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Variabilidade genética e variação das regiões heterocromáticas em linhagens de Triatoma infestans (Heteroptera : Reduviidae) /Mendonça, Priscila Pasqüetto. January 2014 (has links)
Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Alba Regina de Abreu Lima / Banca: João Aristeu da Rosa / Banca: Luiz Carlos de Mattos / Banca: Lilian Madi-Ravazzi / Resumo: A doença de Chagas é uma enfermidade de natureza endêmica, com pronunciada relevância na América do Sul. Um dos principais vetores do Trypanosoma cruzi, causador desta enfermidade, é o triatomíneo Triatoma infestans. Apesar de ter sua incidência reduzida, novos casos de reinfestação apontam a dificuldade do controle vetorial sobre esta espécie devido às suas características biológicas e genéticas, indicando, assim, a importância de se compreender a variabilidade genética neste inseto. No presente trabalho, foi elaborada uma revisão com o objetivo de reunir e organizar os dados disponíveis relacionados à variabilidade genética em T. infestans, permitindo eleger os principais e mais informativos genes, assim como evidenciar os índices de variabilidade intra-populacional e inter-populacional. Complementarmente, foi estudada a variação das regiões heterocromáticas, por meio da citogenética clássica e molecular. A aplicação da técnica de bandamento-C convencional e o uso de fluorocromos em nove linhagens e a técnica de hibridização in situ fluorescente (FISH), com sondas específicas para regiões de DNA satélite em oito linhagens, permitiram observar a grande variação existente na quantidade e distribuição dessas regiões. Os resultados confirmaram a existência de dois grupos com notáveis diferenças genômicas, diferenciadas, principalmente, pela perda de material genético nas linhagens nãoandinas. A variabilidade intraespecífica observada pelas análises citogenéticas revelou uma extraordinária dinâmica genômica que ocorreu durante a dispersão desta espécie / Abstract: Chagas disease is an endemic illness of great relevance in South America. Within the triatomines, Triatoma infestans is one of the most important vectors of Trypanosoma cruzi, the causative protozoan of this disease. Its incidence is controlled, but new cases of reinfestation still occur, and they indicate the difficulties of vector control for this species due to its biological and genetic characteristics. Thus, it is important to understand the genetic variability of this species of insect. In this study, we present a review of the literature in order to gather and organize the data available on genetic variability of T. infestans. This review made it possible for us to elect the most appropriate genes and highlight the rates of intra-population and inter-population variability. The variation in the heterochromatic regions was also studied using classical and molecular cytogenetics. The application of the conventional C-banding technique combined with the use of fluorochromes in nine strains, as well as the application of the fluorescent in situ hybridization technique (FISH) with specific probes for regions of DNA satellite in eight strains, all together revealed the existence of noteworthy variation in the amount and distribution of these regions. The results confirmed the existence of two groups with remarkable genomic differences, which are distinguished mainly by the loss of genetic material in non-Andean lineages. The intraspecific variability observed through cytogenetic analysis revealed the extraordinary genomic dynamics that occurred during the dispersion of T. infestans / Doutor
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Estudo citogenético e imunocitoquímico em Triatomíneos (Heteroptera, Reduviidae) /Borgueti, Adauto de Oliveira. January 2013 (has links)
Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Grasiela de Campos Dias Severi Aguiar / Banca: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Resumo: Os triatomíneos, insetos hematófagos estritos em todas as fases da vida, conhecidos popularmente como "barbeiros" ou "chupanças", pertencem à subfamília Triatominae (Heteroptera - Reduviidae) e são importantes vetores da doença de Chagas. Os interesses nos estudos desses insetos não se limitam apenas a questão médico-sanitária, pois em termos citogenéticos, também são de grande importância. Além disso, a sistemática e relações filogenéticas dos triatomíneos têm sido pautadas em análises morfológicas formando um quadro de conflitos taxonômicos. Assim, por meio da descrição cariotípica de T. baratai sugerimos que dados citogenéticos sejam incorporados aos sistemas de classificação dos triatomíneos. Também foi analisada a diversidade de bandas produzidas com o uso de enzimas de restrição AluI (AG ↓ CT) e Hae III (GG ↓ CC) nas espécies de T. tibiamaculata, T. protacta e T. platensis, alojadas em três diferentes complexos. Os dados obtidos mostraram padrões semelhantes em cromossomos autossômicos e sexuais e comportamentos ora distintos ora semelhantes em núcleos interfásicos. O estudo da proteína nucleolar fibrilarina, por meio de técnicas de imunofluorescência, foi realizada para verificar sua presença no corpo cromatoide, estrutura citoplasmática próximo do envoltório nuclear, de T. platensis e T. rubrovaria. Os dados obtidos no presente estudos aliados com outras técnicas auxiliarão na compreensão da biologia desses vetores da doença de Chagas / Abstract: The triatomine hematophagous insects strict at all stages of life, popularly known as "kissing bugs" or "chupanças" belong to the subfamily Triatominae (Heteroptera - Reduviidae) and are important vectors of Chagas disease. The interests in the studies of these insects are not limited to medical and health issue, because in terms cytogenetic, are also of great importance. Moreover, the systematic and phylogenetic relationships of the insects have been guided by morphological analyzes forming a taxonomic framework of conflict. Thus, by describing karyotype of T. baratai suggest that cytogenetic data are incorporated into the rating systems of the insects. Also analyzed the diversity of bands produced with the use of restriction enzymes AluI (AG ↓ CT) and Hae III (GG ↓ CC) on the species T. tibiamaculata, T. protacta and T. platensis, housed in three different complexes. The information obtained showed similar patterns in autosomal chromosomes and sexual behavior and sometimes different now similar in interphase nuclei. The study of nucleolar protein fibrillarin, by means of immunofluorescence was performed to verify its presence in chromatoid body, cytoplasmic structure near the nuclear envelope, T. platensis and T. rubrovaria. The information obtained in this study combined with other techniques will help understand the biology of these vectors of Chagas disease / Mestre
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Síntese e avaliação biológica de novos compostos das séries LAPDESF FUR-PQ E LAPDESF FUR-TS contra Trypanosoma cruzi /Chiba,Diego Eidy January 2015 (has links)
Orientador: Chung Man Chin / Coorientador: Priscila Longhin Bosquesi / Banca: Rafael Victorio Carvalho Guido / Banca João aristeu da Rosa / Resumo: A doença de Chagas, também conhecida como Tripanossomíase Americana, causada pelo parasita hemoflagelado Trypanosoma cruzi, é tipicamente endêmica em países das Américas Central e Latina, mas devido ao processo de migração, a doença já atinge outros países como Estados Unidos e alguns países europeus. Estima-se que haja aproximadamente 7 - 8 milhões de pessoas infectadas no mundo e mais de 25 milhões correm risco de infecção. Os fármacos aprovados para o tratamento da doença são o benznidazol e o nifurtimox, ambos ativos somente na fase aguda da doença. No Brasil, apenas o benznidazol está disponível na terapêutica. Neste sentido, o presente projeto propõe a obtenção de duas séries de compostos. A série 1 é constituída de sete derivados inéditos híbridos de furoxanos e primaquina. Já a série 2 constitui-se de seis derivados inéditos bioisósteros de nitrofural, substituindo o núcleo nitrofurânico pelo núcleo furoxânico. Os derivados furoxânicos apresentam a capacidade de doação de NO, propriedade anti-inflamatória e tem demonstrado atividade antiparasitária interessante. A primaquina é um fármaco antimalárico, que foi previamente avaliado e demonstrou potencial atividade tripanossomicida. Foram obtidos seis derivados furoxânicos intermediários e caracterizados por espectrometria de infravermelho (IV) e por Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e seis compostos finais, sendo caracterizados por espectrometria de infravermelho (IV) e por Ressonância Magnética Nuclear (RMN). Os compostos finais obtidos foram avaliados quanto a atividade tripanossomicida em formas epimastigotas e amastigotas, a capacidade de doação de óxido nítrico e quanto a mutagenicidade in vivo. Os compostos apresentaram boa atividade tripanossomicida contra as formas epimastigotas e também se mostraram não mutagênicos no ensaio realizado. / Abstract: Chagas disease, also known as American trypanosomiasis, caused by the hemoflagellate parasite Trypanosoma cruzi, is typically endemic in countries of Central and Latin America. However, due to the migration process, this disease has already reached other countries like the United States and some European countries. It is estimated that there are approximately 7 - 8 million people infected worldwide and more than 25 million are at risk of infection. The drugs approved for the treatment are benznidazole and nifurtimox, both active only in the acute phase of the disease. In Brazil, only benznidazole is available. Due to the above, this project proposes to obtain two series of compounds. The Series 1 consists of seven new compounds derived from furoxanos and primaquine. The second series consists of six new bioisosters of nitrofurazone, replacing the nitrofuran group with furoxan. Furoxans derivatives have the ability to donate NO, anti-inflammatory properties and have shown interesting anti-parasitic activity. Primaquine is an antimalarial drug, which was previously demonstrated to have potential trypanocidal activity. Six furoxans intermediates and six finals derivatives were synthesized and characterized by infrared spectrometry (IR) and Nuclear Magnetic Resonance (NMR). Was evaluated the trypanocidal activity against epimastigote form of T. cruzi, the capability of NO donation and the mutagenicity in an in vivo assay. They presented good activity against epimastigote forms of parasite and show no mutagenicity in the in vivo assay. / Mestre
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