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Obtenção, caracterização e aplicação de hidrogéis a base de polissacarídeos

SOARES, Paulo Antônio Galindo 21 August 2015 (has links)
Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-26T19:36:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Paulo Antônio Galindo Soares.pdf: 13877147 bytes, checksum: 054deb774fd3b5c19eb287cdb6ac701f (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-30T20:35:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Paulo Antônio Galindo Soares.pdf: 13877147 bytes, checksum: 054deb774fd3b5c19eb287cdb6ac701f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-30T20:35:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Paulo Antônio Galindo Soares.pdf: 13877147 bytes, checksum: 054deb774fd3b5c19eb287cdb6ac701f (MD5) Previous issue date: 2015-08-21 / CAPES / Hidrogéis são considerados uma rede polimérica tridimensional capaz de absorver grandes quantidades de água ou fluídos biológicos e que podem ser aplicados para a manutenção de células, nutrientes, drogas ou proteínas, bem como matriz de suporte para crescimento celular e regeneração de tecidos. Neste trabalho foram desenvolvidos hidrogéis baseados em polissacarídeos naturais, que foram caracterizados e aplicados como cicatrizantes de lesões cutâneas em ratos. Primeiro foi desenvolvido um hidrogel baseado nas misturas de policaju/quitosana nas proporções de 1:4 e 2:3 (p/p), cuja matriz foi formada seguindo ciclos de secagem/hidratação em valores de pH específicos. Para a caracterização destas formulações, foram empregadas técnicas de espalhamento dinâmico de luz, espectroscopia de infravermelho, microscopia eletrônica de varredura e reologia. Além disso, para o hidrogel de policaju/quitosana 1:4, foi avaliado o seu impacto na cicatrização de lesões cutâneas em ratos (Registro de Patente nº BR 10 2014 014009-3), cujos resultados demonstraram que este hidrogel contribuiu para um processo de cura e modulação da inflamação mais eficiente. Um Segundo hidrogel foi preparado com 1,7% (p/v) de galactomanana (extraída de sementes de Cassia grandis) e diferentes concentrações de κ-carragenana (0,3, 0,4 e 0,5% p/v), CaCl2 (0,0, 0,1 e 0,2 M) e pH (5,0, 5,5 e 6,0), utilizando um planejamento fatorial completo 23 baseado em parâmetros reológicos. A melhor formulação foi obtida com 1,7% (p/v) de galactomanana e 0,5% (p/v) de κ-carragenana, contendo 0,2 M de CaCl2 à pH 5,0. Ressonância magnética nuclear e microscopia eletrônica de varredura foram utilizadas a fim de caracterizar esta formulação do hidrogel. Além disso, um estudo de prateleira foi conduzido ao longo de um período de 90 dias de estocagem a 4 ºC, avaliando pH, cor, contaminação microbiana e reologia. A capacidade cicatrizante deste hidrogel também foi avaliada como curativo tópico, e assim como para o hidrogel de policaju/quitosana, o hidrogel de galactomanana/κ-carragenana também contribuiu positivamente para o processo cicatricial; além disso, a incorporação de bromelina na matriz deste hidrogel estimulou e acelerou este processo. Em conclusão, os hidrogéis de policaju/quitosana e galactomanana/κ-carragenana podem ser uma via promissora no campo de biomateriais e aplicações biomédicas. / Hydrogels are three-dimensional polymeric networks capable of absorbing large quantities of water or biological fluids and can be used to preserve cells, nutrients, drugs or proteins, as well as scaffold matrices for tissue engineering and healing process. In this work we have developed, characterized and applied as wound dressing, hydrogels based on natural polysaccharides. First we developed hydrogels based on mixtures of policaju/chitosan at weight ratios of 1:4 and 2:3 (p/p), which matrices were formed following rounds of drying/hydration cycles at a specific pH value. For the characterization of these formulations, dynamic light scattering, infrared spectroscopy, scanning electron microscopy and rheology techniques were employed. Futhermore, for the 1:4 policaju/chitosan hydrogel, was evaluated the impact of the hydrogel dressing at the wound healing of the cutaneous scars in rats (Patent register nº BR 10 2014 01409-3), which results demonstrated that this hydrogel contributed to more efficient healing process and modulation of the inflammation. A second hydrogel was prepared with 1.7 % (w/v) galactomannan (from Cassia grandis seeds) and different concentrations of κ-carrageenan (0.3, 0.4 and 0.5% w/v), CaCl2 (0.0, 0.1 and 0.2 M) and pH (5.0, 5.5 and 6.0), using a 23 full factorial design based on rheological parameters. The best formulation was obtained with 1.7% (w/v) galactomannan and 0.5% (w/v) κ-carrageenan, containing 0.2 M CaCl2 at pH 5.0. Nuclear magnetic resonance and scanning electron microscopy where used in order to characterize this hydrogel formulation. Further, a shelf life study was carried out with this formulation along 90 days-period of storage at 4 ºC, evaluating pH, color, microbial contamination and rheology. The wound healing capacity of this hydrogel was also evaluated as a topical dressing, and as was to the 1:4 policaju/chitosan hydrogel, the galactomannan/κ-carrageenan also contributed for the wound healing process; further, the incorporation of bromelain in the hydrogel matrix stimulating and accelerating this processes. In conclusion, the policaju/chitosan and galactomannan/κ-carrageenan hydrogels can be a promising road to biomaterials fabrication and biomedical applications.
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Contribuição ao estudo da estrutura quimica do exopolissacarideo PS-32 obtido a partir de fermentação aerobica da bacteria Beijerinckia sp

Mariuzzo, Daniela Martins 09 October 1996 (has links)
Orientador: Adilma Regina Pippa Scamparini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T18:15:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariuzzo_DanielaMartins_M.pdf: 4074331 bytes, checksum: 568b72b7e9f810d9ae2cfa3163a7166f (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A determinação da estrutura química de polissacarídeos tem sido objeto constante de estudo em todo o mundo. Através da determinação das características estruturais de um polissacarídeo é possível definir qual é o seu campo de aplicação, quais as suas possíveis funções em determinados produtos, e qual a sua atuação no comportamento reológico de uma substância. Neste trabalho foram determinadas as características estruturais do polissacarídeo PS-32, obtido da fermentação aeróbica da bactéria Beijerinckia sp (cepa 32) isolada do solo cultivado com cana de açúcar em Ribeirão Preto, S.P, por VENDRUSCOLO, 1995. As bactérias do gênero Beijerinckia sp são encontradas frequentemente em solos de clima tropical e se apresentam na forma de bastonetes Gram-negativos, sendo aeróbicas, catalase-positivas e fixadoras de nitrogênio molecular. Para a produção do biopolímero PS-32 foi utilizado um meio de fermentação contendo 5% de sacarose como fonte de carbono, 0,05% de MgS04, 0,01% de K2HPO4, 0,05% de KH2PO4 e 0,5% de triptose que foi inoculado com 5% de meio YM contendo a bactéria Beijerinckia sp. O caldo de fermentação permaneceu por 72 horas sendo aerado com agitação de 200 rpm a 25°C. Após este período, o caldo de fermentação foi centrifugado para retirada das células e o polissacarídeo foi recuperado por precipitação com etanol, seco em estufa a vácuo e triturado em moinho de bolas, rendendo de 7 a 9g de polissacarídeo/L de caldo. Após este estágio, a proteína presente nas soluções do polissacarídeo foi retirada por hidrólise com papaína e as soluções sofreram sucessivas diálises contra água destilada, até purificação total. As caracteríticas da estrutura do polissacarídeo PS-32 foram estudadas utilizando técnicas cromatográficas acopladas ao espectrômetro de massa e ressonância magnética nuclear de 1H e 13C. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The determination of polysaccharides chemical structure has been studied all over the world. Through this determination it is possible to define where the polysaccharide could be employed, which its possible functions in différents products are and how it will affect the rheological behaviour of a substance. In this work the structural characteristics of PS-32 polysaccharide obtained from aerobic fermentation of Beijerinckia sp (strain 32) bacterium, isolated from soil cultivated with sugar cane in Ribeirão Preto, S.P. by VENDRUSCOLO, 1995 were studied. Beijerinckia sp bacteria are often found in tropical climate and show the following characteristics: gram-negative rods, aerobic, catalase-positive and chemoorganotrophic. For PS-32 polysaccharide production it was used a medium containing sucrose 5%, MgSO4, 0.05%, K2HPO4, 0.01%, KH2PO4 0.05% and tryptose 0.5%. This media was inoculated with 5% of YM browth containing Beijerinckia sp. The fermentation browth was kept during 72 hours at 200 rpm and 25°C. After this period, the browth was centrifugated in order to separate the cells. The polysaccharide was recovered by ethanol precipitation, dried under vacuum and powdered. This procedure yielded 7-9 grams of polysaccharide/litre of browth. After this step, the protein present in polysaccharide solution was eliminated by papain hydrolysis. The polysaccharide solution was dialysed against distillated water, untyl totaly purified. PS-32 polysaccharide structure features were studied by high performance liquid chromatography, gas-liquid chromatography-mass spectrometry, nuclear magnetic ressonance of 1H and 13C and IR. HPLC was used in order to determinate and quantificate monosaccharides present in PS-32 polysaccharide. Therefore, were tested two kinds of hydrolysis: (i) 1M HC1, 70°C, 16 h and (ii) 2N TFA, 100°C, 16 h. It was used a Shimadzu Co. HPLC and hydrolysates were analysed in a 7,9 mm x 30 cm column (SCR-101-P, Shimadzu Co.), with sulfonated polystyrene bonded to Pb+2 cation (ligand exchange) and gel filtration separation. The separation was based in the stability of complex between hidroxyl groups and Pb+2 cation, too. The column temperature was 80°C. It was used ultrapure water as mobile phase, with flow of 0,6 mL/minute. An automatic injector of samples was used. The refractive index detector was used to detect sugars. Sugars were identified by the retention time of corresponded standards and confirmed by mass spectrometry. Using calibration curves with external standards it was quantified glucose:galactose:fucose at the proportion of 3:1:3, respectively. TFA hydrolysate showed best results. In order to confirm the sugars composition in PS-32 polysaccharide and determinate glycosidic linkages positions between these sugar residues, PS-32 polysaccharide was methylated according to HAKOMORI, 1964, hydrolysated, reduced and acetylated. It was obtained acetalic alditols parcialy methylated. This alditols were analysed in a Shimadzu Co. GC-MS. It was used a fused-silic bonded capillary column DB-5, 22 mm X 50 m, split of 1/100 and a temperature program: 130°C during the 5 initial minutes, arising to 300°C, 7°C/minute. Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Estudo da estrututa de exopolissacarideos produzidos por duas especies de Rhizobium e uma de Bradyhizobium isolados de solo de cultivar Feijão de corda (Vigna unguiculata L.)

Druzian, Janice Izabel 27 July 2018 (has links)
Orientador: Adilma Pippa Scamparini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-27T06:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Druzian_JaniceIzabel_D.pdf: 36751989 bytes, checksum: 1519ea355c0af1b0093364b4a0c9ac03 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Três novos biopolímeros extracelulares obtidos por fermentação aeróbica de Rhizobium "NFB", "RFB" e Bradyrhizobium "79" foram desenvolvidos. Meio (O,I % de extrato de levedura, 0,02 % de MgS04.7H20, O,I % de K2HP04) com 10% de sacarose foi usado para a produção dos EPS 79 e RFB, e com 3% de manitol para NFB. NFB e RFB foram fermentados por 10 dias, e 79 por 14 dias, a 30°C. A produção máxima de RFB e EPS 79 foi 2,7 g/L, e de EPS NFB foi 1,7 g/L. Após isolamento das células, a proteína representou em média 2,5% dos EPS, e foi separada com TCA. CLAE-CE-1R com colunas TSK-30 e 40 XL foi usado, e pesos moleculares (PM) na ordem de 106D foram obtidos. A dependência do PM do EPS 79 em relação ao tempo de fermentação também foi testada. [a]D20= 0° , +170°, +85° foram obtidos para os EPS 79, RFB e NFB, respectivamente...Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Three new extracellular biopolymers obtained by aerobic fennentation from the Rhizobium strains "NFB", "RFB" and Bradyrhizobium strain "79" were developed. Medium I (0.1 % yeast extract, 0.02 % MgSO4.7H2O, 0.1 % K2HPO4) with 10% sucrose was used for the production of RFB and 79 EPS, and with 3% mannitol for NFB. NFB and RFB were fennented for 10 days, and 79 for 14 days, at 30°C. To RFB and 79 EPS the maximal production of EPS was 2.7 g/L, and for 79 NFB EPS it was 1.7 g/L. After cell isolation, protein represented on average 2.5 % of the EPS, and was separated using TCA. HPLC-SEC-Rl with the columns TSK-30 and 40 XL, was used, and molecular weight (MW) to the order of 106D were obtained. The dependence ofthe 79 EPS on MW in relation to the fermentation time, was also tested. [ab2O = 0° , +170° and +85° were obtained for the 79 EPS, RFB and NFB, respectively...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos
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Detecção de proteinas que se ligam a cadeia de B(1-4) glucanos em cotiledones de chagas (Tropaeolum majus) durante o periodo de mobilização de xiloglucano de reserva

Silva, Ana Maria da 12 January 2000 (has links)
Orientador: Marcos Silveira Buckeridge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T06:04:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_AnaMariada_M.pdf: 2785329 bytes, checksum: 805a8f875c7d56fac6d3f82d1485fdb5 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Xiloglucanos (xgs) são polissacarídeos que ocorrem em parede celulares principalmente de dicotiledôneas. Possuem uma cadeia principal idêntica a da celulose P(1_4) glucano e ramificações com xilose, galactose e/ou arabinose. Sua principal função nas paredes celulares é orientar as microfibrilas de celulose e consequentemente os xgs têm papel fundamental na forma e desenvolvimento celulares. Xiloglucanos também acumulam-se em grandes quantidades e sementes, onde servem como reserva para o crescimento inicial da plântula. Sua hidrólise in vivo tem se mostrado altamente complexa e apesar de razoavelmente conhecido, o sistema de hidrólise dos xgs em plantas ainda não está completamente elucidado. O presente trabalho mostra que proteínas extraídas de cotilédones de Tropaeolum majus L. interagem in vitro com celulose (cel) e com o complexo celulose-xg (cel-xg). A concentração ótima de proteínas para essa interação está por volta de 80/-lg.mL-1 (nas condições experimentais determinadas no nosso laboratório). A análise por SDS-PAGE das proteínas eluídas a partir da cel e do complexo cel-xg revelou uma diferença no perfil de bandas detectadas. A interação dos polipeptídeos com o complexo cel-xg mostrou uma proporção maior de uma proteína de 43kDa, sugerindo que a presença do xiloglucano poderia estar aumentando o número de sítios para esses polipeptídeos. Uma diferença entre os perfis de polipeptídeos eluídos a partir de celulose e do complexo cel-xg foi o desaparecimento de uma banda de 63kDa que apareceu somente no primeiro (cel). Isto sugere que o xiloglucano, ao interagir com a celulose, poderia "esconder" sítios específicos de ligação da proteína 63kDa à celulose. Nenhuma atividade enzimática das hidrolases do xiloglucano foi detectada nas amostras de proteínas eluídas da cel e do complexo cel-xg e também as massas moleculares das proteínas detectadas nas interações com cel e com complexo cel-xg não coincidem com as das enzimas já reportadas para o sistema de mobilização do xiloglucano. Nossos resultados sugerem que os polipeptídeos que interagem com a cel e com o complexo cel-xg poderiam estar atuando principalmente na ligação entre celulose e xiloglucano, interferindo no acesso das enzimas responsáveis pela mobilização do xiloglucano / Abstract: Xyloglucans (xgs) are polysaccharides that occur mainly in the plant cell walls of dicots. They are composed of a main chain identical to cellulose W-1,4 linked glucoses) branched with xylose galactose and/or arabinose. Its main function in the walls is the orientation of cellulose microfibrils, being therefore important for cell shape determination. Xyloglucans also accumulate in great amounts in seeds, where they serve as a reserve for plantlet initial growth. Although seed Xgs are reserve polymers, their hydrolysis in vivo have been demonstrated to be extremely complex and although many enzymes have been isolated, the system is not completely elucidated. The present work showed that proteins present in the cotyledons of Tropaeolum majus L. are able to interact in vitro with microcrystalline cellulose (cel) ar microcrystalline cellulose covered with xyloglucan (cel+xg). The optimal concentration of proteins for interaction with cel or cel+xg are around 80).!g.mL-1. Analysis by SDSPAGE of the proteins eluted frem cel or cel+xg with sodium chloride revealed a different polypeptide profile. The interaction of cotyledon extracts with cel+xg showed a higher proportion of a 43kDa protein, suggesting that xyloglucan could be increasing the number of sites of interaction for this polypeptide. Alternatively, when cel alone was used, a 63kDa protein appeared together with the 43kDa protein observed in interaction with cel+xg. This suggests that when xyloglucan interacts with cel it possibly "hides" binding sites which are specific for the 63kDa protein binding. No enzymatic activity of any of the xyloglucan hydrolases was observed in the solution of polypeptides eluted from cel or cel+xg. Also, none of the bands found in SDS-PAGE coincide with any of the molecular weights already known for xyloglucan hydrolases of T. majus L. Our results suggest that the cel and cel+xg interactive polypeptides found in the cotyledons of T. majus L. might be related to storage mobilisation, possibly interfering with the access of the hydrolases to xyloglucan / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Avaliação do efeito dos leites materno, de vaca e de cabra sobre a fermentação e síntese de polissacarídeos extracelulares na placa dentária humana. Estudo "in vitro" / “Evaluation of the effects of human, cow and goat milk on the fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides in human dental plaque – in vitro study”

Marcelo Pires Prestes 07 April 2003 (has links)
Na espécie humana, são usados vários leites, além daquele que lhe é próprio, tais como o leite de vaca e o leite de cabra dentre outros. Em meio a seus diversos componentes encontramos a lactose que é um dissacarídeo que se desdobra em glicose e galactose. A cárie dentária como uma doença multifatorial, necessita de um substrato cariogênico para o seu desenvolvimento além das bactérias presentes na placa dentária, que utilizam carboidratos da dieta para seu metabolismo. Tendo em vista a característica de alto consumo e os relatos clínicos nos quais é sugerida a participação do leite no desenvolvimento da cárie, este trabalho avaliou o efeito “in vitro” de três tipos de leite “in natura”; materno, de vaca e de cabra, sobre o metabolismo da placa dentária humana, com relação à capacidade de fermentação e síntese de polissacarídeos extracelulares. Por meio da coleta de placa dentária de 50 crianças e adolescentes entre 10 e 15 anos de idade, procedente de uma Instituição da cidade de Bauru, um “pool” de placa foi tratado em laboratório, e submetido a estudos bioquímicos específicos para fermentação e síntese de polissacarídeos extracelulares. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste de Análise de Variância (ANOVA) a um e dois critérios com nível de significância de 5% e utilizou-se o teste de Tukey-Kramer para comparação entre os diferentes tipos de substratos. Concluiu-se com este estudo que, quando utilizados os leites testados, ocorre, “in vitro”, a fermentação e a síntese de polissacarídeos extracelulares. O leite de cabra apresentou a menor fermentação seguido pelo leite bovino e depois o leite materno. Para a síntese de polissacarídeos o maior resultado foi obtido pelo leite de cabra, seguido pelo leite de vaca e pelo leite materno. / Several types of milk are consumed by human beings besides human milk, such as cow milk, goat milk, and others. Among several other components, the milk contains lactose, which is a disaccharide composed of glucose and galactose. Dental caries, as a multifactorial disease, requires a cariogenic substrate on which to develop, in addition to the bacteria present in dental plaque, which employ the dietary carbohydrates in their metabolism. Considering the high intake of milk by mankind and the clinical reports that suggest its participation in caries development, the present in vitro study evaluated the influence of three types of whole milk, namely human, cow and goat milk, on human dental plaque metabolism as to the capacity of fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides. A “pool” of dental plaque obtained from 50 children aged 10 to 15 years old attending an institution in the city of Bauru was laboratory treated and submitted to biochemical studies specifically for the fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides. The obtained results were submitted to one and two-way variance analysis (ANOVA) at a significance level of 5% and the Tukey-Kramer test was employed to compare the different types of substrates. It was conc luded that all three types of milk demonstrated in vitro fermentation and synthesis of extracellular polysaccharides. Goat milk presented the smallest level of fermentation, followed by cow milk and human milk. Concerning the synthesis of polysaccharides, the highest outcome was achieved for goat milk, followed by cow milk and human milk.
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O efeito da temperatura na ação da xiloglucano endo-beta-transglicosilase sobre xiloglucanos de reserva

Minhoto, Miguel Jose 05 March 2002 (has links)
Orientador: Marcos Silveira Buckeridge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T15:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Minhoto_MiguelJose_M.pdf: 4039916 bytes, checksum: 375e18b7a2d9e8351d156efb0b8f97c0 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Xiloglucano (Xg) é um polissacarídeo estrutural da parede celular e apresenta uma estrutura principal de resíduos de glucose _(1,4) ligados (similar a celulose) e com ramificações regulares de resíduos de xilose com ligação a(1 ,6). As xiloses podem apresentar ainda, em certas posições, resíduos de galactose ligados _(1 ,2). As certas galactoses podemos encontrar, eventualmente, resíduos de fucose ou arabinose ligados. Esse padrão de ramificações com xiloses presentes no polissacarídeo é que determina sua solubilidade, enquanto que os resíduos de galactose e de fucose provavelmente devem estar relacionados à capacidade que o xiloglucano apresenta em orientar as microfibrilas de celulose durante o crescimento e expansão celular. Da mesma forma que o amido, na presença de iodo, as soluções de Xg ficam azuladas e essa propriedade seria devida ao fato do Xg apresentar uma conformação helicoidal semelhante à do amido, com interior hidrofóbico. Utilizando Xg de sementes e de suspensão celular, foi possível estudar o efeito do pH e da temperatura na estabilidade do complexo Xg-iodo. Em todos os casos, o pH teve um efeito secundário se comparado com o efeito da variação da temperatura, entre 30 e 45°C, que permite o complexo se desfazer ao aquecer e refazer-se ao esfriar. Durante os ciclos de diminuição da temperatura, a recaptura do iodo foi mais lenta que a liberação (histerese) sugerindo que em certos casos a reorganização das moléculas requer pouca energia. Em Hymenaea courbaril o complexo se desfaz a 35°C e volta a refazer-se em 33,8°C. A análise da degradação do Xg em cotilédones de Hymenaea courbariJ revelou que, em ciclo de 24 horas, a temperatura da superfície do órgão variou de 20 até 40°C. Em estudos feitos com a xiloglucano endo-_-transglicosilase (XET) , que é uma das enzimas de mobilização da reserva do Xg nos cotilédones de H. courbaril, encontramos atividade ótima da enzima na mesma temperatura onde o complexo se desfaz. Esses resultados sugerem que a degradação do Xg da parede celular dos cotilédones poderia ser controlada pela temperatura, mais elevada durante o dia, que permitiria a quebra em grandes blocos de Xg, enquanto à noite, em temperaturas mais baixas, o metabolismo seria mais ativo e os blocos formados durante o dia seriam degradados. Sob essas condições, a mobilização do carbono vindo do Xg dos cotilédones para o crescimento da plântula não se sobreporia à fotossíntese, sendo possível que este controle seja feito pela temperatura, que daria uma eficiência maior no uso do carbono pela plântula em desenvolvimento / Abstract: Xyloglucan is a cell wall polysaccharide structurally based on a backbone of p-1,4 linked glucosyl residues (similar to cellulose), which is branched with xylose (at a0-6 position) in a fairly regular formo Xyloses at certain positions are branched with galactosyl residues at p-0-2 positions and further with fucosyl or arabinosyl residues are attached to certain galactoseso This branching pattern renders solubility to the polysaccharide and the distributions of galactoses and fucose appear to be related to the capacity that xyloglucan has to orient cellulose microfibrils during cell growth As starch, in the presence of iodine (l2/KI) xyloglucan solutions become blue and this property is thought to be due to the fact that Xg has a helicoidal conformation similar to starch Using xyloglucans from seeds and cell tissue culture, we studied the effect of pH and temperature on the stability of the Xg-iodine complexes. In ali cases, pH had a minor effect whereas under changing temperature X_ releasedlrecaptured iodine between 30 and 45°C. During ascending cycles recapture of iodine was slower than release (hysterese) suggesting that in certain cases the reorganisation of the molecules requires slightly more energy. In a study of the system of xyloglucan degradation in cotyledons of Hymenaea courbaril, we found that the surface temperature of the organ varied from 20 to 41°C during one day period Also, a preliminary study of temperature optima for the enzyme xyloglucan endo-p-transglycosilase (one of the principal enzymes responsible for xyloglucan mobilisation) from the same cotyledons resulted in loss of activity with transition very similar to the changes in xyloglucan conformation Our results suggest that degradation of xyloglucan in the cell wall might be controlled by temperature so that metabolism is shut down during the day (higher temperatures) and active overnight (Lower temperature). As under such conditions mobilisation of carbon of Xg from cotyledons to the growing plantlet would not overlap with photosynthesis, it is possible that this temperature control renders a higher efficiency in carbon use by the growing plantlet / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Interação molecular entre celulose e hemiceluloses e suas implicações biologicas e tecnologicas

Lima, Denis Ubeda de 23 July 2002 (has links)
Orientador : Marcos Silveira Buckeridge / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T23:02:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_DenisUbedade_D.pdf: 4155053 bytes, checksum: 1463b199c6ca8a4f9deec69cf97a67f6 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: As hemiceluloses são polissacarídeos que representam um dos componentes da parede celular vegetal e estão intimamente associados à celulose, definindo as propriedades estruturais na parede além de desempenhar funções na regulação do crescimento e desenvolvimento das plantas. Os xiloglucanos (Xg) e os galactomananos são hemiceluloses presentes tanto em parede primária (função estrutural) como em parede de reserva em sementes de algumas espécies (função de reserva). A interação entre celulose e as hemiceluloses pode ser analisada in vitro, possibilitando o estudo e a caracterização dos fatores que atuam sobre esta interação, consequentemente, tornando-se uma ferramenta importante para a compreensão de como o metabolismo e a arquitetura da parede são controlados. Em vista disto, este trabalho teve como objetivos: 1) analisar o efeito de variações na estrutura fina do xiloglucano (diferentes graus de ramificação com galactose e fucose) sobre sua capacidade de interação com celulose; 2) analisar o efeito do tamanho da molécula sobre a capacidade e sobre a energia envolvida nos processos de adsorção e 3) com base na capacidade de interação com celulose, avaliar o potencial das hemiceluloses (xiloglucano e galactomanano) como aditivos para o incremento das propriedades físicas do papel. Os resultados mostraram que, tanto o grau de ramificação como o tamanho da molécula afetam a interação entre Xg e celulose. Enquanto o grau de galactosilação e fucosilação estão relacionados com a força de ligação entre os polissacarídeos, o tamanho da molécula do Xg afeta a sua capacidade (quantidade) de interação à celulose, consequentemente a auto-interação. Estes dados sugerem que, a ausência da fucose nos Xgs de reserva, associada a sua provável síntese a partir de fragmentos de baixo peso molecular, possibilitariam a ligação (de baixa energia) entre as moléculas, permitindo tanto um eficiente empacotamento, como o fácil acesso às enzimas e expansinas durante o processo de desmonte e mobilização das reservas. As regiões fucosiladas do Xg estariam associadas àquelas regiões da parede primária sob maior pressão (alongamento, turgor), ou ainda, na manutenção da arquitetura da parede de reserva em tecidos de sementes que acumulam tais polissacarídeos. Do ponto de vista tecnológico, o uso das hemiceluloses (xiloglucano e galactomanano) são potenciais produtos alternativos para o incremento das propriedades mecânicas do papel / Abstract: Hemicelluloses are polysaccharides present in plant cell wall that are specifically associated to cellulose. They are related to the structural properties of the wall and act on the regulation of plant growth and development. Xyloglucans (Xg) and galactomannans are hemicelluloses present in primary cell walls, where they have a structural function and in secondary cell walls (as storage polysaccharides) of seeds of some dicotyledonous species. Results of in vitro experiments can be used as important tools to understand how cell wall metabolism and architecture are controlled. In this work, we had the following objectives: 1) to evaluate the effect of variations of the fine structure of Xg (degree of galactosylation and fucosylation) on its binding capacity to cellulose; 2) to analyse the effect of molecular weight of Xg on binding and energy involved in adsorption processes and 3) to assess the potential of hemicelluloses (Xg and galactomannan) as wet-end additives in order to improve the mechanical properties of paper sheets. Our results showed that both the branching degree and the molecular weight of Xg molecules affected the interaction with cellulose. The strength of binding to cellulose was related with the degree of galactosylation and fucosylation. H oweve r, the Xg molecular weight strongly affected its binding capacity (amount) and possibly its capacity of self-association. These data suggest that the absence of fucose in storage Xgs, associated to its biosynthesis as low molecular weight fragments, would allow the low energy binding among the molecules thus affording a rather efficient packing of the polymers in the case of the storage wall. It would also facilitate the access of the hydrolases (and maybe expansins) during the period of storage mobilisation. On the other hand, the fucosylated regions, characteristic of primary cell walls of growing tissues, would be associated with regions of the wall under higher pressure. From the biotechnological point of view, the hemicelluloses (Xg and galactomannan) are potential alternative products to be used to improve the mechanical properties of paper / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal
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Produção, purificação e caracterização da quitinase de Cellulomonas cellulans Fxx

Yamaguchi, Margarida Masami 03 August 2018 (has links)
Orientador: Helia Harumi Sato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T11:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yamaguchi_MargaridaMasami_D.pdf: 17568151 bytes, checksum: 90d91dbeb36407b252d9007e32f21a35 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: As quitinases hidrolisamas ligações(3-1,4 da quitina, um polímero composto de unidades de N-acetil glicosaminas e pequena quantidade de glicosamina,encontrado nas carapaças de lagostas, camarões,insetos e também na parede celular de fungos.A quitinase pode ser aplicada na hidrólise de quitina e produção de ligossacarídeos com atividade biológica e também na inibição de fungos fitopatogênicos.O objetivo deste trabalho foi selecionar um microrganismo para produção de quitinase.Foi estudada a influência de alguns componentes do meio de cultura na produção de quitinase pela linhagem selecionada de Cellulomonascellulans Fxx utilizando-se planejamento experimental.Estudou-se o efeito do pH e da temperatura na atividade e estabilidade da quitinase bruta utilizando-se metodologia univariável e planejamento experimental. A quitinase foi purificada e caracterizada bioquimicamente As linhagens de microrganismos isoladas de amostras de camarões e amostras de solo mostraram baixa produção de quitinase em meio de cultura contendo quitina. As linhagens1, 22, 26, cellulomonas cellulansFxx, Oerskovia xanthineolytican°4 e C.cellulansn° 191 produtoras de nzima(3-1,3 glucanas e capazes de lisara parede celular de leveduras, produziram quitinase no meio de cultura contendo quitina, porém não produziram(3-1,3glucanase nas condições estudadas ...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: Chitinase hydrolyses 'beta'-1,4-glucosidic bonds of chitin, a polymer of N-acetyl glucosamine and little amount of glucosamine residues. It is common constituent of exoskeletons, shells of crustaceans and fungal cell walls. Chitinase is used for teh production of chitooligosacchararides biologically active and phytopathogenic fungi inhibition. The objective of this investigation was to select a high producer of chitinase microorganism ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos
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Interação de proteinas do soro de leite com polissacarideo : fracionamento e estudo das propriedades funcionais dos complexos / Protein interaction of the milk serum with polissacarídeo : fracionamento and study of the functional properties of the complexes

Capitani, Caroline Dario, 1980- 27 May 2004 (has links)
Orientador: Maria Teresa Bertoldo Pacheco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Capitani_CarolineDario_M.pdf: 1950083 bytes, checksum: 599f2e417977a5e7d59d4b587d97c913 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Na indústria de laticínios, a coacervação entre o soro de leite com hidrocolóides pode ser utilizada no fracionamento e recuperação das suas proteínas e, ainda, contribuir na redução da poluição ambiental. O objetivo do trabalho foi estudar a interação entre proteínas do soro lácteo, obtido a partir da fabricação do queijo ¿minas¿, com o polissacarídeo aniônico carboximetilcelulose (CMC), utilizando a técnica de coacervação complexa em diferentes faixas de pH. As proteínas foram complexadas e fracionadas obtendo três diferentes amostras. Para tal, foi feito ajuste do pH e da concentração do hidrocolóide. Os complexos foram classificados como precipitado 1: b-Lg/CMC, precipitado 2: a-La/CMC e precipitado total: PT/CMC, sendo obtidos em valores de pH 4,0; 3,2 e 3,0, respectivamente. Em seguida foram avaliadas variações nas faixas de pH na desestabilização deste complexo. Foram utilizados parâmetros de pH, força iônica e concentração de amostra no estudo de algumas propriedades funcionais tecnológicas, tais como solubilidade, geleificação, viscosidade, formação de espuma e estabilidade de emulsões. Os resultados de porcentagem de proteínas e CMC solúveis e de eletroforese mostraram que os coacervados são parcialmente descomplexados em valores de pH 2, 5 e 6. As análises de calorimetria diferencial de varredura (DSC) permitiram concluir que a presença do hidrocolóide aumentou a estabilidade protéica ao processo de desnaturação térmica. O aumento da concentração de NaCl (0,5M), influenciou positivamente a solubilidade protéica (%SP), contudo, nas faixas de pH correspondentes às de obtenção dos complexos, os resultados foram mínimos para esta propriedade (%SP). Nos testes de geleificação a 20% de concentração, os valores de G¿ foram maiores que os de G¿, concluindo-se que todos os complexos formaram um sólido-viscoelástico. A viscosidade das soluções (pH 6,0) foi maior para as amostras de a-La/CMC e b-Lg/CMC. Em relação às espumas, a melhor capacidade espumante se deu em pH 2,0 com o complexo a- La/CMC. A interação entre os parâmetros testados (pH e concentração de NaCl) foi significativa ( p < 0,05) para a porcentagem de formação de espuma (%) com os complexos a-La/CMC e b-Lg/CMC. As análises das emulsões permitiram afirmar que no pH 6,0 e a 5 mg/ml de concentração de complexo houve maior estabilidade das amostras ao processo de formação do cremado e coalescência, sendo a PT/CMC a amostra menos estável em pH de formação (3,0) do coacervado / Abstract: In dairy industries the coacervation between whey with hydrocolloid might be utilized in the fractionation and recovery of the proteins and contribute to reduce in the ambient pollution. The aim of this work was to study whey protein interaction as a result of cheese type ¿Minas¿ manufacturing with anionic polysaccharyde carboxymetyl-cellulose (CMC) using the complex coacervation technique. The proteins were fractionated and three different complexes. The variables of the conditions optimization of selected fractionation and precipitation were taken out from hydrocolloid concentration and pH. The complexes were classified as: precipitated 1: b-lg/CMC, precipitated 2: a-la;CMC and total precipitated: whey total protein (PT/CMC) and the values of the pH were 4.0; 3.2; and 3.0, respectively. The obtained complexes were studied trough the percentage analyses of soluble proteins-CMC and native-PAGE. The results demonstrated that the complexes ones partially free as they move further from pH original values of attainment and complexes precipitation. DSC analyses could conclude that hydrocolloid presence increases protein stability of the thermal denaturation process. It was analyzed some technological functional properties such as solubility, gelling, viscosity, foam properties and emulsion stability in different samples. Extrinsic parameters analysis varied for pH, ionic force and sample concentration. The increase of NaCl (0.5M) influenced in a positive way the solubility protein. However, the solubility (%SP) was minimum compared to the corresponding complexes obtention of pH. G¿ values had been always superior to G¿ for gelling tests and one could conclude that all complexes formed a viscous solid (20% of concentration). In pH 6.0, solutions viscosity was higher for a-lactoalbumin/CMC and b- lactoglobulina/CMC samples. Related to foaming characteristics, the best foaming capacity occurred in a a-lactoalbumin/CMC with pH 2.0. Related to the interaction between pH parameters and NaCl concentration one could notice a significant increase to foam formation (%) with a-lactoalbumin/CMC and b-lactoglobulina/CMC complexes. The results of emulsions stability analyses demonstrated that pH 6.0 and 5mg/mL concentration had samples greater stability to creaming and coalescence, and PT/CMC presented the lowest formation and complexes precipitation in pH 3.0 / Mestrado / Mestre em Alimentos e Nutrição
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Efeitos do extrato total e fração polissacaridica de Ascaris Lumbricoides sobre o desenvolvimento do tecido de granulação

Braga, Mauro 14 July 2018 (has links)
Orientador : Mario Roberto Vizioli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T06:24:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Braga_Mauro_M.pdf: 1362263 bytes, checksum: 8a1cfd0db7acf5a7101c9a1c3081bfe8 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: O desenvolvimento do tecido de granulação, a fim de relacionar o citado parasita e uma eventual ação de suas toxinas sô bre o processo de reparação do organismo animal. Em ratos al.binos da raça Wistar foram implantados subcutâneamente esponjas de policlorovinil (PVC), sendo estes posteriormente divididos em 6 grupos, como segue: GRUPO I - ~ animais que receberam 0,2 ml de solução salina fisiológica por dia, atraves da via intraperltoneal; GRUPO 11 - 6 animais que receberam 0,2 ml de solução salina fisiológica subcutâneamente, na periferia implante, tambem diariamente; do O presente trabalho teve como finalidade investigar os efeitos do antigeno total e de sua fração polissacarl° dica, obtidos a partir do Ascaris lumbricoides, sôbre GRUPO 111 - 6 ratos que receberam diariamente 0,2 ml de solução de polissacarldeo extraldo do antlgeno total de Ascaris, por via intraperitoneal; GRUPO IV - 6 animais que receberam diariamente 0,2 ml de solução de polissacarldeo extraldo do antlgeno total de Ascaris, por via subcutânea, na periferia do impla~ te; GRUPO V - 6 ratos que receberam 0,2 ml de solução de antlgeno total de Ascaris por dia, atraves da via intraperitoneal; GRUPO VI - 6 ratos que receberam diariamente 0,2 ml de solução de antlgeno total de Ascaris subcutâneamen te, na periferia do implante...Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Microbiologia e Imunologia / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental

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