Le plasma riche en plaquettes (PRP) représente une nouvelle modalité de traitement visant à améliorer le taux de succès des greffes osseuses. Les objectifs de cette étude consistaient à établir un modèle animal afin de quantifier l'effet des PRP activés sur la guérison osseuse initiale et mature in vivo et de caractériser l'effet de l'activation des PRP sur la libération des facteurs de croissance VEGF, PDGF, TGF-0 et IL-ip et sur la division des cellules endothéliales. Des PRP humains, préparés à partir de sang prélevé chez quatre donneurs, furent greffés dans défauts osseux trans-crâniens pratiqués chirurgicalement chez 24 rats athymiques. Les analyses micro-tomographiques assistées par ordinateur réalisées indiquent qu'en moyenne, il n'y a aucune différence significative dans la formation osseuse in vivo lorsque des PRP activés sont greffés dans des défauts crâniens comparés à un défaut contrôle. Cependant, il existe une corrélation entre la formation osseuse et la présence de certains facteurs de croissance libérés par les PRP, tels que VEGF et PDGF.

Reproduction de : Thèse doctorat : Médecine. Hématologie.Biomolécules et dynamique cellulaire : Reims : 2004. / Bibliogr.

Thèses (Ph.D.)--Université de Sherbrooke (Canada), 1999. / Titre de l'écran-titre (visionné le 25 août 2006). Publié aussi en version papier.

Thèses (M.Sc.)--Université de Sherbrooke (Canada), 1997. / Titre de l'écran-titre (visionné le 20 juin 2006). Publié aussi en version papier.

Thesis (M.Sc.)--University of Hong Kong, 2007. / Includes bibliographical references (p. 100-104).

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Les plaquettes, fragments de cellules, sont très abondantes dans le sang où elles favorisent l'hémostase. Activées, elles forment des microparticules (MPs) et libèrent des mitochondries libres ou encapsulées. Comme la membrane mitochondriale est un substrat de la phospholipase A2 sécrétée qui libère des signaux inflammatoires, nos résultats permettent d'identifier les mitochondries extracellulaires au centre d'un mécanisme inflammatoire puissant qui fournit une explication possible de l'augmentation des niveaux sanguins d'ADNmt rapporté dans de multiples pathologies telles que les réactions transfusionnelles où l’ADNmt est présent à des niveaux plus élevés dans les PCs. Ici, nous avons étudié les MPs et les mitochondries extracellulaires dans différents types de PCs Les concentrations des MPs et des mitochondries extracellulaires étaient significativement plus élevées dans le PRP que les autres PC et sont stables dans l’entreposage. Le mode de préparation, plutôt que de la durée d’entreposage a un impact sur leur libération dans les PCs. / Platelets, anucleate cell fragments that contain mitochondria, are highly abundant in blood where they promote hemostasis. Activated platelets shed microparticles (MPs) and release respiratory-competent mitochondria, both within membrane-encapsulated microparticles and as free organelles. As the mitochondrion is an endogenous substrate of secreted phospholipase A2 IIA (sPLA2-IIA), which yields inflammatory mediators, our findings identify extracellular mitochondria at the midpoint of a potent mechanism leading to inflammatory responses. This mechanism provides a potential explanation for the increased levels of extracellular mtDNA reported in blood in multiple pathologies, such as adverse transfusion reactions where mtDNA is present at higher levels in PCs. Herein, we aimed to quantify MPs and extracellular mitochondria in different types of PCs through storage. Concentrations of MPs and extracellular mitochondria were significantly higher in PRP than other PCs and were stable over storage. The mode of preparation, rather than storage duration, impacts release of MPs and mitochondria in PCs.

Les plaquettes jouent un rôle majeur dans le maintien de l’hémostase, ainsi que dans les phénomènes de thrombose et d’occlusion vasculaire. Elles ne contiennent pas d’ADN génomique, mais recèlent néanmoins un transcriptome complexe. Bien que les ARN messagers (ARNm) plaquettaires peuvent être traduits de novo, notamment en réponse aux stimuli physiologiques, les mécanismes contrôlant cette synthèse demeurent obscurs. Notre équipe a démontré que les plaquettes humaines contiennent une quantité abondante et diversifiée de microARN, suggérant leur implication dans le contrôle de la traduction des ARNm plaquettaires. Suite à une stimulation, les plaquettes libèrent des microparticules (MP), qui permettent de véhiculer des signaux biologiques, dont du matériel génétique, à des cellules réceptrices. L’implication des microARN plaquettaires dans la communication intercellulaire via les MP reste à être approfondie. Mes travaux de doctorat, portant sur l'étude des complexes ribonucléoprotéiques au sein des plaquettes, ont montré l’implication des microARN et de la protéine T-cell-restricted intracellular antigen-1 (TIA-1) dans la reconnaissance et la régulation des ARNm plaquettaires, apportant ainsi de nouvelles connaissances sur les mécanismes moléculaires impliqués dans la régulation de la synthèse protéique de novo suite à l’activation des plaquettes. De plus, l’étude de la communication intercellulaire entre les plaquettes et les macrophages a permis de montrer que les MP plaquettaires (i) livrent des microARN aptes à réguler l’expression d’ARNm endogènes chez les cellules réceptrices, et (ii) reprogramment les fonctions primaires des macrophages, laissant entrevoir de nombreuses implications physiologiques. Les résultats de ma thèse suggèrent que les microARN plaquettaires contribuent au maintien de l’hémostase, en participant à la régulation de la synthèse protéique des plaquettes et en modulant l’expression génique des cellules environnantes. L’étude de la fonction des microARN plaquettaires a permis de mettre en relief la complexité de la régulation de l’hémostase et du système circulatoire. / Platelets play an important role in hemostasis, as well as in thrombosis and coagulation processes. Lacking genomic DNA, they nevertheless harbor a complex transcriptome. Although platelet messenger RNAs (mRNAs) can be used for de novo protein synthesis, especially in response to physiological stimuli, mechanisms controlling this synthesis remain unclear. Our team demonstrated that human platelets contain an abundant and diverse array of microRNAs, suggesting their involvement in the control of platelet mRNA translation. Following stimulation, platelets release microparticles (MPs) that convey biological signals and genetic material to recipient cells. The involvement of platelet microRNAs in the intercellular communication via MPs remained incompletely understood. The study of microRNA-containing ribonucleoprotein complexes inside platelets revealed the involvement of microRNAs and of the protein T-cell-restricted intracellular antigen-1 (TIA-1) in the recognition and regulation of platelets mRNAs, thereby improving our understanding of the molecular mechanisms regulating de novo protein synthesis upon platelet activation. Moreover, the study of intercellular communication between platelets and macrophages demonstrated that platelet MPs could (i) deliver functional microRNAs capable to regulate endogenous mRNA expression in recipient cells, and (ii) reprogram primary functions of macrophages, suggesting numerous physiological effects. My thesis results suggest that platelet microRNAs contribute to maintain the hemostatic balance, in regulating the synthesis of essential proteins and by modulating gene expression of surrounding cells. The study of platelet microRNA functions underscores the complexity of the regulatory processes of hemostasis and of the circulatory system.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Thèses (Ph.D.)--Université de Sherbrooke (Canada), 1997. / Titre de l'écran-titre (visionné le 24 août 2006). Publié aussi en version papier.