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Aislamiento e identificación bacteriológica y caracterización de lesiones histopatológicas presentes en el tetra bleeding heart (Hyphessobrycon erythrostigma) procedentes de la cuenca amazónica peruana

Valera Andrade, Adhemir Ayrton January 2016 (has links)
Determina la presencia de agentes bacterianos y caracteriza las lesiones observadas en los tejidos mediante el estudio microbiológico e histopatológico en el pez ornamental tetra bleeding heart (Hyphessobrycon erytrhostigma) procedentes de un acuario de la ciudad de Iquitos. Se recolectaron 120 peces para el estudio microbiológico y se tomaron 60 peces, los órganos evaluados fueron bazo y riñón. El aislamiento se hizo en agar MacConkey, agar GSP, Agar TSA y agar Cytophaga, luego su identificación fue mediante la coloración Gram, y pruebas bioquímicas. Los otros 60 peces fueron derivados para el estudio histopatológico, en el cual se evaluaron los tejidos de piel, ojo, branquias, estómago, intestino, hígado, bazo, músculo, riñón y peritoneo. De las muestras provenientes de bazo y riñón utilizados para el estudio microbiológico, se aislaron seis géneros bacterianos: Pseudomonas sp., Aeromonas sp., Lactobacillus sp., Bacillus sp., Flavobacterium sp., Staphylocccus sp. y Escherichia sp. Con respecto al estudio histopatológico, en el ojo no se observaron lesiones, sin embargo en los demás tejidos si se encontraron diversos hallazgos histopatológicos, en las branquias se observó esporas de Mixosporidium sp., hiperplasia y fusión de lamelas, en hígado y peritoneo se hallaron granulomas parasitarios y bacterianos; en caso del músculo, riñón y bazo también se encontraron granulomas bacterianos, y en el estómago e intestino se observó hiperplasia de las células epiteliales entre otras lesiones. Una parte de los granulomas fueron positivos a la tinción de Ziehl Neelsen, donde se evidencio bacterias bacilares largas acidorresistentes, que son compatibles con Mycobacterium sp. Concluye, según el estudio la presencia de agentes bacterianos así como también diversos hallazgos histopatológicos en el tetra bleeding heart. / Tesis
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Comportamento químico e microbiológico no biofertilizante tipo supermagro / Chemical and microbiological performance in biofertilizer type supermagro

Ruiz Lopez, Miguel Alfredo 08 March 2013 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-07-25T11:42:36Z No. of bitstreams: 1 2013_MiguelAlfredoRuizLopez.pdf: 1910666 bytes, checksum: fb10879022cd331ade3192590c7e6db4 (MD5) / Approved for entry into archive by Leandro Silva Borges(leandroborges@bce.unb.br) on 2013-07-26T21:22:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MiguelAlfredoRuizLopez.pdf: 1910666 bytes, checksum: fb10879022cd331ade3192590c7e6db4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-26T21:22:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MiguelAlfredoRuizLopez.pdf: 1910666 bytes, checksum: fb10879022cd331ade3192590c7e6db4 (MD5) / Os biofertilizantes sao fertiprotetores, provenientes de um processo de decomposicao de materia organica (animal ou vegetal), sendo geralmente utilizados nos sistemas de producao de base ecologica como insumo de efeitos multiplos (fertilizante, estimulante, repelente de insetos e controlador de doencas). Nesta pesquisa, foi avaliada a estabilidade do biofertilizante SUPERMAGRO, na formula de Ramos et al. (2005), por um periodo de 3 meses. Avaliou-se, semanalmente, o teor dos nutrientes N, P, K, Ca, Mg, S, Fe, B, Cu, Mn, Zn, na fracao liquida do produto. Alem disso, foram monitorados, como indicadores de concentracao, a condutividade eletrica, os sais totais dissolvidos e os solidos soluveis totais; como indicadores de fermentacao, o pH e o acido lactico; e, como indicador de microrganismos desejaveis, o Bacillus sp. Dadas as condicoes em que se desenvolveu esta pesquisa, a luz dos resultados obtidos, pode-se concluir que o SUPERMAGRO apresenta as melhores caracteristicas para uso agricola na quinta semana, pois, nesse periodo, tem quantidades altas de acido lactico, pH estabilizado e concluido o processo de adicao mineral. Adicionalmente, esse biofertilizante, com ate tres meses de fermentacao, pode ser usado em aplicacoes foliares (em uma concentracao de 5%) sobre a maioria das culturas, sem perigos de toxicidade mineral. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Biofertilizers are ferti-protectors, derived from a process of decomposition of organic matter (animal or vegetable), and usually used in ecological production systems as multiple effects input (fertilizer, stimulating, insect repellents and disease controllers). In this study, it was evaluated the stability of SUPERMAGRO biofertilizer, according to Ramos et al. (2005) formula, during 3 months. It was evaluated, weekly, the content of N, P, K, Ca, Mg, S, Fe, B, Cu, Mn, Zn in a liquid fraction of the product. Moreover, there have been monitored, as indicators of concentration, electrical conductivity, total dissolved salts and soluble solids; as indicators of fermentation, pH and lactic acid; and, as an indicator of desirable microorganisms, Bacillus sp. Under the conditions in which this research has been developed, and in light of the results obtained, it can be concluded that SUPERMAGRO has the best characteristics for agricultural use in its fifth week, because, during this period, it shows high amounts of lactic acid, pH stabilized and completed the process of mineral adding. Additionally, this biofertilizer, within three months after fermentation, can be used in foliar applications (in a concentration of 5%) on most crops, without causing hazards to mineral toxicity.
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Caracterização fenotípica, genotípica e termorressistência à fervura em linhagens de Nocardia spp isoladas de animais domésticos e humanos

Condas, Larissa Anuska Zeni [UNESP] 22 March 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-22Bitstream added on 2014-06-13T19:31:45Z : No. of bitstreams: 1 condas_laz_me_botfmvz.pdf: 1052264 bytes, checksum: 8c7756dba0d74f545598e900b1ca1700 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Nocardia é um microorganismo ubíquo, relacionado a processos piogranulomatosos supurativos de difícil resolução terapêutica em humanos e animais. Foi investigada caracterização fenotípica, genotípica, perfil de sensibilidade aos antimicrobianos, e termorresistência à fervura em 95 linhagens de Nocardia spp. provenientes de animais domésticos e humanos. Em animais de produção a afecção mais comum foi mastite bovina identificada em 71 linhagens (74,73%). Em animais de companhia obteve-se mais isolamento nos cães com 12 linhagens (12,63%), principalmente de tecido cutâneo. Foram estudados sete isolados de Nocardia spp. obtidos de humanos, com quadros cutâneos e neurológicos. A caracterização molecular e análise filogenética realizada por PCR da fração 16S rRNA identificaram as seguintes espécies: Nocardia nova (68,42%), Nocardia farcinica (13,68%), Nocardia cyriacigeorgica (4,58%), Nocardia puris (3,67%), Nocardia veterana (3,67%), Nocardia africana (2,10%), Nocardia asiatica (0,91%) e Nocardia arthritidis (0,91%). A ocorrência de multirresistência a três ou mais e a cinco ou mais antimicrobianos ocorreu em, respectivamente, 42,88% e 14,28%. A comparação entre perfil de sensibilidade por disco-difusão e concentração inibitória mínima mostrou correlação fraca, exceto para amicacina. Na avaliação da termorresistência à fervura foi observado reisolamento de 84,21% das linhagens após atingir 100ºC no leite, 50,52% após um minuto de fervura a 100ºC e 2,10% após cinco minutos. Depreendeu-se no estudo alta similaridade entre linhagens de Nocardia sp. isoladas de animais domésticos e humanos, elevada multirresistência aos antimicrobianos utilizados na terapia da nocardiose em animais e humanos, e a termorresistência à fervura do leite, ressaltando riscos de consumo do leite de animais com nocardiose mamária / Nocardia is an ubiquitous microorganism, environmental, related to supurative pyogranulomatous of difficult treatment in humans and domestic animals. The phenotypic and genotypic characterization, antimicrobial susceptibility profile and thermorresistance to boiling of 95 strains of Nocardia spp., from both domestic animals and humans, were investigated. In production animals the most common affection was the bovine mastitis, identified in 71 strains (74,73%). Among the small animal, most of the isolates were from dogs, a total of 12 strains (12,63%), especially from cutaneous manifestations. Seven isolates were obtained from humans, with emphasis for cases with cutaneous and neurological signs. The molecular characterization and the phylogenetic analysis made through PCR of the 16S rRNA resulted in the identification: Nocardia nova (68,42%), Nocardia farcinica (13,68%), Nocardia cyriacigeorgica (4,58%), Nocardia puris (3,67%), Nocardia veterana (3,67%), Nocardia africana (2,10%), Nocardia asiatica (0,91%) and Nocardia arthritidis (0,91%). The occurrence of multi-resistance to three or more and five or more antimicrobials was observed in 42,88% and 14,28%of the studied strains, respectively. The comparison between the susceptibility profile through disc diffusion and the minimum inhibitory concentration showed a weak correlation, except for amikacin. In the evaluation of thermorresistance to boiling 84,21% of the strains were re-isolated after reaching 100°C in milk, 50,52% after boiling for one minute at 100ºC and 2,10% after boiling for 5 minutes. This study showed high similarity between Nocardia sp. strains isolated from domestic animals and humans, increased multi-resistance to some of the most used antimicrobials in the therapy of nocardiosis in animals and humans, thermorresistance to the boiling conditions of milk, emphasizing the risk of consuming products from animals with mammary nocardiosis
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Análisis del perfil microbiológico de los componentes de las chica de jora

Collazos, Génesis, arbañil, cristina 18 October 2020 (has links)
Objetivo: Caracterizar el perfil microbiológico de los componentes de la chicha de jora mediante técnicas moleculares. Diseño: El presente trabajo es de tipo experimental exploratorio, con investigación en las áreas de nutrición, biología molecular y microbiología in vitro. Es considerado un estudio de biología molecular ya que se utilizarán técnicas de esta rama como la secuenciación de ADN mediante técnicas moleculares una vez que se aísle la secuencia de ADN objetivo de la muestra a estudiar. Asimismo, es considerado un estudio microbiológico, ya que se experimentará en esta área utilizando componentes moleculares de microorganismos que se aislaron de su entorno biológico habitual.
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Caracterização fenotípica, genotípica e termorressistência à fervura em linhagens de Nocardia spp isoladas de animais domésticos e humanos /

Condas, Larissa Anuska Zeni. January 2011 (has links)
Orientador: Márcio Garcia Ribeiro / Banca: Elisabeth Oliveira Costa Freitas Guimarães / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Márcio Garcia Ribeiro / Resumo: Nocardia é um microorganismo ubíquo, relacionado a processos piogranulomatosos supurativos de difícil resolução terapêutica em humanos e animais. Foi investigada caracterização fenotípica, genotípica, perfil de sensibilidade aos antimicrobianos, e termorresistência à fervura em 95 linhagens de Nocardia spp. provenientes de animais domésticos e humanos. Em animais de produção a afecção mais comum foi mastite bovina identificada em 71 linhagens (74,73%). Em animais de companhia obteve-se mais isolamento nos cães com 12 linhagens (12,63%), principalmente de tecido cutâneo. Foram estudados sete isolados de Nocardia spp. obtidos de humanos, com quadros cutâneos e neurológicos. A caracterização molecular e análise filogenética realizada por PCR da fração 16S rRNA identificaram as seguintes espécies: Nocardia nova (68,42%), Nocardia farcinica (13,68%), Nocardia cyriacigeorgica (4,58%), Nocardia puris (3,67%), Nocardia veterana (3,67%), Nocardia africana (2,10%), Nocardia asiatica (0,91%) e Nocardia arthritidis (0,91%). A ocorrência de multirresistência a três ou mais e a cinco ou mais antimicrobianos ocorreu em, respectivamente, 42,88% e 14,28%. A comparação entre perfil de sensibilidade por disco-difusão e concentração inibitória mínima mostrou correlação fraca, exceto para amicacina. Na avaliação da termorresistência à fervura foi observado reisolamento de 84,21% das linhagens após atingir 100ºC no leite, 50,52% após um minuto de fervura a 100ºC e 2,10% após cinco minutos. Depreendeu-se no estudo alta similaridade entre linhagens de Nocardia sp. isoladas de animais domésticos e humanos, elevada multirresistência aos antimicrobianos utilizados na terapia da nocardiose em animais e humanos, e a termorresistência à fervura do leite, ressaltando riscos de consumo do leite de animais com nocardiose mamária / Abstract: Nocardia is an ubiquitous microorganism, environmental, related to supurative pyogranulomatous of difficult treatment in humans and domestic animals. The phenotypic and genotypic characterization, antimicrobial susceptibility profile and thermorresistance to boiling of 95 strains of Nocardia spp., from both domestic animals and humans, were investigated. In production animals the most common affection was the bovine mastitis, identified in 71 strains (74,73%). Among the small animal, most of the isolates were from dogs, a total of 12 strains (12,63%), especially from cutaneous manifestations. Seven isolates were obtained from humans, with emphasis for cases with cutaneous and neurological signs. The molecular characterization and the phylogenetic analysis made through PCR of the 16S rRNA resulted in the identification: Nocardia nova (68,42%), Nocardia farcinica (13,68%), Nocardia cyriacigeorgica (4,58%), Nocardia puris (3,67%), Nocardia veterana (3,67%), Nocardia africana (2,10%), Nocardia asiatica (0,91%) and Nocardia arthritidis (0,91%). The occurrence of multi-resistance to three or more and five or more antimicrobials was observed in 42,88% and 14,28%of the studied strains, respectively. The comparison between the susceptibility profile through disc diffusion and the minimum inhibitory concentration showed a weak correlation, except for amikacin. In the evaluation of thermorresistance to boiling 84,21% of the strains were re-isolated after reaching 100°C in milk, 50,52% after boiling for one minute at 100ºC and 2,10% after boiling for 5 minutes. This study showed high similarity between Nocardia sp. strains isolated from domestic animals and humans, increased multi-resistance to some of the most used antimicrobials in the therapy of nocardiosis in animals and humans, thermorresistance to the boiling conditions of milk, emphasizing the risk of consuming products from animals with mammary nocardiosis / Mestre
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Efeito da radiação solar e da salinidade sobre o crescimento de Escherichia coli / Effect of solar radiation and salinity on the growth of Escherichia coli

Castro, Hilda Maria Pinheiro de January 2003 (has links)
CASTRO, Hilda Maria Pinheiro de. Efeito da radiação solar e da salinidade sobre o crescimento de Escherichia coli. 2003.51 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2003. / Submitted by Debora Oliveira (deby_borboletinha@hotmail.com) on 2011-11-22T13:16:47Z No. of bitstreams: 1 2003_dis_hmpdcastro.pdf: 382896 bytes, checksum: fa4108a2d324deae28a07b76518dcc6c (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid(nadsa@ufc.br) on 2011-11-23T18:38:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2003_dis_hmpdcastro.pdf: 382896 bytes, checksum: fa4108a2d324deae28a07b76518dcc6c (MD5) / Made available in DSpace on 2011-11-23T18:38:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2003_dis_hmpdcastro.pdf: 382896 bytes, checksum: fa4108a2d324deae28a07b76518dcc6c (MD5) Previous issue date: 2003 / Marine waters have a toxic effect over enteric bacteria, including Escherichia coli which is widely recognized as a microbiological indicator for fecal pollution. Several factors, such as solar radiation, salinity, pH, temperature and nutrients shortage, affect the survival of this bacterium in the marine environment. This work is aimed to study the effect of solar radiation and salinity on the survival of E. coli. An E.coli strain was isolated from a water sample taken from the outfall of a pluvial gallery, in front of the Mucuripe beach, and biochemically identified. Ten sterile transparent flasks and ten sterile amber flasks, each one containing 9 mL of marine water with salinity between 33 and 35‰ and pH between 7.23 and 7.56, were inoculated with 1 mL of the TSA-grown culture, and diluted with sterile saline until the tube reached a turbidity of 0.5 in the McFarland scale. The flasks were then subjected to 10 days of exposure to solar light, running simultaneously a control experiment following the same treatment conditions in the dark. 10 repetitions of the experiment were performed. The bacterial survival was evaluated by the Standard Plate Count assay (SPC), starting with t = 0 (the initial inoculation) and until t = 216 hours. The results showed a plate count every cloudy or rainy day of solar exposure, while in days of strong solar irradiation a significant decrease of the bacterial population was observed. During the same periods, the controls showed no significant decrease. The variance analysis (ANOVA) used to process the obtained data showed a correlation between the time of exposure to solar radiation and the decrease of E. coli cells. / A água do mar tem efeito tóxico sobre o crescimento de bactérias entéricas dentre as quais se incluem a Escherichia coli, reconhecida como indicador microbiológico de poluição fecal . Dentre os fatores que afetam a sobrevivência da bactéria em meio marinho encontram-se a radiação solar, salinidade, pH, falta de nutrientes e temperatura. O objetivo desse trabalho foi testar o efeito da radiação solar e salinidade sobre a sobrevivência de E. coli. De uma amostra de água coletada na saída da galeria pluvial em frente à Praia do Mucuripe, procedeu-se o isolamento e a identificação bioquímica de E.coli. Dez frascos transparentes e 10 frascos de cor âmbar, esterilizados, contendo 9 mL de água do mar com salinidade variando de 33 a 35 ‰, e pH entre 7,23 a 7,56, foram oculados com 1mL da cultura crescida em TSA e diluída em solução salina estéril, de forma que a turbidez correspondesse ao tubo 0,5 da escala de McFarland. Os frascos foram então submetidos a 10 dias de exposição à luz solar tendo como controle o mesmo tratamento em ausência de luz. Foram realizados dez experimentos. A sobrevivência da bactéria foi avaliada segundo o teste da Contagem Padrão em Placas (CCP) partindose do tempo T0 (inóculo inicial) prosseguindo até o T216 (em horas). Os resultados obtidos mostraram que para o cultivo exposto à luz solar, em dias nublados ou chuvosos, a cepa apresentou contagem em placas até o tempo T216, e em dias de maior incidência solar houve um decréscimo acentuado, com tendências sempre à queda da população. Para o controle, durante o mesmo período, não houve decréscimo significativo. O teste de Análise de Variância (ANOVA) mostrou que há uma correlação entre o tempo de exposição da cepa à radiação solar e a diminuição do número de células de E.coli.
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Perfil fitoquímico e farmacológico da Aspidosperma pyrifolium Mart. ensaios pré-clínicos

NÓBREGA, Mário Gustavo Lúcio Albuquerque da 31 January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T16:28:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2098_1.pdf: 1982127 bytes, checksum: 3658f59a5f957ee5b1ee4d47768b587d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / A utilização de produtos naturais vem crescendo notadamente nestes últimos anos. A pesquisa farmacológica de plantas medicinais tem propiciado não só avanços importantes para a terapêutica de várias patologias, como também tem fornecido ferramentas extremamente úteis para o estudo teórico de fisiologia e farmacologia. Aspidosperma pyrifolium Mart. ocorre na caatinga e é conhecida como pereiro, pau-de-coaru e pequiá da mata. No Brasil, essa espécie é usada em casos de enfisema, bronquite e pneumonia, bem como no tratamento de dispnéia asmática e cardíaca. A pesquisa proposta avaliou a atividade toxicológica, microbiológica e antineoplásica, assim como o perfil fitoquímico do extrato metanólico da casca de Aspidosperma pyrifolium Mart.. A toxicidade foi avaliada em duas etapas: preliminar e definitiva, pelo método de Karber e Behrens (1964). O tratamento com o extrato metanólico, com a dose via intraperitoneal em camundongos fêmeas apresentou índice de inibição de 73,90% para a dose de 7mg/kg , 61,54% para a dose de 14mg/kg, 28,57% para a dose de 28mg/kg.O fármaco padrão, metotrexato, foi capaz de inibir 48,64% do crescimento tumoral. Os resultados da toxicidade demonstraram por via intraperitoneal os seguintes efeitos: agitação, movimentos estereotipados, circulantes e de vibrissas, piloereção, reação de fuga, irritabilidade, exoftalmia, aumento da freqüência cardiorespiratória, tremores grosseiros, contorções abdominais e convulsões. No ensaio microbiológico a média aritmética dos halos de inibição foram 8,67; 12,00 e 14,33 para S. aureus (ATCC 6538), 9,00; 12,67 e 15,33 para BIOCLÍNICO e 13,67; 17,67 e 21,00 para M. luteus (ATCC 9341) nas respectivas concentrações. Os resultados confirmaram a capacidade de inibição do crescimento bacteriano in vitro pelo extrato de A. pyrifolium, corroborando os relatos populares. Na abordagem fitoquímica, foi detectada a presença de triterpenos, esteróides, iridóides, saponósidios, acúcares redutores, flavonóides e uma negatividade pra glicosídeos cardíacos. Conclui-se que a Aspidosperma pyrifolium Mart. apesar da alta toxicidade apresenta propriedades antitumorais e antimicrobianas com perspectivas para novas investigações biológicas
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Revisão sistemática e radiossensitividade gama de plantas medicinais : desenvolvimento de protocolo para controle de qualidade

santos Oliveira, Ralph January 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:17:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9108_1.pdf: 1422401 bytes, checksum: 19954c51b8138255fcba210a3c55f42b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O presente trabalho discute a contribuição da adoção de critérios mais objetivos e de maior rigor na seleção e análise de fontes de informação, levando à utilização de maior rigor científico no processo de registro de fitoterápicos. Neste sentido, se propõe a adoção de uma metodologia previamente testada e reconhecidamente eficaz, a Revisão Sistemática (RS), como metodologia básica para a análise de registro de fitoterápicos. Visando permitir a visualização das diferenças causadas pela adoção da Revisão Sistemática no processo de registro, é apresentado um caso, Maytenus ilicifolia M. ( espinheira-santa ). O uso da radiação ionizante vem tendo sua utilidade expandida. Utilizou-se neste trabalho, a radiação gama em matrizes fitoterápicas (extrato de espinheira-santa ) para o controle de qualidade microbiológico destas matrizes. Os resultados apontam para uma contribuição positiva da incorporação da metodologia de RS no processo de registro de fitoterápicos assim como da radiação gama no controle de qualidade microbiológico de matrizes fitoterápicas
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Avaliação quantitativa do risco microbiológico em águas e biossólidos: estado da arte / Quantitative microbial risk assessment: state of the art in water and biosolids

Ignoto, Raquel de Fátima 22 October 2010 (has links)
A avaliação quantitativa de risco microbiológico é o processo utilizado para estimar a probabilidade de infecção, doença ou morte após exposição a microrganismos patogênicos presente em águas, biossólidos, alimentos e ar. Essa pesquisa tem como objetivo descrever o estado da arte da avaliação qualitativa de risco microbiológico associadas a águas e biossólidos, bem como descrever as abordagens e etapas utilizadas na condução do processo, relatar a aplicabilidade e discutir as dificuldades e necessidades na condução da AQRM. Sendo uma pesquisa de caráter descritivo-explicativo, realizou-se revisão de literatura sobre a temática nas seguintes bases de dados: Scielo, LILACS, DEDALUS, MEDLINE e PUBMED e nos documentos produzidos pela Organização Mundial de Saúde e U.S. Environmental Protect Agency. Na literatura consultada verificou-se que a AQRM vem sendo utilizada desde o início da década de 1980 para estimar os riscos à saúde humana. Existem diferentes abordagens utilizadas na condução da ferramenta, diferem na forma de organizar e sistematizar as informações, porém são similares. A abordagem mais utilizada é a proposta pela NRC e consta de quatro etapas: identificação do perigo, avaliação de exposição, avaliação de dose-resposta e caracterização do risco. Constatou-se que a avaliação de exposição apresentase como a etapa mais complexa da AQRM, devido a: i) limitações metodológicas na determinação da concentração e viabilidade dos patógenos em águas e biossólidos e ii) escassez de dados de exposição e de consumo. Verificou-se que a utilização da ferramenta é proeminente na avaliação dos riscos decorrentes da exposição à patógenos presentes em águas de consumo, recreacionais e residuárias, bem como os decorrentes da exposição a solos e cultivos agrícolas fertilizados com biossólidos. É uma ferramenta que assume relevância no cenário internacional vem se consolidando no estabelecimento de valores-limite de patógenos presentes em diversas fontes, no desenvolvimento de normas, guias e legislações, bem como para discussões e implementação de planos de segurança da água e alimentar. Porém, é uma ferramenta pouco conhecida e empregada em nosso país que pode vir a atender às demandas atuais relacionadas a águas e biossólidos, tais como: i) estabelecimento de valores-limite e risco tolerável para patógenos, ii) proposição de métodos de tratamento e controle, iii) criação e revisão de normas, regulamentações e leis e iv) implementação de políticas públicas que visem a promoção e proteção da saúde humana / The quantitative microbial risk assessment is the process used to estimate the probability of infection, disease or death after exposure to pathogenic microorganisms present in water, biosolids, food and air. This research aims to describe the state of the art of quantitative microbial risk assessment associated with water and biosolids, and to describe the approaches and steps used in conducting the proceedings, report the applicability and discuss the difficulties and needs in the conduct of QMRA. As a search with a descriptive-explanatory character, there was a literature review on the subject on the following databases: SciELO, LILACS, DEDALUS, MEDLINE, PUBMED and in documents produced by the World Health Organization and the U.S. Environmental Protection Agency. In literature it was found that the QMRA has been used since the early 1980s to estimate the risk to human health. There are different approaches used in the conduct of the tool, they differ in the way of organizing and systematizing the information, but they are similar. The most used approach is the one proposed by the NRC and consists of four steps: hazard identification, exposure assessment, doseresponse assessment and risk characterization. It was found that the exposure assessment is presented as the most complex steps of QMRA due to: i) methodological limitations in determining the concentration and viability of pathogens in water and biosolids, and ii) lack of exposure data and consumption. It was verified that the use of the tool is prominent in assessing the risks from exposure to pathogens in drinking water, recreational water and wastewater, as well as from exposure to soils and crops fertilized with biosolids. It is a tool that is relevant in the international arena and has been consolidated in the establishment of limit values of pathogens present in different sources, in developing standards, guidelines and laws, as well as for discussion and implementation of plans for water and food security. However, it is a relatively unfamiliar tool used in our country that can come to attend current demands related to water and biosolids, such as: i) establishment of limit values for pathogens and tolerable risk, ii) proposition of methods of treatment and control, iii) creation and revision of standards, regulations and laws and iv) implementation of public policies for promotion and protection of human health
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Desenvolvimento de ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto na detecção de anticorpos anti-Corynebacterium pseudotuberculosis em ovinos (Ovis aries, Linnaeus, 1758) / Development of indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of antibodies against Corynebacterium pseudotuberculosis in sheep (Ovis aries, Linnaeus, 1758)

Nassar, Alessandra Figueiredo de Castro 25 May 2012 (has links)
A linfadenite caseosa é uma doença infectocontagiosas, de ocorrência mundial, que acomete caprinos e ovinos, caracterizada pela formação de abscessos em gânglios linfáticos superficiais, e alguns casos órgãos e linfonodos internos. É uma enfermidade causada pelo Corynebacterium pseudotuberculosis, responsável por grandes perdas econômicas na caprinocultura e ovinocultura. O presente trabalho teve por objetivo desenvolver um teste sorológico sensível e específico para detectar anticorpos anti-C. pseudotuberculosis em ovinos. Os animais foram classificados em dois grupos, com sintomatologia aparente para linfadenite caseosa (n=103) colhidos a campo, onde foram coletados amostras de soro e punção de linfonodos aumentados; e animais sem sintomatologia aparente (n=50) dos quais as amostras de soro e fragmentos de pulmão e linfonodo mediastínico foram colhidos em frigorífico. Em ambas as amostras a confirmação da presença e ausência da doença foi realizada através das provas de cultivo microbiológico e PCR, considerados nesse estudo como padrão para classificação dos animais. O resultado do cultivo microbiológico dos animais com sintomatologia aparente foi 53,5% (55/103) identificadas como C. pseudotuberculosis através de provas bioquímicas, e com a utilização da PCR, 46,5% (48/103) das amostras foram positivas para C. pseudotuberculosis. Com relação aos animais sem sintomatologia aparente, todas as amostras foram negativas no cultivo microbiológico e PCR (0/50). Na padronização do ELISA indireto foram utilizados 42 soros positivos e 43 soros negativos confirmados no cultivo microbiológico e PCR para linfadenite caseosa. A média de absorbância foi 1,88 com desvio padrão de 0,43, para as amostras positivas e, para as amostras negativas a média de 0,71 e desvio padrão 0,18. Dessa forma foram consideradas positivas, as amostras que apresentaram na reação de ELISA valor da DO> 1,1 e negativas de <1,1. A análise gráfica empregada no presente trabalho, curva ROC, permitiu encontrar o valor do ponto de corte associado à combinação dos parâmetros de sensibilidade e especificidade, assim, a acurácia do teste pôde descriminar indivíduos doentes de não doentes. A utilização de técnicas sorológicas no diagnóstico da linfadenite caseosa permitirá o controle epidemiológico da doença, porém não substitui o cultivo microbiológico, técnica considerada padrão ouro, e pode ser utilizada como teste de triagem ou mesmo na comercialização de animais, visto que a doença muitas vezes é de caráter inaparente, o que inviabiliza o diagnóstico clínico e microbiológico. / Caseous lymphadenitis is an infectious disease of worldwide occurrence that affects sheep and goats, characterized by the formation of abscesses in superficial lymph nodes, and sometimes internal organs and lymph nodes. It is caused by Corynebacterium pseudotuberculosis, responsible for great economic losses in goat and sheepproduction. This study aimed to develop a sensitive and specific serological test to detect anti- C. pseudotuberculosis in sheep. The animals were divided into two groups, the first one encompassing the ones with apparent caseous lymphadenitis symptoms (n = 103), where serum samples and puncture of enlarged lymph nodes were collected, and the second one with animals with no apparent symptoms (n = 50) of which samples (lung fragments, serum and and mediastinal lymph nodes) were inspected and harvested in the slaughterhouse. In both groups the presence and absence of the disease was carried through the evidence of microbiological culture and PCR, considered as the standard for the groups classification. Microbiological culture results of animals with apparent symptoms was 53.5% (55/103) identified as C. pseudotuberculosis by biochemical tests, and allied to PCR, 46.5% (48/103) of the samples were positive for C. pseudotuberculosis. Regarding animals without apparent symptoms, all samples were negative in microbiological culture and PCR (0/50). For the standardization of indirect ELISA we used 42 positive sera and 43 negative sera confirmed by microbiological culture and PCR for caseous lymphadenitis. The mean absorbance was 1.88 with standard deviation of 0.43 for the positive samples, and for negative samples the average was 0.71 and standard deviation 0.18. Thus we considered as positive, the samples with DO value > 1.1 and negative <1.1. The graphical analysis employed in this study, ROC curve, allowed us to find the cutoff value allied to the association of sensitivity and specificity parameters, thus the test accuracy was able to discriminate sick from not sick individuals. The use of serological techniques for the diagnosis of caseous lymphadenitis will allow the epidemiological control of the disease, but does not replace the microbiological culture, considered as the gold standard technique, and can be used as a screening test or animals trade, since the disease condition often is unapparent, which derails the clinical diagnosis and microbiological.

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