Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Patricia Lopes.pdf: 5372623 bytes, checksum: 4194291042519fae32e4a6fff04c5d7c (MD5) Previous issue date: 2010-11-29 / The development of restorative materials as well as the knowledge of caries disease has enabled more preservation of the tooth structure and the introduction of new products to remove the carious tissue. In this context, the aim of this study was to investigate in vitro the influence of 1% bromelain-based gel (Ananas cosmosus) on microleakage of restorative materials, idealized to remove the carious tissue. For this study, 30 healthy human third molars were used. Standardized Class V cavity preparations were performed on the buccal and lingual faces. The samples were divided into six groups: GI - sound dentin (positive control) + Adper Easy One® 3M (ESPE) + Z 350 3M (ESPE); GII - sound dentin (positive control) + acid etching + Adper Single Bond® 3M (ESPE) + Z350 3M (ESPE); GIII - 1% Bromelain Gel + acid etching + Adper Easy One® 3M + Z350; GIV - 1% Bromelain Gel + Adper Single Bond® 3M (ESPE) + Z 350 3M (ESPE); GV - Papacárie® + acid etching + Adper Easy One® 3M (ESPE) + Z350 3M (ESPE); GVI- Papacárie® + Adper Single Bond® 3M (ESPE) + Z 350 3M (ESPE). All the adhesive systems were used in accordance with the manufacturer s instructions. After storing the samples in an oven for 24 hours, they were immersed into 50% silver nitrate for 2 hours and then immersed in a pure developer solution for 16 hours under fluorescent light. The teeth were immersed in a physiological solution for a further 24 hours. Afterwards, they were submitted to a thermal cycling test at temperatures from 5° to 55°C, totaling 500 cycles. The teeth were washed under running water and the layers of enamel and Araldite were removed with No 15 scalpel blade. They were then fixed to a small metal plate, using hot glue, with the purpose of stabilizing them for later sectioning. Next the teeth were sectioned using a diamond disk under water cooling, first in the mesio-distal direction and then in the buccal-lingual direction passing through the center of the restoration. Microleakage was assessed according to the degree of leakage of the tracer and classified by the scoring criteria from 0-4. The data were submitted to the Kappa index in order to define reliability and reproducibility of the research, and the values were submitted to the non-parametric Kruskal-Wallis test at a level of significance of 5%. The results showed that there was no significant difference on the cervical surface in the Experimental Groups and that the occlusal surface of Group IV showed less microleakage. It may be concluded that the methods for chemical-mechanical removal did not influence microleakage of the restorative procedures. Descriptors: Ananas cosmosus, carboxymethylcellulose gel, Papacárie ®, microleakage. / A evolução dos materiais restauradores assim como o conhecimento da doença cárie proporcionou maior preservação da estrutura dental e a introdução de novos produtos para a remoção do tecido cariado. Neste contexto a proposta deste estudo foi investigar in vitro a influência do gel a base de bromelina a 1% (Ananas cosmosus), idealizado para a remoção do tecido cariado, na microinfiltração dos materiais restauradores. Para esse estudo foram utilizados 30 terceiros molares humanos hígidos. Foram realizados preparos cavitários de classe V padronizados nas faces vestibulares e linguais. As amostras foram divididas em seis grupos: GI- Dentina sadia (controle positivo) + Adper Easy One® 3M (ESPE) + Z 350 3M (ESPE); GII- Dentina sadia (controle positivo) + Condicionamento ácido + Adper Single Bond® 3M (ESPE) + Z350 3M (ESPE); GIII- Gel de Bromelina a 1% + Condicionamento ácido + Adper Easy One® 3M + Z350; GIV Gel de Bromelina a 1% + Adper Single Bond® 3M (ESPE) + Z 350 3M (ESPE); GV- Papacárie® + Condicionamento ácido + Adper Easy One® 3M (ESPE) + Z350 3M (ESPE); GVI- Papacárie® + Adper Single Bond® 3M (ESPE) + Z 350 3M (ESPE), todos os sistemas adesivos foram utilizados de acordo com as indicações dos fabricantes. Após armazenagem em estufa por 24 horas as amostras foram imersas em nitrato de prata a 50% por duas horas e depois imersas em uma solução reveladora pura (Eastman-Kodak) durante 16 horas sob luz fluorescente. Os dentes voltaram ao soro fisiológico por mais 24 horas. A seguir foram submetidos ao teste de termociclagem nas temperaturas de 5° a 55°C, perfazendo um total de 500 ciclos. Os dentes foram lavados em água corrente e as camadas de esmalte e Araldite removidas com lâminas de bisturi #15. Posteriormente foram fixada em uma pequena placa metálica, através de cola quente, cujo objetivo foi a estabilização para posterior secção. Em seguida os dentes foram seccionados, utilizando um disco de diamante montado, sob refrigeração com água, primeiro no sentido mésio-distal e depois no sentido vestíbulo-lingual passando pelo centro da restauração. A microinfiltração foi avaliada de acordo com o grau de infiltração do traçador e classificado pelo critério de escores de 0-4. Os dados foram submetidos ao índice Kappa a fim de definir a confiabilidade e reprodutibilidade da pesquisa, os valores foram submetidos ao teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis ao nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que na superfície cervical não houve diferença significativa nos grupos experimentais, sendo que na superfície oclusal o grupo IV apresentou menor microinfiltração. Conclui-se que os métodos de remoção químico-mecânica não influenciaram na microinfiltração dos procedimentos restauradores

O tratamento minimamente invasivo tem sido cada vez mais empregado no tratamento das lesões de cárie dental, especialmente em crianças jovens. Com isso, a remoção do tecido cariado pelo método químico-mecânico permite uma maior conservação das estruturas dentais saudáveis. O Papacárie Duo® é um material de fácil aplicação e possui propriedades bactericidas e anti-inflamatórias. Este material é aplicado sobre a dentina cariada, a fim de promover um amolecimento desta, facilitando a sua remoção. Os efeitos celulares de Papacárie Duo® são pouco conhecidos, dessa forma esta pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito do Papacárie Duo® em células indiferenciadas da polpa dental (Capítulo 1) e a capacidade do Papacárie Duo® induzir a ativação de macrófagos e a síntese de mediadores inflamatórios (Capítulo 2). O Papacarie Duo® foi preparado nas concentrações de 0,5 e 5% por meio de diluição seriada, a partir do gel obtido comercialmente. Células OD-21 e macrófagos J774.1 foram mantidas em cultura com os diferentes tratamentos por um período de estimulação de 24 horas para realização do teste de citotoxicidade (Ensaio LDH) e por 36 horas para avaliação da proliferação celular (Ensaio Colorimétrico MTT). A seguir foi realizada avaliação da expressão gênica relativa dos genes Ibsp, Runx2 e Spp1 em células OD-21; e dos genes Il10, Mmp9, Ptgs2 e Tnf em células J774.1, pelo método de transcrição reversa e reação em cadeia de polimerase em tempo real (qRT-PCR), utilizando o sistema TaqMan® após estimulação o período de 24 horas. O Papacárie Duo® a 5% foi citotóxico às células da polpa dental e inibiu a proliferação celular, assim como a expressão de Runx2 e Ibsp. Porém em ambas as concentrações estimulou a expressão de Spp1, a qual foi maior na concentração de 5%. Em macrófagos, o Papacárie Duo® foi citotóxico na concentração de 5%, mas não influenciou a proliferação celular em nenhuma das concentrações (0,5 e 5%). O LPS inibiu a proliferação celular na presença ou não de Papacárie Duo®, sem apresentar citotoxicidade. O Papacárie Duo® induziu a expressão de Ptgs2 e Il10, sem alterar Tnf e Mmp9. Portanto, o Papacárie Duo® foi citotóxico, dependendo da concentração, e apresentou efeito inibitório na diferenciação de células da polpa (OD-21), sem entretanto influenciar a proliferação celular. Papacárie Duo® não impediu a proliferação de macrófagos, porém foi citotóxico na concentração de 5% mas não à 0,5%. Adicionalmente, Papacárie Duo® modulou a ativação de macrófagos pela indução da expressão de Ptgs2 e Il10, sem alterar a expressão de Tnf e Mmp9. / The minimally invasive treatment has been increasingly used in the treatment of dental caries, particularly in young children. Thus, the removal of carious tissue by chemical-mechanical method allows greater conservation of healthy tooth structure. The Papacárie Duo® is an easily applied material, and has bactericidal and anti-inflammatory properties. This material is applied over the carious dentin in order to promote a softening thereof, facilitating its removal. The cellular effects of Papacárie Duo® are little known, therefore this research was to evaluate the effect of Papacárie Duo® in undifferentiated cells from dental pulp (Chapter 1) and the capacity of Papacárie Duo® to induce macrophage activation and synthesis inflammatory mediators (Chapter 2). The Papacárie Duo® was prepared at concentrations of 0.5 and 5% by serial dilution from the gel obtained commercially. OD-21 cells and J774.1 macrophages were maintained in culture with the different treatments for a period of 24 hours to perform the cytotoxicity assay (LDH assay) and for 36 hours for evaluation of cell proliferation (MTT colorimetric assay). The following, was carried out the assessment of the relative gene expression of Ibsp, Runx2 and Spp1 genes in OD-21 cells, and Il10, Mmp9, Tnf and Ptgs2 in J774.1 cells by reverse transcription method and reaction in real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) using the TaqMan system after the stimulation period of 24 hours. The 5% Papacárie Duo® was cytotoxic to cells of dental pulp and inhibited cell proliferation and the expression of Runx2 and Ibsp. However, in both concentrations stimulated the expression of Spp1, which was higher at a concentration of 5%. In macrophages, the Papacárie Duo® was cytotoxic at concentrations of 5%, but did not affect the cell proliferation in any of the concentrations (0.5 and 5%). LPS inhibited cell proliferation in the presence or absence of Papacárie Duo® without giving cytotoxicity. The Papacárie Duo® induced the expression of Ptgs2 and Il10, without changing Tnf and Mmp9. Therefore, the Papacárie Duo® was cytotoxic, depending on the concentration, and showed inhibitory effect on the differentiation of pulp cells (OD-21), but without influencing cell proliferation. Papacárie Duo® not prevent macrophage proliferation, but was cytotoxic at a concentration of 5% but not more than 0.5%. Additionally, Papacárie Duo® modulated the activation of macrophages by inducing Il10 and Ptgs2 expression without altering the expression of ,Tnf, and Mmp9.

O tratamento minimamente invasivo tem sido cada vez mais empregado no tratamento das lesões de cárie dental, especialmente em crianças jovens. Com isso, a remoção do tecido cariado pelo método químico-mecânico permite uma maior conservação das estruturas dentais saudáveis. O Papacárie Duo® é um material de fácil aplicação e possui propriedades bactericidas e anti-inflamatórias. Este material é aplicado sobre a dentina cariada, a fim de promover um amolecimento desta, facilitando a sua remoção. Os efeitos celulares de Papacárie Duo® são pouco conhecidos, dessa forma esta pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito do Papacárie Duo® em células indiferenciadas da polpa dental (Capítulo 1) e a capacidade do Papacárie Duo® induzir a ativação de macrófagos e a síntese de mediadores inflamatórios (Capítulo 2). O Papacarie Duo® foi preparado nas concentrações de 0,5 e 5% por meio de diluição seriada, a partir do gel obtido comercialmente. Células OD-21 e macrófagos J774.1 foram mantidas em cultura com os diferentes tratamentos por um período de estimulação de 24 horas para realização do teste de citotoxicidade (Ensaio LDH) e por 36 horas para avaliação da proliferação celular (Ensaio Colorimétrico MTT). A seguir foi realizada avaliação da expressão gênica relativa dos genes Ibsp, Runx2 e Spp1 em células OD-21; e dos genes Il10, Mmp9, Ptgs2 e Tnf em células J774.1, pelo método de transcrição reversa e reação em cadeia de polimerase em tempo real (qRT-PCR), utilizando o sistema TaqMan® após estimulação o período de 24 horas. O Papacárie Duo® a 5% foi citotóxico às células da polpa dental e inibiu a proliferação celular, assim como a expressão de Runx2 e Ibsp. Porém em ambas as concentrações estimulou a expressão de Spp1, a qual foi maior na concentração de 5%. Em macrófagos, o Papacárie Duo® foi citotóxico na concentração de 5%, mas não influenciou a proliferação celular em nenhuma das concentrações (0,5 e 5%). O LPS inibiu a proliferação celular na presença ou não de Papacárie Duo®, sem apresentar citotoxicidade. O Papacárie Duo® induziu a expressão de Ptgs2 e Il10, sem alterar Tnf e Mmp9. Portanto, o Papacárie Duo® foi citotóxico, dependendo da concentração, e apresentou efeito inibitório na diferenciação de células da polpa (OD-21), sem entretanto influenciar a proliferação celular. Papacárie Duo® não impediu a proliferação de macrófagos, porém foi citotóxico na concentração de 5% mas não à 0,5%. Adicionalmente, Papacárie Duo® modulou a ativação de macrófagos pela indução da expressão de Ptgs2 e Il10, sem alterar a expressão de Tnf e Mmp9. / The minimally invasive treatment has been increasingly used in the treatment of dental caries, particularly in young children. Thus, the removal of carious tissue by chemical-mechanical method allows greater conservation of healthy tooth structure. The Papacárie Duo® is an easily applied material, and has bactericidal and anti-inflammatory properties. This material is applied over the carious dentin in order to promote a softening thereof, facilitating its removal. The cellular effects of Papacárie Duo® are little known, therefore this research was to evaluate the effect of Papacárie Duo® in undifferentiated cells from dental pulp (Chapter 1) and the capacity of Papacárie Duo® to induce macrophage activation and synthesis inflammatory mediators (Chapter 2). The Papacárie Duo® was prepared at concentrations of 0.5 and 5% by serial dilution from the gel obtained commercially. OD-21 cells and J774.1 macrophages were maintained in culture with the different treatments for a period of 24 hours to perform the cytotoxicity assay (LDH assay) and for 36 hours for evaluation of cell proliferation (MTT colorimetric assay). The following, was carried out the assessment of the relative gene expression of Ibsp, Runx2 and Spp1 genes in OD-21 cells, and Il10, Mmp9, Tnf and Ptgs2 in J774.1 cells by reverse transcription method and reaction in real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) using the TaqMan system after the stimulation period of 24 hours. The 5% Papacárie Duo® was cytotoxic to cells of dental pulp and inhibited cell proliferation and the expression of Runx2 and Ibsp. However, in both concentrations stimulated the expression of Spp1, which was higher at a concentration of 5%. In macrophages, the Papacárie Duo® was cytotoxic at concentrations of 5%, but did not affect the cell proliferation in any of the concentrations (0.5 and 5%). LPS inhibited cell proliferation in the presence or absence of Papacárie Duo® without giving cytotoxicity. The Papacárie Duo® induced the expression of Ptgs2 and Il10, without changing Tnf and Mmp9. Therefore, the Papacárie Duo® was cytotoxic, depending on the concentration, and showed inhibitory effect on the differentiation of pulp cells (OD-21), but without influencing cell proliferation. Papacárie Duo® not prevent macrophage proliferation, but was cytotoxic at a concentration of 5% but not more than 0.5%. Additionally, Papacárie Duo® modulated the activation of macrophages by inducing Il10 and Ptgs2 expression without altering the expression of ,Tnf, and Mmp9.