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Ausência da atividade mutagênica de nanotubos de carbono de paredes múltipla, funcionalizados, em células somáticas de Drosophila melanogaster

Machado, Nayane Moreira 30 July 2012 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Carbon nanotubes (CNTs) are rigid molecules, flexible and resistant to tensions formed from sheets of carbon (graphene), which at high temperature, ultimately to curl, forming nanometer diameter tubes. Among the different types of CNTs, the multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) can be noted for comprising a set of concentric nanotubes with perfect structures and defect- free materials. Several applications for this material are suggested, including biological applications such as manufacturing of biosensors, backers of drugs and vaccines and other biomaterials. However, before these materials can be incorporated into the market, is necessary to know their cytotoxic and genotoxic effects. Thus, this study aims to evaluate the mutagenicity of carbon nanotubes in somatic cells of Drosophila melanogaster, using the Somatic Mutation and Recombination Test (SMART). For this purpose we have used 72-hour larvae from standard (ST) and high bioactivation (HB) crosses. The larvae from both crosses were treated with solutions containing different concentrations of multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) functionalized (0,50, 100, 150, 200, 250 mμ /mL). For positive control, doxorubicin DXR (0,4 mM) was used, and reverse osmosis water for negative control. The descendants trans-heterozygous (MH) analyzed from both ST and HB crosses, had no significant effect on the frequency of mutant spots when compared with negative control (reverse osmosis water). This way, based on the results and on the experimental conditions mentioned in this study, it can be concluded that MWCNTs were not mutagenic for Drosophila melanosgaster. / Nanotubos de carbono (NTCs) são moléculas rígidas, flexíveis e resistentes a tensões formadas a partir de folhas de carbono (grafenos), que em altas temperaturas, acabam por se enrolarem, formando tubos de diâmetro nanométrico. Existem diferentes tipos de NTCs, dentre eles podem-se destacar os nanotubos de carbono de parede múltipla (NTCPM) que compreendem um conjunto de nanotubos concêntricos com uma estrutura livre de defeitos. Várias aplicações para este material são sugeridas, incluindo aplicações biológicas como fabricação de biosensores, veiculadores de drogas e vacinas entre outros biomateriais. Contudo, antes que estes materiais possam ser incorporados ao mercado, há a necessidade de se conhecer seus efeitos citotóxicos e genotóxicos. Sendo assim, o presente estudo tem como objetivo avaliar a mutagenicidade de nanotubos de carbono em células somáticas de Drosophila melanogaster, utilizando o Teste para detecção de mutação e recombinação somática (SMART). Para tanto, foram utilizadas larvas de 72 horas provenientes do cruzamento padrão (ST) e do cruzamento de alta bioativação (HB), que foram tratadas com soluções contendo diferentes concentrações de NTCPM funcionalizados (0,50, 100, 150, 200, 250 mμ / mL). Como controle positivo, foi utilizada a doxorrubicina DXR (0,4 mM), e como controle negativo água de osmose reversa. As asas dos descendentes trans-heterozigotos (MH) analisados de ambos os cruzamentos ST e HB, não apresentaram resultado significativo sobre a frequência de manchas mutantes quando comparadas com o controle negativo. Desta forma, com base nos resultados obtidos e nas condições experimentais mencionadas, pode-se concluir que NTCPM não foram mutagênicos para D. melanosgaster. / Mestre em Genética e Bioquímica
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Avaliação imunotoxicológica da anacauíta (Schinus molle l.) em cultura celular

Duarte, Jonathaline Apollo January 2016 (has links)
Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-12T14:17:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JONATHALINE APOLLO DUARTE.pdf: 1033426 bytes, checksum: 65249cf69187d253ce4462e7152ce8db (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-12T14:18:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JONATHALINE APOLLO DUARTE.pdf: 1033426 bytes, checksum: 65249cf69187d253ce4462e7152ce8db (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T14:18:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JONATHALINE APOLLO DUARTE.pdf: 1033426 bytes, checksum: 65249cf69187d253ce4462e7152ce8db (MD5) Previous issue date: 2016 / O emprego de produtos naturais para o tratamento, cura ou prevenção de doenças pela população é datada desde os tempos mais remotos, e apesar dos inúmeros avanços na ciência, o uso de plantas com finalidade medicinal, ainda representa na maioria das vezes o único recurso terapêutico de muitas comunidades e de diversos grupos étnicos.Atualmente é possível verificarmos que apesar de todos os avanços nas indústrias farmacêuticas para a produção de fármacos sintéticos, a população ainda recorre às plantas medicinais.Entretanto, existe uma infinidade de plantas que ainda não são conhecidos os seus possíveis efeitos farmacológicos e/ou toxicológico. Diante desse contexto, a Schinus molle L. (Anacardiaceae), popularmente conhecida como anacauíta, é uma planta rica em óleo essencial, a qual vem sendo usada como uma opção de tratamento para diversas enfermidades, e apesar de seu amplo emprego na medicina popular, a literatura carece de informações voltadas para seu perfil imutoxicologico. Assim, investigouse os efeitos do óleo essencial frente a parâmetros citotóxico, mutagênico e genotoxico em cultura de linfócitos e macrófagos humanos. Inicialmente, determinaramse as DL50 para ambas as células estudadas, através do teste de proliferação celular, para então desenvolver os demais testes. As DL50 encontradas foram de 30.07μg/mL para linfócitos humanos e de 42.07μg/mL para macrófagos humanos, assim, foram definidas as concentrações a serem testadas, sendo essas DL50, DL50/10, DL50/100, DL50/1000 e DL50/10000 para as células em questão, e foi constatado que o óleo essencial foi capaz de promover citotoxicidade em concentrações superiores a DL50/1000, para ambas as células testadas. Entretanto, o mesmo proporciona efeito genotóxico em culturas de macrófagos, somente para as duas concentrações maiores e quando avaliado os frente a parâmetros mutagênicos, constatouse que, o mesmo não promove alterações cromossômicas assim como, também não alterou o índice de divisão celular, embora tenha sido capaz de proporcionar frequência de micronúcleo concentração dependente nos macrófagos. Contudo, é importante salientar a importância de conhecimento dos constituintes do óleo essencial da Schinus molle L., para maiores esclarecimentos referente a sua toxicidade, uma vez que, essa planta é amplamente empregada na medicina popular para as diversas finalidades. Dessa forma, os resultados encontrados nesse trabalho, tem a contribuir com a literatura. Para tanto, estudos complementares são necessários para auxiliar na construção completa do perfil toxicológico do óleo essencial da planta em estudo, buscando a segurança da população que a utiliza. / The use of natural products for the treatment, cure or prevention of disease by population is dated from the earliest times, and despite the numerous advances in science, the use of plants for medicinal purposes, yet is most often the only therapeutic resource many communities and various ethnic groups. It is currently possible to see that despite all the advances in the pharmaceutical industry for the production of synthetic drugs, people still make use of medicinal plants. However, there is a multitude of plants that are not yet known its possible pharmacological effects and / or toxicology. In this context, the Schinus molle L.(Anacardiaceae), popularly known as anacauíta, is a plant rich in essential oil, which has been used as a treatment option for various diseases, and despite its widespread use in therapy, the literature lacks information geared to your immunotoxicology profile. Thus, we investigated the effects of essential oil cytotoxic front parameters, mutagenic and genotoxic in cultured human lymphocytes and macrophages. Initially, the LD50 were determined for both the cells studied by the cell proliferation assay, and then to develop other tests. The LD50 was found to 30.07μg/ml for human lymphocytes and 42.07μg/ml for human macrophages, thus the concentrations to be tested have been identified and these LD50, LD50/10, LD50/100 LD50/1000 and LD50/10000 to the cells in question, and it was found that the essential oil was able to promote cytotoxicity at concentrations above LD50/1000, for both test cells, however, it provides genotoxic effects in macrophage cultures, only the two concentrations and larger when measured against the mutagens parameters, it was found that it does not promote chromosomal abnormalities as well as, did not alter the rate of cell division, although it was able to provide frequency micronucleus concentration dependent on macrophages. However, it is important to stress the importance of knowledge of essential oil constituents of Schinus molle L., for further information regarding its toxicity, since this plant is widely used in folk medicine for a variety of purposes. Thus, the results found in this work, is to contribute to the literature. Therefore, further studies are needed to help complete construction of the toxicological profile of the essential oil of the plant under study, seeking the safety of the population makes use of this. / Schinus molle L
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Caracterização e incremento da variabilidade genética em caracteres agronômicos de importância medicinal em Camomila (Chamomilla recutita L.) / Characterization and increment of genetic variability in agronomic characters of medicinal importance in Chamomilla (Chamomilla recutita L.

Garcia, Cíntia Silveira 07 April 2017 (has links)
Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-07-11T15:53:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DISSERTAÇÃO_GARCIA_2017.pdf: 1124488 bytes, checksum: 23dd5d3a394b02d22f913578d0326a82 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-07-17T20:05:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO_GARCIA_2017.pdf: 1124488 bytes, checksum: 23dd5d3a394b02d22f913578d0326a82 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T20:05:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO_GARCIA_2017.pdf: 1124488 bytes, checksum: 23dd5d3a394b02d22f913578d0326a82 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A Camomila (Chamomilla recutita (L.) Rauschert) é uma espécie de planta medicinal e aromática, pertencente à família Asteraceae, que contém aproximadamente 23.000 espécies. É considerada a planta medicinal de maior cultivo no território brasileiro, sendo, amplamente cultivada nas regiões sul e sudeste do Brasil, onde há o predomínio de solos sob o domínio climático tropical e subtropical. Hoje em dia a Camomila possui a maior parte dos seus constituintes químicos amplamente estudados. Sendo altamente favorecida e muito utilizada na medicina tradicional e popular além de sua importância econômica para a indústria farmacêutica, cosmética e alimentícia. Suas propriedades, que possuem grande importância econômica, foram estabelecidas ao longo dos anos através de pesquisas baseadas no conhecimento popular e científico. Embora as propriedades terapêuticas da Camomila tenham sido bem estabelecidas ao longo dos anos, e desta espécie ser uma das mais utilizadas pela maior parte da população, algumas informações básicas quanto ao seu cultivo, caracterização e variabilidade genética existente, ainda são desconhecidas, sendo muitas vezes utilizadas informações de parentes próximos. Desta forma, os objetivos deste estudo foram reunir o máximo de informações a respeito da espécie quanto à caracterização, utilização, composição química e o cultivo de Camomila; avaliar caracteres morfológicos de sementes e o desempenho inicial de plântulas de populações de diferentes mesorregiões do Rio Grande do Sul e variedades comerciais, bem como estimar o comportamento da variedade comercial ISLA de Camomila frente aos ácidos orgânicos, além de estudar o efeito do mutagênico físico (radiação gama) em sementes de variedade comercial ISLA. Os estudos foram realizados no Laboratório de Biologia Molecular do Centro de Genômica e Fitomelhoramento, do Departamento de Fitotecnia na Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel da Universidade Federal de Pelotas (UFPel), nos anos de 2016 e 2017. Quanto à busca de informações a cerca da Camomila (Capítulo I), verificou-se que para questões fundamentais como o cultivo e exploração da variabilidade as informações disponíveis na literatura ainda são escassas e pouco exploradas. Os resultados encontrados na caracterização de diferentes populações (Capítulo II) demonstraram que a população de Camomila crioula Guabiju se destacou como fonte de variabilidade genética para as variedades comerciais, e quando se leva em consideração os caracteres diretamente associados à semente, o mais promissor foi a massa de cem sementes. Já para parâmetros associados à germinação, o caractere alvo para o melhoramento é o índice de velocidade de germinação, e com relação ao crescimento de plântulas, o caractere com maior importância é primeira contagem de germinação. Quando se estudou o comportamento das sementes comerciais submetidas a diferentes concentrações de ácidos orgânicos comumente encontrados em solos hidromórficos (Capítulo III), observou-se que não houve influência dos ácidos e das concentrações utilizadas na germinação e desenvolvimento inicial das plântulas, indicando que a Camomila 10 é uma planta rústica e que não tem seu comportamento alterado, mesmo em altas concentrações de ácidos orgânicos presentes no solo. Por fim, ao utilizar radiação gama para induzir a mutação e por consequência criar variabilidade genética em sementes comerciais de Camomila (Capítulo IV), observou-se que as doses de até 900 Gy não prejudicaram a germinação de sementes, o desenvolvimento e a sobrevivência das plantas, contudo, as doses de radiação utilizadas são recomendadas, pois aumentam as chances de incremento da variabilidade genética em sementes secas de Camomila (Chamomilla recutita L.). Considerando os resultados obtidos durante a realização deste estudo, pode-se concluir que tanto a utilização de mutagênico físico quanto à utilização de populações de Camomila de diferentes mesorregiões favorecem o incremento da variabilidade existente aumentando assim a exploração dos potenciais da espécie que não é muito exigente quanto ao tipo de solo, mesmo possuindo altas concentrações de ácidos orgânicos de baixa massa molar, encontrados na Região Sul do Brasil. Dessa forma, recomenda-se o cultivo e a sua utilização como alternativa de melhoria da saúde da população e para aumentar a renda de pequenos produtores devido às inúmeras propriedades terapêuticas de Camomila amplamente exploradas pela indústria. / The Chamomile (Chamomilla recutita (L.) Rauschert) it is a specie of medicinal plant and aromatic, belonging to Asteraceae family, which contains approximately 23.000 species. It is considered the most cultivated medicinal plant in the brazilian territory, being, widely cultivated in the south and southeast regions of Brazil, where there is predominance of soils tropical and subtropical climate under domain. Nowadays the Chamomile has most of its widely studied chemical constituents. Being highly favored and widely used in traditional and popular medicine besides its economic importance for the pharmaceutical, cosmetic and food industry. Its properties, which have great economic importance, have been established over the years through research based on popular and scientific knowledge. Although the therapeutic properties of Chamomile have been well established over the years, and this species is one of the most used by most of the population, some basic information about its cultivation, characterization and genetic variability are still unknown, being often information from close relatives. Thus, the objectives of this study were to gather as much information about the species regarding the characterization, use, chemical composition and Chamomile cultivation; to evaluate biometric seed characteristics and initial seedling performance of populations of different mesoregions of Rio Grande do Sul and commercial cultivars, as well as to estimate the behavior of the ISLA commercial cultivar of Chamomile against organic acids, in addition to studying the effect of the physical mutagen (Gamma radiation) in ISLA commercial. The studies were carried out at the Laboratory of Molecular Biology of the Genomics and Breeding Center, Department of Phytotechnology, Faculty of Agronomy Eliseu Maciel, Federal University of Pelotas (UFPel), in the years 2016 and 2017. Regarding the search for information about Chamomile (Chapter I), it was verified that for fundamental questions such as the cultivation and exploitation of variability the information available in the literature is still scarce and little explored. The results found in the characterization of different populations (Chapter II) demonstrated that the Guabiju Chamomile landrace population was highlighted as a source of genetic variability for commercial varieties,and when considering the characters directly associated with seed, the most promising was the mass of one hundred seeds. For parameters associated to germination, the target character for breeding is the rate of germination, and for seedling development, the most important character is the first germination count. When the behavior of commercial seeds submitted to different concentrations of organic acids commonly found in hydromorphic soils (Chapter III) was studied, it was observed that there was no influence of the acids and concentrations used in the germination and initial development of the seedlings, indicating that Chamomile is a rustic plant that does not have its behavior altered, even in high concentrations of organic acids present in the soil. Finally, when using gamma radiation to induce the mutation and consequently to create genetic variability in commercial seeds of Chamomile (Chapter IV), it was observed that the doses up to 900Gy did not affect seed 12 germination, development and plant survival , however, the radiation doses used are recommended because they increase the chances of increasing genetic variability in dry seeds of Chamomile (Chamomila recutita L.). Considering the results obtained during the study, it is possible to conclude that both the use of physical mutagen for the increase of characters of agronomic interest and the use of Chamomile populations of different mesoregions favor the increase of the existing variability, thus increasing the exploitation of potentials of the species that is not very demanding as to the type of soil, even having high concentrations of organic acids of low molar mass, found in the Southern Region of Brazil, therefore, it is recommended the cultivation and its use as an alternative for health improvement of the population and to increase the income of small farmers due to the therapeutic properties of Chamomile widely exploited by the industry.

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