Resumo: A neoplasia intra-epitelial prostática (HGPIN) e a atrofia inflamatória proliferativa (PIA) são lesões potencialmente pré-malignas encontradas na próstata humana (De Marzo et aI., 1999; Bostwick e Qian, 2004). HGPIN tem sido relatada na próstata canina com características semelhantes às observadas em humanos (Waters et aI., 1997), porém a PIA ainda não foi caracterizada nesta espécie. O presente trabalho objetivou a avaliação imunoistoquímica do índice proliferativo (PCNA e Ki67), da expressão de proteínas pró-apoptose (caspase-3), genes supressores de tumores (p-53), genes inibidores de apoptose (bcl-2) e de moléculas de adesão (E-caderina), além da avaliação histoquímica do estado proliferativo (AgNOR) e da determinação de mensurações nucleares por análise quantitativa computadorizada de imagens (AQCI) em focos HGPIN, PIA e em ácinos normais da próstata canina. Considerando os resultados de ácinos normais, constatou-se que as lesões estudadas apresentam alto índice proliferativo; capacidade proliferativa no compartimento epitelial secretor; ausência de expressão de p-53; perda de expressão de E-caderina; padrão de AgNOR semelhante ao de ácinos normais; e núcleos celulares maiores e com fator de circunferência maior. Focos de PIA exibem ainda índice apoptótico semelhante ao de ácinos normais e predomínio do linfócitos T, quando considerado o infiltrado Iinfocítico. Tais achados aproximam estas duas lesões entre si e sugerem que possam estar envolvidas no processo de transformação neoplásica da próstata canina. / Abstract: Prostatic intraepithelial neoplasia (HGPIN) and proliferative inflammatory atrophy (PIA) are potentially premalignant lesions, found in human prostate (De Marzo et aI., 1999; Bostwick e Qian, 2004). HGPIN have been reported in canine prostate (Waters et aI., 1997), and share the same aspects with the humans, and PIA hadn't been described in the dogs. The aim of this work was to evaluate, by immunohistochemistry proliferative index (PCNA and KI-67), proapoptotic proteins expression (caspase 3), tumour suppressor gene (p-53), adhesion molecules (Ecadherin), histochemical proliferative status (AgNOR) and nuclear measurement by image computer quantitative analysis (AQCI) in HGPIN focus, PIA e normal acinus in canine prostate. Comparing the normal acinus results, the lesions showed higher proliferative index, secretory epithelial cells capable of proliferation, absence of p-53 expression, loss of E-cadherin expression, AgNOR patterns similar to normal acinus, cellular nucleus bigger and with higher nuclear round factor. PIA had the same apoptotic index as the normal acinus and mainly T Iymphocytes in the inflammatory infiltrate. Our findings allow us to consider these two lesions close to each other, and they may be involved in the process of neoplastic transformation of canine prostate. / Orientador: Enio Pedone Bandarra / Coorientador: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Sérgio Luis Felisbino / Banca: Ana Paula F. R. L. Bracarense / Banca: Maria Lúcia Zaidan Dagli / Doutor

Resumo: No homem e no cão, as lesões displásicas são a neoplasia intra-epitelial prostática (PIN) e a atrofia inflamatória proliferativa (PIA), as quais vêm sendo estudadas devido seu potencial pré-maligno. Diversos fatores, bem como o processo inflamatório, estão relacionados à carcinogênese prostática. A cicloxigenase-2 (COX-2) apresenta papel fundamental na resposta inflamatória e apresenta relação com o desenvolvimento do câncer de próstata. Este trabalho teve por objetivos caracterizar a proliferação e morte celular (apoptose) das células basais e secretoras do tecido prostático normal e atípico (PIA, PIN e carcinoma) dos cães, avaliar a integridade da camada de células basais por meio do anticorpo p63 e, analisar a expressão gênica de COX-2 nos diferentes componentes teciduais da PIA canina por qRT-PCR. Avaliaram-se, pela técnica de dupla marcação imunoistoquímica, os índices de proliferação e apoptose com os marcadores Ki-67 e caspase-3, respectivamente, das células secretoras (PSA positivas) e das células basais (34âE12 positivas). Para isso, foram estudadas 130 próstatas de cães adultos, inteiros e sem histórico de lesão prostática. Observou-se aumento da proliferação e diminuição da apoptose das células secretoras da PIA e do carcinoma, entretanto, as células basais apresentaram maior índice proliferativo e menor taxa de apoptose apenas nos focos de PIA. Na PIN, a proliferação celular mostrou-se mais evidente em relação à morte celular. Maior quantidade de células basais que expressaram p63 foi constatada na PIA e no carcinoma. Os focos de PIA apresentaram maior expressão gênica de COX-2 no estroma em relação às células epiteliais. Conclui-se que os compartimentos secretor e basal exibem maior proliferação celular e menor taxa apoptótica na PIA. O aumento da marcação de p63 na PIA e no carcinoma sugere participação das ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Dysplastic lesions in human and dogs are prostatic intraepithelial neoplasia (PIN) and proliferative inflammatory atrophy (PIA), which have been investigated because of their premalignant potential. Inflammatory process is related to prostate carcinogenesis. Cyclooxygenase-2 (COX-2) plays a role in the inflammatory response and is correlated with the development of prostate cancer. This study aimed to characterize the proliferation and apoptosis of basal and secretory cells of normal and atypical prostate tissue (PIA, PIN and carcinoma) of dogs, to assess the integrity of the basal cell layer through the p63 immunohistochemistry. In addition, we analyzed the gene expression of COX-2 in different tissue components of canine PIA by qRT-PCR. Immunohistochemical double staining technique was performed using Ki-67 and caspase-3 antibodies to asses cellular proliferation and apoptosis, respectively. PSA was used to characterize the secretory cells and 34âE12 to characterize the basal cells. Were analyzed 130 prostates of adult dogs with or without history of prostatic lesion. Increased proliferation and decreased apoptosis of the secretory cells of the PIA and the carcinoma was observed, however, the basal cells showed higher proliferative index and lower rate of apoptosis only in foci of PIA. PIA and carcinomas showed high expression of p63. It was observed higher gene expression of COX-2 in PIN stroma compared to epithelial cells. We conclude that basal and secretory compartments exhibit higher proliferative and lower apoptotic rate in PIA. The higher expression of p63 in PIA and carcinomas suggests involvement of the basal cells in atypical lesions of the prostate. Furthermore, the expression of COX-2 in PIA is higher in the stromal compartment, revealing important role of this enzyme in the canine prostate carcinogenesis / Orientador: Renée Laufer Amorim / Coorientador: Sérgio Luis Felisbino / Banca: Veridiana Maria Brianezi Dignani De Moura / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Maria Aparecida Custódio Domingues / Banca: Sandra Aparecida Drigo Linde / Doutor

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Lúcia Daniel Machado da Silva / Banca: Diana Magalhães de Oliveira / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Julieta Rodini Engracia de Moraes / Resumo: Quarenta e sete cães machos e não castrados foram divididos em três grupos de acordo com a faixa etária em: animais adultos jovens (grupo A), animais de meia idade (grupo B) e idosos (grupo C). Dez animais com alterações prostáticas visíveis à ultra-sonografia foram reunidos no grupo D, independentemente da idade. Os animais foram eutanasiados, submetidos à ultrasonografia transretal e excisão da glândula. Foram colhidas amostras para exame histopatológico, transcrição reversa e reação em cadeia da polimerse (RT-PCR) e imunoistoquímico. A histopatologia revelou que todos os cães dos grupos B, C e D apresentavam afecção prostática, sendo a hiperplasia prostática (HPB) a mais freqüente. A maioria dos animais apresentava mais de um tipo de afecção simultaneamente, especialmente HPB e prostatite não bacteriana. A RT-PCR foi realizada para as enzimas CPSE, PAP e PSA, obtendo-se amplificação das amostras para CPSE e PAP, mas não para o PSA. Não houve diferença significativa na quantidade de âmplicons de CPSE entre as amostras do grupo A, B e C, mas esse valor foi significativamente maior no grupo D. A quantidade de âmplicons para a PAP não variou entre os grupos. Tampouco houve correlação entre a quantidade de âmplicons para as diferentes enzimas ou entre esses valores e as dimensões prostáticas na ultra-sonografia. Observou-se imunorreação fraca e pouco extensa (++) nos tecidos prostáticos dos animais dos grupos A e B para o PSA e negativa nos grupos C e D. O tecido prostático de todos os animais apresentou marcação positiva (+++) para a PAP na parte apical do citoplasma das células epiteliais. A CPSE apresentou maiores possibilidades de utilização clínica para avaliação da próstata canina, devendo-se investigar melhor sua atividade diante de afecções prostáticas distintas. / Abstract: Forty seven intact male dogs were divided in three groups according to the age: young adults dogs (A group), middle aged dogs (B group) and old dogs (C group). Ten animals with prostatic alterations noted in ultrasonographic exam had been grouped separately (D group). The animals were submitted to euthanasia, transrectal ultrasonography and prostate gland extirpation. Samples were collected to hystopatology, immunohistochemistry and reverse transcriptase and polymerase chain reaction (RT-PCR). The histopathological exam revealed that all samples from B, C and D groups had a prostatic affection in which benign prostatic hyperplasia (BPH) associated to non-bacterial prostatitis was more often. The RT-PCR was performed to evaluate CPSE, PAP and PSA expression, the results showed positive amplification of all samples to CPSE and PAP, but not to PSA. No difference was found between the amplicons quantity of CPSE to A, B and C groups, but this quantity was higher in D group. There was no statistic difference between the amplicons levels of PAP among the groups. Non correlation was found between CPSE amplicons levels and PAP, neither between these quantities and prostatic dimensions obtained by ultrasonography. The immunoreactions was weak and little extensive (++) in prostatic tissue of animals from A and B groups to PSA and the staining was negative in samples from C and D groups. All samples presented positive staining (+++) to PAP in apical cell surface of the prostatic epithelium. CPSE was better than PAP and PSA for canine prostate diagnosis Further more researches are needed to assess the activity of CPSE in different pathology of canine prostate. / Doutor

Orientador: Júlio Carlos Canola / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Naida Cristina Borges / Banca: José Wanderley Cattelan / Banca: Aureo Evangelista Santana / Resumo: O retardamento ou a ausência do processo de consolidação óssea nas correções cirúrgicas das fraturas são situações indesejadas por cirurgiões, haja vista que às vezes se torna um problema de difícil resolução na cirúrgia ortopédica. A união óssea inicia-se imediatamente após a fratura por meio de mecanismos fisiológicos com fases bem definidas. Cada uma dessas fases é mediada por substâncias biológicas distintas específicas e indispensáveis no processo completo da neofomação óssea. Essas substâncias biológicas podem ativar ou impedir a osteogênese dependendo da sua presença, quantidade ou qualidade em cada fase da consolidação óssea. Dentre os inúmeros oteoindutores biológicos e sintéticos existentes, a próstata do cão, recentemente testada mostrou-se efetiva na estimulação da osteogênese. O presente estudo consistiu em avaliar a capacidade osteindutora da próstata do cão em ossos longos, utilizando-a na ostectomia parcial do rádio em coelhos. Os coelhos foram distribuidos em dois grupos (controle e tratado), cada qual com dois subgrupos de 30 e 60 dias, que foram submetidos a ostectomia parcial do rádio, e cujos animais do grupo tratado recebem o implante do fragmento da próstata do cão. Segundo os aspectos clínicos, radiológicos e histológicos, ao longo do tempo, após o procedimento cirúrgico, os resultados sugerem que a próstata induz a osteogênese, e que seu uso nas cirurgias ortopédicas poderá ser uma ferramenta importante no auxílio à consolidação óssea. / Abstract: The retardation or absence of the process of bone healing in the surgical corrections of the fractures are situations not desired for surgeons, has seen that the times if it becomes a problem of dificult in the orthopaedic surgery. The bone healing immediately initiates after the fracture by means of physiological mechanisms with well defined phases. Each one of these phases is mediated by specific and indispensable distinst substances biological in the complete process of the new bone formation. These biological substances can activate or hinder the osteogenesis depending on its presence, amount or quality in each phase the bone helding. Amongst the innumerale existing biological and syntheticosteoinductors, the prostate of the dog, recently tested reveled effective in the simulation of osteogenesis. The present study in consisted of evaluating the osteinduction capacity of the prostate of the dog in long bones, using it in the partial radius ostectomy in rabbits. The rabbits had been divided in two groups (control and treated) and four sub-groups, had been submitted the partial radius ostectomy, whwere they had received the implantation of the dog prostate pieces. After the surgery had been evaluated by clinical, radiography and histological examination. The results had demosntred that prostate induces osteogenesis, and thatits use in the orthopaedics surgeries could bean important tool in the aid of the bone healing. / Doutor

Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Antonio Carlos Alessi / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Resumo: A próstata é o único órgão sexual acessório no cão e as afecções prostáticas são comuns em cães adultos a idosos. A história clínica, anamnese, sinais clínicos e exames complementares, como a radiografia, ultra-sonografia, citologia e a histopatologia auxiliam no diagnóstico, embora o diagnóstico definitivo se fundamenta no exame histopatológico da próstata. Neste estudo, 11 animais da espécie canina, machos, adultos, não castrados e hígidos foram submetidos à punção aspirativa com agulha fina guiada por ultra-som para avaliação citológica e, após, um mínimo sete dias, utilizou-se da videolaparoscopia para obtenção de fragmento prostático para avaliação histopatológica. Nos exames citológicos, dois animais apresentaram alterações celulares compatíveis com hiperplasia prostática benigna. Durante as videolaparoscopias, a colheita do fragmento prostático foi realizada de maneira rápida, não sendo observada hemorragia significativa após o procedimento. Os animais não apresentaram nenhuma complicação no período pós-operatório. Verificou-se, aos exames histopatológicos, morfologia e estrutura celulares e teciduais nos padrões normais do parênquima prostático, em nove animais; os dois restantes apresentaram alterações celulares e teciduais sugestivas de hiperplasia prostática benigna. / Abstract: The prostate is the only sexual accessory gland in the male dog. The prostate diseases are common in adult and geriatric dogs. The clinical history, anamnesis, clinical signs and complementary exams, as radiography, ultrasonography, cytology and histopathology are helpful for the diagnosis, despite the definitive diagnosis is based on prostate histopathologic exams. In this study, 11 healthy intact male dogs were submitted to ultrasound fine needle aspirative puncture for cytologic exam and after, at least 7 days later, by videolaparoscopic fragment collection for further histopathologic evaluation. On cytologic exams, two animals presented changes which correlates with benign prostatic hyperplasia. During the videolaparoscopic proceedings, the prostate fragment collections were made in a quick way and no important hemorrhagic lost has been seen after the collection. The animals presented no complication after the surgeries. The histopathologic exams showed normal prostate parenchyma based on the cellular and tissue morphology and structure in 9 dogs, and the others 2 presented cellular and tissue changes suggesting benign prostatic hyperplasia. / Mestre

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Maria Isabel de Mello Martins / Resumo: A hiperplasia prostática benigna (HPB) tem início no animal com um a dois anos de idade, sendo que 80% dos cães com cinco anos apresentam evidências histológicas de sua presença. A fisiopatologia da doença não está totalmente compreendida, no entanto, a diidrotestosterona é o principal hormônio envolvido. Recentemente, o efeito da toxina botulínica A (TB-A) foi investigado na próstata, mostrando que esta induz atrofia do parênquima e redução do volume. Como o cão é o único animal doméstico que apresenta esta alteração, este se apresenta como modelo experimental para novos estudos da HPB humana. Com base nisso, este estudo objetivou fornecer informações acerca dos efeitos da TB-A sobre a próstata, libido e qualidade do sêmen, comparando os dados com animais orquiectomizados. Para tanto, 18 cães adultos, com evidências ultra-sonográficas de HPB foram submetidos à castração ou administração de 250 ou 500 U de TB-A, e avaliados durante 16 semanas. A orquiectomia mostrou-se um excelente tratamento para a HPB, promovendo redução de 80% do volume prostático. Aplicação da TB-A não ocasionou alterações significativas na libido, ereção ou qualidade e características seminais. Efeitos locais e sistêmicos também não foram observados. Administração de 250 U da TB-A promoveu redução máxima de 9,4% do volume prostático, entretanto, tal redução não foi significativa. Por outro lado, a administração de 500 U de TB-A reduziu significamente as variáveis comprimento, altura e volume da próstata. Desta forma, o presente ensaio contribui de forma singular e inovadora para o conhecimento dos efeitos desta nova modalidade de tratamento na HPB canina. / Abstract: Benign prostatic hyperplasia (BPH) starts the development in animals aging about 1 - 2 years. 80% of 5 years-old dogs have histologic evidences of BPH. Despite the little knowledge concerning about this disease, dihydrotestosterone is the main involved hormone. Recently, the effect of botulinum toxin A (BT-A) on rat and human prostate was investigated, and prostatic parenchyma atrophy and decrease in glandular volume were observed. The dog is one of a few animals that can develop BPH spontaneously and is frequently used as an animal model for human prostatic hyperplasia. Based on that, this study aimed to provide information on BT-A effects on prostate, libido and semen quality, in comparison to orchiectomized dogs. For that, 18 adults dogs, with Ultrasonographic evidences of BPH were submitted to orchiectomy or administration of 250 or 500 U of BT-A, and evaluated along 16 weeks. Orchiectomy presented excellent results on BPH, reducing the prostate volume up to 80%. Administration of BT-A did not significantly interfered on libido, erection or semen characteristics. Local and systemic effects also were not observed. Administration of 250 U of BT-A has promoved a maximum decrease of 9,4% on prostatic volume. However, this reduction was not statistically significant. On the other hand, 500 U of BTA administration has shown to significantly reduce the length, height and volume of prostate. This way, the present study is an innovative and singular contribution for the knowledge of the effects of BT-A on canine prostate. / Mestre