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Expressão dos transcritos do receptor de LH em células da granulosa de fêmeas nelore submetidas ou não à superestimulação ovarianaFernandes, Paulo [UNESP] 07 August 2008 (has links) (PDF)
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fernandes_p_dr_botfmvz.pdf: 525710 bytes, checksum: d101803790fb9aa88818f17ca9c56bde (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Objetivou-se com o presente trabalho avaliar a expressão das isoformas (M1 a M4) do receptor de LH (LHR) em células da granulosa de folículos 8,5 mm de diâmetro obtidos de novilhas cíclicas (grupo NC) ou de vacas superestimuladas (grupo VSE), na raça Nelore. As novilhas cíclicas (n=4) foram submetidas à sincronização da ovulação e em seguida monitoradas por ultra-sonografia transretal, até serem abatidas no terceiro ou quinto dia após a ovulação. As vacas do grupo VSE (n=5) foram submetidas à superestimulação ovariana (protocolo P-36 modificado) e ovariectomizadas 36 horas após a remoção da fonte de progesterona. A expressão das isoformas do LHR (M1 a M4) foram calculadas como valores relativos à expressão do GAPDH. Verificou-se menor expressão do gene do LHR no grupo VSE quando comparado ao grupo NC (6,5±0,35 e 28,96±0,4, respectivamente; Bonferroni, p<0,02). Quando os dados dos grupos NC e VSE foram analisados conjuntamente, obteve-se maior expressão das isoformas M1 (27,22±0,19) e M3 (28,37±0,22) quando comparadas com as isoformas M2 (6,46± 0,38) e M4 (5,05±0,43, Bonferroni, p<0,02). No grupo NC, a expressão do LHR foi mais intensa nos folículos coletados no quinto dia (12 mm de diâmetro, 38,1±0,03) quando comparados aos obtidos no terceiro dia (8,75 mm, 22,6±0,03, Bonferroni, p<0,01) após a ovulação. Estes resultados são indicativos de que o tratamento superestimulatório com Folltropin® em vacas Nelore diminuiu a expressão do LHR nas células da granulosa, aumentou as concentrações intrafoliculares de progesterona, reduziu a razão E2/P4, e que a expressão das isoformas M1 e M3 foi mais abundante do que as M2 e M4 tanto nas novilhas cíclicas quanto nas vacas superestimuladas. / The aim of the present work was to evaluate in the Nelore breed the gene expression of LH receptor isoforms (M1 to M4) in granulosa cells of follicles 8.5 mm diameter from cycling heifers (CH) and superestimulated cows (SC). The cycling heifers (n=4) were submitted to synchronization of ovulation and afterwards evaluated by transrectal ultrasonography until the third and fifth days after ovulation, when the animals were slaughtered to obtain the ovaries and follicles. The SC group (n=5) were submitted to ovarian superstimulation (modified Protocol P-36) and ovariectomized 36 hours after removal of progesterone source. The results of the isoforms expression (M1 to M4) were calculated as GAPDH expression. There was a lower expression of LH receptor gene in SC group as compared to CH group (6.50±0.35 and 28.96±0.40, respectively, Bonferroni, p<0.02). When data of both groups were analyzed together, there was a higher expression of M1 (27.22±0.19) and M3 (28.37±0.22) isoforms when compared to M2 (6.46± 0.38) and M4 (5.05±0.43, Bonferroni, p<0.02). In CH group, LHR expression was more intense in follicles obtained in the fifth day (12 mm diameter, 38.1±0.03) when compared to those obtained on third day (8.75 mm, 22.6±0.03, Bonferroni, p<0.01) after ovulation. The results indicated that superstimulatory treatment with FSH in Nelore cows decreased LH receptor expression in granulosa cells, it increased the concentrations progesterone intrafolliculares, it reduced the reason E2/P4, and that M1 and M3 isoforms expression were more abundant than M2 and M4 in both cycling and superstimulated animals.
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Avaliação da biometria testicular, concentração plasmática de hormônios e minerais em bovinos Nelore variedade Mocha dos 12 aos 24 meses de idadeLezier, Dorça Helena [UNESP] January 2003 (has links) (PDF)
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lezier_dh_dr_botfmvz.pdf: 1066792 bytes, checksum: 3af5f3b732eb7f5741a6be203c09c6a6 (MD5) / No presente trabalho foram utilizados 55 bovinos Nelore variedade Mocha, criados sob condições extensivas, visando avaliar a biometria testicular, as concentrações plasmáticas de hormônio luteinizante, testosterona, triiodotironina, tiroxina e os teores de cobre e zinco, e o efeito da época do ano (seca e chuva) sobre estas características, dos 12 aos 24 meses de idade. Para as medidas testiculares foi utilizada fita métrica e a colheita de sangue foi realizada por venopunção, em tubos de vacutainer heparinizados. Após a centrifugação, o plasma foi armazenado a –20ºC para posterior análise hormonal e mineral. Os valores médios do perímetro escrotal, altura, largura dos testículos direito e esquerdo e o peso dos animais foram de: 24,91 ± 2,81 cm, 8,74 ± 1,04 cm; 4,68 ± 0,61 cm; 8,75 ± 1,10 cm, 4,66 ± 0,62 cm e 304,35 ± 1,30 Kg, respectivamente. As concentrações médias plasmáticas dos hormônios luteinizante, testosterona, triiodotironina e tiroxina foram de√0,25 ± 0,08 ng/dL ou 0,07 ± 0,08 ng/mL, 168,04 ± 95,70 ng/mL, 1,31 ± 0,12 ng/dL e 0,25 ± 0,07 μg/dL, respectivamente. Os teores médios de cobre e zinco foram de 0,29 ± 0,01 mg/L e 0,27 ± 0,01 mg/L respectivamente. O perímetro escrotal, altura e largura dos testículos direito e esquerdo, os hormônios luteinizante , testosterona, triiodotironina e tiroxina e os minerais cobre e zinco mostraram efeito significativo, p<0,01, para idade dos 12 aos 24 meses. O zinco apresentou diferença significativa, p<0,01, para época do ano (inverno e verão /seca e chuva). / In the present work 55 polled Nelore bovines were used, raised under extensive conditions, aiming to evaluate testicular biometry, plasmatic concentrations of luteinizant hormone, testosterone, triiodothyronine, thyroxine and copper and zinc concentration and the effect of season (draught and rain) over these characteristics, from 12 to 24 months old.It was used scrotal tape for the testicle measurement and the blood samples were obtained by jugular venopunction in heparinized vacun tubes. After the centrifugation, the plasma was storaged at –20ºC until hormonal and mineral assays. The average values of scrotal perimeter, height, right and left testicles width and weight of animals were: 24.91 cm, 8.74 cm, 4.68 cm, 8.75 cm, 4.66cm and 304.35 kg, respectively. Average plasmatic concentrations of square root hormones of luteinizant hormone, testosterone, triiodothyronine and thyroxine were 0.25 ± 0.08 ng/dL, 168.04 ± 95.70 ng.mL, 1.31 ± 0.12 ng/dL and 0.25 ± 0.07 μg/dL, respectively. Average concentration of copper and zinc were 0.29 ± 0.01 mg/L and 0.27 ± 0.01 mg/L, respectively. Scrotal perimeter, right and left testicles height and width, luteinizant hormones, testosterone, triiodothyronine and thyroxine and the minerals copper and zinc showed significant effect, p<0.01, for age from 12 to 24 months old. Zinc presented significant difference, p<0.01, for season (draught and rain).
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Identficação de marcadores moleculares para a competência ovocitária em células do cumulus bovinas / Identification of molecular markers for oocyte competence in bovine cummulus cellsCordeiro, Danielle de Moura 01 December 2011 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências Animais, 2011. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-06-04T14:12:02Z
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2011_DanielledeMouraCordeiro.pdf: 2937868 bytes, checksum: 909e8d93696d4ebec413e667cf5b1f95 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2012-06-05T20:47:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2011_DanielledeMouraCordeiro.pdf: 2937868 bytes, checksum: 909e8d93696d4ebec413e667cf5b1f95 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-05T20:47:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2011_DanielledeMouraCordeiro.pdf: 2937868 bytes, checksum: 909e8d93696d4ebec413e667cf5b1f95 (MD5) / As células do cumulus exercem um importante papel durante o crescimento do ovócito, maturação, ovulação e fecundação e, portanto, influenciam a qualidade do ovócito. Com o objetivo de identificar genes diferencialmente expressos em células do cumulus (CC) bovinas foi realizado a análise de microarranjo, utilizando complexos cumulus-ovócitos (COCs) com diferentes graus de competência. Para isso foi utilizado o modelo do tamanho de folículo em que COCs competentes foram recuperados de folículos ?8,1 mm e incompetentes de folículos de 1-3 mm de diâmetro. Nessa análise, foram identificados 4.178 genes diferencialmente expressos (P<0,05) nas duas categorias de CCs. Dentre os genesdiferencialmente expressos utilizou-se um critério de corte adicional em que somente aqueles com 2,5x foldpara mais ou menos foram considerados. Foi, então, gerada uma lista preliminar de 143 genes mais expressos e 80 genes menos expressos em CCs de folículos competentes em relação aos incompetentes, que poderiam possivelmente estar envolvidos com a aquisição da competência ovocitária. Esses genes foram investigados de acordo com suas respectivas funções celulares e a maioria deles foi classificada como relacionados às funções do ciclo celular, ovulação e inflamação, reparo de DNA, metabolismo de energia, metabolismo de aminoácidos, sinalização celular e meiose. Três vias molecularesenvolvendo esses genes foram discutidas. Seis desses genes candidatos a potenciais marcadores (FGF11, IGFBP4, SPRY1, ARHGAP22, COL18A1 e GPC4) foram selecionados para validação por qPCR em células do cumulus obtidas de folículos de 1-3, 6-8 e ?8,1 mm de diâmetro. Dos genes validados, três deles (COL18A1, GPC4 e IGFBP4) confirmaram a expressão diferencial detectada no microarranjo (P<0,05). Entretanto, somente o GPC4 apresentou expressão diferencial entre os folículos mais competentes, 6-8 e ?8,1 mm, em relação aos menos competentes de 1-3 mm, podendo, portanto, ser utilizado como marcador para predizer a competência dos ovócitos. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cumulus cells have an important role during oocyte growth, maturation, ovulation and fertilization. Therefore they influence oocyte quality. In an attempt to identify genes differentially expressed in bovine cumulus cells (CC) of different competence, microarray analysis was performed. The model of follicle size in which competent cumulus-oocytecomplexes (COCs) were recovered from follicles > 8.1 mm and incompetent from follicles 1- 3 mm in diameter was used. In this analysis, we identified 4,178 genes differentially expressed (P<0.05) in the two categories of CCs. In addition to P value we set a cut-off value of 2.5 fold change in gene expression for up or down. Based on those criteria a preliminary list was produced with 143 genes up and 80 genes down regulated, respectively, in CCs of competent follicles in relation to incompetent ones. These genes were investigated according to their cellular functions and most of them were classified as related to the cell cycle, ovulation and inflammation. DNA repair, energy metabolism, metabolism of amino acids, cell signaling and meiosis. Three molecular pathways involving these genes were discussed. Six candidate genes (FGF11, IGFBP4, SPRY1, ARHGAP22, and COL18A1 GPC4) were selected for validation by qPCR in cumulus cells of follicles 1-3. 6-8 and > 8.1 mm in diameter. Among the selected genes, three of them (COL18A1, GPC4 and IGFBP4) confirmed the differential expression detected in the microarray (P<0,05). However, only GPC4 showed differential expression between competent follicles, 6-8 and > 8.1 mm when compared to 1-3 mm. These markers can be used to predict oocyte competence.
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Avaliação do uso do Hormônio Folículo Estimulante eqüino (eFSH) visando a antecipação da estação reprodutiva e a superovulação de éguas na fase de transição de primaveraPeres, Karen Regina [UNESP] January 2004 (has links) (PDF)
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peres_kr_me_botfmvz.pdf: 2762219 bytes, checksum: 1f39026ca97b222a71908cea4090e014 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Foi avaliado o uso do FSH equino (eFSH) para induzir o desenvolvimento folicular e a ovulacao em eguas durante a fase de transicao de primavera. Vinte e oito eguas, de 3 a 15 anos, foram examinadas durante os meses de agosto e setembro de 2003 com ultra-som por duas semanas antes do inicio do experimento, para determinar se elas estavam em transicao (nenhum foliculo maior que 25 mm e nenhum corpo luteo presente). Apos este periodo, conforme as eguas apresentam pelo menos um foliculo maior ou igual a 25 mm, elas foram distribuidas alternadamente em um dos dois grupos: 1) grupo controle . nao tratado; 2) grupo tratado com 12,5 mg de eFSH, duas vezes ao dia, ate que a maioria dos foliculos maiores que 30 mm alcancassem 35 mm. A atividade folicular de todas as eguas foi acompanhada. Quando a maior parte dos foliculos das eguas tratadas e o foliculo das eguas do grupo controle adquiriram um tamanho pre-ovulatorio (. 35 mm), foram administradas 2.500 UI de hCG, via intravenosa, para induzir a ovulacao. A partir deste momento as eguas foram inseminadas com semen fresco, em dias alternados, ate a ovulacao. Os exames ultra-sonograficos continuaram ate a deteccao das ovulacoes e a recuperacao embrionaria foi realizada sete a oito dias apos a ovulacao. As eguas do grupo tratado apresentaram o primeiro foliculo pre-ovulatorio e ovularam mais cedo do que as eguas nao tratadas (6,57 vs 18 dias). Entretanto, elas levaram mais tempo para a segunda ovulacao (22,36 vs 10,92 dias) apos a coleta de embriao e administracao do luteolitico. O periodo medio de tratamento foi de 4,79 } 1,07 dias e 85,71% das eguas tiveram multiplas ovulacoes. O numero de ovulacoes (5,57 vs 1,0) e de embrioes (2,0 vs 0,69) por egua foi superior para as eguas tratadas em comparacao as eguas controle. Porem, o numero de embrioes por ovulacao, foi similar entre os grupos (0,44 vs 0,69). O padrao de... . / Equine FSH (eFSH) was evaluate for inducing follicular development and ovulation in transitional mares. Twenty-eight mares, from three to fifteen years of age, were examined during the months of August and September 2003 with ultrasound for two weeks prior to the start of the experiment to determine transitional characteristics (no larger follicles 25 mm and no corpora lutea present). After this period, as mare obtained a follicle larger or equal to 25 mm, they were assigned to one of two groups: 1) control group . untreated; 2) treated group with 12.5 mg eFSH, two times per day, until at least half of all follicles larger than 30 mm had reached 35 mm. The follicular activity of all mares were accompanied. When most of the follicles of the treated mares and a single follicle of control mares acquired a preovulatory size (. 35 mm), 2.500 IU hCG were administered, intravenously to induce ovulation. From this moment, the mares were inseminated with fresh semen, every other day, until ovulation. Ultrasound exams continued until ovulation detection and the embryo recovery was performed seven to eight days after ovulation. The mares of treated group reached the first preovulatory follicle and ovulated before untreated mares (6.57 vs 18 days). However, they took more time to the second ovulation (22.36 vs 10.92) after the embryo recovery and luteolitic administration. The mean period of treatment were 4.79 } 1.07 days and 85.71% of mares had multiple ovulations. The number of ovulation (5.57 vs 1.0) and embryos (2.0 vs 0.69) per mare were higher for treated mares than control mares. However, the number of embryos per ovulation was similar in both groups (0.44 vs 0.69). The pattern of follicular growth were also different between groups. Eighty-nine percent the embryos from the superovulated mares, were viable after a initial analysis, considering that... (Complete abstract, click electronic address below).
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Produção de 13, 14-diidro 15-ceto prostaglandina F2'alfa'(PGFM) em resposta à ocitocina no período pós-parto em vacas da raça NeloreSatrapa, Rafael Augusto [UNESP] 13 February 2007 (has links) (PDF)
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satrapa_ra_me_botfmvz.pdf: 387499 bytes, checksum: d0c9d852db484deaa32331669d16ae4a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivou-se com o presente estudo avaliar, em vacas Nelore no período pós-parto inicial, se o aumento farmacológico nas concentrações plasmáticas de estradiol no período pré-ovulatório e/ou priming de progesterona (P4) precedendo a ovulação, induzida por tratamentos hormonais, seriam capazes de diminuir a liberação de PGF2 induzida pela administração de ocitocina e, conseqüentemente, evitar a lise prematura do corpo lúteo formado após a primeira ovulação. Vacas Nelore lactantes (n = 30) foram divididas aleatoriamente em 3 Grupos: RTB/GPE (n = 10), RTB/GPE/eCG (n = 10) e RTB/GPG/eCG (n = 10). Em estágio aleatório (D-8, 40 a 70 dias pós-parto), os animais do grupo RTB (remoção temporária do bezerro, 48 h antes do início dos tratamentos)/GPE (GnRH - Prostaglandina - Benzoato de Estradiol) receberam 50 g de um análogo do GnRH (lecirelina, IM, Gestran plus ). Sete dias mais tarde (D-1) os animais receberam injeção de um agente luteolítico (250 g de d-cloprostenol, IM, Prolise ) e no dia 0 (D0) foi administrado 1,0 mg de benzoato de estradiol (BE, IM, Estrogin ). No grupo RTB/GPE/eCG os animais, além de serem tratados com o protocolo GPE, receberam 400 UI de eCG (IM, Novormon ), logo após a administração do agente luteolítico (D-1). No grupo RTB/GPG/eCG, os animais foram tratados de acordo com o protocolo RTB/GPE/eCG, exceto que no lugar do BE foi administrada uma segunda dose de GnRH (50 g de lecirelina, IM) no D0. Em todos os animais foram realizados exames ultra-sonográficos dos ovários (Aloka SSD-500, probe de 7,5 MHZ) e coletas sanguíneas nos dias das aplicações hormonais, com a finalidade de classificar os grupos de acordo com a presença ou ausência de altas concentrações de P4 (priming de P4) antes da ovulação do folículo dominante. O desafio com ocitocina (OT, 50 UI, IV, Univet )... / The purpose of the present study was to evaluate, in early postpartum anestrus of Nelore cows, if the increase of estradiol plasma concentrations in pre-ovulatory period and/or high concentrations of progesterone (P4) preceding ovulation (P4 priming), induced by hormonal treatment, reduces endogenous releasing of PGF2 and, consequently, prevents premature lysis of corpus luteum formed after ovulation. Nelore lactating cows (40 to 70 d postpartum, n = 30), were randomly divided into 3 Groups: GPE (n = 10), GPE/eCG (n = 10) and GPG/eCG (n = 10). At random stage of the estrous cycle (D-8), the animals of GPE group (GnRH - Prostaglandin - Estradiol Benzoate) were treated with a GnRH agonist (50 g lecirelin, IM, Gestran Plus ). Seven days later (D-1) the cows received a luteolytic dose of PGF2a (250 g d-cloprostenol, IM, Prolise ), and on day 0 (D0) 1.0 mg of estradiol benzoate (EB, IM, Estrogin ). Cows from GPE/eCG group received the GPE treatment associated with 400 IU of eCG (IM, Novormon ) on D-1, right after PGF2a administration. The GPG/eCG group was similar to GPE/eCG, except that EB was replaced with a second dose of GnRH (50 g lecirelin, IM). Ovarian ultrasonography were performed (Aloka 500 SSD with a 7.5 MHZ transducer) and blood samples were collected at the days of hormones administration, in order to classify the groups based upon the presence or absence of progesterone (P4 priming), before ovulation. All animals were challenged with oxitocin (OT, 50 IU, IV, Univet ) 6, 9, 12, 15 and 18 days after BE (RTB/GPE and RTB/GPE/eCG groups) or GnRH (RTB/GPG/eCG group) administration and blood samples were collected before and 30 minutes after oxitocin challenge. Moreover, the calves were removed from the cows, during 48 h before the beginning of the treatments. ANOVA was used to estimate the effect of treatment, P4 priming and interactions in the discrete (Complete abstract, click electronic address below)
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Eficiência dos testes de termoresistência (lento e rápido) em relação a fertilidade de sêmen congelado na espécie bovinaVianna, Felipe Pereira [UNESP] January 2005 (has links) (PDF)
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vianna_fp_me_botfmvz.pdf: 192638 bytes, checksum: b176cb07b3c7470d7a90e481c0abf4b1 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Com objetivo de correlacionar e associar a eficiência do teste de termoresistência (rápido e lento) de sêmen congelado na espécie bovina com a fertilidade a campo após a Inseminação Artificial foram utilizados 64 ejaculados de 39 touros da raça Nelore com idades entre 2 e 10 anos pertencentes a central de inseminação artificial Jacarezinho Genetics. Após as colheitas as amostras de sêmen foram avaliadas macro e microscopicamente quanto ao volume, aspecto, turbilhonamento, motilidade total, vigor, concentração e patologia espermática. Posteriormente os ejaculados foram congelados com diluente (TRIS) a uma altura de 3 cm do nitrogênio líquido (-140ºC) em um tanque de congelação durante 15 minutos. Para análise das partidas congeladas foram utilizados os parâmetros de motilidade total subjetiva, vigor, análise computadorizada do movimento espermático (HTMA – IVOS 10), análise de fluorescência para avaliar a integridade de membrana pós-descongelação, após as provas rápidas (46ºC/30`) e lenta (38ºC/5h) de termoresistência. Os valores de motilidade total após as provas de termoresistência foram subdivididos em 4 grupos (0= 0% de motilidade, 1= 1-20% de motilidade, 2= 21-40% de motilidade e 3= > 40% de motilidade). O teste de fertilidade foi realizado através da inseminação artificial de 3161 fêmeas da raça Nelore, com idade entre 2 e 16 anos em uma mesma propriedade, sendo a fertilidade avaliada através do índice de prenhez a 1ª inseminação artificial. Para verificar a associação entre as ocorrências de interesse e a... . / With the aim of correlating the efficiency of the thermoresistance test (fast and slow) of the frozen sperm in the bovine species with the fertility 64 were used ejaculated of 39 bulls of the race Nelore with age between 2 and 10 years belonging to a Headquarter of Artificial Insemination. After the crops the sperm samples were appraised macro and microscopical as for the volume, aspect, turbine, total motility, energy, concentration and spermatic pathology.Later the ejaculated were frozen in diluent (TRIS) to a height of 3 cm of the liquid nitrogen (-140º C) in a freezing tank for 15 minutes. For analysis of the frozen departures the parameters of subjective total motility, energy, computerized analysis of the spermatic movement (HTMA – IVOS 10) were used. Fluorescence test was also used to evaluate the integrity of the membrane post-defrosting after the proofs fast (46°C/30’) and slow (38°C/5h) of thermoresistance. The total motility values after the thermoresistance proofs they were subdivided into 4 categories denominated of adaptation (0=0% of motility, 1= 0- 20% of motility, 2= 20-40% of motility and 3= >40% of motility).The fertility test was accomplished through the artificial insemination of 3161 females of the race Nelore, with age between 2 and 16 years in a same property and the fertility was appraised through the pregnancy index after the first artificial insemination. In order to verify the association between the occurrences of interest and the fertility it was used the proof of Qui-square, with the calculation of statistics X2 and P. The statistics were considered significant when p<0,05 and in the cases which 0,05<p<0,10 the tendency was referred to significance, where p is the probability of erroneously concluding for the significance.The results showed that there were no significant differences among the categories of total... (Complete abstract, click electronic address below).
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Avaliação da resposta ovariana na sincronização do estro e da ovulação utilizando protocolo de curta duração em ovelhas da raça SuffolkTakada, Luciana [UNESP] January 2004 (has links) (PDF)
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takada_l_me_botfmvz.pdf: 2409825 bytes, checksum: 42e3d71a49606cd228a95f0942f10e9a (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O experimento foi realizado em condições controladas, na pré-estação reprodutiva em fêmeas ovinas Suffolk visando estudar a eficácia do protocolo de curta duração na sincronização do estro, utilizando estrógeno para sincronização da emergência da onda folicular e consequentemente a ovulação. Os efeitos dos hormônios exógenos nos padrões de crescimento folicular ovariano através de exames ultra-sonográficos, quantificação de progesterona e observações do início do estro e ovulação. As ovelhas com estro induzido foram divididas em cinco grupos sendo o Grupo controle (MAP por 12 dias, e eCG na retirada da esponja). No Grupo experimental I foi utilizado o protocolo 0,1 mg de BE, esponjas com 60 mg de MAP por 4 dias e na retirada da esponja foi feita aplicação de PGF2a e 48 h após GnRH. No Grupo experimental II foi utilizado o protocolo de 35 mg de progesterona IM, 0,1 mg de BE, esponjas de MAP por 4 dias, e na retirada da esponja foi feita aplicação de PGF2a, eCG e 48 h após GnRH. No Grupo experimental III foi utilizado o protocolo de 35 mg de progesterona IM, 0,2 mg de BE, esponjas de MAP por 4 dias, na retirada da esponja foi feita aplicação de PGF2a, eCG e 56 h após GnRH. E no Grupo experimental IV foi utilizado o protocolo de 35 mg de progesterona injetável e 0,3 mg de BE, esponjas de MAP por 5 dias, e na retirada da esponja foi feita aplicação de PGF2a. Os ovários foram monitorados diariamente usando ultra-som a partir de dois dias antes de iniciar o protocolo até o décimo dia após a ovulação. Foram realizadas 4 colheitas de sangue por venopunção jugular, 10 dias antes da indução, no dia da inserção da esponja no 5° e no 10° dia após a ovulação, para se determinar as concentrações... . / The experiment was conducted under controlled conditions, in the early reproductive season among Suffolk ewes aiming at to study the effectiveness of the protocol of short-term in synchronization of the estrous using estrogen for synchronization of the emergency of the wave folicular and consequently the ovulation. The effects of exogenous hormones in the folicular ovarian growth standards, through ultrasonographic exams, progesterone quantification and observations of the beginning the estro and ovulation. The females with induced estrus were divided in five groups being the control group MAP for 12 days, and eCG by removal of the sponge. In experimental Group I, the protocol of 0.1 mg of BE and 60 mg MAP sponges for 4 days was used and, by removal of the sponge, PGF2a was applied and 48h after GnRH. In experimental Group II, the protocol of 35 mg IM progesterone, 0.1 mg of BE, MAP sponges for 4 days was used, and by removal of the sponge PGF2a and eCG were applied, and 48 h after GnRH. In experimental Group III, the protocol of 35 mg IM progesterone, 0.2 mg of BE, MAP sponges for 4 days was used, and by removal of the sponge PGF2a and eCG were applied, and 56h after GnRH and in the experimental Group IV, the protocol of 35 mg of injectable progesterone and 0.3 mg of BE, MAP sponges for 5 days was used and, upon removal of the sponge, PGF2a was applied. Ovaries were monitored daily by using ultrasound starting 2 days before initiating the protocol up to the tenth day of ovulation. 4 Blood samples were collected through jugular vein puncture, 10 days before induction, on sponge insertion day on the 5th and 10th day after ovulation in order to determine the plasmatic concentrations of progesterone. Ultrasonography... (Complete abstract, click electronic address below).
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Avaliação da taxa de ovulação em búfalas (Bubalus bubalis) submetidas a protocolo de sincronização da ovulação a base de norgestometStella, Edmilson Daniel [UNESP] January 2005 (has links) (PDF)
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stella_ed_me_botfmvz.pdf: 2811647 bytes, checksum: 8c63ad4cd9cec8f017d287edf934c315 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo do presente estudo foi o de avaliar a taxa de ovulação em fêmeas bubalinas submetidas a três diferentes protocolos hormonais com CRESTAR® na estação reprodutiva favorável (Fevereiro - Março). A avaliação da dinâmica folicular pós-retirada do implante e ovulação foi realizada através da ultra-sonografia transretal com transdutor de 5MHz (Aloka 500) a cada 12 horas. Vinte e quatro búfalas Murrah em lactação com idade entre 3 e 8 anos, com mais de 45 dias de período pós-parto foram aleatoriamente divididas em três grupos: (Grupo 1=G1, n=8; Grupo 2=G2, n=8 e Grupo 3=G3, n=8). Todos os animais (G1, G2 and G3) receberam um implante intra-auricular de liberação de progesterona (3mg of norgestomet, CRESTAR®, Intervet) mais 2.0mg de benzoato de estradiol (IM; Benzoato de Estradiol, Index) em momento aleatório do ciclo estral (Dia 0, PM). Os implantes permaneceram por 9 dias (Dia 9, PM) e no momento da remoção houve administração de uma dose luteolítica de um análogo da PGF2a (0.15mg d-cloprostenol, Croniben, Biogenesis) em todos os animais, sendo que os grupos G1 e G3 receberam também 500 UI de eCG IM (Novormon, Syntex). Dois dias após (D11), as búfalas dos grupos 1 e 2 (G 1 e G2) receberam 1000UI of hCG (IM, Vetecor, Calier) 42 horas após a remoção do implante. A análise estatística foi realizada pelo teste de Qui-Quadrado e as taxas de ovulação nos três grupos (G1, G2 e G3) foi de 62,5, 50,0 e 75,0% respectivamente. Não havendo diferenças estatísticas na taxa de ovulação entre os três grupos até o dia 13 (P>0,05). / The objective of the present study was to evaluate the responses of three diferents hormonal protocols with CRESTAR® in buffaloes cows in the breeding season (February - March) aiming ovulation rate. Transrectal ultrasonography using a 5.0 MHz transducer probe (Aloka 500), were done daily in order to study follicular dynamics at each 12 hours after implant removal to verify the moment of ovulation. Twenty four cows with more than 45 days of post partum period were randomly allocated into three groups (Group 1=G1, n=8; Group 2=G2, n=8 and Group 3=G3, n=8). All buffaloes (G1, G2 and G3) received an auricular implant progesterone releasing device (3mg of norgestomet, CRESTAR®, Intervet) plus 2.0mg estradiol benzoate (IM; Benzoato de Estradiol®, Index) at random stages of estrous cycle (Day 0, PM). The implants remained for 9 days. CRESTAR® was removed and a luteolytic dose of PGF2a analog (0.15mg d-cloprostenol, Croniben®, Biogenesis) was administered on Day 9 (D9, PM). On this day, only buffaloes in G1 and G3 received 500 UI of eCG IM (Novormon®, Syntex). After two days (D11), buffaloes in groups 1 and 2 (G1 and G2) received 1000UI of hCG (Vetecor, Calier) 42 hours after implant removal. The statistics analysis was made by Chi-square tests (X2), ovulation rates in three groups (G1, G2 and G3) was 62.5, 50 and 75% respectively. N
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Estudo de metodologias para as criopreservação de sêmen de jumento(Equus Asinus) por meio de testes laboratoriais e fertilidadeOliveira, José Victor de [UNESP] January 2005 (has links) (PDF)
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oliveira_jv_me_botfmvz.pdf: 299191 bytes, checksum: 712daaf6fc5fbb6e68b25bce715b679f (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente trabalho teve os objetivos: avaliar laboratorialmente o sêmen congelado de asininos através do Hamilton Thorne (HTMA); determinar os indices de fertilidade do sêmen criopreservado em jumentas e éguas e verificar a resposta uterina das jumentas perante o sêmen in-natura, diluente e congelado. No experimento 1 as amostras de sêmen, foram criopreservados em dois criotubos: meio macrotubo - 2,5 mL (M) ou palheta - 0,5 mL (P) com diluente MP50 e dez formulações de crioprotetores: 1= 2% DMSO e 2% DF; 2= 3% DF; 3= 2% MF e 2% de Glicerol; 4= 2% dimetil acetamida e 2% de glicerol; 5= 3% metil formamida; 6= 3% de dimetil acetamida; 7= 3% glicerol e 2% dimetil acetamida; 8= (Specific Patogen Free) 3% glicerol e 2% dimetil formamida; 9= 3% Dimetil sulfóxido e 2% glicerol; 10= 1% etilieno glicol + 3% dimetil sulfóxido e 1% dimetil formamida. As comparações realizadas entre os 2 tipos de envase, meio macrotubo e palhetas, não demonstraram superioridade (P>0,05) entre si, não havendo interação com as formulações utilizadas, nos parâmetros analisados. Para as características de motilidade total foi verificado que os tratamentos M4, P4 e P6 foram superiores ao M7 e P5 (P<0,05) a avaliação da motilidade progressiva mostrou qua a formulação M4 se distingüiu exclusivamente do M7 (P<0,05). O estudo da linearidade (LIN), apontou diferença exclusivamente entre os tratamentos M3 e M6 (P<0,05). Os valores obtidos de VCL (velocidade real), de VAP (velocidade do trajeto espermático) e de VSL (velocidade retílinea) proporcionaram resultados semelhantes entre os tratamentos (P>0,05). Na avaliação da membrana plasmática pela fluorescência, foi encontrado maior valor para o tratamento P6, que diferiu significativamente de P5 e M7, além disso o tratamento P4 se diferenciou de P5 (P<0,05)... . / The current paper aimed at conducting laboratoty tests in order to evaluate the frozen semen of the asinines, determining the fertility rate of semen cryopreserved in female donkeys and mares and also verifying the uterine response of female donkeys to the in natura, MP50 extender and frozen semen. In experiment 1, the semen samples were cryopreserved in two cryotubes: half macro tube 2.5 mL (M) or pallets - 0.5 mL (P) with MP50 diluting and ten formulations of cryoprotectors: 1= 2% DMSO and 2% DF; 2= 3% DF; 3= 2% MF and 2% of glycerol; 4= 2% dimethyl acetamide and 2% of glycerol; 5= 3% methyl formamide; 6= 3% of dimethyl acetamide; 7= 3% glycerol and 2% dimethyl acetamide; 8= (Specific Patogen Free) 3% glycerol and 2% dimethyl formamide; 9= 3% dimethyl sulfoxide and 2% glycerol; 10= 1% ethylene glycol + 3% dimethyl sulfoxide and 1% dimethyl formamide. The comparisons made between the two types of packing, did not show superiority (P>0.05) between themselves, and there was no interaction with the used formulations within the analyzed parameters. Regarding the characteristic total motility, it has been verified that the M4, P4 and P6 treatments were superior to the M7 and P5 (P<0,05). The evaluation of the progressive motility showed that the M4 formulation differed exclusively from the M7 (P<0,05). The linearity study demonstrated difference particularly between the M3 and M6 treatments (P<0,05). The values of real velocity, sperm direction velocity and linear velocity did not show similar results between the treatments (P>0,05). Concerning the evaluation of the plasma membrane by fluorescence, a higher value was found for the P6 treatment, which differed significantly from the P5 and M7. Moreover, the P4 treatment was different form the P5 (P<0,05). The other comparisons made... (Complete abstract, click electronic address below).
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Viabilidade e capacitação espermáticas, geração de peróxido de hidrogênio(H2O2) e lipoperoxidação no sêmen ovino adicionado de plasma seminal ou antioxidante após a criopreservaçãoSicherle, Carmem Cecilia [UNESP] 14 December 2007 (has links) (PDF)
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sicherle_cc_me_botfmvz.pdf: 396651 bytes, checksum: 98075f2e6d3318aa8f8806472a54bc87 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Objetivou-se avaliar a adição de plasma seminal e dos antioxidantes, catalase e Trolox, ao sêmen ovino após sua congelação e descongelação. Constituíram–se quatro grupos, CO (controle - com adição de 200µL PBS), CAT (catalase - 12,5 mg/mL = 8 µL + 162 µL PBS), TRO (Trolox - 100 µMol/ 100 x 106 sptz = 3,4 µL + 166,6 µL PBS), PS ( 60% de plasma seminal em PBS = 200 µL) em que os aditivos foram acrescidos (v/v) na proporção de 1:1, às amostras de sêmen criopreservado de 13 carneiros. Os parâmetros de cinética espermática determinados através da análise computadorizada (CASA), a integridade de membrana avaliada pela combinação das sondas fluorescentes Iodeto de Propídeo e Diacetato de Carboxifluoresceína, bem como a capacitação espermática constatada pelo ensaio da Clortetraciclina não foram influenciados pelo tratamento (P>0,05). A adição de plasma seminal teve um efeito deletério sobre a lipoperoxidação avaliada pela produção de TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico), e geração de peróxido de hidrogênio (H2O2) pelo método do Phenol Red de H2O2. O Trolox foi efetivo em controlar a produção de TBARS nos sistema geradores (adição de +FeSO4). Uma vez que a adição de antioxidantes foi benéfica, por prevenir a formação adicional de TBARS e geração de H2O2 no sistema gerador, sua utilização em sêmen ovino após a criopreservação pode ser indicada, principalmente em situações de maior desafio oxidativo. / The aim of this study was to evaluate the addition of the antioxidants, catalase e Trolox, and the seminal plasma in frozen thawed ram semen. Four groups was established, CO (control 200 µL PBS), CAT (catalase - 12,5 mg/mL = 8 µL + 162 µL PBS), TRO (Trolox - 100 µMol/ 100 x 106 sptz = 3,4 µL + 166,6 µL PBS), PS ( 60% of seminal plasma in PBS = 200 µL) added in the proportion of 1:1 (v/v) in cryopreserved semen of 13 rams.The spermatozoa kinematics was determined by CASA, the membrane integrity was determined by the combination of the fluorescent probes Propidium Iodide and Carboxyfluorescein, and the capacitation status was assessed by Chlortetracycline assay. No statistic difference were found for these parameters (P>0,05).The addition of seminal plasma was deleterious on lipid peroxidation analysed by the production of TBARS (thiobarbituric acid reactive species) and on the generation of hydrogen peroxide (H2O2) assessed by Phenol Red assay. An effective effect was found in the production of TBARS in the addition of Trolox in the generation system (addition of +FeSO4). Once the addition of antioxidants were beneficial in prevent de additional generation of TBARS and H2O2 in the generator system, they can be use after the cryopreservation of ram semen, especially in case of oxidative stress.
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