Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:43:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_JulianaCastro_M.pdf: 5278625 bytes, checksum: 63e213bed61e034d07b8ef348696a065 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: TA ciclosporina A (CsA) possui potentes propriedades imunossupressivas e tem sido amplamente usada na terapia de transplantes de órgãos, aumentando as taxas de sobrevivência dos enxertos, e no tratamento de algumas doenças auto-imunes. Apesar de ser um importante medicamento, diversas reações colaterais são verificadas, entre elas a toxicidade testicular, levando à infertilidade masculina. Heteropterys aphrodisiaca é uma planta com indicações de estimulante e potente afrodisíaco, que aumenta o peso corporal e testicular e o volume das células de Leydig nos testículos de ratos adultos. Assim o efeito da associação dessas drogas foi estudado em ratos Wistar em idade reprodutiva, com avaliação da morfometria, estrutura e ultra-estrutura testicular. Foram utilizados 30 ratos divididos em 5 grupos: I- controle; II- tratamento com CsA; III- concomitante uso de CsA e H. aphrodisiaca; IV- pré-tratamento com H. aphrodisiaca por 30 dias, seguido de CsA por 26 dias; V- tratamento com H. aphrodisiaca. CsA foi administrada na dose de 15 mg/kg/dia e H. aphrodisiaca na dose de 0.5 ml de infusão preparada com 25g de raízes secas/100 ml água fervente. Os tratamentos foram administrados diariamente por gavagem, durante 56 dias. Aumento do peso corporal foi observado em todos os grupos, mas os grupos II e III tiveram menor ganho de peso. O peso dos testículos e dos órgãos sexuais acessórios, assim como a proporção e o volume dos compartimentos tubular e intersticial não alteraram nos grupos tratados. Com a administração de CsA houve aumento na proporção de tecido conjuntivo e redução na proporção de células de Leydig que, além disso, eram menores e com citoplasma mais denso que as células dos animais de outros grupos tratados. Por outro lado, a infusão de H. aphrodisiaca resultou em aumento do volume nuclear das células de Leydig. Os níveis de testosterona plasmáticos, o número de células de Leydig por testículo e por grama de testículo aumentou significativamente nos animais do grupo III. CsA causou degeneração das células germinativas, vacuolização nas células de Sertoli, espermátides arredondadas anormais e atrofia das organelas envolvidas na síntese de esteróides nas células de Leydig. H. aphrodisiaca causou vacuolização nas células de Sertoli, perda do contato e espaçamento entre as células germinativas e aumento de retículo endoplasmático liso e mitocôndrias nas células de Leydig. O tratamento concomitante e sequencial com CsA e H. aphrodisiaca foi efetivo em manter a ultra-estrutura das células de Leydig. Nesses tratamentos, as alterações observadas no epitélio seminífero foram a combinação das modificações observadas em cada tratamento separadamente. Entretanto, H. aphrodisiaca exerceu um efeito protetor no epitélio germinativo, uma vez que as modificações encontradas nesses grupos foram menos severas em relação ao grupo tratado somente com CsA / Abstract: Cyclosporine A (CsA) has potent immunosuppressive properties and it has markedly improved the ability of transplant patients to survive grafts and is also used in some autoimmune diseases. However, the drug has several side effects, including testicular toxicity, leading to male infertility (and temporary impotence?). Stimulant and aphrodisiac properties has been attributed to the plant, Heteropterys aphrodisiaca. Data from other experiments suggests that the root extract can increase body and testicular weight and the volume of Leydig cells in rat testis. Thus, the present work was undertaken to study the association of the drug and the medicinal herb in Wistar rats, evaluating testicular morphometry, structure and ultrastructure. Thirty adult rats were used, divided into five groups: I- control; II¿ CsA; III¿ simultaneous use of CsA and H. aphrodisiaca; IV- H. aphrodisiaca for 30 days and CsA sequentially for another 26 days; V- H. aphrodisiaca. CsA was administered at a dose of 15 mg/kg/day and/or H. aphrodisiaca at a dose of 0.5 ml of the infusion prepared with 25g of roots/100ml boiling water, daily by gavage, during 56 days. Increased body weight was observed for all groups, but the animals that received CsA for 56 days showed the smallest body weight gain. The testis and accessory sex organs weights were unchanged. The volume and volumetric proportion of seminiferous tubules and interstitial compartments did not alter in all treated groups. Morphometry showed increased connective tissue volumetric proportion and decreased Leydig cell volumetric proportion in CsA-treated rats. The Leydig cells of CsA-treated animals were smaller and more dense than other groups. On the other hand, the H. aphrodisiaca infusion resulted in an increase in Leydig cell nuclear volume. The plasma testosterone levels and number of Leydig cells per testis increased significantly in group III. Using transmission electron microscopy, it was possible to ascertain that CsA caused germ cell degeneration, Sertoli cell vacuolization, abnormal round spermatids and atrophy of the organelles involved in steroid synthesis in Leydig cells. H. aphrodisiaca caused Sertoli cell vacuolization, loss of germ cell attachment and expanded intercellular spaces between germ cells and Leydig cells with more mitochondria and smooth endoplasmic reticulum. The simultaneous and sequential treatment with H. aphrodisiaca and CsA was effective in maintaining the Leydig cell ultrastructure. In these treatments, the seminiferous epithelium alterations were a combination of the modifications observed for each isolated treatment. However it can be stated that H. aphrodisiaca had a protective effect on the testicular tissue, since less severe modifications were found for this group in relation to the rats that received only CsA / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Predes_FabriciadeSouza_M.pdf: 1559316 bytes, checksum: e206924da33f15ad0daf61b7e2a85726 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: o cádmio (Cd) é um dos poluentes ambientais importantes que causam danos a vários órgãos e tecidos, incluindo os testículos. O objetivo deste trabalho é investigar o efeito protetor e curativo do extrato de G biloba (GbE) nos testículos de ratos adultos Wistar tratados com dose única de Cd. Trinta animais foram divididos aleatoriamente em 5 grupos que receberam: Grupo 1: água por 56 dias ( controle); Grupo 2: GbE por 56 dias; Grupo 3: CdClz (dose única) e água por 56 dias; Grupo 4: CdCh (dose única) e GbE por 56 dias (Cd + GbE); Grupo 5: pré-tratamento com GbE por 30 dias e CdCh no 31° dia (GbE-Cd). O GbE foi administrado diariamente na dose de 100 mg/Kg de peso corporal por gavagem. O cloreto de cádmio (CdCh) foi injetado intraperitonealmente em dose única de 3 umol/Kg de corporal. Após a coleta de sangue, os ratos foram fixados por perfusão com Kamovsky modificado. Fragmentos de testículo incluídos em metacrilato foram secionados na espessura de 3um e corados com azul de toluidina/borato de sódio 1% para estudo morfométrico em miCroscopia óptica. Para observação em microscópio eletrônico de transmissão fragmentos de testículo foram refixados com tetróxido de ósmio 1 % no mesmo tampão a 4°C, desidratados em acetona e incluídos em Epoxy. Cortes ultrafinos foram feitos com navalha de diamante e contrastados com acetato do uranila 2% e citrato de chumbo 2%. Os níveis de testosterona plasmática obtida por RIA não foram alterados neste estudo. Não houve alteração do peso corporal e testicular, do epidídimo e das glândulas acessórias, vesícula seminal e próstata além do índice gonadossomático. A proporção volumétrica e o volume absoluto dos componentes testiculares não alteraram após os tratamentos. O grupo 3 que recebeu somente Cd teve redução significativa no volume individual das células de Leydig. Entretanto, animais que receberam GbE como pré tratamento ou GbE após a dose de Cd não apresentaram esta redução. Isto sugere que GbE é eficaz em manter o volume das células de Leydig em ratos tratados com Cd. O número de células de Leydig não variou nos grupos estudados. Em microscopia eletrônica foram visíveis os efeitos do Cd nos testículos. Nas células de Sertoli foram observados vacuolização citoplasmática, alterações nas junções celulares e acúmulo de gotículas de lipídio e corpos residuais. Espaços intercelulares expandidos foram observados no epitélio germinativo. Cromatina irregularmente condensada e acrossoma anormal foram encontradas em espermátides alongadas. Algumas células endoteliais sofreram alterações morfológicas no núcleo e perderam algumas junções. As células de Leydig mostraram o citoplasma denso com organelas, como retículo endoplasmático liso e mitocôndrias, mal definidas. A administração de GbE após a dose de Cd mostrou-se eficaz em manter a ultraestrutura normal dos testículos do rato. Diferentemente, o pré-tratamento com GbE não foi eficaz em proteger o epitélio seminífero da toxicidade do Cd. Entretanto, as células de Leydig apresentaram morfologia normal com o retículo endoplasmático liso bem definido e numerosas mitocôndrias. Conclui-se que a administração de GbE por 56 dias após dose única de 3 umol de CdCh é capaz de proteger todo o parênquima testicular dos efeitos tóxicos do Cd. Entretanto, o pré-tratamento com GbE não protegeu o epitélio seminífero, mas foi eficaz em proteger as células de Leydig dos efeitos tóxicos do cádmio / Abstract: Cadmium is one of the important environmental pollutants that affect various organs and tissues, including the testis. The aim of this study was to investigate the protective and curative effect of G. biloba extract (GbE) on cadmium-induced testis damage of adult Wistar rats. Thirty rats were randomly divided in five groups that consisted in :Group 1: water for 56 days (control); Group 2: GbE for 56 days; Group 3: CdClz (single dose) and water for 56 days; Group 4: CdCh (single dose) and GbE for 56 days (Cd + GbE); Group 5: pre-treatment with GbE for 30 days and CdCh on the thirty-first day (GbE-+Cd).The GbE was administered daily in a dose of 100 mg/Kg BW by gavage. The cadmium chloride (CdCh) was injected i.p. in a single dosage of 3 umol/Kg BW. After blood collection, rats were fixed by whole-body perfusion in Karnovsky fixative. Methacrylate-embedded testis fi-agments were sectioned at 3um thickness and stained with toluidine blue/sodium borate 1 % for morphometric study in the light microscope. For electron microscopy transmission examination, testis fragments were post-fixed with 1 % osmium tetroxide in the same buffer at 4°C, dehydrated in acetone and embedded in epoxy resin. Ultrathin sections were cut with a diamond knife and stained with 2% uranyl acetate and 2% lead citrate prior to observation. Plasma testosterone values obtained by the RIA method were not modified in this study. No change occurred in the average of corporal and testicular weight, gonadosomatic index, epididymis and accessory glands weight. The volumetric proportion and absolute volume oftesticular componenfs did not change after the treatments. Group 3 had a significant reduction in Leydig cell individual volume. However, animals that received GbE as pre-treatment or GbE after a cadmium dose did not present this reduction of Leydig cell volume. This suggests that GbE is effective in maintaining Leydig cell volume in cadmium-damaged testis. The number ofLeydig cells did not vary in any group studied. In electron microscopy observations, this Cd dose caused visible alterations in the testis. Cytoplasmic vacuolation, disruption oftight junctions, accumulation oflipid droplets and residual bodies were observed in Sertoli cells. Expanded intracellular spaces were observed between the tubule cells. Irregularly condensed chromatin and abnormal acrosomes were found in late spermatids. Endothelium was affected, showing some disruption of tight junetions and morphologieally altered nuclei. Leydig eells showed a dense eytoplasm with poorly defined organelles sueh as SER and mitoehondria. The administration of GbE after the Cd dose is effeetive in maintaining almost normal rat testis ultrastructure. However, GbE pretreatment was not able to protect testis from Cd toxicity, since toxicity signals were observed in the seminiferous epithelium. However, Leydig cells showed the normal morphology with well-defined and abundant smooth endoplasmic reticulum and mitochondria. It can be concluded that, GbE administration for 56 days after a single dose of 3 umol of CdCh could protect the testicular parenchyma from Cd toxic effects. However, GbE pretreatment did not protect the seminiferous epithelium, although it was effective in protecting Leydig cells from Cd toxic effeets / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

A incidência de osteoartose, ou degeneração da cartilagem articular aumenta na pós-menopausa, condição esta relacionada à deficiência de estrógeno. Por outro lado, tem sido demonstrado que a atividade física regular e moderada tem efeitos benéficos sobre o sistema esquelético, em qualquer condição, mas especialmente na menopausa. Utilizando ratos Wistar, como modelo experimental, os objetivos deste trabalho são: a) verificar se a ooforectomia produz alterações na estrutura da cartilagem articular da epífise proximal da tíbia e b) verificar se a realização de exercícios físicos aeróbicos tem efeito sobre estas alterações. Para a realização deste estudo foram utilizadas 24 ratas com 6 meses de idade, da linhagem Wistar, distribuídas em 3 grupos de oito ratas cada: GC-Ratas com seis meses de idade, não submetidas à ooforectomia nem atividade física; GOS-Ratas com seis meses de idade, que sofreram ooforectomia bilateral, mas que não fizeram atividade física e, GOT-Ratas com seis meses de idade que foram submetidas à ooforectomia bilateral mais atividade física (corrida em esteira) durante 3 meses. Todos os animais foram eutanasiados com 9 meses de idade. A avaliação foi realizada através de microscopia de luz em cortes histológicos corados pela Hematoxilina-Eosina e pelo Picrossírius e estudos à microscopia eletrônica de varredura. À microscopia de luz, foram feitas medidas da espessura das zonas da cartilagem articular, contado o número de condrócitos por área, determinados os volumes dos núcleos dos condrócitos e a densidade de volume das fibras colágenas e à microscopia eletrônica de varredura foi analisada a superfície da cartilagem nos três grupos. Os dados quantitativos foram comparados estatisticamente pelo ANOVA e teste de Tukey. Os resultados mostraram que houve um aumento de peso nos animais do GOS e GOT em relação ao GC. Quanto ao treinamento, os animais do GOT tiveram melhor rendimento nos TEMs. Quanto à espessura da cartilagem observamos um aumento da espessura da zona superficial no côndilo medial da tíbia no GOS em relação ao GC. O número de condrócitos por campo foi alterado apenas no GOS, que mostrou um aumento de 34% em relação ao GC, o que, ao que parece, se deveu ao aumento do número de condrócitos da camada profunda. O volume nuclear dos condrócitos da zona superficial foi menor no GOS que no GC. O mesmo ocorreu na zona média do côndilo medial. Quanto aos valores da cartilagem da epífise proximal como um todo, observamos que o volume nuclear dos condrocitos do GOS e também do GOT foram menores do que do GC. Para o colágeno observamos um aumento da densidade de volume do colágeno no GOS e no GOT em relação ao GC. A microscopia eletrônica revelou a presença de lesões degenerativas semelhantes tanto para o GOS, quanto para o GOT. Podemos concluir que a depressão dos níveis de estrógeno acarreta alterações importantes na cartilagem articular da epífise proximal da tíbia tanto no componente celular, quanto na matriz e que a realização de exercícios físicos, isoladamente, parece não influenciar essas alterações. / The incidence of osteoarthritis increase in women in the post-menopausal period. This condition is relationed with the estrogen deficiency. Otherwise, it\'s being demonstrated that regular or moderate physical activity have beneficial effects on the skeletal system, in any condition, but especially in the menopause. Using Wistar rats, as an experimental model, the aims of this work are: a) to check if the ovariectomy produces alterations in the articular cartilage structure of the tibial proximal epiphysis and b) To check if aerobic physical exercises have effects on this alterations. To achieve these goals it was used 24 Wistar rats of 6 months of age, distributed in 3 groups of eight rats each: Control group- Rats with six months of age without ovariectomy and physical activity; GOS- Rats with six months of age with ovariectomy bilateral and without physical activity and, GOT- Rats with six months of age with ovariectomy bilateral and physical activity during 3 months. Al rats were euthanasied with 9 months of age. The results were obtained by using light microscopy to observe the histological sections stained with Hematoxylin and Eosin, and Picrosirius stain and the Scanning Electron Microscope. For light microscopy, were measured the thickness of cartilage, counted the number of chondrocytes, determined the volumes nuclei of chondrocytes and the density of volume of the collagens fibers. For the Scanning Electron Microscope, was analyzed the cartilage surface in the three groups. The data were statistically compared for the ANOVA and Tukey´s test. The results showed that there was an increase in the weight in the animals of GOS and of GOT. In relation to training, the animals of GOT obtained the best income in the TEMs. In relation to the thickness of the articular cartilage it was observed a decrease in the superficial layer of the medial condyle in the GOS and GOT. The number of chondrocytes was altered only in the GOS, that obtained an increase of the 34% on GC in the deep layer. The nuclear volume of chondrocytes in the superficial layer was higher in the GC than the GOS .The same occurred in the medium layer when the two tibial condyles, lateral and medial were assessed separately, but when the values of the epiphysial cartilage was considered as a whole, we found that the volume nuclei of chondrocytes in the GC was higher than the GOS and the GOT. For the collagen, the values of density of volume of the collagen fibers was higher in the GOS and in the GOT than the GC. The Scanning Electron microscopy showed the presence of degenerative lesions in both GOS and GOT. We can conclude that the depression levels of estrogen produced important changes in the tibial cartilage and that the physical activity doesn\'t have effects on these changes.

Introdução: A ereção peniana é um processo neurovascular complexo dependente do relaxamento da musculatura lisa dos corpos cavernosos. O etanol exerce diversos efeitos na atividade sexual masculina e a disfunção sexual induzida pelo etanol é causada pelo seu efeito no sistema nervoso central, principalmente pela sua ingestão aguda e crônica. Foi demonstrado que o etanol afeta significativamente tanto a contração quanto o relaxamento da musculatura lisa dos corpos cavernosos. Os relatos da ocorrência do mecanismo de apoptose nos corpos cavernosos estão associados à denervação, à castração e a doenças crônicas como o diabetes. Poucos são os estudos morfológicos sobre o efeito do etanol no tecido cavernoso; porém, não são descritos trabalhos relacionando as alterações morfológicas causadas pelo etanol no tecido cavernoso, a eventos moleculares e sua relação com o mecanismo de apoptose celular. Objetivos: avaliar e comparar o efeito do alcoolismo na morfometria e no mecanismo de apoptose dos corpos cavernosos de ratos submetidos a modelo de alcoolismo crônico. Material e métodos: Foram utilizados 24 ratos Wistar divididos em dois grupos: controle (C) e tratado com etanol (A) a 20% durante sete semanas. As amostras dos corpos cavernosos foram preparadas para o estudo morfométrico pela coloração de tricrômico de Masson, para o estudo da expressão protéica de CASPASE 3 (pró-apoptótica) por imunohistoquímica e para o estudo da expressão gênica sérica e no tecido cavernoso do miRNA-21 (anti-apoptótico). Resultados: O estudo morfométrico mostrou principalmente diminuição de fibras musculares lisas dos corpos cavernosos nos animais do grupo A. Também foi observado aumento significativo na expressão de CASPASE 3 nos animais do grupo A e baixa expressão gênica sérica e no tecido cavernoso do miRNA-21 nos grupos C e A. Conclusões: A análise morfométrica correspondente à área ocupada pelas fibras musculares lisas dos corpos cavernosos nos animais do grupo A mostrou correlação com os locais de maior expressão protéica de CASPASE 3 e, portanto, de apoptose. Neste estudo, a morte celular por apoptose não foi suprimida pela expressão do miRNA-21. / Introduction: Penile erection is a complex neurovascular process dependent smooth muscle relaxation in the corpus cavernosum. Ethanol exerts different effects on male sexual activity and sexual dysfunction induced by ethanol is caused by its effect on the central nervous system, primarily for its acute and chronic ingestion. Ethanol has been shown to significantly affect both the contraction and the relaxation of smooth muscle of the corpus cavernosum. The reports of the occurrence of the apoptosis mechanism in the corpus cavernosum are associated with denervation, castration and chronic diseases like diabetes. There are few morphological studies on the effect of ethanol in the cavernous tissue, but are not described studies correlating morphological changes caused by ethanol in the cavernous tissue, the molecular events and their relation to the mechanism of apoptosis. Objectives: To evaluate and compare the effect of alcoholism in the morphometry and mechanism of apoptosis in the corpus cavernosum of rats subjected to chronic alcoholism model. Material and methods: 24 Wistar rats were divided into two groups: Control (C) and treated with ethanol (A) diluted 20% for seven weeks. Samples of the corpus cavernosum were prepared for morphometric study by Masson\'s trichrome stain, study for protein expression of CASPASE 3 (pro-apoptotic) by immunohistochemistry and study for gene expression of miRNA-21 (anti-apoptotic) in serum and the cavernous tissue. Results: The morphometric study primarily showed a decrease in smooth muscle cells of the corpus cavernosum in group A. Significant increase for expression of CASPASE 3 in group A and low gene expression of miRNA-21 was also observed in serum and the cavernous tissue in groups C and A. Conclusions: The morphometric analysis corresponding to the area occupied by smooth muscle cells of the corpus cavernosum in group A showed correlation with the sites of increased protein expression of CASPASE 3 and thus apoptosis. In this study, cell death by apoptosis was not suppressed by the expression of miRNA-21.

INTRODUÇÃO: A isquemia cerebral é uma doença de alta prevalência, com desfecho clínico imprevisível, e com profilaxia e tratamento ainda limitados. Na atividade neurocirúrgica, as duas situações em que a isquemia cerebral ocorre com maior freqüência são o vasoespasmo arterial, que ocorre após hemorragia subaracnóidea, e nas microneurocirurgias vasculares, especialmente naquelas em que são realizadas clipagens vasculares temporárias. Dentre todas as formas de neuroproteção a hipotermia tem se mostrado a mais promissora em estudos experimentais. Pode ser aplicada em diferentes momentos do processo isquêmico (pré, intra ou pós-isquemia), sendo a modalidade pré-isquêmica pouco explorada na literatura. O objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente o efeito da hipotermia pré, intra e pós-isquêmica na isquemia focal temporária por oclusão da artéria cerebral média em ratos, através de análise morfométrica computacional. MATERIAL E MÉTODOS: Foram utilizados 74 ratos machos adultos da linhagem Wistar, divididos em 6 grupos, com 10 animais cada: Controle (C), Sham (S), Controle-Isquêmico (CI), Hipotermia Pré-Isquêmica (IH1), Hipotermia Intra-Isquêmica (IH2), Hipotermia Pós-Isquêmica (IH3). Todos os animais dos grupos isquêmicos foram submetidos à isquemia de 60 minutos, com um período reperfusional de 24 horas. A hipotermia utilizada foi do tipo leve (32 - 34 ºC). No grupo IH1 a hipotermia foi iniciada 30 min antes da oclusão arterial e mantida durante toda a isquemia; no grupo IH2 a hipotermia foi mantida somente durante a isquemia; no grupo IH3 a hipotermia foi mantida por 6 horas, sendo iniciada no exato momento da reperfusão. Após a eutanásia os cérebros foram perfundidos e fixados, sendo realizadas secções coronais de 10 micrômetros, em toda a extensão da área isquêmica, as quais foram coradas pela técnica Luxol Fast Blue. A morfometria foi realizada pelo programa KS400, Carl Zeiss, obtendo-se medidas diretas separadas de cada hemisfério, das áreas em azul (fibras mielinizadas) e em vermelho (corpos neuronais), bem como a área total de cada secção. Medidas derivadas (área isquêmica média, e volumes isquêmicos parcial e aproximado) de cada animal, foram obtidas nos grupos submetidos à isquemia. RESULTADOS: Os parâmetros da homeostase dos animais permaneceram dentro dos limites aceitáveis para este tipo de experimento. Em relação às áreas de fibras mielinizadas (azul) não houve diferença significativa entre os grupos C vs. S (p=0,39, Mann-Whitney-Wilcoxon), CI vs. IH3 (p=0,85, Mann-Whitney-Wilcoxon), e IH1 vs. IH2 (p=0,63, Mann-Whitney-Wilcoxon); ocorreu diferença estatística entre os grupos C vs. CI (p=0,0001, Mann-Whitney-Wilcoxon), CI vs. IH1 (p=0,01, Mann-Whitney-Wilcoxon), e CI vs. IH2 (p=0,03, Mann-Whitney-Wilcoxon). Em relação às áreas de corpos neuronais (vermelho), não houve diferença significativa entre os grupos C vs. S (p=0,48, Mann-Whitney-Wilcoxon), CI vs. IH3 (p=0,27, Mann-Whitney-Wilcoxon), e IH1 vs. IH2 (p=0,68, Mann-Whitney-Wilcoxon); ocorreu diferença estatística entre os grupos C vs. CI (p=0,0001, Mann-Whitney-Wilcoxon), CI vs. IH1 (p=0,009, Mann-Whitney-Wilcoxon), e CI vs. IH2 (p=0,03, Mann-Whitney-Wilcoxon). A análise estatística das áreas isquêmicas médias, e dos volumes isquêmicos parciais e aproximados não mostrou diferença significante na comparação entre os grupos CI vs. IH3 (p=0,57, Mann-Whitney-Wilcoxon), e IH1 vs. IH2 (p=0,79, Mann-Whitney-Wilcoxon); mostrou diferença significante entre os grupos CI vs. IH1 (p=0,0001, Mann-Whitney-Wilcoxon), e CI vs. IH2 (p=0,0011, Mann-Whitney-Wilcoxon). CONCLUSÕES: As hipotermias pré-isquêmica e intra-isquêmica mostraram-se neuroprotetoras de forma semelhante, o que não ocorreu com a hipotermia pós-isquêmica. / INTRODUCTION: Cerebral ischemia is a high prevalent disease, with unpredictable clinical outcome, and prophylaxis and treatment remains limited. In the neurosurgical practice cerebral ischemia occurs most frequently due arterial vasospasm after subarachnoid hemorrhage, and in vascular microneurosurgery, mainly when temporary vascular clipping is performed. Among all forms of experimental neuroprotection, hypothermia has been the most promising. It can be applied at different moments of ischemia (pre, intra or post-ischemia), and the pre-ischemic modality is little explored in literature. This study aimed to evaluate comparatively the effect of pre, intra and post-ischemic hypothermia in temporary focal ischemia obtained by middle cerebral artery occlusion in rats, by computational morphometric analysis. MATERIAL AND METHODS: We used 74 Wistar adult male rats divided into six groups of 10 animals each: Control (C), Sham (S), Ischemic-Control (IC), Pre-Ischemic Hypothermia (IH1), Intra-Ischemic Hypothermia (IH2), Post-Ischemic Hypothermia (IH3). All animals in the ischemic groups were subjected to ischemia for 60 minutes with a reperfusion period of 24 hours. It was used mild hypothermia (32 - 34 ºC). In IH1 group hypothermia was initiated 30 minutes before arterial occlusion and maintained throughout the ischemia, in IH2 group hypothermia was maintained only during ischemia, IH3 group hypothermia was maintained for 6 hours, starting at the beginning of the reperfusion. After euthanasia, the brains were perfused and fixed, and coronal sections of 10 microns were performed to the fullest extent of ischemic area, and these sections were stained by Luxol Fast Blue. The morphometry was performed by the KS400 software, Carl Zeiss, obtaining direct separated measurements in each hemisphere, of blue areas (myelinated fibers) and red areas (neuronal bodies) as well as the total area of each section. Derived measures (average ischemic area, and partial and approximated ischemic volumes) were also obtained from the ischemic groups. RESULTS: The animal homeostasis parameters remained within acceptable limits for this type of experiment. Regarding the myelinated areas (blue) there was no significant difference between groups C vs. S (p=0,39, Mann-Whitney-Wilcoxon), IC vs. IH3 (p=0,85, Mann-Whitney-Wilcoxon), and IH1 vs. IH2 (p=0,63, Mann-Whitney-Wilcoxon), and there was statistical difference between groups C vs. IC (p=0,0001, Mann-Whitney-Wilcoxon), IC vs. IH1 (p=0,01, Mann-Whitney-Wilcoxon), and IC vs. IH2 (p=0,03, Mann-Whitney-Wilcoxon). Regarding the neuronal bodies areas (red) there was no significant difference between groups C vs. S (p=0,48, Mann-Whitney-Wilcoxon), IC vs. IH3 (p=0,27, Mann-Whitney-Wilcoxon), and IH1 vs. IH2 (p=0,68, Mann-Whitney-Wilcoxon), and there was significant difference between C vs. IC groups (p=0,0001, Mann-Whitney-Wilcoxon), IC vs. IH1 (p=0,009, Mann-Whitney-Wilcoxon), and IC vs. IH2 (p=0,03, Mann-Whitney-Wilcoxon). Statistical analysis of average ischemic areas, and partial and approximated volumes of ischemic regions showed no significant difference between groups IC vs. IH3 (p=0,57, Mann-Whitney-Wilcoxon), and IH1 vs. IH2 (p=0,79, Mann-Whitney-Wilcoxon), and showed statistical difference between groups IC vs. iH1 (p = 0,0001, Mann-Whitney-Wilcoxon), and IC vs. IH2 (p = 0,0011, Mann-Whitney-Wilcoxon). CONCLUSIONS: Pre-ischemic and intra-ischemic hypothermia were shown to be similarly neuroprotective, but this was not true for post-ischemic hypothermia.

Destaca-se a Salmonella como um dos mais importantes patógenos veiculados por alimentos, devido ao fato de estar amplamente distribuído na natureza, possuir um grande número de reservatórios, apresentar sorotipos inespecíficos quanto aos hospedeiros e apresentar cepas multiresistentes aos antimicrobianos. Salmonella Enteritidis tornou-se um grande problema de saúde pública no Brasil, a partir da década de 80, quando foi associada a produtos avícolas. Desde 1962, a Salmonella Heidelberg tem sido isolada de aves e produtos derivados e aves no Brasil e tem reconhecida importância para saúde humana e em poedeiras comerciais na América do Norte. O presente trabalho teve por objetivo o estudo de diferentes cepas de Salmonella Heidelberg (SH) em comparação com Salmonella Enteritidis (SE) em pintinhos e frangos de corte no que diz respeito à capacidade de invasibilidade de órgãos, persistência de excreção fecal e alterações na morfometria intestinal. Para o estudo in vivo, 65 isolados de SH foram avaliados quanto à presença dos genes de virulência invA, lpfA e agfA e diferenciados por eletroforese em campo pulsado (PFGE). Outro objetivo foi testar uma mistura de ácidos orgânicos e óleos essenciais no controle de excreção fecal de SE. Duas amostras de SH não relacionadas pelo método de PFGE (SH23 e SH35) e uma cepa de SE padrão foram selecionadas para a inoculação das aves. As três cepas promoveram alteração na medida de vilosidades e criptas dos pintinhos, frente a grupo controle. A cepa SH35 promoveu maior reação inflamatória nos cecos. Ambas as cepas testadas foram capaz de atingir o fígado de pintinhos às 6 horas pós-inoculação. Tanto a SE como a SH demonstram persistência e intermitência de excreção fecal em frangos de corte até os 21dias pós-inoculação. A mistura de ácidos e óleos essenciais foi eficaz na redução da excreção fecal de SE, porém somente com o uso contínuo da mistura na ração. As cepas apresentaram comportamentos diferentes quando inoculadas em frangos de corte e devido à persistência destas nos intestinos dos frangos, prejuízo para as aves podem ocorrer, enquanto a subseqüente contaminação de carcaças, representa risco para a saúde humana. / Salmonella, one of the most important food borne pathogen due to the widely distribution in nature, large number of reservoirs, to show unspecific host serotypes and provide multiresistant strains to antibiotics. Salmonella Enteritidis became a big public health problem in Brasil, since 80’s, when it was correlated with poultry products. Since 1962, Salmonella Heidelberg has been isolated from birds and poultry products in Brazil, with importance in human health and layers in North America. The present work aimed to the study of different strains of Salmonella Heidelberg (SH) and compared with Salmonella Enteritidis (SE) in chicks and broiler chickens with regard to the ability of invasibilidade of organs, persistence of fecal excretion and changes in intestinal morphometry. For the in vivo study, 65 isolates of SH were evaluated for the presence of virulence genes invA, lpfA and agfA and differentiated by pulsed field gel electrophoresis (PFGE). Another objective was to test a organic acids and essential oils mixture for controlling SE fecal excretion. Two not related SH samples by the method of PFGE (SH23 and SH35) and a standard strain of SE were selected to the poultry inoculation. The three strains promoted changes in the measures of villi and crypts of the chicks intestine, when compared to the control group. The SH35strain promoted greater inflammatory reaction in the caeca. Both strains tested were able to achieve the chicks liver at 6 hours post inoculation. Both strains, SE and SH, showed persistence and intermittence of fecal excretion in broiler chickens until the 21days post-infection. The organic acids and essential oils mix was effective in reducing the SE fecal excretion, but only with the continuous use of the mix added to the feed. The strains showed different behavior when inoculated in broiler chickens, and because of the persistence of these strains in the chickens intestines, injury to birds may occur, while the subsequent carcasses contamination represents risk to human health.

Esta dissertação de mestrado, organizada na forma de artigo científico apresenta um estudo morfogeométrico da variação do dentário em Clevosaurus brasiliensis Bonaparte e Sues 2006. Este se configura como o segundo estudo em Rhyncocephalia fósseis com uma abordagem sobre o desenvolvimento ontogenético, e o terceiro utilizando morfometria como ferramenta para descrever e explicar a variação morfológica dentro do Grupo. O estudo foi realizado com uma amostragem de 17 dentários de C. brasiliensis provenientes do afloramento Linha São Luiz, que faz parte do topo da Sequencia Santa Maria 2 (Triássico Superior), da Supersequência Santa Maria. Os resultados obtidos pelo PCA demonstram que a maior parte da forma dos dentários pode ser explicada mediante o PC1 (59.67%) e o PC2 (19.414%), sendo que o PC1 está relacionado com processos ontogenéticos e o PC2, com processos tafônomicos. Observou-se que o padrão de crescimento do dentário, como o que ocorre em outros Rhynchocephalia, consiste em um desenvolvimento alométrico, onde a porção posterior (do último dente adicional até a extremidade mais posterior) exibe um maior crescimento em relação à porção anterior (portadora dos dentes). Os processos tafonômicos, como as deformações dos crânios causadas pela diagênese, assim como a desarticulação e a fragmentação, foram os que influenciaram na variação da forma. Além disso, observou-se que, apesar do desgaste nos dentes de C. brasiliensis ser similar ao que ocorre em outros Clevosaurus, algumas sutis diferenças foram detectadas, como um maior crescimento de osso secundário no dentário dos adultos, recobrindo os dentes, o qual pode estar relacionado com uma maior exploração de itens vegetais em comparação com as outras espécies do gênero. Como complemento do artigo é apresentado um estado da arte, onde são desenvolvidos tópicos, como a contextualização do grupo de estudo, Rhynchocephalia, conhecimentos sobre a sua ontogenia e breves considerações sobre a Morfometria Geométrica. / La presente disertación de maestría está organizada como un artículo científico en el cuál se elaboró un estudio morfogeométrico sobre la variación del dentario en Clevosaurus brasiliensis Bonaprte y Sues 2006. Dentro de los estudios con fósiles de Rhycocephalia, este trabajo será el segundo que trata sobre el desarrollo ontogenético, y a su vez será el tercer estudio, que usa la morfometría geométrica como para describir y explicar la variación morfológica. La muestra del estudio estuvo constituída por 17 dentarios de C. brasiliensis provenientes del afloramiento Linha São Luiz, que forma parte de la sección superior de la Secuencia Santa Maria 2 (Triásico Superior), de la Supersecuencia Santa Maria. Los resultados obtenidos por el PCA muestran que la mayor parte de la variación de la forma se puede explicar a través de los PC1 (59.67%) y el PC2 (19.414%), donde el PC1 está relacionado con procesos ontogenéticos y el PC2, con procesos tafonómicos. Se obervó un patrón de crecimiento en el dentario, como ocurre en otros Rhynchocephalia, el cual consiste en un crecimiento mayor de su parte posterior (correspondiente al último diente adicional hasta la parte posterior del dentario), en relación con la porción anterior (portadora de los dientes).Los procesos tafónomicos con una mayor influencia en la forma son, por un lado, las deformaciones de los cráneos debido a la diagénesis y, por otro, los procesos de desarticulación y fragmentación (procesos bioetratinómicos). Aunado a esto, se observo que el desgaste de los dientes es similar a lo reportado en otros Clevosaurus, aunque presenta unas pequeñas diferencias como un mayor desarrollo del hueso secundario en los dentarios de los adultos, lo cual puede indicar un hábito omnívoro con una mayor exploración de la herbivoría, comparado con otras especies de Clevosaurus. Como complemento del artículo se presenta un estado de arte, en el cual se desarrollan dos tópicos: una contextualización del grupo estúdio, Rhyncocephalia, incluyendo una breve nota sobre su ontogenia, y unas breves consideraciones sobre Morfometria Geométrica.

A área de estudo foi a bacia hidrográfica do Ribeirão Bocaina que abrange totalmente a área urbana de Passos (MG) que há muito tempo vem sofrendo com problemas de inundações. O trabalho teve como objetivo principal determinar e analisar a potencialidade à inundação da bacia hidrográfica e da área urbana, integrando atributos morfométricos e geotécnicos. Para isso adotou-se duas escalas de trabalho, 1:50.000 para a bacia hidrográfica e 1:10.000 para a área urbana. Ressalta-se que para a execução dos procedimentos metodológicos foi necessário a utilização dos softwares ArcGIS10® e o TerraHidroView 0.4.5® e também de dados e mapas básicos disponibilizados pelo Projeto Grande Minas. Neste trabalho foram elaborados os seguintes documentos interpretativos: a Carta de Potencial dos Meios Físico e Antrópico ao Escoamento Superficial, desenvolvida por meio da ponderação de atributos com a técnica AHP (Analytical Hierarchy Process); a Carta de Suscetibilidade Morfométrica à Inundação que classificou as sub-bacias hidrográficas do Ribeirão Bocaina com base em cinco parâmetros morfométricos; a Carta da Distância Vertical da Drenagem mais próxima, obtida com auxílio do modelo HAND (Height Above the Nearest Drainage) e a Carta de Predisposição Topográfica à Inundação para a bacia hidrográfica e para a área urbana, obtida a partir da correlação entre a suscetibilidade morfométrica à inundação e o modelo HAND. Além destes produtos cartográficos interpretativos, foi realizada também uma análise detalhada do potencial à inundação considerando as bacias hidrográficas urbanas, identificando os pontos de confluência críticos que demandam maiores cuidados e os locais que apresentam forte tendência ao crescimento urbano e que poderão proporcionar aumento da taxa de impermeabilização a montante da área urbana e potencializar as inundações. Os produtos interpretativos elaborados servirão de aporte para os gestores e planejadores em suas tomadas de decisão, visando à atenuação dos impactos frente à ocorrência do processo. / The study area was the basin of Ribeirão Bocaina covering the entire urban area of Passos (MG) that has long been suffering with flood problems. The work had as main objective to determine and analyze the potential for flooding of the watershed and of the urban area, integrating morphometric attributes and geotechnical. To that adopted two working scales, 1:50.000 for the watershed and 1:10.000 for the urban area. It should be noted that for the implementation of the methodological procedures was necessary the use of ArcGIS10® software and TerraHidroView 0.4.5® and also basic maps and data provided by Projeto Grande Minas. In this work the following interpretative documents were prepared: the Runoff Potential Map to the Physical and Anthropic Environment, developed through weighting of attributes with the AHP technique (Analytical Hierarchy Process); the Morphometric Susceptibility to Flood Map classified the sub-basins of the Ribeirão Bocaina based on morphometric parameters five; the Vertical Distance of the nearest Drainage Map, obtained with the aid of HAND model (Height Above the Nearest Drainage) and the Topographical Predisposition to the flood Map for the watershed and for the urban area, obtained from the correlation among the morphometric susceptibility to flood and the HAND model. In addition to these interpretative cartographic products, a detailed analysis of the flood potential considering the urban watersheds has been made, identifying the critical points of convergence that demand greater care and those places that have a strong tendency to urban growth and that may increase the waterproofing rate upstream of the urban area and increase flooding. The interpretive products developed will serve as a contribution for managers and planners in their decision-making, aimed at attenuating at the mitigation of the impacts against the occurrence of the process.

Este trabalho tem por objetivo avaliar as alterações temporais na rede de drenagem em sub-bacias e microbacias hidrográficas de terrenos cristalinos e sedimentares, que integram, respectivamente, a bacia do alto e baixo rio Capivari e compreendem parte do município de Louveira e Rafard (SP). A metodologia aplicada foi baseada na análise conjunta da morfometria da área e no levantamento das características do meio físico e das atividades antrópicas. Os elementos de análise foram obtidos por meio de fotografias aéreas na escala de 1:25.000, para dois períodos (1972 e 1995), associados a trabalhos de campo e ensaios laboratoriais. Os resultados obtidos demonstraram que as mudanças no número e nos comprimentos dos canais de Ordem 1 foram as mais significativas na rede de drenagem e determinaram as demais modificações na sua estrutura interna, principalmente nos índices densidade de drenagem e densidade hidrográfica. As alterações na área do alto rio Capivari estão associadas diretamente as modificações e/ou implantação de atividades antrópicas. As alterações na área sedimentar são condicionadas pela geologia e intensivo cultivo de cana de açúcar e/ou pastagens. Foram elaborados para as duas áreas de estudo, os seguintes documentos cartográficos: mapa de documentação; mapa de substrato rochoso; carta de declividade; mapa de materiais inconsolidados e mapa de landforms. Além destes foram gerados os mapas de uso e ocupação e rede de drenagem para as duas épocas analisadas, 1972 e 1995. / This work was proposed to evaluation the drainage networks time changes in the crystallines and sedimentaries hydrographic microbasins and sub basins, situated in the high and low Capivari river (Louveira and Rafard/SP). The methodological approach has consisted in the analysis of the morphometry, identification of physical environmental element and human activities. The components were identified, for aerial photo, scale 1:25.000, between 1972 and 1995, and were associated field activities and laboratories tests. The results were showed first-order channel number and length were the morphometric variables which most contributed to the drainage systems changes with direct influence in the index drainage density and hydrographic density. These alterations in the area of Capivari high river sub-basins and microbasins were associated with the human activies installations or the changes. These changes in the area of Capivari low river were associated with geology and sugar-cane raising. Also, the following cartographic documents were elaborated for two studies areas: documentation map, geological map, declivities chart, unconsolidated materials map and landforms map. The drainage network map and the land use map were created for two analysis times, 1972 and 1995.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-02T12:50:55Z No. of bitstreams: 1 Diego Nathan do Nascimento Souza.pdf: 1366512 bytes, checksum: caaf3946b38c8d0e28ab490076fa841e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T12:50:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Diego Nathan do Nascimento Souza.pdf: 1366512 bytes, checksum: caaf3946b38c8d0e28ab490076fa841e (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Plant phenophases, especially flowering and fruiting, and reproductive attributes, such as the production of fruits and seeds, seed morphology, pre-dispersal predation, reproductive success, among others, suffer negative influence of human activities. Thus, the aim in this thesis the preparation of two scientific articles, in which it evaluated the phenology and reproductive attributes three herbaceous species in areas with different ages of natural regeneration. The study was conducted in three areas of hypoxerophytic caatinga in the city of Caruaru, Pernambuco, Brazil, belonging to the Agronomic Institute of Pernambuco (IPA). The first area it is a mature forest, over 50 years of storage. The other two suffered shallow cut vegetation and move on natural regeneration for 17 years (young forest) and 5 years (field). The phenology of species was monitored weekly during the rainy season and early dry for three years, 30 individuals per species in mature forest and young forest. Reproductive and vegetative phenophases these individuals were observed with respect to time, synchronism and intensity. For reproduction attributes evaluated the morphometry of flowers, fruits and inflorescences, the amount of formed fruits and seed, pre-dispersion predation and pre-emergent reproductive success of each species in three areas. There was significant phenological variation among the populations of the two forests, with seemingly trends temporal amplitude, timing and intensity of phenophases. There was anticipation of some phenophases in the young forest populations but with low intensity and frequency. There was also phenophases anticipation of the mature forest. In relation to reproductive attributes, some differences were found, such as the morphology of flowers, inflorescences and fruits between areas, and the production of fruits and seeds. However, pre-dispersal predation and pre-emergent reproductive success of herbaceous did not differ between areas. We conclude that the herbaceous showed little change in phenology and reproductive attributes, being little influenced by the age of the forest. The study indicated that the phenological intensity is the best phenological feature for comparing the herbaceous phenology between areas of different ages and the morphology of inflorescences, flowers and fruits is the best attribute for comparison of these areas. / As fenofases vegetais, principalmente floração e frutificação, e os atributos reprodutivos, como a produção de frutos e sementes, morfometria de sementes, predação pré-dispersão, sucesso reprodutivo, entre outros, sofrem influência negativa de ações antrópicas. Assim, objetivou-se nesta tese a elaboração de dois artigos científicos, nos quais se avaliou as características fenológicas e os atributos reprodutivos de três espécies herbáceas em áreas com diferentes idades de regeneração natural. O estudo foi desenvolvido em três áreas de caatinga hipoxerófila no município de Caruaru-PE, Brasil, pertencentes ao Instituto Agronômico de Pernambuco (IPA). A primeira área trata-se de uma floresta madura, com mais de 50 anos de conservação. As outras duas sofreram corte raso da vegetação e seguem em regeneração natural há 17 anos (floresta jovem) e há 5 anos (campo). A fenologia das espécies foi acompanhada semanalmente no período chuvoso e início do seco durante três anos, em 30 indivíduos por espécie na floresta madura e na floresta jovem. Foram observadas as fenofases reprodutivas e vegetativas desses indivíduos, quanto à época, sincronia e intensidade. Para os atributos reprodutivos, avaliou-se a morfometria de flores, inflorescências e frutos, a quantidade de frutos e sementes formados, a predação pré-dispersão e o sucesso reprodutivo pré-emergente de cada espécie nas três áreas. Não ocorreu variação fenológica expressiva entre as populações das duas florestas, com tendências aparentemente de amplitude temporal, sincronia e intensidade das fenofases. Houve antecipação de algumas fenofases em populações da floresta jovem, mas com baixa intensidade e frequência. Também houve antecipação de fenofases na floresta madura. Já em relação aos atributos reprodutivos, algumas diferenças foram encontradas, como na morfometria de flores, inflorescências e frutos entre as áreas, e na produção de frutos e sementes. Contudo, a predação pré-dispersão e o sucesso reprodutivo pré-emergente das herbáceas não diferiram entre as áreas. Conclui-se que as herbáceas apresentaram pouca alteração na fenologia e nos atributos reprodutivos, sendo pouco influenciadas pela idade da floresta. O estudo sinalizou que a intensidade fenológica é a melhor característica fenológica para comparação da fenologia de herbáceas entre áreas de diferentes idades e que a morfometria de inflorescências, flores e frutos é o melhor atributo para comparação dessas áreas.