Pectobacterium carotovorum ssp. carotovorum (Pcc) is implicated in the destruction of ornamental plants in greenhouse recirculating systems. PCR-based detection and quantification of Pcc requires expensive instrumentation and knowledgeable users. This thesis describes the production of polyclonal antibodies and a single-domain antibody fragment (VHH) against Pcc lipopolysaccharide (LPS), and the development of user- friendly diagnostic assays for detection and quantification of the pathogen. Polyclonal ELISAs against heat-killed (HK) Pcc (limit of detection (LOD) = 81 CFU/ml; limit of quantitation (LOQ) = 216 CFU/ml) and Pcc LPS (LOD = 23 ng/ml; LOQ = 76 ng/ml) were developed. A preliminary user-friendly dipstick assay was also developed (≥ 105 CFU/ml). A phage display library was constructed (6.0 x 105 clones/ml), yielding one unique anti-Pcc LPS VHH. Using the Pcc LPS-specific VHH to produce affordable, user- friendly diagnostic assays is feasible since antibody fragments can be produced on a large scale through expression in Escherichia coli or Piccia pastoris. / Flowers Canada, CANADA-ONTARIO RESEARCH AND DEVELOPMENT (CORD) PROGRAM, Canada Research Chairs (CRC) Program, NSERC/NRC

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-09-19T14:09:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_Doutorado_Carolina_Barbosa_Malafaia_2016_PPGCB_UFPE.pdf: 5843362 bytes, checksum: c164be8fbab90a37d6db77986071cad9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-19T14:09:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_Doutorado_Carolina_Barbosa_Malafaia_2016_PPGCB_UFPE.pdf: 5843362 bytes, checksum: c164be8fbab90a37d6db77986071cad9 (MD5) Previous issue date: 2016-01-25 / CAPES / A formação de biofilme é uma característica importante para as bactérias, por ser uma formação natural e altamente influenciada pelo ambiente circundante, confere aos microrganismos alta tolerância às adversidades e torna-se importante na virulência para patógenos. Sendo assim, apresentamos nesta tese uma investigação da adesão bacteriana e desenvolvimento de biofilme das fitobactérias Ralstonia solanacearum (Rsol) e Acidovorax citrulli (Acc), agronomicamente importantes, sobre superfícies hidrofóbicas, foi investigado também o emprego de extratos vegetais de plantas oriundas da Caatinga, na inibição da adesão bacteriana e sua capacidade bactericida contra R. solanacearum, e foi determinado o método mais eficiente na preparação amostras proteicas para R. solanacearum, A. citrulli e Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) para aplicação em estudos futuros de investigação molecular da formação de biofilmes fitopatogênicos. A formação de biofilme por diferentes isolados bacterianos após 24h de incubação em diferentes meios de cultura foi quantificado pelo método de cristal violeta e suas estruturas observadas por microscopia eletrônica de varredura e microscopia confocal. Foram avaliados também 22 extratos aquosos de 16 plantas coletadas na Caatinga quanto a capacidade de inibição da formação de biofilme de Rsol. Quanto à eficiência na obtenção de proteínas, foram testados os métodos de Trizol, Fenol, Centrifugação e Lise e avaliados através de eletroforese uni e bidimensional. Quanto a formação de biofilme os resultados obtidos indicam que, nas condições testadas, isolados de Rsol se mostrou diferente entre os isolados tanto quantitativa quando morfologicamente onde os isolados B5-5 CGH26 CGH8 e SCN 21 foram moderados ou fortes produtores de biofilme. Já os isolados de Acc não foram bons produtores de biofilme, apresentando apenas os isolados Acc1.43 e Acc 1.73 como fortes formadores de biofilme com quantidade e morfologia semelhantes. No screening de atividade antibiofilme, dentre os extratos testados apenas ramos de Harpochilus neesianus e folhas de Myroxylon peruiferum apresentaram atividade antibiofilme superior a 83% e 50%, respectivamente, e Jacaranda rugosa apresentou atividade antimicrobiana contra todos os isolados de Rsol testados. Quanto à extração de proteínas de alta qualidade o método de Lise foi o mais eficiente para Rsol e Pcc, apresentando respectivamente 369 ± 4 e 212 ± 3 diferentes spots de proteínas, contudo para Acc o método de centrifugação foi o mais indicado com 224 ± 8 spots. De acordo com os resultados deste estudo conclui-se que a formação de biofilme pode ser quantitativa e estruturalmente distinta entre isolados da mesma espécie. O screening das propriedades antimicrobianas das plantas fornece base de dados para o desenvolvimento de novos agentes antibacterianos naturais contra fitopatógenos seguros para o meio ambiente e para o desenvolvimento de estudos moleculares da formação de biofilme faz-se necessária uma prévia determinação de métodos para obtenção das macromoléculas a serem analisadas, sendo assim a seleção de métodos de extração é um ponto crucial para obtenção de amostras de qualidade para analises confiáveis. / Biofilm formation is an important feature for bacteria due to its naturally occurring and highly influence by the surrounding environment, giving to the microorganisms high tolerance to adversity and becoming essential in virulence for pathogens. Thus, we present in this thesis an investigation about bacterial adhesion and biofilm development of the phytobacteria Ralstonia solanacearum (Rsol) and Acidovorax citrulli (Acc), agronomically important, on hydrophobic surfaces; it was also investigated the use of plant extracts from the Caatinga region through the inhibition of the bacterial adhesion and its bactericidal activity against R. solanacearum. The most efficient method to prepare protein samples for R. solanacearum, A. citrulli and Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) was determined to be applied in future studies of molecular investigation of the formation of pathogenic biofilms. The biofilm formation by different bacterial strains after 24 h incubation in distinct culture media was quantified by the crystal violet method and its structures were observed by scanning electron microscopy and confocal microscopy. There were also evaluated 22 aqueous extracts from 16 plants collected in the Caatinga as its potential of inhibition of Rsol biofilm formation. In what concerns the efficiency in obtaining proteins, Trizol, Phenol, centrifugation, and Lyse were the methods evaluated by one- and two-dimensional electrophoresis. The results for biofilm formation demonstrate that, under the tested conditions, Rsol strains were different, both quantitatively and morphologically, and the strains namely B5-5, CGH26, CGH8, and SCN 21 were moderate or strong biofilm producers. Regarding the results for Acc strains, it is possible to note that they were not good biofilm producers, unless the strains Acc1.43 and Acc1.73 that were considered strong biofilm producers with similar quantity and morphology patterns. In relation to the screening of antibiofilm activity, only branches of Harpochilus neesianus and leaves of Myroxylon peruiferum presented antibiofilm activity with values higher than 83% and 50%, respectively, and Jacaranda rugosa showed activity antimicrobial against all the tested Rsol strains. The extraction of high quality proteins was performed most efficiently by the Lysis method for Rsol and Pcc, respectively with 369 ± 4 and 212 ± 3 different spots of proteins, however the centrifuge method was better for Acc with 224 ± 8 spots. According to the results of this study it is possible to conclude that biofilm formation can be quantitatively and structurally distinct from strains of the same species. The screening of the antimicrobial properties of the plants provides data as a basis for the development of new natural antibacterial agents against safe phytopathogens for the environment; in addition, for the development of molecular studies about the biofilm formation it is necessary a preliminary determination of the methods suitable for obtaining the macromolecules to be analyzed, so the selection of extraction methods is a crucial point for obtaining quality samples for reliable analysis.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-17T15:01:49Z No. of bitstreams: 1 Katia Cilene da Silva Felix.pdf: 2202729 bytes, checksum: 8bf95b820172f7d6b51dfd5e4ca39314 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-17T15:01:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Katia Cilene da Silva Felix.pdf: 2202729 bytes, checksum: 8bf95b820172f7d6b51dfd5e4ca39314 (MD5) Previous issue date: 2012-12-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The soft rot caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum is the main bacterial disease of Chinese cabbage and lettuce in Brazil and the world. Chemical control of this disease has not been efficient, being necessary to search for new alternatives of control. Given the growing importance of soft rot as a limiting factor for the production of these vegetables in the regions of the Agreste and Mata of Pernambuco state, Brazil and the difficulty of effective control measures, the present study aimed to: (i) determine the effect Calcium in the control of soft rot in Chinese cabbage, (ii) select lettuce cultivars as promising sources of resistance to soft rot. Were tested two sources of calcium in different concentrations, calcium nitrate [Ca(NO3)2] a 0.00; 0.15 and 0.3 g L-1 and calcium chloride [CaCl2] a 0.00; 1 and 5 g L-1 applied leaf spraying and soil drench. When applied with both methods, Ca(NO3)2 was effective in controlling soft rot, as it reduced the disease severity by up to 48.5% when sprayed onto the leaves (0.15 g L-1). A significant increase in the leaf calcium content was observed only in the plants that were sprayed with higher doses of Ca(NO3)2 and CaCl2. In all of the calcium treatments, light microscopy analyses revealed an increased number of chloroplasts and improved structuring of the palisade parenchyma, while transmission electron microscopy analyses revealed an increased cell wall thickness that was especially evident for the 0.15 g L-1 Ca(NO3)2 treatment applied by leaf spraying and soil drenching. Of the 41 genotypes tested, 14 were moderately resistant when inoculated with Pcc-C, with severity scores ranging from 3.5 to 4.0; 27 genotypes were susceptible. Eleven of these genotypes, four susceptible and seven moderately resistant were selected to test their resistance stability against three pathogen isolates with different degrees of virulence (Pcc-36, Pcc-A1.1 and Pcc-23). Most of the genotypes evaluated (77%) exhibited the same reaction observed in the selection assays only against isolate Pcc-36: Veneza Roxa was susceptible, while Alface Grega, Mimosa Salad Bowl Roxa, Livia, Livinia, Salad Bowl, Vitória de Santo Antão and Saia Veia were moderately resistant. Vitória de Santo Antão was the only genotype that was also moderately resistant to isolates Pcc-A1.1 and Pcc-23. This genotype can be used as a promising source of stable and durable soft rot resistance. / A podridão mole causada por Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum é a principal fitobacteriose das culturas da couve-chinesa e alface no Brasil e mundo. O controle químico dessa doença não tem sido eficiente, sendo necessária a busca por novas alternativas de controle. Tendo em vista a crescente importância da podridão mole como fator limitante para a produção destas hortaliças nas mesorregiões do Agreste e Mata do estado de Pernambuco, Brasil e a dificuldade de medidas efetivas de controle, o presente trabalho teve como objetivos: (i) verificar o efeito do cálcio no controle da podridão mole em couve-chinesa; (ii) selecionar cultivares de alface como fontes de resistência à podridão mole. Foram testadas duas fontes de cálcio em diferentes concentrações, nitrato de cálcio (Ca(NO3)2) a 0,00; 0,15 e 0,3 g L-1) e cloreto de cálcio (CaCl2) a 0,00; 1 e 5 g L-1, aplicadas via pulverização foliar e rega do solo. Ca(NO3)2, nas duas formas de aplicação foi eficiente no controle da podridão mole, reduzindo a severidade da doença em até 48,5% via aplicação foliar (0,15 g L-1). Verificou-se aumento significativo do conteúdo de cálcio foliar apenas nas plantas pulverizadas com as maiores doses de Ca(NO3)2 e CaCl2. Em todos os tratamentos com cálcio, a microscopia de luz revelou aumento do número de cloroplastos e melhor estruturação do parênquima paliçádico, enquanto a microscopia eletrônica de transmissão evidenciou aumento de espessura da parede celular, com destaque para o tratamento Ca(NO3)2 a 0,15 g L-1 via pulverização foliar e rega do solo. De acordo com os resultados obtidos, Ca(NO3)2 a 0,15 e 0,3 g L-1, aplicado via pulverização foliar e rega do solo, apresentou potencial para o controle da podridão mole em plantas de couve-chinesa, estando essa eficiência associada a melhor estruturação e integridade da parede celular. Dos 41 genótipos de alface avaliados quanto à reação à podridão mole, visando identificar fontes de resistência, 14 apresentaram reação como moderadamente resistentes, com severidade variando de 3,5 a 4,0, enquanto 27 genótipos foram suscetíveis. Destes genótipos, 11 foram selecionados para o ensaio de estabilidade da resistência em relação a três isolados do patógeno com diferentes níveis de virulência, sendo quatro suscetíveis e sete moderadamente resistentes. A maioria dos genótipos avaliados (77%) voltou a expressar a mesma reação do ensaio de seleção em relação ao isolado Pcc-36, ou seja, reação susceptível (Veneza Roxa) e moderadamente resistente (Alface Grega, Mimosa Salad Bowl Roxa, Livia, Livinia, Salad Bowl, Vitória de Santo Antão e Saia Veia). Apenas o genótipo Vitória de Santo Antão manteve a reação de moderadamente resistente também para os isolados Pcc-A1.1 e Pcc-23. Portanto, esse genótipo pode ser utilizado como uma fonte promissora de resistência estável e durável contra a podridão mole.

Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliense (Pcb) is a plant pathogenic bacterium that causes blackleg and tuber soft rot disease of potato worldwide. Pectobacterium spp. are characterized by the secretion of large quantities of plant cell wall degrading enzymes. As the name indicates, Pectobacteria are pectinolytic pathogens, producing enzymes such as pectate lyase, polygalacturonase, and many others that are used to catalyse the breakdown of pectin, the main plant cell wall component. Consequently, virulence of Pectobacteria is highly reliant upon the production and secretion of macerating enzymes. Hence these bacteria are also referred to as “brute-force” pathogens. Infection and disease symptoms on plants commonly result in the development of blackleg disease, a characteristic black-like decay extending on the stems of infected potato plants. Furthermore, the infection of tubers results in the development of soft rot disease. Pcb is of particular interest in that among Pectobacterium spp. such as Pectobacterium atrosepticum (Pa), P. carotovorum subsp. carotovorum (Pcc), and P. wasabiae, Pcb strains are reported to be the most aggressive and virulent pathogens causing blackleg and soft rot disease of potato in many growing regions across the world. The fact that strains of Pcb were recently reported and isolated in South Africa has necessitated that this work be undertaken in order to characterise this newly described important pathogen of potato in regard to its phenotypic, genetic diversity, virulence and host range traits. Therefore in this work Pcb strains were subjected to multilocus phylogenetic analyses (MLSA) in order to investigate and determine whether there is any interspecies and intraspecies genetic diversity among the South African Pcb isolates. It was thus established that there is a significant genetic diversity that exists both on an interspecies and intraspecies level among Pcb isolates. As a result we sought to investigate further if the level of genetic diversity observed can be reflected in terms of the pathogen’s virulence, biochemical, phenotypic as well as host range characteristics. The results of virulence assays on potato tubers and stems indicated that Pcb strains are significantly much more virulent on potato compared to closely related Pectobacterium spp. such as Pa and Pcc. Moreover, the level of intraspecies diversity observed through phylogeny was also evident and reflected on the phenotypic, virulence and host range characteristics of the pathogen. This study also focused on investigating virulence factors employed by Pectobacterium spp. during infection. Such factors include the ability to produce and secrete of various extracellular macerating enzymes, as well as screening for the presence of virulence associated effectors and phytotoxin genes. It was of interest to observe that Pcb strains have the ability to grow and produce substrate-degrading enzymes much more rapidly compared to Pa and Pcc. This phenomenon was also observed in virulence assays where Pcb strains were noted to cause more rapid and most severe maceration symptoms on potato tubers and stems. Thus in agreement with other studies, our results suggests that Pcb is a uniquely sophisticated but diverse plant pathogen which can be considered to be one of the most aggressive causal agents of blackleg and soft rot disease of potato in South Africa. / Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2013. / gm2014 / Microbiology and Plant Pathology / Unrestricted

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Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-17T13:11:21Z No. of bitstreams: 1 Indira del Carmen Molo Alvarado.pdf: 1069235 bytes, checksum: 54d92e63acb53f101863e46dc0721313 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-17T13:11:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Indira del Carmen Molo Alvarado.pdf: 1069235 bytes, checksum: 54d92e63acb53f101863e46dc0721313 (MD5) Previous issue date: 2006-07-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Yield of Chinese cabbage (Brassica pekinnensis) may be limited by the occurrence of soft rot caused by pectinolytic bacteria. In this study 39 isolates of bacteria causing soft rot in Chinese cabbage obtained from planting areas of Camocim de São Félix, in Pernambuco State, were identified and characterized as Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) based upon biochemical tests confirmed by PCR. The variability of these isolates was evaluated through disease epidemiological components, sensitivity to antibiotics and molecular markers. The isolates were distributed in similarity groups considering 50% of the total linkage distance by the UPGMA method. Based on epidemiological components incubation period (PI), initial severity (SEVI), final severity (SEVF) and area under the disease curve progress the 39 isolates were distributed in six similarity groups. Among the epidemiological components significant Piersoncorrelation (P≤0.05) was only found for PI and SEVI (r = -0.57). Based on sensitivity to 12 antibiotics, the Pcc were distributed in 14 groups. There were significant correlations between sensitivity to gentamicin and PI (r = -0.41), as well as between sensitivity to clindamicin and SEVF (r = -0.45). The molecular markers REP, ERIC and BOX used in Rep-PCR revealed high genetic variability among the 39 isolates since 32 similarity groups were formed. No significant correlations were found among the linkage distances registered by molecular markers and the disease epidemiological components. In a second study it was evaluated soil influence on Pcc rifampicin resistant mutant (Pcc127Rif). The extinction rate of population was calculated (TEP) and ranged from 0.0547 to 0.6327 log (CFU)/d. Six soils showed suppressiveness to Pcc127Rif while five presented conducivity. The soil groupsbased on the TEP of Pcc127Rif did not correlate with municipalities, types of vegetation cover at the sampling time or soil textural classes. Considering all soils there were no significant correlations (P≤0,05) among TEP of Pcc127Rif and chemical, physical and microbiological characteristics of soils. Considering the six more suppressive soils the TEP of Pcc127Rif significantly correlated with soil apparent density (r = 0.76), total bacterium population (r = 0.82) and Bacillus spp. (r = 0.80). The Bacillus spp. population correlated with apparent density, but not with total bacterium population. Considering the five more conducive soils there was correlation between TEP of Pcc127Rif and Bacillus spp. population (r = -0.86). The high variability among Pcc isolates points out to the necessity of great attention in studies covering identification, detection, epidemiology and control of soft rot in Pernambuco. The elevated correlation between suppressiveness of some soils to P. carotovorum subsp. carotovorum and total bacteria and Bacillus spp. populations is relevant to effective implementation of soft rot management strategies / A produção de couve-chinesa (Brassica pekinensis) pode ser limitada pela ocorrência da podridão-mole causada por bactérias pectinolíticas. No presente estudo, 39 isolados de bactérias causadoras de podridão-mole em couve-chinesa, oriundos de áreas de plantio de Camocim de São Félix, em Pernambuco, foram identificados e caracterizados como Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) por testes bioquímicos confirmados por PCR. A variabilidade desses isolados foi avaliada com base em componentes epidemiológicos da doença, sensibilidade a antibióticos e marcadores moleculares. Os isolados foram distribuídos em grupos de similaridade, considerando-se 50% da distância total de ligação pelo método UPGMA. Com base nos componentes epidemiológicos período de incubação (PI), severidade inicial (SEVI), severidade final (SEVF) eárea abaixo da curva de progresso da doença, os 39 isolados foram distribuídos em seis grupos de similaridade. Entre os componentes epidemiológicos, foi constatada correlação significativa (P≤0,05) somente de PI com SEVI (r = -0,57). Baseado na sensibilidade aos 12 antibióticos, os isolados de Pcc foram distribuídos em 14 grupos. Foram constatadas correlações significativas entre sensibilidade a gentamicina e PI (r = -0,41), bem como entre sensibilidade a clindamicina e SEVF (r = -0,45). A utilização dos marcadores moleculares REP, ERIC e BOX no Rep-PCR revelou grande variabilidade genética entre os 39 isolados, pois foram formados 32 grupos de similaridade. Não foram constatadas correlações significativas entre as distâncias de ligação registradas pelos marcadoresmoleculares e os componentes epidemiológicos da doença. Em outro estudo foi avaliada a influência dos solos na população de Pcc, utilizando-se mutanteresistente a rifampicina (Pcc127Rif). A taxa de extinção relativa da população (TEP) variou de 0,0547 a 0,6327 log (UFC)/dia. Seis solos mostraram-se supressivos a Pcc127Rif enquanto cinco evidenciaram conducividade. Os grupos de solos baseados na TEP de Pcc127Rif não apresentaram relação com os municípios de coleta, tipos de coberturas do solo na época da coleta ou classes texturais dos solos. Considerando-se todos os solos, não foram constatadas correlações significativas (P≤0,05) entre a TEP de Pcc127Rif e as características químicas, físicas e microbiológicas dos solos. Nos seis solos mais supressivos, a TEP de Pcc127Rif se correlacionou significativamente com a densidade aparente do solo (r = 0,76), populações de bactérias totais (r = 0,82) e Bacillus spp. (r = 0,80). A população de Bacillus spp. se correlacionou com a densidade aparente, mas não com a população de bactérias totais. Nos cinco solos mais conducivos houve correlação entre a TEP de Pcc127Rif e a população de Bacillus spp. (r = -0,86). A elevada variabilidadeverificada entre os isolados de Pcc aponta para a necessidade de maior atenção em estudos de identificação, detecção, epidemiologia e controle da podridão-mole em Pernambuco. A alta correlação observada entre a supressividade de alguns solos a Pcc e as populações de bactérias totais e Bacillus spp. é relevante para implementação efetiva de estratégias de manejo da doença.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-24T11:51:36Z No. of bitstreams: 1 Marcelo Rodrigues Figueira de Mello.pdf: 590787 bytes, checksum: 0b21179fd04d627436888523d18d7338 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-24T11:51:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Rodrigues Figueira de Mello.pdf: 590787 bytes, checksum: 0b21179fd04d627436888523d18d7338 (MD5) Previous issue date: 2009-02-16 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The production of Chinese cabbage (Brassica pekinensis) may be limited by occurrence of diseases, among which the soft rot caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc). The effect of inducers and antibiotics on the disease control was studied in laboratory, greenhouse and field. In the first paper acibenzolar-S-metil (ASM) (0.025 g L-1), Ecolife® (2 mL L-1), Agro-Mos® (2 mL L-1) and calcium oxide (0.22 g L-1) were evaluated for in vitro bacterial growth inhibition; epidemiological components, incidence (INC), incubation period (PI), disease final severity (SEVF), diasease index (IDO) and area under disease curve progress (AUPDC); enzymatic activity of peroxidase and polyphenoloxidase and physiological cost of induction. Under greenhouse and field conditions inducers were sprayed seven days after transplant, and seven days after induction strain Pcc120 was inoculated by pricking, except for enzymatic activity and physiological cost experiments. In vitro Pcc120 was not inhibited by any tested product. The INC was not reduced in any experiment. In greenhouse SEVF was reduced by 47.5% by Agro-Mos® and ASM which also reduced IDO by 35.1 and 45.3% respectively and AUDCP. Induced resistance was confirmed by negative antibiosisagainst pathogen and increase of peroxidase and polyphenoloxidase activities in treated plants. In field only ASM confirmed greenhouse results by reducing disease intensity. There was no physiological cost for plants sprayed with ASM or Agro-Mos®. In the second paper it was evaluated the in vitro sensibility of Pcc to bactericides, and the effect of Mycoshield® (oxitetracycline 20%) at 3.0 and 1.5 g L-1, and yeasts (Rh1 and Rh2 - Rhodotorula spp. and Sc1 - Saccharomyces cerevisae at 108 cel mL-1) to control the disease in greenhouse and field. Plants were sprayed with Mycoshield® and yeasts seven days after transplant and inoculated seven days and 12 h after treatment, respectively. In all experiments INC, PI, SEVF, IDO and AUDPC were evaluated. In vitro 40 Pcc isolates were resistant to copper sulfate and sensitive to oxitetracycline, streptomycin, oxitetracycline+ streptomycin and oxitetracycline + copper sulfate all at 0.2 g L-1. Six Pcc isolates were significantly more inhibited by MycoshieldÒ than by Agri-Micina® (oxitetracycline 1.5% + streptomycin 15%), but there was no inhibition by Kasumin® (kasugamicin 2%). In greenhouse MycoshieldÒ at 3.0 g L-1 reduced SEVF and IDO until 47.4 and 19.0%. The yeast Sc1 reduced SEVF and AUDCP till 27.6 and 39.3% respectively, while Rh1 reduced AUDCP until 33.5%. In field MycoshieldÒ reduced IDO, SEVF and AUDCP by 14.4; 15.5 and 28.9% respectively; while Rh1 reduced IDO by 8.8% and Sc1diminished the AUDCP by 15.7%. The reduction of disease intensity and low physiological cost of induction indicate the potentiality of ASM in an integrate management program of Chinese cabbage soft rot. On the other hand MycoshieldÒ and yeasts showed low efficiency for controlling disease in field. / A produção de couve-chinesa (Brassica pekinensis) pode ser limitada pela ocorrência de doenças, dentre as quais se destaca a podridão-mole causada por Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc). O efeito de indutores e antibióticos no controle desta doença foi estudado em laboratório, casa de vegetação e campo. No primeiro trabalho, foram testados acibenzolar-S-metil (ASM) (0,025 g/L), Ecolife® (2 mL/L), Agro-Mos® (2 mL/L) e óxido de cálcio (0,22 g/L). Foram avaliados, a inibição do crescimento bacteriano “in vitro”; os componentes epidemiológicos, incidência (INC), período de incubação (PI), severidade final da doença (SEVF), índice de doença (IDO) e área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD); a atividade das enzimas peroxidase e polifenoloxidase e o custo fisiológico da indução. Em casa de vegetação e campo os indutores foram pulverizados sete dias após o transplante e sete dias após a indução, o isolado Pcc120 foi inoculado por picada, exceto nos experimentos de atividade enzimática e custo fisiológico. Pcc120 não foi inibido “in vitro” por nenhum dos produtos testados. Não houve redução da INC em nenhum dos experimentos. Em casa de vegetação, a SEVF da doença foi reduzida em 47,5% pelos tratamentos Agro-Mos® e ASM, os quais também, respectivamente, reduziram o IDO em 35,1% e 45,3% e propiciaram as menores AACPD. A resistência induzida foi evidenciada pela ausência de antibiose dos dois produtos contra Pcc e pelo aumento das atividades da peroxidase e polifenoloxidase. Em campo, apenas o ASM confirmou os resultados de casa de vegetação reduzindo a intensidade da doença. Não houve custo fisiológico para as plantas com aplicação do ASM ou Agro-Mos®. No segundo trabalho avaliou-se a sensibilidade “in vitro” de Pcc a bactericidas, o efeito de Mycoshield® (oxitetraciclina 20%) nas dosagens de 3,0 e 1,5 g/L, e das leveduras (Rh1 e Rh2 - Rhodotorula spp. e Sc1 - Saccharomyces cerevisae a 108 cel/mL) no controle da doença em casa de vegetação e em campo. As plantas foram pulverizadas com Mycoshield® e leveduras sete dias após o transplante, e inoculadas sete dias e 12 h após o tratamento, respectivamente. Foram avaliados INC, PI, SEVF,IDO e AACPD. In vitro, 40 isolados de Pcc testados apresentaram resistência ao sulfato de cobre e sensibilidade a oxitetraciclina, estreptomicina, oxitetraciclina+estreptomicina e oxitetraciclina+sulfato de cobre, todos na concentração de 0,2 g/L. Seis isolados de Pcc foram significativamente mais inibidos por MycoshieldÒ do que por Agri-Micina® (oxitetraciclina 1,5% + estreptomicina 15%), não sendo inibidos por Kasumin® (casugamicina 2%). Em casa de vegetação, o MycoshieldÒ na dosagem 3,0 g/L reduziu a SEVF e o IDO em até 47,4 e 19%; já a levedura Sc1 reduziu a SEVF e a AACPD em até 27,6 e 39,3%, respectivamente, enquanto Rh1 reduziu a AACPD em até 33,5. Em campo, o MycoshieldÒ reduziu o IDO, a SEVF e a AACPD em respectivamente 14,4; 15,5 e 28,9%; enquanto que Rh1 reduziu o IDO em 8,8% e Sc1 reduziu a AACPD em 15,7%. A redução da intensidade da doença e o baixo custo fisiológico da indução indicam a potencialidade do uso do ASM em um programa de manejo integrado da podridão-mole em couve-chinesa. No entanto,o MycoshieldÒ e as leveduras apresentaram baixa eficiência para o controle da doença em campo.