Gliomas são os mais comuns e devastadores tumores primários do sistema nervoso central. Os nucleotídeos da adenina são moléculas sinalizadoras no meio extracelular, envolvidas em importantes condições fisiológicas e patológicas. O ATP, neurotransmissor excitatório, e a adenosina, neuromoduladora, entre outros efeitos, podem induzir proliferação celular em linhagens de gliomas. Os eventos induzidos pelos nucleotídeos extracelulares são controlados pela ação das E-NTPDases, que hidrolisam o ATP até adenosina extracelularmente. Recentes estudos epidemiológicos têm sugerido que os flavonóides derivados da dieta, em particular a quercetina, apresentam um papel benéfico em prevenir ou inibir a tumorigênese. Assim, primeiramente nós avaliamos o efeito antiproliferativo da quercetina em linhagem de glioma humano U138MG. O estudo demonstrou que este flavonóide induziu em cultura de gliomas: (1) diminuição da proliferação e da viabilidade celular; (2) morte celular via necrose e apoptose; (3) parada no ciclo celular na fase G2 e (4) diminuição do índice mitótico. Além disso, nós demonstramos que a quercetina, enquanto promoveu regressão tumoral, protegeu culturas organotípicas hipocampais do dano isquêmico. Em conjunto, esses dados sugerem que a quercetina exibe efeitos antiproliferativos direcionados para as células tumorais e reduzida citotoxicidade para células normais, características altamente desejáveis na quimioterapia. Dados do nosso laboratório demonstram que o metabolismo extracelular das purinas encontra-se alterado em linhagens de gliomas com relação a culturas de astrócitos, sugerindo que mudanças no sistema purinérgico podem ser uma característica dos gliomas que potencialmente podem contribuir para o seu fenótipo de malignidade. Assim, o passo seguinte desse trabalho foi investigar o perfil de secreção dos derivados da adenina, o metabolismo extracelular do AMP e a ação da quercetina sobre o sistema purinérgico. As culturas de glioma apresentaram secreção de ATP, o qual foi detectado em maiores níveis com relação as outras moléculas avaliadas, ADP, AMP, adenosina e inosina. O AMP extracelular foi eficientemente metabolizado pelos gliomas, demonstrando uma ecto-5’-NT/CD73 muito ativa. Adicionalmente, quercetina interagiu com o sistema purinérgico, inibindo não-competitivamente a atividade da ecto-5’-NT/CD73 e modulando negativamente a sua expressão. Nós sugerimos que a inibição da atividade da ecto-5’-NT/CD73 pode resultar em um decréscimo na disponibilidade de adenosina extracelular, uma promotora tumoral. Tal efeito pode estar correlacionado com a inibição da proliferação promovida pela quercetina nessa linhagem de glioma. Nossos dados sugerem que a quercetina pode ter uma função importante na inibição da proliferação dos gliomas, atuando em diferentes vias de sinalização, incluindo o sistema purinérgico. Assim, esse estudo abre novas perspectivas para as potenciais aplicações dos flavonóides na prevenção e tratamento de tumores cerebrais.

Resumo não disponível

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Gliomas são os mais comuns e devastadores tumores primários do sistema nervoso central. Os nucleotídeos da adenina são moléculas sinalizadoras no meio extracelular, envolvidas em importantes condições fisiológicas e patológicas. O ATP, neurotransmissor excitatório, e a adenosina, neuromoduladora, entre outros efeitos, podem induzir proliferação celular em linhagens de gliomas. Os eventos induzidos pelos nucleotídeos extracelulares são controlados pela ação das E-NTPDases, que hidrolisam o ATP até adenosina extracelularmente. Recentes estudos epidemiológicos têm sugerido que os flavonóides derivados da dieta, em particular a quercetina, apresentam um papel benéfico em prevenir ou inibir a tumorigênese. Assim, primeiramente nós avaliamos o efeito antiproliferativo da quercetina em linhagem de glioma humano U138MG. O estudo demonstrou que este flavonóide induziu em cultura de gliomas: (1) diminuição da proliferação e da viabilidade celular; (2) morte celular via necrose e apoptose; (3) parada no ciclo celular na fase G2 e (4) diminuição do índice mitótico. Além disso, nós demonstramos que a quercetina, enquanto promoveu regressão tumoral, protegeu culturas organotípicas hipocampais do dano isquêmico. Em conjunto, esses dados sugerem que a quercetina exibe efeitos antiproliferativos direcionados para as células tumorais e reduzida citotoxicidade para células normais, características altamente desejáveis na quimioterapia. Dados do nosso laboratório demonstram que o metabolismo extracelular das purinas encontra-se alterado em linhagens de gliomas com relação a culturas de astrócitos, sugerindo que mudanças no sistema purinérgico podem ser uma característica dos gliomas que potencialmente podem contribuir para o seu fenótipo de malignidade. Assim, o passo seguinte desse trabalho foi investigar o perfil de secreção dos derivados da adenina, o metabolismo extracelular do AMP e a ação da quercetina sobre o sistema purinérgico. As culturas de glioma apresentaram secreção de ATP, o qual foi detectado em maiores níveis com relação as outras moléculas avaliadas, ADP, AMP, adenosina e inosina. O AMP extracelular foi eficientemente metabolizado pelos gliomas, demonstrando uma ecto-5’-NT/CD73 muito ativa. Adicionalmente, quercetina interagiu com o sistema purinérgico, inibindo não-competitivamente a atividade da ecto-5’-NT/CD73 e modulando negativamente a sua expressão. Nós sugerimos que a inibição da atividade da ecto-5’-NT/CD73 pode resultar em um decréscimo na disponibilidade de adenosina extracelular, uma promotora tumoral. Tal efeito pode estar correlacionado com a inibição da proliferação promovida pela quercetina nessa linhagem de glioma. Nossos dados sugerem que a quercetina pode ter uma função importante na inibição da proliferação dos gliomas, atuando em diferentes vias de sinalização, incluindo o sistema purinérgico. Assim, esse estudo abre novas perspectivas para as potenciais aplicações dos flavonóides na prevenção e tratamento de tumores cerebrais.

Orientadora : Maria Suely Soares Leonart / Co-orientadores : Aguinaldo José do Nascimento e Tomoe Nakashima / Dissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da Saúde / Resumo: O eritrócito humano maduro, quando submetido à sobrecarga oxidativa por condições patológicas do eritrócito ou por agentes oxidantes pode apresentar depleção de glutationa reduzida (GSH), um dos responsáveis pelo sistema de defesa antioxidante do eritrócito; oxidação da molécula de hemoglobina; e agregação de complexos de ferro junto à membrana. Tais conseqüências podem ocasionar anormalidades na membrana eritrocitária e hemólise. Este trabalho tem por objetivo, estudar a ação antioxidante dos flavonóides quercetina e rutina, e de extrato hidroalcoólico de Vitis virtifera (EHV), em eritrócitos humanos normais, submetidos à sobrecarga oxidativa, in vitro, induzida por agentes oxidantes como terc-butilhidroperóxido (TBH) ou cloridrato de fenil-hidrazina (CF). Coletou-se sangue venoso de 12 indivíduos com idades entre 18 e 40 anos e considerados saudáveis, em EDTAK3. Lavou-se os eritrócitos em tampão fosfato 28 mM, NaCl 123 mM, pH 7,4 três vezes por centrifugação a 1220 x g, ressuspendendo-os até volume globular de cerca de 40 %. Submeteu-se os eritrócitos, pré incubados ou não com quercetina 100 (xM, à ação oxidante de CF 0,5 mM durante 15 minutos e; pré-incubados ou não com quercetina, rutina ou extrato hidroalcoólico de Vitis virtifera, à ação oxidante de TBH (0,5 - 5 mM), durante 0 a 30 minutos. Realizou-se a determinação da concentração de GSH [BEUTLER, Red cell metabolism, 1984], da formação de metahemoglobina (MetHb) [EVELYN; MALLOY, JJBioLChem., 126: 655, 1938], modificado por BEUTLER (1995) e realizou-se a contagem de corpos de Heinz (CH) segundo técnica preconizada por BEUTLER et ai [J.Lab.&Clin.Méd., 45: 40, 1955], modificado por CLARO (2002). Observou-se uma diminuição da concentração de GSH (4,0-0,1 nmoles/ g Hb) proporcional ao aumento da concentração de TBH (0,5 - 1,0 mM). A formação de MetHb aumentou (8 - 35 %) assim como a de CH (2 -16 %), em função da concentração de TBH (0,5 - 5 mM). A incubação com quercetina 100 pM (10 - 30 minutos) preveniu parcialmente a formação de GSH (0,25 -1,3 junoles/g Hb) induzida por TBH 1 mM. Quercetina (2 - 20 JIM) preveniu parcialmente a formação de CH (7,5 - 6,7 %) induzida por TBH 3 mM. Em amostras oxidadas por CF 0,5 mM, a quercetina 10 - 120 pM preveniu parcialmente a formação de MetHb (4 - 3,6 %). A rutina 100 (xM preveniu parcialmente a depleção de GSH (0,4 pmoles/g Hb) por TBH (0 pmoles/g Hb). A rutina (40 - 140 jiM) preveniu parcialmente a formação de CH (7,6 - 4,9 %) induzida por TBH 3 mM (9,0 %). O EHV (0,1 mg/ml) preveniu parcialmente a depleção de GSH (4,4 ±0,1 jimoles/g Hb) induzida por TBH 0,5 mM enquanto que EHV (0,5 - 1,0 mg/ml) preveniu quase que na totalidade a depleção de GSH (7,4 ± 0,4 e 7,3 ±0,1 (imoles/ g Hb, respectivamente) induzida por TBH 0,5 mM. O EHV (1,0 - 5,0 mg/ml) preveniu parcialmente a formação de CH (6,4 - 4,0 %) induzida por TBH 3 mM. A associação entre quercetina 100 pM e mesilato de desferrioxamina 4 mM, inibiu parcialmente a formação de MetHb (30 ± 1,2 %) induzida por TBH 5 mM. Os resultados sugerem que, nas concentrações testadas, a quercetina é parcialmente eficaz contra a sobrecarga oxidativa promovida por CF. O estresse oxidativo promovido por TBH foi parcialmente prevenido na presença de quercetina, rutina ou EHV. / Abstract: The mature human erythocytes, submitted to oxidative stress under pathological conditions or by oxidizer agents can present: depletion of reduced glutatione (GSH), responsible for the antioxidant defense system of the erythocytes, oxidation of the hemoglobin molecule, or aggregation of complexes of iron close to the membrane. These can cause abnormalities in the membrane and hemolysis. The aim of this work was to study the antioxidative action of the flavonoids quercetin and rutin, and of hydroalchoolic extract of Vitis vinifera (HEV), in human erythocytes submitted to the oxidative stress, induced by oxidizer agents fert-butylhydroperoxide (TBH) or phenylhydrazine hydrochloride (PH), in vitro. Venous blood was collected in EDTAK3 from 12 healthy individuals with ages between 18 and 40 years. The erythocytes was washed three times under centrifugation at 1220 x g, in 28 mM phosphate buffer, pH 7.4, and 123 mM NaCL, and ressuspended at a final globular volume of 40%. The erythocytes was then preincubated with 100 jiM quercetine and then submitted to the oxidizer action of 0.5 mM PH for 15 min and, preincubated with quercetin, rutin and hydroalchoolic extract of Vitis vinifera, to the oxidizer action of TBH (0.5 - 5 mM), for up to 30 min. The concentration of GSH was determinate [BEUTLER, Red cell metabolism, 1984], the methemoglobin (MetHb) was monitored [EVELYN; MALLOY, J.BioI.Chem., 126: 655, 1938], modified by BEUTLER et at. (1995) and tiie Heinz bodies (HB) was evaluated acording to BEUTLER et al. [J.Lab.&CIin.Med,, 45: 40, 1955], modified by CLARO (2002). A concentration decrease of GSH was observed (4.0 - 0.1 jimoles /g Hb) as a function of the increase of the concentration of TBH (0.5 - 1.0 mM). The formation of MetHb (8 - 35 %) and HB (2 -16 %), increased as a function of the TBH concentration (0.5 - 5 mM). The incubation with 100 (iM quercetin (10 - 30 min) partially prevented the GSH formation (0.25 - 1.3 jimoles/g Hb) induced by 1 mM TBH. Quercetin (2 - 20 pM) partially prevented HB formation (7.5 - 6.7 %) induced by 3 mM TBH. Erythrocyte samples oxidized by 0.5 mM PH and treated with 10 - 120 jiM quercetin had the formation of MetHb (4 - 3.6%) partially prevented. The 100 pM rutin partially prevented the depletion of GSH (0.4 junoles/g Hb) in the absence of TBH. The rutin (40 - 140 pM) partially prevented the formation of HB (7.6 - 4.9 %) induced by 3 mM TBH (9.0 %). HEV (0.1 mg/ml) partially prevented the depletion of GSH (4.4 ± 0.1 jimoles/g Hb) induced by 0.5 mM TBH while HEV (0.5 - 1.0 mg/ml) almost prevented the totally depletion of GSH (7.4 ± 0.4 and 7.3 ± 0 . 1 junoles/g Hb, respectively) induced by 0.5 mM TBH. HEV (1.0 - 5.0 mg/ml) partially prevented the formation of HB (6.4 - 4.0 %) induced by 3 mM TBH. The association of 100 JIM quercetin and 4 mM deferrioxamine mesilate, partially inhibited the formation of MetHb (30 ± 1.2 %) induced by 5 mM TBH. The results suggest that quercetin, at the used concentrations was partially effective against the oxidative stress promoted by PH. The erythrocyte oxidative stress promoted by TBH was partially prevented in the presence of quercetin, rutin and HEV.

Orientador: Maria Stella Gonçalves Raddi / Banca: Mariza Landgraf / Banca: Karina Ferrazzoli Devienne / Resumo: Esse estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito da concentração subinibitória de quercetina sobre alguns fatores relacionados à virulência de Staphylococcus aureus (ATCC 25923). A atividade antibacteriana foi determinada através do método de microdiluição em caldo e a concentração de 40μg/mL de quercetina foi utilizada como sub-inibitória. O sobrenadante de culturas de S. aureus em BHI contendo quercetina diminuiu a atividade hemolítica para hemácias de carneiro mas não alterou a atividade de citolisinas extracelulares para células de linhagem contínua (células McCoy B ATCC 1696) quando comparado com o sobrenadante da cultura na ausência do flavonol. O efeito da quercetina na fagocitose do S. aureus por polimorfonucleares neutrófilos (PMN) foi determinado através de técnica quimiluminescente. O burst oxidativo de PMN foi estatisticamente significativo para bactérias tratadas em relação às não tratadas, demonstrando que S. aureus crescidos na presença de quercetina tornam-se menos susceptíveis à fagocitose. A inibição da expressão de fatores relacionados à adesão bacteriana foi evidenciada através dos experimentos de fagocitose/adesão em microscopia óptica (1.000x). Mesmo que a quercetina, abaixo da concentração inibitória, tenha pouco efeito sobre a viabilidade de S. aureus, o conhecimento de que esse flavonol é capaz de alterar a adesão de estafilicocos à superfície celular parece ser atrativo para a sua utilização como profilático em processos infecciosos, visto que a adesão é o primeiro passo na patogênese da infecção bacteriana. Entretanto, deve-se considerar sua interferência com a atividade de células fagocíticas, uma importante função do sistema imune do hospedeiro. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effects of quercetin at sub-inhibitory concentration on some Staphylococcus aureus (ATCC 25923) factors related to the virulence. The antibacterial activity of quercetin was evaluated by broth microdilution method and the concentration of 40 μg/mL was used as sub- inhibitory. S. aureus BHI culture supernatant containing quercetin reduced the hemolytic activity for sheep erythrocytes but did not exhibit a detectable change in cytolysin extracellular activity on continuous cell lines (McCoy B cells ATCC 1696) when compared with quercetin-free medium. The effect of quercetin-grown staphylococci phagocytosis by polymorphonuclear neutrophils (PMN) was compared with the effect on non-treated bacteria by chemiluminescence assay. The level of oxidative burst of PMN was statistically different in untreated versus quercetin-treated bacteria showing that druggrown cells became less susceptible to phagocytic uptake. The inhibition of expression of factors related bacterial adhesion was established though adesion/phagocytosis experiments by optical microscopy (1.000x). Even if quercetin at low level has little effect on S. aureus viability, the knowledge that this flavonol is able to affect the properties of staphylococci adherence to cell surfaces may be an attractive advance for its applications as prophylactic in infectious process, considering that bacterial adherence is the initial event in the pathogenesis of bacterial infection. Conversely, it also interferes with the activities of phagocytic cells, an important function of host immune system. / Mestre

Gliomas são os mais comuns e devastadores tumores primários do sistema nervoso central. Os nucleotídeos da adenina são moléculas sinalizadoras no meio extracelular, envolvidas em importantes condições fisiológicas e patológicas. O ATP, neurotransmissor excitatório, e a adenosina, neuromoduladora, entre outros efeitos, podem induzir proliferação celular em linhagens de gliomas. Os eventos induzidos pelos nucleotídeos extracelulares são controlados pela ação das E-NTPDases, que hidrolisam o ATP até adenosina extracelularmente. Recentes estudos epidemiológicos têm sugerido que os flavonóides derivados da dieta, em particular a quercetina, apresentam um papel benéfico em prevenir ou inibir a tumorigênese. Assim, primeiramente nós avaliamos o efeito antiproliferativo da quercetina em linhagem de glioma humano U138MG. O estudo demonstrou que este flavonóide induziu em cultura de gliomas: (1) diminuição da proliferação e da viabilidade celular; (2) morte celular via necrose e apoptose; (3) parada no ciclo celular na fase G2 e (4) diminuição do índice mitótico. Além disso, nós demonstramos que a quercetina, enquanto promoveu regressão tumoral, protegeu culturas organotípicas hipocampais do dano isquêmico. Em conjunto, esses dados sugerem que a quercetina exibe efeitos antiproliferativos direcionados para as células tumorais e reduzida citotoxicidade para células normais, características altamente desejáveis na quimioterapia. Dados do nosso laboratório demonstram que o metabolismo extracelular das purinas encontra-se alterado em linhagens de gliomas com relação a culturas de astrócitos, sugerindo que mudanças no sistema purinérgico podem ser uma característica dos gliomas que potencialmente podem contribuir para o seu fenótipo de malignidade. Assim, o passo seguinte desse trabalho foi investigar o perfil de secreção dos derivados da adenina, o metabolismo extracelular do AMP e a ação da quercetina sobre o sistema purinérgico. As culturas de glioma apresentaram secreção de ATP, o qual foi detectado em maiores níveis com relação as outras moléculas avaliadas, ADP, AMP, adenosina e inosina. O AMP extracelular foi eficientemente metabolizado pelos gliomas, demonstrando uma ecto-5’-NT/CD73 muito ativa. Adicionalmente, quercetina interagiu com o sistema purinérgico, inibindo não-competitivamente a atividade da ecto-5’-NT/CD73 e modulando negativamente a sua expressão. Nós sugerimos que a inibição da atividade da ecto-5’-NT/CD73 pode resultar em um decréscimo na disponibilidade de adenosina extracelular, uma promotora tumoral. Tal efeito pode estar correlacionado com a inibição da proliferação promovida pela quercetina nessa linhagem de glioma. Nossos dados sugerem que a quercetina pode ter uma função importante na inibição da proliferação dos gliomas, atuando em diferentes vias de sinalização, incluindo o sistema purinérgico. Assim, esse estudo abre novas perspectivas para as potenciais aplicações dos flavonóides na prevenção e tratamento de tumores cerebrais.

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Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-04-08T14:18:03Z No. of bitstreams: 2 Tese de Doutorado PG Cadena.pdf: 7224941 bytes, checksum: 9dbb9e9f76c68050e2d3c57ee60adf6f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T14:18:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese de Doutorado PG Cadena.pdf: 7224941 bytes, checksum: 9dbb9e9f76c68050e2d3c57ee60adf6f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / FACEPE; CNPq; UFPE / Várias moléculas naturais são agentes potenciais para o tratamento da obesidade e outras doenças relacionadas ao acúmulo de gordura subcutânea, sendo o desoxicolato de sódio (SDC ou DCA) bastante usado desde 2001. Outras moléculas de origem natural também foram descobertas com efeitos sobre a inibição da adipogênese em pré-adipócitos e indução de apoptose em adipócitos maduros. Recentemente descobriu-se que flavonoides como a quercetina (QUE) e resveratrol (RES) apresentam esta desejada ação apoptótica e antiadipogênica em tecido adiposo comprovado por estudos in vitro em células humanas. Entretanto estas moléculas podem apresentar elevada toxicidade como o SDC e baixa biodisponibilidade devido ao caráter hidrofóbico como QUE e RES. Diante do exposto a nanotecnologia farmacêutica, através de lipossomas, pode apresentar-se como uma alternativa para superar estas limitações. Esta Tese tem por objetivo a obtenção de um produto à base de uma formulação lipossomal em escala nanométrica para administração por via subcutânea contendo desoxicolato de sódio, quercetina e resveratrol livres e/ou complexados a ciclodextrinas. Um método de complexação de sais biliares, como o SDC e o ácido ursodesoxicólico (UDCA), em ciclodextrinas foi desenvolvido e usado na determinação destas substâncias. O SDC também foi usado como um dos constituintes de lipossomas elásticos para a nanoencapsulação de QUE e RES. O aumento da temperatura causou variações nas absorbâncias em todos os complexos de inclusão, entretanto, 20-30 °C foi encontrado o melhor intervalo para a determinação dos ácidos biliares. A temperatura causou um efeito negativo na constante de equilíbrio resultando em valores altamente negativos de entalpia (β-CD-DCA: -10,25 ± 1,48 e β-CD-UDCA: -12,47 ± 0,96 kJ.mol-1) e valores positivos de entropia (β-CD-DCA: 50,31 ± 4,74 e β-CD-UDCA: 43,42 ± 3,12 J.mol-1). Em todos os casos, as reações de complexação competitiva foram espontâneas. Os complexos de inclusão foram estáveis por 12 dias tendo um tempo de meia vida de 68,71 dias para o DCA e 294,71 dias para a determinação do UDCA. O método foi validado pela metodologia da ANVISA e EMEA apresentando limites de detecção e de quantificação de 3,94x10-5mol.L-1 e 1,31x10-4mol.L-1 para o DCA e 4,08x10-5mol.L-1 e 1,36x10-4mol.L-1 para o UDCA, respectivamente. Amostras dos ácidos biliares foram determinadas em formulações farmacêuticas com variação de 4% para o DCA e 1% para o UDCA. A reação de complexação competitiva também foi aplicada na construção de sensores químicos. A melhor formulação lipossomal produzida reduziu o uso de fosfatidilcolina e colesterol em 17,7% e 68,4%, respectivamente, em relação às primeiras formulações produzidas. Os lipossomas tiveram um diâmetro médio de 149 nm com índice de polidispersão de 0,3. O potencial zeta dos lipossomas foi negativo (-13,1 mV) devido à presença do SDC na bicamada lipídica. A eficiência de encapsulação de QUE e RES nos lipossomas foi maior que 97%. A cinética de liberação de QUE e RES a partir dos lipossomas também foi estudada havendo liberação controlada por mais de 50 h e liberação máxima de 96% para QUE e RES. Foi possível nanoencapsular 23 vezes (4620 μM) mais flavonoides que a concentração (100 μM) reportada na literatura que apresenta efeitos apoptóticos e antiadipogênicos. Podemos concluir que as formulações lipossomais elásticas produzidas são adequadas para a injeção subcutânea, podendo proporcionar uma nova estratégia para redução de gordura subcutânea.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9506_1.pdf: 7017684 bytes, checksum: aff515c7450e1ff68320e1a2966f015c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Várias moléculas naturais são agentes potenciais para o tratamento da obesidade e outras doenças relacionadas ao acúmulo de gordura subcutânea, sendo o desoxicolato de sódio (SDC ou DCA) bastante usado desde 2001. Outras moléculas de origem natural também foram descobertas com efeitos sobre a inibição da adipogênese em pré-adipócitos e indução de apoptose em adipócitos maduros. Recentemente descobriu-se que flavonoides como a quercetina (QUE) e resveratrol (RES) apresentam esta desejada ação apoptótica e antiadipogênica em tecido adiposo comprovado por estudos in vitro em células humanas. Entretanto estas moléculas podem apresentar elevada toxicidade como o SDC e baixa biodisponibilidade devido ao caráter hidrofóbico como QUE e RES. Diante do exposto a nanotecnologia farmacêutica, através de lipossomas, pode apresentar-se como uma alternativa para superar estas limitações. Esta Tese tem por objetivo a obtenção de um produto à base de uma formulação lipossomal em escala nanométrica para administração por via subcutânea contendo desoxicolato de sódio, quercetina e resveratrol livres e/ou complexados a ciclodextrinas. Um método de complexação de sais biliares, como o SDC e o ácido ursodesoxicólico (UDCA), em ciclodextrinas foi desenvolvido e usado na determinação destas substâncias. O SDC também foi usado como um dos constituintes de lipossomas elásticos para a nanoencapsulação de QUE e RES. O aumento da temperatura causou variações nas absorbâncias em todos os complexos de inclusão, entretanto, 20-30 °C foi encontrado o melhor intervalo para a determinação dos ácidos biliares. A temperatura causou um efeito negativo na constante de equilíbrio resultando em valores altamente negativos de entalpia (β-CD-DCA: -10,25 ± 1,48 e β-CD-UDCA: -12,47 ± 0,96 kJ.mol-1) e valores positivos de entropia (β-CD-DCA: 50,31 ± 4,74 e β-CD-UDCA: 43,42 ± 3,12 J.mol-1). Em todos os casos, as reações de complexação competitiva foram espontâneas. Os complexos de inclusão foram estáveis por 12 dias tendo um tempo de meia vida de 68,71 dias para o DCA e 294,71 dias para a determinação do UDCA. O método foi validado pela metodologia da ANVISA e EMEA apresentando limites de detecção e de quantificação de 3,94x10-5mol.L-1 e 1,31x10-4mol.L-1 para o DCA e 4,08x10-5mol.L-1 e 1,36x10-4mol.L-1 para o UDCA, respectivamente. Amostras dos ácidos biliares foram determinadas em formulações farmacêuticas com variação de 4% para o DCA e 1% para o UDCA. A reação de complexação competitiva também foi aplicada na construção de sensores químicos. A melhor formulação lipossomal produzida reduziu o uso de fosfatidilcolina e colesterol em 17,7% e 68,4%, respectivamente, em relação às primeiras formulações produzidas. Os lipossomas tiveram um diâmetro médio de 149 nm com índice de polidispersão de 0,3. O potencial zeta dos lipossomas foi negativo (-13,1 mV) devido à presença do SDC na bicamada lipídica. A eficiência de encapsulação de QUE e RES nos lipossomas foi maior que 97%. A cinética de liberação de QUE e RES a partir dos lipossomas também foi estudada havendo liberação controlada por mais de 50 h e liberação máxima de 96% para QUE e RES. Foi possível nanoencapsular 23 vezes (4620 μM) mais flavonoides que a concentração (100 μM) reportada na literatura que apresenta efeitos apoptóticos e antiadipogênicos. Podemos concluir que as formulações lipossomais elásticas produzidas são adequadas para a injeção subcutânea, podendo proporcionar uma nova estratégia para redução de gordura subcutânea