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Estudo comparativo das características bioquímicas funcionais e especificidade catalítica de aspartil, cisteíno e serino peptidases fúngicas / Comparative study of functional biochemical characteristics and catalytic specificity of aspartyl, cysteine and serine fungal peptidases

Silva, Ronivaldo Rodrigues da [UNESP] 12 February 2016 (has links)
Submitted by RONIVALDO RODRIGUES DA SILVA (rds.roni@yahoo.com.br) on 2016-03-01T13:46:53Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado RONIVALDO R. SILVA.pdf: 3318357 bytes, checksum: 82fadd527a2ede34e2a0a237a881e8f8 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-01T18:27:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_rr_dr_sjrp.pdf: 3318357 bytes, checksum: 82fadd527a2ede34e2a0a237a881e8f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-01T18:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_rr_dr_sjrp.pdf: 3318357 bytes, checksum: 82fadd527a2ede34e2a0a237a881e8f8 (MD5) Previous issue date: 2016-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Aspártico (E.C. 3.4.23), cisteíno (E.C. 3.4.22) e serino peptidases (E.C. 3.4.21) são endopeptidases, cujos modos de ação são dependentes de resíduos de ácido aspártico, cisteína e serina presentes no sítio catalítico, respectivamente. Atualmente, vários estudos são realizados na busca por novas enzimas com relevantes propriedades bioquímicas para aplicação industrial. Neste contexto, nós propomos a produção de enzimas em bioprocesso submerso, purificação, estudo das propriedades bioquímicas e determinação da especificidade catalítica das peptidases secretadas pelos fungos filamentosos Rhizomucor miehei, Phanerochaete chrysosporium e Leptosphaeria sp. Inicialmente, após produção por bioprocesso submerso, estas enzimas foram purificadas utilizando cromatografias de exclusão molecular e troca iônica. Em ensaios de inibidores na atividade enzimática, notamos inibição das peptidases por pepstatina A (R. miehei), ácido iodoacético/N-Etilmaleimida (P. chrysosporium) e fluoreto de fenil metil sulfonila (Leptosphaeria sp), sendo então definidas como aspártico, cisteíno e serino peptidases, respectivamente. Por SDS-PAGE (12%), as massas moleculares foram estimadas em 37 kDa (aspártico), 23 kDa (cisteíno) e 35 kDa (serino). O máximo de atividade proteolítica foi alcançado em pH 5,5 e 55 ºC para peptidase aspártica secretada por R. miehei; pH 7 e faixa de temperatura 45-55 ºC para cisteíno peptidase secretada por P. chrysosporium, e pH 7 e 45 ºC para serino peptidase secretada por Leptosphaeria sp. Sob efeito de incubação a diferentes pH, a peptidase aspártica mostrou-se estável em condições ácidas (pH 3-5); cisteíno peptidase foi estável em ampla faixa de pH (pH 4-9), e serino peptidase mostrou-se mais estável em condições com tendências alcalinas e pH ligeiramente ácido (pH 5-9). Em todas estas faixas de pH citadas, as peptidases apresentaram atividade proteolítica acima de 80% por 1 hora de incubação. Quanto à estabilidade térmica, a cisteíno peptidase mostrou-se mais termoestável dentre as três enzimas e serino peptidase descreveu a menor tolerância à temperatura. Em incubação com agentes desnaturantes, observamos redução na atividade proteolítica sob efeito de surfactantes iônicos (0,02-1%): dodecil sulfato de sódio (SDS) e brometo de cetil-trimetil amônio (CTAB); íon cobre II (5 mM); Ditiotreitol (DTT) e guanidina (ambos na faixa de 10-200 mM) para todas as peptidases. Por último, em estudo de especificidade catalítica destas enzimas, observamos a preferência por aminoácidos aromáticos (F e W), básicos (K e R) e apolares (em particular, resíduo de metionina) para peptidase aspártica. Alta especificidade descrita por cisteíno peptidase, cuja preferência catalítica é notória por aminoácidos básicos (K, H e R), especialmente na posição P3 e lisina-dependência para catálise na posição P'3. Em serino peptidase, notamos maior aceitação por aminoácidos apolares (G, I, L, M e V), básicos (H e R) e polares neutros (N e Q) para as diferentes posições avaliadas no substrato. / Aspartic (EC 3.4.23), cysteine (EC 3.4.22) and serine peptidases (EC 3.4.21) are endopeptidases whose modes of action are dependent on aspartic acid, cysteine and serine residues present in the catalytic site, respectively. Currently, several studies are conducted in the search for new enzymes with relevant biochemical properties for industrial application. In this context, we propose the production of enzymes in submerged bioprocess, purification, the study of biochemical properties and determining the catalytic specificity peptidases secreted by the filamentous fungus Rhizomucor miehei, Phanerochaete chrysosporium and Leptosphaeria sp. Initially, after production submerged bioprocess, these enzymes have been purified using size-exclusion and ion exchange chromatographies. In the effect of inhibitors on enzyme activity, we note peptidase inhibition by pepstatin A (R. miehei), iodoacetic acid/ N-Ethylmaleimide (P. chrysosporium) and phenyl methyl sulfonyl fluoride (Leptosphaeria sp), suggesting that these enzymes are aspartic, cysteine and serine peptidases, respectively. For SDS-PAGE (12%), molecular weights were estimated at 37 kDa (aspartic), 23 kDa (cysteine) and 35 kDa (serine). Maximum proteolytic activity was achieved at pH 5.5 and 55 °C for aspartic peptidase secreted by R. miehei; pH 7 and temperature range 45-55 °C for cysteine peptidase secreted by P. chrysosporium and pH 7 and 45 °C for serine peptidase secreted by Leptosphaeria sp. Under incubation at different pH effect, aspartic peptidase was stable under acidic conditions (pH 3-5); cysteine peptidase was stable in wide pH range (pH 4-9), and serine peptidase was more stable under alkaline conditions and pH slightly acidic (pH 5-9). In all these pH ranges mentioned, peptidases showed proteolytic activity above 80% by 1 hour incubation. As regards the thermal stability, cysteine peptidase was more thermostable enzyme and serine peptidase described the lowest temperature tolerance. In incubation with denaturing agents, we observed a decrease in proteolytic activity under the effect of ionic surfactant (0.02-1%) sodium dodecyl sulfate (SDS) bromide and cetyl-trimethyl ammonium bromide (CTAB); copper (II) ion (5 mM); Dithiothreitol (DTT) and guanidine (both in the range of 10-200 mM) for all peptidases. Finally, the study of catalytic specificity of these enzymes, we found a preference for aromatic amino acids (F and W), basic (K and R) and nonpolar (in particular, methionine residue) to aspartic peptidase. High specificity described by cysteine peptidase, which a catalytic preference is notorious for basic amino acids (K, R and H), especially in position P3 and lysine-dependence for catalysis at position P'3. In serine peptidase, for different evaluated positions, we noticed greater acceptance by nonpolar amino acids (G, I, L, M and V), basic (M and R) and neutral polar (N and Q).
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Desenvolvimento de um sensor eletroquímico planar modificado com 1-2 Diaminobenzeno (DAB) para monitoração de nitrito por FIA-automatizada. / Development of a planar electrochemical sensor modified with 1-2 Diaminobenzene (DAB) for nitrite measuring by automatic FIA.

Fernando Luis de Almeida 11 September 2009 (has links)
A presente dissertação de mestrado tem o propósito de relatar o desenvolvimento de um sensor planar eletroquímico com três eletrodos para o monitoramento de nitrito e seus interferentes (ácido úrico, ácido ascórbico e paracetamol). Para tal, no procedimento experimental é descrito o desenvolvimento do aparato extracorpóreo (mini-bomba compressora, válvulas solenóides e cela de análise). Esse é acoplado a um sistema de Análise por Injeção em Fluxo Automatizada (do inglês, Flow-injection Analysis) FIA-automatizada. Este trabalho também descreve a fabricação dos sensores em substrato de alumina, o processo de limpeza padrão dos eletrodos, o processo de obtenção dos eletrodos de referência em HCl (0,1 mol L-1) e ativação eletroquímica da superfície do eletrodo de trabalho com H2SO4 (0,1 mol L-1). Em seguida, é mostrada a estabilização dos eletrodos de referência Ag/AgCl em solução salina contendo cloretos, o estudo da secagem dos eletrodos em temperatura ambiente com exposição à luz e a caracterização dos mesmos por três métodos distintos, a saber: i) teste de reversibilidade (corrente redox vs. potencial); ii) variação do potencial com o tempo (coeficiente de degradação termodinâmica) e iii) variação do potencial com a concentração de cloretos. Também, apresenta-se a caracterização da área efetiva exposta do eletrodo de medição (trabalho) e os resultados da deposição de 1-2 Diaminobenzeno (DAB) como polímero seletivo. Além disso, são apresentados os resultados e discussões dos pseudo-eletrodos (recoberto ou não com Náfion® 117). Um ponto relacionado, a histerese associada à irreversibilidade dos eletrodos de referência resultou da ordem de 40 mVAg/AgCl Náfion® 117. Os potencias termodinâmicos observados foram da ordem de 100 ± 6 mVAg/AgCl Náfion® 117 para pseudo-eletrodo de referência sem e com Náfion® 117. Depois, foi realizado um estudo criterioso dos potenciais de resposta ao nitrito e aos interferentes por meio da técnica de DPV (do inglês, Differencial Pulse Voltammetry). Para evitar degradação acelerada (corrosão) do polímero sobre o eletrodo de trabalho, optou-se por realizar as medições com potencial igual a 0,50 VAg/AgCl Náfion® 117. Nessa condição, apresenta-se a monitoração de nitrito por FIA-automatizada na faixa de concentração de 50 a 250 mol L-1. Os resultados para a medição de nitrito mostraram que o sensor planar eletroquímico amperométrico desenvolvido é promissor, pois esse apresentou ótimo desempenho de reprodutividade (99,66%), sensibilidade (90 microA mol-1 L mm-2), seletividade (0,32%), repetitividade (91,28%) e estabilidade (15 ± 0,3 pA). / In this Master of Science, it has been developed an electrochemical planar sensor defined with three electrodes for nitrite measuring and its interferents (uric acid, ascorbic acid and paracetamol). In the experimental procedure, it is shown the development of an extracorporis set up (mini-pump, solenoid valves and analysis cell) which is coupled to a system of Flow-injection Analysis (FIA). This work also describes the sensor fabrication using alumina substrates, the standard cleaning of the electrodes, the process to obtain Ag/AgCl reference electrodes in HCl (0.1 mol L-1) and electrochemical activation of the working-electrode surface with H2SO4 (0.1 mol L-1). Following, it is shown the study of drying for electrodes at room temperature with exposition to room light and their characterization using three different methods: i) reversibility test (redox current vs. potential); ii) variation of the potential with the time (thermodynamics degradation coefficient) and iii) variation of the potential with the chloride concentration. Also, it is presented the characterization of the effective exposed area of the working electrode and the results of the deposited 1-2 Diaminobenzene (DAB) is presented as a selective polymer. In addition, the results and discussions of the pseudo-reference (recovered or not with Nafion® 117) are presented. Related to irreversibility is the hysteresis associated to the reference electrodes which resulted in the order of 40 mVAg/AgCl Nafion® 117. The observed thermodynamic potentials were of (100 ± 6) mVAg/AgCl Nafion® 117 for pseudo-electrodes recovered with Nafion® 117. Later on, a careful study of the response to nitrite and to its interferents was performed by means of the DPV technique (Differential Pulse Voltammetry). In order to avoid accelerated degradation (corrosion) of the polymer, measurements were performed at a potential of 0,5 VAg/AgCl Nafion® 117. In this condition, nitrite was monitored using the automatized-FIA (Flow Injection Analysis) for concentration in the range of 50 to 250 mol L-1. The results have shown that the planar amperometric sensor for nitrite measuring is usefull since it was observed excellent performance related to reproducibility (99.66%), sensitivity (90 microA mol-1 L mm-2), selectivity (0.32%), repetibility (91.28%) and stability (15.0 ± 0.3 pA).
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Germinação, conservação, produção de mudas e tolerância à inundação da Vochysia divergens Pohl / Germination, storage, production of seedling and tolerance to flood of Vochysia divergens pohl

Fernandez, José Ricardo Castrillon 14 June 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:29:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3143.pdf: 957420 bytes, checksum: 73658db2e7692e81ac17c2134ff3f844 (MD5) Previous issue date: 2010-06-14 / The Vochysia divergens Pohl is an arboreal species of the genus Vochysiaceae, widely distributed in the wetlands of Barão de Melgaço, Poconé and Paraguay across the river Paraguay, usually associated with places that suffer from periodic flooding. Is distributed on an aggregate, forming uniform vegetation types, called cambarazais. Although considered a weed of native grasslands, with potential medicinal, ornamental, and timber melífero. This study examined aspects of germination, storage, vigor, seedling production and survival in an environment flooded. Tests for selection of substrates for germination, indicate that on paper substrates, from paper, roll paper and vermiculite, are effective. The sand substrate was inadequate to conduct tests of germination for this species. To determine the conditions conducive to maintaining the viability of the seeds were tested the packaging in plastic, paper and cans, stored in refrigerator, cold room and under natural conditions. Wrapping in plastic bags or in cans and stored in refrigerator, facilitate the maintenance of seed viability for periods greater than 360 days. To evaluate the efficiency of the accelerated aging test in detecting changes in force, the seeds were incubated in a moist chamber at 41, 43 and 45ºC during the time 12, 24, 36, 48, 72, 96, 120, 144 and 168 hours. After the period of exposition to stress, were conducted germination tests, and temperature 45°C and 72 hours, an efficient combination to verify changes in force. For the production of lantana seedlings were tested three substrate compositions for filling containers such tubes, as follows: commercial substrate, commercial substrate + 20% vermiculite and land area of occurrence of lantana. The results of height, diameter, dry matter indicate that the use of land area cambará fostered the growth of plants for six months. But the use of commercial substrate or with a mixture of vermiculite keeps the plants for only 30 days and is not recommended under these conditions for use in the production of seedlings of this species. To evaluate the tolerance to flooding, lantana plants were subjected to quotas flooding that ranged from zero to 204,5 cm in a hydroperiod in the wetland. The results indicate a survival rate of 30,9% of the plants, when subjected to a maximum level of inundation of 2.04 cm, and 82 days for 73 days without light. Flooding for 32 days with maximum quota of up to 84,5 cm, not interfere with the survival of lantana plants. / A Vochysia divergens Pohl é uma espécie arbórea pertencente ao gênero Vochysiaceae, com ampla distribuição nos pantanais de Barão de Melgaço, Poconé e Paraguai e em toda margem do rio Paraguai, normalmente associada à locais que sofrem inundações periódicas. Encontra-se distribuída de forma agregada, formando fitofisionomias uniformes, denominadas de cambarazais. Apesar de ser considerada uma invasora de pastagens nativas, apresenta potencial medicinal, ornamental, melífero e madeireiro. O presente estudo avaliou aspectos de germinação, armazenamento, vigor, produção de mudas e sobrevivência em ambiente inundado. Os testes para escolha de substratos para a germinação, indicam que os substratos sobre papel, entre papel, rolo de papel e vermiculita, são eficientes. O substrato areia mostrou-se inadequado para condução de testes de germinação para essa espécie. Para a determinação de condições propícias para a manutenção da viabilidade das sementes, foram testados o acondicionamento em embalagens de plástico, de papel e em latas, armazenadas em geladeira, câmara refrigerada e em condições naturais. O acondicionamento em sacolas de plástico ou em lata, armazenadas em geladeira, propiciam a manutenção da viabilidade das sementes por períodos superiores à 360 dias. Para se avaliar a eficiência do teste de envelhecimento acelerado na detecção de variações de vigor, as sementes foram mantidas em câmara úmida nas temperaturas de 41, 43 e 45ºC, durante o tempo de 12, 24, 36, 48, 72, 96, 120, 144 e 168 horas. Após o período de exposição das sementes ao estresse, foram realizados os testes de germinação, sendo a temperatura de 45ºC e o período de 72 horas, uma combinação eficiente para verificar variações de vigor. Para a produção de mudas de cambará, foram testadas três composições de substratos para preenchimento de recipientes tipo tubetes, sendo: substrato comercial, substrato comercial + 20% de vermiculita e terra de área de ocorrência de cambará. Os resultados de altura, diâmetro e matéria seca indicam que o uso de terra de área de cambará propiciou o crescimento das plantas por seis meses. Já o uso do substrato comercial ou com a mistura de vermiculita permite manter as plantas por apenas 30 dias, não sendo recomendado, nestas condições, para o uso na produção de mudas dessa espécie. Para avaliar a tolerância à inundação, plantas de cambará foram submetidas a cotas de alagamento que variaram de zero a 204,5 cm, em um hidroperíodo no pantanal. Os resultados indicam uma taxa de sobrevivência de 30,9% das plantas, quando submetidas a um nível máximo de inundação de 2,04 cm, durante 82 dias e 73 dias na ausência de luz. Inundações durante 32 dias, com cota máxima de até 84,5 cm, não interferem na sobrevivência de plantas de cambará.
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Efeitos da distribuição de manchas de folhas na estrutura de macroinvertebrados de riachos

Hanashiro, Fábio Toshiro Taquicava 29 April 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:31:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2985.pdf: 1080161 bytes, checksum: 6f77b3c4bacbb6a36ca073cc541e5909 (MD5) Previous issue date: 2010-04-29 / Universidade Federal de Minas Gerais / To understand the effects of spatial heterogeneity on the processes that determine the distribution of organisms in low-order streams, in the present study we asked the following question: do the composition and spatial arrangement of leaf litter patches at the scale of streambed landscapes influence the structure and composition of aquatic macroinvertebrate communities? We evaluated substrate organization in two distinct phases: an initial description of the streambeds using landscape ecology techniques, and a second, experimental phase studying the response of aquatic macroinvertebrates to manipulated distributions of the substrate. The results of the descriptive phase showed the importance of leaf litter substrate influencing taxon richness, diversity, evenness, and abundance; further, the division of the habitat in patches was also important to structure the macroinvertebrate communities. The experimental manipulation showed that resource aggregation influences the colonization of the community, mainly in the early periods (8 days). In general, the influence of resource spatial distribution had different effects between the two approaches used, probably due to differences in patch size and quality. The results of the present study can contribute to a better comprehension of the mechanisms structuring the communities of aquatic macroinvertebrates, and to the improvement of sampling techniques and stream restoration projects. / Para tentar entender como a heterogeneidade espacial influencia os processos que determinam a distribuição de organismos em riachos de baixa ordem, o presente estudo teve como objetivo responder a pergunta: a composição e o arranjo espacial das manchas de folhas na escala de paisagens de fundos de riachos influenciam a estrutura e a composição das comunidades de macroinvertebrados aquáticos? Avaliamos a organização dos substratos em duas fases distintas: uma descrição inicial dos ambientes a serem estudados por meio de técnicas de ecologia de paisagem e uma segunda fase experimental, estudando a resposta dos macroinvertebrados aquáticos a distribuições manipuladas do substrato. Os resultados da fase descritiva nos deram indícios da importância da proporção do substrato detritos influenciando a riqueza, diversidade, equitabilidade e abundância; além disso, a divisão do habitat em manchas também parece ser importante para a estruturação da comunidade dos macroinvertebrados. A manipulação experimental permitiu inferir a influência da agregação dos recursos nos processos de colonização da comunidade, principalmente nos períodos iniciais (oito dias). De maneira geral, a influência da distribuição de recursos teve resultados diferentes para as duas abordagens utilizadas, provavelmente devido a diferenças no tamanho e na qualidade das manchas. Os resultados do presente estudo podem contribuir para uma maior compreensão sobre os mecanismos de estruturação de comunidades de macroinvertebrados aquáticos, subsidiando a melhoria das técnicas de amostragem e projetos futuros de restauração dos riachos.
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Efeito de doses de potássio sobre índices de avaliação do estado de nitrogênio e produtividade de batata-semente básica em substrato orgânico e hidroponia / Effect of potassium doses on indices of assessing the state of nitrogen and yield of basic seed-potato in organic substrate and hydroponics

Tufik, Camila Borges Antonio 12 August 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:39:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1517562 bytes, checksum: b53601808a4fd1550697a44b90cc133b (MD5) Previous issue date: 2013-08-12 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The purpose of this study was to characterize the effect of potassium doses (K) on diagnosis indices of the nitrogen state (N) of potato plants in two production systems: pots containing organic substrate and hydroponic system of three phases. Furthermore, this study aimed to determine the critical content of K in the dry matter of the reference leaf (fourth leaf) and quantify the optimal dose of K for the production of minitubercles of the basic seed in both production systems. The systems consisted of planting minitubercles from Ágata cultivar, basic category G0 and type VI in pots containing 3 dm3 of organic substrate BioPlant® Silver serie and minitubercle planting in pots with a capacity of 8.5 L containing washed sand over a layer of 5-7 cm of expanded clay, in hydroponic system. Each system was an experiment. The treatments in pot containing organic substrate consisted of 5 doses of KCl (0; 660; 1320; 1980 and 2640 mg dm-3) and in the hydroponic system the treatments were 5 doses of K (0; 2.5; 5.0; 7.5 and 10.0 mmol L-1). In the system where the organic substrate was used, 20% of N and K doses were applied in the pre-planting and the remaining 80% were divided in 15 equal parts and applied daily, by way of irrigation water from the emergency of plants. In the hydroponic system, the nutrient solution containing the treatments and other nutrients were provided daily since the emergence of plants and the sources utilized were KCl and KNO3. Both experiments were installed in a greenhouse. In the experiment in organic substrate, the determinations made in the fourth leaf at 21 days after the emergence (DAE), the dose of K influenced the nitrogen balance index (NBI), number of leaflets (NL), leaf area (LA), masses of fresh matter (FW) and dry matter (DM). In the experiment in hydroponic system, the indices in the fourth leaf influenced by dose of K were: SPAD, chlorophyll (CHL), NBI, NL, length (L), width (W), fresh mass (FW) and dry matter (DM) and N-NO3 content in petiole sap. In both experiments, at the determination performed in the fourth leaf at 21 DAE, the dose of K did not influence the N content in the dry matter. On this date, the optimal K content in the dry matter of the fourth leaf was 6.62 and 6.17 dag kg-1 for systems in pots with organic and hydroponic substrate, respectively. In both experiments, there was a dose effect of K on the number and mass of the matter of fresh tubercles. In the experiment in pot containing organic substrate, the maximum value of tubercles number was 15.95 and the mass of fresh tubercles per plant was 301.9 g, obtained with the dose 0 mg dm-3 KCl. In the hydroponic systems, the maximum yield per plant was 48.41 tubercles obtained with 6.15 mmol L-1 of K and maximum mass of fresh matter was 646.6 g/plant, obtained with 6.13 mmol L-1 of K. / O objetivo do trabalho foi caracterizar o efeito de doses de potássio (K) sobre índices de diagnóstico do estado de nitrogênio (N) de plantas de batata em dois sistemas de produção: vasos contendo substrato orgânico e sistema hidropônico de três fases. Adicionalmente, objetivou-se determinar o teor crítico de K na matéria seca da folha de referência (quarta folha) e quantificar a dose ótima de K para a produção de minitubérculos de batata semente-básica nos dois sistemas de produção. Os sistemas constituíram do plantio de minitubérculos da cultivar Ágata, categoria básica G0 e tipo VI, em vasos contendo 3 dm3 do substrato orgânico BioPlant®, série Prata e do plantio de minitubérculos em vasos com capacidade para 8,5L contendo areia lavada sobre uma camada de 5 - 7 cm de argila expandida, em sistema hidropônico. Cada sistema foi um experimento. Os tratamentos em vaso contendo substrato orgânico foram constituídos por 5 doses de KCl (0; 660; 1320; 1980 e 2640 mg dm-3) e no sistema hidropônico os tratamentos foram 5 doses de K (0; 2,5; 5,0; 7,5 e 10,0 mmol L-1). No sistema onde foi utilizado o substrato orgânico, 20% das doses de N e K foram aplicadas em pré-plantio e os 80% restante foram divididas em 15 partes iguais e aplicadas diariamente, via água de irrigação a partir da emergência das plantas. No sistema hidropônico, a solução nutritiva contendo os tratamentos e os demais nutrientes foi fornecida diariamente desde a emergência das plantas e as fontes utilizadas foram KCl e KNO3. Os dois experimentos foram instalados em casa de vegetação. No experimento em substrato orgânico, nas determinações efetuadas na quarta folha, aos 21 dias após a emergência (DAE), a dose de K influenciou o índice de balanço de nitrogênio (NBI), número de folíolos (NFo), área foliar (AF), massas das matérias fresca (MF) e seca (MS). No experimento em sistema hidropônico, os índices na quarta folha influenciados por dose de K foram: SPAD, clorofila (CHL), NBI, NFo, comprimento (C), largura (L), massa da matéria fresca (MF) e seca (MS) e o teor de N-NO3 na seiva do pecíolo. Em ambos os experimentos, na determinação efetuada na quarta folha, aos 21 DAE, a dose de K não influenciou o teor de N na matéria seca. Nesta data, o teor ótimo de K na matéria seca da quarta folha foi 6,62 e 6,17 dag kg-1 para os sistemas em vasos com substrato orgânico e hidropônico, respectivamente. Em ambos os experimentos, houve efeito de dose de K sobre o número e massa da matéria de tubérculos frescos. No experimento em vaso contendo substrato orgânico, o valor máximo do número de tubérculos foi 15,95 e da massa de tubérculos frescos por planta foi 301,9 g, obtidos com a dose 0 mg dm-3 de KCl. No sistema hidropônico, a máxima produtividade por planta foi 48,41 tubérculos obtida com 6,15 mmol L-1 de K e a máxima massa da matéria fresca de tubérculos foi 646,6 g/planta, obtida com 6,13 mmol L-1 de K.
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Crescimento de mudas frutíferas sob ação de microrganismos promotores de crescimento / Growth of fruit seedlings under the action of growth promoting microorganisms

Santos, Carlos Henrique Barbosa [UNESP] 05 September 2017 (has links)
Submitted by CARLOS HENRIQUE BARBOSA SANTOS null (carlosufrb@hotmail.com) on 2017-10-18T12:25:03Z No. of bitstreams: 1 Tese_Carlos_Henrique_Barbosa_Santos.pdf: 953644 bytes, checksum: 56603e75ff2fec6f11d766aa8ee7d73a (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-10-23T17:35:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_chb_dr_jabo.pdf: 953644 bytes, checksum: 56603e75ff2fec6f11d766aa8ee7d73a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T17:35:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_chb_dr_jabo.pdf: 953644 bytes, checksum: 56603e75ff2fec6f11d766aa8ee7d73a (MD5) Previous issue date: 2017-09-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A utilização de microrganismos promotores do crescimento de plantas (MPCP) tem sido aceita como alternativa a redução do uso de adubos químicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar dois métodos de encapsulamento de diferentes MPCP para verificar o estabelecimento destes microrganismos no solo e, consequentemente, o efeito do uso dos MPCP no crescimento de mudas de espécies frutíferas. O inóculo microbiano continha as seguintes espécies: Azospirillum brasilense, Burkolderia cepacia, Bacillus thuringienses, B. megaterium, B. cereus, B. subtilis, Tricoderma spp. e Isolado 411. As espécies frutíferas avaliadas foram: Myrciaria cauliflora (DC.) O. Berg (jabuticaba); Myrciaria glazioviana (Kiaersk.) G. Barros & Sobral (cabeludinha); Myrciaria dubia (Kunth) Mc Vaugh (camu-camu); Eugenia brasiliensis Lam. (grumixama); Diospyros kaki L. (caqui); Garcinia brasiliensis Mart. (bacupari); Annona muricata L. (graviola); Duguetia lanceolata A. St. – Hil. (pindaíba); Chrysophyllum cainito L. (caimito); Anacardium occidentale L. (caju); Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl. (nêspera) e Litchi chinensis Sonn. (lichia). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado (DIC), em esquema fatorial 3 (controle, alginato de sódio e argila) x 2 (presença e ausência de inóculo microbiano) com cinco repetições (uma muda por repetição). As mudas foram mantidas em 50% de iluminação à temperatura média de 22,5°C, durante noventa dias, sendo avaliada a altura da planta, diâmetro do colo, massa seca da parte aérea e de raiz, atividade enzimática da desidrogenase, determinação do amônio e nitrato, fosfato solúvel em bicarbonato, carbono da biomassa microbiana e número total de bactérias. O diâmetro do caule para as mudas de M. dubia foi maior quando não se utilizou os MPCP, sejam eles encapsulados ou não. A presença de MPCP, independentemente do encapsulante utilizado, promoveu melhor desenvolvimento das mudas de caimito (altura, diâmetro do caule e massa seca de raiz) e de lichia (diâmetro do caule e massa seca da planta). Desta forma, os MPCP favorecem o crescimento das mudas destas espécies. A atividade microbiana no substrato não foi influenciada pela adição de microrganismos encapsulados. Os agentes encapsulantes argila e alginato de sódio, com ou sem inóculo microbiano, podem modificar a atividade enzimática da desidrogenase, o nitrogênio e o carbono da biomassa microbiana no solo, porém são dependentes da espécie frutífera cultivada. / The use of plant growth promoting microorganisms (PGPM) has been accepted as an alternative to reduce the use of chemical fertilizers. The objective of this study was to evaluate two methods of encapsulation of different PGPM to verify the establishment of these microorganisms in the soil and, consequently, the effect of PGPM on the growth of seedlings of fruit species. The microbial inoculums contained the species: Azospirillum brasilense, Burkolderia cepacia, Bacillus thuringienses, B. megaterium, B. cereus, B. subtilis, Tricoderma spp. and Isolado 411. The fruit species evaluated were: Myrciaria cauliflora (DC.) O. Berg; Myrciaria glazioviana (Kiaersk.) G. Barros & Sobral; Myrciaria dubia (Kunth) Mc Vaugh; Eugenia brasiliensis Lam.; Diospyros kaki L.; Garcinia brasiliensis Mart.; Annona muricata L.; Duguetia lanceolata A. St. – Hil.; Chrysophyllum cainito L.; Anacardium occidentale L.; Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl. and Litchi chinensis Sonn. The experimental design was a completely randomized, in a factorial arrangement 3 (control, sodium alginate and clay) x 2 (presence and absence of microbial inoculum) with five replicates (one seedling per replicate). Seedlings were maintained in 50% illumination at an average temperature of 22.5 °C for ninety days, and evaluated for plant height, diameter, root shoot and stem dry shoot, enzymatic activity of dehydrogenase, determination of ammonium and nitrate, bicarbonate soluble phosphate, carbon of the microbial biomass and total number of bacteria. The stem diameter of M. dubia seedlings was higher when PGPM was not used, either encapsulated or not. The presence of PGPM, regardless the encapsulant used, promoted a better development of C. cainito (height, stem diameter and root dry mass) and L. chinensis (stem diameter and plant dry mass) seedlings. In this way, the PGPM favor the growth of the seedlings of these species. Microbial activity in the substrate was not influenced by the addition of encapsulated microorganisms. The encapsulating agent clay and sodium alginate, with or without microbial inoculum, may modify the enzymatic activity of the dehydrogenase, the nitrogen and the carbon of the microbial biomass in the soil, but are dependent on the cultivated fruit species.
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An?lise de antenas de microfita com patches circulares sobre substratos anisotr?picos usando o m?todo dos potenciais de Hertz

Feitoza, Giordano Miranda 31 March 2005 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:56:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GiordanoMF.pdf: 774778 bytes, checksum: b977df28e6c6f90822e09729743a9dc1 (MD5) Previous issue date: 2005-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / This work consists on the theoretical and numerical analysis of some properties of circular microstrip patch antennas on isotropic and uniaxial anisotropic substrates. For this purpose, a full wave analysis is performed, using Hertz Vector Potentials method in the Hankel Transform domain. In the numerical analysis, the moment method is also used in order to determine some characteristics of the antenna, such as: resonant frequency and radiation pattern. The definition of Hertz potentials in the Hankel domain is used in association with Maxwell?s equations and the boundary conditions of the structures to obtain the Green?s functions, relating the components of the current density on the patch and the tangential electric field components. Then, the Galerkin method is used to generate a matrix equation whose nontrivial solution is the complex resonant frequency of the structure. In the analysis, a microstrip antenna with only one isotropic dielectric layer is initially considered. For this structure, the effect of using superconductor patches is also analyzed. An analysis of a circular microstrip antenna on an uniaxial anisotropic dielectric layer is performed, using the Hertz vector potentials oriented along the optical axis of the material, that is perpendicular to the microstrip ground plane. Afterwards, the circular microstrip antenna using two uniaxial anisotropic dielectric layers is investigated, considering the particular case in which the inferior layer is filled by air. In this study, numerical results for resonant frequency and radiation pattern for circular microstrip antennas on isotropic and uniaxial anisotropic substrates are presented and compared with measured and calculated results found in the literature / Este trabalho consiste na an?lise te?rica e num?rica das caracter?sticas de uma antena de microfita com patch circular, cujo substrato ? composto por materiais diel?tricos isotr?picos e anisotr?picos uniaxiais. Para isto, uma an?lise de onda completa ? realizada, utilizando-se o M?todo dos Potenciais Vetoriais de Hertz no dom?nio da transformada de Hankel. Na an?lise num?rica da estrutura, ? utilizado tamb?m o M?todo de Galerkin, como um caso particular do M?todo dos Momentos, visando a determina??o de suas caracter?sticas, tais como a freq??ncia de resson?ncia e o diagrama de radia??o. A defini??o dos potenciais vetoriais de Hertz, em conjunto com as equa??es de Maxwell e as condi??es de contorno da estrutura, permite a obten??o das fun??es di?dicas de Green, relacionando as componentes da densidade de corrente no patch com as componentes tangenciais do campo el?trico. O M?todo de Galerkin ? ent?o usado para gerar a equa??o matricial, cuja solu??o n?o trivial permite a obten??o da freq??ncia de resson?ncia complexa da estrutura. Na an?lise, s?o consideradas, inicialmente, antenas de microfita com uma camada diel?trica isotr?pica separando o patch e o plano de terra, sendo analisado ainda para esta estrutura, o caso no qual o patch ? composto por um material supercondutor. Em seguida, ? considerado tamb?m o caso no qual o substrato diel?trico ? composto por um material anisotr?pico uniaxial, orientando os potenciais vetoriais na dire??o do eixo ?ptico, que ? tomado na dire??o perpendicular ao plano de terra. ? feita ainda a an?lise da antena de microfita com patch circular situado sobre duas camadas diel?tricas anisotr?picas uniaxiais, considerando o caso particular do patch suspenso, no qual a camada inferior ? composta pelo ar. S?o apresentados resultados da freq??ncia de resson?ncia e do diagrama de radia??o para patches circulares isotr?picos e anisotr?picos, fazendo-se compara??es com outros resultados obtidos na literatura
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Aplica??o do m?todo LTT ?s estruturas retangulares e triangulares em multicamadas e empilhadas em substratos PBG para comunica??es m?veis

Santos, K?sia Cristiane dos 20 December 2005 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:56:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KesiaCS.pdf: 532004 bytes, checksum: e5e91d569fd4794eb815f8bbbd565c37 (MD5) Previous issue date: 2005-12-20 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Recently the planar antennas have been studied due to their characteristics as well as the advantages that they offers when compared with another types of antennas. In the mobile communications area, the need for this kind of antennas have became each time bigger due to the intense increase of the mobile communications that needs of antennas which operate in multifrequency and wide bandwidth. The microstrip antennas presents narrow bandwidth due the loss in the dielectric generated by radiation. Another limitation is the radiation pattern degradation due the generation of surface waves in the substrate. In this work some used techniques to minimize the disadvantages (previously mentioned) of the use of microstrip antennas are presented, those are: substrates with PBG material - Photonic Bandgap, multilayer antennas and with stacked patches. The developed analysis in this work used the TTL - Transverse Transmission Line method in the domain of Fourier transform, that uses a component of propagation in the y direction (transverse to the direction real of propagation z), treating the general equations of electric and magnetic field as functions of y and y . This work has as objective the application of the TTL method to microstrip structures with single and multilayers of rectangular and triangular patches, to obtaining the resonance frequency and radiation pattern of each structure. This method is applied for the treatment of the fields in stacked structures. The Homogenization theory will be applied to obtaining the effective permittivity for s and p polarizations of the substrate composed of PBG material. Numerical results for the triangular and rectangular antennas with single layer, multilayers resonators with triangular and rectangular patches are presented (in photonic and isotropic substrates). Conclusions and suggestions for continuity of this work are presented / Recentemente as antenas planares t?m despertado interesses devido ?s suas caracter?sticas assim como pelas vantagens que oferecem quando comparadas com os demais tipos de antenas. Na ?rea de comunica??es m?veis a necessidade de antenas desse tipo tem se tornado cada vez maior devido ao intenso crescimento das comunica??es m?veis que necessitam de antenas que operem em multifreq??ncia e em banda larga. As antenas de microfita apresentam largura de banda estreita devido ?s perdas no diel?trico geradas pela irradia??o. Outra limita??o ? a degrada??o do diagrama de irradia??o devido ? gera??o de ondas de superf?cie no substrato. Neste trabalho s?o apresentadas algumas t?cnicas usadas para tentar minimizar as desvantagens (citadas acima) do uso de antenas de microfita, sendo elas: substratos com material PBG – Photonic Bandgap, antenas em multicamadas e com patches empilhados. As an?lises desenvolvidas neste trabalho foram realizadas com a utiliza??o do m?todo LTT – Linha de Transmiss?o Transversa no dom?nio da transformada de Fourier que utiliza uma componente de propaga??o na dire??o y (transversa ? dire??o real de propaga??o z), tratando assim as equa??es gerais dos campos el?tricos e magn?ticos em fun??es de y e y . Este trabalho tem como objetivo a aplica??o do m?todo LTT ?s estruturas de microfita com uma e multicamadas de patch retangular e triangular, para a obten??o da freq??ncia de resson?ncia e diagrama de irradia??o de cada estrutura. Este m?todo ? aplicado para o tratamento dos campos em estruturas planares empilhadas. A teoria da Homogeneiza??o ser? aplicada para a obten??o da permissividade efetiva para as polariza??es s e p dos substratos compostos de material PBG - Photonic Bandgap. Resultados num?ricos para as antenas triangulares e retangulares com uma camada e ressoadores com multicamadas de patch retangular e triangular s?o apresentados (em substratos isotr?picos e fot?nicos). S?o apresentadas conclus?es e sugest?es para a continuidade deste trabalho
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Desenvolvimento e caracteriza??o de dispositivos para reposi??o de filmes finos por descarga em c?todo oco

Ara?jo, Francisco Odolberto de 15 December 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T15:15:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FranciscoOA.pdf: 1713095 bytes, checksum: 1ee138883bf7b4da570838f6654b21b0 (MD5) Previous issue date: 2006-12-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / In the present work we use a plasma jet system with a hollow cathode to deposit thin TiO2 films on silicon substrates as alternative at sol-gel, PECVD, dip-coating e magnetron sputtering techniques. The cylindrical cathode, made from pure titanium, can be negatively polarized between 0 e 1200 V and supports an electrical current of up to 1 A. An Ar/O2 mixture, with a total flux of 20 sccm and an O2 percentage ranging between 0 and 30%, is passed through a cylindrical hole machined in the cathode. The plasma parameters and your influence on the properties of deposited TiO2 films and their deposition rate was studied. When discharge occurs, titanium atoms are sputtered/evaporated. They are transported by the jet and deposited on the Si substrates located on the substrate holder facing the plasma jet system at a distance ranging between10 and 50 mm from the cathode. The working pressure was 10-3 mbar and the deposition time was 10 -60 min. Deposited films were characterized by scanning electron microscopy and atomic force microscopy to check the film uniformity and morphology and by X-ray diffraction to analyze qualitatively the phases present. Also it is presented the new dispositive denominate ionizing cage, derived from the active screen plasma nitriding (ASPN), but based in hollow cathode effect, recently developed. In this process, the sample was involved in a cage, in which the cathodic potential was applied. The samples were placed on an insulator substrate holder, remaining in a floating potential, and then it was treated in reactive plasma in hollow cathode regime. Moreover, the edge effect was completely eliminated, since the plasma was formed on the cage and not directly onto the samples and uniformity layer was getting in all sampl / Filmes finos de TiO2 foram depositados sobre substrato de sil?cio usando descarga em c?todo oco. A presente t?cnica foi usada como alternativa a outras t?cnicas como solgel, PECVD, dip-coating e magnetron sputtering. O sistema desenvolvido apresenta uma configura??o de c?todo oco cil?ndrico polarizado com tens?o DC variando entre 0 e 1200V e corrente de at? 1 A. Um jato de plasma de Ar + O2, extrai ?tomos do mesmo, que s?o em seguida depositados sobre um substrato frontalmente posicionado. As amostras s?o posicionadas a dist?ncias do c?todo variando entre 10 e 50 mm. Foram investigadas os par?metros do plasma e sua influ?ncia sobre as propriedades dos filmes depositados. Os par?metros de trabalho para deposi??o de TiO2 foram 20sccm de fluxo da mistura Ar/O2 com percentuais de oxig?nio variando entre 0 -30%, press?o de trabalho 10-3 mbar e tempos de deposi??o de 10 -60 minutos. As amostras foram caracterizadas por microscopia eletr?nica de varredura e microscopia de for?a at?mica para verificar sua uniformidade e morfologia e por difra??o de raios-x para an?lise qualitativa das fases presentes nos filmes. Neste trabalho tamb?m ? apresentado um novo dispositivo, denominado gaiola ionizante, derivada da nitreta??o a plasma em tela ativa (ASPN), mas baseado no efeito de c?todo oco, recentemente desenvolvido. Neste processo as amostras s?o envolvidas por uma gaiola, na qual ? aplicada a diferen?a de potencial, permanecendo em potencial flutuante, sendo tratadas numa regi?o livre da influ?ncia do campo el?trico por um plasma reativo, operando em regime de c?todo oco. Dessa forma foram obtidas camadas uniformes em todas as amostras e eliminados defeitos como o efeito de borda
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Dinâmica funcional da comunidade microbiana heterotrófica em lagoa rasa subtropical

Lima, Marla Sonaira January 2011 (has links)
Ecossistemas aquáticos flutuam em torno de tendências, podendo ocorrer transições súbitas de um regime persistente para outro, alterando a viabilidade dos recursos ou dos parâmetros físico-químicos. Seguindo essa tendência, comunidades variam no tempo e no espaço como resultado de suas interações com o ambiente e com os outros organismos. Comunidades microbianas aquáticas são importantes componentes do metabolismo aquático, atuando na reciclagem de nutrientes pela remineralização e na transferência de biomassa pela alça microbiana. A compreensão da dinâmica funcional microbiana em lagos é uma importante ferramenta para o entendimento desses sistemas, uma vez que a funcionalidade e a composição microbiana podem refletir as condições gerais da lagoa em questão. Desse modo, no presente trabalho, foi utilizada a abordagem de impressões metabólicas da comunidade microbiana na Lagoa Mangueira, uma grande lagoa costeira, rasa e subtropical localizada no extremo sul do Brasil. Teve como objetivo avaliar, pioneiramente para essa região, a diversidade metabólica microbiana aquática através de padrões de consumo de fontes de carbono disponíveis, utilizando Biolog EcoplatesTM e verificar a existência de dinâmicas temporais e espaciais na preferência de consumo desses substratos. Foi observada heterogeneidade temporal e espacial na preferência de consumo de substratos ao longo da Lagoa. Tais preferências puderam ser representadas por diferentes substratos indicadores, associados às estações e aos locais da Lagoa. O consumo das fontes de carbono esteve relacionado com a variabilidade ambiental de fatores como turbidez, transparência da água, nutrientes, clorofila a, carbono orgânico temperatura. Isso evidencia que a dinâmica funcional foi influenciada pela dinâmica de nutrientes, pelos componentes de produtividade, pela sazonalidade e pela compartimentação da Lagoa. Nesse sentido, a investigação do consumo de fontes de carbono, no presente estudo, se mostrou um bom indicador da dinâmica funcional microbiana para ecossistemas aquáticos. / Aquatic ecosystems float around trends in which abrupt transitions can occur between persistents regimes, alterning the viability of the resources or the physical and chemical parameters. Following this trend, communities vary in time and space as a result of their interactions with the environment and other organisms. Microbial communities are important components in the aquatic metabolism, responsible for recycling of nutrients by remineralization, and transfering of biomass through the microbial food web. Understanding the functional microbial dynamics in lakes is an important tool to understand these systems, since the microbial composition and function may reflect the overall condition of the lake. The approach of metabolic fingerprint of microbial communities in shallow lakes was applied in the current study in Lake Mangueira, a costal and large subtropical shallow lake located in southern Brazil. The main goal was to evaluate, pioneered for this region, the heterotrophic microbial metabolic diversity through consumption patterns of available carbon sources using Biolog EcoplatesTM and verify the existence of temporal and spatial dynamics of consumption preference in these substrates. As a result, was observed temporal and spatial heterogeneity of substrate consumption preference among the Lake. Such preferences were represented by different substrate indicators, associated with seasons and sites within the Lake. The substrate utilization was related to environmental variability of factors as turbidity, water transparence, nutrients, chlorophyll a, organic carbon, water temperature. This is evidence that the functional dynamic was influenced by nutrients dynamic, production component, seasonality and compartimentation. In this way, carbon source utilization approach was a good indicator of functional dynamics in the present study to aquatic ecosystems.

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