Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / Os papilomavírus humanos (HPVs) oncogênicos são importantes agentes na gênese do câncer ginecológico e têm sido implicados também nos cânceres da boca. Com objetivo de avaliar a relação entre o HPV e o carcinoma espinocelular (CEC) da língua, foram selecionados 50 pacientes do sexo masculino, da raça branca, fumantes e com diagnóstico histológico de CEC, e um grupo controle composto por 10 pacientes sem evidências clínicas de lesão na língua. A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para detectar a presença do genoma HPV em amostras de tecido fresco, provenientes CEC da margem da língua. Trinta e sete pacientes (74%) apresentaram resultado positivo de PCR para papilomavírus oncogênicos, sendo que no grupo controle apenas uma amostra (10%) foi positiva para os papilomavírus não-oncogênicos. Pôde-se concluir através de análise estatística deste trabalho que o paciente portador de papilomavírus oncogênico na cavidade bucal possui 25,6 vezes mais chance de desenvolver o CEC da língua devendo, portanto ser acompanhado de forma sistemática, através de exames clínico e complementar. / The oncogenic human papillomavirus (HPVs) are important agents in the genesis of gynecological cancer and have been also related to mouth cancer. Aiming to assess the relation between HPV and squamous cell carcinoma (SCC) of the tongue, 50 white male smokers with a histological diagnosis of SCC and a control group composed of 10 subjects with no clinical evidence of lesions in the tongue were selected. Polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the presence of the HPV genome in fresh tissue samples from SCC in the edge of the mouth. Thirty-seven patients (74%) had a positive PCR for oncogenic papillomavirus, and in the control group only one sample (10%) was positive for non-oncogenic papillomavirus. Based on the statistical analysis, we concluded patients with oncogenic papillomavirus in the oral cavity are 25.6-fold more likely to develop SCC of the tongue and must be systematically followed-up by clinical and complementary tests. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2016-04-19T21:04:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Priscila Marinho.pdf: 1383745 bytes, checksum: 6b862d0e24aa8d87583921ea791aa1d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-05-16T14:03:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Priscila Marinho.pdf: 1383745 bytes, checksum: 6b862d0e24aa8d87583921ea791aa1d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-16T14:03:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Priscila Marinho.pdf: 1383745 bytes, checksum: 6b862d0e24aa8d87583921ea791aa1d4 (MD5) / CAPES / Biomarcadores de progressão tumoral são importantes na determinação do prognóstico e resposta ao tratamento em carcinoma de células escamosas da cavidade bucal. Este estudo teve como objetivo avaliar a frequência de infecção pelo HPV e a expressão de p16 como biomarcador de prognóstico em carcinoma de células escamosas da cavidade bucal. Dados clínico-patológicos e tecido tumoral de 90 indivíduos com carcinoma de células escamosas da cavidade bucal foram obtidos por entrevista e análise de prontuários. Detecção de HPV foi realizada à partir de amostras de tecido tumoral por PCR utilizando o conjunto de primers PGMY09/11. A seguir, as mesmas amostras foram submetidas à PCR com os primers MY09/11 e nested PCR com os primers GP5+/6+. Expressão de p16 foi detectada por imunohistoquímica. Análise estatística foi feita através de associação de variáveis, utilizando o teste de qui-quadrado e exato de Fisher. Sobrevida doença-específica (SDE) e sobrevida livre de doença (SLD) foram estimadas usando método de Kaplan-Meier. Comparação entre as curvas de sobrevida foram realizadas com o teste Log-Rank. Comparação entre status da infecção pelo HPV e expressão de p16 foram analisadas pelo teste Cox. Todos os testes com P ≤ 0.05 foram considerados significantes. A frequência de infecção pelo HPV na população estudada foi de 3,70% detectadas apenas com a nested PCR. Expressão de p16 foi observada em 21,87% das amostras analisadas. A SDE foi de 25,5 meses (95% IC = 20,03 - 31,00), enquanto a SLD foi de 30 meses (95% IC = 25,63 – 34,48). Maior SDE foi observada em indivíduos com tumores em estádio inicial (I-II) (P=0,001), tumores < 2cm (P=0,001), sem metástase em linfonodos regionais (P=0,006) e aqueles submetidos a tratamento cirúrgico (P<0,0001). Em conclusão, o status da infecção pelo HPV não mostrou-se um bom marcador de prognóstico e parece não ser determinante na tumorigênese em CCE da cavidade bucal, uma vez que apresentou baixa frequência de infecção. A expressão de p16 não foi um indicador determinante da presença de HPV nas amostras estudadas e um maior número de casos é necessário para avaliar sua aplicabilidade como marcador de prognóstico na população estudada. / Tumor progression biomarkers are important in determining prognosis and treatment response in squamous cell carcinoma of the oral cavity. This study aimed to evaluate the frequency of HPV infection and p16 expression as a biomarker of prognosis in squamous cell carcinoma of the oral cavity. Clinicopathological data and tumor tissue of 90 patients with squamous cell carcinoma of the oral cavity were obtained by interview and review of medical records. HPV detection was performed starting from tumor tissue samples by PCR using the primer set PGMY09/11. Next, the same samples were subjected to PCR with primers MY09 / 11 primers and nested PCR with GP5+/6+ primers. P16 expression was detected by immunohistochemistry. Statistical analysis was performed using variable association, using the chi-square and Fisher exact test. Disease-specific survival (DSS) and disease-free survival (DFS) were estimated using Kaplan-Meier. Comparison between the survival curves were performed using the log-rank test. Comparison status of HPV infection and p16 expression were analyzed by Cox test. All tests with P≤0,05 were considered significant. The frequency of HPV infection in this population was 3,70% detected only with nested PCR. p16 expression was observed in 21.87% of the analyzed samples. The DSS was 25.5 months (95% CI = 20.03 to 31.00), while the DFS was 30 months (95% CI = 25.63 to 34.48). Most DSS was observed in subjects with initial stage tumors (I-II) (P=0,001), tumor <2 cm (P=0,001), without regional lymph node metastasis (P=0,006) and those undergoing surgical treatment (P<0,0001). In conclusion, the status of HPV infection not proved to be a good prognostic marker and does not seem to be decisive in tumorigenesis in SCC of the oral cavity, since it showed low frequency of infection. The expression of p16 was not a key indicator of the presence of HPV in all samples and a greater number of cases it is necessary to evaluate its applicability as a prognostic marker in this population.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-06Bitstream added on 2014-06-13T20:03:02Z : No. of bitstreams: 1 kawata_lt_dr_araca.pdf: 1246612 bytes, checksum: 16cc6433f58bd5e31123db2601352d36 (MD5) / Os resultados da presença do papilomavírus humano (HPV) em relação ao câncer das vias aerodigestivas superiores são muito controversos. Destas vias, a orofaringe tem sido a localização com maior prevalência de HPV, o que desperta grande interesse dos pesquisadores sobre a real participação do vírus na carcinogênese desta região. Este trabalho teve como objetivo verificar a prevalência de HPV em pacientes com carcinoma espinocelular de orofaringe, através da reação em cadeia polimerase (PCR) e correlacioná-la com dados demográficos, clínico-patológicos e de sobrevida. O estudo foi realizado através da análise de 27 peças oriundas de blocos de parafina obtidos de pacientes portadores de carcinoma espinocelular de orofaringe diagnosticados e tratados no Centro de Oncologia Bucal da Faculdade de Odontologia de Araçatuba - UNESP. Foram realizadas extrações do DNA com o QIAamp DNA minikit, conforme instrução do fabricante. Após confirmar a presença e integridade do DNA, foi realizada a nPCR para detecção do HPV. Dois grupos foram formados considerando-se a presença ou ausência do HPV. Foram amplificadas 26 amostras para o gene -globina sendo que o HPV foi detectado em 50% dos casos estudados. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos em relação as variáveis clínico-patológicas e a sobrevida. / Reports on the presence of human papillomavirus (HPV) in upper aerodigestive tract are very controversial. In this tract, the oropharynx has been the site with the highest prevalence of HPV, which encourage the great interest of researchers for the real role of the virus in the carcinogenesis of this area. This study had the objective of verifying the HPV prevalence in patients with oropharyngeal squamous cell carcinoma using polymerase chain reaction (PCR) and its correlation with demographic data, clinicopathological aspects and survival. This study was accomplished by the analysis of embedded paraffin tissues of oropharyngeal squamous cell carcinoma from 27 patients diagnosed and treated in São Paulo State University, Dentistry College of Araçatuba – UNESP. DNA extraction was accomplished with QIAamp DNA minikit, according to the manufacturer´s protocol. After confirming the presence and integrity of DNA, nPCR for HPV was performed. Two groups were formed, considering patients with HPV and without HPV. -globin gene was PCR amplified in 26 samples and the HPV detected in 50% of the studied cases. There was no statistically significant difference between the groups in relation of clinicopathological variables and survival.

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-21. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:51:02Z : No. of bitstreams: 1 000865639_20170424.pdf: 263980 bytes, checksum: 15fc94ccf0076116715ab6e82b5b206e (MD5) Bitstreams deleted on 2017-04-24T11:16:42Z: 000865639_20170424.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-04-24T11:17:27Z : No. of bitstreams: 1 000865639.pdf: 1375136 bytes, checksum: edf870807fd646427b740bb501c96718 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: A infecção por genótipos de alto risco doPapilomavírus Humano (HPV) está associada ao desenvolvimento das lesões cervicais pré-invasivas e do carcinoma cervical invasor. A carga viral e o estado físico desses genótipos de HPV são considerados importantes biomarcadores para a progressão dessas lesões. A resposta imune do hospedeiro tem um papel importante na história natural da infecção pelo HPV na cérvice uterina como, por exemplo, a persistência viral e o desenvolvimento do câncer cervical. As citocinas são os principais mediadores desta resposta imune e são capazes de regular a transcrição do HPV dependendo do padrão de resposta ao qual estão associadas. O padrão Th1 contribui para o desenvolvimento da imunidade celular contra a infecção pelo HPV e está relacionado com clearance dessa infecção.Por outro lado, o padrão Th2 está associado com a persistência viral da infecção e com a progressão das lesões cervicais. A maioria dessas infecções provavelmente envolve um balanço entre osperfis Th1 e Th2 da resposta imune. Objetivo: Avaliar a concentração de IL-1β, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-e INF- na secreção e no soro e a intensidade da imunomarcação destas citocinas nas biópsias cervicais. Além disso, determinar a carga viral e o estado físico do HPV16 em mulheres portadoras de lesão intraepitelial escamosa de baixo grau (LIEBG), lesão intraepitelial escamosa de alto grau (LIEAG), carcinoma cervical invasor (CCI) e no grupo controle.Pacientes e Métodos: Foram incluídas no estudo 109 mulheres com diagnóstico histopatológico de LIEBG (n=16), LIEAG (n=40), CCI (n=13) e 40 mulheres sem alterações histopatológicas na biópsia do colo do útero (grupo controle), atendidas no Ambulatório de Ginecologia Preventiva do Hospital Amaral Carvalho, Jaú, SP. As concentrações das diferentes citocinasno soro e na secreção cervical foram determinadas por ensaio imunoenzimático... / Introduction: Infection with high-risk genotypes of the human papillomavirus (HPV) is associated with the development of preinvasive cervical lesions and invasive cervical carcinoma. The viral load and physical state of HPV genotypes are considered important biomarkers for lesion progression. The immune response has an important role in the natural history of HPV infection in the uterine cervix, as, for example, the viral persistence and the development of cervical cancer. Cytokines are the main mediators of this immune response and they regulate the HPV transcription depending on the response pattern to which they are related. The Th1 pattern contributes to the development of cellular immunity against HPV infection and its clearance. On the other hand, Th2 pattern is associated with the persistence of viral infection and the progression of cervical lesions. Most of these infections probably involves a balance between Th1 and Th2 immune response profiles.Objective: To evaluate the concentration of IL-1 β, IL-4, IL-6, IL-10,TNF-and INF-in secretionand serum and also to assess the immunostaining intensity of these cytokines in cervical biopsies.Moreover, the present study aimed to determine the viral load and physical state of HPV16 in women with low-grade squamous intraepithelial lesion (LSIL), high-grade squamous intraepithelial lesion (HSIL), invasive cervical carcinoma (ICC) and also in the control group.Patients and Methods: This study included 109 women with histopathologic diagnosis of LSIL (n=16), HSIL (n=40), ICC (n=13) and 40 women with no pathological changes on cervix biopsy (control group) attended in Preventive Gynaecological Ambulatory at the Amaral Carvalho Hospital, Jaú, São Paulo, Brazil. Cytokine concentrationwas determined in serum and cervical secretion by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Immunohistochemistry was used to evaluate the immunostaining intensity of cytokines in biopsy ... / FAPESP: 11/16009-0

Resumo: O carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço é uma neoplasia cujo principal fator de risco é o consumo de tabaco e/ou álcool. As infecções pelo HPV têm sido observadas nesse grupo de tumores. Os HPVs de alto risco podem induzir alterações calulares pela interação de suas proteínas E6 e E7 com as proteínas p53 e a pRb, respectivamente. As oncoproteínas são insuficientes para o desenvolvimento do fenótipo maligno, sugerindo a presença de outros cofatores, como a susceptibilidade genética. O gene TP53 possui um polimorfismo que resulta na presença de uma prolina ou de uma arginina na posição correspondente ao códon 72, no exon 4. O objetivo do presente estudo foi avaliar o papel da infecção pelo HPV e do polimorfismo de TP53 na carcinogênese de cabeça e pescoço. Foram analisadas 142 amostras de indivíduos controle e 50 amostras de pacientes. Os resultados mostraram a presença do HPV em 10,6% dos controles e em 16% dos tumores. A análise da freqüência de distribuição dos genótipos relativos revelou 50% Arg/Arg, 43% Arg/Pro e 7% Pro/Pro no grupo controle e 52% Arg/Arg, 32% Arg/Pro e 16% Pro/Pro no grupo dos tumores. A análise estatística desses dados não mostrou diferença significativa na distribuição dos genótipos e dos alelos entre os dois grupos, independentemente da presença do HPV, à exceção dos indivíduos Pro/Pro, que estão associados à ausência do HPV. O alelo arginina e o genótipo Arg/Pro têm efeito protetor ao desenvolvimento dos tumores. O HPV não representa risco aos carcinomas espinocelulares de cabeça e pescoço. / Abstract: Head and neck squamous cell carcinoma is a disease associated with tobacco and/or alcohol abuse. There are evidences that oncogenic HPV may also be a risk for upper aerodigestive tract cancers. High-risk HPVs encode two early proteins, E6 and E7, that can bind to p53 and pRb, respectively, and induce its degradation or inactivation. The TP53 gene has a single polymorphism at codon 72 of exon 4 that encodes either arginine (Arg) or proline (Pro). The purpose of this study was to evaluate the role of HPV infection and p53 polymorphism in head and neck cancer. We analyzed 50 tumors as well swabs of oral mucosa from 142 control individuals by PCR technique. The prevalence of HPV in controls was 10.6% and in cancer specimens was 16%. The frequency of distribution of genotypes in controls was 50% Arg/Arg, 43% Arg/Pro and 7% Pro/Pro and in tumors was e 52% Arg/Arg, 32% Arg/Pro e 16% Pro/Pro. Contrarely to the results of some studies on cervical cancer, no association between any TP53 genotype or allele and the development of head and neck cancer was observed, regardless of HPV status, except for Pro/Pro genotype which is associated with the absence of HPV. Arginine allele and Arg/Pro genotype appear to protect against head and neck cancers. Also, the data showed that HPV infection results in no increasing risk of developing head and neck tumors.. / Orientador: Paula Rahal / Coorientador: Eloiza Helena Tajara da Silva / Banca: João Manuel Grisi Candeias / Banca: Claudia Regina Bonini Domingos / Mestre

Orientador: Silvia Regina Rogatto / Resumo: O carcinoma de células escamosas de laringe (CCEL) é um dos mais comuns que acometem a região da cabeça e pescoço, representando aproximadamente 25% dos tumores malignos desta localização anatômica. Os fatores de risco associados ao desenvolvimento deste tumor são o consumo de tabaco e álcool, história familiar e a infecção pelo vírus do papiloma humano (HPV) em uma parcela dos casos. A ocorrência de segundos tumores primários e metástases é frequentemente relatada nos CCEL. Entretanto, até o momento, não há marcadores moleculares úteis na prática clínica que sejam capazes de predizer a progressão e a evolução clínica da doença. Neste contexto, as plataformas de microarranjos de oligonucleotídeos (microarrays), têm possibilitado uma análise mais ampla na busca por marcadores de detecção precoce, progressão, resposta e risco de recorrência e metástase. Foram incluídos neste estudo 88amostras de CCEL de pacientes não tratados. O grupo teste foi composto por 35 CCEL avaliados previamente para expressão gênica global (8x60K, Agilent Technologies) e 33 para a expressão de miRNAs (plataforma Array 8x60K, Agilent Technologies). O grupo de validação foi formado por 33amostras fixadas em formalina e em blocos de parafina (FFPE) e 19 amostras de tumor a fresco. O grupo teste foi avaliado para genotipagem para o HPV (LINEAR ARRAY HPV Genotyping Test, Roche), resultando em dois casos positivos para HPV16. A análise de expressão de transcritos revelou 1.680 genes diferencialmente expressos comparados aos tecidos normais de laringe (necrópsias). A análise de expressão global de miRNAs revelou 89 miRNAs diferencialmente expressos na comparação entre tecido normal e tumoral. A integração entre os dados de transcritos codificadores e de miRNAs (correlação negativa r<0) revelou alterações recorrentes em um subgrupo de genes associados com a degradação de componentes da matriz extracelular... / Abstract: Laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) is one of the most common head and neck malignancies representing approximately 25% of the tumors located in this region. Risk factors associated to development of LSCCs include alcohol and tobacco consumption, family history of cancer and human papilloma virus (HPV) infection. Second primary tumors and metastasis are frequently observed in patients with LSCC. To date, no useful molecular markers have been described that can successfully predict disease progression and clinical outcome. In this context, large scale molecular studies enable a global analysis of tumor molecular alterations aiming to reveal biomarkers for early diagnosis, prognosis and response to therapy. LSCC samples were obtained from 88 untreated patients. Global gene (Array plataform 8x60K, Agilent Technologies) and miRNA expression (Array platform 8x60K, Agilent Technologies) profiles were evaluated in 35 and 33 samples, respectively (Test group, N=36). An independent group of samples (N=33, validation group) was included, being 33 formalin fixed and paraffin embedded tissue samples and 19 fresh frozen tissues. HPV genotyping using LINEAR ARRAY HPV Genotyping Test (Roche) was performed in tumor samples from test group. Only two cases were HPV16-positive. The expression analysis revealed 1,680 differentially expressed genes in tumors compared to normal tissue (pool of normal laryngeal samples from necropsies). The miRNA analysis revealed 89 miRNAs differentially expressed. Integrative transcriptome and miRNAs analysis data (negative correlation r<0) revealed a subset of altered genes associated with the degradation of extracellular matrix components (MMP3, MMP9, MMP10, MMP13, COL10A1 and COL3A1) and neoplastic processes (CAV1, ERBB4, HLF,HMGA2, HOXB6, KLF2, PDCD4, PPP1R3 and TOP2), as well as their putative miRNA regulators (hsa-miR-199b-5p, hsa-miR-218-5p, hsa-miR-29c-3p, hsa-miR-21-5p, hsa-miR-204-5p, hsa-miR-125b-5p, hsa-miR- ... / Mestre

Orientador : Christiane Pienna Soares / Coorientador: Valeria Valente / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Cleverton Roberto de Andrade / Resumo: O câncer de colo de útero é um problema de saúde pública mundial, especialmente nos países em desenvolvimento, configurando a quarta neoplasia feminina mais comum no mundo. A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) é o principal fator de risco para o desenvolvimento do referido câncer, estando presente em 90% dos casos de câncer de colo uterino na população mundial. Frente a busca por novos agentes quimioterapêuticos, os produtos naturais tem contríbuido intensamente para a identificação dessas substâncias e o desenvolvimento da terapêutica moderna. Maitenina, é um triterpeno quinonametídeo extraído das raízes da plana Maytenus ilicifolia, que possui algumas atividades biológicas já relatadas, como antifúngica, antiprotozoária e principalmente ação antitumoral. No momento não existem relatos na literatura relacionando a atividade da maitenina em células infectadas por HPV-16. O objetivo do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade da maitenina em linhagem de carcinoma cervical infectada por HPV-16 (SiHa), não-infectada pelo vírus (C-33 A) e queratinócitos humanos imortalizados (HaCaT), bem como verificar a indução de apoptose e/ou necrose pelo ensaio de Hoechst e Iodeto de Propídeo e indução de apoptose pela atividade de caspase-3 nas três linhagens celulares, além de verificar alterações no ciclo celular das células tratadas com maitenina e o potencial de genotoxicidade e mutagenicidade, além de avaliar a proliferação das três linhagens. O ensaio de citotoxicidade foi realizado pelo método da sulforodamina B, e as três linhagens celulares foram tratadas durante 6, 12 ou 24 horas. Foi possível observar um efeito concentração e tempo resposta nas três linhagens analisadas. O CI50 foi de 3,26, 8,49 e 3,09 μM para as linhagens SiHa, C-33 A e HaCaT respectivamente, no tempo de tratamento de 24 horas. Com o intuito de avaliar o potencial efeito indutor de apoptose foi realizado o ensaio... / Abstract: Cervical cancer is a worldwide public health problem, especially in developing countries, setting the fourth most common female cancer in the world. The infection by human papillomavirus (HPV) is the main risk factor for the development of this cancer, being present in 90% of cases of cervical cancer in the world population. Forward the search for new chemotherapeutic agents, natural products have strongly contributed to the identification of these substances and the development of modern therapeutics. Maytenin is a quinonemethide triterpene extracted from the roots of Maytenus ilicifolia plant, which has some biological activities previously reported as an antifungal, antiprotozoal and especially antitumor action. At the moment there are no reports in the literature relating the activity of maytenin in infected cells by HPV-16. The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity of maytenin in cervical carcinoma line infected by HPV-16 (SiHa), non-infected by the virus (C-33 A) and by immortalized human keratinocytes (HaCaT), as well as verifying the induction of apoptosis and / or necrosis by Hoechst test and propidium iodide and the induction of apoptosis by caspase-3 activity in all three cell lines, in addition to check for changes in the cell cycle of treated cells with maytenin and the potential of genotoxicity and mutagenicity, and to evaluate the proliferation of the three cell lines. The cytotoxicity assay was performed by sulforhodamine B method and the three cell lines were treated during 6, 12 or 24 hours. It was possible to observe a concentration effect and response time in three lines analyzed. The IC50 was 3,26, 8,49 and 3,09 μM for SiHa, C-33 A and HaCaT lines respectively, in 24 hours treatment time. In order to evaluate the potential inductive effect of apoptosis it was performed a marking cytomorphological test with Hoechst and propidium iodide in 6 and 12 hours treatment times, and for the three cell lines it was ... / Mestre

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Luisa Lina Villa / Banca: Luis Octávio Regasini / Resumo: O câncer cervical é um problema de saúde pública mundial, especialmente nos países em desenvolvimento representando 12% de todos os tipos de neoplasias malignas que acometem as mulheres, configurando a segunda neoplasia ginecológica mais freqüente no mundo. Estudos epidemiológicos e moleculares demonstram a forte associação entre a etiologia do câncer cervical associado à infecção pelo HPV, especialmente para os tipos de alto risco oncogênico (HP-V16 e HPV-18). A cancerologia experimental, utilizando cultura de células, é de grande valia para se estudar os diversos aspectos relacionados aos processos neoplásicos cervicais. Alguns fármacos usados na quimioterapia são oriundas de espécies vegetais ou derivadas de um protótipo natural. Os produtos naturais têm contribuído intensamente para o desenvolvimento da terapêutica moderna. A quimioprevenção envolve o uso de substâncias naturais ou sintéticas para reduzir o risco de desenvolvimento de câncer. Por esta razão, o presente estudo foi inserido no Projeto de Bioprospecção BIOTA-FAPESP para a avaliação de dois compostos isolados da planta Pterogyne nitens, uma planta com conhecida atividade citotóxica, antioxidante e antifúngica que está distribuída do sudeste ao sul do Brasil, principalmente na Mata Atlântica e no Cerrado. No presente estudo, o potencial inflamatório, antitumoral e quimiopreventor de pteroginina e pteroginidina foram estudados em cultura de células normais e tumorais de câncer cervical (HeLa, SiHa e C33A), queratinócito normal de pele (HaCaT), corioncarcinoma (JEG-3), hepatocarcinoma murino (Hepa1c1c7) e hepatocarcinoma murino mutado (TAOc1BPrc1). Portanto foram realizados ensaios de citotoxicidade por MTT, de determinação de citocinas: IL1-β, IL-4, IL-6, TNF-α e IFN-γ por ELISA, da atividade antitumoral... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cervical cancer is a public health problem worldwide, mainly in developing countries, representing 12% of all types of malignancies that affect women, and the second common gynecologic malignancy in the world. Molecular and epidemiological research showed a strong association between infection, with HPV, especially high-risk HPV, and the etiology and progression of cervical cancer. Cell culture based on experimental oncology is valuable for study of various features of neoplasic processes. Several drugs used in chemotherapy were isolated from plants species or derived from a natural prototype. Natural products have contributed to the development of modern therapeutics. Chemoprevention involves the use of natural or synthetic substances to reduce the risk of developing cancer. Thus, this study, Bioprospecting Project BIOTA-FAPESP was aimed at assessing two compounds from Pterogyne nitens, a plant with known antiinflammatory and antioxidant activities, is distributed from southeast to southern Brazil, mainly in the Forest Atlantic and Cerrado biomes. The anti-inflammatory, antitumor and quimiopreventor potentials of the compounds pterogynine and pterogynidine was studied in normal and tumor cell lines: cervical cancer (HeLa, SiHa and C33A), normal skin keratinocytes (HaCaT), chorioncarcionoma (JEG-3), murine hepatocellular carcinoma (Hepa 1c1c7) and mutated murine hepatocellular carcinoma (TAOc1BPrc1). These compounds were assesmet for of cytotoxicity (MTT), determination of inflammatory cytokines IL1-β, IL-4, IL-6, TNF-α and IFN-γ (ELISA), antitumor activity with sHLA-G molecule (ELISA) and chemoprevention with quinone reductase (QR). The results showed that both tested compounds exhibited high concentration-dependent cytotoxicity to the three cervical carcinoma cell... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Marilia de Freitas Calmon / Coorientador: Paula Rahal / Coorientador: Laura Sichero / Banca: Isabel Maria Vicente Guedes de Carvalho-Mello / Banca: Enrique Mario Boccardo Pierulivo / Resumo: A Papilomatose Respiratória Recorrente (PRR) é uma doença caracterizada pela presença de tumores benignos no trato respiratório superior, sendo a laringe o sítio de lesão mais comum. Esta doença tem uma distribuição de idade bimodal, permitindo sua classificação em papilomatose juvenil ou adulta. O principal agente etiológico da PRR é o Papilomavírus Humano (HPV), um grupo de vírus de DNA, dos quais mais de 150 tipos já foram identificados. HPV-6 e HPV-11 são os tipos mais encontrados em PRR. Há poucos estudos sobre a distribuição das variantes moleculares de HPV de baixo risco. Desta maneira, o objetivo deste estudo foi avaliar a variabilidade genética do gene E6 entre isolados de HPV-6 e HPV-11 detectados em amostras de papilomatose respiratória recorrente (PRR) obtidas em uma coorte de pacientes brasileiros. A fim de comparar as sequências de nucleotídeos identificados em nosso estudo com isolados previamente reportados provenientes de outras partes do mundo, e de diferentes sítios anatômicos (papilomatose de laringe, verrugas genitais, câncer cervical e esfregaço anal), foi realizada a análise filogenética para determinar as relações filogenéticas das variantes detectadas no Brasil com as variantes isoladas em outras regiões do mundo. A região codificante completa do gene E6 de 25 amostras foi clonada e sequenciada. Em 18 isolados foi detectado o DNA do HPV-6 (72%), e em 7 isolados o DNA do HPV-11 (28%). Um total de quatro variantes genômicas diferentes de HPV-6 e duas variantes genômicas de HPV-11 foram identificadas e nenhuma variante pode ser associada com o quadro clínico do paciente. Para a reconstrução filogenética foram utilizadas as sequências de E6 detectadas neste estudo adicionalmente às sequências anteriormente publicadas originárias da Eslovênia e da África do Sul. Devido ao pequeno... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Recurrent respiratory papillomatosis (RRP) is a disease characterized by benign neoplasms and can occur anywhere within the upper respiratory tract, but the most common lesion site is the larynx. This disease has a bimodal age distribution which forms the basis of its classification as juvenile or adult. The main etiological agent of RRP is Human Papillomavirus virus (HPV), a group of DNA virus with more than 150 identified types. HPV-6 and 11 are the most common types identified in RRP. There are few studies about the distribution of natural molecular variants of low-risk HPVs. So, the aim of this study was to evaluate the E6 early gene variability among HPV-6 and HPV-11 isolates detected in recurrent respiratory papillomatosis (RRP) samples obtained in a cohort of Brazilian patients. In order to compare nucleotide sequences identified in our study with previously reported sequences isolates from different anatomic sites (laryngeal papillomas, genital warts, cervical cancer and anal swabs) obtained from other parts of the world was performed phylogenetic analysis to determine the phylogenetic relationships of variants detected in Brazil with variants isolated in others regions of world. The complete coding region of the E6 gene of 25 samples were cloned and sequenced. HPV-6 DNA was detect in 18 isolates (72%) and HPV-11 DNA in 7 isolates (28%). A total of four different HPV-6 genomic variants and two HPV-11 genomic variants were identified and any variant could not be associated with the clinical outcome. Phylogenetic trees for both HPV types were reconstructed enclosing E6 sequences detected in our study in addition to formerly published sequences from Slovenia and South Africa. The small number of samples analyzed prevents the evaluation of the association between specific molecular variants and the... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

OBJECTIVES: To determine the association of epithelial lesions and penile Human Papillomavirus infection among women with Human Papillomavirus induced cervical epithelial lesions and their partners.METHODS: To obtain the answer to the objectives were developed two studies. The first cross- sectional with 82 partners of women with cervical lesions Human Papillomavirus induced, examined by peniscopy, cytology and genotyping. The second study a systematic review with meta-analysis. The authors collected published information in databases about the prevalence of penile epithelial lesions and explored potential associations in partners of women with HPV-induced lesions. For the analysis we used methodological standards STROBE Initiative. Additionally meta-analyzes were conducted involving the selected studies.RESULTS: Observed positive peniscopy in 100% of patients. Koilocytosis in76.8%, and viral DNA positive in 14%, Human Papillomavirus types found were 16, 31 and 33. There was a significant association between the presence of penile injury and the time of contact with the partner p = 0.02. The authors included 29 studies in systematic review with a total of 8033 patients. Studies of case-control showed better methodological quality assessment in STROBE (Strengthening the Reporting of Observational Studies in Epidemiology). All patients were included in the meta-analyzes. There was a positive association between the detection methods for HPV and peniscopy among partners of women with cervical lesions and HPV infection in cross-sectional studies with Relative Risk (RR) of 0.87 and 0.34, and case-control (RR 0.13 and 0.58). The association was negative among cohort studies (RR 2.41 and 1.40).CONCLUSION: Positive peniscopy prevalence was higher than those found in the literature. There was significant association between penile lesion and time for socializing, in detriment of other risk variables A significant positive association in the meta-analysis of cross-sectional studies and case-control seems to demonstrate that there is a positive risk to partner of the woman s cervical lesion also acquires viral infection. The relative risk observed in the search for associations between HPV infection and peniscopy with both, positive and negative results appeared as a protective factor for acquiring HPV induced lesions in man. These tests could represent preventive methods for acquiring viral infection. / OBJETIVOS: Determinar a prevalência e associação de lesões epiteliais penianas e infecção por HPV entre mulheres com lesões epiteliais cervicais induzidas pelo HPV, e seus parceiros. MÉTODOS: Para obtenção da resposta aos objetivos foram elaborados dois estudos. O primeiro do tipo transversal prospectivo em 82 parceiros de mulheres com lesões cervicais HPV induzidas examinados através de peniscopia, citologia e genotipagem. O segundo uma revisão sistemática com metanálise onde os autores coletaram informações publicadas em bases de dados sobre a prevalência das lesões epiteliais penianas e exploraram as potenciais associações com as lesões HPV induzidas das parceiras. Para a análise metodológica utilizou-se os padrões da iniciativa STROBE (Strengthening the Reporting of Observational Studies in Epidemiology). Adicionalmente foram realizadas metanálises envolvendo os estudos selecionados. RESULTADOS: Observou-se peniscopia positiva em 100% dos pacientes, coilocitose em 76,8% , o DNA viral positivo em 14% , os tipos de HPVs encontrados foram 16, 31 e 33. Houve significativa associação entre a presença de lesão peniana e o tempo de convívio com a parceira p=0,02. Os autores incluíram 29 artigos na revisão sistemática, com um total de 8033 pacientes. Os estudos do tipo caso-controle apresentaram melhor qualidade metodológica na avaliação STROBE. Todos os pacientes foram incluídos nas metanálises. Houve associação positiva entre os métodos de detecção para o HPV e a peniscopia entre os parceiros de mulheres com lesão cervical ou infecção por HPV nos estudos transversais com Riscos Relativos (RR) de 0,87 e 0,34 e de caso- controle (RR de 0,13 e 0,58). A associação foi negativa entre os estudos de coorte (RR de 2,41 e 1,40). CONCLUSÃO: A prevalência de peniscopias positivas foi acima do encontrado na literatura. A associação entre a lesão peniana e o tempo de convívio, se mostrou significativo em detrimento de outras variáveis de risco. A associação significativa positiva na metanálise dos estudos transversais parece demonstrar que existe um risco positivo para o parceiro da mulher com lesão cervical também adquirir a infecção. O risco relativo observado nas associações entre a pesquisa para o HPV e peniscopias tanto com resultados positivos quanto negativos, apareceu como fator protetor para a infecção pelo Papilomavírus Humano no homem. Estes exames poderiam representar métodos preventivos para a aquisição da infecção viral.