitus (Tayassu tajacu) criados em cativeiroBARTHA, Mário Mansour Pinheiro 20 February 2009 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-06-09T17:52:47Z
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Previous issue date: 2009 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Realizou-se a análise microbiológica de sêmen de 10 catitus machos criados em cativeiro no período de outubro de 2007 a janeiro de 2009, num total de 84 analises, com o objetivo de identificar a presença e freqüência de bactérias no mesmo, além de testar a sensibilidade de diferentes antimicrobianos frente aos microrganismos isolados. Nesse período, isolou-se um total de 225 colônias sendo 80 (35,6%) de Streptococcus sp., 72 (32%) Staphylococcus sp., 64 (28,4%) Micrococcus sp., 5 (2,2%) Corynebacterium sp. e 4 (1,8%) Enterococcus sp..Nos testes de sensibilidade utilizando onze antibióticos destacaram-se a Gentamicina (92,8%), Amicacina (85,3) entre aqueles mais eficazes frente aos microrganismos isolados. Concluiu-se que apesar da freqüência e dos gêneros dos microrganismos isolados no sêmen a taxa reprodutiva dos animais não foi afetada uma vez que essas bactérias podem ser provenientes da flora normal ou do meio em que os animais vivem, recomendando-se os antimicrobianos mais eficazes contra os microrganismos isolados para serem adicionados no diluidor caso haja necessidade de resfriamento do sêmen desses animais. / Was held the microbiological analysis of semen from 10 catitus males reared in captivity
from October 2007 to January 2009, in a total of 84 test, to identify the presence and
frequency of bacteria in it, in addition to test the sensitivity of different antibiotics against the
microorganisms isolated. During this period was isolated a total of 225 colonies, being 80
(35.6%) of Streptococcus sp., 72 (32%) Staphylococcus sp., 64 (28.4%) Micrococcus sp., 5
(2.2%), Corynebacterium sp. and 4 (1.8%) Enterococcus sp. In sensitivity ´s test, using
eleven antibiotics, highlighted to Gentamicin (92.8%), Amikacin (85.3) among those most
effective against the microorganisms isolated. It was concluded that despite the frequency
and genera of microorganisms isolated in semen the reproductive rate of animals was not
affected, since these bacteria may be from the normal flora or make part the environment in
which animals live, is recommending the most effective antimicrobial against the
microorganisms isolated, to be added in dilutive if there is a need of cooling the semen of
these animals.
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Eletroejaculação em caititus (Tayassu tajacu): características seminais pré e pós-refrigeraçãoKAHWAGE, Priscila Reis 20 May 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Para implementar um sistema de criação de Tayassu tajacu é necessário estudar sua biologia reprodutiva, principalmente os aspectos referentes aos machos. O objetivo do trabalho foi testar
a eficiência da eletroejaculação para obtenção de sêmen, descrever o perfil seminal e testar a
capacidade de conservação de gametas masculinos sob refrigeração. Foram selecionados 11
machos adultos (76,8±37,8 meses, 19,5±2,7 kg) para a avaliação da biometria testicular, e 8
deles foram submetidos à eletroejaculação (45±13 estímulos, 12 volts, 3 segundos/pulso e
descanso de 3 segundos). As amostras colhidas foram avaliadas quanto às características físicas
(aspecto, cor, volume total, concentração, pH, motilidade e vigor espermáticos) e características
morfológicas (viabilidade e defeitos espermáticos). As amostras foram divididas e diluídas em
BTS (diluidor de curta duração) ou X-Cell® (longa duração) e mantidas sob refrigeração a 17º
C. As amostras foram avaliadas imediatamente após a diluição (T0), após 24 horas (T24) e 48
horas (T48) de resfriamento. Os animais apresentaram testículo esquerdo com comprimento de
3,8±0,4 cm, largura de 2,6±0,3 cm e consistência de 2,3±0,2, e testículo direito com 3,8±0,5 cm
de comprimento, 2,7±0,3 cm de largura e 2,3±0,2 de consistência. A taxa de sucesso obtida
com a eletroejaculação foi de 75,21%. O sêmen apresentou: volume 0,81±0,86 mL,
concentração 137,44±153 x 106 sptz/mL, pH 7,92±0,73, motilidade 52,66±28,79%, vigor
2,2±0,8, viabilidade 55,84±28,55%, defeitos maiores 22,87±12,93%, defeitos menores
9,11±5,88% e defeitos totais 31,52±13,81%. Não houve variações expressivas na produção e
qualidade seminal ao longo dos meses do ano. Não houve diferença significativa entre os
diluidores testados, com relação à capacidade de manutenção dos parâmetros seminais durante
o período de estocagem, havendo influência significativa do tempo de armazenamento
(P<0,05). Nos tempos T0, T24 e T48, o sêmen diluído em BTS apresentou motilidade
espermática média de 56,1±17,6 %, 17,9±23,3 % e 7,7 ±19,6%, a viabilidade espermática
média de 60,2±17,2%, 27,9±23,8% e 11,7±20,2%, e defeitos totais médios de 28,1±10,8%,
37,5±12,1% e 41,28±11,4%., respectivamente. Amostras seminais diluídas em X-Cell®
apresentaram motilidade média de 54,2±22,1%, 27,0±28,0% e 14,0±24,2%, viabilidade média
de 57,8±21,7%, 33,0±26,9% e 19,9±25,6% e defeitos totais médios de 30,8±11,2%,
41,2±13,4% e 44,2±14,4% nos três tempos avaliados. Assim, a eletroejaculação é eficiente e
segura para a obtenção de ejaculados de caititus, o sêmen produzido possui potencial para
estocagem, e pode ser conservado sob 17ºC até 24 horas. / Studies concerning reproductive biology of collared peccary (Tayassu tajacu) are worthy to
improve creation system. The aims of this research were testing electroejaculation as safety
method to collect semen; describing the seminal profile along the year; and testing the capacity
for spermatozoa storage under refrigeration. Eleven adults males (76.8±37.8 months, 19.5±2.7
kg) were selected for the measurements of testicular length and width. Eight adults males were
used to semen collection (45±13 stimuli, 12 volt, 3 seconds; and resting pulse of 3 seconds).
Semen samples were evaluated for physic characteristics (appearance, color, volume, sperm
concentration, pH, sperm motility and vigor), and morphological characteristics (sperm
viability and sperm defects). Semen samples were split and diluted in two different extenders:
BTS (short-term storage) or X-Cell ® (long-term storage). Diluted semen samples were
maintained under refrigeration at 17ºC. The samples were evaluated immediately after dilution
(T0), after 24 hours (T24) and 48 hours (T48) of cooling. Animals presented 3.8±0.4 cm on left
testicles length, 2.6±0.3 cm on left testicles width and left testicles consistency of 2.3±0.2; right
testicles presented 3.8±0.5 cm length, 2.7±0.3 cm width and 2.3±0.2 for consistency. The
success rate obtained with electroejaculation was 75.21%. The seminal features observed were:
volume 0.81±0.86 mL, concentration 137.44±153 x 106 sptz/mL, pH 7.92±0.73, motility
52.66±28.79%, vigor 2.2±0.8, viability 55.84±28.55%, primary abnormalities 22.87±12.93%,
secondary abnormalities 9.11±5.88% and total abnormalities 31.52±13.81%. There were no
significant changes in production and quality semen along the months of the year. There was no
significant difference between extenders tested concerning to maintenance capacity of seminal
parameters during the storage period of storage; however, significant influence of storage time
was observed (P<0.05). Diluted semen in BTS presented at T0, T24 and T48, average sperm
motility of 56.1±17.6%, 17.9±23.3% and 7.7±19.6%, the average sperm viability was
60.2±17.2%, 27.9±23.8% and 11.7±20.2%, and the average total defects were 28.1±10.8%,
37.5±12.1% and 41.28±11.4%, respectively. Semen samples diluted in X-Cell® presented at
T0, T24 and T48 average motility of 54.2±22.1%, 27.0±28.0% and 14.0±24.2%, average
viability of 57.8±21.7%, 33.0±26.9% and 19.9±25.6% and total defects were 30.8±11.2%,
41.2±13.4% and 44.2±14.4%. Thus, electroejaculation is an effective and safe method to obtain
seminal samples from collared peccary, the semen of collared peccary has potential for storage
and can be maintained under 17º C up to 24 hours.
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Produ??o de anticorpos IgY de galinhas e IgG de coelhos para an?lise de auxina e citocininas. Serop?dica: UFRRJ, 2008. 61 p. / Production of antibodies IgY from chicken and IgG from rabbits for analysis of auxin and cytokinins. Serop?dica: UFRRJ, 2008. 61 pSousa, Cleiton Mateus 25 July 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-07-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The determination of plant hormones can be an excellent tool for to study the plant
development. Today, the complexity of methods, equipment and reagents of high cost limit
the use with practice of routine. Some advantages of methods immunoassay can exceed those
limitations, showing a potential of practical use in determination of plant hormones. The test
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) is utilized in detection of molecules with low
molecular weight. However, the ELISA requires specific antibodies against molecules of
interest, in the case, plant hormones. Today in the market there is not available antibodies for
the determination of hormonal molecules. Faced with that, proposed be produced and
characterize antibodies against molecules of AIA, 2ip and zeatin and subsequently, for use the
detection those molecules. For that, the hormonal molecules were conjugated with protein
(BSA) for subsequent immunization of chicken or rabbits. From the serum of rabbits or yolks
eggs the antibodies were purified and characterized through the test of precipitation of double
diffusion, SDS-PAGE and test ELISA. The antibodies that presented better results were
utilized in detection of plant hormones molecules in samples of plantlets in vitro of gerbera.
The test of precipitation of double diffusion revealed that the antibodies productized were
capable of will detect the molecule in study. Through in the SDS-PAGE was verified that the
antibodies obtained in eggs yolks of chicken presented superior purity than them obtained in
serum of rabbits. From the results of the test ELISA, observed itself that the antibodies
against AIA did not present potential of practical use. The detection of plant hormones in
samples of tissue stayed restricted to 2ip and zeatin. The detection of those two molecules in
crude extract, obtained from plantlets in vitro of gerbera, revealed that the level endogenous
of zeatin was higher of level 2ip. Plantlets with six weeks after multiplication presented
higher level of zeatin than plantlets with one week after multiplication. For the 2ip, that
difference was not evident. The use of antibodies obtained in eggs yolks of chicken permitted
the determination of zeatin and 2ip in samples plant utilizing the test ELISA. / A determina??o do n?vel hormonal end?geno pode ser uma excelente ferramenta para estudar
o desenvolvimento vegetal. Atualmente, fica limitada devido a complexidade das
metodologias adotadas, uma vez que demandam equipamentos e reagentes de alto custo e
ainda apresentam baixo rendimento. Por outro lado, os ensaios imunoenzim?ticos possuem
algumas vantagens que superam essas limita??es, demonstrando um potencial de uso pr?tico
na dosagem de horm?nios vegetais. Entre os ensaios imunoenzim?ticos, destaca-se o teste
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), o qual vem sendo utilizado na detec??o de
mol?culas com baixo peso molecular. No entanto, o teste ELISA exige anticorpos espec?ficos
e que sejam capazes de reconhecer as mol?culas de interesse, no caso os horm?nios vegetais.
Hoje no mercado n?o h? anticorpos dispon?veis para a determina??o das mol?culas
hormonais. Diante disso, prop?s-se produzir e caracterizar anticorpos contra mol?culas de
AIA, 2ip e zeatina e posteriormente, us?-los na detec??o dessas mol?culas. Para isso, as
mol?culas hormonais foram conjugadas com prote?na (BSA) para posterior imuniza??o de
galinhas poedeiras ou coelhos. A partir do soro de coelhos ou de gemas de ovos de galinhas
os anticorpos foram purificados e caracterizados atrav?s do teste de imunodifus?o, SDSPAGE
e teste ELISA. Os anticorpos que apresentaram melhores resultados foram utilizados
na detec??o de mol?culas hormonais em amostras de tecidos de pl?ntulas mantidas in vitro. O
teste de imunodifus?o revelou que os anticorpos obtidos foram capazes de detectarem a
mol?cula em estudo. Atrav?s do SDS-PAGE verificou-se que os anticorpos obtidos em gemas
de ovos de galinhas apresentaram maior pureza que os obtidos em coelhos, sugerindo que os
mesmos possuem maior potencial de uso pr?tico. A partir dos resultados do teste ELISA,
observou-se que os anticorpos contra AIA n?o apresentaram potencial de uso pr?tico na
determina??o dessa mol?cula em amostras vegetais. Sendo assim, a detec??o de mol?culas
hormonais em amostras de tecidos vegetais ficou restrita a 2ip e a zeatina. A detec??o dessas
duas mol?culas em extrato bruto, obtidos a partir de pl?ntulas de g?rbera mantidas in vitro,
revelou que o n?vel end?geno de zeatina foi superior ao n?vel de 2ip. Pl?ntulas com seis
semanas ap?s a repicagem apresentaram maior n?vel de zeatina do que pl?ntulas rec?m
repicadas, enquanto para o 2ip, essa diferen?a n?o foi evidente. O uso de anticorpos obtidos
em gemas de ovos de galinhas permitiu a detec??o e quantifica??o de zeatina e 2ip em
amostras vegetais utilizando o teste ELISA.
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Avaliação da dinâmica folicular, atividade ovariana e involução uterina durante o pós-parto de búfalas (Bubalus bubalis) criadas em condições tropicaisSILVA, Aluizio Otavio Almeida da 11 August 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-08-11 / Neste experimento objetivou-se monitorar a dinâmica folicular e atividade ovariana de fêmeas bubalinas no puerpério através de exames ultrassonograficos, investigando-se alguns eventos relacionados a atividades ovariana no Período Pós-Parto (PPP), e a involução uterina, desde o 7º dia de paridas, até o segundo cio pós-parto. Foram utilizadas dez (10) fêmeas mestiças entre as raças Murrah e Mediterrânea com parições eutócicas e sem histórico de problemas reprodutivos, manejados em regime semi extensivo, com disponibilidade de água e suplementação mineral ad libitum. Constatou-se a presença de padrões de crescimento folicular de duas ondas (2OCF) e de três ondas (3OCF), na proporção de 40% e 60%, respectivamente. O 1º e 2º cios pós parto se manifestaram aos 37,00+13,12 e 58,83+14,56 dias pós parto para os animais de 2OCF e aos 45,00+15,19 e 66,00+23,02 dias pós parto para os animais de 3OCF. Os intervalos estrais foram de 21,00+2,44 e 21.83+2,56 dias para os animais de 2OCF e 3OCF, respectivamente. A emergência folicular, ocorreu em média aos 1,02+0,34 e 7,25+0,50 dias do ciclo para a primeira e segunda onda, respectivamente, dos animais do 2OCF e aos 0,93+0,35; 6,6+1,36 e 10,83+1,94 dias do ciclo para a primeira, segunda e terceira onda, respectivamente, para os animais de 3OCF. O diâmetro folicular pré ovulatório foi de 13,08+2,6 e 11,45+0,35 mm para o 1º e 2º cios pós parto dos animais de 2OCF e 13,24+2,41 e 12,74+1,10 mm para o 1º e 2º cios pós parto dos animais de 3OCF. A involução uterina ocorreu em média aos 29,00+1,48 dias, P<0,05, com diâmetro do corno uterino pós gravídico (CUPG) em torno de 18,84+0,33 mm. A taxa da involução uterina foi de 0,97+0,21, (P<0,05). Observou-se alta correlação entre o PPP e CUPG, representada por r=-0,8179 (P<0,0001), sendo possível estabelecer uma regressão linear entre os dois parâmetros, representada pela equação Y=40,8809 + (-0,8214.X) (P<0,0001). / In this experiment aimed to monitor the follicular dynamics and ovarian activity of buffalo females in the postpartum period through ultrasound exams, investigating whether some events related to ovarian activity in the Postpartum Period (PPP), and uterine involution, since the 7th day calved until the second post-partum estrus. ten were used (10) crossbred females between Murrah and Mediterranean breeds with eutócicas parities and no history of reproductive problems, managed in semi extensive system, with availability of water and mineral supplementation ad libitum. It was found the presence of follicular growth patterns of two waves (2 OCF) and three waves (3OCF) at a ratio of 40% and 60%, respectively. The 1st and 2nd postpartum estrus demonstrated to 37,00+13,12 and 58,83+14,56 days postpartum for 2OCF animals, 45,00 + 15,19 and 66,00 + 23.02 days postpartum for animal 3OCF. The estrous intervals were 21,00+2,44 and 21,83+2,56 days for animals 2OCF and 3OCF respectively. Follicular emergency occurred at an average of 1,02+0,34 and 7.25+0,50 days cycle for the first and second waveform, respectively, of animals and 2OCF 0,93+0,35; 6,6+1,36 and 10,83+1,94 days cycle for the first, second and third wave, respectively, for the animal 3OCF. The pre ovulatory follicular diameter was 13,08±2,6 and 11,45+0,35 mm for the 1st and 2nd postpartum estrus of 2 OCF animals and 13,24+2,41 and 12,74+1,10 mm for the 1st and 2nd postpartum estrus of 3OCF animals. The uterine involution occurred at an average of 29,00+1,48 days, (P <0.001), diameter of the post gravid uterine horn (DPGUH) around 18,84+0,33 mm. The rate of uterine involution was 0,97+0,21 mm/day, (P <0,001). There was a high correlation between the PPP and CUPG, represented by r = -0,8179 (P<0,0001), being possible to establish a linear regression between the two parameters, represented by the equation Y = 40,8809 + (-0,8214.X) (P<0,0001).
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Biometria testicular, caracterização e congelamento de sêmen de macacos-de-cheiro de vida livre (Saimiri vanzolinii, S. cassiquiarensis e S. macrodon) e cativeiro (S. Collinsi) em água de coco em pó (ACP-118®)OLIVEIRA, Karol Guimarães 24 June 2014 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-05T15:43:09Z
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Previous issue date: 2014-06-24 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Recentemente, o táxon Saimiri sciureus (macaco-de-cheiro) foi revisado e algumas subespécies são agora classificadas, por alguns autores, como espécies, por exemplo: o Saimiri collinsi, o S. cassiquiarensis e o S. macrodon. Características fenotípicas nestas espécies são bem determinadas. No entanto, informações sobre aspectos reprodutivos são ainda bastante escassas. O objetivo da primeira fase deste trabalho foi descrever e correlacionar a biometria testicular com a qualidade do sêmen de macacos-de-cheiro de cativeiro (S. collinsi) e de vida-livre (S. vanzolinii, S. cassiquiarensis e S. macrodon). Foram mensurados comprimento, largura, altura, circunferência e volume testiculares, bem como motilidade, vigor, integridade de membrana plasmática e morfologia espermática para a correlação de dados. Não foi observada diferença entre os testículos direito e esquerdo dentro de cada espécie. Nem diferença entre as espécies com relação às medidas testiculares. O sêmen, que foi coletado por meio de eletroejaculação com probe retal, foi constituído por uma fração coagulada e uma fração líquida ou ambas. A qualidade do ejaculado foi semelhante entre as espécies. Não sendo observada correlação entre o volume testicular e o volume seminal de S. collinsi e S. vanzolinii, tanto com relação à fração líquida quanto à coagulada. A segunda fase do trabalho teve como objetivo propor um protocolo de congelamento de sêmen de S. collinsi em diluidor a base de ACP-118® (água de coco em pó) testando duas concentrações de glicerol (1,5 e 3%), em laboratório. E a terceira fase objetivou testar um protocolo de resfriamento de sêmen sem adição de gema de ovo, seguido do congelamento com a melhor concentração de glicerol observada no experimento anterior, e aplicar esses protocolos testados em S. collinsi mantidos em cativeiro, nas espécies S. vanzolinii, S. cassiquiarensis e S. macrodon em condições de campo. O sêmen de S. collinsi pôde ser resfriado em diluidor a base de ACP-118® sem ovo gema. O protocolo de congelamento desenvolvido demonstrou ser útil para a criopreservação de sêmen de S. collinsi, embora requeira melhoria para permitir melhor manutenção da qualidade espermática após o descongelamento. O procedimento demonstrou ser aplicável também em condições de campo em animais de vida livre, fornecendo resultados bastante animadores para a formação de bancos de germoplasma de espécies vulneráveis à extinção, como o S. vanzolinii. / Recently, Saimiri sciureus taxon (squirrel monkey) was revised and some subspecies are now classified by some authors as species, for example: Saimiri collinsi, S. cassiquiarensis and S. macrodon. Phenotypically these species are well determined. However, information on reproductive aspects is still quite scarce. The objective of the first phase of this study was to describe and correlate the testis with the seminal quality from captive (S. collinsi) and free-living (S. vanzolinii, S. cassiquiarensis and S. macrodon) squirrel monkeys. Length, width, height, circumference and testicular volume were measured as well as motility, vigour, plasma membrane integrity and morphology, for correlation data. No difference was observed between the right and left testicles within species, neither difference between species concerning to testicular measures. Semen, which was collected by electroejaculation with rectal probe, was constituted by a coagulated fraction, a liquid fraction or both. Seminal quality was similar among species. There is no correlation between testicular volume and seminal volume (of liquid or coagulated fraction) in S. collinsi and S. vanzolinii. The second phase of this work aimed to propose a semen freezing protocol in an extender based in ACP- 118® (powdered coconut water), testing two glycerol concentrations (1.5 and 3%) for captive S. collinsi. The third phase aimed to test a semen cooling protocol without addition of egg yolk (extracellular cryoprotector) followed by freezing with the best glycerol concentration observed in the preceding experiment and apply these protocols, previously tested in captive S. collinsi, in free-living males from S. vanzolinii, S. cassiquiarensis and S. macrodon in field conditions. Semen from S. collinsi could be cooled in ACP-118® without egg yolk. The freezing protocol developed proved to be useful for semen cryopreservation of S. Collinsi, although requiring improved to allow better maintenance of sperm quality after thawing. The procedure proved to be also applicable under field conditions on free-living animals, providing very encouraging results for the formation of genebanks for species vulnerable to extinction as the S. vanzolinii.
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