A abordagem imunoterapêutica do câncer tem sido cada vez mais explorada. Entre os fatores que a tornam atraente, mas também a limitam, está o uso de material antigênico do próprio paciente. Assim, pretendeu-se estabelecer condições de extração e amplificação de mRNA tumoral, como fonte renovável de antígenos. Pretendeu-se avaliar também a eficácia da vacina, com o uso de monócitos transfectados com RNA tumoral total para mimetismo das células tumorais. Diferentes concentrações (0,1 mg a 10 mg) de RNA total de SK-BR-3 e diferentes tempos (12, 24 e 48 h) foram usados para transfecção. Na avaliação do potencial linfo-estimulador dos monócitos foi usado o ensaio de proliferação linfocitária e a secreção de citocinas durante a co-cultura. Como resultado viu-se que monócitos transfectados se tornaram mais ativados e foram capazes de induzir linfoproliferação. Esses resultados indicaram ser possível o desenvolvimento de um método para avaliação das respostas celulares induzidas contra células tumorais em pacientes com câncer que foram vacinados. / The cancer immunotherapeutic approach has been increasingly exploited. Among the factors that make it attractive, but also limited, is the use of patient antigenic material. Thus, we propose to establish conditions for extraction and amplification of mRNA tumor, as renewable source of antigens. It is also intended to assess the vaccine effectiveness, using monocytes transfection with total tumor RNA for mimicry the tumor cells. Different concentrations (0.1 to 10 mg) of SK-BR-3 total RNA and different times (12, 24 and 48 h) were used in transfection. To assess the lympho-stimulator potential of transfected monocytes was used the test of lymphocyte proliferation, and cytokines secretion during co-culture. The result was that transfected monocytes became more activated and were able to induce lymphoproliferation. These results indicated that the development of a method for evaluating cellular responses induced against tumor cells in cancer patients who were vaccinated is possible.

A abordagem imunoterapêutica do câncer tem sido cada vez mais explorada. Entre os fatores que a tornam atraente, mas também a limitam, está o uso de material antigênico do próprio paciente. Assim, pretendeu-se estabelecer condições de extração e amplificação de mRNA tumoral, como fonte renovável de antígenos. Pretendeu-se avaliar também a eficácia da vacina, com o uso de monócitos transfectados com RNA tumoral total para mimetismo das células tumorais. Diferentes concentrações (0,1 mg a 10 mg) de RNA total de SK-BR-3 e diferentes tempos (12, 24 e 48 h) foram usados para transfecção. Na avaliação do potencial linfo-estimulador dos monócitos foi usado o ensaio de proliferação linfocitária e a secreção de citocinas durante a co-cultura. Como resultado viu-se que monócitos transfectados se tornaram mais ativados e foram capazes de induzir linfoproliferação. Esses resultados indicaram ser possível o desenvolvimento de um método para avaliação das respostas celulares induzidas contra células tumorais em pacientes com câncer que foram vacinados. / The cancer immunotherapeutic approach has been increasingly exploited. Among the factors that make it attractive, but also limited, is the use of patient antigenic material. Thus, we propose to establish conditions for extraction and amplification of mRNA tumor, as renewable source of antigens. It is also intended to assess the vaccine effectiveness, using monocytes transfection with total tumor RNA for mimicry the tumor cells. Different concentrations (0.1 to 10 mg) of SK-BR-3 total RNA and different times (12, 24 and 48 h) were used in transfection. To assess the lympho-stimulator potential of transfected monocytes was used the test of lymphocyte proliferation, and cytokines secretion during co-culture. The result was that transfected monocytes became more activated and were able to induce lymphoproliferation. These results indicated that the development of a method for evaluating cellular responses induced against tumor cells in cancer patients who were vaccinated is possible.

A dermatite de contato alérgica decorre de uma reação imunológica, mediada por células T, contra um contactante em pessoas previamente sensibilizadas. O exame padrão ouro para o diagnóstico da DCA é o teste de contato (TC). Infelizmente, o TC demanda tempo, não é inócuo e tem algumas limitações. O teste de proliferação linfocitária (TPL) convencional, uma alternativa ao TC, apresenta baixa sensibilidade no diagnóstico de alergia ao cromo. A fim de aprimorar a sensibilidade o resultado do teste foi obtido pela detecção de citocinas no sobrenadante das culturas e não por timidina radiomarcada. Dezoito pacientes alérgicos ao cromo e 19 controles foram testados com o teste convencional e com as citocinas IFN-?, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17 e rantes. Houve correlação entre alergia ao cromo e detecção das citocinas IFN-gama, IL-2, IL-5, IL-12 e IL-13. Dessas, os melhores resultados foram encontrados com a IL-13. O TPL pode ser utilizado como exame adicional ou alternativo no diagnóstico da DCA pelo cromo / Allergic contact dermatitis (ACD) elapses from an specific T cell immunologic reaction against an allergen in a sensitized individual. The gold standard exam to confirm ACD is the patch test (PT). However, PT demands time, has potential side efects and some limitations. The standard lymphocyte proliferation assay (LPA) has sensitivity in the diagnosis of chromium allergy. To optimize this test the results were obtained by detection of cytokines instead radiolabeled thymidine. Eighteen patients allergic to chromium and 19 controls were tested with the conventional LPA and for the following cytokines: IFN-?, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17 and rantes. Correlation between allergy to chromium and detection of IFN-gama, IL-2, IL-5, IL-12 e IL-13 was found. The best results were found with IL-13. LPA can be used as an alternative or additional test in the diagnosis of ACD by chromium.

A dermatite de contato alérgica decorre de uma reação imunológica, mediada por células T, contra um contactante em pessoas previamente sensibilizadas. O exame padrão ouro para o diagnóstico da DCA é o teste de contato (TC). Infelizmente, o TC demanda tempo, não é inócuo e tem algumas limitações. O teste de proliferação linfocitária (TPL) convencional, uma alternativa ao TC, apresenta baixa sensibilidade no diagnóstico de alergia ao cromo. A fim de aprimorar a sensibilidade o resultado do teste foi obtido pela detecção de citocinas no sobrenadante das culturas e não por timidina radiomarcada. Dezoito pacientes alérgicos ao cromo e 19 controles foram testados com o teste convencional e com as citocinas IFN-?, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17 e rantes. Houve correlação entre alergia ao cromo e detecção das citocinas IFN-gama, IL-2, IL-5, IL-12 e IL-13. Dessas, os melhores resultados foram encontrados com a IL-13. O TPL pode ser utilizado como exame adicional ou alternativo no diagnóstico da DCA pelo cromo / Allergic contact dermatitis (ACD) elapses from an specific T cell immunologic reaction against an allergen in a sensitized individual. The gold standard exam to confirm ACD is the patch test (PT). However, PT demands time, has potential side efects and some limitations. The standard lymphocyte proliferation assay (LPA) has sensitivity in the diagnosis of chromium allergy. To optimize this test the results were obtained by detection of cytokines instead radiolabeled thymidine. Eighteen patients allergic to chromium and 19 controls were tested with the conventional LPA and for the following cytokines: IFN-?, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17 and rantes. Correlation between allergy to chromium and detection of IFN-gama, IL-2, IL-5, IL-12 e IL-13 was found. The best results were found with IL-13. LPA can be used as an alternative or additional test in the diagnosis of ACD by chromium.