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Production of isopropanol, butanol and ethanol by metabolic engineered Clostridia / Production of isopropanol, butanol and ethanol by metabolic engineered Clostridia

Collas, Florent 14 November 2012 (has links)
Au cours des dernières décennies, la fermentation IBE (isopropanol, butanol and éthanol) a connu un regain d'intérêt en vue de la production de carburants ou de composés chimiques à partir de matériaux renouvelables. Dans cette étude, nous avons étudié la production d'IBE avec le producteur naturel Clostridium beijerinckii NRRL B593 et avec des souches modifiées de Clostridium. acetobutylicum ATCC 824. En culture discontinue, la souche C. beijerinckii NRRL B593 excrétait 13.2 g/L d'IBE (dont 4,5 g/L d'isopropanol). Afin d'améliorer la production d'IBE, le gène codant pour l'alcool déshydrogénase secondaire (s-Adh) de NRRL B593, ainsi que différentes combinaisons des gènes des enzymes actives de la conversion de l'acétoacétyl-CoA en acétone, c.-à-d. l'acétoacétyl-CoA acétate/butyrate transférase (ctfA et ctfB) et l'acétoacétate décarboxylase (adc), ont été exprimées dans la souche productrice d'ABE (acétone, butanol éthanol), C. acetobutylicum ATCC 824. Les résultats montrent que la sur-expression des gènes ctfA et ctfB augmentait significativement la productivité et les concentrations finales en IBE tandis que la surexpression du gène adc n'avait qu'un effet limité. Cultivée en discontinu, la meilleure souche, exprimant les gènes adh, ctfA, ctfB et adc a produit 24.4 g/L d'IBE dont 8.8 g/L d'isopropanol avec une productivité de 0.7 g/L h. Cultivée en mode continu à un taux de dilution de 0.1 h-1, la productivité en IBE a été portée à 1.7 g/L h. Puisque le mélange IBE est considéré comme un additif carburant de qualité, les transformants obtenus constituent une avancée réelle vers le développement d'un procédé IBE industriel de production de biocarburants. / Over the past decades, the IBE fermentation (isopropanol, butanol and ethanol) has received a renew interest for the production of fuels or biochemicals from renewable materials. In the present study, we have investigated the IBE fermentation using the natural producer C. beijerinckii NRRL B593 and genetically-modified strains of Clostridium acetobutylicum ATCC 824. In batch culture, C. beijerinckii NRRL B593 was found to excrete 13.2 g/L IBE of which 4.5 g/L was isopropanol. To increase IBE production, the gene coding the secondary alcohol dehydrogenase (s-Adh) of C beijerinckii NRRL B593 and different combinations of genes coding for enzymes active in acetoacetyl-CoA to acetone conversion i.e. acetoacetate decarboxylase (adc) and acetoacetyl-CoA: acetate/butyrate: CoA transferase subunits A and B (ctfA and ctfB) were expressed in the ABE (acetone, butanol ethanol) producer C. acetobutylicum ATCC 824. Results showed that the overexpression of the ctfA and ctfB genes significantly increased both speed and extent of the IBE production while the overexpression of the adc gene had only a little effect. In batch culture, the best mutant (expressing adh, ctfA, ctfB and adc) produced 24.4 g/L IBE (of which 8.8 g/L was isopropanol) and displayed an IBE productivity of 0.7 g/L h. Cultivated in continuous mode at the dilution rate of 0.1 h-1, IBE productivity was increased to 1.7 g/L h IBE. As the IBE mix has been considered as a valuable fuel additive, the transformants obtained are a real step forward towards the development of an industrial IBE process for biofuel production.
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Enjeux éthiques des modifications génétiques humaines à visées mélioratives : critique à partir de Jürgen Habermas et Hans Jonas

Facal, Christophe 05 1900 (has links)
Ce mémoire porte sur l’éthique des modifications génétiques à visées mélioratives. Les modifications génétiques à visées mélioratives sont l’une des technologies les plus étudiées dans le mouvement transhumaniste. Nous présenterons la défense transhumaniste de cette technologie à travers l’ouvrage « From Chance to Choice », qui propose une défense de nature politique, faisant remarquer que cette technologie peut venir offrir un outil précieux aux théories de la justice égalitariste. Cette défense est cependant dépourvue d’un volet éthique, puisque les éthiques classiques sont impuissantes à se saisir de ce phénomène nouveau de manière intelligible. Afin de fournir un cadre de régulation éthique de ces modifications génétiques, nous nous tournerons vers l’éthique de la discussion de Jürgen Habermas et l’éthique de la responsabilité de Hans Jonas. Nous montrerons dans un premier temps que l’éthique de la discussion, selon laquelle une norme morale est valide si elle peut espérer recevoir le consentement des sujets moraux impliqués à la suite d’un débat argumenté, permet de légitimer sur un plan éthique les modifications génétiques car il est possible d’espérer le consentement à venir du sujet de la modification génétique. Cependant, ce consentement ne peut être postulé que si la réflexion sur la modification à effectuer est effectuée sous le signe de l’éthique de la responsabilité, présentée par la suite, selon laquelle un tel choix doit être effectué dans un processus nommé « heuristique de la peur », soit avec en ayant en tête les effets lointains de notre action. / This memoir studies the ethical implications of human genetic modification. Human genetic enhancement is one of the most studied technologies by the transhumanist movement. We will present the transhumanist defence of genetic modification in the book “From Chance to Choice”, which defends this technology on political grounds, due to its efficiency in helping carry out egalitarian theories of justice. This defense is deprived of a substantial ethical aspect. More generally, classical ethical theories seem to be inadequate to grasp the issues of human genetic modification. In order to offer an ethical framework of regulation of this technology, we will study Jürgen Habermas’s discussion ethics and Hans Jonas’s responsibility ethics. We will first show that discussions’ ethics, according to which a moral norm is valid if and only if every moral subject affected by it can agree to it through an argumentative debate, ethically legitimates genetical improvements because we can hoe for the future consent of the modified person. This being said, this consent can only be postulated if the ethical reasoning is aided by responsibilities ethics, which is then presented, according to which a choice such as a genetic modification has to be made under the guidance of the heuristic of fear, in other words, while bearing in mind the long-term effects of our actions.
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Liberté de la recherche et modification du génome humain : le cas du transfert d'ooplasme

Fortin, Sabrina 04 1900 (has links)
"Mémoire présenté à la faculté des études supérieures en vue de l'obtention du grade de maîtrise en droit (LL.M.) option droit, biotechnologies et société" / Le transfert d'ooplasme est une nouvelle technique de reproduction (NTR) qUI bouscule les fondements utilisés pour encadrer les modifications génétiques chez l'humain. Par l'intervention dans le matériel génétique contenu dans les mitochondries des cellules, ce nouveau procédé implique la création d'enfant issus du matériel génétique de trois parents. L'exemple est intéressant en ce qu'il permet à la fois d'analyser une situation spécifique aux enjeux éthiques et sociaux considérables, mais également de poser une réflexion plus générale sur les modes d'encadrement des NTR et leur impact sur la liberté de la recherche scientifique. Les théories sociologiques issues de l'analyse de la technoscience permettent de démontrer d'une part un enthousiasme pour la recherche et d'autre part les craintes de sa dérive. L'hypothèse du pluralisme normatif, issue de ces craintes et de l'incapacité du droit à parvenir à les calmer, permet de mettre en lumière la multiplication des normes destinées à encadrer la recherche scientifique. Cette pléthore de normes est responsable d'une confusion dans l'interprétation des différents principes qui les justifient (dignité humaine, innocuité, bienfait thérapeutique), d'autant plus qu'elles doivent être conciliées entre les niveaux international, régional et national. Cette réflexion éthique sur la limitation de la liberté de la recherche par l'encadrement des NTR permet la démonstration des véritables enjeux qu'impliquent la génétique de la reproduction et propose un regard neuf sur la façon de l'envisager. / Ooplasm transfer is a new reproductive technique that jostles the basis of human gene modification. This new fertility treatment involved the transplantation of genetic material included in mitochondrion, and results in new-born with DNA from three different persons. This technique brings important sociological and ethical dilemmas. It also raises a critical discussion on how new reproductive techniques are regulated and how that regulation limits the freedom of research. Sociological theories about technosciences have shown that there is a great enthusiasm for research in society, but also great concerns on its excess. Those concerns have generated a multiplication of norms in order to control possible abuses of researchers. The multiplication of norms limits not only the freedom of research, but is also responsible for the confusion in interpreting the principles that justify them (human dignity, innocuity, health benefits), especial1y when these principles have to be reconciled at the national, regional and international level. This study is an ethical reflection on limits imposed on the freedom of research in the new reproductive genetics area. By using ooplasmic transfer as an example, this work addresses main issues of reproductive genetic and proposes a new way of understanding and considering genetics in the socio-economical context of technoscientific societies.
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Liberté de la recherche et modification du génome humain : le cas du transfert d'ooplasme

Fortin, Sabrina 04 1900 (has links)
Le transfert d'ooplasme est une nouvelle technique de reproduction (NTR) qUI bouscule les fondements utilisés pour encadrer les modifications génétiques chez l'humain. Par l'intervention dans le matériel génétique contenu dans les mitochondries des cellules, ce nouveau procédé implique la création d'enfant issus du matériel génétique de trois parents. L'exemple est intéressant en ce qu'il permet à la fois d'analyser une situation spécifique aux enjeux éthiques et sociaux considérables, mais également de poser une réflexion plus générale sur les modes d'encadrement des NTR et leur impact sur la liberté de la recherche scientifique. Les théories sociologiques issues de l'analyse de la technoscience permettent de démontrer d'une part un enthousiasme pour la recherche et d'autre part les craintes de sa dérive. L'hypothèse du pluralisme normatif, issue de ces craintes et de l'incapacité du droit à parvenir à les calmer, permet de mettre en lumière la multiplication des normes destinées à encadrer la recherche scientifique. Cette pléthore de normes est responsable d'une confusion dans l'interprétation des différents principes qui les justifient (dignité humaine, innocuité, bienfait thérapeutique), d'autant plus qu'elles doivent être conciliées entre les niveaux international, régional et national. Cette réflexion éthique sur la limitation de la liberté de la recherche par l'encadrement des NTR permet la démonstration des véritables enjeux qu'impliquent la génétique de la reproduction et propose un regard neuf sur la façon de l'envisager. / Ooplasm transfer is a new reproductive technique that jostles the basis of human gene modification. This new fertility treatment involved the transplantation of genetic material included in mitochondrion, and results in new-born with DNA from three different persons. This technique brings important sociological and ethical dilemmas. It also raises a critical discussion on how new reproductive techniques are regulated and how that regulation limits the freedom of research. Sociological theories about technosciences have shown that there is a great enthusiasm for research in society, but also great concerns on its excess. Those concerns have generated a multiplication of norms in order to control possible abuses of researchers. The multiplication of norms limits not only the freedom of research, but is also responsible for the confusion in interpreting the principles that justify them (human dignity, innocuity, health benefits), especial1y when these principles have to be reconciled at the national, regional and international level. This study is an ethical reflection on limits imposed on the freedom of research in the new reproductive genetics area. By using ooplasmic transfer as an example, this work addresses main issues of reproductive genetic and proposes a new way of understanding and considering genetics in the socio-economical context of technoscientific societies. / "Mémoire présenté à la faculté des études supérieures en vue de l'obtention du grade de maîtrise en droit (LL.M.) option droit, biotechnologies et société"

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