Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-02Bitstream added on 2014-06-13T20:32:03Z : No. of bitstreams: 1 salvador_a_me_botfca.pdf: 3403486 bytes, checksum: af59e87163487d04855bf1057e26b9b7 (MD5) / A sociedade como um todo tem se preocupado com a contaminação do ambiente causada pelo uso de produtos químicos e muitas tentativas tem sido feitas para que se reduza a quantidade de herbicidas utilizada no controle de plantas daninhas. Há anos os produtores tem observado uma tendência de formação de manchas por várias espécies de plantas daninhas. A aplicação localizada é uma técnica que permite a variação da dose dos herbicidas de acordo com a variabilidade espacial dos alvos no campo. Dependendo do sistema adotado, mapas com a localização e características das plantas daninhas infestantes em um campo podem ser utilizados em aplicações localizadas de herbicidas. O objetivo deste trabalho foi comparar diferentes metodologias de mapeamento da distribuição espacial da infestação de plantas daninhas numa área de 3,9ha com milho em plantio direto sobre vegetação espontânea: mapeamento pelo caminhamento em grade de amostragem, mapeamento pelo caminhamento no contorno das manchas, mapeamento pelo deslocamento da colhedora no campo e mapeamento pela análise de imagens aéreas obtidas em baixa altitude de vôo. Para tanto foi utilizado um GPS de navegação para georreferenciar o perímetro das manchas localizadas na área. Uma grade de amostragem de 20x20m foi determinada com o uso de um DGPS, sendo amostradas a presença e porcentagem de cobertura em cada grade. A posição das plantas daninhas observadas durante a colheita foi georreferenciada com um DGP S conforme a plataforma da colhedora entrava ou saía de uma área de infestação. Diferentes tipos de câmeras foram utilizadas na obtenção das imagens da área sobrevoada por uma aeronave a uma altura de 300 a 500 m do solo. Marcas de referência foram colocas em 20 dos 101 pontos de coordenadas conhecidas que formavam a grade de amostragem para permitir o georreferenciamento das imagens... . / Society has been concerned with the environmental contamination caused by chemicals and attempts have been made to reduce herbicide weed control. Farmers have experienced for years that there is a tendency of a range of weed species to occur in patches. Patch spraying is a technique to minimize inputs of herbicides by applying it according to the weed patch position. Maps showing location and characteristics of weed infestation across the field can be used for patch spraying. Four different approaches for collecting georeferenced weed information to create weed maps were studied along the cycle of a corn crop in a no-tillage field of 3.9ha: manual surveying by field walking in sample grids, manual surveying by field walking at patch perimeters, manual surveying from the combine during the harvest and the use of low altitude aerial image analysis. The weed patches perimeter were georeferenced by walking with a GPS. A regular 20x20m grid sampling was established in the field with a DGPS and weed presence and percentage of coverage were determined at every grid point. Weed patches at the harvest time were georeferenced from the combine using a DGPS to record the patch position as the combine header passed through the patches. Different cameras were used to obtain images from an airplane flying 300 to 500 m above the ground level. Visible objects were placed at 20 of the 101 DGPS georeferenced grid points for afterwards image analysis using a Geographical Information System. Maps of weeds presence and position were generated with Idrisi32. The results showed that sampling percentage of coverage at grid was efficient to describe the spatial distribution of broadleaf weeds, even when it was present all over the area. The perimeter survey result to be an efficient method to map perennial weeds, mainly grass weeds. Digitalized images obtained from standard... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-28Bitstream added on 2014-06-13T19:58:44Z : No. of bitstreams: 1 toledonetto_p_me_araiq.pdf: 834223 bytes, checksum: 1d900ee9c7e53ef3b1ae4af19b4bbf87 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A presença de pesticidas em matrizes ambientais e biológicas vem sendo investigada há décadas e estudos sobre a atuação de baixas concentrações destes contaminantes, como possíveis alteradores endócrinos e agentes carcinogênicos, ainda são incipientes. Portanto, o desenvolvimento de métodos analíticos para determinação destes compostos em matrizes biológicas torna-se necessário para se ter uma estimativa da quantidade que pode ser bioacumulada e relacioná-la ao desenvolvimento de alterações em diversos tecidos do organismo. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um método eficiente e rápido para determinação de resíduos dos pesticidas dicofol, dieldrin, endosulfan e permetrina em matriz de tecido adiposo de ratos. Estes pesticidas foram selecionados por apresentarem controvérsias quanto aos efeitos nocivos que podem causar ao homem, como por exemplo desregulação do sistema endócrino e, coincidentemente, por terem sido encontrados pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) em matrizes vegetais consumidas pela população brasilerira nos últimos anos. A principal dificuldade do trabalho foi estabelecer um procedimento experimental que permitisse a remoção de lipídios. Nesse sentido diversas condições experimentais foram avaliadas para eliminação destas macromoléculas, entre elas: extração em fase sólida, dispersão da matriz em fase sólida, envolvendo combinações de diversos adsorventes e extração por congelamento da amostra. Finalmente o método otimizado incluiu a extração das amostras de tecido adiposo com hexano em banho de ultrasom, seguida da extração em fase sólida (alumina) utilizando uma alíquota (1 mL) do extrato, sendo a eluição processada com hexano:diclorometano e, finalmente a concentração do eluato a secura, sua redissolução em isooctano e análise por GC/ECD. O método foi validado com sucesso... / The presence of pesticides in environmental and biological materials have been known for decades, but studies regarding their low concentration on potential carcinogenic and endocrine disruption effects are only beggining. Therefore, the development of quantitative analytical methods for pesticides in complex biological samples is important not only to estimate pesticide accumulation but also to evaluate possible tissue damages. The aim of this work was to develop and validade a simple, fast and senstive method for the pesticides dicofol, dieldrin, endosulfan and permethrin in rat adipose tissue. These specific molecules have been selected because they are the most frequently found in fruit and vegetables consumed in Brazil, according a survey performed by the National Health Surveillance Agency (Anvisa) and because they have been recently found to affect the endocrine system. The stablishment of an efficient procedure to eliminate lipids was a very difficult step. Therefore, several combinations of sorbents and eluents were tested copled to solid phase extraction, matrix solid phase dispersion and sample freezing extraction. Finally the optimized method includes the extraction from rat adipose tissue samples with hexane in ultrasonic bath. The resulting extract is submitted to solid phase extraction using alumina and eluted with hexane:dichloromethane. Extracted solvent was dried and redissolved in isooctane and analysed by GC/ECD. The method was sucessfully validated by following parameters: linearity range (analytical curve in sample extract): 5 to 1200 ng g-1; recovery at three different levels of sample fortification (50, 100 and 500 ng g-1 for dieldrin and endosulfan, 500, 1000 and 5000 ng g-1 for dicofol and permethrin); accuracy (recovery:75 – 119%); precision (coefficient of variation: 3 – 19%); selectivity... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Georgino Honorato de Oliveira / Coorientador: Regina Vincenzi Oliveira / Banca: Maria Palmira Daflon Gremião / Banca: Antonio Cardozo dos Santos / Banca: Rosângela Gonçalves Peccinini / Banca: Silvana Aparecida Calafatti / Resumo: Clinicamente, os sintomas da intoxicação por organofosforados (OPs) são divididos em quatro categorias: síndrome colinérgica, síndrome intermediária, transtornos neuropsiquiátricos crônicos induzidos por OPs e neuropatia retardada induzida por OPs (NRIOP). Há estudos que comprovam a ocorrência de casos de NRIOP em seres humanos após intoxicação por metamidofós, porém existe grande dificuldade de estudar esta neuropatia no modelo experimental (galinha), devido à forte crise colinérgica que ocorre após a inibição da acetilcolinesterase (AChE). Uma possível explicação para tal diferença de efeito entre a espécie humana e a galinha é o fato de que os OPs possuem centros assimétricos e, assim sendo, se apresentam sob formas enantioméricas que podem apresentar diferenças de inibição da AChE e da esterase susceptível à neuropatia (ESNp). Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar, em sangue de galinhas e de seres humanos, em cérebro de galinhas (in vitro e in vivo) e em células da linhagem SH-SY5Y de neuroblastoma humano, a neurotoxicidade de formas enantioméricas de compostos organofosforados utilizados como praguicidas, tendo o metamidofós como protótipo e utilizando a AChE, butirilcolinesterase (BChE), ESNp e a calpaína como biomarcadores. Inicialmente, foi feita a separação dos enantiômeros do metamidofós utilizando a técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com emprego de fases estacionárias quirais de polissacarídeos, onde se obteve resolução de até 1,56 para os enantiômeros avaliados. A forma (+)-metamidofós apresentou maior toxicidade in vitro para a BChE em galinhas e para ESNp... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Clinically, the symptoms of organophosphorus (OP) poisoning are divided into four categories: acute cholinergic syndrome, intermediate syndrome, chronic organophosphorus-induced neuropsychiatric disorders (COPIND) and organophosphorus-induced delayed neuropathy (OPIDN). There are studies that prove the occurrence of OPIDN in humans after methamidophos poisoning, but there is great difficulty in studying this neuropathy in the experimental model (hen), due to strong cholinergic crisis that occurs after inhibition of acetylcholinesterase (AChE). One possible explanation for this difference in effect between humans and hens is the fact that the OPs have asymmetric centers and therefore, are presented as enantiomeric forms that may exhibit differences in inhibition of AChE and neuropathy target esterase (NTE). Thus, the objective of this study was to evaluate, in the blood of hens and humans, in the brains of chickens (in vitro and in vivo) and in the SH-SY5Y human neuroblastoma cells, the neurotoxicity of enantiomeric forms of OPs used as pesticides, having methamidophos as the prototype and using AChE, butyrylcholinesterase (BChE), NTE and calpain as biomarkers. Initially, the complete separation of the methamidophos enantiomers was obtained applying the technique of high performance liquid chromatography (HPLC) and using polysaccharide chiral stationary phases. A maximum resolution of 1.56 was gotten for the enantiomers evaluated. The form (+)-methamidophos presented higher in vitro toxicity than that of the (-)-methamidophos for BChE of hens and NTE of hens and humans... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ulisses Rocha Antuniassi / Resumo: A aplicação de defensivos é uma atividade que envolve riscos ambientais e econômicos. A utilização de herbicidas para o controle de plantas daninhas pode se tornar bastante onerosa e ineficiente devido as condições inadequadas de equipamentos e técnicas de aplicação. Neste contexto, a agricultura de precisão, através da aplicação localizada de herbicidas, pode proporcionar melhor qualidade, segurança e retorno econômico nas aplicações. Dentre as diversas tecnologias para aplicação localizada, a utilização de sistemas de injeção de defensivos pode auxiliar na obtenção de menores riscos ambientais e econômicos para a aplicação de herbicidas em áreas de ferrovia. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar um sistema de injeção de defensivos adaptado para a aplicação localizada de herbicidas. Neste sentido, o desenvolvimento tecnológico e metodológico foi realizado visando otimizar o sistema e determinar suas características de desempenho. O trabalho foi realizado em três fases, sendo que a primeira consistiu do desenvolvimento metodológico para avaliação do desempenho dos sistemas, a segunda fase consistiu no desenvolvimento e avaliação de diferentes versões (protótipos) do sistema de injeção em laboratório e a terceira fase consistiu de ensaio de campo do sistema. Os resultados mostraram que a metodologia desenvolvida se apresentou adequada aos propósitos do trabalho, assim como foi positiva a interação com o fabricante do sistema de injeção no desenvolvimento do sistema. As avaliações dos protótipos mostraram que as modificações realizadas entre a primeira e última versões reduziram significativamente os erros de dosagem. O tempo de resposta do sistema de injeção dotado de bomba com ajuste automático do curso do pistão foi considerado adequado. O mesmo sistema durante o ensaio de campo apresentou resultado satisfatório de controle da dose e do volume de calda aplicado. / Abstract: The pesticide application involves environmental and economics risks. The use of herbicide for weed control can be expensive due to unsuitable condition, equipment and techniques. Thus, precision farming, with variable rate application of herbicide will be improve the quality, safety and reduce costs of weed control. The aim of this study was to develop and to evaluate the performance of one injection metering systems for variable rate herbicide application on railways. In this way, the development of methods and techniques was applied to improve accuracy and to determine the performance characteristics. This work was carried out in three phases, the first one was to develop laboratory methods to analyse the perform of the system, the second phase was to develop and to evaluate performance of several version of injection metering systems in laboratory conditions and the third phase was to evaluate of injection metering systems on field conditions. The results showed that the methodology was adequate and can be used to standard tests. The interaction with the system manufacturer was also positive to the development of the system. The prototype evaluation showed that the changes performed between the first and the last version increased accuracy. The time response of the last version of the injection system was adequate. This version showed satisfactory results on the field test to control the rate and volume applied. This results were suitable for the purpose of variable rate herbicide application in railways. / Doutor

Os pesticidas etileno-bis-ditiocarbamatos da classe dos ditiocarbamatos estão entre os fungicidas mais empregados em todo o mundo para o controle de pragas. Muitos métodos para determinar ditiocarbamatos são baseados na hidrólise ácida em presença de cloreto estanoso e análise do CS2 gerado por diferentes técnicas. Nesse contexto, constituiram em objetivos do presente trabalho, como primeira etapa, o estudo de condições adequadas à estocagem de amostras de solo, e como segunda etapa, a avaliação das taxas de degradação e de lixiviação do fungicida mancozebe num cambissolo distrófico através do método espectrofotométrico. O sítio de estudo foi uma área delimitada de 36 m2, de uma cultura de couve, localizada em São Lourenço no 3 distrito do município de Nova Friburgo-RJ. As análises foram realizadas no laboratório de tecnologia ambiental (LABTAM/UERJ). Na primeira etapa, duas sub-amostras de solo contaminadas com mancozebe foram submetidas a tratamento com cloridrato de L-cisteina e estocadas às temperaturas ambiente e de -20C, sendo posteriormente analisadas em intervalos de 1, 7, 15 e 35 dias após a aplicação do fungicida. Outras duas sub-amostras não tratadas com cloridrato de L-cisteina foram submetidas às mesmas condições de temperatura e analisadas nos mesmos intervalos de tempo. Na segunda etapa, foi efetuada a aplicação do fungicida MANZATE 800 (Dupont Brasil, 80% mancozebe) na dose recomendada de 3,0 Kg ha-1 e coletadas amostras do solo nas profundidades de 0-10, 10-20 e 20-40 cm em intervalos de 2,5,8,12,15,18 e 35 dias após aplicação. As amostras de cada profundidade foram tratadas com cloridrato de L-cisteina e acondicionadas sob temperatura de -20C. Através dos resultados obtidos na primeira etapa, pôde-se concluir que o tratamento com cisteina foi eficaz para conservação do analito, tanto para a amostra mantida a -20C quanto para a amostra mantida à temperatura ambiente. Os dados obtidos na segunda etapa do estudo mostraram que mancozebe apresentou comportamento semelhante ao descrito na literatura, para persistência no solo. Os resultados de lixiviação mostraram que nas condições pelas quais foi conduzido o experimento, resíduos de mancozebe foram detectados em profundidades de até 40 cm, porém através dos modelos de potencial de lixiviação, concluiu-se que o fungicida não oferece risco de contaminação de águas subterrâneas / Ethylene-bis-dithiocarbamates pesticides of the class of dithiocarbamates fungicides are among the most widely used around the world to control pests. Many methods to determine dithiocarbamates are based on acid hydrolysis in the presence of stannous chloride and analysis of CS2 generated by different techniques. In this context, the aims of this study are to evaluate the appropriate conditions for storage of soil samples, and the rates of degradation and leaching of the fungicide mancozebe in a Cambisol by spectrophotometric method. The study site was an area of 36 m2, of a planting of cabbage, located in São Lourenço in the 3rd district of the city of Nova Friburgo-RJ. The analysis was conducted in the laboratory of environmental technology (LABTAM / UERJ). In the first step, two sub-samples of soil contaminated with mancozebe were treated with L-cysteine-HCl and stored at room temperature and -20C, then analyzed at intervals of 1,7,15 and 35 days after fungicide application. Other two sub-samples not treated with L-cysteine-HCl were subjected to the same conditions of temperature and analyzed at the same time intervals. In the second step, the fungicide MANZATE 800 (Dupont Brazil, 80% mancozeb) was applied at the recommended dose of 3.0 kg ha-1 and collected soil samples at 0-10, 10-20 and 20-40 cm at intervals of 2,5,8,12,15,18 and 35 days after application. Samples from each depth were divided into two parts, one being treated with L-cysteine-HCl and both under temperature of -20 C. The results obtained in the first step, indicate that treatment with cysteine was more effective for conservation of the analyte, both for the sample kept at -20 C and for the sample kept at room temperature. Data obtained in the second step of the study showed that mancozeb demonstrated a behavior similar to that one described in the literature to persistence in soil. The leaching results, showed that under condictions in which the experiment was conducted, mancozeb residues were detected at depths of up to 40 cm, but through the models of the potential for leaching, it was concluded that the fungicide is not liable for contamination of groundwater

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000438119-Texto+Completo-0.pdf: 1374944 bytes, checksum: ed0d2c4ba08c684fb0fe51136bb75979 (MD5) Previous issue date: 2012 / Endosulfan is a broad spectrum organochlorine pesticide that is still widely used in many developing countries. Following application endosulfan can get to watercourses through surface runoff from agricultural fields and disturb the nontarget aquatic animals including freshwater fish species. Given that the activity of the enzyme acetylcholinesterase (AChE) is one of the most recurrently used biomarkers of exposure to pesticides and there are controversial results concerning the effects of endosulfan exposure and AChE activity in fish, the aim of the present study was to evaluate the effects of endosulfan in brain AChE activity and its gene expression pattern using adult zebrafish (Danio rerio) as an animal model. Moreover, we have analyzed the effects of endosulfan exposure in different parameters of zebrafish swimming activity and in long-term memory formation. After 96 hours of exposition, fish in the 2. 4 μg endosulfan/L group presented a significant decrease in AChE activity (9. 44 ± 1. 038 μmol SCh. h-1. mg protein-1; p = 0. 0205) when compared to the control group (15. 87 ± 1. 768 μmol SCh. h-1. mg protein-1; p = 0. 0205). The downregulation of brain AChE activity is not directly related with the transcriptional control as demonstrated by the RT-qPCR analysis. Our results reinforce AChE activity inhibition as a pathway of endosulfan-induced toxicity in brain of fish species. In addition, exposure to 2. 4 μg endosulfan/L during 96 hours impaired all exploratory parameters evaluated: decreased line crossings (273. 7 ± 28. 12 number of line crossings compared to the control group 344. 6 ± 21. 30, p=0. 0483), traveled distance (23. 44 ± 2. 127 meters compared to the control group 29. 39 ± 1. 585, p=0. 0281), mean speed (0. 03 ± 0. 003 meters/seconds compared to the control group 0. 04 ± 0. 002, p=0. 0275) and body turn angle (69,940 ± 4,871 absolute turn angle compared to the control group 88,010 ± 4,560 p=0. 0114). These results suggest that endosulfan exposure significantly impairs animals' exploratory performance, and potentially compromises their ecological and interspecific interaction. Our results also showed that the same endusulfan exposure did not compromise animals' performance in the inhibitory avoidance apparatus. These findings provide further evidence of the deleterious effects of endosulfan exposure in the nervous system. / Endosulfan é um pesticida organoclorado de amplo espectro ainda utilizado largamente em muitos países subdesenvolvidos. As aplicações repetidas de endosulfan podem se incorporar aos cursos de água por meio da lixiviação dos solos das plantações e atingir animais aquáticos, incluindo espécies de peixes. Dado que a atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE) é um dos biomarcadores de exposição aos pesticidas mais utilizados de forma recorrente e há resultados controversos envolvendo os efeitos da exposição ao endosulfan e a atividade da AChE em peixes, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do endosulfan na atividade da AChE cerebral e seu padrão de expressão gênica utilizando zebrafish adulto (Danio rerio) como modelo experimental. Além disso, nós analisamos os efeitos da exposição ao endosulfan em diferentes parâmetros de locomoção do zebrafish e na formação da memória de longo prazo. Após 96h de exposição, os peixes do tempo com 2,4 μg/L de endosulfam apresentaram um decréscimo significante na atividade da AChE (9. 44 ± 1. 038 μmol SCh. h-1. mg proteína-1; p = 0. 0205) quando comparados com o grupo controle (15. 87 ± 1. 768 μmol SCh. h-1. mg proteína-1; p = 0. 0205). A regulação inibitória da atividade da AChE cerebral não está diretamente relacionada com o controle transcricional como demostrado pela análise de RT-qPCR. Nossos resultados reforçam a inibição da atividade da AChE como via da toxicidade induzida pelo endosulfan em cérebro de de peixe. Além disso, a exposição de 2,4 μg/L do endosulfan durante 96h prejudicou todos os parâmetros exploratórios avaliados: linhas cruzadas (273. 7 ± 28. 12 número de linhas cruzadas em comparação com o grupo controle: 344. 6 ± 21. 30, p=0. 0483), distância viajada (23. 44 ± 2. 127 metros comparados com o grupo controle 29. 39 ± 1. 585, p=0. 0281), velocidade média (0. 03 ± 0. 003 metros/segundos comparados com o grupo controle 0. 04 ± 0. 002, p=0. 0275) e mudanças de ângulo (69,940 ± 4,871 mudanças de ângulo absolutas comparadas com o grupo controle 88,010 ± 4,560 p=0. 0114). Esses resultados sugerem que a exposição ao endosulfan prejudica significativamente a performance exploratória dos animais e, potencialmente, compromete suas interações interespecíficas e ecológicas. Nossos resultados também demonstraram que a mesma exposição ao endosulfan não compromete a performance dos animais no aparato de esquiva inibitória. Esses achados fornecem evidências adicionais de efeitos deletérios da exposição ao endosulfan no sistema nervoso.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Florestal, 2014. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-10-02T12:01:48Z No. of bitstreams: 1 2014_MarcosAntônioDeSouza.pdf: 8907365 bytes, checksum: 1f9116d1504e4b7f0c1c87a346b56822 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-10-02T12:02:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_MarcosAntônioDeSouza.pdf: 8907365 bytes, checksum: 1f9116d1504e4b7f0c1c87a346b56822 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-02T12:02:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_MarcosAntônioDeSouza.pdf: 8907365 bytes, checksum: 1f9116d1504e4b7f0c1c87a346b56822 (MD5) / O glifosato é um herbicida pós-emergente não-seletivo de ampla utilização em várias culturas, irrigadas ou de sequeiro, desde a fase pré-plantio até a fase produtiva. É o herbicida mais utilizado no mundo, devido à adoção do seu uso no manejo das lavouras ter-se mostrado vantajoso em relação a vários métodos de controle de plantas daninhas, inclusive a capina manual. Se utilizado de forma inadequada pode provocar fitotoxicidade e risco de contaminar e causar danos na biota, e também em seres humanos. Pesquisa conduzida para avaliar os mecanismos de transporte e interação desse produto com as variáveis ambientais, em uma gleba rural localizada na bacia hidrográfica do ribeirão Pipiripau - GO/DF, indica mobilidade e transporte da ordem de 0,007% do total de glifosato aplicado na lavoura para a água do escoamento superficial. Nesse compartimento, para o caso estudado, os parâmetros adotados pelo Modelo de Avaliação do Risco de Contaminação Ambiental por Pesticidas - A.R.C.A., como a distância do cultivo ao corpo hídrico, conteúdo de argila e tipo de manejo do solo, influenciaram diretamente nos achados de concentração do ingrediente ativo nas amostras analisadas. Os dados laboratoriais indicam que o modelo A.R.C.A. foi construído com precisão, por representar adequadamente o sistema real, podendo ser utilizado com facilidade e segurança em programas de redução do risco de contaminação ambiental por pesticidas. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Glyphosate is the most used non selective herbicide in the world. If used improperly entails risk of environmental contamination. Research conducted to evaluate the transport mechanisms and interaction of this product with environmental variables, in a small farm located in watershed of Pipiripau stream - GO / DF, indicates mobility and transporting of the order of 0.007% of glyphosate applied to the crop in water runoff. In this compartment, for the case studied, the parameters adopted by the Model Risk Assessment of Environmental Contamination by Pesticides – A.R.C.A., as the distance from the body of water, clay content and type of soil management, influenced directly the findings concentration of the active ingredient in the samples. Laboratory data indicate that the model A.R.C.A. was built with accuracy, by adequately represent the real system, and can be used safely by programs to reduce the risk of environmental contamination by pesticides. _________________________________________________________________________________________ RESUMÉ / Le glyphosate est l'herbicide le plus utilisé sélective non dans le monde. Si elle est utilisée incorrectement entraîne le risque de contamination de l'environnement. Les recherches menées pour évaluer les mécanismes de transport et de l'interaction de ce produit avec les variables d'environnement , dans une petite ferme située dans le bassin versant du ruisseau Pipiripau - aller / DF , indique la mobilité et le transport de l'ordre de 0,007% de glyphosate appliquées à la culture dans les eaux de ruissellement . Dans ce compartiment , pour le cas étudié , les paramètres retenus par l'évaluation du modèle de risque de contamination de l'environnement par les pesticides – A.R.C.A., comme la distance entre le plan d'eau, la teneur en argile et le type de gestion des sols, influencé directement la concentration des conclusions de l' actif ingrédient dans les échantillons. Les données de laboratoire indiquent que le modèle A.R.C.A. a été construit avec une précision, par adéquatement représenter le système réel, et peut être utilisé en toute sécurité par des programmes visant à réduire le risque de contamination de l'environnement par les pesticides. _________________________________________________________________________________________ RESUMEN / El glifosato es un herbicida pos-emergente no selectivo de amplio uso en diferentes cultivos, de irrigacion o de secano, desde antes de la siembra hasta la fase de producción. Es el herbicida más utilizado en el mundo, debido a la adopción de su uso en los cultivos han demostrado ser ventajoso en relacion a varios métodos de control de malezas, incluyendo deshierbe manual. Si se utiliza incorrectamente puede causar fitotoxicidad riesgo de infectar y causar daños a la biota, y también en los seres humanos. Las investigaciones realizadas para evaluar los mecanismos de transporte y la interacción del producto con las variables ambientales en una zona situada en la cuenca del río Pipiripau - GO / DF, indica movilidad y el transporte del orden de 0,007% de glifosato aplicados en la agricultura para la escurrimiento superficial. En este compartimiento, para el caso estudiado, los parámetros adoptados por el modelo de Evaluación del Riesgo de Contaminación Ambiental por pesticidas – A.R.C.A., ya que la distancia del cuerpo de agua, contenido de arcilla y el tipo de manejo del suelo, bajo la influencia directa de la concentración de hallazgos el ingrediente activo en las muestras. Los datos de laboratorio indican que el modelo A.R.C.A. fue construida con precisión, por representar adecuadamente el sistema real, y se puede utilizar con facilidad y seguridad em los programas gubernamentales para reducir el riesgo de contaminación ambiental por pesticidas.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-02-05T13:25:15Z No. of bitstreams: 1 2012_AndreiaNunesOliveiraJardim.pdf: 4022520 bytes, checksum: 2a1c94f1077a71ed4bfa4fde878088f6 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-02-08T14:24:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_AndreiaNunesOliveiraJardim.pdf: 4022520 bytes, checksum: 2a1c94f1077a71ed4bfa4fde878088f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-08T14:24:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_AndreiaNunesOliveiraJardim.pdf: 4022520 bytes, checksum: 2a1c94f1077a71ed4bfa4fde878088f6 (MD5) / O uso de pesticidas no campo pode levar a presença de resíduos desses compostos nos alimentos, o que pode representar um risco para a saúde humana. Para avaliar este risco são necessários dados de resíduos de pesticidas em alimentos, de consumo desses alimentos e de toxicidade dos pesticidas. Dados de resíduos de pesticidas para 22 alimentos da dieta brasileira obtidos de programas de monitoramento do MAPA e ANVISA mostraram que os fungicidas ditiocarbamatos (possíveis carcinogênicos) e os inseticidas organofosforados (neurotóxicos) foram os mais presentes nas 13556 amostras analisadas entre 2001 e 2010 (41,6 e 30,7%, respectivamente). Múltiplos resíduos de organofosforados foram encontrados em 18,6% das amostras positivas para esta classe, seguido dos triazóis (16,1%). Um método multirresíduo foi validado para determinação de 46 pesticidas e metabólitos em caqui, caju, goiaba e pêssego utilizando extração com acetato de etila e purificação por extração dispersiva em fase sólida com amina primária secundária. Os compostos foram analisados por CG-FPD (organofosforados), CG-µECD (piretróides) e LC-MS/MS (carbamatos), com LOQs entre 1,0 e 8,0 µg/kg. Cerca de 60% das 238 amostras analisadas apresentaram resíduos de pesticidas, a maioria de uso não autorizado. A avaliação probabilística cumulativa da exposição foi conduzida no programa Monte Carlo Risk Assessment (MCRA 7.1) para organofosforados e carbamatos (aguda), triazóis (crônica e aguda), piretróides (aguda) e ditiocarbamatos (crônica). Foram utilizados dados de consumo individual da POF 2008/2009 (≥ 10 anos), dados de resíduos de 26 alimentos e 73 preparações e fatores de potência tóxica publicados na literatura. A ingestão cumulativa aguda ultrapassou o parâmetro toxicológico (ARfD) apenas para os compostos organofosforados e carbamatos nos P99,9 da curva de distribuição. Em geral, o arroz, feijão e laranja foram os alimentos que mais contribuíram para a ingestão dos compostos avaliados. Uma limitação importante deste estudo foi a ausência de dados de consumo para crianças, grupo da população ainda em desenvolvimento que possui maior consumo de alimento por peso corpóreo. Este é o primeiro estudo no país que avaliou a exposição cumulativa a piretróides e triazóis e seus resultados podem auxiliar as autoridades governamentais na tomada de decisões relacionadas ao uso de pesticida no Brasil. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The presence of pesticide residues in food as a consequence of their agricultural use may represent a human health risk. To estimate this risk, data on pesticide residues in food, food consumption data and information regarding the pesticide toxicity are necessary. In this study, monitoring residue data for 22 crops obtained from the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supplies and the National Sanitary Surveillance Agency showed that the dithiocarbamate fungicides (possible human carcinogens) and organophosphorous insecticides (neurotoxic compounds) were the most detected pesticides found in the 13556 samples analyzed between 2001 and 2010 (41.6 e 30.7%, respectively). Multiple residues of organophosphorus compounds were found in 18.6% of the samples positive for these compounds, followed by triazoles (16.1%). A multiresidue method was validated for the determination of 46 pesticides and metabolites in khaki, cashew, peach and guava using ethyl acetate extraction and dispersive clean up with primary secondary amine. The compounds were analyzed by GC/FPD (organophosphorous), GC-µECD (pyrethroids) and LC-MS/MS (carbamates), with LOQs ranging from 0.001 to 0.008 mg/kg. About 60% of the 238 samples analyzed contained at least one residue, mostly from non-authorized use. Probabilistic cumulative exposure assessments using the Monte Carlo Risk Assessment (MCRA 7.1) program were conducted for organophosphorous and carbamates (acute), triazoles (chronic and acute), pyrethroids (acute) and dithiocarbamates (chronic). Individual consumption data were obtained from the POF 2008/2009 (≥ 10 years old) and residue data for 26 crops and 73 food preparations. The acute cumulative exposure exceeded the ARfD only for the organophosphorus and carbamates at the 99.9 percentile of the distribution curve. An important limitation of this study is the lack of consumption data for children, a population subgroup that is still under development and has higher food consumption per body weight. The results of this study can help governmental authorities in the decision making process regarding pesticide use in Brazil.

A capacidade de degradação de compostos xenobióticos por organismos vivos, principalmente bactérias, tem sido objeto intenso de pesquisa, principalmente por aqueles microrganismos isolados do solo. Dessa forma, a busca por novos nichos que resultem no isolamento de microrganismos altamente eficientes se torna cada vez mais necessária. Assim, dada a diversidade de interações inseto - bactérias, este estudo buscou explorar insetos resistentes a inseticidas como nicho de bactérias com capacidade de degradação de pesticidas para o desenvolvimento de estudos voltados à i) utilização dessas bactérias na biorremediação e ii) determinação de sua contribuição na metabolização de inseticidas pelo hospedeiro. Assim, esse trabalho teve por objetivos i) isolar, identificar e caracterizar microrganismos associados ao trato digestivo de linhagens de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) resistentes a lambda-cyhalothrin e deltamethrin (piretróide), chlorpyrifos ethyl (organofosforado), spinosad (naturalyte) e lufenuron (inibidor de síntese de quitina), ii) verificar o seu potencial de biodegradação desses compostos, iii) estudar sua associação a populações naturais de S. frugiperda e iv) determinar seu papel na metabolização de xenobióticos. Bactérias com potencial de biodegradação foram selecionadas via cultivo seletivo da flora associada ao trato intestinal de lagartas de quinto ínstar de S. frugiperda em meio mínimo M9 acrescido de 10 ?g/mL de um dos inseticidas em estudo como única fonte de carbono. As bactérias isoladas foram sujeitas à análise de PCR-RFLP do gene do 16S rDNA, com três enzimas de restrição (EcoRI, Rsa, DdeI), resultando na identificação de 16 isolados. Após sequenciamento, dez filotipos foram identificados, distribuídos em Firmicutes (Enterococcaceae e Staphylococcaceae), ?-Proteobacteria (Enterobacteriaceae e Pseudomonadaceae), ?-Proteobacteria (Comamonadaceae) e Actinobacteria (Micrococcaceae e Microbacteriaceae). Enterococcus, Pseudomonas e Microbacterium foram os únicos representados por dois filotipos, sendo ainda encontrados um filotipo de Delftia, Leclercia, Staphylococcus e Arthrobacter. Enterococcus casseliflavus e Enterococcus mundtii foram isolados de praticamente todas as linhagens resistentes de S. frugiperda. Análises de antibiograma e do metabolismo de carboidratos indicaram a similaridade entre os clones de E. casseliflavus, enquanto que os clones de E. mundtii diferiram de maneira expressiva. Apesar disso, os alelos analisados para tipagem via multilocus não resultaram em diferenças. Análises de PCR-diagnóstico do intestino de lagartas de S. frugiperda de linhagem suscetível de laboratório resultaram na detecção de quatro dos dez filotipos isolados do intestino de linhagens resistentes de S. frugiperda. Já em populações naturais foram encontrados cinco dos dez filotipos. O isolado com maior capacidade de crescimento em cada inseticida foi selecionado e todos apresentaram resposta dependente da concentração dos inseticidas, sendo encontrado efeito antimicrobiano em alguns inseticidas. A análise de cromatografia acoplada a espectrometria de massas comprovou a degradação dos inseticidas utilizados pelos diferentes isolados. A colonização do trato digestivo de linhagem suscetível de S. frugiperda com um dos filotipos (Microbacterium arborescens) isolado de lagartas resistentes a lufenuron resultou em CL50 cerca de 10 vezes superior àquela da linhagem apossimbionte. Assim, linhagens resistentes de S. frugiperda se mostraram um excelente reservatório de bactérias com capacidade de degradação dos inseticidas testados e que podem auxiliar na metabolização desses produtos pelo hospedeiro, assim como ser exploradas na descontaminação de áreas que apresentam resíduos desses xenobióticos. / The capacity of living organisms to degrade xenobiotics has been intensively studied, mainly for soil-associated bacteria. Thus, there is a growing need to search for new niches to lead to the isolation of highly efficient microrganisms. As insect-bacteria interactions are very diverse, we focused on exploiting insecticide resistant insects as a niche of pesticidedegrading bacteria to develop studies devoted to a) bacterial utilization in bioremediation and ii) determination of bacterial contribution to insecticide metabolization by the host insect. Our main objetives were to i) isolate, identify and characterize the microrganisms associated to the gut of resistant strains of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) capable to degrade lambda-cyhalothrin,deltamethrin (pyrethroids), chlorpyrifos ethyl (organophosphate), spinosad (naturalyte) and lufenuron (chitin synthesis inhibitor), ii) verify their potential to degrade these insecticides, iii) to verify their association to natural populations of S. frugiperda, and iv) to determine their role in the metabolization of xenobiotics in the host. Bacteria with biodegrading capacity were selected from the gut flora of fifth instars of S. frugiperda on selective media based on the minimum media M9 added of 10 ?g/mL of one of the insecticides selected as the sole carbon source. The isolated bacteria were subjected to RFLP-PCR analysis of the 16S rDNA gene using three restriction enzymes (EcoRI, Rsa, DdeI), which led to the identification of 16 isolates. These isolates were grouped in ten phylotypes after sequencing, representing Firmicutes (Enterococcaceae and Staphylococcaceae), ?-Proteobacteria (Enterobacteriaceae and Pseudomonadaceae), ?- Proteobacteria (Comamonadaceae) and Actinobacteria (Micrococcaceae e Microbacteriaceae). Enterococcus, Pseudomonas and Microbacterium were the only represented by more than two phylotypes. Delftia, Leclercia, Staphylococcus and Arthrobacter were also represented. Enterococcus casseliflavus and Enterococcus mundtii were isolated from almost all resistant lines of S. frugiperda. Antibiogram and carbohydrate metabolism assays indicated the similarity among the isolates of E. casseliflavus, while those of E. mundtii displayed some differences. However, no molecular differences were observed by comparing different alleles in multilocus sequence analysis. Diagnostic-PCR analysis of a susceptible, lab-strain of S. frugiperda allowed the identification of four out of the ten phylotypes isolated from resistant strains. But no bacteria from the susceptible strain could be cultivated in the selective media. In natural populations of S. frugiperda, five out of the ten isolates were detected. The most active isolate to degrade each pesticide was selected for further tests and all displayed a dose-dependent response to the insecticides. Analyses by gas or liquid chromatography-coupled mass spectrometry demonstrated the capacity of each isolate to degrade the insecticides tested. Gut colonization of larvae from the susceptible strain with Microbacterium arborescens isolated from resistant larvae increased the LC50 to lufenuron in 10 fold when compared to the aposymbiont strain. Thus, resistant strains of S. frugiperda are an excellent reservoir of bacteria capable of degrading the tested insecticides, and have a potential to be exploited for the bioremediation of xenobiotic contaminated areas. Moreover, these bacteria can auxiliate the host insect to metabolize insecticides and may play a role in insect response to insecticides.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The development of analytical methods aiming at monitoring of pesticides is essential to ensure that foods are within limits considered safe for health, and to enable the regulatory agencies to obtain faster and more reliable results. In this work, we developed and validated a method for the determination of pesticides in mango, running the sample preparation with QuEChERS method modified with the addition of graphitized carbon (CGB - Carbon Grafitized Black) to remove nonpolar pigments and to identify and quantification of the compounds to the Gas Chromatography Mass Spectrometry (GC-MS). The developed method showed selectivity for all compounds. For all compounds was identified matrix effect, so the study of quantification of the compound was made based on the curves made in the matrix extract. The limits of detection (LOD) ranged from 0,0025 to 0,01 mg.kg-1 and the limits of quantification (LOQ) ranged from 0,008 to 0,03 mg.kg-1. The compounds showed acceptable recovery levels ranging from34% to 143%. The method was applied to the determination of pesticide residues in twelve samples of mango, among which, in six samples were detected five different compounds (Chloroneb, Propachlor, α-Chlordane, Chlorpyrifos,DCPA, Chlorobenzilate and trans-Permethrin). For Chloroneb compounds, Propachlor and α-Chlordane were detected concentration above the maximum residue limit allowed under EU data / O desenvolvimento de mÃtodos analÃticos visando o monitoramento de pesticidas à fundamental para assegurar que os alimentos estejam dentro dos limites considerados seguros para a saÃde, bem como possibilitar aos ÃrgÃos fiscalizadores a obtenÃÃo de resultados mais rÃpidos e confiÃveis. Neste trabalho, foi desenvolvido e validado um mÃtodo para a determinaÃÃo de pesticidas em manga, executando-se o preparo da amostra com mÃtodo QuEChERS modificado, com a adiÃÃo de carbono grafitizado (CGB â Carbon Grafitized Black) para remover pigmentos apolares e para identificaÃÃo e quantificaÃÃo dos compostos a Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (CG-EM). O mÃtodo desenvolvido demonstrou seletividade para todos os compostos. Para todos os compostos foi identificado efeito matriz, dessa forma o estudo de quantificaÃÃo dos compostos foi feito com base nas curvas realizadas no extrato da matriz. Os limites de detecÃÃo (LD) variaram de 0,0025 a 0,01 mg.kg-1 e os limites de quantificaÃÃo (LQ) variaram de 0,008 a 0,03 mg.kg-1. Os compostos apresentaram nÃveis de recuperaÃÃo aceitÃveis compreendidos entre 34% a 143%. O mÃtodo desenvolvido foi aplicado para a determinaÃÃo de resÃduos de pesticidas em doze amostras de manga, dentre as quais, em seis amostras foram detectados cinco diferentes compostos (Cloronebe, Propacloro, α-Clordano, ClorpirifÃs, DCPA, Clorobenzilato e trans-Permetrina), com valores entre 0,004 a 0,042 mg.kg-1. Para os compostos Cloronebe, Propacloro e α-Clordano foram detectados concentraÃÃes superiores ao limite mÃximo de resÃduo permitido segundo dados da UniÃo EuropÃia