Orientador: Milton Carlos kuga / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência do etanol a 95 % (Rinse-N-Dry [RD]) ou da solução de formamida (Endosolv R [ER]), associados com a microabrasão com micropartículas de vidro (Concepsis Scrub [Cs]), na limpeza da dentina impregnada com o cimento à base de resina epóxi (AH Plus) e seus efeitos sobre a interface adesiva. Quarenta espécimes de dentina foram impregnadas com o cimento endodôntico (AH Plus). Em seguida foram limpos com os seguintes protocolos (n = 10): G1(E), somente RD; G2(ER), somente ER; G3(E + Cs), RD e Cs; G4(ER + Cs), ER e Cs. No G5 (controle) nenhum tratamento foi realizado. Os espécimes foram analisados em SEM, para avaliar a presença de resíduos (500x) e contagem de túbulos de dentinários abertos (1000x). Outros 50 espécimes foram preparados esubmetidos a similares procedimentos e protocolos de limpeza. Após 7 dias, tubos contendo resina composta foram fixados na dentina com um sistema adesivo "condiciona-e-lava" (Scotchbond Multi-porpose; 3M ESPE; 3M; St. Paul; MN, USA) e submetidos ao teste de microcisalhamento. G2 e G4 demonstraram maior persistência de resíduos e menor incidência de túbulos dentinários abertos que G1 e G3(P<0.05) e não houve diferença entre G1 e G3 ou G2 e G4 (P>0.05). A resistência de união do sistema adesivo foi similar entre todos os grupos (P>0.05). A microabrasão imediata interferiu negativamente na ação dos protocolos de limpeza, porém todos mantiveram resíduos sobre a superfície dentinária. Entretanto, após 7 dias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the cleaning protocol of dentin impregnated with epoxy resin-based sealer (AH Plus) and the effects on the adhesive interface using 95% ethanol (Rinse-N-Dry [RD]) or formamide solution (Endosolv R [ER]) associated with microabrasion with glass microparticles (Concepsis Scrub [Cs]) . Forty dentin specimens were impregnated with endodontic sealer (AH Plus). Specimens were cleansed according to the following protocols (n = 10): G1 (E), only RD; G2 (ER), only ER; G3 (E + Cs), RD and Cs; G4 (ER + Cs), ER and Cs. No treatment was performed in G5 (control). The specimens were subjected to SEM in order to evaluate the residues persistence (500x) and open dentinal tubules counting (2000x). Another 50 specimens were prepared, subjected to similar procedures and cleaning protocols.7 days later, composite-resin-made specimens were performed on dentin using etch-and-rinse adhesive system, then submitted to micro-shear test. G2 and G4 showed higher residues persistence and lower incidence of open dentinal tubules than G1 and G3 (P <0.05). No difference was found between G1 and G3 or G2 and G4 (P> 0.05). Adhesive system bond strength was similar in all groups (P> 0.05). Microabrasion negatively affected the cleaning protocols action, all groups presented residues on the dentin surface. However, 7 days later the protocols did not affect the bond strength of etch-and-rinse adhesive system to dentin previously impregnated with epoxy resin-based sealer. / Doutor

O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar a perda mineral no esmalte adjacente a cavidades preparadas com laser de Er,Cr:YSGG e restauradas com diferentes materiais, liberadores ou não de flúor, após desafio ácido. Cento e vinte blocos de esmalte dental de terceiros molares humanos (4 x4 mm) foram aleatoriamente divididas em 12 grupos (n=10) de acordo com a técnica de preparo: G1- alta-rotação (AR); G2- Laser de Er,Cr:YSGG (3W, 20Hz, 53,05 J/cm2)(65% ar, 55% água); G3- Laser de Er,Cr:YSGG (4 W, 20 Hz, 70,74 J/cm2); G4- Laser de Er,Cr:YSGG (5 W, 20 Hz, 88,43 J/cm2). Cada grupo experimental foi dividido em subgrupos, conforme o material restaurador utilizado: 1- cimento de ionômero de vidro (CIV), 2- cimento de ionômero de vidro resino modificado (CIVRM), 3- sistema adesivo e resina composta (RC). As amostras foram submetidas a desafio ácido (pH 4,8) por 7 dias. As concentrações do íon cálcio nas soluções desmineralizadoras (ppm/mm2), nos diferentes tempos (1, 3 e 7 dias), foram analisadas por espectrofotometria de emissão atômica. Os dados obtidos foram analisados usando os testes estatísticos ANOVA e LSD (?=5%) mostrando haver diferenças significativas entre Técnica e Material Restaurador no tempo total. Os menores valores médios da perda de cálcio foram obtidos nos grupos G2 + CIV, G2 + CIVRM e G1 + CIVRM; os maiores valores foram observados nos grupos de G1 + RC, G4 + CIV e G4 + RC. As restaurações de RC apresentaram maior perda mineral que as de CIV e CIVRM; os preparos com laser utilizando menor radiância (53,05J/cm2) apresentaram significante menor desmineralização que as maiores radiâncias (70,74 e 88,43J/cm2). Nenhuma técnica ou material impediu a desmineralização do esmalte. Os resultados deste estudo in vitro sugerem que a realização de preparos cavitários com laser de Er,Cr:YSGG (53,05J/cm2) restaurados com CIV e CIVRM ou alta-rotação e CIVRM foram efetivos na redução da perda mineral e aumento da resistência ácida do esmalte adjacente as restaurações após desafio ácido, com importante potencial em prevenir lesões de cárie secundária. / The aim of this study was to evaluate the enamel calcium loss around cavities prepared by Er,Cr:YSGG laser and restored with different materials after an acid challenge. One hundred and twenty enamel samples obtained from third molars (4 x 4 mm) were randomly divided in 12 groups (n=10) using different techniques: G1- high-speed drill (HD); G2- Er,Cr:YSGG laser (3W, 20Hz, 53.05 J/cm2)(air 65% - water 55%); G3- Er,Cr:YSGG laser (4 W, 20 Hz, 70.74 J/cm2); G4- Er,Cr:YSGG laser (5 W, 20 Hz, 88.43 J/cm2). Each experimental group was divided in subgroups, according to the restorative material: 1 - glass ionomer cement (GIC), 2 - resin modified GIC (RMGIC), 3 - adhesive system and composite resin (C). Samples were submitted to an acid challenge (4.8 pH) for 7 days. The Demineralizing solutions were analyzed in relation to the calcium ion contend (ppm/mm2), in different times (1, 3 and 7 days), under atomic emission spectrometry. ANOVA and LSD tests were performed (?=5%). There were significant difference between Technique and Restorative Material on Total Time. The lower average values of calcium loss were observed on G2 + GIC, G2 + RMGIC, G1 + RMGIC groups; the higher values were observed on G1 + C, G4 +GIC, G4 + C. The composite resin showed higher calcium loss than RMGIC and GIC. The lased cavities using lower fluence (53.05J/cm2) showed significant reduced demineralization than higher fluences (70.74 and 88.43J/cm2). Neither the techniques nor the restorative materials used were able to prevent the enamel demineralization. The findings of this in vitro study suggest that the Er,Cr:YSGG lased cavities (53.05J/cm2) restored with GIC or RMGIC or conventional drill cavities with RMGIC were effective on reducing the mineral loss and enhancing the enamel acid resistant around restorations after the acid challenge, showing an important potential in preventing secondary caries.

O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar a perda mineral no esmalte adjacente a cavidades preparadas com laser de Er,Cr:YSGG e restauradas com diferentes materiais, liberadores ou não de flúor, após desafio ácido. Cento e vinte blocos de esmalte dental de terceiros molares humanos (4 x4 mm) foram aleatoriamente divididas em 12 grupos (n=10) de acordo com a técnica de preparo: G1- alta-rotação (AR); G2- Laser de Er,Cr:YSGG (3W, 20Hz, 53,05 J/cm2)(65% ar, 55% água); G3- Laser de Er,Cr:YSGG (4 W, 20 Hz, 70,74 J/cm2); G4- Laser de Er,Cr:YSGG (5 W, 20 Hz, 88,43 J/cm2). Cada grupo experimental foi dividido em subgrupos, conforme o material restaurador utilizado: 1- cimento de ionômero de vidro (CIV), 2- cimento de ionômero de vidro resino modificado (CIVRM), 3- sistema adesivo e resina composta (RC). As amostras foram submetidas a desafio ácido (pH 4,8) por 7 dias. As concentrações do íon cálcio nas soluções desmineralizadoras (ppm/mm2), nos diferentes tempos (1, 3 e 7 dias), foram analisadas por espectrofotometria de emissão atômica. Os dados obtidos foram analisados usando os testes estatísticos ANOVA e LSD (?=5%) mostrando haver diferenças significativas entre Técnica e Material Restaurador no tempo total. Os menores valores médios da perda de cálcio foram obtidos nos grupos G2 + CIV, G2 + CIVRM e G1 + CIVRM; os maiores valores foram observados nos grupos de G1 + RC, G4 + CIV e G4 + RC. As restaurações de RC apresentaram maior perda mineral que as de CIV e CIVRM; os preparos com laser utilizando menor radiância (53,05J/cm2) apresentaram significante menor desmineralização que as maiores radiâncias (70,74 e 88,43J/cm2). Nenhuma técnica ou material impediu a desmineralização do esmalte. Os resultados deste estudo in vitro sugerem que a realização de preparos cavitários com laser de Er,Cr:YSGG (53,05J/cm2) restaurados com CIV e CIVRM ou alta-rotação e CIVRM foram efetivos na redução da perda mineral e aumento da resistência ácida do esmalte adjacente as restaurações após desafio ácido, com importante potencial em prevenir lesões de cárie secundária. / The aim of this study was to evaluate the enamel calcium loss around cavities prepared by Er,Cr:YSGG laser and restored with different materials after an acid challenge. One hundred and twenty enamel samples obtained from third molars (4 x 4 mm) were randomly divided in 12 groups (n=10) using different techniques: G1- high-speed drill (HD); G2- Er,Cr:YSGG laser (3W, 20Hz, 53.05 J/cm2)(air 65% - water 55%); G3- Er,Cr:YSGG laser (4 W, 20 Hz, 70.74 J/cm2); G4- Er,Cr:YSGG laser (5 W, 20 Hz, 88.43 J/cm2). Each experimental group was divided in subgroups, according to the restorative material: 1 - glass ionomer cement (GIC), 2 - resin modified GIC (RMGIC), 3 - adhesive system and composite resin (C). Samples were submitted to an acid challenge (4.8 pH) for 7 days. The Demineralizing solutions were analyzed in relation to the calcium ion contend (ppm/mm2), in different times (1, 3 and 7 days), under atomic emission spectrometry. ANOVA and LSD tests were performed (?=5%). There were significant difference between Technique and Restorative Material on Total Time. The lower average values of calcium loss were observed on G2 + GIC, G2 + RMGIC, G1 + RMGIC groups; the higher values were observed on G1 + C, G4 +GIC, G4 + C. The composite resin showed higher calcium loss than RMGIC and GIC. The lased cavities using lower fluence (53.05J/cm2) showed significant reduced demineralization than higher fluences (70.74 and 88.43J/cm2). Neither the techniques nor the restorative materials used were able to prevent the enamel demineralization. The findings of this in vitro study suggest that the Er,Cr:YSGG lased cavities (53.05J/cm2) restored with GIC or RMGIC or conventional drill cavities with RMGIC were effective on reducing the mineral loss and enhancing the enamel acid resistant around restorations after the acid challenge, showing an important potential in preventing secondary caries.

Iodoform (PI) and calcium hydroxide- based pastes (PH) are used in pulpectomy of primary teeth, complementing the antimicrobial action of mechanical chemical preparation and promoting tissue repair. These pastes take up and stay for a period of time along the root canal by contacting the periapical region and surrounding tissue, making it the aim of this study to quantify the relative expression of toxicity genes expressed by pastes, evaluating the biocompatibility these materials. By RT-PCR assay, were analyzed cellular mechanisms induced or generated by extracts of endodontic pastes: PI with Nebacetin (PNEB); with Maxitrol (PMAX); chlorhexidine (PCHX); and Guedes Pinto (GP); and PH: Calen® thickened with zinc oxide ( Calen®/ZO); and calcium hydroxide paste with Chlorhexidine (PHCHX); Ultracal®XS, using mononuclear cells from human peripheral blood (PBMC) , for to quantify the gene expression on the cytotoxic mediators: Granzyme A, Granzyme B, Granulysin and Perforin. Prior to gene expression, to analyze aspects of cell viability assays were performed - MTT, LDH and Capases Activity. The results were analyzed by Kolmogorov-Smirnov, one-way ANOVA and Tukey test, with p<0.05. The PNEB was the only one among all evaluated pastes that expressed all cytotoxic mediators above mentioned (p<0.05). Reviewed in cell viability, increased by PNEB Caspases 1 and 8 (p<0.05); The PGP increased Caspases 1, 3 and 8 (p<0.05); The PCHX decreased cell viability MTT and LDH, and exhibit increased activity of all Caspases (p<0.05). In PH, Ultracal®XS only presented significant concentration values for Caspase 1 , 3 and 8 (p<0.05). Despite the PNEB have presented high relative gene expression of all cytotoxic mediators analyzed, not caused decrease in cell viability, not causing increased activity of Caspase 3 (effector of apoptosis), demonstrating biocompatibility. Among the PI that showed better biocompatibility under the aspect of cytotoxicity were the PGP and PMAX. The material with cytotoxic potential observed in this experiment was the PCHX as dramatically decreased cell viability, confirmed the two tests and supported by high activity of all the analyzed Caspases, and also due to cell death, the inability of gene expression. All pH played citocompatível behavior, according to tests performed in the light of molecular biology. / Pastas iodoformadas (PI) e a base de hidróxido de cálcio (PH) são empregadas na pulpectomia de dentes decíduos, complementando a ação antimicrobiana do preparo químico mecânico e favorecendo o reparo tecidual. Essas pastas ocupam e permanecem por um período de tempo ao longo do canal radicular, entrando em contato com a região periapical e tecidos adjacentes, tornando-se o objetivo deste estudo quantificar a expressão relativa de genes de toxicidade manifestados pelas pastas, de forma a avaliar a biocompatibilidade das mesmas. Pelo ensaio RT-PCR, foram analisados mecanismos celulares induzidos ou gerados por extratos das pastas endodônticas: PI com Nebacetin (PNEB); com Maxitrol (PMAX); com Clorexidina (PCHX); e Guedes-Pinto (PGP); e PH: Calen® espessada com Oxido de Zinco (Calen®/ZOE); e pasta de Hidróxido de Cálcio com Clorexidina (PHCHX); Ultracal®XS, frente às células mononucleares do sangue periférico humano (CMSP), de forma a quantificar a expressão gênica relativa dos mediadores citotóxicos: Granzima A, Granzima B, Granulisina e Perforina. Previamente à expressão gênica, para analisar aspectos da viabilidade celular, foram realizados ensaios MTT, LDH e atividade de Caspases. Após teste de normalidade Kolmogorov-Smirnov, os resultados foram tratados por ANOVA de uma via e Tukey, com p<0,05. A PNEB foi a única pasta que expressou todos os mediadores citotóxicos avaliados (p<0.05). Com relação à viabilidade celular, a PNEB apresentou aumento de Caspases 1 e 8 (p<0.05); A PGP levou ao aumento das Caspases 1, 3 e 8 (p<0.05); A PCHX diminuiu a viabilidade celular no MTT e LDH, além de apresentar aumento da atividade de todas as Caspases (p<0.05). Nas PH, somente a Ultracal®XS apresentou valores de concentração significativos para Caspase 1, 3 e 8 (p<0.05). Apesar da PNEB ter apresentado elevada expressão gênica relativa de todos os mediadores citotóxicos analisados, não causou diminuição da viabilidade celular, não ocasionando aumento da atividade da Caspase 3 (efetora da apoptose), demonstrando biocompatibilidade. Dentre as PI que apresentaram melhor biocompatibilidade sob o aspecto de citotoxicidade foram a PGP e PMAX. O material com potencial citotóxico verificado neste experimento foi a PCHX, pois diminuiu drasticamente a viabilidade celular, confirmada em dois ensaios e corroborada pela alta atividade de todas as Caspases analisadas, e ainda, devido à morte celular, a incapacidade de expressão gênica. Todas as PH desempenharam comportamento citocompatível, de acordo com os ensaios realizados e à luz da biologia molecular.