La gravité est une stimulation permanente pour l'organisme sur terre. La microgravité induit des modifications de nombreuses fonctionnalités, y compris celles du système cardio-vasculaire. Le but de ce travail était d‟étudier les mécanismes des modifications vasculaires induites par les modèles de microgravité. Nous avons conduit nos études chez l‟homme à l‟aide de l‟immersion sèche qui est considérée comme un des modèles reproduisant au mieux la microgravité. L'immersion sèche est le seul modèle de microgravité prolongée à imiter l'absence d‟appui. Notre travail montre que l‟immersion sèche induit une atteinte au niveau microcirculatoire avec une dysfonction endothéliale (étude des microparticules circulantes) et une atteinte de la fonction vasodilatatrice cutanée (étude par iontophorèse couplée au laser Doppler). Cette atteinte vasculaire s'intègre dans un syndrome de déconditionnement cardiovasculaire plus global que nous avons également étudié. Il comprend un nouvel équilibre hydro-sodé qui survient très rapidement, dans les 24 premières heures. Pendant la période de récupération, nous avons observé une augmentation significative du NT-proBNP qui pourrait être un marqueur biologique du déconditionnement cardio-vasculaire. Nos études sur l‟animal avec les modèles d‟hypokinésie et d'inclinaison tête en bas discontinues chroniques suggèrent qu'une translocation augmentée d‟endotoxine et une réduction du métabolisme énergétique en microgravité pourraient participer aux atteintes endothéliales. La dysfonction endothéliale deviendrait ainsi une cible thérapeutique pour des atteintes liées à l‟inactivité physique et à la microgravité.

<p>Type 1 diabetes mellitus affects millions of people worldwide. Islet transplantation is a minimal invasive surgical procedure that restores euglycemia and halts the progression of diabetic complications. However, despite transplantation of islets from multiple donors most patients reverse to hyperglycemia within five years. New strategies to improve long-term outcome of islet transplantation are indispensable. This thesis studied differences in the microvasculature between endogenous and transplanted pancreatic islets, and investigated means to improve islet graft revascularization and function. Islet graft microvessels were similar to endogenous islets responsive to adenosine, angiotensin II and nitric oxide (NO). Recipient hyperglycemia induced a higher basal islet graft blood flow, which also was less dependent on NO than in normoglycemic recipients. Transplantation of freshly isolated instead of cultured islets improved graft revascularization, oxygenation and function. Pretreatment of islets with vascular endothelial growth factor decreased their expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and impaired graft revascularization. Moreover, MMP-9 pretreatment <i>per se</i> improved graft revascularization. <i>In vivo</i>, 20-25% of all endogenous rat islets was low oxygenated (pO₂ <10 mmHg). Changes in the islet mass, by means of whole-pancreas transplantation, doubled the fraction of low oxygenated islets in the endogenous pancreas of transplanted animals, whereas this fraction almost completely disappeared after a 60% partial pancreatectomy. Interestingly, oxygenation was related to metabolism, since well oxygenated islets <i>in vivo</i> had 50% higher leucine-dependent protein biosynthesis, which includes (pro)insulin biosynthesis. In intraportally transplanted islets, the low oxygenated fraction of islets was markedly increased one day post-transplantation, and the oxygenation remained low following revascularization. In summary, these data suggest that a better revascularization of transplanted islets can improve graft function. Furthermore, the oxygenation and metabolism of endogenous islets is tightly regulated. This regulation seems to be disturbed following transplantation, which may contribute to long-term islet graft failure. </p>

Type 1 diabetes mellitus affects millions of people worldwide. Islet transplantation is a minimal invasive surgical procedure that restores euglycemia and halts the progression of diabetic complications. However, despite transplantation of islets from multiple donors most patients reverse to hyperglycemia within five years. New strategies to improve long-term outcome of islet transplantation are indispensable. This thesis studied differences in the microvasculature between endogenous and transplanted pancreatic islets, and investigated means to improve islet graft revascularization and function. Islet graft microvessels were similar to endogenous islets responsive to adenosine, angiotensin II and nitric oxide (NO). Recipient hyperglycemia induced a higher basal islet graft blood flow, which also was less dependent on NO than in normoglycemic recipients. Transplantation of freshly isolated instead of cultured islets improved graft revascularization, oxygenation and function. Pretreatment of islets with vascular endothelial growth factor decreased their expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and impaired graft revascularization. Moreover, MMP-9 pretreatment per se improved graft revascularization. In vivo, 20-25% of all endogenous rat islets was low oxygenated (pO2 &lt;10 mmHg). Changes in the islet mass, by means of whole-pancreas transplantation, doubled the fraction of low oxygenated islets in the endogenous pancreas of transplanted animals, whereas this fraction almost completely disappeared after a 60% partial pancreatectomy. Interestingly, oxygenation was related to metabolism, since well oxygenated islets in vivo had 50% higher leucine-dependent protein biosynthesis, which includes (pro)insulin biosynthesis. In intraportally transplanted islets, the low oxygenated fraction of islets was markedly increased one day post-transplantation, and the oxygenation remained low following revascularization. In summary, these data suggest that a better revascularization of transplanted islets can improve graft function. Furthermore, the oxygenation and metabolism of endogenous islets is tightly regulated. This regulation seems to be disturbed following transplantation, which may contribute to long-term islet graft failure.

La microcirculation est constituée d'un réseau vasculaire qui comprend les artérioles, les veinules et les capillaires. La microcirculation cutanée est un paramètre physiologique important pour les applications cliniques avancées comme le syndrome de Raynaud ou la prévention des escarres. De nombreuses méthodes non ambulatoires ont été développées afin de mesurer la microcirculation sanguine. La tendance actuelle dans le domaine des technologies pour la santé est la miniaturisation des capteurs et de leurs instrumentations associées pour les rendre non-invasifs, portables par le patient et ainsi adaptés aux mesures ambulatoires en conditions réelles, ou appelées aussi " écologiques ". Le manuscrit présente la conception et la réalisation d'un système électronique miniaturisé ambulatoire (µHématron), permettant de réaliser un monitoring continu, en temps réel de la conductivité thermique tissulaire qui est l'image de la microcirculation dans les capillaires. La première expérimentation effectuée a pour l'objectif de confronter le système µHématron avec un moniteur de fluxmétrie laser Doppler, au cours d'une étude destinée à évaluer le confort thermique chez l'homme. Ainsi, une étude d'influence de la température de différentes ambiances sur un certain nombre de paramètres de la peau de sujets sains, y compris la microcirculation cutanée, a été réalisée. Les corrélations obtenues entre les variations des deux signaux des deux instrumentations pour les ambiances neutres, chaudes et froides sont présentées. La deuxième expérimentation est consacrée à l'étude préliminaire de l'effet global des bas médicaux de compression sur la microcirculation cutanée des membres inférieurs de sujets sains. Grâce à l'instrumentation ambulatoire, la microcirculation a pu être évaluée de façon continue pour différentes postures des sujets : allongée, assise, débout et en marche, et ce, pour des différentes classes de bas de compression (I, II, et III). Cette étude a permis d'améliorer la compréhension de l'effet de ces bas sur les sujets sains.

Diss. (sammanfattning) Linköping : Univ., 2005. / Härtill 5 uppsatser.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A fase cefálica de secreção de insulina (FCSI) ocorre dentro da fase cefálica da digestão, em aproximadamente dez minutos entre a estimulação oro-sensorial pelo alimento e o início da absorção deste e determina um incremento rápido dos níveis basais de insulina. A FCSI parece ser importante para a tolerância normal à glicose. A hipótese deste estudo é de que a insulina secretada na fase cefálica da digestão teria ações direcionadas para o tecido microvascular, com conseqüente recrutamento capilar. Estudos recentes com indivíduos sadios têm mostrado a associação entre função microvascular e componentes dietéticos. Padrões alimentares saudáveis e intervenções nutricionais com alimentos específicos representam estratégias preventivas e terapêuticas não-farmacológicas para redução da inflamação e do risco metabólico e cardiovascular associados. O estudo de consumo alimentar inserido nesta pesquisa objetivou identificar associações entre componentes dietéticos e a função microvascular em indivíduos saudáveis. Após avaliação clínica e laboratorial, 39 voluntários saudáveis foram submetidos a dois exames de videocapilaroscopia do leito ungueal, com um intervalo de dez minutos entre os mesmos. Neste intervalo, conforme randomização, uma refeição com ótima apresentação e aroma foi apresentada (estímulo sensorial) ou não (controle). Coletas sangüíneas foram realizadas aos 3, 9 e 15 minutos após a apresentação do estimulo, para avaliação dos níveis de insulina e polipeptídeo pancreático (PP), marcadores bioquímicos da fase cefálica da digestão. Durante todo o exame medidas de fluxo e vasomotricidade foram realizadas pela técnica de laser-Doppler fluxometria. Após o exame, foi realizada iontoforese transdérmica de insulina. Todos os participantes responderam a um questionário de freqüência alimentar (QFA), relativo ao hábito de consumo dietético dos últimos 12 meses. O estudo da resposta microvascular à fase cefálica comparou as diferenças de densidade capilar funcional e fluxo capilar nos grupos experimental e controle, antes e após o estímulo sensorial, e sua correlação com a variação de insulina e PP. O estudo de consumo alimentar avaliou correlações entre componentes dietéticos e recrutamento capilar no exame basal (antes do estímulo) em toda amostra. Após o intervalo, o grupo que recebeu o estímulo sensorial teve sua densidade capilar funcional (DCF) aumentada. A variação de insulina não diferiu entre os grupos e a de PP foi maior no grupo estimulado, sendo também correlacionada positivamente como aumento na DCF. A velocidade máxima de perfusão pósisquemia também aumentou no grupo estimulado, enquanto o tempo para alcançar esta velocidade máxima diminuiu. O estudo do consumo alimentar revelou associações positivas entre o consumo de cálcio, selênio e laticínios e recrutamento capilar na amostra total. Em conclusão, o consumo alimentar de cálcio, selênio e laticínios foi associado com maior recrutamento capilar em indivíduos sadios. Nestes indivíduos a microcirculação cutânea respondeu ao estímulo da fase cefálica da digestão com recrutamento capilar e aumento de fluxo sanguíneo microvascular. / The cephalic phase of insulin secretion (CPIS) occurs within the cephalic phase of digestion, in approximately ten minutes between the oral-sensorial stimulation elicited by the food to be consumed and the beginning of its absorption. It determines a rapid increase in insulin levels. The CPIS is believed to be important for normal glucose tolerance. The hypothesis of this study is that insulin secreted during cephalic phase would also have actions targeting microvascular tissue, with resulting capillary recruitment. Recent studies with healthy subjects have shown an association between microvascular function and dietary factors. Healthy eating patterns and nutritional interventions with specific food items represent non-pharmacological preventive and therapeutic strategies for reducing inflammation and cardio-metabolic associated risk factors. The study of food intake included in this research aimed to identify associations between dietary intake and microvascular function in healthy subjects. After clinical and laboratorial assessment, 39 healthy men underwent two nailfold videocapillaroscopies, with an interval of 10 minutes between them. In this interval, according to randomization, they were subjected to a great-looking breakfast tray (CPIS group) or to nothing (control group). Blood samples were drawn at 3, 9 and 15 minutes after the stimulus presentation to assess insulin and pancreatic polypeptide (PP) levels, which are markers of cephalic phae of digestion. Throughout the exam, microflow and vasomotion were measured by laser-Doppler flowmetry. After the exam insulin iontophoresis was performed. All participants answered a food-frequency questionnaire (FFQ) regarding their dietary intake in the last 12 months. The assessment of microvascular response to CPIS compared differences in functional capillary density (FCD) and microflow in the CPIS and control groups, pre- and post-stimulus and their correlations with changes in insulin and PP. The study of food intake attempted to identify correlations between dietary factors and functional capillary recruitment pre-stimulus in the total sample. After the interval, the CPIS group had significantly increased basal and peak FCD. Insulin variation was not different between groups. PP was significantly increased in the CPIS group and its variation was positively correlated with FCD increase. Resting red blood cell velocity (RBCV) and peak RBCV were also significantly increased and time taken to reach peak RBCV, decreased. The study of food intake revealed positive associations between calcium, selenium and dairy intakes and functional capillary recruitment in the total sample. In conclusion, skin microcirculation is activated during cephalic phase of digestion. Selenium, calcium and dairy intakes are positively associated with capillary recruitment in healthy men.

A terapia celular para doenças cardiovasculares representa uma nova e promissora opção terapêutica, principalmente para a cardiopatia isquêmica. A injeção de células mononucleares de medula óssea (CMMO) pela via intracoronariana (ICO) é a mais estudada em ensaios clínicos. Embora já se tenha documentado efeitos benéficos com essa terapia, dados relativos aos mecanismos de interação entre as células transplantadas e o ambiente microvascular cardíaco são escassos. A avaliação das CMMO na microcirculação miocárdica tem o potencial de esclarecer seus mecanismos de ação, abrindo novas possibilidades terapêuticas. O objetivo do estudo foi descrever e avaliar uma inovadora técnica de injeção ICO direta e visualização in vivo das CMMO na microcirculação miocárdica de pequenos roedores, após um período de isquemia miocárdica global (IMG) seguida de reperfusão, na presença e na ausência da aterosclerose. Materiais e Métodos: A técnica de transplante cardíaco heterotópico cervical (TCHC) em murinos foi modificada com a inserção e fixação de um microcateter conectado a uma seringa, no tronco braquiocefálico do animal doador. IMG foi induzida ocluindo-se a artéria nutridora do enxerto com um microclamp vascular, por 1 hora. As CMMO foram isoladas e marcadas antes da injeção ICO. Microscopia intravital de fluorescência (MIF) foi usada para análise da microcirculação coronariana do ventrículo direito (VD), incluindo arteríolas, capilares e vênulas pós-capilares. Parâmetros de perfusão e permeabilidade microvasculares e as interações entre as CMMO e células endoteliais foram estudados. O impacto da aterosclerose na recuperação, fenótipo e função celular também foi avaliado. Resultado: A MIF permitiu análise detalhada da microcirculação coronariana e da cinética das CMMO injetadas pela via ICO. A IMG afetou a microcirculação, reduzindo a densidade capilar funcional (DCF). Tal redução foi maior na presença de aterosclerose. A principal área de retenção celular foi a rede capilar e não as arteríolas ou vênulas. Nem a presença de isquemia, nem de aterosclerose alterou o número de células retidas. O número de CMMO retidas não aumentou na presença de isquemia, nem de aterosclerose e não se correlacionou com a perfusão microvascular ou inflamação prévios à injeção. Houve forte correlação entre o número de CMMO retidas e a expressão de CXCR4. A injeção de CMMO não afetou negativamente a DCF e a microcirculação. Aterosclerose não alterou o número de CMMO obtidas após isolamento por gradiente de Ficoll. A expressão de CD54 estava reduzida em camundongos ApoE-/-. CMMO de doadores ateroscleróticos geraram um número aumentado de unidades formadoras de colônias de granulócitos e macrófagos. A análise ecocardiográfica da função do VD do enxerto cardíaco cervical foi exeqüível. Conclusões: A injeção ICO direta e a visualização detalhada da cinética das CMMO na microcirculação coronária in vivo por MIF foi possível. A IMG provocou redução da densidade capilar funcional. A retenção das CMMO após injeção ICO se deu nos capilares e provavelmente depende da expressão de CXCR4. / Cell therapy for cardiovascular disease represents a promising new therapeutic option, especially for ischemic heart disease. The intracoronary (ICo) injection of bone marrow mononuclear cells (BMMC) is the most commonly studied rote in clinical trials. Although it has been documented beneficial effects with this therapy, data pertaining the mechanisms of interaction between transplanted cells and cardiac microvascular environment are lacking. Assessment of BMMC in myocardial microcirculation has the potential to clarify its mechanisms of action, opening new therapeutic possibilities. The objective of the study was to describe and to evaluate an innovative technique of direct ICo injection and in vivo visualization of BMMC in myocardial small rodents, after a period of global cardiac ischemia (GMI) and reperfusion, in the presence and absence of atherosclerosis. Materials and Methods: The syngeneic murine cervical heterotopic heart transplantation (CHHT) technique was modified by inserting and fixing a catheter connected to a syringe into the donor animal brachiocephalic trunk. GMI was induced occluding the nutritive artery of the graft for 1 hour. Bone marrow mononuclear cells were isolated and labeled prior to ICo injection. Intravital fluorescence microscopy (IFM) was used for analysis of the coronary microcirculation of the right ventricle (RV), including arterioles, capillaries and venules. Parameters of microvascular perfusion, microvascular permeability and the interactions between the BMMC and endothelial cells were studied. The impact of atherosclerosis on the recovery, phenotype and cellular function was also evaluated. Results: The IFM has allowed detailed analysis of both the coronary microcirculation, as the kinetics of BMMC. The GMI affected microcirculation, reducing the functional capillary density (FCD). This reduction was higher in the presence of atherosclerosis. The main area of cell retention was the capillary network, not the arterioles or venules. The number of BMMC retained was not increased in the presence of ischemia, neither of atherosclerosis and didnt correlate with microvascular perfusion or inflammation before injection. Cell retention was strongly correlated with BMMC expression of CXCR4. BMMC injection didnt affect negatively the FCD and microcirculation. Atherosclerosis didnt change the number of BMMC recovered after Ficoll gradient isolation. BMMC expression of CD54 was reduced in ApoE-/- mice. BMMC of atherosclerotic donors have generated a greater number of colony forming units of granulocytes and macrophages. The RV function analyses of the cardiac graft could be performed by echocardiography. Conclusions: The direct ICo injection and detailed visualization of BMMC kinetics in the coronary microcirculation in vivo was possible. The IRCG caused reduction of functional capillary density. Retention BMMC after ICo injection occurred in the capillaries and probably depends on the expression of CXCR4.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A obesidade atinge proporções epidêmicas em países industrializados e está relacionada a uma série de doenças metabólicas e circulatórias. Nesse contexto, a atividade física, tratamento não farmacológico da obesidade, acessível a diversas populações e está relacionada com a redução do risco cardiovasvascular mesmo. O objetivo deste trabalho foi avaliar, após mudança ou não da dieta, associação ou não a um programa de treinamento aeróbico (PTA) durante 8 semanas, a possível reversibilidade dos danos causados por uma dieta hiperlipídica por 12 semanas. Para tal, 120 hamsters machos da espécie Mesocricetus auratus, com massa corporal de 60 g, foram distribuídos em quatro grupos, cada um subdividido em três subgrupos, com dez animais para diferentes análises. Os grupos Obeso Controle (OBC) e Obeso Exercitado (OBEX) receberam a ração hiperlipídica por 20 semanas, com adição do PTA ao grupo OBEX nas últimas 8 semanas. Os Obeso Ração Padrão (OBRP) e Obeso Ração Padrão/Exercício (OBRP/EX) tiveram a ração modificada para comercial padrão e adição do PTA ao grupo OBRP/EX após as 12 semanas iniciais. Para as análises microcirculatórias, a bolsa da bochecha foi usada para determinação do número máximo de extravasamentos induzidos por 30 min de isquemia seguida de reperfusão e da reatividade microvascular após a aplicação tópica de acetilcolina e nitroprussiato de sódio. No sangue coletado foi avaliado o perfil lipídico, glicemias quinzenais e leptina. As expressões de eNOS e iNOS foram determinadas na aorta por imunoblotting e a composição corporal avaliada nos tecidos adiposos visceral, urogenital e retroperitoneal, retirados no dia do experimento. Os resultados foram analisados com os métodos o teste estatístico de análise de variância (One Way ANOVA - Teste de Kruskal-Wallis), seguido pelo pós-teste de Dunn. Resultados mostram que a modificação dietética, associada ou não ao PTA, reduziu significativamente a massa corporal (p<0,0001), comprimento naso-anal (p=0,0011) e tecido adiposo (visceral [p<0,0001], urogenital [p=0.0004] e retroperitoneal [p= 0,0083]). Nas análises sanguíneas não foram encontradas diferenças com relação ao perfil lipídico e glicemia, já na leptina houve uma redução significativa (p=0,0039). A análise da reatividade microvascular mostrou melhora significativa na vasodilatação endotélio-dependente nos grupos submetidos à modificação dietética associada ou não ao PTA. Nas medidas de permeabilidade a macromoléculas houve redução significativa no número de extravasamentos nos grupos submetidos à modificação dietética associada ou não ao PTA, (5 min [p= 0,0207] e 10 min [p= 0,0057]). Houve um aumento na expressão de eNOS nos grupos submetidos à modificação dietética associada ou não ao PTA, em comparação ao grupo OBC (p=0,0352). Os resultados mostraram que a modificação dietética, associada ao protocolo de treinamento aeróbico melhora a vasodilatação endotélio-dependente, aumenta a expressão da óxido nítrico sintase endotelial e reduz o número de extravasamentos induzidos por isquemia e reperfusão, mesmo sem melhoras nos marcadores bioquímicos tradicionais como glicemia e perfil lipídico. / Obesity is a growing public health problem reaching epidemic proportions in industrialized countries and an independent risk to metabolic and circulatory diseases. Physical activity is seen as a non-pharmacological treatment to obesity and its co-morbities, accessible to the population. Physical benefits are not necessarily related to adiposity loss but on improvement of vascular hemodynamic. The objective of this work was to evaluate if changes on diet associated or not to an aerobic training program (ATP) for 8 weeks could counteract damages on obese hamsters, elicited by high fat chow given during 12 weeks. One hundred and twenty male hamsters (Mesocricetus auratus) with body mass around 60g were distributed into four groups, subdivided into three subgroups with ten animals each for different analysis. Obese Control (OBC) and Obese + Exercise (OBEX) groups received high fat chow for 20 weeks, being the last one combined to AET. Groups Obese + Standard Chow (OBSC) and Obese + Standard Chow/Exercise (OBSC/EX) received high fat chow for 12 weeks, returned to the standard chow, being the last one combined to AET. The cheek pouch preparation was used to evaluate the maximum number of extravasations induced by 30 min ischemia followed by reperfusion and microvascular reactivity in response to topical applications of acetylcholine and sodium nitroprusside. Blood was collected for lipid profile, biweekly glycemia and leptin. On the day of the experiment, the aorta was excised for immunoblotting of eNOS and iNOS and the body composition was determined by collection of different adipose tissues. For statistical analysis Kruskal Wallis ANOVA for transversal analysis, followed by the Dunn post test. Results have shown that dietary modification associated or not to AET significantly reduced body mass (p<0.0001), naso-anal length (p=0.0011) and the amount of adipose tissues (visceral [p<0.0001], urogenital [p=0.0004] and retroperitoneal [p=0.0083]) in treated groups. Blood analysis did not show any differences between groups in relation to lipid profile and glycemia. Leptin had a significant reduction in all treated groups (p=0.0039). Microcirculatory analysis showed that groups subjected to dietary modification associated or not to AET had better endothelium-dependent responses after topical application of acetylcholine, in all concentrations (10-8M [p=0.0001], 10-6M [p<0.0001] and 10-4M [p<0.0001]). For ischemia/reperfusion, animals subjected to AET associated or not to dietary modification had significantly lower number of leaks (5 min [p=0.0207] and 10 min [p=0.0057]). Immunoblotting assays of eNOS showed linear improvement after AET associated to dietary modification in comparison to obese control animals (p=0.0352). Results have shown that the dietary modification and its association to an aerobic exercise training, could detect substantial improvement on the endothelial response and reduction in the number of leaks on ischemia/reperfusion. These modifications occurred without any significant changes on biochemical markers.

Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos sistêmicos, microcirculatórios assim como mudanças na expressão gênica renal, causados pela ação da noradrenalina, nitropussiato de sódio e levosimendan no tratamento do choque hemorrágico. Nesse estudo foi utilizado o modelo da câmara dorsal.Os animais foram sujeitos a choque hemorrágico e após, foram aleatoriamente divididos em quatro grupos. Os grupos foram: CTRL, recebeu apenas ringer lactato; NPS recebeu ringer lactato com nitroprussiato de sódio; NA recebeu ringer lactato com noradrenalina e LEV, recebeu ringer lactato com levosimendan. Foram avaliados parâmetros sistêmicos, assim como parâmetros microcirculatórios (comparados como percentual em relação ao momento basal). Além disso, foi avaliada a expressão gênica renal de eNOS, HIF-1&#945;, ICAM e caspase-3. O grupo NPS apresentou uma recuperação sustentada do diâmetro arteriolar ( 89 12 %) e DCF (125 114 %) ao final do tratamento. Houve recuperação da velocidade de hemácias nos grupos CTRL e NPS. Não houve diferença em relação ao número de leucócitos aderidos e/ou rolantes ao final do tratamento. A expressão gênica renal de eNOS e caspase-3 entre os grupos não apontou diferenças, entretanto houve diferença significativa na expressão renal de HIF- 1&#945; no grupo NA (0,65 0,08, UA) em relação ao grupo CTRL (0,44 0,06, UA) e LEV (0,45 0,06, UA). Todos os grupos tiveram uma maior expressão de ICAM (0,65 0,12; 0,7 0,12; 0,069 0,06; 0,65 0,12, UA) em relação ao grupo SHAM (0,50 0,05, UA). Ringer lactato puro ou associado com noradrenalina ou levosimendan não foram suficientes para recuperar e sustentar os parâmetros microvasculares. O tratamento com nitroprussiato de sódio foi o que apresentou os melhores resultados, com recuperação dos diâmetros arteriolar, da DCF e velocidade de hemácias. / This work aimed at evaluating the systemic and microcirculatory effects, as well as changes in renal gene expression elicited by noradrenalin, sodium nitroprusside and levosimendan associated to volume resuscitation in the treatment of hemorrhagic shock. The dorsal chamber model was used in this study. Animals were subjected to hemorrhagic shock and after that, were randomly distributed between four groups. Groups were: CTRL, received only lactated ringer's solution; NPS received lactated ringer's solution with sodium nitroprusside; NA received lactated ringer's solution with noradrenaline and LEV received lactated ringer's with levosimendan. Systemic and microcirculatory parameters were evaluated ( as percent change compared to baseline). Furthermore, renal genic expression of eNOS, HIF-1a and caspase-3 were also evaluated. NPS group presented a sustained recovery of arteriolar diameter ( 89 12 %) and FCD (125 114 %) at the end of the treatment. There was a red blood cell velocity recovery in CTRL and NPS groups. There was no difference regarding adhered or rolling leukocytes at the end of the treatment. eNOS and caspase-3 renal genic expression between groups showed no differences, however, there was a significant difference in renal genic expression of HIF-1&#945; in NA group (0,65 0,08, AU) compared to CTRL (0,44 0,06, AU) e LEV (0,45 0,06, AU). All groups had a higher expression of ICAM (0,65 0,12; 0,7 0,12; 0,069 0,06; 0,65 0,12, AU) compared to the SHAM group (0,50 0,05, AU). Ringer's lactate solution associated or not to noradrenaline or levosimendan were not enough to recover and sustain microvascular parameters. Treatment with sodium nitroprusside presented the best results, with sustained arteriolar diameter, FCD and RBCV recoveries.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A obesidade atinge proporções epidêmicas em países industrializados e está relacionada a uma série de doenças metabólicas e circulatórias. Nesse contexto, a atividade física, tratamento não farmacológico da obesidade, acessível a diversas populações e está relacionada com a redução do risco cardiovasvascular mesmo. O objetivo deste trabalho foi avaliar, após mudança ou não da dieta, associação ou não a um programa de treinamento aeróbico (PTA) durante 8 semanas, a possível reversibilidade dos danos causados por uma dieta hiperlipídica por 12 semanas. Para tal, 120 hamsters machos da espécie Mesocricetus auratus, com massa corporal de 60 g, foram distribuídos em quatro grupos, cada um subdividido em três subgrupos, com dez animais para diferentes análises. Os grupos Obeso Controle (OBC) e Obeso Exercitado (OBEX) receberam a ração hiperlipídica por 20 semanas, com adição do PTA ao grupo OBEX nas últimas 8 semanas. Os Obeso Ração Padrão (OBRP) e Obeso Ração Padrão/Exercício (OBRP/EX) tiveram a ração modificada para comercial padrão e adição do PTA ao grupo OBRP/EX após as 12 semanas iniciais. Para as análises microcirculatórias, a bolsa da bochecha foi usada para determinação do número máximo de extravasamentos induzidos por 30 min de isquemia seguida de reperfusão e da reatividade microvascular após a aplicação tópica de acetilcolina e nitroprussiato de sódio. No sangue coletado foi avaliado o perfil lipídico, glicemias quinzenais e leptina. As expressões de eNOS e iNOS foram determinadas na aorta por imunoblotting e a composição corporal avaliada nos tecidos adiposos visceral, urogenital e retroperitoneal, retirados no dia do experimento. Os resultados foram analisados com os métodos o teste estatístico de análise de variância (One Way ANOVA - Teste de Kruskal-Wallis), seguido pelo pós-teste de Dunn. Resultados mostram que a modificação dietética, associada ou não ao PTA, reduziu significativamente a massa corporal (p<0,0001), comprimento naso-anal (p=0,0011) e tecido adiposo (visceral [p<0,0001], urogenital [p=0.0004] e retroperitoneal [p= 0,0083]). Nas análises sanguíneas não foram encontradas diferenças com relação ao perfil lipídico e glicemia, já na leptina houve uma redução significativa (p=0,0039). A análise da reatividade microvascular mostrou melhora significativa na vasodilatação endotélio-dependente nos grupos submetidos à modificação dietética associada ou não ao PTA. Nas medidas de permeabilidade a macromoléculas houve redução significativa no número de extravasamentos nos grupos submetidos à modificação dietética associada ou não ao PTA, (5 min [p= 0,0207] e 10 min [p= 0,0057]). Houve um aumento na expressão de eNOS nos grupos submetidos à modificação dietética associada ou não ao PTA, em comparação ao grupo OBC (p=0,0352). Os resultados mostraram que a modificação dietética, associada ao protocolo de treinamento aeróbico melhora a vasodilatação endotélio-dependente, aumenta a expressão da óxido nítrico sintase endotelial e reduz o número de extravasamentos induzidos por isquemia e reperfusão, mesmo sem melhoras nos marcadores bioquímicos tradicionais como glicemia e perfil lipídico. / Obesity is a growing public health problem reaching epidemic proportions in industrialized countries and an independent risk to metabolic and circulatory diseases. Physical activity is seen as a non-pharmacological treatment to obesity and its co-morbities, accessible to the population. Physical benefits are not necessarily related to adiposity loss but on improvement of vascular hemodynamic. The objective of this work was to evaluate if changes on diet associated or not to an aerobic training program (ATP) for 8 weeks could counteract damages on obese hamsters, elicited by high fat chow given during 12 weeks. One hundred and twenty male hamsters (Mesocricetus auratus) with body mass around 60g were distributed into four groups, subdivided into three subgroups with ten animals each for different analysis. Obese Control (OBC) and Obese + Exercise (OBEX) groups received high fat chow for 20 weeks, being the last one combined to AET. Groups Obese + Standard Chow (OBSC) and Obese + Standard Chow/Exercise (OBSC/EX) received high fat chow for 12 weeks, returned to the standard chow, being the last one combined to AET. The cheek pouch preparation was used to evaluate the maximum number of extravasations induced by 30 min ischemia followed by reperfusion and microvascular reactivity in response to topical applications of acetylcholine and sodium nitroprusside. Blood was collected for lipid profile, biweekly glycemia and leptin. On the day of the experiment, the aorta was excised for immunoblotting of eNOS and iNOS and the body composition was determined by collection of different adipose tissues. For statistical analysis Kruskal Wallis ANOVA for transversal analysis, followed by the Dunn post test. Results have shown that dietary modification associated or not to AET significantly reduced body mass (p<0.0001), naso-anal length (p=0.0011) and the amount of adipose tissues (visceral [p<0.0001], urogenital [p=0.0004] and retroperitoneal [p=0.0083]) in treated groups. Blood analysis did not show any differences between groups in relation to lipid profile and glycemia. Leptin had a significant reduction in all treated groups (p=0.0039). Microcirculatory analysis showed that groups subjected to dietary modification associated or not to AET had better endothelium-dependent responses after topical application of acetylcholine, in all concentrations (10-8M [p=0.0001], 10-6M [p<0.0001] and 10-4M [p<0.0001]). For ischemia/reperfusion, animals subjected to AET associated or not to dietary modification had significantly lower number of leaks (5 min [p=0.0207] and 10 min [p=0.0057]). Immunoblotting assays of eNOS showed linear improvement after AET associated to dietary modification in comparison to obese control animals (p=0.0352). Results have shown that the dietary modification and its association to an aerobic exercise training, could detect substantial improvement on the endothelial response and reduction in the number of leaks on ischemia/reperfusion. These modifications occurred without any significant changes on biochemical markers.