Made available in DSpace on 2014-10-09T12:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:58:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A Leishmaniose Visceral Humana (LVH) é uma protozoonose sistêmica grave que tem apresentado mudança no comportamento epidemiológico, com uma tendência crescente no Brasil. Na Região Norte, com a criação do Estado do Tocantins em 1989, houve aumento da incidência de LV em decorrência das modificações ecoepidemiológicas. Foi realizado um estudo descritivo de corte transversal para avaliar o quadro da LVH no município de Araguaína (TO) no período de janeiro de 2007 a agosto de 2010. Adicionalmente, foram realizados ensaios para comparar as abordagens diagnósticas sorológicas para o diagnóstico da doença. Na distribuição dos casos de LVH nos municípios do norte do estado do Tocantins, Araguaína representa 79,8% no total dos casos no período de 2.007 a agosto de 2.010. Os resultados deste estudo revelaram que, nesse período, 769 casos foram confirmados, sendo que 98,7% foram de casos novos. Houve um predomínio do sexo masculino de 57,8% e a faixa etária mais acometida foi a de 0 a 14 anos, com 71,3% dos casos notificados. Na distribuição por zona de residência, foram notificados 98,5% dos casos na zona urbana, mostrando a urbanização da doença. Nos ensaios, foram utilizadas uma abordagem usual da rede do SUS: um ensaio de imunofluorescência indireta (IFI), um ELISA convencional, somados a um ELISA dissociativo. Os ensaios de ELISA apresentaram alta reprodutibilidade. Os pacientes positivos à IFI apresentaram uma frequência de 4% de falso-positivos quando testados em ambos os ELISA. Entre os pacientes suspeitos, houve uma alta frequência de positivos ao ELISA, maior no ELISA dissociativo do que no ELISA convencional. Na população assintomática, houve um achado de amostras positivas ao ELISA dissociativo. A presença de imunocomplexos em pacientes assintomáticos no início da doença ou sua presença em pacientes com resposta humoral menos intensa, como crianças, pode explicar estes achados de maior positividade no ELISA dissociativo. A confirmação destes resultados depende da pesquisa parasitológica em pacientes positivos ao ELISA dissociativo. Estes resultados mostram a importância de novas abordagens sorológicas no diagnóstico da LVH que viabilizariam uma triagem de paciente para diagnóstico parasitológico invasivo. / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:27:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Leishmanioses são um complexo de doenças infecciosas causadas por protozoários intramacrofágicos do gênero Leishmania, fatal se não tratadas adequadamente. Os antimoniais pentavalentes são os medicamentos de primeira escolha para o tratamento, apesar de sua toxicidade e seu mecanismo de ação pouco esclarecido. Uma terapia mais eficaz pode ser conseguida pelo direcionamento de fármacos antileishmania para os locais de infecção. Os lipossomas são vesículas lipídicas que promovem melhora na eficácia e na ação de fármacos na célula alvo. Os lipossomas são capturados preferencialmente pelas células do sistema mononuclear fagocitário (SMF). O objetivo deste estudo foi desenvolver uma formulação de antimoniato de meglumina lipossomal, constituído por fosfatidilserina e estudar sua farmacocinética em animais sadios para esclarecer seu metabolismo e distribuição. As análises quantitativas de antimônio em lipossomas demonstram que Análise por Ativação Neutrônica foi a técnica mais sensível com cerca de 100 % de precisão. Todas as formulações de lipossomas apresentaram um tamanho de diâmetro médio de 150 nm. A determinação da CE50 em macrófagos infectados mostrou que as formulações de antimoniato de meglumina encapsulado em lipossomas foram entre 10 - 63 vezes mais eficazes do que a fármaco livre, indicando maior índice de seletividade. Por microscopia de fluorescência, foi verificada uma maior internalização de lipossomas fluorescentes em macrófagos infectados durante um curto tempo de incubação em comparação com macrófagos não infectados. A biodistribuição do antimoniato de meglumina irradiado encapsulado em lipossomas contendo fosfatidilserina mostrou que a formulação lipossomal promoveu um direcionamento seletivo do antimônio para tecidos do SMF, além do que manteve as doses elevadas nos órgãos por um período prolongado. Em conclusão, estes dados sugerem que o antimoniato de meglumina encapsulado em lipossomas apresentou maior eficácia do que a fármaco não lipossomal contra a infecção por Leishmania. O desenvolvimento de formulações lipossomais pode ser uma nova alternativa para a quimioterapia de doenças infecciosas, especialmente Leishmanioses, já que são usados como sistemas carreadores para entrega sustentada e direcionada de fármacos ao local da infecção. / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:42:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 06121.pdf: 5715540 bytes, checksum: ca3626a80eb62b032ade08a2bfe344c4 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Orientador: Edson Aparecido Abdul Nour / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Civil, Arquitetura e Urbanismo / Made available in DSpace on 2018-08-25T02:32:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_GuilhermeAugustoda_M.pdf: 2678513 bytes, checksum: 34afef846ff5c1c96bb5c9b85443853c (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O presente estudo monitorou um sistema combinado anaeróbio-aeróbio com o objetivo de caracterizar a microfauna contida na biomassa aderida do reator aeróbio e determinar sua correlação com variáveis físicas e químicas, além de avaliar a redução da toxicidade do afluente do sistema para as espécies Vibrio fischeri e Girardia tigrina. O tratamento de esgoto com características sanitárias foi realizado por sistema em escala piloto constituído por filtro anaeróbio (FA), com volume de 300 L, seguido de biofiltro aeróbio submerso (BAS), com volume de 150 L, ambos preenchidos com meio suporte, seguidos de um decantador (DEC) com volume de 50 L. O sistema está instalado nas dependências do Laboratório de Protótipos de Tratamento de Águas e Efluentes (LABPRO) da FEC/UNICAMP. A pesquisa foi dividida em 4 etapas que se diferenciaram pela razão de recirculação entre efluente tratado e o efluente bruto que alimentava o sistema. Na etapa 1 (E1) não houve recirculação, ou seja, razão 0, na etapa 2 (E2) a razão foi de 1,5, na etapa 3 (E3) de 3,0 e na etapa 4 (E4) de 4,0. Foram monitorados 5 pontos de coleta no sistema: P1-esgoto bruto, P4- altura de 40 cm no BAS, P6-altura de 140 cm no BAS, P7-altura de 200 cm no BAS e P8-esgoto tratado. Foram coletadas amostras semanalmente para caracterização da microfauna e determinação das variáveis físicas e químicas, enquanto que os testes de toxicidade foram realizados 3 vezes em cada etapa sendo um no início, um no meio e outro no fim da etapa. A correlação foi estabelecida entre os grupos componentes da microfauna ¿ ciliados predadores de flocos (CPF), ciliados livre natantes (CLN), ciliados fixos (CF), amebas (AMB), flagelados (F) e micrometazoários (MTZ) ¿ e variáveis físicas e químicas tais como pH, temperatura, oxigênio dissolvido, nitrogênio amoniacal, nitrito, nitrato, demanda química de oxigênio (DQO), dentre outras. Na E1 foi encontrada correlação negativa entre o grupo F e as variáveis pH, alcalinidade parcial, alcalinidade total e nitrogênio amoniacal em P4. Em P7 foi determinada correlação positiva entre o grupo CF e pH, alcalinidade parcial, alcalinidade total, NTK e nitrogênio amoniacal, e correlação negativa com nitrato. Na E2 no ponto P4 foi possível correlacionar positivamente o grupo MTZ com nitrato, e negativamente com alcalinidade parcial. O grupo CLN foi correlacionado positivamente com nitrogênio amoniacal, NTK e DBO, e negativamente com nitrito e nitrato em P7. Na E3 o grupo CLN do P7 apresentou correlação positiva com pH, alcalinidade parcial e DBO, e negativa com oxigênio dissolvido e nitrato. Na E4 não foram obtidas correlações significantes para os pontos P4 e P6. Já em P7, o grupo AMB foi correlacionado positivamente com NTK. O esgoto bruto que alimentou o sistema apresentou toxicidade em todas amostras coletadas tanto para Vibrio fischeri quanto para Girardia tigrina. Para o organismo Vibrio fischeri todos os valores de CE50 determinados para o efluente tratado foram considerados não tóxico em cada etapa. Para Girardia tigrina ocorreu uma redução gradual da toxicidade do esgoto tratado ao longo de E1, E2 e E3, e não foi observada toxicidade em E4. P7 se mostrou como o melhor ponto para caracterização da microfauna devido à maior frequência dos grupos da microfauna, além de gerar maior número de correlações com as variáveis do que os pontos P4 e P6. Além disso, foi possível concluir que o sistema combinado foi considerado eficiente na redução de toxicidade para as espécies utilizadas de acordo com os parâmetros de operação aplicados ao sistema / Abstract: This study monitored an anaerobic-aerobic combined system aiming to characterize the microfauna contained in the aerobic reactor biomass and to determine its correlation to physical and chemical variables; it also aimed to asses the wastewater toxicity reduction of the system to the Vibrio fischeri and Girardia tigrina species. The treatment of wastewater with sanitary characteristics was accomplished by a pilot-scale system using an anaerobic filter (AF - 50 L) followed by a submerged aerobic biofilter (SAB - 150 L), both filled with support media, and a clarifier (50 ¿ L). The system is installed at the Laboratório de Protótipos de Tratamento de Águas e Efluentes (LABPRO) from FEC/UNICAMP. The research was divided into 4 stages that differentiate from each other by the recirculation ratio of treated effluent over affluent in the system. In stage 1 (S1), there was no recirculation, so the recirculation ratio was 0. In stage 2 (S2), the ratio was 1,5; in stage 3 (S3), the ratio was 3,0 and in stage 4 (S4), the ratio was 4,0. Five sample points were monitored in the system: P1 ¿ raw wastewater, P4 ¿ 40 cm height in SAB, P6 ¿ 140 cm height in SAB, P7 ¿ 200 cm height in SAB, and P8 ¿ treated wastewater. Samples were collected weekly for microfauna characterization and determination of physical and chemical variables, while toxicity essays were conducted 3 times at each stage: one at the start of the stage, one in the middle of the stage, and the last one at the end of the stage. The correlation was established between the groups that constitute microfauna ¿ crawling ciliates (CC), free swimming ciliates (FSC), sessile ciliates (SC), testae amobae (TA), flagellates (F) and micrometazoa (MTZ), as well as physical and chemical variables, such as pH, temperature, dissolved oxygen, chemical oxygen demand (COD), and others. In S1, negative correlation was established between group F and the variables pH, partial alkalinity, total alkalinity and ammonia nitrogen for P4. In P7, positive correlation was determined between group SC and ph, partial alkalinity, total alkalinity, TKN and ammonia nitrogen, and negative correlation to nitrate. In S2 for P4, it was possible to positively correlate the group MTZ to nitrate, and negatively to partial alkalinity. The group FSC correlated positively to ammonia nitrogen, TKN and BOD, and negatively to nitrite and nitrate in P7. In S3, the FSC group of P7 correlated positively to pH, partial alkalinity and BOD, and negatively to dissolved oxygen and nitrate. In S4, no significant correlation was found for P4 and P6. For P7, the TA group showed positive correlation to TKN. The raw wastewater that fed the system was determined as toxic to all samples collected to Vibrio fischeri and Girardia tigrina. For the organism Vibrio fischeri, all CE50 values determined for treated wastewater were considered nontoxic in every stage. For Girardia tigrina, a gradual toxicity reduction occurred for treated wastewater during S1, S2, and S3, but in S4, all samples were nontoxic. From the results, P7 showed to be the best point for microfauna characterization due to the bigger frequency of microfauna groups in this point and because it generated more significant coefficients that correlated to variables than points P4 and P6. In addition, the combined system is considered efficient when it comes to reducing toxicity for the species used according to the operation parameters applied in the system / Mestrado / Saneamento e Ambiente / Mestre em Engenharia Civil

Trypanosomes are protozoans, of which many are parasitic, and possess complex lifecycles which alternate between mammalian and arthropod hosts. As is the case with most organisms, molecular chaperones and heat shock proteins are encoded within the genomes of these protozoans. These proteins are an integral part of maintaining the structural integrity of proteins during normal and stress conditions. Heat shock protein 40 (Hsp40) is a co-chaperone of heat shock protein 70 (Hsp70) and in some cases can act as a chaperone. These proteins work together to bind non-native polypeptide structures to prevent unfolded protein aggregrate formation in times of stress, translocate proteins across organelle membranes, and transport unsalvageable proteins to proteolytic degradation by the cellular proteasome. Hsp40s are divided into four types based on their domain structure. Analysis of the nuclear genomes of eight trypanosomatid species revealed that less than 10 of the approximate 70 Hsp40 sequences per genome were Type 1 Hsp40s, many of which contained putative orthologues in the other seven trypanosomatid genomes. One of these Type 1 Hsp40s from T b. brucei, Trypanosoma brucei DnaJ 2 (Tbj2), was functionally characterised in T brucei brucei. RNA interference knockdown of expression in T brucei brucei showed that cells deficient in Tbj2 displayed a severe inhibition of the growth of the cell population. The levels of the Tbj2 protein population in T brucei brucei cells increases after exposure to 42°c and the protein was found to have a generalized cytoplasmic subcellular localization at 37°c. These findings provide evidence that Tbj2 is an orthologue of Yeast DnaJ 1 (Y dj l), an essential S. cerevisiae protein. Hsp40s interact with their partner Hsp70s through their J-domain. The amino acids of the J-domain important for a functional interaction with Hsp70 were examined in Trypanosoma cruzi DnaJ 2 (Tcj2) (the orthologue of Tbj2) and T cruzi DnaJ protein 3 (Tcj3) by testing their ability to substitute for Y dj l in Saccharomyces cerevisae and for DnaJ in Escherichia coli. In both systems, the positively charged amino acids of Helix II and III of the J-domain disrupted the functional interaction of these Hsp40s with their partner Hsp70s. Substitutions in Helix I and IV of the J-domains of Tcj2 and Tcj3 produced varied results in the two different systems, possibly suggesting that these helices serve to define with which Hsp70s a given Hsp40 can interact. The inability of an Hsp40 and an Hsp70 to interact functionally does not necessarily mean a total absence of physical interaction between these proteins. The amino acid substitution of the histidine in the HPD motif (H34Q) of the J-domain of Tcj2 and Tcj3 removed the ability of these proteins to interact functionally with S. cerevisiae Hsp70 (Ssal) in vivo. However, preliminary binding studies using the quartz crystal microbalance with dissipation monitoring (QCM-D) show that Tcj2 and Tcj2(H34Q) both physically interact with M sativa Hsp70 in vitro. This study is the first report to provide evidence that certain trypanosoma! Type 1 Hsp40s are essential proteins. Futhermore, the interaction of these Hsp40s with Hsp70 identified important features of the functional interface of this chaperone machinery.

Surveys of human intestinal protozoa in the United States have been confined mostly to Eastern sections of the country and to the Pacific coast. There has been little work done concerning these parasites in western mountain states, and no previous surveys have been made of these organisms in the Intermountain West. It is important that the kinds oand numbers of these parasitic protozoa be dtermined for this locality; and it is only through surveys that the harmful, as well as the commensal, intestinal protozoa can be determined and treated. In 1933, teh city of Chicago experienced a general epidemic of amoebic dysentry, believed to be caused by a Endameba histolytica carrier. The seriousness of this epidmic led to the realization that the amoebic dysentary of the tropics could occur in tempearte regions. It is one of the purposes of surveys to recognized the incidence of pathogenic protozoa, with the purpose of averting possible epidemics of dysentary, diarrhea and other minor intestinal disturbances.

Immunoelectrophoresis revealed an antigen-antibody response between 4 day metabolic products and 8, 12 and 16 day sera and between 4 day trypanosomal extract and 16 day serum. Metabolic products from trypanosomes incubated at room temperature do not appear to be antigenic. The limitations of immunodiffusion are discussed in reference to the results. It is suggested that some of the antibodies to metabolic products may be of the precipitating type while others are not. Since a faint reaction also occurred between 4 day trypanosomal extract and 16 day serum, it may be concluded that metabolic products contribute to only a portion of the antibody response of the rat and are by no means the exclusive agents. They possibly work in conjunction with other metabolics within or on the surface of the trypanosome.

The purpose of the work leading to the writing of the thesis was two fold: (1) to survey birds of Northern California for hemoprotozoa of the genera Haemoproteus, Leucocytozoon, and Trypanosoma, and (2) to construct an up-to-date check-list of the Haemoproteus, Leucocytozoon, and Trypanosoma parasites of birds of North America.

The overall aim of this study was to provide new and updated information about subterranean termite morphology and digestive physiology. Scanning electron microscopy was used to obtain high resolution images of morphological features of the termite cuticle not discernable by light microscopy. In addition, digital scanning electron micrographs clearly show the appearance of wood particles recovered from the termite digestive tract at different stages of digestion. The ability of termites to obtain and conserve nitrogen in their diet was demonstrated by establishing whether the insect can digest chitin, as well as from determination of levels of soluble proteins and uric acid in the feces. Finally, a technique for determining the efficiency of cellulosic food digestion was tested. Scanning electron microscope images of alate abdomens showed similar appearance of cuticular structures between two subterranean termite species. In addition, the high magnification of electron microscopy allowed for identification of a pair of cuticular structures in the vicinity of the female genitalia that had not been reported from previous light microscope studies. Scanning electron microscopy also revealed the appearance of wood undergoing degradation as it traverses worker termite digestive tract, showing detail not possible from light microscope images. Adult workers of a native termite species were found to produce the enzymes needed to digest chitin, a nitrogen containing polysaccharide ingested by termites. Specific activity of chitinase was subsequently determined to establish the efficiency of chitin digestion for the termite species tested. As termites are coprophagous, significant levels of proteins measured from the feces demonstrated an additional potential dietary nitrogen source. Uric acid was generally found to be absent from termite feces, however. Digestive efficiency of wood cellulose could not be determined for Formosan termites due to the inability to obtain sufficient feces for quantification of undigested food contained in it. Previous studies of Formosan termite digestive efficiency did not address difficulty in obtaining feces for assay. Therefore, interpretation of data from earlier studies of Formosan termite digestive efficiency should be viewed with caution.

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