Made available in DSpace on 2014-10-09T12:47:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 08287.pdf: 1642417 bytes, checksum: 48f844079650f71035ccb87b1dffe7a4 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

No presente estudo, avaliamos a resposta de anticorpos, por ELISA, contra um recombinante bacteriano baseado no domínio 11 da Proteína Ligação ao Duffy (DBP-RII) em indivíduos naturalmente expostos Plasmodium vivax. Amostras de soro de 160 pacientes com malária vivax, procedentes de duas áreas endêmicas do Estado do Pará (Belém e São Jorge), foram utilizadas neste estudo. Estes soros foram também testados contra outras duas proteínas recombinantes derivadas de merozoítas de P. vívax, para efeito de comparação da resposta de anticorpos: AMA-1 (Antígeno 1 Membrana Apical) e MSP119 (região C-terminal de 19 kDa da Proteína 1 Superfície do Merozoíta). A freqüência de indivíduos que apresentaram anticorpos IgG específicos contra as proteínas recombinantes DBP-RII, AMA-1 e MSP119 foi de 15,6% 50% e 93,1%, respectivamente. Observamos que a proporção de indivíduos que apresentaram anticorpos contra DBP-RII e AMA-1 aumentou de acordo com o maior número de exposições prévias ao P. vivax, enquanto que resposta de anticorpos contra a MSP119 desenvolveu-se rapidamente após uma única exposição ao parasita. A persistência da resposta de anticorpos contra DBP-RII, AMA-1 MSP119 foi avaliada em amostras de soro coletadas durante a infecção patente e dois ou nove meses após o tratamento. Observamos que, durante este período, não houve uma diminuição significativa das freqüências respondedores contra DBP-RII e AMA-1. Por outro lado, a freqüência respondedores contra a MSP119, diminuiu significativamente nove meses após o tratamento. Não observamos diferença significativa entre os títulos anticorpos obtidos contra DBP-RII e AMA-1, durante a infecção e dois ou nove meses após o tratamento, indicando que a resposta de anticorpos se manteve. Por outro lado, os títulos de anticorpos para MSP119 foram significativamente maiores durante a infecção patente do que nove meses após o tratamento. / In the present study, we evaluated by ELISA the antibody immune response to a recombinant protein based on the domain II of the Duffy Binding Protein (DBP-RII) in individuals naturally exposed to Plasmodium vivax. Serum samples from 160 patients with vivax malaria were collected in two endemic areas of State of Pará (Belém and São Jorge). For purposes of comparison, ELISA were also performed using two other recombinant proteins representing antigens derived from P. vivax merozoites: AMA-1 (Apical Membrane Antigen-1) and MSP119 (19kDa C-terminal region of Merozoite Surface Protein-1). The frequency of individuals who presented IgG antibodies specific to the recombinant proteins DBP-RII, AMA-1 or MSP119 were 15.6%, 50% or 93.1 respectively. We observed that the proportions of individuals who presented antibodies against DBP-RII or AMA-1 increased according to the number malaria episodes, while the antibodies response to MSP1 19 developed quickly after a single contact with the parasite. The persistence of antibodies response to DBP-RII, AMA-1 or MSP119 was compared in serum samples during patent infection or two and nine months following treatment. We observed that during this period the frequency responders to DBP-RII and AMA-1 remained similar. In contrast, the frequency of responders to MSP119 dropped significantly nine months after treatment. No difference was observed when we compared the antibody titers obtained DBP-RII or AMA-1 during the infection or after treatment. These results established that the antibodies response to DBP-RII or AMA-1 remained similar two or nine months after treatment. In contrast, the antibody titers to MSP119 were significantly lower nine months after treatment when compared to patent infection.

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T22:40:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Branco_Nilson_M.pdf: 3324626 bytes, checksum: 922a0ec9e9ca62f657865c7f3811fdb0 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A presença de espécies dos protozoários Cryptosporidium e de Giardia em água, principalmente as destinadas ao consumo humano, assumiu nos últimos 22 anos grande importância em Saúde Pública devido à veiculação hídrica de suas formas infectantes. Esses protozoários causam gastroenterites no ser humano e em diversas espécies animais. A transmissão desses protozoários ocorre pela via fecal-oral mediante a ingestão de água ou de alimentos contaminados, ou pelo contato direto (pessoa-a-pessoa ou animal-pessoa; transmissão zoonótica). A persistência de oocistos e cistos no ambiente e a grande resistência aos processos de desinfecção contribuem com a veiculação hídrica desses protozoários. Numerosos surtos de gastroenterite aconteceram nos últimos 25 anos devido à ingestão de água de consumo e involuntariamente águas recreacionais contaminadas. No Brasil é crescente a degradação de águas superficiais e subterrâneas devido à deficiência de infra-estrutura no sistema de esgotamento sanitário. Análises realizadas pela Sabesp sobre a qualidade microbiológica da água proveniente das fontes naturais da cidade de Campos do Jordão (nordeste do estado de São Paulo) revelam que 13, de um total de 22 fontes, apresentaram padrão de qualidade impróprio para o consumo humano ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The presence of protozoan parasites Cryptosporidium and Giardia mainly in water destined to the human consumption, assumed in the last 22 years, a great importance in Public Health due to the water transmission of its infectant forms. These protozoa cause gastroenteritis in human and in many animal species. The transmission of these parasites occurs by oral-fecal route, consumption of contaminated water or food or by the direct contact (person to person, animal to person or zoonotic transmission). The persistence of oocysts and cysts in the environment and its resistance to the conventional process of disinfection contribute to the waterbome transmission of these protozoa. Numerous outbreaks of gastroenteritis occurred in the last 25 years due to the consumption water and involuntarily recreational waters contaminated. In Brazil, the degradation of subterranean and superficial waters is growing due to the deficiency of infrastructure in the sanitary system. Analyses carried out by the Sabesp about the microbiological quality of the water originating from the natural springs of the city of Campos do Jordão (northeast of the state of São Paulo) revealed that 13, out of a total of 22 springs, presented standard of quality unfit for the human consumption ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:43:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:56:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 06648.pdf: 3159375 bytes, checksum: b1ad256abf7e9f79cfed807e33c3ce91 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:58:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 11100.pdf: 8300645 bytes, checksum: 9c727e3872cf11826392a56319e2787e (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:02:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:44:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:09:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 07003.pdf: 3920419 bytes, checksum: 9435c2aad6d4bdbb8a804a50227efa79 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:32:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:10:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 11288.pdf: 2211640 bytes, checksum: 164f2f80d3086eca966340404607988c (MD5) / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:47:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 08287.pdf: 1642417 bytes, checksum: 48f844079650f71035ccb87b1dffe7a4 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T17:55:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_MirnaAparecida_D.pdf: 2261433 bytes, checksum: 8a2057547b84881643df7c062530dc1e (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Cryptosporidium spp. e Giardia spp. são parasitos causadores de gastroenterites destacando se pela elevada incidência de casos, características de resistência aos tratamentos químicos e capacidade de permanência no meio ambiente. O importante papel desses protozoários em vários surtos epidêmicos de veiculação hídrica e alimentar coloca em evidência as hortaliças que, por serem ingeridas cruas, favorecem a aquisição destas parasitoses. No Brasil, são escassos os dados sobre a ocorrência destes protozoários em vegetais como alface e rúcula, alimentos frescos amplamente consumidos pela população. O propósito deste estudo foi investigar a ocorrência destes parasitos em amostras de hortaliças cultivadas na região agrícola de Campinas (SP), e comercializadas pela Central de Abastecimento de Campinas S.A. CEASA, avaliar a água utilizada na irrigação das mesmas, e as condições higiênico sanitárias das Unidades de Produção Agrícola UPAs estudadas (n=15). Para tanto, a presença de oocistos e cistos foi determinada em amostras de alface (Lactuca saliva) e rúcula (Eruca saliva) e parâmetros fisico químicos foram estabelecidos para a água de irrigação destes vegetais, em diferentes épocas do ano. As coletas foram realizadas durante dois anos consecutivos, nos períodos de maior freqüência d<;ls chuvas e de maior ocorrência (esperada) de casos de criptosporidiose em Campinas (devido à acentuada sazonalidade do protozoário no fim do verão e início do outono) e, em períodos que correspondessem a épocas de maior utilização das águas subsuperficiais na irrigação das hortaliças, devido à escassez de chuvas. As diversas amostras de vegetais, após serem lavadas com 100ml de solução contendo Tween 80 (0,01 %), foram filtradas em membranas de ésteres mistos de celulose (47mm de diâmetro e 3/lm de porosidade nominal), seguida de eluição mediante extração mecânica. Após concentração por centrifugação (1050 x g por 10 minutos), os sedimentos resultantes foram examinados mediante a reação de imunotluorescência direta e teste confirmatório das características morfológicas empregando se o corante tluorogênico DAPI (4',6' diamidino 2 phenylindole). Também se utilizou a técnica de centrífugo tlutuação em sulfato de zinco, com o intuito de comparar a eficiência de detecção destes protozoários nos vegetais. Amostras de água de irrigação (2 litros) foram processadas pela mesma metodologia. A presença de cistos de Giardia spp. ocorreu em 4,1% das 120 amostras de hortaliças examinadas, no primeiro e terceiro períodos de coleta, e não foram encontrados na água de irrigação. Cryptosporidium spp. não foi detectado em nenhum dos períodos investigados, tanto em relação às amostras de hortaliças quanto da água de irrigação. A técnica de centrífugo flutuação em sulfato de zinco mostrou se ineficiente, pois não foi revelada a presença de cistos de protozoários e oocistos de Cryptosporidium spp. nas amostras de hortaliças, quando este método foi empregado. A sensibilidade da técnica de filtração em membranas para os vegetais foi de 2,3 % a 63,1 % para oocistos e, para cistos, 1,1 % a 29,3 %. Em amostras de água de irrigação, a sensibilidade desta metodologia variou de 6,0 % a 15 % para Cryptosporidium spp. e, de 23,6 % a 25,8 % para Giardia spp.. Cistos foram encontrados em 6,6 % das amostras de alface, com densidade de 180 a 230 cistos/50g e, 1,6% das amostras de rúcula, com densidade de 180 cistos/50g de folhas de vegetal o que representa elevada importância em Saúde Pública, dada a possibilidade de aquisição de giardiose. O esclarecimento sobre a dispersão destes protozoários no ambiente e o aperfeiçoamento de procedimentos de detecção dos mesmos, quer em amostras hídricas ou alimentares, são vantajosos para o entendimento da epidemiologia destes patógenos / Abstract: Cryptosporidium spp. and Gim-dia spp. are waterborne parasites that cause gastroenteritis. They are known for the high incidence of cases and the chemical resistance to treatments and capacity to stay intact for a prolonged time in environment. Today, the great influence of protozoa in several waterborne and foodborne outbreaks, becomes evident that vegetables eaten raw are dangerous and favor acquisition of intestinal parasitosis. In Brazil, there is little information on transmission of Cryptosporidium spp. and Giardia spp. in fresh vegetables as lettuce and rucola, largely consumed by population. The objective of this study was to investigate the occurrence of Cryptosporidium and Giardia in vegetable samples from agricultural area in Campinas District (SP, Brazil), and commercialized by Central de Abastecimento de Campinas S.A, CEASA, as well to evaluate the water used in vegetable irrigation, and the health and hygiene related conditions of Unidades de Produção Agrícola - UPAs (n = 15). Therefore, the presence of cysts and oocysts was determined in lettuce (Lactuca saliva) and rucola (Eruca saliva) samples and physico chemical parameters were established for irrigation water of vegetables, in different seasons of the year. Collections were made over two consecutive years, in such a way that chqracterized seasons of higher frequency of rains corresponding to months of higher occurrence of cryptosporidiosis cases in Campinas district (due to accentuated seasonality of protozoa in the end of summer and fhe beginning of autumn) and in per~?ds that corresponded to séasons of high peak utilization of subsurface waters in vegetable irrigation due to lack of rain. After washed with 100 ml of Tween 80 (0,01 %) several vegetable samples were filtered through mixed esters of cellulose membranes (4 7mm diameter and 311m nominal porosity), followed by elution by mechanical extraction. After concentration by centrifugation (1050 x g 10 minutes), the resulting sediments were examined by means of direct immunofluorescence reaction and confirmatory morphological test using the fluorogenic stain DAP1 ( 4', 6' diamidino 2 phenylindole), it was also used zinc sulfate centrifugation flotation method to compare detection efficiency of protozoa in vegetables. Irrigation water samples (2L) were processed by the same methodology. The presence of Giardia spp. cysts occurred in 4,1% of 120 vegetable samples, in the first and third collection periods, cysts were not detected in irrigation water. Cryptosporidium spp. was not detected in either investigated seasons Cin relation to vegetable samples and irrigation water) and the presenee of eysts and ooeysts was not detected through zinc sulfate centrifugation flotation method in either vegetable samples. Sensibility of membrane filtration method for vegetables was 2,3 % to 63,1 % oocysts and 1, I % to 29,3 % eysts, respeetively. In irrigation water samples, the sensibility of methodology varied from 6,0 % to 15 % for Cryptosporidium spp. and from 2.,3 % to 25,8 % for Giardia spp.. Cysts were found in 6,6% of lettuce samples with a density of 180 to 230 cysts/50g, and 1,6 % of rueola samples with a density of 180 eysts/50g found on vegetable leaves. Therefore, it has a high importance for public health due to risk faetor for aequisition of giardiasis. The knowledge on protozoa spreading into environment and the improvement of deteetion process in food or water samples are useful for epidemiological understanding of those parasites / Doutorado / Doutor em Parasitologia