Orientador: Ana Maria Pires Soubhia / Co-orientador: Elerson Gaetti Jardim Júnior / Banca: Ana Cláudia Okamoto / Banca: Alvimar Lima de Castro / Banca: Diurianne Caroline Campos França / Banca: Luís Fernando Landucci / Resumo: Introdução: Os medicamentos antirretrovirais têm a finalidade de impedir a replicação viral, mantendo indiretamente a contagem de linfócitos T CD4+ estável, com isso, as infecções oportunistas diminuem, havendo melhora da qualidade de vida do indivíduo infectado pelo HIV, porém, inibidores de proteases e da transcriptase reversa também estão associados a efeitos adversos e risco de desenvolvimento de resistência medicamentosa. Além disso, ainda não está claro o efeito dessas terapias na microbiota bucal. Objetivo: O objetivo desse estudo foi investigar, em biofilme supra e subgengival de pacientes HIV positivos com diferentes condições periodontais e imunológicas, o efeito da terapia antirretroviral sobre microrganismos que podem estar associados a infecções oportunistas locais ou sistêmicas. Materiais e métodos: Foram obtidos dados sobre as condições de saúde, uso antirretrovirais e amostras de biofilme supra e subgengival de 118 pacientes HIV positivos de ambos os sexos divididos em dois grupos (usuários e não usuários de HAART). Essas amostras foram submetidas à detecção de microrganismos por PCR. Cálculos de Odds ratios foram realizados para determinar a relevância de inter-relações entre diferentes microrganismos e a significância dos parâmetros clínicos e microbiológicos foi determinada através de regressão logística multivariada. Resultados: Foram encontrados principalmente Tannerella forsythia, Campylobacter rectus, Acninomyces israelli, Staphylococcus sp, Citomegalovírus e Enterobacteriaceae nos pacientes. Treponema denticola, Fusobacterium nucleatum, Mollicutes, Actinomyces israelli e Staphylococcus sp em biofilme subgengival tiveram correlação significativa com os grupos de antirretrovirais (p < 0,05). Na comparação entre os grupos, somente Enterococcus faecalis e Pseudomonas... / Abstract: Introduction: Antiretrovirals are used in order to prevent viral replication while maintaining CD4 + T lymphocytes stable and low viral load, thus the occurrence of opportunistic infections decreases with an improvement in the quality of life of HIV-infected individual. As is known, protease inhibitors and reverse transcriptase are also associated with risk of adverse effects and development of drug resistance, however, it remains unclear the effect of these therapies on oral microbiota. Objective: The aim of this study was to investigate, in biofilm supra and subgingival in HIV - positive patients with different periodontal and immunological conditions, the effect of HAART on microorganisms that may be associated with local or systemic opportunistic infections. Materials and methods: Data on health conditions, use or nonuse of antiretroviral and biofilm samples supra and subgingival of 118 HIV - positive patients of both sexes, divided into two groups (users and nonusers of HAART), were obtained. These samples were subjected to PCR for detection of microorganisms. Odds ratio calculations were performed to determine the relevance of inter - relations between different microorganisms and the significance of clinical and microbiological parameters were determined using multivariate logistic regression. Results: Mainly T. forsythia, C. rectus, A. israelli, Staphylococcus sp and CMV were found. T denticola, F nucleatum, mollicutis, A. israelli and Staphylococcus sp in subgingival biofilm showed significant correlation (p <0.05) with antiretrovirals groups. Only E. faecalis and P. aeruginosa were significant with higher incidence in no HAART users group. Conclusion: There were no significant differences in... / Doutor

O princípio da regeneração tecidual guiada (RTG) baseia-se na utilização de membranas biocompatíveis com a finalidade de impedir a migração dos tecidos conjuntivo e epitelial para a ferida, permitindo que células do ligamento periodontal repovoem a superfície radicular e regenerem o aparato de inserção do dente. A RTG tem sido utilizada em diversas situações clínicas para facilitar o reparo de defeitos ósseos e periodontais, sendo as membranas de politetrafluoretileno expandido (e-PTFE) as mais utilizadas. O objetivo deste estudo foi avaliar a biocompatibilidade in vitro de uma nova membrana do compósito de poli(vinilideno-trifluoretileno)/titanato de bário (P(VDF-TrFE)/BT). Para isso, osteoblastos, fibroblastos e queratinócitos, células com as quais a membrana entrará em contato durante o processo de RTG, foram cultivados sobre membranas de P(VDF-TrFE)/BT e PTFE (controle). Os seguintes parâmetros foram avaliados: 1) adesão celular por contagem em hemocitômetro; 2) proliferação celular por MTT e 3) adesão e morfologia celular por fluorescência, para as linhagens osteoblástica, fibroblástica e de queratinócitos; 1) medida do conteúdo de proteína total; 2) medida da atividade de fosfatase alcalina (ALP) e 3) formação de matriz mineralizada, para as linhagens osteoblástica e fibroblástica; 1) imunolocalização de ALP por fluorescência; 2) detecção histoquímica in situ da atividade de ALP e 3) expressão dos genes Runx2, Colágeno I (COL I), Ostepontina (OPN), ALP, Sialoproteína óssea (BSP), Osteocalcina (OC), Bax, Bcl-2 e Survivina (SUR) por PCR em tempo real, para a linhagem osteoblástica; 1) expressão dos genes Periostin (PRT), Periodontal Ligament Specific 17 (PDLs17), Calcium-binding protein (S100A4), Fibromodulina (FBM), Bax, Bcl-2 e SUR por PCR em tempo real, para a linhagem fibroblástica e 1) expressão dos genes Involucrina (IVL), Queratina 1 (QRT-1), Queratina 10 (QRT-10), Queratina 14 (QRT-14), Bax, Bcl-2 e SUR por PCR em tempo real, para a linhagem de queratinócitos. Os dados quantitativos foram submetidos ao teste estatístico Mann-Whitney (nível de significância: 5%). A adesão de células osteoblásticas foi semelhante entre P(VDF-TrFE)/BT e PTFE em 30 min, 2 e 4 h (p>0,05). A proliferação de células osteoblásticas foi maior em culturas crescidas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 1, 7 e 10 dias (p<0,05). A epifluorescência indicou que as células osteoblásticas estavam aderidas e mais espraiadas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 30 min, 4 e 24 h. A imunofluorescência revelou presença de ALP apenas em culturas crescidas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 7 e 14 dias. O conteúdo de proteína total foi semelhante entre as duas membranas em 10 dias (p>0,05) e maior sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 7 e 14 dias (p<0,05). Não houve diferença estatisticamente significante para atividade de ALP em 7 dias (p>0,05), entretanto em 10 e 14 dias (p<0,05) a atividade de ALP foi maior em culturas sobre o P(VDFTrFE)/ BT. A detecção histoquímica in situ revelou atividade de ALP apenas em culturas crescidas sobre o P(VDF-TrFE)/BT, tanto aos 7 quanto aos 14 dias. A formação de matriz mineralizada ocorreu apenas em culturas crescidas sobre o P(VDF-TrFE)/BT. A expressão dos genes Runx2, COL I, OPN, ALP, BSP, OC, Bax e SUR foi maior em células cultivadas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 7 e 14 dias (p<0,05). Não houve expressão de Bcl-2 em culturas sobre as duas membranas. A adesão de células fibroblásticas foi semelhante entre P(VDFTrFE)/ BT e PTFE em 30 min (p>0,05) e maior sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 2 e 4 h (p<0,05). A proliferação de células fibroblásticas foi estatisticamente semelhante entre as duas membranas em 3 dias (p>0,05) e maior em culturas crescidas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 1 e 7 dias (p<0,05). Os ensaios de fluorescência direta revelaram que as células fibroblásticas estavam aderidas sobre as duas membranas, porém em estágios mais avançados de espraiamento sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 30 min, 2 e 4 h. O conteúdo de proteína total foi maior sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 10, 14 e 21 dias (p<0,05). Não se observou atividade de ALP em culturas fibroblásticas sobre as membranas de P(VDF-TrFE)/BT e PTFE aos 7 dias. Contudo, em 14 dias (p>0,05) a atividade de ALP foi semelhante entre as duas membranas e em 21 dias (p<0,05) foi estatisticamente significante em culturas crescidas sobre o P(VDF-TrFE)/BT. Aos 21 dias não se notou formação de matriz mineralizada em ambas as membranas. A expressão dos genes PRT, PDLs17, S100A4, FBM, Bax e SUR foi maior em culturas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 7 e 14 dias (p<0,05). A expressão de Bcl-2 foi maior em células fibroblásticas cultivadas sobre o PTFE em 7 e 14 dias (p<0,05). A adesão de queratinócitos foi semelhante entre P(VDF-TrFE)/BT e PTFE em 30 min, 2 e 4 h (p>0,05). A proliferação de queratinócitos foi estatisticamente semelhante entre as duas membranas em 4, 7, 10 e 14 dias (p>0,05) e maior sobre culturas crescidas sobre P(VDF-TrFE)/BT em 1, 17 e 21 dias (p<0,05). Por fluorescência direta notou-se que células cultivadas sobre ambas as membranas exibiam morfologia predominantemente arredondada em 30 min, 4 e 24 h. A expressão do gene IVL foi semelhante em culturas crescidas sobre as duas membranas em 7 dias (p>0,05) e maior sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 14 dias (p<0,05). Os genes QRT-1, QRT -10 e QRT -14, Bax e SUR estavam mais expressos em culturas sobre o P(VDF-TrFE)/BT em 7 e 14 dias (p<0,05). A expressão de Bcl-2 foi maior em queratinócitos crescidos sobre o PTFE em 7 dias (p<0,05) e semelhante entre as duas membranas em 14 dias (p>0,05). Por favorecer eventos relacionados ao desenvolvimento tecidual, como a adesão, proliferação e diferenciação celular, a membrana de P(VDF-TrFE)/BT pode representar uma boa alternativa ao PTFE para procedimentos de RTG. / The principle of guided tissue regeneration (GTR) is based on the use of physical barrier to isolate periodontal defects of the gingival connective and epithelial tissues so that bone, periodontal ligament, and cementum can be regenerated from their own cells. RTG procedure has been used in many clinical situations to promote bone and periodontal regeneration. Membranes of expanded polytetrafluoroethylene (e-PTFE) are the most commonly used material for GTR. However, several membranes have been tested to be applied in GTR. The purpose of this study was to evaluate the in vitro biocompatibility of the membrane of poly(vinylidene-trifluoroethylene/barium titanate (P(VDF-TrFE)/BT) composite. For that, osteoblasts, fibroblasts and keratinocytes, cells that will interact with the membrane during RTG, were culture P(VDF-TrFE)/BT and PTFE (control) membranes for up to 21 days. The following parameters were evaluated: 1) cell adhesion by counting in hemocytometer, 2) cell proliferation and 3) cell morphology by fluorescent labeling, for osteoblastic, fibroblastic and keratinocyte lineages; 1) total protein content; 2) alkaline phosphatase (ALP) activity and 3) mineralized bone-like nodule formation, for osteblastic and fibroblastic lineages; 1) immunolocalization of ALP by fluorescent labeling; 2) histochemistry detection in situ of ALP activity and 3) gene expression of Runx2, Collagen I (COL I), Ostepontin (OPN), ALP, Bone Sialoprotein (BSP), Osteocalcin (OC), Bax, Bcl-2 and Survivin (SUR) by real-time PCR, for osteoblastic lineage; 1) gene expression of Periostin (PRT), Periodontal ligament specific (PDLs17), Calcium-binding protein (S100A4), Fibromodulin (FBM), Bax, Bcl-2 and SUR by real-time PCR, for fibroblastic lineage; 1) gene expression of Involucrin (IVL), Keratin-1 (QRT-1), Keratin-10 (QRT-10), Keratin-14 (QRT- 14), Bax, Bcl-2 and SUR days by real-time PCR, for keratinocyte lineage. Data were submitted to Mann-Whitney test (level of significance: 5%). The adhesion of osteoblastic cells was similar between P(VDF-TrFE)/BT and PTFE at 30 min, 2 and 4 h (p>0.05). Cell proliferation was higher in ostegenic cultures grown on P(VDF-TrFE)/BT at 1, 7 and 10 days (p<0.05). Epifluorescence showed that osteoblastic cells grown on P(VDF-TrFE)/BT were more adhered and spread compared to PTFE at 30 min, 4 and 24 h. Immunofluorescence revealed the presence of ALP only in osteogenic cultures grown on P(VDF-TrFE)/BT at 7 and 14 days. Total protein content was similar between the membranes at 10 days (p>0.05) and higher on the P(VDF-TrFE)/BT at 7 and 14 days (p<0.05). There was no differences in ALP activity at 7 days (p>0.05). However, ALP activity was higher in osteogenic cultures on the P(VDF-TrFE)/BT at 10 and 14 days (p<0.05). The histochemistry reveals that only ostegenic cultures grown on P(VDF-TrFE)/BT had ALP activity in situ at 7 and 14 days. Bone-like nodule formation occurred only in cultures on the P(VDF-TrFE)/BT at 21 days. Gene expression of Runx2, COL I, OPN, ALP, BSP, OC, Bax and SUR was higher in cultures grown on P(VDF-TrFE)/BT at 7 and 14 days (p<0.05). There was no expression of Bcl-2 in cultures on both membranes. The adhesion of fibroblastic cells was similar between P(VDFTrFE)/ BT and PTFE at 30 min (p>0.05) and greater in fibroblastic cultures on P(VDFTrFE)/ BT at 2 and 4 h (p<0.05). Cell proliferation was similar in fibroblastic cultures grown on both membranes at 3 days (p>0.05) and higher in cultures on P(VDF-TrFE)/BT at 1 and 7 days (p<0.05). Epifluorescence showed that fibroblastic cells grown on P(VDF-TrFE)/BT were more adhered and more spread compared to PTFE at 30 min, 4 and 24 h. Total protein content was greater on P(VDF-TrFE)/BT at 10, 14 and 21 days (p<0.05). There was no ALP activity in fibroblastic cultures grown on both membranes at 7 days. The ALP activity was similar between P(VDF-TrFE)/BT and PTFE at 14 day (p>0.05) and higher on P(VDFTrFE)/ BT at 21 days (p<0.05). Bone-like nodule formation was not observed in fibroblastic cultures on both membranes at 21 days. Gene expression of PRT, PDLs17, S100A4, FBM, Bax and SUR was higher in cultures on the P(VDF-TrFE)/BT at 7 and 14 days (p<0.05). Bcl- 2 expression was higher in fibroblastic cultures on the PTFE at 7 and 14 days (p<0.05). Keratinocyte adhesion was similar for P(VDF-TrFE)/BT and PTFE at 30 min, 2 and 4 h (p>0.05). Keratinocyte proliferation was statistically similar on both membranes at 4, 7, 10 and 14 days (p>0.05) and higher in cultures grown on P(VDF-TrFE)/BT at 1, 17 and 21 days (p<0.05). Keratinocytes displayed a round morphology and was not observed any evidence of cell spreading at 30 min, 4 and 24 h. The gene expression of IVL was similar in cultures grown on P(VDF-TrFE)/BT and PTFE at 7 days (p>0.05) and higher on the P(VDF-TrFE)/BT at 14 days (p<0.05). Genes expression of QRT-1, QRT-10, QRT-14, Bax and SUR was greater in keratinocytes grown on P(VDF-TrFE)/BT at 7 and 14 days (p<0.05). Bcl-2 expression was higher in keratinocytes cultured on PTFE at 7 days (p<0.05) and similar on both membranes at 14 days (p>0.05). Our study indicates that P(VDF-TrFE)/BT membrane promote events related to tissue development/regeneration, such as cell adhesion, proliferation and differentiation. Thus, the membrane of P(VDF-TrFE)/BT could be used as an advantageous alternative to PTFE in GTR procedures.

Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2018-07-11T19:45:29Z No. of bitstreams: 2 Jessica_Malanotte2018.pdf: 2658956 bytes, checksum: e539d867d61d9c4b845d2d201bec0c78 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-11T19:45:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Jessica_Malanotte2018.pdf: 2658956 bytes, checksum: e539d867d61d9c4b845d2d201bec0c78 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Estado do Paraná (FA) / Periodontal disease is a chronic inflammatory condition of the teeth fixation structures, the proximity of the bacterial biofilm with periodontal vascularization facilitates the dissemination of bacteria, contributing to systemic inflammation, and may cause exacerbation of neuronal degeneration in the nervous lesions due to the intense inflammatory process. Studies report that low-power laser can improve the inflammatory condition in nerve lesions. Thus the objective of this study was to evaluate the effect of low power laser on peripheral nerve regeneration under the systemic inflammatory condition of periodontal disease. A total of 48 male rats were divided into 6 groups: control (GC); periodontal disease (GDP); nerve injury (GL); periodontal disease with nerve damage (GDPL); nerve damage and treatment (GLT); periodontal disease with nerve injury and treatment (GDPLT). On the 1st day of the experiment, ligation was performed around the lower first molars, which acted as a gingival irritant for 30 days. On the 15th day of the experiment, the nerve injury was performed by axonotmosis and the low power laser treatment started on the 18th day, performed for 2 weeks. The sciatic functional index (IFC) was evaluated, with subsequent euthanasia of all animals on the 30th day of the experiment. The sciatic nerve and right and left hemimandibula were collected for morphological, histological, radiographic and oxidative stress analysis. In the radiographic and histomorphometric analysis of the mandible, it was possible to confirm the induction of periodontal disease, in the results of the IFC, there was no statistical difference between the groups in the first pre-lesion evaluation, since the second evaluation, all groups presented a decrease in these values, which were maintained after treatment. In the histomorphometry of the nervous tissue there was no difference between the groups in the total nerve fibers (FN), in relation to the total of viable NF and greater than 4 micrometers, GC and GDP presented greater amount than GL and GDPL, in the fibers smaller than 4 μm all groups were similar. GC and GDP showed lower amounts of non-viable fibers. In relation to the diameters of the FN and myelin and axon sheath, GC and GDP presented larger diameters for the FN greater than 4μm, while in the smaller ones only 4μm for the BM there was difference, GC presented a larger diameter than GL and GDPL. All groups showed similar amounts of blood vessels and percentage of connective tissue. In the density of the cell nuclei, GC and GDP presented lower mean values than the other groups. In the morphology of the GDPL nervous tissue presented integral fibers of larger diameter while GLT and GDPLT larger and smaller diameters. In the antioxidant system, there was an increase in protein concentration, higher superoxide activity, and decreased glutathione transferase activity in the treated groups. Catalase and cholinesterase did not differ between groups, and lipoperoxidation was increased in the PD groups. In conclusion, the low power laser in the parameters used was not effective in increasing the nociceptive threshold, but it helped in the regeneration of the nerve fibers, although the inflammation in the place was still present, yet the treatment protected the cells against oxidative damages due to the increase of the superoxide and protein, however the decrease of glutathione S transferase demonstrates the inhibition of this stage of the antioxidant system. / A doença periodontal é uma condição inflamatória crônica das estruturas de fixação dos dentes. A proximidade do biofilme bacteriano à vascularização periodontal facilita a disseminação de bactérias, contribuindo para a inflamação sistêmica, o que pode ocasionar a exacerbação da degeneração neuronal nas lesões nervosas devido ao intenso processo inflamatório. Estudos científicos reportam que o laser de baixa potência pode melhorar a condição inflamatória em lesões nervosas. Diante disso, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do laser de baixa potência na regeneração nervosa periférica sob a condição inflamatória sistêmica da doença periodontal. Foram utilizados 48 ratos machos, divididos em 6 grupos: controle (GC); doença periodontal (GDP); lesão nervosa (GL); doença periodontal com lesão nervosa (GDPL); lesão nervosa e tratamento (GLT); doença periodontal com lesão nervosa e tratamento (GDPLT). No primeiro dia de experimento, realizou-se a ligadura ao redor dos primeiros molares inferiores que atuou como irritante gengival por 30 dias. No 15º dia de experimento, o nervo foi lesionado por axonotmese, o tratamento com laser de baixa potência iniciou no 18º dia, realizado por 2 semanas. No processo, avaliou-se o índice funcional do isquiático (IFC), com posterior eutanásia de todos os animais no 30º dia de experimento. Foram coletados o nervo isquiático e as hemimandíbulas direitas e esquerdas para análise morfológica, histológica, radiográfica e do estresse oxidativo. Na análise radiográfica e histomorfométrica da mandíbula, foi possível comprovar a indução da doença periodontal, nos resultados do IFC; não houve diferença estatística entre os grupos na primeira avaliação pré-lesão. Não obstante, a partir da segunda avaliação, todos os grupos apresentaram diminuição desses valores, que se mantiveram após tratamento. Na histomorfometria do tecido nervoso não houve diferença entre os grupos no total de fibras nervosas (FN), em relação ao total de FN viáveis e maiores que 4 micrómetros, GC e GDP apresentaram maior quantidade que GL e GDPL, nas fibras menores de 4 μm, todos os grupos foram semelhantes. GC e GDP apresentaram menor quantidade de fibras inviáveis. Com relação aos diâmetros das FN e bainha de mielina e axônio, GC e GDP apresentaram maiores diâmetros para as FN maiores que 4μm, enquanto que, nas menores que 4μm, apenas para a BM houve diferença, GC apresentou diâmetro maior que GL e GDPL. Todos os grupos apresentaram quantidades semelhantes de vasos sanguíneos e porcentagem de tecido conjuntivo. Já na densidade dos núcleos celulares, GC e GDP apresentaram médias menores que os demais grupos. Na morfologia do tecido nervoso, GDPL apresentou fibras integras de maior diâmetro, enquanto GLT e GDPLT maior e menor diâmetros. No sistema antioxidante, houve aumento da concentração de proteínas, maior atividade da superóxido, e diminuição da atividade da glutationa transferase nos grupos tratados. Catalase e colinesterase não apresentaram diferença entre os grupos, e a lipoperoxidação estava aumentada nos grupos com DP. O que se concluiu foi que o laser de baixa potência nos parâmetros utilizados não foi eficaz em aumentar o limiar nociceptivo; contudo, auxiliou na regeneração das fibras nervosas. Apesar da inflamação no local ainda estar presente, o tratamento protegeu as células contra danos oxidativos devido ao aumento da superóxido e de proteínas; porém, a diminuição da glutationa S transferase demonstra a inibição dessa etapa do sistema antioxidante.

Orientador: Ana Paula de Souza Pardo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-22T12:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guedes_RogerAntoniaci_M.pdf: 960151 bytes, checksum: c0a68bdbdf663d427c182550b1d9fa14 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A periodontite é caracterizada pela inflamação do periodonto, o tecido de suporte dos dentes. Este processo inflamatório pode evoluir da fase aguda para a fase crônica, acarretando severa destruição dos tecidos periodontais como também grave perda de inserção dos dentes ao osso alveolar. É evidente que o acúmulo de patógenos periodontais sobre a superfície dos dentes desencadeia a doença, porém seu agravamento e severidade também são dependentes de fatores ambientais, socioeconômicos, tabagismo, condição de saúde sistêmica e carga genética dos indivíduos. Desta forma, vários pesquisadores têm se dedicado a estudar a influência dos polimorfismos genéticos sobre a suscetibilidade e/ou risco aumentado à doença periodontal, uma vez que estes podem exercer efeito sobre o prognóstico da periodontite crônica. Estudos têm relatado associação entre vários polimorfismos genéticos com a inflamação periodontal. Há ainda estudos em larga escala onde grande parte do genoma (GWA) foi investigado, relatando efeito da genética do hospedeiro sobre a resposta à doença. Desde modo, considerando a hipótese de associação entre periodontite e polimorfismos no gene SOCS1 que expressa uma proteína chave no controle da via intracelular JAK/STAT ativada por diversas citocinas pró-inflamatórias presentes na inflamação periodontal, nosso objetivo neste estudo foi estudar a frequência dos genótipos, alelos e haplótipos dos polimorfismos SOCS1-1478 (rs33989964) e SOCS1-820 (rs33977706) em grupo de indivíduos com saúde periodontal e indivíduos com periodontite crônica, na tentativa de observar associação entre variações no gene SOCS1 com a doença periodontal crônica. Para tal, DNA genômico foi purificado de células epiteliais bucais obtidas por meio de enxágue com dextrose a 3%. Após, os genótipos foram identificados com a utilização das técnicas de PCR/ RFLP/ eletroforese. Análises estatísticas possibilitaram a observação da associação do polimorfismo SOCS1 -820 (rs33977706) com os casos de periodontite crônica mais severa / Abstract: The periodontitis is characterized by the periodontium inflammation, the supporting tissue of the teeth. This inflammatory disorder might evolve from the acute to the chronic phase, causing severe periodontal tissue destruction as well as teeth insertion loss in the alveolar bones. It is evident that the accumulation of periodontal pathogens on the teeth surface origins the disease, yet its aggravation and severity also depend on socioeconomic and environmental factors, smoking, systemic health condition and the genetic background of the subjects. Thus, several researchers have focused their studies on the influence of the genetic polymorphisms in the susceptibility and/or increased risk to the periodontal disease, once they might play a role on the chronic periodontitis prognosis. Studies have shown association between several genetic polymorphisms and periodontal inflammation. Still, there are large-scale studies in which the majority of the genome (GWA) has been investigated, reporting genetic host roles as responses to the disease. Thus, considering the hypothesis of association between periodontitis and polymorphisms in the SOCS1 gene which expresses a key protein in the control of the intracellular JAK/STAT via activated by varied pro-inflammatory cytokines found in the periodontal inflammation, we aimed to study the frequency of genotypes, alleles and haplotypes of the polymorphisms SOCS1-1478 (rs33989964) and SOCS1-820 (rs33977706) in a healthy periodontal subjects group and in a chronic periodontal subjects group, attempting to observe association between variations in the SOCS1 gene and the chronic periodontal disease. To do so, genomic DNA was purified from mouth epithelial cells collected through 3% dextrose rinse. Afterwards, the genotypes were identified by the use of PCR/RFLP electrophoresis techniques. Statistical analysis allowed us to observe association of SOCS1-820 polymorphism (rs33977706) with more severe chronic periodontitis cases / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Determina los principales factores anatómicos que influyen en la integridad de las papilas interdentarias en el sector anterosuperior en pacientes que acuden a la clínica de posgrado de periodoncia de UNMSM. Se evalúa a 50 pacientes los cuales siguen los criterios de inclusión y exclusión, y que cuentan con Tomografía Cone Beam. La evaluación clínica se realiza a las papilas interdentarias entre 13 a 23 según la clasificación de Nordland y Tarnow, el biotipo gingival se evalúa mediante la transparencia al sondaje. El análisis tomográfico consiste en realizar medidas tomográficas a la distancia PC-CO, distancia interradicular, espesor de hueso alveolar, forma de tronera gingival (según distancias UCEp-UCEp y PC-UCEp), y determinar la forma de la corona dentaria a través de medidas tomográficas. Las variables cuantitativas se someten a la prueba de normalidad Kolmogorov-Smirnov, luego a las pruebas ANOVA y Kruskall-Walis. Para las variables cualitativas se emplea el análisis estadístico Chi-Cuadrado. Finalmente los factores con relación significativa se evalúan con regresión logística binaria. Se evalúa un total de 232 papilas interdentarias las cuales el 89% presentan algún grado de pérdida en su dimensión (clase I, II y III). El biotipo gingival grueso está asociado a una clase 0 y I papilar, y el biotipo delgado a una clase II y III. La forma de la tronera gingival ancha-corta es más relacionado a papilas clase 0, y la clase III a troneras ancha-largas y ancha-cortas. La mayor distancia PC-CO, mayor distancia interradicular y forma triangular de la corona están relacionadas significativamente a papilas clase II y III. El espesor alveolar es menor en papilas clase II y III en 12-11, 21-11 y 21-22. Tras el análisis de regresión logística binaria se encuentra que en la mayoría de casos el biotipo gingival y la distancia PC-CO tenían una relación significativa respecto a las demás. Se concluye que la forma de la corona dentaria, distancia interradicular, espesor de hueso alveolar (en 12-11, 11-21, 21-22), la forma de la tronera gingival, la distancia PC-CO y el biotipo gingival tienen una relación significativa a la condición clínica de la papila interdentaria. Siendo las 2 últimas las que más influyen respecto a las demás. / Tesis

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a microbiota subgingival pela técnica de Checkerboard e o perfil de citocinas por imunoensaio com princípio sanduíche baseado na tecnologia fluxometria do fluido gengival e soro em indivíduos não obesos; e em indivíduos com obesidade, antes e após cirurgia bariátrica. Diferenças na microbiota bucal foram observadas entre não obesos e obesos para 19 espécies bacterianas, particularmente E. corrodens que apresentou diferenças significativas em obesos, com consequente redução após a perda de peso. As citocinas IL-1b, IL-6, IL-10, IL-13, IL-17, TNF-a, leptina e adiponectina apresentaram diferenças estatisticamente significantes (p<0,05) quando esses indivíduos foram comparados. Todas as citocinas analisadas no soro diminuíram após a redução de peso, apenas a adiponectina apresentou concentrações significativamente mais elevadas (p<0,05). Assim, a obesidade promove alterações na microbiota subgengival e na resposta imunológica local e sua prevenção ou controle pode favorecer a saúde bucal. / In this study, the aimed to evaluate the subgingival microbiota using Checkerboard technique and the cytokines profile by using immunoassay based on the flowmetry gingival fluid and serum in non-obese and obese individuals, before and after bariatric surgery. Differences were observed in the oral microbiota between nonobese and obese for 19 bacterial species, particularly E. corrodens that showed significant differences in obese, with a consequent reduction after weight loss. The cytokines IL-1b, IL-6, IL-10, IL-13, IL-17, TNF-a, leptin and adiponectin were statistically different (p <0.05) when these individuals were compared. All analyzed cytokines in serum decreased after weight reduction only adiponectin concentrations showed significantly higher (p <0.05). Thus, obesity causes changes in the subgingival microbiota and the local immune response, and prevention and control can promote oral health.

Purpose: The aim of this study was to evaluate the buccal and lingual alveolar bone morphology and the periodontal clinical condition of impacted permanent maxillary central incisors at least 6 months after the orthodontic traction. Methods: This split mouth transversal study evaluated a sample of 11 patients a mean of 15.41 years after the orthodontic traction of unilateral impacted maxillary central incisor. The experimental group (TR) consisted of 11 impacted central incisors. The comparison group (NTR) consisted of 11 non-impacted contralateral teeth. High-resolution CBCT exams of central incisors were performed using Accuitomo (J. Morita, Kyoto, Japan). Cross section imagens passing through the center of maxillary central incisors were used to measure buccal and lingual alveolar bone level. Presence of fenestration, root dilacerations, root coverage, and position of the root apex were also assessed in the same images. Clinical parameters included the periodontal probing depth, attachment level, gingival bleeding index, plaque index, degree of gingival recession, amount of gingival mucosa and evaluation of interproximal papilla and black triangle. Digital model analysis included an assessment of clinical crown height and width. Intergroup comparisons were performed using paired t tests, McNemar and Wilcoxon tests (p<0.05). Pearson correlation coefficient was calculated to determine the relationship between the clinical and CBCT findings. Results: TR group showed a significantly thinner buccal bone plate thickness at the middle and apical root level compared to NTR group. A decreased buccal alveolar crest level was observed in TR group in comparison to NTR group. The TR group showed a greater frequency of buccal bone dehicences and root dilacerations than antimeres. Experimental group showed more gingival recession, a decreased amount of gingival mucosa and an increased clinical attachment level at the buccal aspect than the NTR group. Moderate inverse correlation was found between buccal bone plate thickness of central incisors and attachment level and moderate positive correlation was found between buccal alveolar crest height and attachment level Conclusions: The periodontal conditions of maxillary central incisors long-term after orthodontic traction are different compared to its antimere. A decreased thickness and height of buccal alveolar bone and gingival recessions were observed in central incisors 15 years after orthodontic traction. / Introdução: o objetivo deste estudo foi avaliar a morfologia óssea alveolar vestibular e lingual e a condição clínica periodontal de incisivos centrais superiores impactados há, pelo menos, 6 meses após o tracionamento ortodôntico. Material e Métodos: Este estudo transversal de boca dividida avaliou uma amostra de 11 pacientes com média de 15,41 anos após a mecânica de tração ortodôntica de incisivo central superior retido unilateral. O grupo experimental (TR) foi composto por 11 incisivos centrais retidos. O grupo controle (NTR) foi composto por 11 incisivos contralaterais irrompidos naturalmente. Exames de TCFC de alta resolução dos incisivos centrais foram realizados utilizando o Accuitomo (J. Morita, Kyoto, Japão). As imagens transversais que passaram pelo centro dos incisivos centrais superiores foram utilizadas para medir o nível ósseo alveolar vestibular e lingual. A presença de fenestração, dilaceração, recobrimento radicular e posição do ápice radicular também foram avaliados nas mesmas imagens. Os parâmetros clínicos incluíram profundidade de sondagem periodontal, nível de inserção clínico, índice de sangramento gengival, índice de placa, grau de recessão gengival, quantidade de mucosa queratinizada e avaliação da presença de triângulo negro na papila interproximal. A análise de modelo digital consistiu da avaliação da altura e largura da coroa clínica. As comparações intergrupos foram realizadas utilizando os testes de t pareado, McNemar e Wilcoxon (p<0,05). O coeficiente de correlação de Pearson foi calculado para determinar a relação entre os achados clínicos e TCFC. Resultados: o grupo TR apresentou uma espessura da tábua óssea vestibular significantemente mais fina em nível médio e apical da raiz, em comparação ao grupo NTR. Observou-se uma diminuição do nível da crista alveolar vestibular no grupo TR em comparação ao grupo NTR. O grupo TR mostrou uma maior frequência de deiscência óssea vestibular e dilaceração radicular quando comparado aos contralaterais. O grupo experimental revelou maior recessão gengival, diminuição da quantidade de mucosa gengival e maior do nível de inserção clínico na face vestibular, em comparação ao grupo NTR. Verificou-se uma correlação inversa entre a espessura da tábua óssea vestibular dos incisivos centrais e o nível de inserção clínico e uma positiva correlação entre a altura da crista alveolar vestibular e o nível de inserção, ambas moderadas. Conclusões: As condições periodontais dos incisivos centrais superiores em longo prazo após o tracionamento ortodôntico são diferentes em comparação aos contralaterais. Uma menor espessura e altura óssea alveolar vestibular, bem como presença de recessões gengivais foram observadas nos incisivos centrais 15 anos após o tracionamento ortodôntico.

Acreditava-se que a reparação do osso alveolar durante a movimentação ortodôntica só ocorresse após a diminuição da carga aplicada. No entanto, recentemente foi observado reparação do osso alveolar utilizando força contínua. Osteopontina é uma proteína não colágena da matriz com importante papel na remodelação óssea. Para analisar as reações no periodonto de sustentação e a distribuição de OPN, uma força contínua de 15cN foi aplicada aos primeiros molares superiores de ratos por 12d, 15d e 18d. Como controle, outros animais não tiveram seus molares movimentados. As maxilas foram processadas para análise ultra-estrutural morfológica, imunocitoquímica para OPN e histoquímica para fosfatase ácida resistente ao tartarato. No tempo inicial do estudo não foram encontradas reabsorções radiculares. Nos tempos intermediário e final, no entanto, reabsorções radiculares estavam presentes e aumentavam sua severidade com o tempo. Além disso, foi observado sinal de reparação do cemento. A expressão de OPN apresentou-se aumentada na superfície óssea e radicular. / It is believed that repair during orthodontic movement occurs after decreasing of force. However, signs of repair in alveolar bone submitted to continuous orthodontic force have been recently observed. Osteopontin is a major noncollagenous matrix protein that plays a role in physiological remodeling and mechanical stress. In order to test periodontal reactions and the distribution of OPN, a continuous 15cN force was applied to upper first rat molars for 12d, 15d, 18d, while other rats did not have their molars moved as a control. Maxillae were processed for ultrastructural analysis, immunocytochemistry for OPN and tartarate-resistant acid phosphatase histochemistry. Ultrastructural analysis revealed root resorption at 15d and 18d. Deep lacunae appeared in some regions of the pressure area after 18 days, most of them reaching the underlying root dentine. Signs of repair were detected concomitant with tissue damage and resorption of the root surfaces. At all times studied, overexpression of OPN was observed recovering alveolar bone and root surface.

Objetivos: Avaliar a espessura da tábua óssea e nível de crista vestibular e lingual de segundos pré-molares e molares após o tratamento ortodôntico em pacientes com perda do primeiro molar inferior. Além de investigar presença de fenestrações e o comportamento dos parâmetros clínicos periodontais. Métodos: A amostra foi composta de 36 hemiarcos os quais foram divididos em 3 grupos: Grupo Abertura (GA - 15 molares verticalizados), Grupo Fechamento (GF - 12 molares mesializados para área de rebordo atrófico) e Grupo Controle (GC 9 hemiarcos sem perdas dentárias). Após a movimentação, os pacientes foram submetidos a exames de tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) seguindo protocolos de 0,2 mm de voxel a 6 cm de FOV, no aparelho i-CAT Cone-Beam 3-D Dental Imaging System. Todas as medições foram realizadas no Dolphin em cortes parassagitais e avaliadas nas faces vestibular e lingual. Presença de fenestrações, posição do ápice radicular e recobrimento radicular também foram avaliados. Além disso, profundidade de sondagem, índice de sangramento gengival, recessão e índice de placa foram mensurados antes e depois do tratamento. A comparação intergrupos do nível da crista e espessura óssea foi realizado com o ANOVA seguido do teste de Tukey. A comparação intergrupos para a presença de fenestração e a posição do ápice radicular foi avaliada usando o Qui-quadrado enquanto o recobrimento radicular foi comparado pelo teste de Kruskal-wallis e Mann-Whitney. Os parâmetros clínicos periodontais foram comparados por meio do teste t pareado (intragrupos) e ANOVA e Tukey (intergrupos). Resultados: Não houve diferença significante entre os grupos para nenhuma medição realizada no segundo pré-molar. Houve um menor nível da crista óssea vestibular e lingual para o grupo fechamento. Não houve diferença para a espessura da tábua óssea e para a presença de fenestrações entre os grupos. GF apresentou ápices radiculares mais centralizados, enquanto os demais grupos mostraram raízes ligeiramente deslocadas para vestibular. Na avaliação dos parâmetros clínicos periodontais, não houve diferença para a avaliação intragrupos, mas em uma avaliação intergrupos, o índice de sangramento gengival no GA foi o dobro dos demais grupos. Conclusões: Dentes mesializados apresentam crista óssea suavemente deslocada para apical em relação aos molares verticalizados e somente alinhados e nivelados. A pequena diferença não compromete essa indicação terapêutica. / Objective: The aim of this study was to evaluate the buccal and lingual bone plate thickness measurements and dehiscences of mandibular second premolars and molars after orthodontic treatment in patients with loss of first permanent molar and to investigate periodontal parameters behavior. Methods: The sample comprised 36 hemiarchs which were divided into 3 groups: GA (15 uprighted molars), GF (12 molars that were moved to atrophic areas) and GC (control grup 9 molars aligned and leveled). Posttreatment CBCT exams of the mandible were taken with voxel dimensions of 0.2 mm using the i-CAT Cone-Beam 3-D Dental Imaging System. Linear measurements were performed using the Dolphin software on cross section slices. Dehiscences and bone plate thickness measurements at middle of root were taken in buccal and lingual surfaces. Fenestrations, root apex position e root coverage were evaluated. Besides, the probing depth, plaque index, recession level and gingival bleeding index were evaluated before and after molar movement. The comparison between groups regarding dehiscence and bone thickness was performed by ANOVA followed by Tukey test. Presence of fenestration and root apex position were investigated by chi-square test. Root coverage measurements were performed by kruskal-wallis and Mann-Whitney. Periodontal parameters investigation were performed by Student t test (intergroup) and ANOVA and Tukey test (intergroup). Results: There were no significant differences for premolars measurements. Other than that, the distance between the CEJ and the alveolar crest was significant higher for molars that were moved to atrophic areas without differences on bone thickness. There was no difference for presence of fenestration between groups. GF showed centralized root apex, while others groups showed a small buccal root displacement. GF showed lower root coverage than GA and GC. Regarding periodontal parameters, there was no differences for intragroup comparison, but bleeding gingival index was higher on GA at end of treatment. Conclusions: It was concluded that molar movement to atrophic areas increased buccal and lingual dehiscences and this movement should be indicated with caution.

Objetivos: Avaliar a espessura da tábua óssea e nível de crista vestibular e lingual de segundos pré-molares e molares após o tratamento ortodôntico em pacientes com perda do primeiro molar inferior. Além de investigar presença de fenestrações e o comportamento dos parâmetros clínicos periodontais. Métodos: A amostra foi composta de 36 hemiarcos os quais foram divididos em 3 grupos: Grupo Abertura (GA - 15 molares verticalizados), Grupo Fechamento (GF - 12 molares mesializados para área de rebordo atrófico) e Grupo Controle (GC 9 hemiarcos sem perdas dentárias). Após a movimentação, os pacientes foram submetidos a exames de tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) seguindo protocolos de 0,2 mm de voxel a 6 cm de FOV, no aparelho i-CAT Cone-Beam 3-D Dental Imaging System. Todas as medições foram realizadas no Dolphin em cortes parassagitais e avaliadas nas faces vestibular e lingual. Presença de fenestrações, posição do ápice radicular e recobrimento radicular também foram avaliados. Além disso, profundidade de sondagem, índice de sangramento gengival, recessão e índice de placa foram mensurados antes e depois do tratamento. A comparação intergrupos do nível da crista e espessura óssea foi realizado com o ANOVA seguido do teste de Tukey. A comparação intergrupos para a presença de fenestração e a posição do ápice radicular foi avaliada usando o Qui-quadrado enquanto o recobrimento radicular foi comparado pelo teste de Kruskal-wallis e Mann-Whitney. Os parâmetros clínicos periodontais foram comparados por meio do teste t pareado (intragrupos) e ANOVA e Tukey (intergrupos). Resultados: Não houve diferença significante entre os grupos para nenhuma medição realizada no segundo pré-molar. Houve um menor nível da crista óssea vestibular e lingual para o grupo fechamento. Não houve diferença para a espessura da tábua óssea e para a presença de fenestrações entre os grupos. GF apresentou ápices radiculares mais centralizados, enquanto os demais grupos mostraram raízes ligeiramente deslocadas para vestibular. Na avaliação dos parâmetros clínicos periodontais, não houve diferença para a avaliação intragrupos, mas em uma avaliação intergrupos, o índice de sangramento gengival no GA foi o dobro dos demais grupos. Conclusões: Dentes mesializados apresentam crista óssea suavemente deslocada para apical em relação aos molares verticalizados e somente alinhados e nivelados. A pequena diferença não compromete essa indicação terapêutica. / Objective: The aim of this study was to evaluate the buccal and lingual bone plate thickness measurements and dehiscences of mandibular second premolars and molars after orthodontic treatment in patients with loss of first permanent molar and to investigate periodontal parameters behavior. Methods: The sample comprised 36 hemiarchs which were divided into 3 groups: GA (15 uprighted molars), GF (12 molars that were moved to atrophic areas) and GC (control grup 9 molars aligned and leveled). Posttreatment CBCT exams of the mandible were taken with voxel dimensions of 0.2 mm using the i-CAT Cone-Beam 3-D Dental Imaging System. Linear measurements were performed using the Dolphin software on cross section slices. Dehiscences and bone plate thickness measurements at middle of root were taken in buccal and lingual surfaces. Fenestrations, root apex position e root coverage were evaluated. Besides, the probing depth, plaque index, recession level and gingival bleeding index were evaluated before and after molar movement. The comparison between groups regarding dehiscence and bone thickness was performed by ANOVA followed by Tukey test. Presence of fenestration and root apex position were investigated by chi-square test. Root coverage measurements were performed by kruskal-wallis and Mann-Whitney. Periodontal parameters investigation were performed by Student t test (intergroup) and ANOVA and Tukey test (intergroup). Results: There were no significant differences for premolars measurements. Other than that, the distance between the CEJ and the alveolar crest was significant higher for molars that were moved to atrophic areas without differences on bone thickness. There was no difference for presence of fenestration between groups. GF showed centralized root apex, while others groups showed a small buccal root displacement. GF showed lower root coverage than GA and GC. Regarding periodontal parameters, there was no differences for intragroup comparison, but bleeding gingival index was higher on GA at end of treatment. Conclusions: It was concluded that molar movement to atrophic areas increased buccal and lingual dehiscences and this movement should be indicated with caution.