Introdução: A busca por um substituto ósseo que faça prescindível a obtenção de enxerto autólogo é uma necessidade do cirurgião ortopédico. O aspirado de medular óssea possui células tronco do sistema mesenquimal capazes de se diferenciarem em osteoblastos, sendo assim considerado um material osteogênico. O plasma rico em plaquetas possui os chamados fatores plaquetários de crescimento, que possuem a capacidade de promover e estimular a diferenciação de células tronco do sistema mesenquimal em osteoblastos, acelerando o processo de consolidação óssea. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de consolidação e o tempo para tal nas osteotomias de cunha de abertura na tíbia, comparando o enxerto autólogo de ilíaco, ao plasma rico em plaquetas associado a medular óssea. Métodos: Foram estudados 25 pacientes submetidos a osteotomia tibial de cunha de abertura medial. Os pacientes foram divididos em dois grupos, de forma randomizada. O grupo controle formado por 14 pacientes submetidos à osteotomia com a utilização de enxerto autólogo do ilíaco, e o grupo de estudo formado por 11 pacientes submetidos à osteotomia com utilização de um composto de plasma rico em plaquetas e medular óssea. Resultados: Quanto à ocorrência de consolidação da osteotomia, as Introdução: A busca por um substituto ósseo que faça prescindível a obtenção de enxerto autólogo é uma necessidade do cirurgião ortopédico. O aspirado de medular óssea possui células tronco do sistema mesenquimal capazes de se diferenciarem em osteoblastos, sendo assim considerado um material osteogênico. O plasma rico em plaquetas possui os chamados fatores plaquetários de crescimento, que possuem a capacidade de promover e estimular a diferenciação de células tronco do sistema mesenquimal em osteoblastos, acelerando o processo de consolidação óssea. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de consolidação e o tempo para tal nas osteotomias de cunha de abertura na tíbia, comparando o enxerto autólogo de ilíaco, ao plasma rico em plaquetas associado a medular óssea. Métodos: Foram estudados 25 pacientes submetidos a osteotomia tibial de cunha de abertura medial. Os pacientes foram divididos em dois grupos, de forma randomizada. O grupo controle formado por 14 pacientes submetidos à osteotomia com a utilização de enxerto autólogo do ilíaco, e o grupo de estudo formado por 11 pacientes submetidos à osteotomia com utilização de um composto de plasma rico em plaquetas e medular óssea. Resultados: Quanto à ocorrência de consolidação da osteotomia, asIntrodução: A busca por um substituto ósseo que faça prescindível a obtenção de enxerto autólogo é uma necessidade do cirurgião ortopédico. O aspirado de medular óssea possui células tronco do sistema mesenquimal capazes de se diferenciarem em osteoblastos, sendo assim considerado um material osteogênico. O plasma rico em plaquetas possui os chamados fatores plaquetários de crescimento, que possuem a capacidade de promover e estimular a diferenciação de células tronco do sistema mesenquimal em osteoblastos, acelerando o processo de consolidação óssea. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de consolidação e o tempo para tal nas osteotomias de cunha de abertura na tíbia, comparando o enxerto autólogo de ilíaco, ao plasma rico em plaquetas associado a medular óssea. Métodos: Foram estudados 25 pacientes submetidos a osteotomia tibial de cunha de abertura medial. Os pacientes foram divididos em dois grupos, de forma randomizada. O grupo controle formado por 14 pacientes submetidos à osteotomia com a utilização de enxerto autólogo do ilíaco, e o grupo de estudo formado por 11 pacientes submetidos à osteotomia com utilização de um composto de plasma rico em plaquetas e medular óssea. Resultados: Quanto à ocorrência de consolidação da osteotomia, as Introdução: A busca por um substituto ósseo que faça prescindível a obtenção de enxerto autólogo é uma necessidade do cirurgião ortopédico. O aspirado de medular óssea possui células tronco do sistema mesenquimal capazes de se diferenciarem em osteoblastos, sendo assim considerado um material osteogênico. O plasma rico em plaquetas possui os chamados fatores plaquetários de crescimento, que possuem a capacidade de promover e estimular a diferenciação de células tronco do sistema mesenquimal em osteoblastos, acelerando o processo de consolidação óssea. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de consolidação e o tempo para tal nas osteotomias de cunha de abertura na tíbia, comparando o enxerto autólogo de ilíaco, ao plasma rico em plaquetas associado a medular óssea. Métodos: Foram estudados 25 pacientes submetidos a osteotomia tibial de cunha de abertura medial. Os pacientes foram divididos em dois grupos, de forma randomizada. O grupo controle formado por 14 pacientes submetidos à osteotomia com a utilização de enxerto autólogo do ilíaco, e o grupo de estudo formado por 11 pacientes submetidos à osteotomia com utilização de um composto de plasma rico em plaquetas e medular óssea. Resultados: Quanto à ocorrência de consolidação da osteotomia, as Introdução: A busca por um substituto ósseo que faça prescindível a obtenção de enxerto autólogo é uma necessidade do cirurgião ortopédico. O aspirado de medular óssea possui células tronco do sistema mesenquimal capazes de se diferenciarem em osteoblastos, sendo assim considerado um material osteogênico. O plasma rico em plaquetas possui os chamados fatores plaquetários de crescimento, que possuem a capacidade de promover e estimular a diferenciação de células tronco do sistema mesenquimal em osteoblastos, acelerando o processo de consolidação óssea. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de consolidação e o tempo para tal nas osteotomias de cunha de abertura na tíbia, comparando o enxerto autólogo de ilíaco, ao plasma rico em plaquetas associado a medular óssea. Métodos: Foram estudados 25 pacientes submetidos a osteotomia tibial de cunha de abertura medial. Os pacientes foram divididos em dois grupos, de forma randomizada. O grupo controle formado por 14 pacientes submetidos à osteotomia com a utilização de enxerto autólogo do ilíaco, e o grupo de estudo formado por 11 pacientes submetidos à osteotomia com utilização de um composto de plasma rico em plaquetas e medular óssea. Resultados: Quanto à ocorrência de consolidação da osteotomia, as porcentagens de consolidação foram de 100% no grupo Ilíaco e 91% no grupo PRP (p=0,440). Em relação ao tempo para consolidação não se observou diferença entre os grupos (p=0,129). Conclusão: Nas osteotomias proximais por cunha de adição medial a utilização do plasma rico em plaquetas associado ao aspirado de medular óssea foi efetiva no que se refere à ocorrência de consolidação e no tempo necessário para a ocorrência de tal evento, quando estudamos e comparamos este enxerto ao enxerto autólogo do ilíaco / Introduction: The search for a bone substitute that makes unnecessary the harvest of autologous bone graft is a necessity of the orthopaedic surgeon. Bone marrow aspirate is rich in mesenquimal stem cells. The bone marrow aspirate contain mesenquimal stem cells that can differenciate in osteoblasts, being considered an osteogenic material. Platelet rich plasma contain several growth factors that have the capacity to promote and stimulate the differenciation of mesenquimal stem cells in osteoblasts improving the bone healing process, in other words platelet rich plasma has osteoinductive property. Objective: The aim of this study was to compare the occurrence of consolidation and the time taken to achieve this in cases of opening wedge osteotomy of the tibia, between autologous iliac grafts and platelet rich plasma with bone marrow aspirate. Methods: Twenty-five patients who underwent opening wedge osteotomy were studied. They were randomly divided into two groups: a control group of 14 patients wich received autologous iliac grafts and a study group of 11 patients wich received a compound of platelet rich plasma and bone marrow aspirate. Results: The consolidation rates achieved were 100% in the iliac group and 91% in the platelet-rich plasma group (p = 0.440). There was no difference in the time taken to achieve consolidation between the groups (p = 0.129). Conclusion: The use of platelet rich plasma with bone marrow aspirate as a bone substitute was shown to be effective in achieving consolidation in tibial osteotomies and in the time necessary to achieve this when compared to autologous iliac graft .

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-01Bitstream added on 2014-06-13T20:08:37Z : No. of bitstreams: 1 pola_nm_me_araca_parcial.pdf: 170016 bytes, checksum: e13ec1e3d138f22d976c2b91751b1c20 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-03-16T11:30:07Z: pola_nm_me_araca_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-03-16T11:30:58Z : No. of bitstreams: 1 000619909.pdf: 461103 bytes, checksum: b87e4d11fd729dc2c792fbb094e8e02d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou, histomorfometricamente, o reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) criados cirurgicamente em calvárias de ratos e tratados com Plasma Rico em Plaquetas (PRP) derivado do sangue periférico (SP) ou do aspirado de medula óssea (AMO) associado ou não ao enxerto de osso autógeno (OA). 60 ratos foram divididos em 6 Grupos: Grupo C (controle), Grupo OA, Grupo PRP-sp, Grupo PRP-amo, Grupo OA/PRP-sp e Grupo OA/PRP-amo. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido somente com coágulo sangüíneo. No Grupo OA, o defeito foi preenchido com enxerto de OA particulado. Nos grupos PRP-sp e PRP-amo, os defeitos cirúrgicos foram preenchidos com PRP-sp e PRP-amo, respectivamente. Nos grupos OA/PRP-sp e OA/PRP-amo, os defeitos foram preenchidos com enxerto de OA particulado associado ao PRP-sp e ao PRP-amo, respectivamente. Todos os animais foram submetidos à eutanásia aos 30 dias pós-operatórios. A quantidade de osso neoformado foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Esses valores foram transformados em arcoseno para a análise estatística (ANOVA, Tukey, p<0,05). O Grupo C apresentou formação óssea significativamente menor (12,34 ± 2,51%) que os grupos OA (48,94 ± 3,91%), PRP-sp (31,48 ± 14,05%), PRP-amo (35,38 ± 17,19%), OA/PRP-sp (60,27 ± 9,12%) e OA/PRP-amo (44,19 ± 16,49%). A quantidade de formação óssea do Grupo OA/PRP-sp foi significativamente maior que a do Grupo PRP-sp. Dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que todos os tratamentos realizados potencializaram o reparo ósseo em DTC em calvárias de ratos. A associação enxerto de OA/PRP-sp demonstrou uma tendência de apresentar a maior AO / This study histomorphometrically evaluated the bone healing of critical-size defects (CSD) surgically created in rat calvaria and treated with Platelet-Rich Plasma (PRP) derived from either the peripheral blood (PB) or bone marrow aspirate (BMA) combined or not with autogenous bone (AB) grafts. 60 rats were divided into 6 groups: Group C (control), Group AB, Group PRP-pb, Group PRP-bma, Group AB/PRP-pb and Group AB/PRP-bma. A 5-mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled with blood clot only. In Group AB, the defect was filled with AB graft. In groups PRP-pb and PRP-bma, the defects were filled with PRP derived from PB and BMA, respectively. In groups AB/PRP-pb and AB/PRP-bma, the defects were filled with AB grafts combined with PRP-pb and PRP-bma, respectively. All animals were euthanized at 30 days post-operatively. Bone Area (BA) was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Percentage data were transformed into arccosine for statistical analysis (ANOVA, Tukey, p<0.05). Group C presented significantly less bone formation (12.34 ± 2.51%) than groups AB (48.94 ± 3.91%), PRP-pb (31.48 ± 14.05%), PRP-bma (35.38 ± 17.19%), AB/PRP-pb (60.27 ± 9.12%) and AB/PRP-bma (44.19 ± 16.49%). Bone formation in Group AB/PRP-pb was significantly greater than in Group PRP-pb. Within the limits of this study, it can be concluded that all treatments promoted bone formation in CSD in rat calvaria. The combination AB/PRP-pb demonstrated a trend to present the largest BA

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-27Bitstream added on 2014-06-13T19:57:15Z : No. of bitstreams: 1 esper_la_me_araca.pdf: 415604 bytes, checksum: 36bcb3441620df6465aef668552a719f (MD5) / Este estudo avaliou histomorfometricamente o processo de cicatrização em defeitos de fenestração periodontal, criados cirurgicamente em cães e tratados com Plasma Rico em Plaquetas (PRP) associado ou não ao uso de barreira de membrana. Defeitos de fenestração periodontal com 5 mm de diâmetro foram cirurgicamente criados nos caninos superiores de 12 cães. Os dentes foram divididos em 4 grupos: C (controle) - defeito preenchido somente com coágulo sangüíneo; M - defeito preenchido com coágulo sangüíneo e protegido com uma membrana de politetrafluoretileno expandido (PTFE-e) com reforço de titânio; PRP - defeito preenchido com PRP; PRP/M - defeito preenchido com PRP e protegido com uma membrana de PTFE-e com reforço de titânio. Os animais foram eutanasiados após 4 semanas. Medidas lineares e de área da cicatrização periodontal foram avaliadas e calculadas como porcentagem do defeito original. Os dados foram submetidos à análise estatística (análise de variância, p < 0,05). Nenhum espécime regenerou-se completamente com osso ou cemento. Formação de novo cemento foi significativamente maior nos Grupos PRP e PRP/M quando comparados ao Grupo C. Observou-se, também, significativa maior formação de novo cemento no Grupo PRP/M que no Grupo M. Dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que o PRP favoreceu a formação de novo cemento. A Regeneração Tecidual Guiada (RTG) não proporcionou efeitos adicionais ao uso do PRP no tratamento de defeitos de fenestração periodontal em cães. / This study histomorphometrically analyzed the healing of periodontal fenestration defects surgically created in dogs and treated with Platelet-Rich Plasma (PRP) with or without a barrier membrane. A 5 mm diameter periodontal fenestration defect was made in each upper canine of 12 dogs. The teeth were divided into 4 groups: C (control) - defect filled with blood clot only; M - defect filled with blood clot and covered by a titanium-reinforced expanded polytetrafluoroethylene membrane (ePTFE); PRP - defect filled with PRP; PRP/M - defect filled with PRP and covered by a titanium-reinforced ePTFE. All animals were euthanized at 4 weeks post-operative. Linear and area measurements of periodontal healing were evaluated and calculated as a percentage of the original defect. Data were statistically analyzed (analysis of variance, p < 0.05). No defect completely regenerated with either bone or cementum. Cementum formation was significantly greater in groups PRP and PRP/M when both groups were compared to Group C. A significant greater cementum formation was also observed in Group PRP/M than in Group M. Within the limits of this study, it can be concluded that the PRP favored cementum formation. Guided Tissue Regeneration (GTR) did not promote any additional benefit to the use of PRP in the treatment of periodontal fenestration defects in dogs.

Platelet-rich plasma (PRP) is an autogenous product obtained from whole blood, through one or two centrifugations process. The resulting small volume of plasma contains a high platelets numbers and their growth factors. The aim of this study was to evaluate different protocols to obtain PRP using the manual method according to their capacity to concentrate platelets, leukocytes and erythrocytes contamination and the correlation between platelet count and growth factor TGF-β1 levels in the PRP samples. Ten healthy horses with mean age of 7 years (± 2.39), weighing on average 500 kg (± 67.1) were used to evaluate seven protocols to obtain PRP. The protocols tested varied according to speed and time used on both centrifugations. The variables analyzed on the PRP samples were: platelet concentration, leukocytes and erythrocytes, TGF-β1 levels quantified by ELISA. No significant differences between protocols were observed regarding the ability to concentrate platelet and the levels of TGF-β1. However, protocol PI showed significantly more erythrocyte and leukocyte contamination in PRP samples than the other protocols, being considered an inadequate protocol for the volume of blood used in this experiment. The remaining protocols are suitable for extracting PRP. Although the PRP is an option of therapy in equine medicine, many gaps regarding their compliance must still be met. / O plasma rico em plaquetas (PRP) é obtido a partir do sangue total, através de uma ou duas centrifugações, resultando em um pequeno volume de plasma com elevado número de plaquetas contendo fatores de crescimento. O objetivo do presente estudo foi avaliar diferentes protocolos para obtenção de PRP através do método manual quanto à capacidade de concentração das plaquetas, contaminação com leucócitos e hemácias, e correlacionar a concentração plaquetária com os níveis do fator de crescimento TGF-β1 nas amostras de PRP. Dez equinos, sadios, com idade média de 7 anos (±2,39), pesando em média 500kg (± 67,1) foram usados para avaliar sete protocolos de obtenção de PRP. Os protocolos testados variaram quanto à velocidade e tempo nas duas centrifugações. As variáveis analisadas nas amostras de PRP foram: concentração de plaquetas, presença de leucócitos e hemácias, e níveis de TGF-β1 quantificados pelo teste ELISA. Os resultados deste estudo não demonstraram diferenças significativas entre os protocolos testados quanto à capacidade de concentração plaquetária e quanto aos níveis de TGF- β1. Entretanto, foram observadas diferenças significavas entre o protocolo I aos demais protocolos devido a este apresentar maior número de hemácias e leucócitos nas amostras de PRP, sendo por isto considerado inadequado para o volume de sangue utilizado. Os demais protocolos podem ser utilizados para obtenção de PRP de sangue eqüino. Apesar do PRP ser uma opção de terapia na medicina equina, muitas lacunas relativas ao seu respeito ainda devem ser preenchidas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 664829 bytes, checksum: ca64b1b21971df0322f503f7cd45ce7b (MD5) Previous issue date: 2007-05-04 / Platelet rich plasma (PRP) is composed by polypeptides that forms biologic mediators responsible for the regulation of events influencing cell division, matrix synthesis and tissue differentiation. The present study evaluated autogenous PRP s influence on the reparation process of four bone defects made on eighteen rabbit s skull, associated or not to autogenous bone graft (EOE) by mesoscopic, radiographic and microscopic evaluations. Defect I received PRP only; defect II received 3mg of EOE only; defect III received EOE associated to PRP; defect IV was left to heal naturally, serving as control. After each surgery the animals were randomly divided into three groups of same number that were euthanized at 30, 60 and 90 days. In the mesoscopic evaluation bone ingrowth started from the defect s borders to the center and from the bottom to the surface for all observation times on the control (VI) and PRP only (I) groups. The groups treated with EOE only (II) and EOE associated to PRP (III) new bone was observed in the center of the defects. Radiographic analysis showed greater central radiopacity for groups treated with EOE only (II) and EOE associated to PRP (III) at all observation times. At 90 days all defects from groups II and III showed opacity similar to the host bone. Microscopically in the group treated with EOE associated to PRP (III) at 30 days the graft was indistinguishable from new bone present on the border of the defect, associated to a moderate quantity of a very vascularized and cellular fibrous connective tissue. This tissue showed an extracelular eosinophilic amorphous foamy material, associated to an inflammatory process constituted mainly by lymphocytes and in less number by macrophages and multinucleated giant cells that may have negatively influenced early bone formation. At 60 and 90 days occasional spots of lymphocytic inflammation were observed in some animals, probably due to the gel absorption. Both treatments, PRP associated or not to EOE, were similar for the bone ingrowth at the final time of observation; the graft used alone determined early bone reparation and thromboplastine used for the platelets gel formation incited a foreign body-like reaction that acted negatively on the initial fase of reparation. / O plasma rico em plaquetas (PRP) é composto por um grupo de polipeptídios que formam mediadores biológicos responsáveis pela regulação de eventos celulares. O presente estudo avaliou a influência do PRP autógeno, associado ou não ao auto-enxerto ósseo esponjoso (EOE), na reparação de quatro falhas criadas no crânio de 18 coelhos, por meio de exames mesoscópicos, radiográficos e microscópicos. A falha I foi preenchida com o PRP; a II com 3mg de EOE; a III com 3mg de EOE associado ao PRP e a falha IV não foi preenchida, servindo como controle. Após as cirurgias, os animais foram separados aleatoriamente em três grupos experimentais, e eutanasiados aos 30, 60 e 90 dias. Na avaliação mesoscópica, independentemente do período de observação, o preenchimento ósseo na falha controle e naquelas tratadas com PRP, iniciou-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. Já nas falhas tratadas com EOE e com enxerto associado ao PRP foi notado crescimento ósseo na porção central das falhas. Na análise radiográfica, foi observada maior radiopacidade no interior das falhas dos animais tratados com EOE e naquelas tratadas com enxerto associado ao PRP, em todos os tempos. Aos 90 dias, todas as falhas dos animais tratados com EOE e enxerto associado ao PRP manifestaram opacidade semelhante à do osso receptor. Microscopicamente, aos 30 dias, na falha tratada com EOE associado ao PRP, os fragmentos do enxerto estavam indistintos do tecido ósseo neoformado presente em toda borda do defeito, associado à moderada quantidade de tecido conjuntivo fibroso muito vascularizado e celularizado. Este tecido apresentou material amorfo, eosinofílico e extracelular, junto a um processo inflamatório, constituído predominantemente por linfócitos e, em menor número, por macrófagos e células gigantes multinucleadas, e que podem ter influenciado negativamente na precocidade de formação óssea. Aos 60 e 90 dias, focos ocasionais de inflamação linfocitária foram observados em alguns animais, provavelmente pela absorção do gel. O comportamento dos dois tratamentos, PRP associado ou não ao EOE, em relação a preenchimento ósseo, foi semelhante ao final do período de observação; o enxerto, utilizado de forma isolada determinou precocidade de reparação óssea e a tromboplastina, utilizada para formação do gel de plaquetas, incitou uma reação semelhante a do tipo corpoestranho, que atuou negativamente na fase inicial de reparação.

Submitted by MILAGROS DEL VALLE EL ABRAS ANKHA (doc_elabras@hotmail.com) on 2018-04-19T00:51:40Z No. of bitstreams: 1 Milagros Abras Ankha-tese final 2018 com ficha catolográfica.pdf: 3661703 bytes, checksum: 64be3370b9106d7afd83981f08a49a3e (MD5) / Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2018-04-25T22:49:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 elabrasankha_mdv_dr_sjc.pdf: 3661703 bytes, checksum: 64be3370b9106d7afd83981f08a49a3e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-25T22:49:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 elabrasankha_mdv_dr_sjc.pdf: 3661703 bytes, checksum: 64be3370b9106d7afd83981f08a49a3e (MD5) Previous issue date: 2018-02-07 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos anteriores sugerem que o ácido hialurônico (AH) e o plasma rico em plaquetas (PRP) têm potencial para melhorar o processo de cicatrização da cartilagem e diminuir a progressão da osteoartrite. No entanto, poucas pesquisas avaliam seu efeito sinérgico. Este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito do AH associado ao PRP na regeneração do disco articular e da superfície osteocondral da articulação temporomandibular (ATM). A osteoartrite será induzida por meio da perfuração bilateral do disco articular de coelhos. Quarenta coelhos foram divididos em 4 grupos, conforme o procedimento: sem lesão(SL)/sem tratamento(ST) (n=4), lesão(L)/sem tratamento (ST) (n=12), L/AH (n=12), L/AH+PRP (n=12). Quatro coelhos do grupo SL/ST foram eutanasiados no tempo zero. Após 8 e 24 semanas da perfuração dos discos articulares, seis coelhos dos grupos L/ST, L/AH e L/AH+PRP foram eutanasiados. O disco articular foi avaliado radiograficamente para visualizar possíveis calcificações. Foi realizada análise macroscópica e histológica do disco e do côndilo mandibular. Foi utilizada a análise histoquímica por Picrosirius Red para avaliar a presença de colágeno I e III e a análise imuno-histoquímica do colágeno I e II. As porcentagens de marcação obtidas nas análises histoquímica e imuno-histoquímica foram avaliadas estatisticamente, adotando-se o nível de significância de 5%. Macroscopicamente, o disco articular nos grupos tratados apresentou, na maioria dos espécimes, preenchimento parcial ou total do defeito criado. Os côndilos apresentaram, na maioria dos espécimes, irregularidade da superfície osteocondral. Radiograficamente, após 24 semanas da perfuração do disco, focos de radiopacidade foram observados nos grupos não tratados e em alguns dos espécimes dos tratados. Na análise histológica foi confirmada a presença de material mineralizado, próximo e distante da perfuração, além de diminuição da celularidade e fibrose. Na análise histoquímica, a porcentagem de colágeno I prevaleceu com relação ao colágeno III, tanto no disco quanto no côndilo, independentemente do grupo e período avaliado. Entretanto, no disco não houve diferença estatística significativa. No côndilo, L/AH e L/AH+PRP nos períodos de 8 e 24 semanas apresentaram uma porcentagem de colágeno I significativamente maior que L/ST (p<0,05). A expressão imuno-histoquímica de colágeno I e II no disco não apresentou diferença estatística significante. No côndilo, a expressão do colágeno I apresentou diferença significativa entre os 9 grupos (p=0,00) e os períodos (p=0,05). O grupo L/AH+PRP de 24 semanas apresentou maior porcentagem de marcação positiva para colágeno I, que era diferente dos grupos SL/ST e L/ST, porém sem diferença estatística com relação ao L/AH. Em conclusão, os tratamentos da osteoartrite com AH ou PRP associado ao AH mostram resultados promissores, ajudando na redução do defeito criado no disco, porém, sem resultados satisfatórios como protetores da superfície osteocondral, na presença de perfuração discal. / Previous studies have suggested that hyaluronic acid (HA) and platelet-rich plasma (PRP) have the potential to improve the healing process of cartilage and decrease the progression of osteoarthritis. However, few studies have evaluated their synergistic effect. This study aims at evaluating the effect of HA associated with PRP on the regeneration of the articular disc and the osteochondral surface of the temporomandibular joint (TMJ). Osteoarthritis was induced by means of bilateral perforation of the articular disc of rabbits. Forty rabbits were divided into 4 groups, according to the procedure: without lesion (WL)/without treatment (WT) (n = 4), lesion (L)/without treatment (WT) (n = 12), L/HA (n = 12), L/ HA+PRP (n = 12). Four rabbits from group G1 were euthanized at time zero. After 8 and 24 weeks of joint disc perforation, six rabbits from groups L/WT, L/HA and L/HA+PRP were euthanized. The articular disc was evaluated radiographically to visualize possible calcifications. Macroscopic and histological analysis of the disc and the mandibular condyle were performed. The histochemical analysis by Picrosirius Red was used to evaluate the presence of collagen I and III, as well as the immunohistochemical analysis was used to evaluate the expression of collagen I and II. The percentages of staining obtained from the histochemical and immunohistochemical analysis were statistically evaluated, adopting the significance level of 5%. Macroscopically, the articular disc in the treated groups presented in most of the specimens partial or total filling of the defect created. The condyles presented, in most of the specimens, degeneration of the osteochondral surface. Radiographically, after 24 weeks of disc perforation, foci of radiopacity were observed in the untreated and in some of the specimens of treated groups. Histological analysis confirmed the presence of mineralized material, close and distant to perforation, as well as decreased cellularity and fibrosis. In the histochemical analysis, the percentage of collagen I prevailed in both disc and condyle, independently of the group and period evaluated. However, in the disc there was not statistical difference. In the condyle, L/HA and L/HA+PRP in the periods of 8 and 24 weeks presented a percentage of collagen I significantly higher than L/WT (p <0.05). The expression of collagen I and II in the disc did not present significant statistical difference. In the condyle, the expression of collagen I was statistically different between the groups (p = 0.00) and the periods (p = 0.05). The 24-week L/HA+PRP group had a higher percentage of positive marking for collagen I, which was different from the WL/WT and L/WT groups, but with no statistical difference with respect to L/HA. In conclusion, the treatment of osteoarthritis with HA or PRP associated with HA shows promising results, helping to reduce the defect created in the disc, but without satisfactory results as protectors of the osteochondral surface, in the presence of perforation of the disc. / 2016/23446-2

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Coorientador: Valdir Gouveia Garcia / Coorientador: Edilson Ervolino / Banca: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Michel Reis Messora / Resumo: Este estudo avaliou a influência do aspirado de medula óssea (AMO) e do plasma rico em plaquetas (PRP) associados ou não à terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) no reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 96 ratos foram divididos em 6 grupos: C, PRP, AMO, LLLT, PRP/LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. Nos grupos PRP e AMO, o defeito foi preenchido com PRP e AMO, respectivamente. No grupo LLLT, o defeito recebeu aplicação da LLLT (InGaAlP), foi preenchido com coágulo sanguíneo e irradiado novamente. Nos grupos PRP/LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu aplicação da LLLT, foi preenchido com PRP ou AMO, respectivamente e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 10 ou 30 dias pós-operatórios. Foram realizadas análises histomorfométrica e imunoistoquímica. A área de osso neformado (AON) foi calculada como porcentagem da área total do defeito original. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para detecção do antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), proteínas morfogenéticas ósseas 2/4 (BMP-2/4) e osteocalcina (OCN). As células PCNA-positivas, BMP-2/4-positivas e OCN-positivas foram quantificadas. Os dados foram analisados estatisticamente. Aos 10 dias pós-operatórios, o grupo AMO apresentou AON significativamente maior que o grupo C. Aos 30 dias pós-operatórios, o grupo AMO apr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the influence of bone marrow aspirate (BMA) and platelet-rich plasma (PRP) combined or not with low-level laser therapy (LLLT) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSD) in rat calvaria. 96 rats were divided into 6 groups: C, PRP, BMA, LLLT, PRP/LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In groups PRP and BMA, the defects were filled with PRP and BMA, respectively. In Group LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot and irradiated again. In groups PRP/LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with PRP or BMA, respectively, and irradiated again. Animals were euthanized at either 10 or 30 days postoperative. Histomorphometric and immunohistochemical analyses were performed. Newly formed bone area (NFBA) was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), bone morphogenetic protein 2/4 (BMP-2/4) and osteocalcin (OCN) immunohistochemical staining were performed. PCNA-positive, BMP-2/4-positive and OCNpositive cells were quantified. Data were statistically analyzed. At 10 days postoperative, Group BMA presented significantly greater NFBA than control. At 30 days postoperative, Group BMA presented significantly greater NFBA than control and Group LLLT, as well as significantly higher numbers of B... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O plasma rico em plaquetas (PRP) é utilizado na medicina equina para o tratamento de lesões ósseas, articulares, tendíneas e ligamentares. No entanto o PRP deve ser preparado no momento de cada aplicação, pois seu tempo máximo de utilização após o preparo é de apenas oito horas. O objetivo deste estudo foi avaliar o resfriamento e criopreservação como métodos de armazenamento do PRP equino utilizando dois crioprotetores: dimetil sulfóxido (DMSO) e trealose, na tentativa de manter a viabilidade plaquetária após o armazenamento a baixas temperaturas. Duas amostras de PRP foram preparadas a partir da centrifugação do sangue de seis pôneis saudáveis e foram destinadas à criopreservação a -196º C ou ao resfriamento a 4º C. Cada amostra de PRP preparada foi dividida em quatro alíquotas: fresca, com DMSO, com trealose ou sem crioprotetor. As amostras frescas foram avaliadas quanto à contagem plaquetária, determinação do volume plaquetário médio (VPM), concentração plaquetária em relação ao sangue total e quantificação do fator de crescimento de transformação beta 1 (TGF-β1). As amostras criopreservadas e resfriadas ficaram armazenadas por 14 dias e foram então submetidas às mesmas análises laboratoriais. O número de plaquetas e concentração plaquetária foram similares entre as amostras frescas e resfriadas com ou sem crioprotetor, mas foram superiores nas amostras frescas em relação às amostras criopreservadas. Observou-se aumento do VPM em todas as amostras armazenadas, indicando que as plaquetas sofreram lesões durante o armazenamento. A liberação de TGF-β1 foi superior no PRP fresco em relação ao PRP resfriado ou criopreservado, não havendo diferença entre as amostras que continham ou não crioprotetores. A adição dos crioprotetores DMSO e trealose não impediu as lesões plaquetárias de armazenamento. Por outro lado, tanto as amostras resfriadas quanto as criopreservadas liberaram quantidades significativas de TGF-β1. / Platelet rich plasma (PRP) is used in equine medicine for treatment of bone, joint, tendon and ligament injuries. However the PRP must be prepared at the time of each application, since its maximum time of use after the preparation is only eight hours. The objective of this study was to evaluate cooling and cryopreservation of equine PRP as storage methods using two cryoprotectants: dimethyl sulfoxide (DMSO) and trehalose, in an attempt to maintain platelet viability after storage at low temperatures. Two PRP samples were prepared from the blood centrifugation of six healthy ponies and were intended for cryopreservation at -196 ° C or cooling at 4 ° C. Each prepared PRP sample was divided into four aliquots: fresh, DMSO, trehalose or without cryoprotectant. The fresh samples were evaluated for platelet count, determination of mean platelet volume (MVP), platelet concentration in relation to whole blood and quantification of transforming growth factor beta 1 (TGF-β1). The cryopreserved and cooled samples were stored for 14 days and then submitted to the same laboratory tests. The number of platelets and platelet concentrations were similar between fresh and cooled samples with or without cryoprotectant, but were higher in fresh samples than in cryopreserved samples. An increase in MPV was observed in all stored samples, indicating that platelets suffered lesions during storage. The release of TGF-β1 was higher in fresh PRP than in cold or cryopreserved PRP, with no difference between samples containing or not cryoprotectants. The addition of DMSO and trehalose cryoprotectants did not prevent platelet storage lesions. On the other hand, both the cooled and cryopreserved samples released significant amounts of TGF-β1.

O objetivo da presente pesquisa foi investigar o ganho e a qualidade óssea promovidos com a utilização da cerâmica bifásica HA/TCPp porosa comparativamente ao enxerto ósseo autógeno e ao Bio-Oss® associados ou não ao plasma rico em plaquetas (PRP), em cirurgias de levantamento de seio maxilar em coelhos. Em 54 coelhos foram realizados levantamento bilateral dos seios, sendo um dos seios preenchido com enxerto/biomaterial e sangue (SG) e o contralateral com o enxerto/biomaterial e PRP, e os grupos de tratamento designados de HA/TCPp/SG, HA/TCPp/PRP, AUT/SG, AUT/PRP, Bio-Oss/SG e Bio-Oss/PRP. Após os períodos de 30, 60 e 180 dias (n=18/período), as peças histológicas foram coletadas e fixadas em formol a 10% tamponado. Em seguida, imagens microtomográficas foram obtidas e as peças processadas histologicamente. O volume e altura do seio maxilar elevado foram determinados nas imagens microtomográficas e o percentual e volume do biomaterial e tecido ósseo avaliados nos cortes histológicos pela técnica morfométrica de volumetria de pontos. Os dados foram comparados pela ANOVA a três critérios e as médias contrastadas pelo teste de Tukey, com nível de significância de 5%. O volume e altura do seio maxilar elevado se mantiveram estáveis nos grupos Bio-Oss e HA/TCP, com valores médios de, respectivamente, 154,9mm3 e 5,6mm entre 30 e 180 dias, enquanto que, no grupo AUT essas mesmas dimensões reduziram, respectivamente, 33,3% e 21,7%. O enxerto autógeno sofreu rápida reabsorção e promoveu concomitantemente intensa neoformação/remodelação óssea até os 60 dias. Entre 60 e 180 dias o volume ósseo ganho não se manteve, reduzindo 52,5%. A associação do enxerto AUT com PRP acelerou o processo de neoformação/remodelação óssea e a reabsorção osteoclástica das partículas enxertadas. Já o volume do Bio-Oss® e HA/TCP, praticamente não se modificou em todo período e a formação óssea ocorreu nos espaços entre as partículas, ocupando um volume em média de 42,85mm3 aos 60 dias, que se manteve até os 180 dias. A adição do PRP aos biomateriais Bio-Oss® e HA/TCPp não promoveu alterações na quantidade de tecido ósseo neoformado, porém acelerou o seu processo de maturação, em relação aos grupos associados com SG. Os três materiais aqui usados no levantamento de seio maxilar, permitiram uma expressiva formação óssea, porém o volume ganho se manteve estável nos grupos HA/TCP e Bio-Oss, mas não no grupo AUT, onde esse volume reduziu drasticamente devido aceleração na remodelação óssea, com predomínio da reabsorção osteoclástica aliada à pressão sinusal. Conclui-se que o ganho ósseo no levantamento de seio maxilar com o HA/TCPp ou Bio-Oss mantémse estável porque oferece melhor resistência contra a pressão sinusal e a repneumatização em relação ao obtido com enxerto autógeno. A associação do PRP ao enxerto autógeno acelera o processo de formação/remodelação óssea, porém a sua associação ao HA/TCPp ou Bio-Oss não influencia no ganho final de volume ósseo, mas aumenta a velocidade de sua maturação. / This study investigated the bone gain and quality achieved by utilization of biphasic porous ceramic HA/TCPp compared to autogenous bone graft and Bio-Oss® associated or not with platelet-rich plasma (PRP), in maxillary sinus lift surgeries in rabbits. Bilateral sinus lift was performed in 54 rabbits, being one side filled with graft/biomaterial and blood (SG) and the contralateral side was filled with graft/biomaterial and PRP, and the treatment groups were designed as HA/TCPp/SG, HA/TCPp/PRP, AUT/SG, AUT/PRP, Bio-Oss/SG and Bio-Oss/PRP. After periods of 30, 60 and 180 days (n=18/period), the histological specimens were collected and fixed in buffered 10% formalin. Following, microtomographic images were obtained and the specimens were histologically processed. The volume and height of the lifted maxillary sinus were determined on the microtomographic images, and the percentage and volume of graft/biomaterial and bone tissue were morphometrically evaluated on the histological sections by point counting volumetry. Data were compared by threeway ANOVA and the means were compared by the Tukey test, at significance level of 5%. The volume and height of the lifted maxillary sinus were stable in the groups Bio- Oss and HA/TCP, with mean values of 154.9mm3 and 5.6mm between 30 and 180 days respectively, while in the group AUT the same dimensions were reduced in 33.3% and 21.7%, respectively. The autogenous graft exhibited fast resorption with concomitant intense new bone formation and remodeling up to 60 days. Between 60 and 180 days, the increase in bone volume was not maintained, reducing in 52.5%. The association of AUT graft with PRP accelerated the new bone formation/remodeling process and the osteoclastic resorption of grafted particles. Conversely, the volume of Bio-Oss® and HA/TCP was nearly unchanged throughout the period and bone formation occurred in the spaces between particles, filling a mean volume of 42.85mm3 at 60 days, which was maintained up to 180 days. The addition of PRP to the biomaterials Bio-Oss® and HA/TCPp did not promote changes in the quantity of newly formed bone, yet accelerated its maturation in relation to groups associated with SG. The three materials presently used for maxillary sinus lift allowed significant bone formation, yet the volume gain was stable in the groups HA/TCP and Bio-Oss but not in the group AUT, in which this volume was dramatically reduced due to the accelerated bone remodeling, with predominance of osteoclastic resorption associated with sinus pressure. It was concluded that, the bone gain in maxillary sinus lift with HA/TCPp or Bio-Oss remains stable because it offers better strength against the sinus pressure and pneumatization compared to that obtained with autograft. The association of PRP with the autogenous graft accelerates the process of bone formation/remodeling, yet its association with HA/TCPp or Bio-Oss does not influence the final bone volume gain, but increases the rate of bone maturation.

O tratamento tópico de feridas visa favorecer um processo de cicatrização eficaz, rápido e seguro. Como uma das opções, o Plasma Rico em Plaquetas – PRP - um concentrado de plaquetas obtido por meio de centrifugação sanguínea ou aférese, vem sendo também utilizado no tratamento de feridas por conter os fatores de crescimento plaquetários. Visto que se trata de uma terapia inovadora, este estudo objetivou buscar as evidências sobre o seu uso na terapia tópica de feridas crônicas de perna. Para tanto, realizou-se revisão sistemática de literatura, seguindo-se as etapas preconizadas pela Colaboração Cochrane. Os estudos foram levantados até 2006, por meio dos descritores platelet rich plasma, platelet derived growth factor, platelet gel, platelet releasate, platelet lysate, CT-102 activated supernatant, wound healing, chronic wound, foot ulcer, diabetic foot, e varicose ulcer, utilizando diferentes combinações, conforme a base de dados consultada (Cochrane, PubMed, Lilacs, Embase e Cinahal). Para a análise da validade interna dos estudos, empregaram-se: a Escala de Jadad, Escala de Avaliação do Grau de Recomendação e Evidência e Escala de Avaliação do Controle das Variáveis. De 56 estudos pré-selecionados, chegou-se à amostra de 18 ensaios clínicos, indexados, principalmente, no PubMed/ Medline (17 / 94,5%), originários dos EUA (12 / 66,6%) e publicados em língua inglesa. Desses, sete (39%) eram ensaios clínicos randomizados, que obtiveram forte recomendação (A) e nível de evidência alto. A partir das metanálises desses ensaios randomizados, em diferentes combinações, os resultados mostraram que o PRP favorece o processo de cicatrização (IC95% 1,84 - 7,41), principalmente em úlceras diabéticas (IC95% 2,94 - 20,31), e quando utilizado como CT-102 (IC95% 2,70-41,40). Concluindo, esta revisão sistemática e metanálise mostram que há evidências científicas sobre os resultados favoráveis do uso do PRP em feridas crônicas de perna, principalmente as de etiologia diabética / The wound topical treatment stimulates an effective, fast and safe wound healing. The platelet rich plasma (PRP) – a concentrated of platelets obtained from centrifugation or single apheresis, has been used as the treatment of wounds because it contains platelet derived growth factor. Being a new therapy, the aim of this study is to show some evidence about the effectiveness of PRP on the healing of chronic wound leg. To this test, a systematic review was conducted, as the recommendation of the Cochrane Library. The studies were screened until 2006 using some key words: platelet rich plasma, platelet derived growth factor, platelet gel, platelet releasate, platelet lysate, CT-102 activated supernatant, wound healing, chronic wound, foot ulcer, diabetic foot, and varicose ulcer; with different combinations, according to data base (Cochrane, PubMed, Lilacs, Embase e Cinahal). From 56 studies, 18 were clinical trials, specially found in PubMed (17 / 94,5%), originated in USA (12 / 66,6%) and published in English. Seven (39%) were clinical trials randomized , classified as a strong recommendation (A) with high evidence level. The meta-analysis of these randomized trials, shows the PRP promotion in wound healing (CI 95% 1,84-7,41), mainly in diabetic ulcer (CI 95% 2,70-41,40). To sum up, this study provides a scientific evidence on repair of chronic wound leg, mainly diabetic ulcer, using PRP