Orientador : Eneida de Paula / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T10:33:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_AlexandredeAquino_M.pdf: 12161605 bytes, checksum: 67b1ecf73e749cb80408b243d9326e1d (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Domínios lipídicos são regiões de composição diferente em uma mesma membrana, quer seja biológica ou sintética. A dinâmica destes domínios pode participar de processos bioquímicos e fisiológicos. Anestésicos locais são fármacos que agem sobre proteínas de membranas por um mecanismo ainda não totalmente conhecido, e cuja potência está fortemente correlacionada com sua hidrofobicidade. Oentre estes, a dibucaína (OSC) é um potente anestésico, com alto coeficiente de partição em favor das membranas, capaz de interferir com diversos processos fisiológicos e de reverter alguns efeitos do íon cálcio, um conhecido indutor de domínios lipídicos. Investigamos a interação da OBC com membranas e o efeito deste AL sobre domínios lipídicos naturais e induzidos por cálcio. As técnicas usadas foram Fluorescência Estática, Ressonância Paramagnética Eletrônica e Microscopia de Fluorescência. Verificamos que a oac possui um pKa de 8,4 e que deve localizar-se na altura do glicerol em membranas compostas por OOPC, o que favorece sua competição com o cálcio pelas cabeças polares de lipídios, e que a forma neutra apresenta maior afinidade pela membrana (_ = 1500) que a protonada (_ = 930). A fluorescência intrínseca da molécula foi analisada em água, em membranas e em soluções de diferentes polaridades; observamos diminuição no rendimento quântico de fluorescência da OSC, concomitante a um deslocamento para o azul nos meios mais apoiares. Experimentos de Ressonância Paramagnética Eletrônica com marcadores de spin do tipo nitróxido em alta concentração (exibindo alargamento dos espectros devido à interação de troca de estado de spin) mostraram que a OBC reverte domínios lipídicos induzidos por cálcio e por magnésio, em sistemas ternários de OOPC: POPA: 5-MeSL. Por microscopia de fluorescência (usando sondas do tipo nitro-benzoxadiol amino, NBO) notamos diferenças evidentes no padrão de formação de domínios lipídicos entre os tratamentos controle, com cálcio, com OBC e com ambos os aditivos, tanto em vesículas unilamelares gigantes quanto em eritrócitos e ghosts de eritrócitos marcados. As diferenças entre os tratamentos foram qualitativamente consistentes para os parâmetros de análise das imagens utilizados. Vimos também aqui o antagonismo entre a OSC e o cálcio e, além disso, uma aparente capacidade da OSC em reverter domínios induzidos por proteínas de membrana. Nossos resultados sugerem que a OSC reverte a separação lateral de fases induzida por cálcio ou proteínas de membrana; esta capacidade da OSC - não'observada em outros anestésicos locais - estaria relacionada à localização preferencial da DSC próximo à cabeça polar dos fosfolipídios. Tal fenômeno pode ser relevante nos processos membranares em que a DSC reconhecidamente interfere, mediados pela alteração do padrão dos domínios lipídicos, dentre os quais a fusão celular e a própria anestesia / Abstract: Lipid domains are compositionally different regions within biological or artificial membranes that may play an important role in physiological and biochemical events as well. Local anesthetics, however, acts upon membrane proteins by an still unknown mechanism and exibit a strong correlation between partition to membranes and anesthetic potency. Among this class of pharmaceuticals, dibucaine (OBC) is a potent one, with a high membrane partition, able to alter several physiological processes and revert some calciuminduced effects on artificial membranes. We have investigated the interaction of neutral and protonated forms of OBC with natural and artificial membranes and its effect upon naturally and calcium-induced lipid domains both in biological and artificial membrane systems. Our approach was based on Static Fluorescence, Electronic Paramagnetic Resonance (EPR) and Fluorescence Microscopy. Our experiments reveal a pKa of 8,4 for OBC and that its aromatic ring may be located close to the glycerol backbone of phospholipid membranes. Surprisingly, OBC emission decreased simultaneously to a classical blue shift when membranes are available or by reducing its solution polarity. EPR experiments strongly suggest that OBC reverts Ca+2- or Mg+2-induced lipid domains. The parameter ais increased in ternary systems composed by OOPC: POPA: 5MeSL when OBC is present, which is antagonic to calcium ion. Fluorescence Microscopy experiments revealed distinct patterns among OBC, Ca+2 or OBC plus Ca+2 treatments, in NBO-PA labeled liposomes, ghosts and erythrocytes. Although Kruskal-Wallis test were not able to tell which treatment differences were statistically significant, those differences were consistent through ali parameters analysed. We could observe antagonism between OBC and Ca+2, besides a further ability of OBC to disrupt naturally occurring lipid domains. These data suggest that OBC is able to revert Ca+2_, Mg+2 or protein-induced domains, for its favoured location close to the phospholipid head. Such phenomena may be relevant in lipid domain mediated processes, which may include anesthesia itself / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores : Francisco Humberto Nociti Junior, Enilson Antonio Sallum / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T08:11:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Saldanha_JulianaBezerra_M.pdf: 2343282 bytes, checksum: 571dd8c63d5e25f658a911d06c70e9fb (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar, histometricamente, a regeneração óssea de defeitos criados cirurgicamente em rebordos alveolares edêntulos de cães tratados ou não, pelo princípio da regeneração óssea guiada. Foram utilizados nove cães, sem raça definida, fêmeas, que tiveram seus primeiros, segundos e terceiros molares (M1, M2, M3) extraídos bilateralmente. Após três meses, um defeito ósseo de três paredes foi criado bilateralmente na mandíbula, sendo um deles recoberto por uma membrana não reabsorvível de politetrafluoretileno expandido. As dimensões do defeito foram de aproximadamente 8mm no sentido apicocoronário, 12mm no sentido mesiodistal e 8mm no sentido vestibulolingual. Quatro meses após a criação e tratamento dos defeitos ósseos, os animais foram sacrificados, para remoção dos blocos e preparo histológico. A análise histométrica foi realizada quantificando a área, a altura, a largura do osso neoformado e a proporção de tecido ósseo mineralizado. A análise intergrupos revelou diferença estatística significante para os parâmetros área (215,62 + 42,44; 156,33 + 46,85mm2), altura (11,59 + 1,83; 8,64 + 1,42mm) e proporção de tecido ósseo mineralizado (74,19 + 7,74; 81,51 + 6,07%), para o grupo teste e controle respectivamente (p<0,05). Não houve diferença estatística para o parâmetro largura do tecido ósseo neoformado. Dentro dos limites do presente estudo, foi possível concluir que a utilização de membranas não reabsorvíveis no tratamento de defeitos ósseos traz significativos benefícios no reparo ósseo, proporcionando uma maior quantidade de osso neoformado, e promove um retardo no processo de maturação óssea / Abstract: The aim of the present study was to histometrically evaluate the bone regeneration obtained in surgically created ridge defects in dogs treated or not with guided bone regeneration. Nine female mongrel dogs were included. All molars in the mandible were extracted. After three months, a bone defect was surgically created bilaterally in the mandible with dimensions of approximately 12mm mesiodistally and 8mm apicocoronally and 8mm buccolingually. The defects were randomly assigned to one of two groups: non-resorbable membrane (test) and no membrane (control). Four months later, the animals were sacrificed and the specimens were routinely processed for decalcified sections. The histomorphometric analyses were used to determine the height, the width and the area of new bone and the percentage of mineralized tissue. Statistically significant difference was found for the area (215,62 + 42,44; 156,33 + 46,85mm2), the height (11,59 + 1,83; 8,64 + 1,42mm) and the percentage of mineralized tissue (74,19 + 7,74; 81,51 + 6,07%), for test and control group, respectively (p<0,05). Within the limits of the present study, it was concluded that the use of non-resorbable membrane may positively influence bone regeneration, providing a superior amount of newly formed bone and delay the maturation / Mestrado / Periodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Lucia Pereira da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:25:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Morselli_AnaLia_M.pdf: 4367604 bytes, checksum: 93c7e171933a30bca94c0c0c5bec2363 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Neste trabalho procuramos estudar as alterações causadas na permeabilidade da membrana mitocondrial por agentes capazes de promover efluxo de 'Ca¿++. Após incubação de mitocôndrias isoladas de diferentes tecidos de rato. fígado. cérebro e rim ou de vegetais, milho, batata, em condições de ¿stress¿ oxidativo ou na presença de altas concentrações de 'Ca¿++ e Pi. extraíram-se dos sobrertadantes os lipídeos presentes e analisou-se qualitativamente a presença de ácidos graxos livres através de cromatografia em camada delgada em sílica gel ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Intramitochondrial phospholipase activity has been correlated with Ca++ efflux from mitochondria incubated in the presence of different Ca++ releasing agents. We compared the phospholipase 'A IND. 2¿ activity in mitochondria isolated from rat liver, brain and kidney and from corn and potato. These mitochondria show different sensitivities to the Ca++ releasing agents t-butylhydroperoxide, diamide and Pi ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Lucia Pereira da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T07:20:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bernardes_CeleneFernandes_M.pdf: 6038941 bytes, checksum: cbf9207b29d4ad44d5257e7cb4c82b74 (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Mitocôndrias isoladas de fígado de rato, energizadas pela oxidação de succinato ou pela hidrólise de ATP apresentam um aumento transitório na velocidade de efluxo de Ca2+ concomitante com a oxidação do NAD(P)H pelo hidroperóxido, quando suspensas em um meio contendo ATP 3mM, Mg2+ 4mM, acetato como ânion permeante e moderada concentração de Ca2+. Isto ocorre paralelamente a um aumento no estado de fluxo constante da concentração de Ca2+ extramitocondrial, decréscimo de, aumento na velocidade de respiração e inchamento mitocondrial. Com exceção do inchamento todos os outros eventos eram reversíveis. Se o movimento cíclico de Ca2+ era prevenido por vermelho de rutênio, o decréscimo de, a velocidade de respiração e a extensão do inchamento mitocondrial eram significantemente diminuídos. Nessas condições, não houve decréscimo significativo no conteúdo de nucleotídeos de piridina mitocondriais e o acoplamento mitocondrial era preservado após um ciclo de efluxo e recaptação de Ca2+. Por outro lado, mitocôndrias de fígado de rato incubadas na presença do antibiótico X-537A, apresentam uma maior captação de Ca2+, baixando o estado de fluxo constante da concentração extramitocondrial do íon; um aumento de e inibição do efluxo de Ca2+ induzido por hidroperóxido ou vermelho de rutênio. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Isolated rat liver mitochondria, energized either by succinate oxidation or ATP hydrolysis present a transient increase in the rate of Ca2+ efflux concomitant to NAD(P)H oxidation by hydroperoxides when suspended in a médium contaning 3mM ATP, 4mM Mg2+, acetate as permeant anion and moderate Ca2+ concentrations. This is paralelled by an increase in the steady state concenration of extramitochondrial Ca2+, a decrease in, an increase in the rate of respiration and mitochondrial swelling. With the exception of mitochondrial swelling all other events were found to be reversible. If Ca2+ cycling was prevented by ruthenium red, the decrease in , the rate of respiration and the extent of mitochondrial swelling were significantly diminished. In addition, the was no significant decrease in the content of mitochondrial pyridine nucleotides. Mitochondrial coupling was preserved after a cycling of Ca2+ release and reuptake under these experimental conditions. On the other hand, rat liver mitochondria incubated in the presence of antibiotic X-537A present a decrease in the steady state concentration of extramitochondrial Ca2+, an increase in and inhibition of ruthenium red or hydroperoxide-induced Ca2+ efflux. The results indicate that alterations in the t-butyl hydroperoxide and X-537A induced Ca2+ flux are related with structural changes of mitochondria, changing the membrane permeability to the cation. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Maria do Carmo Alberto-Rincon / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T21:43:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_DeboraReginaMachado_M.pdf: 15574919 bytes, checksum: 54563616a5f0d36298cadef97386915b (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O uso de materiais artificiais para restaurar parte do corpo humano tem exigido o desenvolvimento de tecnologias diferenciadas para fabricação de produtos que atendam às solicitações de materiais implantáveis para próteses. Com esse intuito, o desenvolvimento de materiais biodegradáveis vem despertando o interesse para o estudo de suas interações com o organismo hospedeiro, a fim de que se tomem adequados como materiais de próteses temporárias. Membranas de poli-ácido lático (PLLA) biodegradáveis têm sido utilizadas para diversas finalidades, como liberação controlada de drogas, separação entre tecidos, suporte para cultura celular e preenchimento de tecidos lesados. Sabe-se que é possível modificar as propriedades fisicas destes polímeros através da adição de plastificante, como o tri-etilcitrato, fornecendo maleabilidade e porosidade aos implantes. A quantidade de plastificante utilizada pode fornecer membranas com porosidades diferentes, possibilitando o controle do tempo de degradação do polímero e da invasão de elementos teciduais por entre os poros da membrana e, por conseguinte, permitindo uma degradação do material compatível com reconstituição tecidual. O objetivo deste trabalho consistiu na análise in vivo das propriedades biológicas de uma membrana de PLLA porosa adicionada de 7% de tri-etil-citrato até 180 dias pós implantação no tecido subcutâneo de ratos. As amostras coletadas de ratos Wistar remeas de 2 a 180 dias após o procedimento cirúrgico foram processadas para análise por microscopia de luz, com inclusão em parafina e em resina sintética glicol metacrilato, microscopia eletrônica de varredura (M.E. V.), microscopia eletrônica de transmissão (M.E.I.) e imunocitoquímica de PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen). Os resultados indicam que as membranas são envolvidas por tecido conjuntivo :fi-ouxo, com aumento da invasão de elementos teciduais no decorrer dos dias de implantação. A análise por M.E.V. mostra que o processo de degradação do polímero se inicia com o aparecimento de :fi-aturas centrípedas nas unidades globulares, ganhando maiores proporções nos períodos finais de análise. Através da análise por imunocitoquímica de PCNA, foi possível observar núcleos de células marcadas, indicando proliferação celular no local do implante / Abstract: The increasing use of artificial materials for protheses has Iead to the development of products that meet the demands of impIantabIe materiaIs. The deveIopment of biodegradabIe materials has stimulated interest in the study of their interactions with host tissue in order to improve the likelihood of success in protheses. Biodegradable poly(L-lactic acid) membranes have been used for several purposes, including controlled release of drugs, as a barrier for soft and hard tissues and for replacing of damaged tissues. The physical properties of these materials can be modified by the addition of a plasticizer, such as the triethyIcitrate, to provide flexibiIity and porosity to the implants and to enhance the control of the polymer degradation time. The accurate addition of plasticizer thus allows the production of material for different applications so that the degradation time of the polymer can be made compatible with the proliferation of new tissue. The aim of this work was to examine the biological and morphoIogical properties of a porous membrane of PLLA containing 7% trietylcitrate until 180 days after implantation in the subcutaneous tissue of rats. Samples of skin obtained ITom female Wistar rats 2-180 days after implantation with PLLA-based membrane were processed for light microscopy, scanning electron microscopy (SEM), transmission electron microscopy (TEM), and PCNA (proliferating Cell Nuclear Antigen) Immunocytochemistry. The results indicated that the membranes became surrounded by a delicate network of connective tissue which gradually invaded the membrane structure. Analysis by SEM indicated that the polymer degradation began with the appearance of radial tractures in the globular units of the biodegradable membrane, especially by 90 and 180 days after implantation. By immunocytochemistry, was possible to observe labeled nuc1eus, indicating cellular proliferation into the site of implantation / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador : Anibal Eugenio Vercesi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T18:22:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valle_ValderezGarciaRodrigues_M.pdf: 2841589 bytes, checksum: 9ef7f58d4f8f66dce35b175b05e4397a (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Este trabalho descreve experimentos mostrando que safranina, em concentrações geralmente empregadas para monitorar o potencial elétrico da membrana mitocondrial, causa efeitos indesejáveis sobre o transporte de 'CA POT. ++' por mitocôndrias de fígado. Nossas observações indicam que: (i) Safranina potencializa a descarga espontânea de 'CA POT. ++' mitocondrial induzida por fosfato ou acetoacetato. A liberação de 'CA POT. ++' é paralelamente acompanhada pela potencialização da liberação do estado respiratório - 4 ' e pela potencialização do aumento de volume mitocondrial, indicando uma ação generalizada do corante sobre a membrana mitocondrial. (ii) O efluxo do 'CA POT. ++ ' mitocondrial induzido por hidroperóxido é estimulado na presença de safranina mesmo na presença de estabilizadores de membrana como 'MG POT. ++' e ATP. Conclui-se que o uso de safranina para indicar mudanças no potencial elétrico de membrana durante o transporte de 'CA POT. ++' por mitocôndrias deve ser evitado ou devem ser tomados cuidados especiais. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This work describes experiments showing that safranine, at the concentrations usually employed as a probe of mitochondrial membrane potential, causes significant undesirable side effects on 'CA POT. ++' transport by liver mitochondria. The major observations are: (i) safranine potentiates the spontaneous 'CA POT. ++' release from liver mitochondria induced by phosphate or acetoacetate. This is paralelled by potentiation of the release of state -4 -respiration and of the rate of mitochondrial swelling, indicating a generalized effect of the dye on the mitochondrial membrane; (ii) The efflux of mitochondrial 'CA POT. ++induced by hidroperoxide is stimulated in the presence of safranina even if membrane stabilizers such as 'MG POT. ++' and ATP are present. It is concluded that the use of safranine to monitor the changes in membrane potential during 'CA POT. 2+' transport by mitochondria should be avoided or special care be taken. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia e Biofisica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Salvador Massaguer Roig / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T01:33:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peres_Leila_D.pdf: 4586693 bytes, checksum: 5ffea26c2967998036402c83c1c9e7a3 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Neste trabalho efetuou-se um estudo da ultrafiltração de leite integral coagulado enzimaticamente com renina, onde foram utilizadas membranas minerais CARBOSEP para microfiltração (MF ) e para ultrafiltração (DF ). Membranas para MF CARBOSEP M45, 14 e M6, com diâmetros médios de poro respectivamente de 0,45 , 0,14 e 0,08 µm e embranas para DF CARBOSEP com pesos moleculares médios de corte respectivamente de 300000, 150000 e 50000 Daltons, foram usadas. Os processamentos de concentração de leite coagulado por DF, foram realizados em uma unidade piloto de ultrafiltração CARBOSEP 2S 37 (com 1,6 m2 de área de membrana) e em uma unidade de bancada MICROCARBOSEP 40 (com 75 cm2 de área de membrana). Foram também efetuados, para efeito de comparação, processamentos com leite na unidade piloto CARBOSEP 2S 37. Os processamentos foram conduzidos às pressões de 3, 4 e 5 bar, temperatura de 35°C para leite coagulado e 55°C para leite e velocidade de escoamento tangencial de 4,0 m/s para a unidade piloto e de 1,2 m/s para a unidade de bancada. A DF de leite já pré-coagulado oferece como principal vantagem, em relação à do leite, um elevado aumento do fluxo de permeado, devido às características de maior porosidade da camada de polarização por concentração formada pelo leite coagulado. Na ultrafiltração de leite na unidade piloto CARBOSEP 2S 37, realizada a 4 bar, obteve-se para os dois tipos de membrana CARBOSEP utilizadas ( M4 e M6 ) um fluxo de permeado inicial em tomo 60 1/h.m2 e coeficientes de retenção de proteína de 99% para a membrana M4 e de 96% para a membrana M6. Já para o leite coagulado, o melhor desempenho foi da membrana de microfiltração M6, para a qual obtiveram-se um fluxo de permeado inicial de 300 1/h.m2 e um coeficiente de retenção de proteína de 94%, que embora seja inferior ao obtido para o leite, mostra também uma boa eficiência de separação para a membrana M6. Os processamentos de concentração com leite coagulado realizados na unidade de bancada MICROCARBOSEP 40, mostraram também um melhor desempenho em termos de fluxo para as membranas de microfiltração CARBOSEP Ml4 e M45. A possibilidade do uso de membranas de microfiltração CARBOSEP, para realizar a ultrafiltração de leite coagulado, obtendo-se inclusive um maior fluxo que o obtido para as membranas de DF, é conseqüência das características da camada de polarização por concentração formada dinamicamente sobre a membrana, que se comporta durante o processo como uma membrana secundária, de menor porosidade que a membrana primária. Os processamentos de concentração realizados com as membranas M4, na unidade piloto CARBOSEP 2S 37 e M6 e M8 na unidade de bancada, mostraram um aumento de fluxo de permeado com o aumento da pressão de 4 para 5 bar para o leite, enquanto para o leite coagulado o uso de uma pressão maior não resultou em um melhor desempenho da membrana. Os processamentos realizados com leite coagulado na unidade piloto CARBOSEP 2S 37, demonstraram a viabilidade do uso do processo na fabricação de um queijo semelhante ao queijo petit suisse ou outro queijo de massa mole, desde que sua produção não envolva coagulação ácida, já que em todos os processamentos realizados, o pH natural do leite ( 6,6 ¬ 6,7 ) foi mantido constante. Foram estudadas as influências das características da camada de polarização por concentração formada sobre a membrana e da incrustação (fouling ) da membrana, na transferência de massa e capacidade de permeação da membrana / Abstract: In the present work a study of the rennetted curd milk (obtained from whole milk ) ultrafiltration was conducted by using microfiltration (MF) and ultrafiltration (DF) CARBOSEP mineral membranes. (MF) CARBOSEP M45, M14 and M6 membranes, with average pore diameter of 0.45, 0.14 and 0.08 µm, respectively and (DF) CARBOSEP M9, M3 and M8 membranes, with average molecular weight cut-off of 300000, 150000 and 50000 Daltons, respective1y, have been used. The DF concentration experiments have been performed in a CARBOSEP 2S 37 ultrafiltration pilot unit ( 1.6m2 of membrane area ) and in a MICROCARBOSEP 40 bench ultrafiltration unit ( 75 cm2 of membrane area ). In order to compare the results, whole milk DF concentration experiments were also performed in the pilot unit. The DF concentration experiments were conducted at transmembrane pressures of 3, 4 and 5 bar , at a temperature of 35°C for coagulated whole milk and 55°C for whole milk. The tangential velocity was 4,0m/s for the pilot unit and 1,2 m/s for the bench unit. The major advantage in performing the DF of pre-coagulated milk, is the great improvement in the permeate flow obtained (10 times in some cases ), due to the high porosity characteristics of the concentration polarization layer formed by the coagulum on the membrane. An initial permeate flow of 60 l/h.m2 for the two used membranes ( M4 and M6 ) and protein retention coefficients of 97% for M6 membrane and 99% for M4 membrane, have been obtained in the milk DF experiments performed in the CARBOSEP 2S 37 unit, at 4 bar. When using the coagulated milk, the microfiltration M6 membrane showed the best performance, since an initial permeate flow of 300 1/h.m2 and a protein retention coefficient of 94% have been obtained. In spite being this retention coefficient lower than that obtained for milk, this value however represents, a good separation efficiency for M6 membrane Coagulated milk concentration experiments, carried out in the MICROCARBOSEP 40 bench unit, have also showed better performance for microfiltration membranes Ml4 and M45. The possibility of using microfiltration CARBOSEP membranes to perform coagulated milk DF, obtaining indusively a higher permeate flow than that obtained for ultrafiltration CARBOSEP membranes, is a consequence of the concentration polarization layer characteristics, formed dynamically over the membrane, that acts during the process as a secondary membrane with a lower porosity than the primary membrane porosity. The experiments conducted in the pilot unit with M4 membrane and in the bench unit with M6 and M8 membranes have showed, for milk, an improvement in the permeate flow, when the pressure was changed from 4 to 5 bar. For coagulated milk, however, the higher pressure has not resulted in better membrane performance. The experiments conducted in the pilot unit with coagulated milk, have showed the viability in using this process in the manufacturing of a cream cheese, like petit suisse cheese or other soft cheese, not involving acid coagulation, since the natural milk pH ( 6.6 to 6.7 ) was maintained constant throughout all the performed experiments. The influences of the concentration polarization layer characteristics and of the membrane fouling, on the membrane mass transfer and permeation capacity, have been studied / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Pedro L. O. Volpe / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-23T13:54:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sorratini_RodolphoB_M.pdf: 2459675 bytes, checksum: 7573e917d4bc219bb1d4f035717668fd (MD5) Previous issue date: 1996 / Mestrado

Orientador: Eneida de Paula / Dissertação (mestrado) - Unversidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T18:12:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prete_PauloSergioCastilho_M.pdf: 7512602 bytes, checksum: 3cde985a4e814dabb7fb0d50b30a4d23 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Surfactantes apresentam efeito concentração dependente sobre membranas de eritrócitos, podendo proteger ou solubilizar essas membranas. Neste trabalho estudamos a interação de surfactantes não-iônicos da série Tween (Polioxietileno-sorbitol) com membranas de eritrócitos humanos. Triton X1O0 (t-octilfenoxi polietoxi etanol), foi usado como controle para os ensaios hemolíticos. Inicialmente fizemos a carActerização físico-auímicA dos surfActAntes atrAvés da determinAção da CMC, e medidAs de lH-RMN, que comprovaram a purezA e composição estruturAI dos surfactantes. Estudos hemolíticos em eritrócitos humAnos (com suspensões de Ht de 5 20%) revelaram que os surfactantes da série Tween (20, 40 e 80) têm efeito protetor e lítico Acima dAS suas respectivAs CMCs (59, 27 e 12 _), enquAnto que com o Triton Xloo estes efeitos ocorrem na faixa dA sua concentrAção micelar críticA (0,25 mM). O ensaio de proteção a hemólise foi feito em condições hipotônicAs (77 mM de NaCI) e o de lise em condições isotônicas. Em Ambos ensAios mediu-se fotometricamente A saída de hemoglobina (Hb), do eritrócito. DAS concentrAções de surfActAnte parA proteção (Cprot), início (csat) e 100% de hemólise (CSOI) determinamos AS razões molares surfActante:lipídio no eritrócito para proteção e lise (RProt, Rsat, Rso respectivamente). Nos ensaios em condições isotônicas medimos também a liberação do I( intracelular (por potenciometria) como um método alternativo de quantificar a hemólise. Assim como as medidas de liberação de Hb, os ensaios de liberação de I( mostraram-se adequados aos estudos hemolíticos. Detectou-se uma estreita correlação entre os valores de csat e esol obtidos pelas duas técnicas, embora a liberação de I( ocorra em concentrações menores de surfactante, indicando que a saída de I( precede a de Hb, na hemólise. Em concentrações muito altas esses surfactantes podem induzir a oxidação da Hb, sendo que o Tween 80 tem maior poder oxidante que os demais da série (Tween 80 > Tween 40 > Tween 20) e o Triton X100 não oxida a Hb. O efeito oxidante do Tween 80 impediu a determinação dos valores de Rso1 em Ht mais altos. O tratamento proposto por Lichtenberg (1985) para a quantificação da razão efetiva surfactante:membrana para solubilização não se mostrou adequado à análise do efeito hemolítico dos surfactantes da série Tween, cujos valores de R são muito altos, caracterizando-os como pouco hemolíticos / Abstract: Surfactants present hemolytic effects and depending on their concentration, they can either protect or solubilize erythrocyte membrane. In this work we have studied the interaction of nonionic surfactants from the Tween series (polyoxyethylenesorbitan) with human erythrocytes membranes. Triton Xl00 (t-octylphenoxypolyethoxyethanol) was used as a control, in hemolytic assays. To assure the purity and structural composition of the surfactants we employed CMC determination and lH-NMR characterization. Hemolytic studies with human erythrocytes (Ht 5 - 20%) showed that surfactants from the Tween series (20,40 and 80) have a protective and Iytic effect upon the membrane above their respective CMCs (59, 27 and 12 _), while Triton Xl00 presents those effects at its CMC range (0,25 mM). The "protection" assays were carried out in a hypotonic media (NaCI 77mM) and the Iysis experiments in isotonic conditions. In both assays Hb release from the erythrocyte was spectrophometrically measured. From the surfactant concentrations for protection (Ol'Ot), onset (csat) and 100% hemolysis (csol) we determined the surfactant:lipid molar ratios for protection and Iysis (RProt, Rsat, R$OI respectively). At isotonic condition we measured also the release of intracelular K'" (by potenciometry) as an alternative method for quantifying hemolysis. As well as Hb release measurements, the assays of K'"-release showed to be quite adequate for the study of hemolysis. There is a good correlation between csat and csol values obtained by the two techniques, although K'"-release occurs at lower surfactant concentrations than Hb-release. In extremely high concentrations, these surfactants induce Hb oxidation, being Tween 80 the one with the highest oxidative power, in comparison to the other Tweens (Tween 80 > Tween 40 > Tween 20). Triton X100 does not oxidise Hb. The oxidative effect of Tween 80 prevented the determination of Rso1 values in the highest Hts. The treatment proposed by Lichtenberg (1985) for the quantification of surfactant:membran ratios for solubilization was not found adequate for the analysis of the hemolytic effect of Tweens, which R values are very high, characterizing them as weak solubilizers / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Nilce Correa Meirelles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T14:46:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Malheiros_SoniaValeriaPinheiro_D.pdf: 7935126 bytes, checksum: 3b030641c196f94bbc7a635c9b2d7f7d (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente trabalho reporta um estudo da interação do antipsicótico trifluoperazina (TFP), do anestésico local dibucaína (OSC) e do antihelmíntico praziquantel (PZQ) com membranas biológicas e sintéticas. A interação droga-membrana foi estudada através da determinação do coeficiente de partição das drogas entre vários sistemas de membrana e água, e também pela monitoração da atividade hemolítica (determinação das razões efetivas drogas/lipídio para proteção e indução de lise, determinação do efeito térmico envolvido na hemólise, análise morfológica e determinação do perfil de eluição de lipídios). Além do estudo da contribuição do grau de ionização da TFP e da OSC na interação com membranas. A TFP apresentou o maior coeficiente de partição em todas as membranas e a melhor eficácia hemolítica, seguida pela OSC e pelo PZQ. A maior partição da TFP em relação à OSC deve-se às interações específicas com as proteínas da membrana bem como à contribuição da maior concentração da forma neutra em pH 7,4. A proteção induzida pelos xenobióticos em condições hiposmóticas está diretamente relacionada à hidrofobicidade dos compostos e é produzida pela inserção das formas monoméricas na membrana em concentrações inferiores às de saturação da membrana. A razão efetiva drogallipídio para a hemólise isosmótica induzida pela TFP ocorre muito antes de uma real saturação da membrana, enquanto que as razões efetivas drogallipídio para OSC e PZQ refletem uma real saturação da membrana. A hidrofobicidade parece ser um fator determinante na lise isosmótica induzida pelos xenobióticos embora fatores como a propriedade de agregação da TFP e a baixa solubilidade do PZQ tenham sido fundamentais para a indução ou inibição da hemólise. A hemólise induzida pela TFP e pela OSC são processos predominantemente entálpicos onde os eventos que mais contribuem são: a interação específica com proteínas da membrana e a formação de micelas mistas, no caso da TFP, e, a intercalação do monômero na membrana, no caso da OSC. Todos os xenobióticos estudados induziram estomatocitose e promoveram eluição de fosfolipídios e colesterol, no entanto a saída de lipídios não está proporcionalmente relacionada à hemólise. Os resultados obtidos sugerem que distintos mecanismos celulares de interação com a membrana são responsáveis pelos mecanismos de citotoxicidade de cada droga e revelam a multiplicidade de fatores (hidrofobicidade, solubilidade, grau de ionização, propriedades de agregação, afinidade específica por determinado componente da membrana e efeitos estéricos) que devem ser considerados na interpretação do fenômeno hemolítico ou, de uma maneira mais genérica, da interação de anfifílicos com membranas biológicas / Abstract: The present work reports a study of the interaction of the antipsychotic trifluoperazine (TFP), the local anesthetic dibucaine (DBC) and the antihelminthic praziquantel (PZQ) with biological and synthetic membranes. The drug-membrane interaction was studied by the determination of the partition coefficient of the drugs between various membrane systems and water, and by monitoring the hemolytic activity (determination of drugllipid ratios for protection and Iysis), determination of the thermal effect involved in hemolysis, morphological analysis and determination of the release of membrane lipids). In addition the study of TFP and DBC ionization contribution to membrane interaction was performed. TFP presented the higher partition coefficient in ali studied membranes and the higher hemolytic efficacy, followed by OSC and PZQ. The higher partition of TFP in relation to OSC is due to the specific interaction with membrane proteins and to the greater contribution of the neutral form at pH 7.4. The protection induced by the drugs in hyposmotic conditions is directly related to the compounds' hydrophobicity and it is triggered by the monomeric drug partition into membrane, in lower concentrations than those required for membrane saturation. The effective drugllipid ratio in the isosmotic hemolysis induced by TFP occurs before membrane saturation while for OSC and PZQ the Iytic drugllipid ratio reflect a real membrane saturation. The hydrofobicity seems to be a determinant factor in the induced Iysis although factors as TFP aggregative property and the low solubility of PZQ have became incisive to the induction or inhibition of hemolysis. The TFP and OSC induced Iysis are primarily enthalpyc process in which the events that more effectively contribute are the specific membrane protein interaction and micelle-mixed formation in case of TFP, and the monomer intercalation into membrane, for DBC. Ali the studied drugs induced stomatocytosis. The phospholipid and cholesterol release induced by the drugs are not directly related to hemolysis. The results presented suggest that distinct pathways are responsible for the Iytic effect induced for each drug and reveal the plurality of factors (hydrofobicity, solubility, ionization degree, aggregative properties, specific affinity for membrane components and steric effects) that must be considered in the interpretation of the hemolytic phenomenon or, in a more general view, the interaction of amphiphiles with biological membranes / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Ciências Biológicas