While Rhodococcus equi (R. equi) remains the most common cause of subacute or chronic granulomatous bronchopneumonia in foals, development of a relevant model to study this bacterium has proven difficult. As a result, the reasons for the underlying foal’s susceptibility to this disease are not well understood. Furthermore, data regarding the immune response of foals to R. equi infection remains controversial. We hypothesized that foals are susceptible to R. equi early in life and that this susceptibility decreases with age. Also, we hypothesized that specific subclasses of IgG antibodies to the virulence-associated protein of R. equi, VapA, predict the outcome of exposure. The objectives of this study were: (1) to develop an R. equi challenge model that resulted in slow progressive disease in some foals as well as spontaneous regression of lesions in others, (2) using the developed model, to investigate the age-related susceptibility of young foals to R. equi, (3) to describe the humoral immune response of foals following experimental challenge and natural infection. The use of a low dose of R. equi to challenge neonatal foals resulted in slow, progressive disease characterized by pulmonary abscessation and spontaneous regression in approximately 50% of the foals. When this low dose was used in 1, 2 or 3-week-old foals, a marked decrease in disease susceptibility was observed as the foals aged. The immunological responses seen after experimental challenge reflect those observed after natural infection. While there was a significant increase of VapA-specific IgG and IgG subclasses over time in both pneumonic and healthy foals, use of VapA-specific IgG(T) showed good sensitivity and specificity when used as a diagnostic tool for R. equi pneumonia. In summary, this study shows that foal susceptibility to R. equi occurs early in life and decreases with age. Whereas all foals developed VapA-specific IgG antibodies post-exposure, IgG(T) appeared to be predictive of infection.

Tierärztl. Hochsch., Diss., 2004--Hannover.

Tierärztl. Hochsch., Diss., 2004--Hannover.

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-25Bitstream added on 2014-11-10T11:57:43Z : No. of bitstreams: 1 000741914_20151231.pdf: 202931 bytes, checksum: b09a175d62ec19f75595646ea61ffda5 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:18Z: 000741914_20151231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:14Z : No. of bitstreams: 1 000741914.pdf: 1231278 bytes, checksum: 31828ab93cfccd06f552bc041efb2c26 (MD5) / A linfadenite infecciosa em suínos representa uma das afecções mais preocupantes na criação de suínos em todo mundo, causada por patógenos de origem bacteriana, geralmente diagnosticada na linha de abate. Acarreta prejuízos econômicos com a condenação total ou parcial das carcaças, bem como reflexos em saúde pública, devido ao potencial zoonótico dos agentes causais. O presente estudo investigou a ocorrência e as principais espécies do gênero Mycobacterium, assim como marcadores de virulência plasmidial em linhagens de Rhodococcus equi (R. equi) isoladas de linfonodos e das fezes de suínos de abatedouros do interior do estado de São Paulo, com e sem linfadenite. Foram examinados 150 linfonodos (50 mesentéricos, 50 mediastínicos e 50 submandibulares) com lesões, 150linfonodos (50 mesentéricos, 50 mediastínicos e 50 submandibulares) sem lesões aparentes e 150 fezes de suínos, provenientes de animais destinados ao abate, em dois frigoríficos do interior do estado de São Paulo. As amostras de linfonodos e fezes foram submetidas ao cultivo microbiológico simultaneamente nos meios de ágar acrescido de sangue bovino (5%) desfibrinado, e meios seletivos de CAZ-NB, TCP e TVP para R. equi, e Stonebrink–Lesslie e Lowenstein-Jensen para micobactérias. As colônias sugestivas de R. equi e positivas no teste de CAMP, foram enviadas ao Japão para detecção de linhagens VapA ou VapB, associadas a virulência. As linhagens sugestivas no cultivo microbiano para o gênero Mycobacterium foram submetidas a caracterização de espécies por PCR pela técnica de PRA. Foram identificados nos linfonodos de suínos com lesões 48 (32,0%) linhagens de Mycobacterium spp.e 6 (4,0%) Rhodococcus equi. Nos linfonodos de suínos sem lesões foram identificados 11 (7,3%) isolados de Mycobacterium spp.e nenhuma linhagem de R. equi. Nas fezes foram identificadas 40 (26,6%) linhagens de Rhodococcus equi e ... / The infectious lymphadenitis represents one of the most important diseases in pigs worldwide caused by bacterium, usually diagnosed on the slaughterhouses.The disease leads to economic losses due to total or partial condemnation of carcasses, as well as public health concern due to the zoonotic potential of microorganisms. The present study investigated the occurrence and the main species of the genus Mycobacterium as well as virulence markers of plasmid in Rhodococcus equi (R. equi) strains isolated from lymph nodes and feces from pigs of slaughterhouses in the state of São Paulo, with and without lymphadenitis. Were sampled 150 lymph nodes (50 mesenteric, 50 mediastinal and 50 submandibular) with lesions, 150 lymph nodes (50 mesenteric, 50 mediastinal and 50 submandibular) without visible lesions, and 150 feces from pigs of slaughterhouses of state of São Paulo, Brazil. The lymph nodes samples and feces were subjected to microbiological culture simultaneously indefibrinated bovine blood agar (5%), selective media of CAZ-NB, TCP, TVP for R. equi, and Stonebrink-Lesslie, and Lowenstein-Jensen for mycobacteria . The suggestive colonies of R. equi and positive to CAMP test were sent to Japan for evaluation of plasmid profile (VapA or VapB). The suggestive of Mycobacterium sp. were subjected to polymerase chain reaction (PCR) – based species identification using restriction enzyme pattern analysis (PRA). Among lymph nodes of pigs with lesions, 48 (32.0%) Mycobacterium spp. and 6 (4.0%) R. equi strains were identified. In the lymph nodes of pigs without lesions were identified 11 (7.3%) Mycobacterium spp. and none R. equi strain. From the fecal samples, 40 (26.6%) R. equi and 2 (1.3%) Mycobacterium spp. isolates were identified. From 48 Mycobcterium isolates from pigs with lesions, 37 (77.0%) were identified by PRA as M. avium type 1, and 11 (23.0%) M. avium type 2. Among limph nodes with lesions wer ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-02-21Bitstream added on 2014-06-13T19:50:56Z : No. of bitstreams: 1 martins_cb_me_jabo.pdf: 234153 bytes, checksum: a0a5965509f8505fb5b72f7bfe8b4650 (MD5) / A transferência de imunidade passiva, através da ingestão do colostro é um fator de grande importância para a sobrevivência de potros neonatos. O colostro é rico em imunoglobulinas, que constitui para esses animais a única fonte de proteção contra os agentes infecciosos durante o período neonatal, fase em que os animais apresentam maior susceptibilidade às doenças. Dentre estas, destaca-se a infecção ocasionada pelo Rhodococcus equi, responsável por elevadas taxas de mortalidade e grandes perdas econômicas. A infecção possui distribuição mundial e causa pneumonia supurativa e enterite associada a linfadenite em potros com menos de seis meses de idade. Apesar da sua grande importância no Brasil, a rodococose ainda é pouco estudada em nossas condições. O objetivo deste estudo foi comparar a resposta imune humoral entre éguas das raças Brasileiro de Hipismo (BH) e Bretã previamente imunizadas para R. equi, e avaliar o efeito da imunoprofilaxia ativa materna na transferência de anticorpos específicos protetores, via colostro, para neonatos eqüinos, utilizando na detecção de anticorpos o ensaio imunoenzimático indireto (ELISA teste), comparando dois diferentes antígenos (APTX e comercial). Os resultados demonstraram que ocorreu aumento na titulação de anticorpos anti-Rhodococcus equi nos grupos de éguas após a vacinação e transferência de anticorpos através do colostro para os potros neonatos. Não houve efeito da raça na produção de anticorpos. O antígeno comercial detectou títulos de anticorpos maiores e mais persistentes do que o antígeno APTX... . / The passive immunity transfer through colostrum is very important to new-born foals survival. The colostrum is immunoglobulin full, wich is responsable to protect against infectious agents during new-born period, stage that animals present higher susceptibility to diseases. Among these, the infection caused by Rhodococcus equi has the great importance, responsable for large economics damage and high mortality rates in animals illness. The infection has a world-wide distribuition and it causes suppurative pneumonia and enterits associated to limphadenitis in foals under 6 months old. Although its great importance in Brazil, this disease is not well studied. The aims of this study was to compare the humoral immune respost between the breeds Brasileiro de hipismo (BH) and Breton, previously vaccinated against Rhodococcus equi, and to evaluate the matern immunoprofilaxy effect in the specific antibodies transfer through colostrum to new-born foals, using the Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA-test) comparing two differents antigens (APTX and comercial). The results demonstrated that there were an increase in mares antibodies after vaccination and also antibodies transfer through colostrum to new-born foals. There was no breed effect in the antibodies production. The Comercial antigen demonstrated antibodies titulation higher and more persistents than APTX antigen. The ELISA-test demonstrated sensible R. equi antibodies determination.

The objective of this study was to purify IgG from commercially available hyperimmune Rhodococcus equi plasma and to assess the delivery of IgG as an aerosol to the equine lung. IgG was purified from plasma, and the IgG concentration of both the plasma and the purified IgG was determined by ELISA. The purified IgG was aerosolized using a vibrating mesh nebulizer and aerosol characterization was performed using cascade impaction. The purified IgG was nebulized to six healthy adult horses in order to assess the efficacy of pulmonary delivery and safety of administration. Bronchoalveolar fluid was retrieved endoscopically using a low volume technique prior to aerosolization (time 0) and at 0.5, 4 and 24 hours post aerosolization. The BAL fluid IgG concentration was determined and cytologic analysis was performed. The IgG concentrations of the plasma and purified IgG were 2,175 mg/dL and 1,145 mg/dL, respectively. The MMAD of the purified IgG aerosol was 4.7 microns. The mean BAL fluid IgG concentration increased 61% from 19.33 µg/dL at time 0 to 31.5 µg/dL at 0.5 hours, but this increase was not significant (P=0.603). No significant change was observed in inflammatory cell numbers over time or at any time point during the study. This study demonstrated that IgG antibodies were purified at a concentration acceptable for nebulization, and that the nebulization unit generated aerosol particles from the IgG solution of appropriate size for pulmonary delivery. Nebulization of purified IgG to adult horses was well tolerated and caused no local or systemic adverse effects. / Master of Science

O Rhodococcus equi é uma das principais causas de pneumonia piogranulomatosa e linfadenite em potros de 1-6 meses de idade, resultando em alta morbidade e muitas vezes em óbito. Em propriedades endêmicas, a enfermidade é responsável por gerar altos custos para tratar e prevenir a doença. Com o objetivo de propor uma alternativa para o controle ambiental do Rhodococcus equi, foi aplicado um protocolo para isolamento de bacteriófagos. Foram isoladas 14 amostras de bacteriófagos, obtidas do ambiente de criação de cavalos. Estas apresentaram capacidade de lisar in vitro amostras de campo de Rhodococcus equi com diferentes intensidades. O resultado obtido nos possibilita sugerir que os fagos podem ser uma alternativa natural para a redução da bactéria no ambiente. / Rhodococcus equi is an important cause of pyogranulomatus pneumonia and lymphadenitis in foals 1-6 months of age, resulting in high morbidity and often mortality. In endemic properties, the disease is responsible for generating high costs to treat and prevent disease. In order to propose an alternative to the environmental control of Rhodococcus equi, a protocol for isolation of bacteriophages was applied. Fourteen bacteriophage samples were isolated obtained from horse breeding environment. They showed capacity to lyse in vitro Rhodococcus equi field samples with different sensitivities. The results obtained allows us to suggest the phage as a natural alternative to reducing R. equi population.

Rhodococcus equi (R.equi), uma bactéria gram-positiva intracelular facultativa, é uma causa importante de pneumonia em potros com idade entre 3 semanas e 5 meses. A manifestação clinica mais comum da doença é a broncopneumonia piogranulomatosa com abscedação. Na pneumonia causada por R. equi os primeiros sinais clínicos podem não ser aparentes até que as alterações patológicas estejam bastante avançadas, por esse motivo, o diagnóstico precoce e acurado de potros com pneumonia por R. equi se torna fundamental. O diagnóstico definitivo baseia-se na detecção de R. equi na cultura bacteriológica e identificação molecular a partir da amostra de lavado traqueal; no entanto, essa técnica é invasiva, traz riscos para o animal e é relativamente cara. A ultrassonografia (US) para detecção precoce tem se tornado uma pratica de rotina em muitas fazendas endêmicas para rodococose equina. Com o advento dessa prática de triagem, a forma mais identificada de pneumonia por R. equi tem sido a subclínica, onde os animais apresentam presença de alterações pulmonares mas não apresentam sinais clínicos da doença. Atualmente, vapA é o gene com função demonstrada na virulência. Identificação de R. equi por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em amostras de fezes tem se mostrado efetivo para o reconhecimento precoce do agente. Ultrassonografia torácica e PCR das amostras de fezes e swab nasal foram realizadas em 22 potros desde as 3 até as 16 semanas de idade (intervalos de 15 dias) de 3 fazendas endêmicas de criação de cavalos no sul do Brasil para identificar a ocorrência de doença subclínica. A associação entre a ultrassonografia torácica e PCR das amostras de fezes possibilitaram a detecção de doença subclínica e identificação de pontos críticos de controle dessa doença. Considerando o fato de que 95.4% dos potros apresentaram doença subclínica e que nenhum deles desenvolveu a doença clínica demonstra que o tratamento desses casos não é justificável para a população analisada. / Rhodococcus equi, a gram-positive facultative intracellular pathogen, is an important cause of pneumonia in foals between 3 weeks and 5 months of age. Pneumonia caused by R. equi is an insidious disease in which clinical signs may not be apparent until pathologic changes are well progressed. Because of the insidious progression of infection to severe clinical signs, early and accurate diagnosis of foals with R. equi pneumonia is important. Definitive diagnosis is based on R. equi detection by bacterial culture and molecular identification from tracheobronchial aspirate (TBA), this procedure is invasive, labor-intensive, requires skill, carries risks to foals, and is relatively expensive. The sequential thoracic ultrasonography (TUS) to early detection of the disease has been adopted as a screening method in many endemic farms; for this reason, subclinical disease has been the most frequently observed form. Nowadays, vapA is the only virulent gene identified. Fecal polymerase chain reaction (PCR) is a noninvasive technique with good diagnostic accuracy. Thoracic ultrasound screening (TUS) and PCR from fecal and nasal swab samples were performed in 22 foals from 3 to 16 weeks of age from 3 endemic farms at south of Brazil to identify the occurrence of R. equi subclinical disease. The association of TUS and fecal PCR detection of virulent R. equi provided a possibility of identification of critical points in disease control. Considering the fact that 95.4% of the foals showed evidence of subclinical disease and none of them developed any signs of clinical disease, the antibiotic treatment was not reasonable for the foals followed.

O Rhodococcus equi é uma das principais causas de pneumonia piogranulomatosa e linfadenite em potros de 1-6 meses de idade, resultando em alta morbidade e muitas vezes em óbito. Em propriedades endêmicas, a enfermidade é responsável por gerar altos custos para tratar e prevenir a doença. Com o objetivo de propor uma alternativa para o controle ambiental do Rhodococcus equi, foi aplicado um protocolo para isolamento de bacteriófagos. Foram isoladas 14 amostras de bacteriófagos, obtidas do ambiente de criação de cavalos. Estas apresentaram capacidade de lisar in vitro amostras de campo de Rhodococcus equi com diferentes intensidades. O resultado obtido nos possibilita sugerir que os fagos podem ser uma alternativa natural para a redução da bactéria no ambiente. / Rhodococcus equi is an important cause of pyogranulomatus pneumonia and lymphadenitis in foals 1-6 months of age, resulting in high morbidity and often mortality. In endemic properties, the disease is responsible for generating high costs to treat and prevent disease. In order to propose an alternative to the environmental control of Rhodococcus equi, a protocol for isolation of bacteriophages was applied. Fourteen bacteriophage samples were isolated obtained from horse breeding environment. They showed capacity to lyse in vitro Rhodococcus equi field samples with different sensitivities. The results obtained allows us to suggest the phage as a natural alternative to reducing R. equi population.

Rhodococcus equi (R.equi), uma bactéria gram-positiva intracelular facultativa, é uma causa importante de pneumonia em potros com idade entre 3 semanas e 5 meses. A manifestação clinica mais comum da doença é a broncopneumonia piogranulomatosa com abscedação. Na pneumonia causada por R. equi os primeiros sinais clínicos podem não ser aparentes até que as alterações patológicas estejam bastante avançadas, por esse motivo, o diagnóstico precoce e acurado de potros com pneumonia por R. equi se torna fundamental. O diagnóstico definitivo baseia-se na detecção de R. equi na cultura bacteriológica e identificação molecular a partir da amostra de lavado traqueal; no entanto, essa técnica é invasiva, traz riscos para o animal e é relativamente cara. A ultrassonografia (US) para detecção precoce tem se tornado uma pratica de rotina em muitas fazendas endêmicas para rodococose equina. Com o advento dessa prática de triagem, a forma mais identificada de pneumonia por R. equi tem sido a subclínica, onde os animais apresentam presença de alterações pulmonares mas não apresentam sinais clínicos da doença. Atualmente, vapA é o gene com função demonstrada na virulência. Identificação de R. equi por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em amostras de fezes tem se mostrado efetivo para o reconhecimento precoce do agente. Ultrassonografia torácica e PCR das amostras de fezes e swab nasal foram realizadas em 22 potros desde as 3 até as 16 semanas de idade (intervalos de 15 dias) de 3 fazendas endêmicas de criação de cavalos no sul do Brasil para identificar a ocorrência de doença subclínica. A associação entre a ultrassonografia torácica e PCR das amostras de fezes possibilitaram a detecção de doença subclínica e identificação de pontos críticos de controle dessa doença. Considerando o fato de que 95.4% dos potros apresentaram doença subclínica e que nenhum deles desenvolveu a doença clínica demonstra que o tratamento desses casos não é justificável para a população analisada. / Rhodococcus equi, a gram-positive facultative intracellular pathogen, is an important cause of pneumonia in foals between 3 weeks and 5 months of age. Pneumonia caused by R. equi is an insidious disease in which clinical signs may not be apparent until pathologic changes are well progressed. Because of the insidious progression of infection to severe clinical signs, early and accurate diagnosis of foals with R. equi pneumonia is important. Definitive diagnosis is based on R. equi detection by bacterial culture and molecular identification from tracheobronchial aspirate (TBA), this procedure is invasive, labor-intensive, requires skill, carries risks to foals, and is relatively expensive. The sequential thoracic ultrasonography (TUS) to early detection of the disease has been adopted as a screening method in many endemic farms; for this reason, subclinical disease has been the most frequently observed form. Nowadays, vapA is the only virulent gene identified. Fecal polymerase chain reaction (PCR) is a noninvasive technique with good diagnostic accuracy. Thoracic ultrasound screening (TUS) and PCR from fecal and nasal swab samples were performed in 22 foals from 3 to 16 weeks of age from 3 endemic farms at south of Brazil to identify the occurrence of R. equi subclinical disease. The association of TUS and fecal PCR detection of virulent R. equi provided a possibility of identification of critical points in disease control. Considering the fact that 95.4% of the foals showed evidence of subclinical disease and none of them developed any signs of clinical disease, the antibiotic treatment was not reasonable for the foals followed.