Orientador: José Carlos Barbosa / Coorientador: Antonio Carlos Busoli / Banca: Julio César Guerreiro / Banca: Marília Gregolin Costa de Castro / Banca: Nilza Maria Martinelli / Banca: Francisco Jorge Cividanes / Resumo: O percevejo-marrom-da-soja Euschistus heros, destaca-se como uma das principais pragas da cultura, sendo fundamental realizar amostragens periódicas para aferir a densidade populacional e auxiliar na tomada de decisão de controle. O objetivo do presente trabalho foi estudar a dinâmica populacional e a distribuição espacial de E. heros em cultivares de soja transgênica de diferentes ciclos de desenvolvimento, visando o desenvolvimento de um plano de amostragem sequencial. Os experimentos foram conduzidos nos anos agrícolas 2013/14 e 2014/15 na FCAV/UNESP, Jaboticabal, SP. Foram selecionados quatro campos, e em cada um foi demarcada uma área de 8.000 m2 (0,8 ha), sendo cada área subdividida em 80 parcelas de 100 m2 (10 m x 10 m). As cultivares de soja transgênica de diferentes ciclos de desenvolvimento utilizadas foram: SYN 1365 RR (precoce), M 7908 RR (média); BRS Valiosa RR (tardia), e a cultivar AS 3730 RR2 PRO (precoce), transgênica resistente a lagartas. As amostragens foram realizadas semanalmente pelo método da batida de pano, em 2 m de linha de plantas, registrando-se o número de ninfas, adultos e percevejos maiores que 0,5 cm. Foram confeccionadas figuras para demonstrar a dinâmica populacional entre os dados médios de infestação do inseto-praga e o estágio fenológico da cultura, sendo a influência dos fatores meteorológicos analisada por meio da análise de regressão múltipla com seleção de variáveis pelo método "stepwise". Para o estudo da dispersão de E. heros foram utilizados os seguintes índices: razão variância/média, índice de Morisita, coeficiente de Green e o expoente k da distribuição binomial negativa. Para os estudos dos modelos de distribuição espacial de E. heros foram testados os ajustes das distribuições de Poisson e distribuição binomial negativa. O plano de amostragem sequencial foi elaborado para os dados de percevejos maiores... / Abstract: The neotropical stink bug Euschistus heros is one of the most important species of pests in soybean culture, so it is essential to realize periodic samples to measure the population density and help in the decision making control. The objective of this work was to study the population dynamics and spatial distribution of E. heros in transgenic soybean cultivars of different maturing cycles that helps the development of a sequential sampling plan. The experiments were carried out in seasons 2013/14 and 2014/15 in FCAV / UNESP, Jaboticabal, SP. Four fields were selected, and in each one was marked an area of 8.000 m2 (0.8 ha) divided into 80 splits of 100 m2 (10 m x 10 m). The transgenic soybean cultivars of different maturing cycles were: SYN 1365 RR (early), M 7908 RR (middle), BRS Valiosa RR (late), and the cultivar AS 3730 RR2 Pro (early), transgenic resistant to larvae. Samples were taken weekly using the ground-shake method, in 2 m line of plants, where were recorded the number of nymphs, adults and nymphs of higher than 0.5 cm E. heros. The figures were plot to demonstrate the population dynamics between the mean data of insect pest infestation and the phenological stage of culture, and the influence of meteorological factors analyzed using multiple regression analysis with selection of variables using the stepwise method. To evaluate insect dispersion in the area, the following indexes were used: variance/mean ratio, Morisita's index, Green's coefficient, and the k exponent of negative binomial distribution. For studies of spatial distribution models of E. heros, adjustments of Poisson distribution and negative binomial distribution were tested. The sequential sampling plan was developed for E. heros higher than 0.5 cm based on the ratio of the Sequential Test Maximum Likelihood, and it was used the threshold levels of 4.0 and 2.0 E. heros higher than 0.5 cm for grain and seed ... / Doutor

Orientador: Mary Massumi Itoyama / Banca: Francisco Langeani Neto / Banca: João Aristeu da Rosa / Resumo: Pentatomomorpha é composta por cerca de 14.000 espécies, distribuídas em seis superfamílias, entre as quais estão inclusas Pentatomoidea e Coreoidea. Pentatomoidea possui 7.000 espécies distribuídas em 15 famílias, das quais Pentatomidae é a maior, com 4.500 espécies e 760 gêneros, estando representados no Estado de São Paulo 163 espécies. A superfamília Coreoidea é composta por cinco famílias, contudo apenas Coreidae, Rophalidae e Alydidae estão presentes no Neotrópico. A família Coreidae possui 1.884 espécies, divididas em quatro subfamílias, das quais Coreinae tem oito tribos com representantes no Brasil. Embora as famílias Pentatomidae e Coreidae apresentem um significante papel como pragas de culturas agrícolas, são escassas análises cladísticas envolvendo esses táxons, o que resulta na ausência de uma única hipótese de classificação, tornando pesquisas com abordagens de sistemática filogenética necessárias para essas famílias. Portanto, o presente estudo buscou caracterizar as relações filogenéticas das famílias Pentatomidae e suas subfamílias por meio dos genes 16S, ND5 (mitocondriais), 18S e 28S (nucleares) e da família Coreidae e sua respectiva subfamília Coreinae por meio dos genes 18S e 28S. Objetivou-se também, confirmar a classificação atual das tribos e subfamílias das espécies de Pentatomidae e Coreidae, que é embasada em caracteres morfológicos, assim como avaliar a variabilidade genética das sequências correspondentes aos genes mitocondriais e nucleares analisados. A partir dos resultados foi observado que os genes nucleares são conservados ao passo que os mitocondriais são altamente variáveis e com tendência as bases AT. Este estudo evidenciou que os genes nucleares 18S e 28S não são ideais para resoluções filogenéticas em nível de famílias, subfamílias e tribos de Coreidae e Pentatomidae, visto que... / Abstract: Pentatomomorpha consists about 14.000 species distributed in six superfamilies, to which Pentatomoidea and Coreoidea are included. Pentatomidae has 7000 species in 15 families, of which Pentatomidae is the largest, with 4500 species and 760 genera, although in the state of São Paulo only 163 species are present. The Coreoidae superfamily consists of five families, however only Coreidae, Rophalidae and Alydidae are present in the Neotropics. The Coreidae family has 1884 species, divided into four subfamilies, of which Coreinae has eight tribes with representatives in Brazil. Although Pentatomidae and Coreidae families have a significant role as pests of agricultural crops, the cladistic analysis involving these taxa are scarce, which results in the absence of a single hypothesis classification, making research on phylogenetic systematic approaches necessary for these families. Therefore, this study aimed to characterize the phylogenetic relationships of Pentatomidae families and subfamilies through the 16S, ND5, 18S and 28S genes and Coreidae family and their respective Coreinae subfamily through the 18S and 28S genes. We aimed also to confirm the current classification of tribes and subfamilies of Pentatomidae and Coreidae, which is grounded on morphological characters, as well as to evaluate the genetic variability of the sequences corresponding to the mitochondrial and nuclear genes analyzed. From the results it was observed that the nuclear genes are conserved while the mitochondrial are highly variable and tend to AT base. Our study showed that nuclear genes 18S and 28S are not ideal for phylogenetic resolution at the level of families, subfamilies and tribes of Coreidae and Pentatomidae, because the supports of the branches do not allow that there is confiability in the analysis. Furthermore, groups considered monophyletic, based on morphological characteristics, such ... / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2011. / Submitted by Max Lee da Silva (bruce1415@hotmail.com) on 2011-06-28T14:32:38Z No. of bitstreams: 1 2011_LucianaRamalhoDeFarias.pdf: 2230097 bytes, checksum: ad0589346d3e4e161f07d665eb227f60 (MD5) / Approved for entry into archive by Elna Araújo(elna@bce.unb.br) on 2011-07-04T19:52:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_LucianaRamalhoDeFarias.pdf: 2230097 bytes, checksum: ad0589346d3e4e161f07d665eb227f60 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-04T19:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_LucianaRamalhoDeFarias.pdf: 2230097 bytes, checksum: ad0589346d3e4e161f07d665eb227f60 (MD5) / O percevejo-marrom Euschistus heros é uma praga que reduz consideravelmente a produtividade nacional de culturas agrícolas de grande importância econômica, dentre elas a soja. Visando subsidiar o desenvolvimento de ferramentas biotecnológicas alternativas para auxílio no controle dessa praga, o presente trabalho realizou o estudo da expressão de genes relacionados à olfação e análise do perfil e sítios de expressão utilizando as técnicas de qPCR em Tempo Real e hibridização in situ, respectivamente. A prospecção foi realizada através da construção de uma biblioteca de cDNA a partir do RNA total extraído das antenas utilizando o kit Smart cDNA Library Construction (Clontech®). Mil clones foram sequenciados e, através de bioinformática, foram identificadas duas sequências de 477 e 294 pares bases pertencentes a genes da família das proteínas ligantes de odorantes (Odorant Binding Protein - OBP) que foram denominados EherOBP1 e EherOBP2, respectivamente. O EherOBP1 possui sequência deduzida de aminoácidos de 16 kDa e pI 5,18, peptídio sinal na extremidade N-terminal, domínio de ligação a feromônio (Pheromone Binding Protein – PBP) e seis resíduos de cisteína em posições conservadas, todas características esperadas para proteínas integrantes da família OBP. Embora parcial, a sequência deduzida de aminoácidos de EherOBP2 já pode também ser atribuída a função hipotética de proteína ligante a odor devido a presença do domínio PBP e cinco resíduos de cisteína em posições conservadas. A análise da expressão diferencial através de RT-PCR quantitativo em tempo real (qRT-PCR) indicou que as antenas representam o principal sítio de produção da EherOBP1 em ambos os sexos, sendo a expressão nas antenas de macho cerca de três vezes maior que nas antenas de fêmeas. Em relação a EherOBP2, foi observada uma predominância da expressão nas antenas e abdômen de machos, sendo esta cerca de cinco vezes maior em relação à expressão observada nas antenas de fêmeas. A partir dos resultados obtidos com a localização da hibridização in situ nas antenas foi possível inferir que os mRNAs das EherOBPs são localizados especificamente na base dos órgãos olfativos (sensilas), havendo diferenças na expressão ao longo da antena entre machos e fêmeas. Neste trabalho foram identificados dois transcritos gênicos relacionados à olfação que codificam duas proteínas com provável função de ligação a odorantes. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In Brazil, the stink bug Euschistus heros represents an important agricultural plague responsible for economic damages on several cultures, including the soy. Aiming the development of alternatives biotechnological tools, the present work conducted the study of the expression of genes related to olfaction through the construction of a cDNA library from transcripts (mRNA) isolated from the antennae and analysis of the profile and sites of expression using the techniques of real-time qPCR and in situ hybridization, respectively. cDNA library was successfully constructed from total RNA extract from adults antenna using the Smart cDNA Library Construction Kit (Clontech®). A total of 1000 cDNA clones were randomly selected and submitted to sequencing. Two transcripts encoding OBPs were identified by bioinformatics approaches. The E. heros OBPs nucleotide sequences showed 477 and 294 pb and were named as EherOBP1 and EherOBP2, respectively. The deduced amino acid sequence of EherOBP1 has16kDa and pI 5.18, signal peptide at the N-terminal, PBP domain and six cysteine residues in conserved positions, all the expected features for members of OBP protein family. Although partial, the deduced amino acid sequence of EherOBP2 can be assigned as a hypothetical Odorant Binding Protein due the presence of PBP domain and five cysteine residues in conserved positions. Analysis of differential expression by quantitative real time PCR indicated that antenna are the main production site of EherOBP1 in both sexes, and the expression in male antennae is about three times higher than in female antennae. Regarding to EherOBP2, there was a predominance of expression in the antennae and abdomen of males, which is about six times greater than the expression observed in the antennae of females. In situ hybridization results showed that EherOBPs mRNAs are specifically expressed on the base of the antenna olfactory organs (sensilas) with differences in the localization of the expression along the antenna of male and female. In this work were identified two transcripts related to olfaction encoding proteins with hypothetical function odorant binding.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2011. / Submitted by Max Lee da Silva (bruce1415@hotmail.com) on 2011-06-28T13:52:32Z No. of bitstreams: 1 2011_MirianFernandesFurtadoMichereff.pdf: 8735089 bytes, checksum: 8f70ab3c311aa4e61d9b1f1adaa8bcba (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-07-08T17:45:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_MirianFernandesFurtadoMichereff.pdf: 8735089 bytes, checksum: 8f70ab3c311aa4e61d9b1f1adaa8bcba (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-08T17:45:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_MirianFernandesFurtadoMichereff.pdf: 8735089 bytes, checksum: 8f70ab3c311aa4e61d9b1f1adaa8bcba (MD5) / O controle biológico associado ao uso de cultivares resistentes ao ataque de insetos apresenta interesse e potencial para ser utilizado no manejo de pragas. Os objetivos do trabalho foram investigar os mecanismos envolvidos na resistência das cultivares de soja Dowling e IAC100 ao percevejo Euschistus heros, em comparação com a cultivar suscetível Silvânia; avaliar a atração do parasitóide de ovos, Telenomus podisi, e do percevejo a essas cultivares com diferentes tipos de injúrias (herbivoria, herbivoria+oviposição e oviposição); avaliar a resposta do parasitóide aos compostos induzidos pela herbivoria, assim como investigar a distribuição de ninfas e adultos do percevejo e os parasitóide de ovos de E. heros nas diferentes cultivares em condições de campo. No teste de oviposição do percevejo, com escolha entre as cultivares, não houve diferença significativa no número de posturas e ovos entre as cultivares, enquanto no teste sem chance de escolha, o número de ovos deixados na cultivar Silvânia foi maior do que nas demais. As cultivares resistentes afetaram o desenvolvimento do percevejo. As ninfas mantidas na cultivar Dowling não completaram seu ciclo biológico. Houve diferença nos pesos médios e na longevidade dos adultos do percevejo para as cultivares IAC100 e Silvânia. A fecundidade foi maior para fêmeas alimentadas na cultivar Silvânia, porém não houve diferença na viabilidade dos ovos. A sobrevivência do percevejo da fase ninfal até adulto diferiu significativamente entre os tratamentos. Houve maior produção dos isoflavonóides na cultivar Silvânia, sendo que apenas o composto genisteína, 48hr após a herbivoria, foi produzido em maior quantidade. Nos bioensaios com olfatômetro em “Y”, os parasitóides foram atraídos para as plantas injuriadas pela herbivoria e pela associação de herbivoria+oviposição quando comparadas com plantas não atacadas de soja nas cultivares resistentes, mas não mostrou preferência para cultivar Silvânia em nenhum dos tratamentos. Os voláteis da planta emitidos nas três cultivares após a oviposição não atraíram o parasitóide. Nos bioensaios com o olfatômetro de quatro escolhas, fêmeas de E. heros não mostraram preferência para os odores das plantas de soja atacadas ou não paras as três cultivares. Porém, com o olfatômetro em “Y”, o percevejo foi atraído para plantas não atacadas quando comparadas com o controle (somente ar). As análises de Curvas de Respostas Principais (PRC) mostraram que houve diferença entre os tratamentos ao longo do tempo no perfil químico dos voláteis entre os tratamentos para a cultivar Dowling. Os xix compostos que mais contribuíram para a diferença ente plantas de soja injuriadas comparadas com plantas não atacadas foram (E,E)-a-farneseno, salicilato de metila, (Z)-3-acetato de hexenila e (E)-2-octen-1-ol. O parasitóide foi atraído somente para o (E,E)-α-farneseno a 1x10-5M nos testes no olfatômetro em “Y”, feitos com cada um dos compostos, com exeção do (E)-2-octen-1-ol, e comparados ao controle (hexano). Porém, houve diferença no tempo de residência para o composto salicilato de metila nas concentrações 1x10-4 e 1x10-5M. Não houve diferença significativa na primeira escolha, nem no tempo que o parasitóide permaneceu nos braços do olfatômetro, tratamento e controle, quando as misturas: (1) (E,E)-α-farneseno+salicilato de metila+(Z)-3-acetato de hexenila; (2) (E,E)-α-farneseno+ salicilato de metila; (3) (E,E)-α-farneseno+(Z)-3- acetato de hexenila e (4) salicilato de metila+(Z)-3-acetato de hexenila foram testadas contra o controle (E,E)-α-farneseno a 1x10-5M. O parasitóide também não mostrou preferência pelas misturas testadas, com o hexano como controle. Entretanto, o tempo de residência no braço com a mistura 2, especificada acima, foi estatisticamente diferente. Telenomus podisi foi atraído para as plantas com herbivoria, permanecendo também a maior parte do tempo no braço do olfatômetro com o tratamento, nos bioensaios utilizando plantas atacadas e não atacadas pelo E. heros, após 96 hr, comparado com o (E,E)-α-farneseno a 1x10-5M. Não houve diferença entre as cultivares na distribuição do percevejo nas plantas do campo. A maior população foi observada no final do ciclo da soja, porém, o maior número de ovos naturais e parasitismo foram encontrados entre os estágios reprodutivos R1 e R5. Os parasitóides T. podisi, Trissolcus teretis, Tr. urichi e Tr. brochymenae emergiram dos ovos sentinela de E. heros, sendo T. podisi o mais freqüente e com maior ocorrência a partir do estágio reprodutivo R6. Os resultados sugerem que as cultivares IAC100 e Dowling possuem defesa direta (constitutiva) contra E. heros e que não houve indução da produção dos isoflavonóides na cultivar de soja resistente Dowling pela injúria de herbivoria. As plantas das cultivares resistentes danificadas pelo percevejo apresentaram defesa induzida indireta. Os compostos (E,E)-a-farneseno, salicilato de metila, (Z)-3-acetato de hexenila estão, provavelmente, envolvidos na atração do parasitóide T. podisi. O parasitóide T. podisi foi atraído pela cultivar de soja resistente Dowling em condições de campo. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The association of resistant varieties and biological control has great interest and potential to be used for pest management. The aims of this work were to evaluate the mechanisms involved in resistance of the soybean cultivars Dowling and IAC100 for the stinkbug Euschistus heros, in contrast with the suscetible Silvânia; the attraction of Telenomus podisi and the stinkbug to different types of damage (herbivory, herbivory+oviposition and oviposition) to these cultivars; the response of the parasitoid to compounds induced by herbivory damage and the distribution of nymphs and adults of the stinkbug and the egg parasitoid on different cultivars under field conditions. In choice tests, there was no difference in the number of clutches and the number of eggs between the cultivars, but the cultivar Silvânia received more eggs in the test without choice. The nymphs reared on cv Dowling did not complete their biological cycle. The mean weight and the longevity of adults on the different cultivars were different. Female fecundity on cultivar Silvânia was higher than on cultivar IAC100, however the egg fertility was not different. The survivorship of nymphs until adults differed significantly between treatments. Total amount of isoflavonoids compounds was higher in cultivar Silvânia, and only the compound genistein at 48 hr after damage, was produced in greater quantity in the herbivory treatment. In a Y-tube olfactometer, the parasitoids were attracted to herbivory and herbivory+oviposition damaged soybean plants when compared to undamaged soybean plants for the resistant cultivars, but did not show preference for the susceptible cultivar Silvânia in any of the damage treatments. The plant volatiles emitted by oviposition damaged plants in the three cultivars did not attract the egg parasitoid. In four-arm-olfactometer bioassays E. heros females did not show a preference for odors of damaged or undamaged soybean plants of the three cultivars studied. In a Y-tube olfactometer, the stink bug was attracted to undamaged soybean plants for all cultivars compared with air. The Principal Response Curves (PRC) analysis showed consistent variability over time in the chemical profile of volatiles between treatments for the cultivar Dowling. The compounds that most contributed to the divergence between damaged soybean plants compared to undamaged plants were (E,E)-a-farnesene, methyl salicylate, (Z)-3-hexenyl acetate and (E)-2-octen- 1-ol. Testing the compounds in a Y-tube olfactometer, the parasitoids were attracted only to (E,E)-α-farnesene at 1x10-5M, when both individual compounds and hexane xxi were contrasted. However, the residence time was different to methyl salicylate at concentrations of 1x10-4 e 1x10-5M. No difference was observed on the initial choice neither on the time that the parasitoid remained in the arms of the olfactometer, treatment and control, when the blends of volatiles: (1) (E,E)-α-farnesene+methyl salicylate+(Z)-3-hexenyl acetate; (2) (E,E)-α-farnesene+methyl salicylate; (3) (E,E)-α- farnesene+(Z)-3-hexenyl acetate and (4) methyl salicylate+(Z)-3-hexenyl acetate were tested against (E,E)-α-farnesene at 1x10-5M. Testing hexane as control, the parasitoid did not show preference to the blends tested, but the residence time in the arm supplied with the blend 2 was statistically different. In the bioassays with 96 hr herbivory damage caused by E. heros, and undamaged soybean plants against (E,E)-α-farnesene at 1x10-5M, T. podisi was attracted to herbivory damaged soybean plants, also remaining a long of time in the olfactometer arm supplied with the odor of herbivory damaged plants. There was no difference between cultivars in stink bug distribution in the field; the highest population was observed in the final stages of crop, however, more natural eggs and parasitism were found among the reproductive stages R1 and R5. The parasitoids T. podisi, Trissolcus teretis, Tr. urichi e Tr. brochymenae emerged from the sentinel eggs of E. heros, where T. podisi was the most common and occured more from the reproductive stage R6. These results suggest that the cv IAC100 and Dowling present direct defense (constitutive) against E. heros; that the herbivory damage did not induce isoflavonoids production on resistant soybean cultivar Dowling; the plants of the resistant cultivars damaged by the stinkbug have indirect induced defense; the compounds (E,E)-a-farnesene, methyl salicylate, (Z)-3-hexenyl acetate are probably involved in the attraction of the egg parasitoid T. podisi and that the parasitoid T. podisi is attracted by the cultivar Dowling in field conditions.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, 2011. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-09-05T14:28:18Z No. of bitstreams: 1 2011_MichelyFerreiraSantosdeAquino.pdf: 8914441 bytes, checksum: 101e518f6bb5c891e0294318ebcae578 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-09-05T14:28:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_MichelyFerreiraSantosdeAquino.pdf: 8914441 bytes, checksum: 101e518f6bb5c891e0294318ebcae578 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-09-05T14:28:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_MichelyFerreiraSantosdeAquino.pdf: 8914441 bytes, checksum: 101e518f6bb5c891e0294318ebcae578 (MD5) / Os parasitóides são importantes componentes dos ecossistemas terrestres atuando como controladores de populações de insetos herbívoros. A busca e seleção de hospedeiros constituem etapas decisivas do ciclo vital destes insetos já que asseguram seu sucesso reprodutivo. O forrageamento das fêmeas dos parasitóides inclui uma série de passos comportamentais seqüenciais intermediados por estímulos de natureza física (visuais ou mecânicas), química (semioquímicos) ou bioquímica. O objetivo deste trabalho foi estudar a influência de características físicas e químicas do hospedeiro nos comportamentos de busca e seleção dos parasitóides de ovos Telenomus podisi e Trissolcus basalis, importantes agentes de mortalidade de percevejos praga da soja. Foram realizados experimentos utilizando substratos coloridos para estudar sua influência no comportamento de busca de hospedeiros. Os parasitóides mostraram preferência inata por substratos de cor amarelo e secundariamente verde. Esta resposta não foi modificada após experiência de oviposição em substratos de diferentes cores, indicando ausência de aprendizado associativo em relação à cor de substrato. Os resultados sugerem que a resposta a cores de substratos observada estaria relacionada com a orientação para a folhagem de plantas durante a busca de hospedeiros. Em outra etapa do trabalho foram estudados os comportamentos de reconhecimento e aceitação de hospedeiros quando os parasitóides utilizaram ovos de quatro espécies de percevejos (Euschistus heros, Nezara viridula, Piezodorus guidlinii e Chinavia ubica). Neste caso foram analisadas a influência de características físicas do hospedeiro. Os parasitóides mostraram uma clara discriminação de hospedeiros parasitando somente ovos daquelas espécies de percevejos que maximizam seu sucesso reprodutivo. Embora os comportamentos de reconhecimento e aceitação de hospedeiros se apresentaram bem estereotipados, foi observado que diferenças morfológicas como tamanho e forma das posturas e cor e ornamentação dos ovos são importantes para diferenciação dos hospedeiros. A última etapa do trabalho foi dedicada ao estudo de estímulos químicos relacionados ao reconhecimento de hospedeiros. Extrações químicas de ovos de E. heros em diferentes solventes (acetona, metanol e diclorometano) e tempos de extração (1, 4 e 24 h) revelaram que o solvente de maior polaridade utilizado, metanol, foi o mais eficiente, extraindo maior quantidade de compostos que os obtidos nos outros solventes. Adicionalmente os extratos metanólicos induziram no parasitóide T. podisi os comportamentos de reconhecimento e tentativa de oviposição, quando os mesmos foram aplicados em posturas artificiais, formadas com pérolas de vidro. A resposta observada no parasitóide resultou significativamente superior à observada frente a extratos obtidos com outros solventes ou solventes aplicados individualmente nas pérolas de vidro. Os resultados obtidos representam novas contribuições para o avanço do conhecimento do comportamento de forrageamento de parasitóides da família Scelionidae. Trabalhos futuros devem orientar-se principalmente à identificação precisa dos compostos químicos com ação cairomonal, ao estudo das interações entre estímulos físicos e químicos e a estabelecer a importância dos mesmos tanto para estimular comportamentos específicos quanto para identificar aqueles envolvidos na seleção de hospedeiros que maximizam o potencial reprodutivo dos parasitóides. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Insect parasitoids are main components of terrestrial ecosystems functionin as regulators of insect herbivores populations. Search and selection of host are decisive steps in the vital cycle because ensure the reproductive success. Parasitoids females foraging include some behavioral steps mediated by physical (visual or mechanics), chemical (semiochemicals) or biochemical. The egg parasitoids Telenomus podisi and Trisssolcus basalis are important as mortality agents of stink bugs that are pest on soybean and some aspects of their behavior are unknown. The objective of this work was study the influence of physical and chemical characteristic of the host in the search and selection behaviors of the egg parasitoids, Telenomus podisi and Trissolcus, two important mortality agents of stink bugs that are pest on soybean. There were conducted experiments using colored substrates to study their influence in the host searching behavior. The parasitoids showed innate preference by yellow substrates and, secondarily, by green substrates. This response was not modified after oviposition experience on substrates of different colors, indicating absence of associative learning in relation to the colors of the substrate. The results suggest that the response to colour of substrate observed could be related to the orientation to plants foliages when search for hosts. In other step of the work the host identification and acceptation behaviors when the parasitoids used egg of four species of stink bugs (Euschistus heros, Nezara viridula, Piezodorus guidlinii e Chinavia ubica) were studied. In this case were analyzed the physical characteristics of hosts. The parasitoids showed a clear discrimination of host parasitizing eggs of stink bugs species that maximize their reproductive success. Although the host identification and acceptation behaviors were stereotyped it was observed that, morphological differences as size and shape of the egg masses and egg color and ornamentation are important to host differentiation. The last stage of the work was dedicated to the study of chemical stimuli related to the recognition of host. Chemical extractions of eggs of the brown stink bug, E. heros, in different solvents (acetone, methanol and dichloromethane) and extraction times (1,4 and 24 h) showed that the more polar solvent, methanol, was more efficient, extracting higher quantities of the compounds obtained when compared with the others solvents used. Besides methanolic extracts induced, in the parasitoid T. podisi, the recognition behavior and oviposition attempt, when they were applied on artificial egg mass, formed with glass beads. The parasitoid response was significantly higher than the observed when the glass beads were treated with extracts obtained in others solvents or solvents alone. The results obtained represent new contributions to the advance of knoweldge of foraging behavior of Scelionidae wasps. Future works should be oriented, principally, to accurate identification of the chemical compounds with kairomonal action, to the study of the interactions of chemical and physical stimuli and establish both their relevance to induce specific behaviors and to identify which are related to the selection of hosts that maximize the reproductive success of these parasitoids.

Orientador : Sonia Nair Bao / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T18:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_AdriennedePaiva_D.pdf: 14435897 bytes, checksum: bea44487f87ecfb27ba8f5e1dd5f2ee9 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Percevejos fitófagos (Hemiptera, Pentatomidae) são as principais pragas de colheitas economicamente importantes ao redor do mundo, como por exemplo soja, arroz, coco, café, entre outras. Apesar da grande quantidade de informação sobre as espécies-praga, seu dano potencial nas plantas de importância econômica e as formas de controle usadas, fazem com que o impacto dessas pragas na produção de colheitas permaneça em níveis indesejáveis. A caracterização ultra-estrutural da espermiogênese desses insetos poderá, possivelmente, ser importante para direcionar e programar um controle bioquímico e a manipulação genética através de machos estéreis ou semiestéreis. Estudos ultra-estruturais e citoquímicos foram desenvolvidos elucidando as mudanças nucleares e a formação do acrosoma durante a espermiogênese de percevejos fitófagos. Além do mais, foi realizada a detecção ultra-estrutural de cálcio e a imunolocalização de calmodulina e de diferentes formas de tubulinas. A espermiogênese envolve elongação nuclear, condensação cromatínica, formação do acrosoma e desenvolvimento flagelar, com a formação do axonema e dos derivados mitocondriais. O desenvolvimento do núcleo envolve mudanças na forma e no grau de condensação da cromatina que apresenta padrão fibrilar em alguns estágios de diferenciação. O acrosoma é formado pelo complexo de Golgi e pode apresentar características morfológicas pouco comuns aos outros Heteroptera durante o seu desenvolvimento, que conta com a participação de resíduos específicos de carbohidratos e de enzimas como fosfatase ácida, glicose-6-fosfatase e tiaminopirofosfatase. A detecção / localização de cálcio e a imunolocalização de calmodulina indicam uma possível ação conjunta desses dois elementos como reguladores de vários eventos celulares durante a espermiogênese dos percevejos. Ainda, utilizando a imunocitoquímica foram detectados vários isotipos de tubulina durante o período de diferenciação celular. Esses dados indicam que deve existir alguma diferença estrutural e funcional entre os microtúbulos citoplasmáticos e axonemais. Além das modificações morfofuncionais que ocorrem durante a espermiogênese foram descritas as modificações enzimáticas sofridas pelo espermatozóide 20 h e 40 h após à cópula, O processo de espermiogênese também foi analisado durante a diapausa adulta de duas espécies de percevejos fitófagos. Os resultados indicam que durante esse período a espermiogênese é descontinuada e para isso conta com a participação de eventos com padrão apoptótico e fagocítico / Abstract: Phytophagous stink bugs (Hemiptera, Pentatomidae) are the main pests of economically important crops throughout the world, such as soybean, rice, cocoa and coffee among others. Despite the amount of information regarding pest species, their damage potential to economically important plants, and control measures used, the pests impact on the production of crops remains at undersirable levels. The ultrastructural characterization of these insects spermiogenesis would be important to programs directed towards the biochemical control of these insect pests and genetic manipulation through sterile and semisterile males. Ultrastructurals and cytochemical studies were carried out on nuclear changes and acrosome formation during spermiogenesis of the phytophagous bug. Indeed, was done the ultrastructural detection of calcium and the immunolocated of calmodulin as well as severaI tubulins isoforms. The spermiogenesis involves nuclear elongation, chromatin condensation, acrosomal formation and flagellar development along with formation of the axoneme as well as mitochondrial derivatives. The development of the nucleus involves changes in the shape and in degree of chromatin condensation which presents fibrillar pattern during some stages of differentiation. The acrosome is formed by the Golgi complex and can be present unusual morphological features with the other Heteroptera during its development, whose take the participation of specific carbohidrate residues and enzymes as acid phosphatase, glucose-6phosphatase and thiaminepyrophosphatase. The calcium detection and the immunolocated of calmodulin suggest that they act toghether as regulators of several cellular events during the bugs spermiogenesis. Moreover, using immunocytochemistry were detected several tubulins isotypes during this cellular differentiation period. These data suggest that could be exist some structural and funcional diferences between cytoplasmic and axonemal microtubules. Besides the morphofunctional modifications úndergone during spermiogenesis, we described the enzimatic modifications undergone to the spermatozoon 20 h and 40 h after copulation. The spermiogenesis process was analised during adult diapause of two phytophagous bugs species. The results indicate that during this period the spermiogenesis is discontinued and for this, takes off cellular events with apoptotic and phagocytic pattern / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Edson Luiz Lopes Baldin / Coorientador: Leandro do Prado Ribeiro / Coorientador: Robert L. Koch / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: André Luiz Lourenção / Banca: Pedro Takao Yamamoto / Banca: Carlos Gilberto Raetano / Resumo: Percevejos fitófagos são insetos-praga que atacam diversas culturas de importância agrícola. Estes insetos, no geral apresentam preferência pela parte reprodutiva de leguminosas, porém, devido a mudanças no sistema produtivo brasileiro, têm sido comumente observados alimentando-se de plântulas de milho (Zea mays L.), especialmente quando este sucede a soja [Glycine max (L.) Merr.] no campo, causando danos significativos e variados. O percevejo-barriga-verde, Dichelops melacanthus (Dallas) (Hemiptera: Pentatomidae), é considerado praga-chave de período inicial na cultura do milho no Brasil. A espécie Euschistus heros (F.) (Hemiptera: Pentatomidae) é a espécie mais abundante no Brasil e também pode se alimentar de plântulas de milho. O percevejo-marrom-marmorizado, Halyomorpha halys (Stål) (Hemiptera: Pentatomidae) foi introduzido nos Estados Unidos da América na década de 1990 e tem se dispersado rapidamente pelo país, trazendo prejuízos de até 100% em culturas de importância econômica. Embora percevejos adultos tenham seu potencial de danos reconhecido, pouco se sabe sobre os prejuízos relacionados aos demais estágios de desenvolvimento. Formas de controle alternativas ao método químico, e que causem menos impacto ao ambiente e ao homem são altamente desejáveis. A resistência de plantas é uma tradicional ferramenta do Manejo Integrado de Pragas (MIP) e tem como principais vantagens a eficiência, menor impacto ambiental e a compatibilidade com outros métodos de controle. Diant... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Phytophagous stink bugs are insect pests that attack several crops of agricultural importance. These insects generally have a preference for the reproductive parts of leguminous plants, but due to changes in the Brazilian agricultural system, they have been commonly observed feeding on corn seedlings (Zea mays L.), especially when it succeeds soybean [Glycine max (L.) Merr.] in the field, causing significant and varied damage to the corn. The green-belly stink bug, Dichelops melacanthus (Dallas) (Hemiptera: Pentatomidae), is considered a key pest of early-stage corn in Brazil. The neotropical brown stink bug Euschistus heros (F.) (Hemiptera: Pentatomidae) is the most abundant stink bug in Brazil and feeds on corn seedlings as well. Halyomorpha halys (Stål) (Hemiptera: Pentatomidae) was introduced in the United States of America in the 1990's and has quickly spread throughout the country, bringing yield losses of up to 100% in crops of economic importance. Thus, alternatives to chemical control which cause less impact to the environment and humans, are highly desirable. Plant resistance is a traditional Integrated Pest Management (IPM) tool and has advantages such as being efficient, having a lower environmental impact, and good compatibility with other control methods. Thus, the present work has the following objectives: i) to characterize antixenosis and/or antibiosis of corn genotypes to D. melacanthus; ii) to determine injury caused by different life stages of D. melacanthus and E. heros in corn seedlings iii) to determine the injury caused by different stages of H. halys in sweet corn seedlings in the United States. We observed that after 24 h D. melacanthus infested genotypes IAC 8046, SCS 156 Colorado and IAC 8390 significantly less than the others indicating antixenosis. The genotypes IAC 8390 and JM 2M60 affected biological parameters of the green-belly stink bug, revealing the occurrence of ... / Doutor

Orientador: Edson Luiz Lopes Baldin / Banca: Carlos Gilberto Raetano / Banca: André Lourenção / Resumo: A cultura da soja [Glycine max (L.) Merrill] está sujeita ao ataque de insetos-praga desde a germinação até a colheita. Na fase vegetativa, a cultura é alvo de diversas lagartas desfolhadoras e na fase reprodutiva sofre ataque do complexo de percevejos da família Pentatomidae. Esses insetos se alimentam diretamente das vagens e sementes, causando danos desde o início do desenvolvimento destes órgãos até a maturação. A espécie Dichelops melacanthus (Dallas, 1851), também conhecida como percevejo-barriga-verde, é uma praga importante para diversas culturas na região Sul do Brasil, principalmente ao norte do Estado do Paraná. Este percevejo ainda é considerado uma praga secundária para a cultura da soja, porém vem apresentando infestações crescentes nessa região. Em adição é apontado como praga-chave para a cultura do milho [Zea mays (L.)], trigo [Triticum aestivum (L.)] e outras gramíneas como aveia-preta [Avena strigosa (Schreb.)] e triticale [(Triticum secale (Wittmack)]. Considerando-se a carência de métodos de controle eficientes e menos agressivos ao ambiente, este trabalho avaliou 17 genótipos de soja, pertencentes a três grupos de maturação (precoce, semiprecoce e tardio), visando caracterizar mecanismos de resistência ao percevejo-barriga-verde. Para tanto, foram realizados ensaios de atratividade, preferência alimentar e desempenho biológico sob condições de laboratório (T= 26  2ºC, U.R.= 65  10% e fotoperíodo=14h). As vagens dos genótipos PI 171451 e D75-10169 (precoces); PI 227687, 'IAC 100', IAC 78-2318 e IAC 74-2832 (semiprecoces) foram pouco atrativas e consumidas por adultos de D. melacanthus, indicando a ocorrência de antixenose. Por sua vez, as vagens de PI 274453, PI 274454 e L 1-1-01 (tardios) sofreram menor número de puncturas, indicando a expressão do mesmo mecanismo. Todos os materiais afetaram o desempenho biológico do ... / Abstract: Soybean [Glycine max (L.) Merrill] is subject to attack by insect pests from germination to harvest. In the growth vegetative phase, the crop is target of several defoliating caterpillars. Moreover, in the reproductive phase, it suffers from stink bugs complex attack (Pentatomidae family). These insects feed directly from the pods and seeds, causing damage from the early development of these bodies to maturity. The species Dichelops melacanthus (Dallas, 1851) is an important pest for several crops in southern Brazil, especially north of Paraná State. This insect is still considered a secondary pest of soybean, but increasing infestations have been observed. In addition, it is highlighted as key-pest of maize [Zea mays (L.)], wheat [Triticum aestivum (L.)] and other grasses such as oat [Avena strigosa (Schreb.)] and triticale [(Triticum secale (Wittmack)]. Considering the lack of efficient control methods, in special those less harmful to the environment, this study evaluated 17 soybean genotypes from three maturity groups (early, semi-early and late), to characterize resistance mechanisms to the green-belly stink bug. Therefore, attractiveness tests were carried out, as well as food preference and biological performance under laboratory conditions (T= 26  2ºC, R.H. = 65  10% and photoperiod=14h). Pods of genotypes PI 171451 and D 75-10169 (early); PI 227687, 'IAC 100', IAC 78-2318 and IAC 74-2832 (semiearly) were unattractive and consumed by adult of D. melacanthus, indicating the occurrence of antixenosis. In adittion, pods of PI 274453, PI 274454 and L 1-1-01 (late) showed lesser number of bites, indicating expression of the same mechanism. All materials affected the biological performance of the green-belly stink bug, characterizing the occurrence of antibiosis. However, PI 227687, 'IAC 100', PI 171451, IAC 78-2318, D 75-... / Mestre

Orientador: Sandra Helena Unêda Trevisoli / Coorientador: Antonio Orlando Di Mauro / Coorientador: Antonio Sergio Ferraudo / Banca: Ivana Marino Bárbaro Torneli / Banca: Fabiana Mota da Silva / Resumo: A soja apresenta grande importância econômica para o Brasil, sendo considerada a principal cultura do sistema agrícola brasileiro. No entanto, está sujeita a grandes interferências externas durante todo o seu ciclo, as quais podem afetar consideravelmente seu desempenho produtivo. O ataque de insetos pragas se caracteriza como um dos principais problemas a ser solucionado, em especial, o chamado complexo de percevejos, o qual ataca diretamente às sementes durante o período de enchimento e maturação, depreciando a qualidade das mesmas. Assim sendo, este trabalho teve como objetivo avaliar linhagens de soja obtidas a partir de hibridações artificiais entre cultivares de soja com resistência ao complexo de percevejos e elevado potencial agronômico, buscando identificar possíveis genótipos que apresentem simultaneamente os bons atributos de ambos os genitores, além de identificar quais os caracteres que melhor auxiliam na seleção de genótipos resistentes ao complexo de percevejos. O trabalho foi desenvolvido no ano agrícola 2014/15, em delineamento experimental alfa-látice 16x16, utilizando 256 genótipos de soja sob infestação natural do complexo de percevejos. Foram avaliados os caracteres altura de planta na maturidade, altura de inserção da primeira vagem, número de dias para a maturação, valor agronômico, retenção foliar, produtividade de grãos, peso de sementes boas, porcentagem de sementes boas, peso de cem sementes, número de ramos por planta, número de vagens por planta e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Soybean has great agricultural and economic importance to Brazil, being the main culture of the Brazilian agricultural system. However, the productive performance of soybean is greatly affected by external interferences throughout the production cycle. The attack of pests is characterized as one of the main problems to be solved, especially the stink bug complex, which directly attacks the seeds during the filling and maturation, lowering soybean quality. Thus the aim of this study was to evaluated soybean lines derived from artificial crosses between soybean cultivars with resistance to stink bug complex and high agronomic potential, aiming to identify possible genotypes that inherited the good traits of both parents, and which traits best assist in the selection of genotypes resistant to stink bug complex. The experiment was carried out in the 2014/15 growing season, using an alpha-lattice experimental design 16x16 and 256 genotypes of soybean naturally infested with the stink bug complex. The agronomic traits evaluated were: plant height at maturity, height of the first pod insertion, number of days to maturity, agronomic value, leaf retention, grain yield, good seeds weight, good seed percentage, one hundred-seeds weight, number of branches per plant, number of pods per plant and number of reproductive nodes. Thirty-three genotypes were resistant to the stink bug complex and performed well regarding agronomically important traits. The traits grain yield, good seed weight, good seed percentage, leaf retention and one hundred-seeds weight can be used for indirect selection of genotypes resistant to the stink bug complex / Mestre

Orientador: José Carlos Barbosa / Banca: Marcelo Francisco Arantes Pereira / Banca: Marilia Gregolin Costa de Castro / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Antônio Carlos Busoli / Resumo: Com a expansão dos seringais na região Noroeste do Estado de São Paulo, o percevejo-de-renda da seringueira, Leptopharsa heveae, alcançou níveis populacionais que provocaram e têm provocado danos à heveicultura em geral, reduzindo de forma significativa a produção de látex nos seringais. Com o objetivo de conhecer a distribuição espacial para basear ações de controle desta praga, instalaram-se experimentos em 3 áreas de seringueira plantadas com o clone RRIM 600, com idades de 4, 8 e 12 anos, em uma fazenda localizada no município de Guapiaçu-SP. Em cada área foram consideradas 100 parcelas, cada uma composta por uma linha de 3 plantas sendo amostrado 1 ramo da parte externa do terço inferior da copa da planta central de cada parcela onde foram contadas ninfas e adultos, em 27 amostragens. O nível de agregação da praga foi estudado, para cada amostragem, segundo os índices de dispersão: razão variância/média, índice de Morisita, coeficiente de Green, lei de potência de Taylor e expoente k da binomial negativa e constatou-se que, na maioria das amostragens, a população de L. heveae apresentou distribuição agregada tanto para ninfas quanto para adultos e também para a população total (ninfas + adultos) da praga. Estudou-se o ajuste às distribuições de probabilidade através do teste qui-quadrado de aderência e o modelo mais adequado para representar a distribuição espacial foi a distribuição binomial negativa para ninfas, adultos e para o total da praga. Foi construído um plano de amostragem sequencial para a população total de L. heveae e o número máximo esperado é de 21 ramos para decidir se há a necessidade ou não do controle. As maiores médias populacionais de ninfas e adultos de L. heveae ocorreram no período de julho a outubro, e verificou-se que a população de L. heveae foi significativamente influenciada pelas chuvas, independente das idades ... / Abstract: With the expansion of rubber trees in the northwestern region of São Paulo state, Brazil, the rubber-tree lacebug, Leptopharsa heveae, reached population levels that caused and continues to cause damages to heveiculture, reducing significantly the rubber production in these trees. To determine the spatial distribution of the lace bug and devise measures to control this pest, experiments were established in 3 areas where RRIM 600 rubber tree clones had been planted (ages 4, 8, and 12 years old), in a farm in the city of Guapiaçu, São Paulo. In each area, 100 parcels were considered, each one made by a line of 3 plants, being sampled 1 branch from the outer section of the lower-third of the canopy of the central plant in each parcel where the number of lacebug nymphs and adults was counted in 27 sampling dates. In each sample, the level of pest aggregation was studied by the dispersion indexes: variance/mean relationship, Morisita's index, Green's coefficient, Taylor's Power Law, and k exponent of the negative binomial; thus, it was verified that, in most samples, the L. heveae population presents aggregate distribution both for nymphs and adults, as well as the pest population as a whole (nymphs plus adults). The adjustment to the probability's distributions was studied through the chi-square test; the binomial negative distribution was the most appropriate model to represent the spatial distribution of the nymphs, adults, and the total population in the 3 areas. A sequential sampling plan was developed for the whole L. heveae population, with an expected maximum of 21 branches being sampled to determine whether preventive measures are necessary. The highest population averages of nymphs and adults of L. heveae occurred from July to October. It was found that the population of L. heveae was significantly influenced by rainfall, regardless of the age of the rubber trees / Doutor