Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El óxido nítrico (NO) es un gas soluble sintetizado en diversas células a partir de Larginina, a través de una reacción de oxidación catalizada por las enzimas óxido nítrico sintasas (NOS). Se sintetiza en el endotelio vascular, y posee una potente acción vasodilatadora, que permite mantener una respuesta vascular adecuada a las crecientes demandas de flujo de sangre durante el ejercicio. En la sangre es oxidado a nitrito, que permanece estable en el plasma sanguíneo. Al mismo tiempo, el nitrito puede ser reducido a óxido nítrico en condiciones de hipoxia. El objetivo de este trabajo es describir la concentración plasmática de nitrito como metabolito estable del óxido nítrico en equinos FSC con diferente rendimiento hípico. Se utilizaron tres grupos de equinos FSC con diferente rendimiento. La muestra de sangre se obtuvo en la mañana, en condición de ayuno y reposo. Luego se centrifugó para obtener el plasma, y la concentración de nitrito se determinó por la prueba de Griess. Los resultados se expresan como μM de nitrito, indicándose valor promedio ± desviación estándar para cada grupo. El mayor valor se obtuvo en el grupo intermedio (226,96 ± 28,17), el cual difiere significativamente (p<0,05) respecto al grupo de bajo rendimiento (190,36 ± 26,81) y de alto rendimiento (157,94 ± 31,59). Este resultado se explica debido a que los grupos de rendimiento bajo e intermedio tienen un régimen de competencia similar (14,1 y 12,0 promedio de carreras corridas en últimos 6 meses respectivamente), en tanto para el grupo de alto rendimiento este promedio es de 6,7. A su vez, en el presente estudio la concentración de nitrito se correlacionó positivamente con el valor del VGA (ρ = 0,44). Estos hallazgos sugieren que la concentración de nitrito plasmática como indicador de actividad de NOS endotelial, no constituiría un biomarcador de rendimiento hípico en ejemplares con diferente régimen de training, pero podría representar una adaptación al ejercicio. / Nitric Oxide (NO) is a soluble gas synthesized in various cells from L-arginine through a oxidation reaction catalyzed by NO synthase (NOS). Nitric Oxide is synthesized in the vascular endothelium, and has potent vasodilating action, which enables to maintain adequate vascular response to growing demands of blood flow during exercise. In blood is oxidized to nitrite, that remains stable in blood plasma. At the same time nitrite can be reduced to NO under hypoxia. The objective of the study is to describe the plasma concentration of nitrite as a stable metabolite of nitric oxide in thoroughbreds with different performance. Three groups of thoroughbreds with different performance were used. The blood sample was obtained in the morning, at fasting condition and rest. Then centrifuged to obtain plasma, and the concentration of nitrite was determined by the Griess assay. Results are expressed as μM of nitrite, indicating average value ± standard deviation for each group. The highest value was obtained in the intermediate group (226,96 ± 28,17), which differed significantly (p <0,05) compared to the low performance group (190,36 ± 26,81) and high performance group (157,94 ± 31,59). This result is explained because the low and intermediate groups have a similar competition regime (14,1 and 12,0 average of races in last 6 months, respectively), while for high performance group this average is 6,7. In turn, the nitrite concentration was positively correlated with PCV (ρ = 0,44). These findings suggest that plasma nitrite concentration as an indicator of endothelial NOS activity, would not constitute a biomarker of performance in thoroughbreds with different training regime, but could represent an adaptation to exercise.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El oxido nítrico (NO) es un radical libre gaseoso de vida media, el cual participa en diversos procesos tanto fisiológicos como patológicos. En el sistema nervioso en particular, actúa normalmente como un mensajero neuronal regulando la transmisión sináptica; sin embargo en condiciones patológicas como en la epilepsia su síntesis puede verse alterada, en términos tales que su aumento puede favorecer la aparición de otros radicales libres, entre ellos el peroxinitrito, el cual es un potente agente neurotóxico. No obstante, además de su acción proepiléptica, el NO de acuerdo con algunas investigaciones presentaría también efectos antiepilépticos. Debido a esta dualidad de efectos, resulta relevante conocer con exactitud en qué condiciones esta molécula puede tomar uno u otro camino. El presente trabajo tiene como objetivo, evaluar en un modelo experimental de epilepsia en gatos, los niveles relativos de las tres isoformas de Oxido Nítrico Sintasa que producen NO, tanto nNOS, iNOS y eNOS en tres regiones cerebrales de bajo umbral a la epilepsia tales como el hipocampo, la amígdala y la corteza cerebral. Para ello se trabajó con tres grupos de gatos adultos, a los cuales se les implantó bilateralmente electrodos en las tres estructuras estudiadas, además de una cánula en hipocampo derecho. En dos de los grupos experimentales, a través de la cánula implantada crónicamente en hipocampo derecho, se inyectó AMPA como agente epileptogénico y solución salina en el grupo control. Uno de los grupos con epilepsia inducida fue sacrificado a las 24 horas y el otro grupo experimental fue sacrificado a los 5 días después de la inyección de AMPA, al igual que el grupo control que también fue sacrificado a los 5 días. Bajo anestesia profunda se extrajeron muestras bilaterales de tejido de las estructuras implantadas. Las muestras fueron procesadas para determinar la presencia de las isoformas nNOS, iNOS y eNOS, las cuales fueron identificadas por Dot Blot y cuantificadas por densitometría. En los dos grupos de gatos con epilepsia se observaron variaciones temporales y regionales respecto de los controles en los niveles de NOS; eNOS se encontró elevada a las 24 horas en corteza cerebral izquierda (p<0,05) y a los 5 días en hipocampo derecho (p<0,05) e izquierdo (p<0,05); por su parte nNOS aumentó a los 5 días tanto en hipocampo derecho (p<0,05) como en corteza cerebral izquierda (p<0,05); la iNOS se encontró elevada a los 5 días sólo en amígdala derecha (p<0,05). Los aumentos en los niveles de las diferentes isoformas de NOS, sugieren un compromiso y respuesta específica de las estructuras estudiadas en el proceso epiléptico, lo que plantea nuevas interrogantes a cerca de los tejidos y los lugares en que el NO actúa modulando los estados de hiperexcitabilidad neuronal

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Este estudio evaluó el efecto de la terapia antioxidante sobre la expresión de la isoenzima NOS en placenta de ovejas que gestaron en la altura, debido a que la hipoxia propia de este ambiente genera estrés oxidativo. Para ello se utilizaron dos grupos de ovejas, uno nativo de altura (HH), el otro proveniente del valle Lluta (500 msnm) (LH) que desarrollaron su gestación a una altitud de 3580 m. La mitad de cada grupo recibió diariamente suplementación oral de vitamina C (500 mg) y E (350 UI) durante la preñez. A los 100 días de gestación se midió la concentración plasmática de vitaminas antioxidantes y se determinó la presencia y actividad de isoenzimas NOS (nNOS, iNOS y eNOS), en 4 placentomas por cada animal. La concentración plasmática de vitaminas en ovejas suplementadas fueron dos a tres veces mayor que en ovejas no suplementadas. No se evidenció presencia de las enzimas iNOS y nNOS a través de la técnica de Western-Blot. La eNOS fue detectada en las muestras analizadas, siendo mayor la expresión en animales recién expuestos a la hipoxia (LH) que en nativos de esta condición (HH). La administración de vitaminas disminuyó significativamente la expresión de la enzima eNOS en el lado materno de la placenta. En cuanto a la actividad de esta enzima, fue detectada sólo para las isoformas dependientes de Ca+2, detectándose mayor actividad en la placenta fetal de animales suplementados con antioxidantes. Sin embargo, aún cuando la disparidad en el comportamiento de las porciones materna y fetal de la placenta podría estar relacionado a la presencia de diferentes rutas metabólicas, estas se traducen en una aparente mejora en la capacidad de transporte, ya que los fetos de los grupos suplementados logran un mejor crecimiento