Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-03-30T17:53:42Z No. of bitstreams: 1 muiaraaparecidamoraes.pdf: 2242922 bytes, checksum: 649dffc13e33d3863587f15980f26e52 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-04-24T02:55:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 muiaraaparecidamoraes.pdf: 2242922 bytes, checksum: 649dffc13e33d3863587f15980f26e52 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-24T02:55:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 muiaraaparecidamoraes.pdf: 2242922 bytes, checksum: 649dffc13e33d3863587f15980f26e52 (MD5) Previous issue date: 2013-07-19 / Palicourea rigida Kunth, pertencente à família Rubiaceae, têm sido utilizada na medicina popular para o tratamento de inflamação e infecção do trato urinário e do aparelho reprodutor feminino. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial químico-farmacológico de P. rigida e verificar a sua adequação aos padrões normativos do Sistema Único de Saúde (SUS). Folhas secas e pulverizadas foram submetidas à extração em etanol. Após remoção do solvente, extrato etanólico sofreu fracionamento por partição, produzindo as frações hexânica, diclorometânica, em acetato de etila e butanólica. Foram realizadas prospecção fitoquímica, quantificação de fenóis totais e flavonoides por espectrofotometria e análise por cromatografia líquida de alta eficiência. A atividade antioxidante foi avaliada pelos métodos do DPPH, bioautografia, poder de redução e -caroteno/ácido linoléico. A toxidez aguda foi determinada e as atividades antinociceptiva (testes de contorções, formalina e placa quente) e antiinflamatória (ensaios de edema de pata e pleurisia) foram realizadas. Análise da viabilidade da inclusão da P. rigida na lista de plantas de interesse ao SUS foi verificada. Os dados foram demonstrados através da média±erro padrão. Análise de variância seguida dos testes de Turkey ou Student-Newman-Keuls foram usados para medir o grau de significância para p < 0,05. Flavonoides, taninos, cumarinas, terpenoides e esteroides, alcaloides e antraquinonas foram detectadas em P. rigida. Os fenóis totais variaram entre 3,72 e 28,05 g/100 g, enquanto os flavonoides foram de 1,95 e 14,15 g/100g. Rutina e quercetina foram identificadas nas frações em acetato de etila e butanólica, respectivamente. Usando DPPH, as CE50 mostraram valores entre 24,51 ± 0,52 a 125,79 ± 0,10μg/mL, enquanto o poder de redução produziu CE50 de 183,09 ± 1,84 a 703,14 ± 1,15 μg/mL. As porcentagens de inibição da oxidação do -caroteno foram de 24,30 ± 3,38 a 84,76 ± 1,40. O extrato etanólico inibiu as contorções abdominais em 32,88 (100 mg/kg), 34,25 (200 mg/kg) e 61,64% (400 mg/kg). Doses de 200 e 400 mg/kg inibiram a primeira fase em 13,80 (200 mg/kg) e 24,74% (400 mg/kg), enquanto a segunda fase foi reduzida em 10,52 (100 mg/kg), 22,92 (200 mg/kg) e 35,73% (400 mg/kg). Após 90 min de tratamento, doses de 200 mg/kg (36,61%) e 400 mg/kg (71,21%) prolongaram o tempo de latência. Doses de 200 e 400 mg/kg reduziram o edema de pata após 3 e 4 h de tratamento. O volume do exsudato foi reduzido em 27,18 (200 mg/kg) e 36,89% (400 mg/kg) e o número de leucócitos totais sofreu inibição de 11,94 e 24,91% nas doses de 200 e 400 mg/kg, respectivamente. Os resultados indicaram que P. rigida constitui uma fonte promissora de substâncias bioativas com atividades antioxidante, antinociceptiva e anti-inflamatória, justificando o uso popular e reunindo características importantes de interesse do SUS. / Palicourea rigida Kunth, belonging to the family Rubiaceae, have been used in folk medicine for the treatment of inflammation and infection of the urinary tract and the female reproductive tract. This study aimed to evaluate the potential chemical-pharmacological P. rigida and verify its appropriateness to normative standards of the Unified Health System (SUS). Dried and sprayed leaves were extracted in ethanol. After removing the solvent, ethanol extract was submmited to the fractionation by partition to obtain the hexanic, dichlorometanic, in ethyl acetate and butanolic fractions. Phytochemical screening, quantification of total phenols and flavonoids by spectrophotometry and analysis by high performance liquid chromatography were performed. The antioxidant activity was evaluated by DPPH, bioautography, power reduction and -carotene/linoleic acid methods. Acute toxicity was determined and the antinociceptive (writhing, formalin and hot plate tests) and anti-inflammatory activities (paw edema and pleurisy methods) were evaluated. Analysis of the feasibility of inclusion of P. rigida in list of plants of interest to the SUS has been verified. Data were expressed by mean ± standard error. Analysis of variance followed by Turkey or Student-Newman-Keuls tests was used to measure the degree of significance to p < 0.05. Flavonoids, tannins, coumarins, terpenoids and steroids, alkaloids and anthraquinones were detected in P. rigida. The total phenols ranged between 3.72 and 28.05 g/100 g, while flavonoids were 1.95 and 14.15 g/100g. Rutin and quercetin were identified in ethyl acetate and butanolic fractions, respectively. Using DPPH, the values of EC50 showed between 24.51 ± 0.52 to 125.79 ± 0.10 mg/mL, while reducing power produced EC50 of 183.09 ± 1.84 to 703.14 ± 1.15 mg/mL. The percentages of inhibition of -carotene oxidation were 24.30 ± 3.38 to 84.76 ± 1.40. The ethanol extract inhibited the writhing at 32.88 (100 mg/kg), 34.25 (200 mg/kg) and 61.64% (400 mg/kg). Doses of 200 and 400 mg/kg inhibited the first phase in 13.80 (200 mg/kg) and 24.74% (400 mg/kg), while the second phase was reduced by 10.52 (100 mg / kg) , 22.92 (200 mg/kg) and 35.73% (400 mg/kg). After 90 min of treatment, doses of 200 mg/kg (36.61%) and 400 mg/kg (71.21%) prolonged the latency time. Doses of 200 and 400 mg/kg reduced the paw edema after 3 and 4 hours of treatment. The volume of exudate was reduced by 27.18 (200 mg/kg) and 36.89% (400 mg/kg) and total white cell count suffered inhibition of 11.94 and 24.91% at the doses of 200 and 400 mg/kg, respectively. The results indicated that P. rigida is a promising source of bioactive compounds with antioxidant, antinociceptive and anti-inflammatory activities that justifies the popular usage and gathers important characteristics of interest to the SUS.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-03-10T14:07:49Z No. of bitstreams: 1 rafaelpimentelpinheiro.pdf: 5642312 bytes, checksum: c0018e11016a4083a03c156be84fe1ad (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-03-13T19:16:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rafaelpimentelpinheiro.pdf: 5642312 bytes, checksum: c0018e11016a4083a03c156be84fe1ad (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T19:16:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rafaelpimentelpinheiro.pdf: 5642312 bytes, checksum: c0018e11016a4083a03c156be84fe1ad (MD5) Previous issue date: 2015-07-30 / Palicourea rigida Kunth, pertencente à família Rubiaceae, tem sido utilizada na medicina popular para o tratamento de inflamações e infecções do trato urinário, do aparelho reprodutor feminino e para doenças da pele. Do ponto de vista químico, triterpenos, iridoides, flavonoides e alcaloides têm sido identificados na espécie. O objetivo do presente trabalho foi realizar uma caracterização química e avaliar as atividades anti-inflamatória tópica e cicatrizante de P. rigida. Folhas secas e pulverizadas foram extraídas em etanol P.A. por maceração estática seguida de rota-evaporação para obtenção do extrato etanólico (EEPR). EEPR foi submetido à partição líquido/líquido, adquirindo as frações hexânica, diclorometânica, em acetato de etila e butanólica. EEPR foi analisado por CLUE-UV-EM, enquanto a fração hexânica por CG-EM. A fração em acetato de etila foi fracionada por cromatografia em coluna de Sephadex LH-20 e a substância isolada foi elucidada por RMN 1H e 13C e espectrometria de massas. A partir de EEPR, foi desenvolvido uma formulação de creme à base Lanette® (cEEPR). A atividade antiinflamatória tópica de EEPR foi avaliada pelos modelos de edema de orelha em camundongos Swiss empregando óleo de cróton, ácido araquidônico, capsaicina e fenol. A atividade cicatrizante de EEPR e cEEPR foi investigada em ratos Wistar através do modelo de lesões por excisão cutânea. Análises histopatológicas e as atividades das enzimas mieloperoxidase (MPO) e N-acetil-β-d-glucoronidase (NAG) foram também determinadas. Loganina e quercetina 3-6- O-acetil-β-glicosídeo foram identificadas no EEPR por CLUE-UV-EM, enquanto ácido palmítico, fitol, ácido linoleico, esqualeno, gama tocoferol, vitamina E, campesterol, estigmasterol e gama sitosterol foram caracterizadas na fração hexânica por CG-EM. A partir da fração em acetato de etila, o flavonoide quercetina 3-O-β-D-glicosídeo foi isolado e sua estrutura elucidada. EEPR apresentou atividade anti-inflamatória tópica nos diferentes modelos através da redução da massa e espessura do edema, assim como pela diminuição do processo inflamatório observado pelas análises histopatológicas e inibição das atividades de MPO e NAG. EEPR e cEEPR demonstraram atividade cicatrizante pela diminuição da área da lesão e aumento do grau de contração, bem como pela estimulação do processo de cicatrização e redução das atividades de MPO e NAG. Os resultados indicam que P. rigida é rica em substâncias bioativas que podem ser responsáveis pelas atividades anti-inflamatória e cicatrizante. / Palicourea rigida Kunth, belonging to the Rubiaceae family, has been used in folk medicine for the treatment of inflammation and infections of the urinary tract, female reproductive tract and skin conditions. From the chemical point of view, triterpenes, iridoids, flavonoids and alkaloids have been identified in species. The aim of this study was to perform a chemical characterization and evaluate the topical anti-inflammatory and wound healing activities of P. rigida. Dried and powdered leaves were extracted in ethanol PA by static maceration followed by rota-evaporation for obtaining ethanol extract (EEPR). EEPR was subjected to partition liquid/liquid to obtain the hexane, dichloromethane, ethyl acetate and butanol fractions. EEPR was analyzed by UPLC-UV-MS, while the hexane fraction by GC-MS. The ethyl acetate fraction was separated by column chromatography with Sephadex LH-20 and the isolated compound was elucidated by 1H and 13C NMR and mass spectrometry. From the EEPR, a dermatological formulation was developed using the cream-based Lanette® (cEEPR). The topical anti-inflammatory activity of EEPR was evaluated by the ear edema models in mice Swiss using croton oil, arachidonic acid, capsaicin and phenol. The wound healing activity of EEPR and cEEPR was investigated in Wistar rats through the model of skin lesions. Histopathological analysis and activity of the enzyme myeloperoxidase (MPO) and N-acetyl- β-D-glucuronidase (NAG) were also determined. Loganin and quercetin 3-6-O-acetyl-β- glucoside were identified in EEPR by UPLC-UV-MS, while palmitic acid, phytol, linoleic acid, squalene, gamma tocopherol, vitamin E, campesterol, stigmasterol and sitosterol were characterized in the hexane fraction by GC-MS. From the fraction in ethyl acetate, the flavonoid quercetin 3-O-β-D-glucoside was isolated and its structure elucidated. EEPR showed topical anti-inflammatory activity in different models by reducing the the mass and thickness of the edema, as well as through the decrease in the inflammatory process observed by histopathological analysis and inhibition of the MPO and NAG activities. EEPR and cEEPR demonstrated wound healing activity by decrease the area of lesion and increase the contraction degree, as well as stimulate the healing process and reduce the MPO and NAG activities. The results indicate that P. rigida is rich in bioactive substances which may be responsible for the anti-inflammatory and wound healing activities.