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Efeito da progesterona na expressão do RNAm do receptor de LH e enzimas esteroidogênicas reguladoras do desenvolvimento folicular em células da granulosa de novilhas nelore

Dias, Henrique Pedro [UNESP] 11 December 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-03-07T19:21:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-11. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:25:30Z : No. of bitstreams: 1 000858939.pdf: 982272 bytes, checksum: fb39d575bd6ef650066d639f1b13b44c (MD5) / O objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito da concentração de P4 sobre a abundância de RNAm do LHR e enzimas esteroidogênicas em células da granulosa de folículo dominante (FD) em novilhas Nelore. Hipotetizamos que a alta progesterona afetaria negativamente a expressão do LHR e enzimas esteroidogênicas proporcionando menor desenvolvimento folicular. Para tanto, 52 novilhas Nelore foram pré-sincronizadas (D-17: 2mg BE + dispositivo intravaginal de progesterona CIDR®; D-10: 12,5mg PGF2α Lutalyse®; D-8: 0,5 mg ECP® e retirada CIDR®). As novilhas que responderam à présincronização (presença de CL) foram submetidas à ablação folicular e colheita de sangue no D0 e aleatoriamente distribuídas em 6 grupos: G1: Alta P4-D5 (implante de CIDR1 (novo) no D0 e abatidas após 5 dias); G2: Baixa P4-D5 (implante de CIDR3 (previamente utilizado por 18 dias) no D0 e aplicação de 25mg PGF2α no D0 e no D1, abate no D5); G3: Alta P4-D6 (implante de CIDR1 e abatidas após 6 dias); G4: Baixa P4- D6 (implante de CIDR3 no D0 e aplicação de 25mg PGF2α no D0 e no D1, abate no D6); G5: Alta P4 + PE (proestro) (implante de CIDR1 no D0, retirada do CIDR, colheita de sangue e aplicação de 25mg PGF2α no D5 e abatidas no D6); G6: Baixa P4 + PE (implante de CIDR3 no D0 e aplicação de 25mg PGF2α no D0 e no D1, retirada do CIDR, colheita de sangue e aplicação de 25mg PGF2α no D5 e abatidas no D6). Os ovários foram retirados, o FD mensurado e dissecado para obtenção das células da granulosa. As concentrações plasmáticas e intrafoliculares de P4, E2 e IGF-1 livre foram mensuradas. As comparações do efeito da duração (G1 e G2 x G3 e G4), efeito do proestro (G3 e G4 x G5 e G6) e efeito da concentração de P4 e suas interações, sobre os níveis de ... / The aim of this study was to investigate the effect of P4 concentration on the abundance of LHR mRNA and steroidogenic enzymes in granulosa cells of the dominant follicle (DF) in Nellore heifers. High progesterone negatively affects the expression of LHR and steroidogenic enzymes, providing lower follicular development. 52 Nellore heifers were pre-synchronized (D-17: BE + 2 mg intravaginal device CIDR® progesterone; D-10: 12.5 mg PGF2a Lutalyse®; D-8: 0.5 mg ECP® and withdrawal CIDR®). Heifers who responded to the pre-synchronization (presence of CL) underwent follicular ablation and blood collection on D0 and randomly divided into 6 groups: G1: High P4-D5 (implant CIDR1 (new) on D0 and slaughtered after 5 days); G2: Low P4-D5 (implant CIDR3 (previously used for 18 days) on D0 and 25mg PGF2a in D0 and D1, D5 slaughter); G3: High P4-D6 (implant CIDR1 and slaughtered after 6 days); G4: Low P4-D6 (CIDR3 implant in D0 and application of 25mg PGF2a in D0 and D1, slaughter D6); G5: High P4 + PE (proestrus) (CIDR1 implant in D0, CIDR, blood collection and application of 25mg PGF2a in D5 and slaughtered in D6); G6: Low P4 + PE (CIDR3 implant in D0 and application of 25mg PGF2a in D0 and D1, CIDR, blood collection and application of 25mg PGF2a on D5, slaughtered on D6). The ovaries were removed, the DF measured and dissected to obtain the granulosa cells. The plasma concentrations and intrafollicular P4, E2 and free IGF-1 were measured. Comparisons of the effect of lenght (G1 e G2 x G3 e G4), proestrus effect (G3 e G4 x G5 e G6) and the effect of P4 and their interactions on the LHR mRNA levels and steroidogenic enzymes were performed by ANOVA. Granulosa cells from DF exposed to higher concentration of P4 showed lower mRNA abundance of the LHR, aromatase and 3β-HSD (P <0.05). In conclusion, the high concentration of P4 leads to lower expression of LHR and 3β-HSD in granulosa cells independently ...
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Efeito da progesterona na expressão do RNAm do receptor de LH e enzimas esteroidogênicas reguladoras do desenvolvimento folicular em células da granulosa de novilhas nelore /

Dias, Henrique Pedro. January 2015 (has links)
Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Anthony Cesar de Souza Castilho / Banca: Mario Binelli / Banca: José Luiz Moraes Vasconcelos / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito da concentração de P4 sobre a abundância de RNAm do LHR e enzimas esteroidogênicas em células da granulosa de folículo dominante (FD) em novilhas Nelore. Hipotetizamos que a alta progesterona afetaria negativamente a expressão do LHR e enzimas esteroidogênicas proporcionando menor desenvolvimento folicular. Para tanto, 52 novilhas Nelore foram pré-sincronizadas (D-17: 2mg BE + dispositivo intravaginal de progesterona CIDR®; D-10: 12,5mg PGF2α Lutalyse®; D-8: 0,5 mg ECP® e retirada CIDR®). As novilhas que responderam à présincronização (presença de CL) foram submetidas à ablação folicular e colheita de sangue no D0 e aleatoriamente distribuídas em 6 grupos: G1: Alta P4-D5 (implante de CIDR1 (novo) no D0 e abatidas após 5 dias); G2: Baixa P4-D5 (implante de CIDR3 (previamente utilizado por 18 dias) no D0 e aplicação de 25mg PGF2α no D0 e no D1, abate no D5); G3: Alta P4-D6 (implante de CIDR1 e abatidas após 6 dias); G4: Baixa P4- D6 (implante de CIDR3 no D0 e aplicação de 25mg PGF2α no D0 e no D1, abate no D6); G5: Alta P4 + PE (proestro) (implante de CIDR1 no D0, retirada do CIDR, colheita de sangue e aplicação de 25mg PGF2α no D5 e abatidas no D6); G6: Baixa P4 + PE (implante de CIDR3 no D0 e aplicação de 25mg PGF2α no D0 e no D1, retirada do CIDR, colheita de sangue e aplicação de 25mg PGF2α no D5 e abatidas no D6). Os ovários foram retirados, o FD mensurado e dissecado para obtenção das células da granulosa. As concentrações plasmáticas e intrafoliculares de P4, E2 e IGF-1 livre foram mensuradas. As comparações do efeito da duração (G1 e G2 x G3 e G4), efeito do proestro (G3 e G4 x G5 e G6) e efeito da concentração de P4 e suas interações, sobre os níveis de ... / Abstract: The aim of this study was to investigate the effect of P4 concentration on the abundance of LHR mRNA and steroidogenic enzymes in granulosa cells of the dominant follicle (DF) in Nellore heifers. High progesterone negatively affects the expression of LHR and steroidogenic enzymes, providing lower follicular development. 52 Nellore heifers were pre-synchronized (D-17: BE + 2 mg intravaginal device CIDR® progesterone; D-10: 12.5 mg PGF2a Lutalyse®; D-8: 0.5 mg ECP® and withdrawal CIDR®). Heifers who responded to the pre-synchronization (presence of CL) underwent follicular ablation and blood collection on D0 and randomly divided into 6 groups: G1: High P4-D5 (implant CIDR1 (new) on D0 and slaughtered after 5 days); G2: Low P4-D5 (implant CIDR3 (previously used for 18 days) on D0 and 25mg PGF2a in D0 and D1, D5 slaughter); G3: High P4-D6 (implant CIDR1 and slaughtered after 6 days); G4: Low P4-D6 (CIDR3 implant in D0 and application of 25mg PGF2a in D0 and D1, slaughter D6); G5: High P4 + PE (proestrus) (CIDR1 implant in D0, CIDR, blood collection and application of 25mg PGF2a in D5 and slaughtered in D6); G6: Low P4 + PE (CIDR3 implant in D0 and application of 25mg PGF2a in D0 and D1, CIDR, blood collection and application of 25mg PGF2a on D5, slaughtered on D6). The ovaries were removed, the DF measured and dissected to obtain the granulosa cells. The plasma concentrations and intrafollicular P4, E2 and free IGF-1 were measured. Comparisons of the effect of lenght (G1 e G2 x G3 e G4), proestrus effect (G3 e G4 x G5 e G6) and the effect of P4 and their interactions on the LHR mRNA levels and steroidogenic enzymes were performed by ANOVA. Granulosa cells from DF exposed to higher concentration of P4 showed lower mRNA abundance of the LHR, aromatase and 3β-HSD (P <0.05). In conclusion, the high concentration of P4 leads to lower expression of LHR and 3β-HSD in granulosa cells independently ... / Mestre
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Efeitos da clonagem na inativação do cromossomo X e da regulação nutricional do metabolismo da metionina na qualidade ovocitária em bovinos

Ferreira, Allice Rodrigues [UNESP] 01 July 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-01Bitstream added on 2014-06-13T20:26:11Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_ar_dr_botfmvz.pdf: 1429391 bytes, checksum: 8f14684d6c31152b88742021cd3eb683 (MD5) / Os objetivos deste estudo foram: 1) Avaliar a expressão alelo-específica do gene monoamina oxidase de tipo A (MAOA), presente no cromossomo X e sujeito a inativação, em embriões produzidos in vivo e por transferência nuclear (TN). Para análise foram utilizadas biópsias da massa celular interna (MCI) e do trofoblasto (TF) dos embriões; 2) Avaliar se a carência de S e Co (Grupo -S-Co) na dieta, ou a suplementação com Metionina e Colina encapsuladas (Grupo +Met+Col) afetaria os níveis bioquímicos sanguíneos de componentes do ciclo da metionina e do metabolismo de glicose, expressão de genes ligados ao ciclo de um carbono em células do cumulus, qualidade ovocitária e taxa de embriões. Foram oferecidas três dietas com níveis diferentes de Co e S para novilhas da raça Nelore, alocadas em 10 animais/grupo. Após 3 meses de dieta os folículos ovarianos das novilhas foram aspirados semanalmente durante 7 semanas. Para a ICX, nos embriões in vivo detectou-se a presença dos dois alelos, tanto na MCI quanto no TF. Da mesma forma, encontrou-se a expressão dos dois alelos do gene MAO-A em embriões TN, mas com uma prevalência da detecção do alelo A comparado ao G na MCI e no TF. Nenhuma diferença foi encontrada entre +Met+Col e o grupo controle. O grupo -S-Co teve diferença do grupo controle para homocisteína (13,7 vs. 10,6; p<0,001), ácido fólico (29,6 vs. 26,0; p=0,011), B12 (143,8 vs. 165,6; p<0,001), IGF-I (375,3 vs. 410,2; p=0,034), e glicose (82,2 vs. 76,2; p=0,003). Os genes MAT2B e DNMT1 foram menos expressos no grupo - S-Co comparado ao controle quando normalizados pelos genes endógenos GAPDH (MAT2B p=0,05; DNMT1 p=0,03) e β-Actina (MAT2B p=0,06; DNMT1 p=0,01). As novilhas do grupo -S-Co produziram menor número de ovócitos por animal comparado ao grupo controle (13,81 vs 17,79; p=0,0438), sem diferença para a produção embrionária / The objectives of this study were: 1) to assess allele-specific expression of the monoamine oxidase type A (MAO-A) gene, which is located on the X chromosome, in inner cell mass (ICM) and trophoblast (TF) of embryos produced in vivo and by somatic cell nuclear transfer (SCNT); 2) to evaluate the influence of different levels of dietary sulfur (S), cobalt (Co), methionine and choline on the blood plasma levels of homocysteine, folic acid, B12, IGF-I, glucose and insulin; oocyte and in vitro embryo production; and the expression of genes codifying key enzymes of the one-carbon cycle and DNA methylation in cumulus cells. Three diets with different levels of Co, S, methionine and choline were given for Nellore heifers (n=10 per group). Regards to the MAO-A expression, both alleles were detected in in vivo and by SCNT produced embryos both in ICM and TF. However, a higher frequency of the mono-allelic expression of a specific allele was observed in SCNT embryos. No differences were found between the +Meth+Chol and control groups. The -S-Co group differed from the control in homocysteine levels (13.7 vs. 10.6; p<0.001), folic acid levels (29.6 vs. 26.0; p=0.011), B12 levels (143.8 vs. 165.6; p<0.001), IGF-I levels (375.3 vs. 410.2; p=0.034), and glucose levels (82.2 vs. 76.2; p=0.003). The MAT2B and DNMT1 genes were expressed less in the -S-Co group compared to the control when normalized by the GAPDH (MAT2B p=0.05; DNMT1 p=0.03) and β-Actin (MAT2B p=0.06; DNMT1 p=0.01) endogenous genes. Heifers from the -S-Co group produced lower numbers of oocytes per animal compared to the control group (13.81 vs. 17.79; p=0.0438), but no differences were observed in embryo production
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Remoção de bezerros e/ou ECG na taxa de prenhez de vacas Nelore paridas submetidas à IATF e seus eleitos no desempenho das crias

Carvalho, Everton Rodolfo de [UNESP] 09 June 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-09Bitstream added on 2015-01-26T13:30:37Z : No. of bitstreams: 1 000789816.pdf: 288859 bytes, checksum: fd854d222c92768d7558bea239a2c308 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivou-se avaliar a taxa de prenhez de vacas Nelore paridas sincronizadas com protocolo de IATF e submetidas a três diferentes tratamentos: remoção de bezerros (RB), aplicação de gonadotrofina coriônica equina (eCG) e a associação de RB e eCG (RB+eCG). Foram utilizadas 2643 matrizes, entre elas 2044 multíparas e 599 primíparas em duas estações de monta consecutivas, utilizando o mesmo protocolo de IATF a base de P4 e E2. No primeiro ano as vacas foram inseminadas com média de 91,9±16,5 dias pós-parto, já no segundo com média de 51,4±8,38 dias. A taxa de prenhez foi de 56,1% e diferiu entre as EM (P<0,01), no segundo ano foi maior (60,1%) que no primeiro (52,2%), porém não houve interação entre ano e tratamento (P=0,30). Vacas multíparas tenderam (P=0,08) a ter maior prenhez (56,9%) do que primíparas (53,0%). Houve uma tendência de interação para ordem e tratamentos (P=0,06) na taxa de prenhez, em multíparas maior para RB (60,7%) e eCG (56,3%) do que para RB+eCG (53,9%), e em primíparas não foi diferente. Em multíparas com escore de condição corporal (ECC) <2,75 a taxa de prenhez para RB (55,2%) e eCG (54,4%) foram semelhantes e maiores que RB+eCG (45,1%), e em ECC ≥2,75 não foi diferente. Para primíparas não houve interação entre ECC e tratamentos (P=0,13). No segundo ano foram avaliadas a manifestação de estro e a ciclicidade ao início do protocolo. A manifestação de estro foi diferente entre os tratamentos (P<0,01), para tratamento com RB (70,2%) e RB+eCG (68,1%) foi maior do que eCG (55,2%). Vacas com presença de CL tratadas com RB (67,5%) e RB+eCG (70,6%) tiveram maior prenhez que o eCG (46,8%), já em vacas sem CL não foi diferente. As vacas foram classificadas de acordo com o peso dos bezerros na desmama (210 dias), em maior ou menor que a mediana de pesos (>Mediana ou <Mediana). No primeiro ano não houve interação entre peso e taxa de prenhez, já no segundo ano vacas que desmamaram ... / The experiment aimed to evaluate pregnancy rate of Nelore cows calved synchronized with TAI protocol and subjected to three different treatments: calf removal (CR), application of equine chorionic gonadotropin (eCG) and the association of CR and eCG (CR+eCG). Animals were used in 2643, including 599 primiparous and multiparous 2044 in two consecutive breeding seasons (BS), and all the animals were synchronized with the same TAI protocol based P4 and E2. The first year the cows were served with 91.9±16.5 days postpartum medium, and the second year with 51.4±8.38 days. The mean pregnancy rate of cows was 56.1 % and differed between BS (P<0.01) in the second year was higher (60.1%) than in the first (52.2%), but no interaction between year and treatment (P=0.30). Multiparous cows tended (P = 0.08) to have a higher pregnancy rate (56.9%) than primiparous (53.0%). There was a tendency interaction in pregnancy rate between order and treatments (P=0.06), multiparous pregnancy rate was higher for CR (60.7%) and eCG (56.3%) than for CR+eCG (53.9 %), and primiparous was not different. In multiparous with body score condition (BCS) <2.75 pregnancy rate among treatments (55.2%, 54.4 % and 45.1 %) was similar to CR and eCG, and both greater CR+eCG, respectively. As for BCS ≥2.75 the pregnancy rate between treatments was not different. In primiparous no interaction between BCS and treatments (P=0.13). In the second year were detected estrous behavior and cyclicity at beginning of protocol. The rate of heat detection was different between treatments (P<0.01), whereas cows treated with CR (70.2%) and CR+eCG (68.1%) had higher expression of estrus than eCG (55.2%). Cows with presence of CL treated with CR (67.5%) and CR+eCG (70.6 %) were higher pregnancy rate than eCG (50.0%), and cows without CL was not different. The cows was divided in two weaning weight classes (210 days), higher our less that median (>Median our <Median). In the first year not ...
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Remoção de bezerros e/ou ECG na taxa de prenhez de vacas Nelore paridas submetidas à IATF e seus eleitos no desempenho das crias /

Carvalho, Everton Rodolfo de. January 2014 (has links)
Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Roberto Sartori Filho / Banca: Ricarda Maria dos Santos / Resumo: Objetivou-se avaliar a taxa de prenhez de vacas Nelore paridas sincronizadas com protocolo de IATF e submetidas a três diferentes tratamentos: remoção de bezerros (RB), aplicação de gonadotrofina coriônica equina (eCG) e a associação de RB e eCG (RB+eCG). Foram utilizadas 2643 matrizes, entre elas 2044 multíparas e 599 primíparas em duas estações de monta consecutivas, utilizando o mesmo protocolo de IATF a base de P4 e E2. No primeiro ano as vacas foram inseminadas com média de 91,9±16,5 dias pós-parto, já no segundo com média de 51,4±8,38 dias. A taxa de prenhez foi de 56,1% e diferiu entre as EM (P<0,01), no segundo ano foi maior (60,1%) que no primeiro (52,2%), porém não houve interação entre ano e tratamento (P=0,30). Vacas multíparas tenderam (P=0,08) a ter maior prenhez (56,9%) do que primíparas (53,0%). Houve uma tendência de interação para ordem e tratamentos (P=0,06) na taxa de prenhez, em multíparas maior para RB (60,7%) e eCG (56,3%) do que para RB+eCG (53,9%), e em primíparas não foi diferente. Em multíparas com escore de condição corporal (ECC) <2,75 a taxa de prenhez para RB (55,2%) e eCG (54,4%) foram semelhantes e maiores que RB+eCG (45,1%), e em ECC ≥2,75 não foi diferente. Para primíparas não houve interação entre ECC e tratamentos (P=0,13). No segundo ano foram avaliadas a manifestação de estro e a ciclicidade ao início do protocolo. A manifestação de estro foi diferente entre os tratamentos (P<0,01), para tratamento com RB (70,2%) e RB+eCG (68,1%) foi maior do que eCG (55,2%). Vacas com presença de CL tratadas com RB (67,5%) e RB+eCG (70,6%) tiveram maior prenhez que o eCG (46,8%), já em vacas sem CL não foi diferente. As vacas foram classificadas de acordo com o peso dos bezerros na desmama (210 dias), em maior ou menor que a mediana de pesos (>Mediana ou <Mediana). No primeiro ano não houve interação entre peso e taxa de prenhez, já no segundo ano vacas que desmamaram ... / Abstract: The experiment aimed to evaluate pregnancy rate of Nelore cows calved synchronized with TAI protocol and subjected to three different treatments: calf removal (CR), application of equine chorionic gonadotropin (eCG) and the association of CR and eCG (CR+eCG). Animals were used in 2643, including 599 primiparous and multiparous 2044 in two consecutive breeding seasons (BS), and all the animals were synchronized with the same TAI protocol based P4 and E2. The first year the cows were served with 91.9±16.5 days postpartum medium, and the second year with 51.4±8.38 days. The mean pregnancy rate of cows was 56.1 % and differed between BS (P<0.01) in the second year was higher (60.1%) than in the first (52.2%), but no interaction between year and treatment (P=0.30). Multiparous cows tended (P = 0.08) to have a higher pregnancy rate (56.9%) than primiparous (53.0%). There was a tendency interaction in pregnancy rate between order and treatments (P=0.06), multiparous pregnancy rate was higher for CR (60.7%) and eCG (56.3%) than for CR+eCG (53.9 %), and primiparous was not different. In multiparous with body score condition (BCS) <2.75 pregnancy rate among treatments (55.2%, 54.4 % and 45.1 %) was similar to CR and eCG, and both greater CR+eCG, respectively. As for BCS ≥2.75 the pregnancy rate between treatments was not different. In primiparous no interaction between BCS and treatments (P=0.13). In the second year were detected estrous behavior and cyclicity at beginning of protocol. The rate of heat detection was different between treatments (P<0.01), whereas cows treated with CR (70.2%) and CR+eCG (68.1%) had higher expression of estrus than eCG (55.2%). Cows with presence of CL treated with CR (67.5%) and CR+eCG (70.6 %) were higher pregnancy rate than eCG (50.0%), and cows without CL was not different. The cows was divided in two weaning weight classes (210 days), higher our less that median (>Median our <Median). In the first year not ... / Mestre
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Efeitos da clonagem na inativação do cromossomo X e da regulação nutricional do metabolismo da metionina na qualidade ovocitária em bovinos /

Ferreira, Allice Rodrigues. January 2013 (has links)
Orientador: Roberto Sartori Filho / Coorientador: Mauricio Machaim Franco / Banca: Milo Charles Wiltbank / Banca: Margot Alves Nunes Dode / Banca: José Buranti Junior / Banca: João Carlos Pinheiro ferreira / Resumo: Os objetivos deste estudo foram: 1) Avaliar a expressão alelo-específica do gene monoamina oxidase de tipo A (MAOA), presente no cromossomo X e sujeito a inativação, em embriões produzidos in vivo e por transferência nuclear (TN). Para análise foram utilizadas biópsias da massa celular interna (MCI) e do trofoblasto (TF) dos embriões; 2) Avaliar se a carência de S e Co (Grupo -S-Co) na dieta, ou a suplementação com Metionina e Colina encapsuladas (Grupo +Met+Col) afetaria os níveis bioquímicos sanguíneos de componentes do ciclo da metionina e do metabolismo de glicose, expressão de genes ligados ao ciclo de um carbono em células do cumulus, qualidade ovocitária e taxa de embriões. Foram oferecidas três dietas com níveis diferentes de Co e S para novilhas da raça Nelore, alocadas em 10 animais/grupo. Após 3 meses de dieta os folículos ovarianos das novilhas foram aspirados semanalmente durante 7 semanas. Para a ICX, nos embriões in vivo detectou-se a presença dos dois alelos, tanto na MCI quanto no TF. Da mesma forma, encontrou-se a expressão dos dois alelos do gene MAO-A em embriões TN, mas com uma prevalência da detecção do alelo A comparado ao G na MCI e no TF. Nenhuma diferença foi encontrada entre +Met+Col e o grupo controle. O grupo -S-Co teve diferença do grupo controle para homocisteína (13,7 vs. 10,6; p<0,001), ácido fólico (29,6 vs. 26,0; p=0,011), B12 (143,8 vs. 165,6; p<0,001), IGF-I (375,3 vs. 410,2; p=0,034), e glicose (82,2 vs. 76,2; p=0,003). Os genes MAT2B e DNMT1 foram menos expressos no grupo - S-Co comparado ao controle quando normalizados pelos genes endógenos GAPDH (MAT2B p=0,05; DNMT1 p=0,03) e β-Actina (MAT2B p=0,06; DNMT1 p=0,01). As novilhas do grupo -S-Co produziram menor número de ovócitos por animal comparado ao grupo controle (13,81 vs 17,79; p=0,0438), sem diferença para a produção embrionária / Abstract: The objectives of this study were: 1) to assess allele-specific expression of the monoamine oxidase type A (MAO-A) gene, which is located on the X chromosome, in inner cell mass (ICM) and trophoblast (TF) of embryos produced in vivo and by somatic cell nuclear transfer (SCNT); 2) to evaluate the influence of different levels of dietary sulfur (S), cobalt (Co), methionine and choline on the blood plasma levels of homocysteine, folic acid, B12, IGF-I, glucose and insulin; oocyte and in vitro embryo production; and the expression of genes codifying key enzymes of the one-carbon cycle and DNA methylation in cumulus cells. Three diets with different levels of Co, S, methionine and choline were given for Nellore heifers (n=10 per group). Regards to the MAO-A expression, both alleles were detected in in vivo and by SCNT produced embryos both in ICM and TF. However, a higher frequency of the mono-allelic expression of a specific allele was observed in SCNT embryos. No differences were found between the +Meth+Chol and control groups. The -S-Co group differed from the control in homocysteine levels (13.7 vs. 10.6; p<0.001), folic acid levels (29.6 vs. 26.0; p=0.011), B12 levels (143.8 vs. 165.6; p<0.001), IGF-I levels (375.3 vs. 410.2; p=0.034), and glucose levels (82.2 vs. 76.2; p=0.003). The MAT2B and DNMT1 genes were expressed less in the -S-Co group compared to the control when normalized by the GAPDH (MAT2B p=0.05; DNMT1 p=0.03) and β-Actin (MAT2B p=0.06; DNMT1 p=0.01) endogenous genes. Heifers from the -S-Co group produced lower numbers of oocytes per animal compared to the control group (13.81 vs. 17.79; p=0.0438), but no differences were observed in embryo production / Doutor
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Determinação da taxa de ovulação e sua relação com diâmetro folicular e isoformas de mRNA para receptor de LH, em vacas da raça Nelore

Simões, Renato Arantes Lima [UNESP] 29 July 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-29Bitstream added on 2014-06-13T19:32:29Z : No. of bitstreams: 1 simoes_ral_me_botib.pdf: 373207 bytes, checksum: 81fc46acebb89383a1fee98db6390faf (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivou-se com o presente trabalho verificar a relação entre diâmetro folicular, taxa de ovulação e a expressão gênica das isoformas do receptor de LH em vacas da raça Nelore. O experimento 1 foi realizado para verificar a dose mínima de LH capaz de induzir ovulação em folículos com diâmetro entre 10 e 11 mm. Vacas Nelore (n=20) foram submetidas à sincronização da ovulação e o crescimento folicular passou a ser acompanhado diariamente por ultrassonografia (US). Quando os folículos atingiram diâmetro entre 10 e 11 mm, os animais foram divididos em quatro grupos para receber diferentes doses de LH (Lutropin-V®, Bioniche, Ontario, Canada; IM): 1,56; 3,12; 6,25 e 12,5 mg. Os dados foram analisados pelo Teste Exato de Fisher (PROC FREQ, do SAS). As taxas de ovulação foram 0 (0/5), 80 (4/5), 80 (4/5) e 80% (4/5), respectivamente, ocorrendo diferença significativa entre o grupo 1,56 mg e os demais (p<0,02). No experimento 2, foram utilizados 6,25 mg de LH para induzir ovulação em vacas Nelore (n=53) submetidas a sincronização da ovulação e divididas em cinco grupos de acordo com o diâmetro folicular (mm) no momento da administração de LH: Grupo 1 (7,0 a 7,5); Grupo 2 (7,6 a 8,0); Grupo 3 (8,1 a 8,5); Grupo 4 (8,6 a 9,0) e Grupo 5 (9,1 a 10,0). Os resultados foram analisados por Regressão Logística (PROC GENMOD, do SAS). As taxas de ovulação foram 0 (0/11), 20 (2/10), 36 (4/11), 36 (4/11) e 90% (9/10), respectivamente. Houve diferença significativa entre G5 e os demais grupos (p<0,01). Ao associar G1+G2 (7,0 a 8,0 mm), G3+G4 (8,1 a 9,0 mm) e G5 (9,1 a 10,0 mm) as taxas de ovulação foram 9 (2/21), 36 (8/22) e 90% (9/10), respectivamente. Houve diferença significativa entre G1+G2 vs G5 (p<0,01), G3+G4 vs G5 (p<0,02) e G1+G2 vs G3+G4 (p<0,03). Após a administração de LH, o diâmetro do menor folículo capaz de ovular foi 7,65 mm. No experimento... / The aim of the present experiment was to verify the relationship between follicular diameter, ovulation rate and gene expression of LH receptor isoforms, in Nellore cows. Experiment 1 was performed to determine the lowest LH dose necessary to induce ovulation in follicles with 10 to 11 mm in diameter. Nellore cows (n=20) had their ovulation induced by hormonal treatment, and afterwards follicular growth was daily observed by ultrasonography (US). When the follicles reached 10 to 11 mm diameter, the cows were randomly allocated in four groups and treated with different doses of LH (Lutropin-V®, Bioniche, Ontario, Canada): Groups 1.56; 3.12; 6.25 and 12.5 mg. The data were analyzed by Fisher’s Exact Test (PROC FREQ, SAS). The ovulation rates were 0 (0/5), 80 (4/5), 80 (4/5) e 80% (4/5), respectively, and it was lower in group 1.56 when compared to the others (P<0.02). In experiment 2, the 6.25 mg LH dose was chosen to induce ovulation in Nellore cows (n=53), submitted to the same hormonal treatment used in experiment 1, and randomly allocated in five groups according to follicular diameter (mm) at the time of LH administration: Group 1 (7.0-7.5); Group 2 (7.6-8.0); Group 3 (8.1-8.5); Group 4 (8.6-9.0) and Group 5 (9.1-10.0). The results were analyzed by Logistic Regression (PROC GENMOD, SAS). The ovulation rates were 0 (0/11), 20 (2/10), 36 (4/11), 36 (4/11) and 90% (9/10), respectively, for G1, G2, G3, G4 and G5. There was significant difference between G5 and the others groups (P<0.01). When data from two groups (except Group 5) were combined G1+G2 (7.0-8.0 mm), G3+G4 (8.1-9.0 mm) and G5 (9.1-10.0) ovulation rates were, respectively, 9 (2/21), 36 (8/22) e 90% (9/10). There were significant differences when comparing G1+G2 v. G5 (P<0.01), G3+G4 v. G5 (P<0.02) and G1+G2 v. G3+G4 (P<0.03). After LH application, the smallest follicle that ovulated had a diameter of 7.65 mm. In ... (Complete abstract click electronic access below)
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Restabelecimento da atividade ovariana em vacas nelore (Bos taurus indicus) tratadas com implante subcutâneo de agonista de GnRH (deslorelina) durante 70 dias

Destro, Flavia Caroline [UNESP] 25 July 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-25Bitstream added on 2014-06-13T18:58:54Z : No. of bitstreams: 1 destro_fc_me_botfmvz.pdf: 752446 bytes, checksum: f518354aa765561a5fac57e44fd72386 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Avaliar em vacas Nelore (Bos indicus) tratadas por longo prazo (70 dias) com implantes subcutâneos de agonista de GnRH (deslorelina- -Suprelorin® 4,7 mg) a dinâmica folicular ovariana e as concentrações plasmáticas do hormônio folículo estimulante (FSH), do hormônio luteinizante (LH) e da progesterona (P4) durante os últimos 20 dias do tratamento, e a dinâmica folicular ovariana e as concentrações de P4 da remoção do implante até a ovulação. Quinze vacas Nelore com escore de condição corporal (ECC) 3 tiveram sua ovulação sincronizada. No dia da detecção da ovulação, 10 animais foram selecionados para serem submetidos ao tratamento com implante subcutâneo de deslorelina. Nos últimos 20 dias do período de tratamento, foram realizados exames ultrassonográficos, a cada 2-3 dias, para caracterização da dinâmica folicular e registro dos folículos, que foram classificados de acordo com o diâmetro como: I (< 0,4 cm), II (0,4-0,6cm) e III (> 0,6cm). Neste mesmo período foram coletadas amostras de sangue para mensuração das concentrações plasmáticas de FSH, LH e P4. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as diferenças entre as médias foram determinadas através do teste de Tukey. Durante os 70 dias de tratamento com a deslorelina nenhum animal ovulou, apesar de não ter sido observado a supressão do desenvolvimento folicular. Esse achado ultrassonográfico foi confirmado pelos resultados da concentração plasmática de P4, que se manteve em média abaixo de 0,16 ng/mL. Durante os últimos 20 dias de tratamento, quatro animais apresentaram desenvolvimento folicular com diâmetro máximo variando entre 0,4 a 0,6 cm, enquanto que nos três restantes foram observados diâmetros superiores a 0,9 a 1,2 cm. As secreções de FSH e LH não foram abolidas ao longo do estudo. Após a remoção... / The objective of the present study was to evaluate in Nelore cows (Bos indicus) treated for a long period (70 days) with subcutaneous implants of deslorelin (GnRH agonist-Suprelorin® 4,7mg) the ovarian follicular dynamics and plasma concentrations of follicle-stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and progesterone (P4) during the last 20 days of treatment and the ovarian follicular dynamics and plasma concentrations of P4 from the removal of the implant until the ovulation. Fifteen Nelore cows with body condition score (BCS) 3 had their ovulation synchronized. At the day of the detection of ovulation 10 animals were randomly selected to receive subcutaneous implant of deslorelin. In the last 20 days of the period of implantation, ultrasonographic scans were realized, every 2-3 days, in order to characterize the follicular dynamics and to register the follicles which were classified according to diameter as: I (< 0,4 cm), II (0,4-0,6cm) and III (> 0,6cm). Simultaneously, blood samples were collected to measure plasma concentrations of FSH, LH and P4. Results were tested by analysis of variance and difference between means were defined using Tukey’s test. During the 70 days of deslorelin implantation none of the animals ovulated, despite of the implant not suppressing all follicular development. This ultrasonographic finding was confirmed by the results of P4 plasma concentrations, which was kept in average below 0,16 ng/mL. During the last 20 days of implantation, four animals presented follicular development with maximum diameter ranging through 0,4 to 0,6 cm while in the three remaining animals the observed diameter ranged through 0,9 to 1,2 cm. The secretion of LH and FSH was not entirely suppressed during the study. After the removal of the deslorelin subcutaneous implant (Suprelorin® 4,7 mg), the period of... (Complete abstract click electronic access below)
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Restabelecimento da atividade ovariana em vacas nelore (Bos taurus indicus) tratadas com implante subcutâneo de agonista de GnRH (deslorelina) durante 70 dias /

Destro, Flavia Caroline. January 2012 (has links)
Orientador: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Eunice Oba / Banca: Lindsay Unno Gimenes / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Thales Ricardo Rigo Barreiros / Resumo: Avaliar em vacas Nelore (Bos indicus) tratadas por longo prazo (70 dias) com implantes subcutâneos de agonista de GnRH (deslorelina- -Suprelorin® 4,7 mg) a dinâmica folicular ovariana e as concentrações plasmáticas do hormônio folículo estimulante (FSH), do hormônio luteinizante (LH) e da progesterona (P4) durante os últimos 20 dias do tratamento, e a dinâmica folicular ovariana e as concentrações de P4 da remoção do implante até a ovulação. Quinze vacas Nelore com escore de condição corporal (ECC) 3 tiveram sua ovulação sincronizada. No dia da detecção da ovulação, 10 animais foram selecionados para serem submetidos ao tratamento com implante subcutâneo de deslorelina. Nos últimos 20 dias do período de tratamento, foram realizados exames ultrassonográficos, a cada 2-3 dias, para caracterização da dinâmica folicular e registro dos folículos, que foram classificados de acordo com o diâmetro como: I (< 0,4 cm), II (0,4-0,6cm) e III (> 0,6cm). Neste mesmo período foram coletadas amostras de sangue para mensuração das concentrações plasmáticas de FSH, LH e P4. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as diferenças entre as médias foram determinadas através do teste de Tukey. Durante os 70 dias de tratamento com a deslorelina nenhum animal ovulou, apesar de não ter sido observado a supressão do desenvolvimento folicular. Esse achado ultrassonográfico foi confirmado pelos resultados da concentração plasmática de P4, que se manteve em média abaixo de 0,16 ng/mL. Durante os últimos 20 dias de tratamento, quatro animais apresentaram desenvolvimento folicular com diâmetro máximo variando entre 0,4 a 0,6 cm, enquanto que nos três restantes foram observados diâmetros superiores a 0,9 a 1,2 cm. As secreções de FSH e LH não foram abolidas ao longo do estudo. Após a remoção... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of the present study was to evaluate in Nelore cows (Bos indicus) treated for a long period (70 days) with subcutaneous implants of deslorelin (GnRH agonist-Suprelorin® 4,7mg) the ovarian follicular dynamics and plasma concentrations of follicle-stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and progesterone (P4) during the last 20 days of treatment and the ovarian follicular dynamics and plasma concentrations of P4 from the removal of the implant until the ovulation. Fifteen Nelore cows with body condition score (BCS) 3 had their ovulation synchronized. At the day of the detection of ovulation 10 animals were randomly selected to receive subcutaneous implant of deslorelin. In the last 20 days of the period of implantation, ultrasonographic scans were realized, every 2-3 days, in order to characterize the follicular dynamics and to register the follicles which were classified according to diameter as: I (< 0,4 cm), II (0,4-0,6cm) and III (> 0,6cm). Simultaneously, blood samples were collected to measure plasma concentrations of FSH, LH and P4. Results were tested by analysis of variance and difference between means were defined using Tukey's test. During the 70 days of deslorelin implantation none of the animals ovulated, despite of the implant not suppressing all follicular development. This ultrasonographic finding was confirmed by the results of P4 plasma concentrations, which was kept in average below 0,16 ng/mL. During the last 20 days of implantation, four animals presented follicular development with maximum diameter ranging through 0,4 to 0,6 cm while in the three remaining animals the observed diameter ranged through 0,9 to 1,2 cm. The secretion of LH and FSH was not entirely suppressed during the study. After the removal of the deslorelin subcutaneous implant (Suprelorin® 4,7 mg), the period of... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Determinação da taxa de ovulação e sua relação com diâmetro folicular e isoformas de mRNA para receptor de LH, em vacas da raça Nelore /

Simões, Renato Arantes Lima. January 2009 (has links)
Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira / Resumo: Objetivou-se com o presente trabalho verificar a relação entre diâmetro folicular, taxa de ovulação e a expressão gênica das isoformas do receptor de LH em vacas da raça Nelore. O experimento 1 foi realizado para verificar a dose mínima de LH capaz de induzir ovulação em folículos com diâmetro entre 10 e 11 mm. Vacas Nelore (n=20) foram submetidas à sincronização da ovulação e o crescimento folicular passou a ser acompanhado diariamente por ultrassonografia (US). Quando os folículos atingiram diâmetro entre 10 e 11 mm, os animais foram divididos em quatro grupos para receber diferentes doses de LH (Lutropin-V®, Bioniche, Ontario, Canada; IM): 1,56; 3,12; 6,25 e 12,5 mg. Os dados foram analisados pelo Teste Exato de Fisher (PROC FREQ, do SAS). As taxas de ovulação foram 0 (0/5), 80 (4/5), 80 (4/5) e 80% (4/5), respectivamente, ocorrendo diferença significativa entre o grupo 1,56 mg e os demais (p<0,02). No experimento 2, foram utilizados 6,25 mg de LH para induzir ovulação em vacas Nelore (n=53) submetidas a sincronização da ovulação e divididas em cinco grupos de acordo com o diâmetro folicular (mm) no momento da administração de LH: Grupo 1 (7,0 a 7,5); Grupo 2 (7,6 a 8,0); Grupo 3 (8,1 a 8,5); Grupo 4 (8,6 a 9,0) e Grupo 5 (9,1 a 10,0). Os resultados foram analisados por Regressão Logística (PROC GENMOD, do SAS). As taxas de ovulação foram 0 (0/11), 20 (2/10), 36 (4/11), 36 (4/11) e 90% (9/10), respectivamente. Houve diferença significativa entre G5 e os demais grupos (p<0,01). Ao associar G1+G2 (7,0 a 8,0 mm), G3+G4 (8,1 a 9,0 mm) e G5 (9,1 a 10,0 mm) as taxas de ovulação foram 9 (2/21), 36 (8/22) e 90% (9/10), respectivamente. Houve diferença significativa entre G1+G2 vs G5 (p<0,01), G3+G4 vs G5 (p<0,02) e G1+G2 vs G3+G4 (p<0,03). Após a administração de LH, o diâmetro do menor folículo capaz de ovular foi 7,65 mm. No experimento ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present experiment was to verify the relationship between follicular diameter, ovulation rate and gene expression of LH receptor isoforms, in Nellore cows. Experiment 1 was performed to determine the lowest LH dose necessary to induce ovulation in follicles with 10 to 11 mm in diameter. Nellore cows (n=20) had their ovulation induced by hormonal treatment, and afterwards follicular growth was daily observed by ultrasonography (US). When the follicles reached 10 to 11 mm diameter, the cows were randomly allocated in four groups and treated with different doses of LH (Lutropin-V®, Bioniche, Ontario, Canada): Groups 1.56; 3.12; 6.25 and 12.5 mg. The data were analyzed by Fisher's Exact Test (PROC FREQ, SAS). The ovulation rates were 0 (0/5), 80 (4/5), 80 (4/5) e 80% (4/5), respectively, and it was lower in group 1.56 when compared to the others (P<0.02). In experiment 2, the 6.25 mg LH dose was chosen to induce ovulation in Nellore cows (n=53), submitted to the same hormonal treatment used in experiment 1, and randomly allocated in five groups according to follicular diameter (mm) at the time of LH administration: Group 1 (7.0-7.5); Group 2 (7.6-8.0); Group 3 (8.1-8.5); Group 4 (8.6-9.0) and Group 5 (9.1-10.0). The results were analyzed by Logistic Regression (PROC GENMOD, SAS). The ovulation rates were 0 (0/11), 20 (2/10), 36 (4/11), 36 (4/11) and 90% (9/10), respectively, for G1, G2, G3, G4 and G5. There was significant difference between G5 and the others groups (P<0.01). When data from two groups (except Group 5) were combined G1+G2 (7.0-8.0 mm), G3+G4 (8.1-9.0 mm) and G5 (9.1-10.0) ovulation rates were, respectively, 9 (2/21), 36 (8/22) e 90% (9/10). There were significant differences when comparing G1+G2 v. G5 (P<0.01), G3+G4 v. G5 (P<0.02) and G1+G2 v. G3+G4 (P<0.03). After LH application, the smallest follicle that ovulated had a diameter of 7.65 mm. In ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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