Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Texto parcialmente liberado pelo autor - sem capítulo 1, resultados e discussões. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-04-08T13:23:00Z No. of bitstreams: 1 2009_RayaneBalsamo.pdf: 2950463 bytes, checksum: c3c2f767f54d4e7b94255a48940eb6a1 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-19T18:40:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_RayaneBalsamo.pdf: 2950463 bytes, checksum: c3c2f767f54d4e7b94255a48940eb6a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-19T18:40:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_RayaneBalsamo.pdf: 2950463 bytes, checksum: c3c2f767f54d4e7b94255a48940eb6a1 (MD5) Previous issue date: 2009 / A traça-das-crucíferas (TDC) Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) é a principal praga da cultura das crucíferas e o controle químico é o método mais empregado para reduzir os danos desta praga. Uma alternativa para o controle da P.xylostella é a utilização de agentes de controle biológico, como Bacillus thuringiensis (Bt). Seu uso ainda é restrito, quando comparado aos inseticidas químicos, pois quando aplicado nas folhas, o complexo esporo-cristal fica exposto à radiação solar e é rapidamente desnaturado ou é lavado pela ação das chuvas. A alternativa é o uso endifítico do Bt, que tem a mesma função, sem os limites derivados da baixa ação residual. Este trabalho teve como objetivo determinar o efeito do Bt sobre P. xylostella a partir da aplicação sistêmica da bactéria na planta de couve. Foi utilizado o Bacillus thuringiensis kurstaki marcado com GFP (Btk- GFP), pertencente ao banco de Bacillus spp. da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. A estirpe foi crescida por 72 h em meio nutritivo e inoculada perto da raiz das plantas para avaliar a sua atividade tóxica para nas lagartas de P. xylostella. Após a inoculação foram realizados bioensaios para a determinação da mortalidade das lagartas no terceiro instar. Os resultados obtidos mostraram que, a planta absorveu o Btk-GFP do solo e que este se multiplicou em seu interior, protegendo-a contra os insetos. É possível que esses experimentos preliminares estejam abrindo a possibilidade de uma nova forma de utilização de B. thuringiensis no controle de insetos. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The diamondback moth (DM) Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) is the major pest of crucifer culture and the chemical control is the method most used to reduce its damage. An alternative to control this pest is the use of biological control agents, such as Bacillus thuringiensis (Bt). Its use is still limited when compared to chemical insecticides, because when applied in complex leaves the spore-crystal is exposed to solar radiation and is rapidly denatured or are "washed" by the action of rain. The alternative is the use of endophitic Bt that has the same function, without the limitation derived from low residual action. This study aimed to determine the effect of Bt on Plutella xylostella from the systemic application of the bacteria in the plant of cabbage. We used the GFP Bacillus thuringiensis kurstaki (Btk-GFP), belonging to the bank of Bacillus spp. at Embrapa Genetic Resources and Biotechnology. The strain was grown for 72 h in nutrient medium and inoculated near the roots of plants to evaluate their toxic activity to the larvae of P. xylostella. After inoculation bioassays were conducted to determine the mortality of the larvae in the third instar. The results showed that the plant absorbs the Btk-GFP from the ground and proliferates in the interior, protecting it against insects. It is possible that these preliminary experiments are opening the possibility of a new way of using B. thuringiensis to control insects.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-13T16:22:02Z No. of bitstreams: 1 2009_PedroHenriqueBrumTogni.pdf: 3570491 bytes, checksum: 0384bdcc97a6fd8478b97991da93546f (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-04-15T14:41:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_PedroHenriqueBrumTogni.pdf: 3570491 bytes, checksum: 0384bdcc97a6fd8478b97991da93546f (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-15T14:41:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_PedroHenriqueBrumTogni.pdf: 3570491 bytes, checksum: 0384bdcc97a6fd8478b97991da93546f (MD5) Previous issue date: 2009-03 / A mosca-branca Bemisia tabaci biótipo B é considerada uma das principais pragas do tomateiro por causar perdas de produtividade devido a danos diretos e pela transmissão de diversas viroses (Geminiviridae). As aplicações de inseticidas para seu controle têm se mostrado cada vez mais incipientes. Isso evidencia a necessidade de novas técnicas de manejo baseado nas interações ecológicas entre a mosca-branca e outros componentes bióticos e abióticos do agroecossistema do tomateiro. Em estudos anteriores o consórcio do tomateiro com coentro reduziu os níveis populacionais de B. tabaci, principalmente em sistemas orgânicos de produção. Porém, os mecanismos pelos quais o coentro pode afetar as populações de mosca-branca ainda não são evidentes. O objetivo deste trabalho é gerar bases científicas para o manejo ecológico de B. tabaci em cultivos de tomate orgânico a partir do consórcio tomate+coentro e do manejo do tipo de irrigação (gotejamento e aspersão). No capítulo 1, foi realizado um experimento em olfatômetro de múltipla escolha do tipo X para avaliar se B. tabaci é atraída pelos voláteis do tomateiro e como o coentro pode afetar esses padrões. Machos e fêmeas da mosca-branca foram atraídos pelos voláteis constitutivos do tomateiro, indicando que os infoquímicos têm um papel importante na seleção da planta hospedeira por este herbívoro. Entretanto, ao contrário do esperado, os voláteis constitutivos do coentro não foram repelentes para o inseto. Quando apresentados em conjunto com os voláteis do tomateiro houve uma redução na preferência pela escolha dos voláteis do tomateiro por B. tabaci. No capítulo 2, foi comparado em campo a flutuação populacional de B. tabaci biótipo B e a ocorrência de predadores e parasitóides em monocultivo de tomate e tomate consorciado com coentro, submetidos a irrigação por gotejamento e por aspersão em diferentes fases fenológicas do tomateiro. Adultos e ninfas de B. tabaci foram menos abundantes nos tratamentos consorciados com coentro, principalmente após as cinco primeiras semanas de amostragem e nos tratamentos irrigados por aspersão. Quanto aos inimigos naturais, foi verificada maior abundância e diversidade de espécies nos tratamentos com coentro, principalmente após a floração e quando irrigado por aspersão. O tipo de irrigação e o consórcio com o coentro afetaram de forma distinta a abundância de diferentes grupos de inimigos naturais como joaninhas, moscas predadoras e parasitóides. No capítulo 3, objetivou-se descrever os padrões espaciais de adultos de mosca branca no início do ciclo da cultura do tomateiro irrigado por aspersão ou gotejamento e plantado em monocultura ou em consórcio com coentro. A população inicial que colonizou os tomateiros apresentou um padrão agregado nos dois sistemas de irrigação na primeira semana de amostragem. No gotejamento esse padrão agregado se manteve ao longo do período de amostragem, enquanto que na aspersão o efeito mecânico da água sobre os indivíduos alterou a distribuição da população que passou a aleatória. O consórcio com o coentro reduziu a colonização da plantas de tomate por B. tabaci. As populações permaneceram agregadas principalmente nas parcelas de monocultivo de tomate, sendo mais evidente no gotejamento onde não há ação mecânica da água sobre os indivíduos. A dispersão do Begomovirus acompanhou a dispersão do vetor na área sendo observado um padrão agregado no gotejamento e aleatório na aspersão. Portanto, o consórcio tomate+coentro e a irrigação por aspersão afetaram a distribuição espacial de adultos de mosca-branca e a incidência de viroses associadas. Esses resultados reforçam a importância do plantio do coentro antes do transplante do tomateiro para o campo. Contudo, ainda são necessários novos trabalhos para identificar os voláteis produzidos pelas plantas e verificar a interação química entre estes e B. tabaci. Apesar de ser recomendado o plantio de tomate em sistemas irrigados por gotejamento devido à incidência de doenças, este trabalho demonstra que para mosca-branca a irrigação por aspersão pode ser mais favorável para seu controle e favorece a abundância e diversidade de inimigos naturais. Dessa forma, essas duas práticas culturais (consórcio tomate+coentro e tipo de irrigação) podem ser estratégias eficientes como medida preventiva para colonização, estabelecimento, distribuição e incidência de B. tabaci e Begomovirus em cultivos de tomate orgânico durante o período de baixa precipitação pluviométrica. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The whitefly Bemisia tabaci biotype B stands out, among the diverse community of pest herbivores that colonize the tomato crop, due to the direct damages and transmission of several pathogenic viruses (Geminiviridae) causing productivity losses. The spraying of insecticides for its control selects resistant populations and promotes the dispersion of adults to other cropped areas. This shows the necessity of new techniques based on knowledge of several ecological interactions relating the tomato and the biotic and abiotic components of tomato agroecosystem. Previous field observations showed that the intercropping of coriander and tomato crops together can reduce the population levels of B. tabaci, mainly in organic crop system. Therefore, how coriander can affect the whiteflies populations is unknown. The objective of this work was to generate new scientific bases for the ecological management of B. tabaci in organic tomato crop systems through intercropping with coriander and managing irrigation systems (sprinklers and drip). Chapter 1: A multiple-choice test in an olfactometer (X type) was conducted to evaluate if B. tabaci is attracted by the tomato volatiles and how the coriander volatiles can affect this pattern. Male and female of whiteflies were attracted by constitutive volatiles of tomato plants showing that these infochemicals have an important role in plant selection by this herbivore. However, on the contrary of what was expected, the constitutive volatiles of coriander alone were not repellent to the insect. Nonetheless, when exposed in a combination with tomato volatiles, there was a reduction in the preference of B. tabaci for tomato plants. Chapter 2: The dynamics of B. tabaci populations and the occurrence of predators and parasitoids in tomato monocultures and tomato-coriander bicultures, submitted to drip and sprinklers irrigation, were compared during different phenological stages of tomato plants. Adults and nymphs of B. tabaci were less abundant in the tomato-coriander biculture treatments, mainly after the five first weeks of sampling, and in the plots irrigated by sprinklers. Higher abundance and species diversity of natural enemies was observed in the treatments with coriander, mainly after its flowering and in the treatments under sprinklers irrigation. The irrigation management and the consortium with coriander affected distinctly the abundance of different groups of natural enemies, such as ladybeetles, predaceous flies, and parasitoids. This knowledge will be helpful in the conservation biological control of different tomato pests, and in different periods of the year. Chapter 3: The spatial distribution pattern of whitefly adults during the colonization period in tomato monoculture and the tomato-coriander biculture and irrigated by drip or sprinkler was described. The initial population that colonized tomato plants in the first sampling week showed a clumped pattern in both drip and sprinklers irrigation systems. The clumped population pattern remained in all sampling periods in the drip system. On the other hand, the mechanical effect of the water from sprinklers on the individuals changed the aggregation pattern from a clumped distribution to a random distribution. The tomato-coriander biculture reduced the plant colonization by B. tabaci compared to the monoculture. The adult population remained clumped, mainly in the plots of single cropped tomato, remaining more evident in plots with drip irrigation where there is no mechanical action of water on the adults. The dispersion of Begomovirus followed the vector dispersion in the area, and it was observed a clumped pattern under the drip irrigation and a random distribution pattern under the sprinklers irrigation. This way, the tomato-coriander biculture and the irrigation by sprinklers affected the spatial distribution of whitefly adults and the incidence of viruses. These results reinforce the importance of planting coriander before the tomato plant in order to diminish the colonization rate of whitefly and reduce the losses caused by disease. Additional studies are needed to identify the volatiles produced by plants and understand the chemical interactions of these volatiles and B. tabaci. Natural enemies specific against these species of whitefly should also be evaluated for population control. Instead of recommendations for irrigating tomato crop by drip system to reduce disease attack, this study showed that for whitefly control the sprinklers system is more efficient. This way, these two cultural practices can be efficient strategies as measures to prevent colonizing and establishing of B. tabaci and Begomovirus in organic tomato crops during the period of low incidence of rains.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2010. / Submitted by Washington da Silva Chagas (washington@bce.unb.br) on 2011-04-06T21:50:16Z No. of bitstreams: 1 2010_LucianaMoraisdeFreitas.pdf: 1369485 bytes, checksum: 54137c29475e1de4992db659daf336fc (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2011-04-09T01:40:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_LucianaMoraisdeFreitas.pdf: 1369485 bytes, checksum: 54137c29475e1de4992db659daf336fc (MD5) / Made available in DSpace on 2011-04-09T01:40:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_LucianaMoraisdeFreitas.pdf: 1369485 bytes, checksum: 54137c29475e1de4992db659daf336fc (MD5) / O trabalho foi realizado entre julho de 2008 a agosto de 2009 e teve como objetivo avaliar o efeito de doses de nitrogênio, potássio e silício na incidência da traça-das-crucíferas em plantas de repolho e avaliar o efeito do silício em algumas características biológicas da fase larval da praga sob condições de laboratório. Dois experimentos foram realizados, tendo sido o primeiro conduzido a campo, onde se avaliou o efeito de diferentes doses de nitrogênio, potássio e silício na injuria causada pela praga e na produção de repolho. O segundo estudo, composto de três ensaios, foi realizado em laboratório, e objetivou avaliar o efeito de doses de silício na preferência alimentar, mortalidade e desgaste da mandíbula de P. xylostella. Observou-se maiores injúrias causadas pela traça nas plantas que receberam doses maiores de nitrogênio e potássio e, menor dano, nas plantas que receberam silício. A maior massa fresca por cabeça de repolho foi observada no tratamento que recebeu adubação corretiva, seguido pelos tratamentos com doses altas de nitrogênio e potássio. Menor massa fresca foi observada em plantas do tratamento testemunha (sem adubação). Plantas que receberam silício produziram cabeças com tamanho desejado pelo mercado, cerca de 900g. Em relação às características biológicas do inseto, observou-se que o produto contendo silício em todas as doses testadas, interferiu aumentando a mortalidade, exercendo efeito de preferência sobre as lagartas e danificando as mandíbulas. O silício apresenta características que indicam que o nutriente pode vir a ser utilizado em programas de manejo da traça-das-crucíferas na cultura do repolho. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The research was carried out from July 2008 to August 2009 to evaluate the effect of nitrogen, potassium, silicon fertilization in the incidence of diamondback moth in cabbage plants and to evaluate silicon effect in some biological characteristics of the insect. Two experiments were established. The first one was developed at UnB-FAL where the effect of different doses of nitrogen, potassium and silicon on insect damages and yield were evaluated. The second one, composed by three trials, was developed at Embrapa Hortaliças to evaluate silicon effect on feeding preference, mortality and jaws mandibles damages. The highest insect damages were observed on plants that received the highest doses of nitrogen and potassium. Fewer damages were observed on plants sprayed with silicon. The highest plant weight was observed on plants that received chemical fertilization according to soil analyses, followed by treatments with highest doses of nitrogen and potassium. The lowest plant weight was observed in plants from the control with no fertilization. Plants with silicon presented a fresh weight desirable by the market, about 900g. For biological characteristics, silicon interfered by increasing mortality, attracting the worms and provoking serious jaws mandible damages. Therefore, fertilization has influenced insect incidence and, consequently, damages. Silicon showed characteristics that indicate a possible use in pest management programs aiming diamondback moth control on cabbage plants.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2010. / Submitted by Luiza Moreira Camargo (luizaamc@gmail.com) on 2011-06-21T17:31:51Z No. of bitstreams: 1 2010_MatheusGeraldoPiresdeMelloRibeiro.pdf: 579637 bytes, checksum: b90724bb421772f4daf730ec15c88a7b (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2011-06-22T18:16:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_MatheusGeraldoPiresdeMelloRibeiro.pdf: 579637 bytes, checksum: b90724bb421772f4daf730ec15c88a7b (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-22T18:16:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_MatheusGeraldoPiresdeMelloRibeiro.pdf: 579637 bytes, checksum: b90724bb421772f4daf730ec15c88a7b (MD5) / O objetivo deste trabalho foi determinar o efeito das relações molares de N:K, aplicados via fertirrigação, sobre a infestação do ácaro-rajado e a produtividade de duas cultivares de morangueiro. O estudo foi conduzido em 2009, sob cultivo protegido, na Embrapa Hortaliças – Gama/DF. As plantas receberam, via gotejamento, as doses de (gramas de N e K por planta por semana): 0,27 e 0,13; 0,27 e 0,50; 0,27 e 0,76 e Testemunha (água por gotejamento), em vinte e oito fertigações (semanas). Vinte e duas colheitas foram realizadas, sendo avaliadas as características de produção e os frutos classificados em comerciais e refugos. Quatro análises foliares foram feitas a fim de determinar o estado nutricional das plantas. As densidades populacionais do ácaro foram determinadas semanalmente. Houve interação significativa (p<0,05) entre a cultivar Diamante e a dose de potássio. As maiores doses de K propiciaram redução nas densidades populacionais de ovos e formas ativas de T. urticae, tendo a Diamante as menores densidades. O K e o P apresentaram correlação negativa para ambas as variáveis. Entretanto, o N apresentou correlação positiva. Não houve efeito das adubações sobre as características de produção do morangueiro, provavelmente, por estarem associadas à elevada infestação do ácaro rajado (> 40 ácaros/folíolo) em todas as parcelas durante a maior parte do ciclo de cultivo. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this work was to evaluate the effect of N:K molar relationship, applied through fertigation, on two-spotted-spider mite infestation and two strawberry cultivars yield. The study was carried out in 2009 under greenhouse conditions at Embrapa Vegetables, Gama-DF. Strawberry plants received by drip irrigation weekly doses of N and K (grams per plant): 0,27 e 0,13; 0,27 e 0,50; 0,27 e 0,76 and control, only water. Fruits were collected twenty two times during crop cycle. Commercial, non commercial fruits and others yield caractheristics were evaluated. Leaf´s nutrient content analysis were performed to determine the nutritional condition of the plants. Population´s density of T. urticae was evaluated weekly. It was observed a significant interaction between K doses and pest population (p<0,05). Higher doses of the nutrient reduced the number of eggs and active forms of the pest population with Diamante showing the smallest pest density. K and P showed negative correlation with both variables, but N showed a positive one. No effect was observed of fertilization on yield caractheristics due, probably, to the high infestations of the pest (>40 individuals per leaflet) in all treatments during most of the crop cycle.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2010. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-07-08T19:29:27Z No. of bitstreams: 1 2010_AlineWelzelGramkowParcial.pdf: 2841617 bytes, checksum: 6d3e8691cd26e3d57ff5f9003c7d61c3 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-07-13T21:46:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_AlineWelzelGramkowParcial.pdf: 2841617 bytes, checksum: 6d3e8691cd26e3d57ff5f9003c7d61c3 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-13T21:46:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_AlineWelzelGramkowParcial.pdf: 2841617 bytes, checksum: 6d3e8691cd26e3d57ff5f9003c7d61c3 (MD5) / Os baculovírus compreendem o maior grupo de vírus de insetos estudados no mundo, principalmente pela eficiência em matar pragas da agricultura. Neste trabalho, três baculovírus recombinantes contendo os genes ScathL (Catepsina L) de Sarcophaga peregrina (vSynScathL), Kerat (Queratinase) do fungo Aspergillus fumigatus (vSynKerat) e Quit (Quitinase) do fungo Metarhizium anisopliae (vSynQuit) foram construídos e suas propriedades bioinseticidas analisadas em larvas de Spodoptera frugiperda. Bioensaios em larvas neonatas e de 3º ínstar de S. frugiperda infectadas com os baculovírus vSynScathL, vSynKerat e vSynQuit mostraram uma diminuição no tempo necessário para matar os insetos infectados quando comparado ao vírus selvagem. O vSynScathL apresentou uma TL50 e TD de 47 horas e 2,62 dias, respectivamente, enquanto o AcMNPV, uma TL50 de 136 horas e TD de 5,37 dias, respectivamente para larvas de S. frugiperda de 3º ínstar. Isso representa uma diminuição significativa de 65,5% para TL50 e 50,09% para TD, no tempo necessário para o vírus matar os insetos infectados quando comparado ao vírus selvagem. A TL50 e TD para o vírus vSynKerat foi de 91 horas e 3,70 dias, respectivamente, com uma redução de 32,8% para TL50 e 30,21% para TD, no tempo necessário para o vírus matar os insetos infectados quando comparado ao vírus AcMNPV. Já, o vírus recombinante vSynQuit apresentou uma TL50 de 110,67 horas, o que foi 23,6% menor do que o vírus selvagem (TL50 de 144,97). Já em larvas neonatas de S. frugiperda o vSynScathL mostrou uma TL50 de 77 horas comparado ao AcMNPV de 104 horas quando inoculado com 102 corpos de oclusão/nL, já o TD foi de 3,46 dias para o vírus recombinante e 4,16 dias para o AcMNPV. Isso representa uma redução de 26% na TL50 e 16,82% para TD no tempo necessário para matar os insetos infectados quando comparado ao vírus selvagem AcMNPV. A TL50 do vírus vSynKerat foi de 54 horas, com uma redução de xx 48% comparado ao vírus AcMNPV e o TD de 3,87 dias, reduzindo 6,97% no tempo necessário para matar os insetos; já a TL50 do vírus vSynQuit foi de 86 horas, com uma redução de 45,2% comparado ao vírus selvagem e o TD de 3,75 dias comparado com o vírus selvagem de 4,43 dias, representando uma redução de 15,34% no tempo necessário para matar os insetos. Também mostramos que os vírus vSynScathL e vSynKerat foram capazes de aumentar a atividade de fenoloxidase na hemolinfa de larvas de S. frugiperda em relação ao vírus selvagem e à larva não infectada. A expressão de proteases em larvas infectadas resulta na destruição dos tecidos internos em estágios tardios da infecção, podendo ser uma das razões para o aumento da velocidade para matar as larvas de S. frugiperda, como observado na microscopia eletrônica de varredura para os vírus vSynScathL e vSynKerat em relação ao vírus selvagem e à larva não infectada. O ensaio enzimático com quitina regenerada mostrou também uma diferença quitinolítica significativa em relação aos corpos de oclusão do vírus vSynQuit em comparação ao vírus selvagem. A transcrição de genes celulares em hemócitos derivados de larvas de Anticarsia gemmatalis infectados (12 h p.i.) pelos baculovírus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) e/ou Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) também foram analisados neste trabalho pela técnica análise de diferença representacional (RDA). Os trancritos mais abundantes encontrados foram para proteases celulares, que estão provavelmente envolvidas na resposta do inseto à infecção viral. Outros genes, como por exemplo, hsp70 e hsc70, proteínas ribossomais, aminopeptidase, beta 1,3 glicanase, proteína induzida pelo hormônio juvenil, lipase também foram detectados. Todos esses transcritos podem de alguma maneira ter um papel na defesa celular e/ou estabelecimento da infecção viral. Para confirmação dos dados obtidos pela RDA, a transcrição do gene hsc70 foi analisada por PCR em tempo real e confirmou sua expressão diferencial. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Baculovirus comprise the largest group of insect viruses most studied worldwide, mainly because they efficiently kill agricutural insect pests. In this study, tree recombinant baculoviruses containing the ScathL gene (Cathepsin L) from Sarcophaga peregrina (vSynScathL), the Kerat gene (Keratinase) from the fungus Aspergillus fumigatus (vSynKerat) and Quit gene (Chitinase) from the fungus Metarhizium anisopliae (vSynQuit) were constructed and their insecticidal properties analysed against Spodoptera frugiperda larvae. Bioassays of third-instar and neonate S. frugiperda larvae with vSynScathL,vSynKerat and vSynQuit showed a decrease in the time needed to kill the infected insects when compared to the wild type virus. The vSynScathL showed LT50 and TD of 47 hours and 2.62 days respectively, while AcMNPV, a LT50 of 136 hours and TD of 5.37 days, respectively for third-instar S. frugiperda.larvae. This represents a significant decrease (from 65.5% for LT50 and 50.09% for TD) in the time required to kill the virus infected insects compared to wild virus. The LT50 and TD for vSynKerat was 91 hours and 3.70 days, respectively, showing also a reduction (32.8% for LT50 and 30.21% for TD), in the time required to kill the virus infected insects compared to AcMNPV. Also, the vSynQuit in another bioassay, showed a LT50 of 110.67 hours, which was 23.6% lower than the wild type virus (LT50 of 144.97 hours). Using neonate larvae of S.frugiperda, the vSynScathL showed a LT50 77 hours compared to 104 hours of AcMNPV when inoculated with 102 occlusion bodies/nL, since the TD was 3.46 days for the recombinant virus and 4.16 days for AcMNPV. This represents a 26% reduction in LT50 and 16.82% for TD compared to wild type virus AcMNPV. The LT50 of the virus vSynKerat was 54 hours with a 48% reduction compared to AcMNPV and in the TD of 3.87 days, 6.97%; with vSynQuit the LT50 was 86 hours, with a reduction of 45.2% compared to the wild virus and TD of 3.75 days compared with 4.43 days for wild type virus, a reduction of 15.34%. We have also shown that vSynScathL and vSynKerat were able to increase phenoloxidase activity in the hemolymph of S. frugiperda larvae compared with the wild type virus and with larvae not infected. The expression of proteases in infected larvae resulted in destruction of internal tissues late in infection, which could be the reason for the increased viral speed of kill, as observed in scanning electron microscopy for viruses vSynScathL and vSynKerat compared to the wild type virus and uninfected larvae. The enzyme assay with regenerated chitin also showed a significant chitinolytic difference with occlusion bodies of the vSynQuit compared to wild type virus . The transcription of cellular genes in hemocytes derived from infected larvae of Anticarsia gemmatalis (12 h p.i.) by Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) and/or Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) were also analyzed in this work by the representational difference analysis (RDA). Transcrits more abundants were cellular proteases, which are probably involved in insect response to viral infection. Other genes, such as hsc70 and hsp70, ribosomal proteins, aminopeptidase, beta 1.3 glucanase, protein induced by juvenile hormone, lipase were also detected. All of these transcripts can somehow play a role in cellular defense and/or establishment of viral infection. To confirm the data obtained by RDA, the hsc70 gene transcription was analyzed by real time PCR and confirmed their differential expression.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-09-25T14:21:10Z No. of bitstreams: 1 2013_MagnoRodriguesdeCarvalhoFilho.pdf: 3266869 bytes, checksum: af4ff8325e1cec5ab19c33e4b2982369 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2013-10-03T13:11:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MagnoRodriguesdeCarvalhoFilho.pdf: 3266869 bytes, checksum: af4ff8325e1cec5ab19c33e4b2982369 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T13:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MagnoRodriguesdeCarvalhoFilho.pdf: 3266869 bytes, checksum: af4ff8325e1cec5ab19c33e4b2982369 (MD5) / Trichoderma constitui um gênero de microfungos mundialmente distribuído na natureza. Nos solos, estão presentes como microorganismos de vida livre ou colonizando raízes de plantas. Podem também colonizar endofiticamente os tecidos vegetais, como simbiontes. Por apresentarem ação antagonista contra fitopatógenos, linhagens de diversas espécies desse gênero vem sendo estudadas como agentes de biocontrole de doenças de plantas, dentre as quais, o mofo branco, causado por Sclerotinia sclerotiorum, em diversas espécies vegetais. A caracterização molecular desse grupo de antagonistas tem grande importância, tanto em estudos de biodiversidade e distribuição das espécies, como na identificação de potenciais agentes de biocontrole, e de possíveis patógenos oportunistas a humanos, a exemplo de Trichoderma longibrachiatum. O objetivo desse trabalho foi identificar 148 isolados em nível de espécie, por sequenciamento das regiões ITS do DNA ribossomal e avaliar a biodiversidade desses isolados com referência à origem geográfica. Foi realizada seleção in vitro de isolados com potencial de biocontrole, os quais foram avaliados, em casa de vegetação, quanto à capacidade de supressão do mofo branco e como promotores de crescimento do feijoeiro. Os 29 isolados selecionados foram também submetidos à técnica de MALDI-TOF MS (Matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry), para confirmação das espécies, correlacionando esta técnica de identificação com a técnica molecular empregada. Filtrados de culturas do isolado CEN201, com potencial de inibição do crescimento micelial do patógeno supracitado, foram submetidos a técnicas de extração e purificação de metabólitos secundários. A capacidade de inibição do crescimento micelial de S. Sclerotiorum, por esses compostos, foi confirmada. No capítulo 1 são relatados resultados desses estudos, mostrando que 17,4% dos isolados apresentaram alto nível de antagonismos em pareamento de culturas e dois grupos apresentaram 83,3 a 88,9% de inibição micelial do patógeno por metabolitos não voláteis. Outro ponto ressaltado nesta pesquisa foi o índice de biodiversidade relativa aos 144 isolados de Trichoderma procedentes de sete estados brasileiros, que alcançou 0,076 com 11 espécies. Já o capítulo 2 relata a supressão do mofo branco com 19 dos 29 isolados selecionados in vitro no capítulo 1. Observou-se, também, promoção de crescimento de plantas de feijão com 7 isolados estudados. Foram ainda mostrados os resultados obtidos na identificação dos isolados por espectrometria de massa (MALDI-TOF MS). Esses resultados, confrontados com os dados obtidos na identificação molecular verificada no capítulo anterior, indicaram a convergência das duas técnicas, confirmando o potencial de MALDI-TOF MS como método rápido para identificação de espécies de Trichoderma. O capítulo 3 está focado nos estudos com metabólitos não voláteis produzidos pelo isolado CEN201 (T.asperellum). As técnicas utilizadas, Cromatografia líquida e MALDI-TOF MS possibilitaram, por homologia de massa/carga, inferir a presença de dois compostos com ação antibiótica, Asperelina B e Trichocompactina, no filtrado de culturas estudado. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Trichoderma composes a genus of microfungi distributed worldwide. In soil, these fungi may be present as free life or colonizing plant roots. Can also to colonize plant tissues endophytically like symbionts. Some species have been studied as biocontrol agents of plant diseases, among which, white mold caused by Sclerotinia sclerotiorum in several plant species. Their mechanisms of action include the production of secondary metabolites with antibiotic effect, mycoparasitism and competition for space and nutrients. The molecular characterization of this group of antagonists is very important, both in studies of biodiversity and species distribution and for identification of potential biocontrol agents, and possible opportunistic pathogens to humans like Trichoderma longibrachiatum. The aim of this study was to identify 148 the isolates of Trichoderma on species level by sequencing the ITS region of Ribossomal and to evaluate their biodiversity with reference to geographical originan. Was performed, in vitro, selection of isolates with potencial biocontrol, which were evaluated in greenhouse as the ability of white mold supression and as beans growth promoters. The 29 selected isolates were also subjected to the technique of MALDI-TOF MS (Matrix-assisted laser desorption / ionization-time of flight mass spectrometry) to confirm the species, correlating this technique in identification with molecular technique employed. Culture filtrates of isolate CEN 201, with potential to inhibit the mycelial growth of the pathogen above, were subjected to techniques of extraction and purification of secondary metabolites. The capacity of mycelial growth inhibition of S. Sclerotiorum by these compounds was confirmed. In chapter 1, are reported results of these studies showing that 17,4% of the isolates showed a high level of antagonism in pairing cultures and two groups showed 83,3 to 88,9% of inhibition of the pathogen by volatile metabolites. Another point emphasized in this study was the index of biodiversity on 144 Trichoderma isolates from seven Brazilian states, which reached 0,076 with 11 species. Already Chapter 2 reports the suppression of white mold with 19 of the 29 isolates selected in vitro in Chapter 1. It was observed, also, promote growth of bean plants with 7 isolates tested. Also shown are the results obtained by identification of the isolated mass spectrometry (MALDI-TOF MS). These results, compared with the data obtained in the molecular identification verified in the previous chapter showed the convergence of the two techniques, confirming the potential of MALDI-TOF MS as a rapid method for identification of Trichoderma species. The Chapter 3 is focused on studies of non-volatile metabolites produced by isolated CEN201 (T.asperellum). The techniques used, liquid chromatography and MALDI-TOF MS was enable, by homology mass/charge, to infer the presence of two compounds with antibiotic activity, Trichocompactin and Asperelin B in culture filtrates studied.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-10T21:17:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Isabela Janne de Lima.pdf: 1419581 bytes, checksum: 76718044f85ed358745363990a3659ce (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-17T18:10:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Isabela Janne de Lima.pdf: 1419581 bytes, checksum: 76718044f85ed358745363990a3659ce (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T18:10:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Isabela Janne de Lima.pdf: 1419581 bytes, checksum: 76718044f85ed358745363990a3659ce (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / CNPq / A palma forrageira, adaptada ao semiárido nordestino, está sendo ameaçada pela cochonilha do carmim. Para seu combate, uma alternativa é o controle biológico com fungos entomopatogênicos produzidos em escala comercial. Para tanto, necessita-se de um grande número de conídios viáveis. Uma vez aplicada no campo para o controle de insetos, o monitoramento dos fungos pode ser feito com o uso de marcadores moleculares, como o Inter Simple Sequence Repeats (ISSR). Os objetivos deste trabalho foram selecionar substratos potenciais para produção de biomassa de isolados do complexo de espécies Fusarium incarnatum-equiseti (FIESC) induzindo a sua esporulação e germinação e caracterizar estes isolados por meio de marcadores moleculares. Foram utilizados cinco isolados do FIESC 20-b obtidos de Dactylopius opuntiae coletados em diferentes municípios de Pernambuco. Para o cultivo dos isolados foram utilizados grãos de arroz, grão de arroz + peptona 1%, quirela de milho, quirela de milho + peptona 1%, quirela de milho + extrato de levedura 1%, farinha de palma forrageira, farinha de palma forrageira + peptona 1%, farelo de trigo, farelo de trigo + peptona 1%, torta de mamona e torta de mamona + peptona 1%. A caracterização molecular foi feita utilizando nove primers de ISSR. Dos cinco isolados, os melhores para a produção massal foram URM6779 e URM6782 nos substratos: grãos de arroz, grãos de arroz + peptona (1%), quirela de milho e quirela de milho + peptona (1%). Os isolados selecionados foram cultivados em frascos Erlenmeyer contendo grãos de arroz + fungo e armazenados a 4 e 28ºC durante um período de 90 dias. A melhor temperatura de armazenamento foi a 4ºC e os conídios permaneceram viáveis até 90 dias. Os fungos mostraram-se eficientes no controle de D. opuntiae até 90 dias de armazenamento a 4ºC. Dentre os nove primers utilizados, dois (M13 e UBC849) diferenciaram os cinco isolados estudados, podendo ser utilizados no monitoramento destes fungos no campo. / The forage palm, adapted to the northeastern semi-arid, is being threatened by carmine cochineal. For its combat, an alternative is the biological control with entomopathogenic fungi produced in commercial scale. For this, a large number of viable conidia are needed. Once applied in the field for insect control, monitoring of fungi can be done using molecular markers such as the Inter Simple Sequence Repeats (ISSR). The objectives of this work were to select potential substrates for biomass production of Fusarium incarnatum-equiseti (FIESC) isolates, inducing their sporulation and germination and characterizing these isolates by means of molecular markers. Five FIESC 20-b isolates obtained from Dactylopius opuntiae collected in different municipalities of Pernambuco were used. For the cultivation of the isolates were used rice grains, rice grain + 1% peptone, corn kernel, corn kernel + 1% peptone, corn kernel + 1% yeast extract, forage palm meal, forage palm meal + 1% peptone, wheat bran, wheat bran + 1% peptone, castor cake and castor cake + 1% peptone. Molecular characterization was performed using nine ISSR primers. Of the five isolates, the best for mass production were URM6779 and URM6782 on the substrates: rice grains, rice + peptone (1%), corn kernel and corn kernel + peptone (1%). The selected isolates were grown in Erlenmeyer flasks containing rice grains + fungus and stored at 4 and 28 ° C for a period of 90 days. The best storage temperature was 4ºC and the conidia remained viable for up to 90 days. The fungi were efficient in controlling D. opuntiae up to 90 days of storage at 4ºC. Among the nine primers used, two (M13 and UBC849) differentiated the five isolates studied, and could be used to monitor these fungi in the field.

Orientador: Benedito Carlos Benedetti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-25T15:19:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_Ester_M.pdf: 2001932 bytes, checksum: ec5a1f638b43c0b4240e4c704052f39b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Neste trabalho, foi verificado o efeito da utilização de folhas de eucalipto (Eucaliptus citriodora) e tratamento ténnico (70°C por 8 min), comparando-os com o tratamentos químicos de aplicação de inseticida (Sumithion) e expurgo (fosfina), respectivamente, no controle do inseto Acanthoscelides obtectus (Say) no feijão (Phaseolus vulgaris L.) armazenado. o feijão foi armazenado com umidade de 13,4%, em sacos de aniagem de 22 kg cada, à temperatura ambiente. Nove tratamento foram utilizados. Inicialmente, o feijão foi caracterizado através da classificação comercial e as propriedades fisicas, peso específico aparente, peso específico real, porosidade e curvas de umidade de equilíbrio. O produto foi armazenado por 8 meses e mensalmente foram realizadas análises de umidade, grau de infestação e perda de peso. A cada 2 meses foram realizadas detenninações de acidez e análise sensorial. Os resultados demonstraram que o feijão sem nenhum tipo de tratamento apresentou o maior índice de infestação. Os tratamentos ténnico e folha de eucalipto se equivalem em eficiência. Os tratamentos folha de eucalipto, expurgo e tratamento ténnico-folha de eucalipto se equivalem em eficiência. Os tratamentos ténnico-folha de eucalipto, expurgo-folha de eucalipto, inseticida, tratamento ténnico-inseticida e expurgo-inseticida também se equivalem em eficiência e foram os que se mostraram mais eficazes no controle do caruncho do feijão armazenado, sendo que o tratamento alternativo mais indicado para a conservação do produto foi o tratamento ténnico- folha de eucalipto. As folhas de eucalipto não proporcionaram alteração no sabor, porém ocasionaram um aumento no teor de umidade do feijão armazenado / Abstract: The objective of this work was to verify the use of eucalyptus leaves (Euca/iptus citriodora) and thermal treatment (70°C for 8 min) in comparison with chemical treatment using insecticide (Sumithion) and fumigation (phosphine), respectively, in the control of the insect canthosce/ides obtectus (Say) in stored beans (Phaseo/us vu/garis L.). The product was stored with 13,4% moisture content, w.b., in bags of 22 kg each, at room temperature. Nine treatments were used. lnitially, the beans were commercially classified and the physical properties true density, bulk density, porosity and equilibrium moisture content were determined. The product was stored for 8 months and once a month moisture content, infestation leveI and lose of weight were measured. At every 2 months acidity and sensory analysis were realized. The results showed that the beans with no treatment had a higher rate of infestation. The thermal and eucalyptus leaves treatments were similar in efficiency. The eucalyptus leaves, fumigation and thermal-eucalyptus leaves treatments were also similar in efficiency. The thermal treatment-eucalyptus leaves, fumigation-eucalyptus leaves, insecticide, thermal treatment-insecticide and fumigation insecticide were also similar in efficiency and showed a stronger effect in the control of stored bruchid beans. However the best altemative treatment for insect control in beans was the combination of thermal treatment-eucaliptus leaves. The product stored with eucalyptus leaves had no change in the taste of the cooked beans, but the moisture content of the beans showed some increase during the storage period / Mestrado / Pre-Processamento de Produtos Agropecuarios / Mestre em Engenharia Agrícola

Orientador: Mohamed E. M. Habib / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:03:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amaral_MariaEugeniaCarvalhodo_M.pdf: 3530173 bytes, checksum: a7928c71ba6169ea333a2d5a0c867cc7 (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: No presente trabalho, além de estudos da flutuação populacional de A. gemmatalis, foi observada e avaliada a ocorrência natural de patógenos, parasitos e predadores deste noctuídeo, durante o desenvolvimento da soja em Dourados, MS, no período de outubro/1979 a março/1980 ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: During the present research, the population dynamics of the velvetbean caterpillar, Anticarsia gemmatalis, in addition to the natural occurrence of its pathigens, parasites and predators, were studied in soybean fields in Dourados, MS, throughout the season 1979/80 ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ecologia

Orientador : Mohamed E.M. Habib / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:02:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AmaralFilho_BenedictoFerreirado_D.pdf: 9518484 bytes, checksum: f516cac3e812edab9c828b29de2e32b6 (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo estudos biológicos e patológicos de duas espécies de lepidópteros da família Pyralidae, pragas de produtos agrícolas armazenados. A biologia de Anagasta kuhniella (Zeller. 1879) e Plodia interpunctella (Hubner, 1813) foi estudada sob condições de 25 '+ ou '2 GRAUS'C, 70 '+ ou -' 10% U.R e 12 horas de fotofase. As larvas da primeira espécies foram alimentadas com dieta composta por farinha de trigo (80%) e farelo de trigo (20%), enquanto que as da segunda receberam a dieta CENA P-1. Para os estudos de patologia foram realizados esperimentos com Bacillus thuringiensis Berliner var. kurstaki (sorotipo H-3a:3b) em três formulações comerciais (Dipel , Bactospeine e Thuricide) e o isolado Zoocamp -78. Dados referentes ao tempo de duração e mortalidade natural de cada uma das fases evolutivas de cada espécie, assim como o peso médio dos indivíduos, capacidade reprodutiva e a razão sexual foram determinados. Através de parâmetros biológicos convencionais, tanto a dieta oferecida para larvas, como as condições de criação mostraram-se totalmente favoráveis à manutenção das criações dos dois piralídeos. O ciclo total de vida dos indivíduos não acasalados das duas espécies foi mais prolongado do que o dos indivíduos acasalados...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: During the present work, biological aspects and pathological approaches were investigated among two pyralid species. The biology of Anagasta kuhniella as well as that of Plodia interpuncella was studied under constant laboratory conditions of 25 '+ ou '2 GRAUS'C, 70 '+ ou -'10% and 12 hours of photoperiod. /the larvae of the first species were fed on a diet composed of wheat flour + wheat bran (4:1), while that of the second were fed on a special semi-artificial diet (CENA-P1). The development of the two species was investigated under the above mentioned conditions, obtaining data concerning egg stage (incubation period and viability) larval stage (duration time and natural mortality), pupal stage (duration time and viability), adult stage (sex ratio, longevity and reproductive capacity), in addition to the whole life cycle. Conventional biological indicators, revealed that the rearing conditions established in the present work, showed to be of great suitability for maintaining cultures od these two species in the laboratory. The whole life cycle of the unmted individuals lasted more than the mated ones, dues to the greater longevity of the unmated adults. It is probable that the longevity of mated adults in reduce due to the energy spent during the reproductive activities ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas