Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 426539.pdf: 739311 bytes, checksum: f650cc62f7d453c93f03cd8df5d812e4 (MD5) Previous issue date: 2010-08-16 / Introdu??o: A contagem de corpos lamelares (CCL) no fluido amni?tico ? utilizada amplamente para identificar rec?m-nascidos em risco da s?ndrome do desconforto respirat?rio, que se beneficiariam da profilaxia de surfatante ou terapia muito precoce. O teste de CCL em aspirado traqueal em rec?m-nascidos ainda n?o foi explorado. Objetivo: O objetivo foi avaliar o desempenho da CCL em aspirados traqueais de rec?m-nascidos a termo e pr?-termos em ventila??o mec?nica para predi??o da S?ndrome do Desconforto Respirat?rio. M?todo: Rec?m-nascidos pr?-termo <37 semanas com SDR (n=38) e um grupo controle n?o SDR (n=34), ambos os grupos necessitando ventila??o mec?nica e com at? tr?s dias de vida, foram inclu?dos no estudo. O grupo controle foi dividido em 2 grupos: rec?m-nascidos pr?-termo sem SDR (n =16) e rec?m-nascidos a termo (n=18). CCL foi realizada em um contador autom?tico de c?lulas Sysmex XT-1800i (Sysmex Corporation, Jap?o). As amostras traqueais foram dilu?das em um diluente (Dithiothreitol) sem centrifuga??o. Para realizar a CCL, foi preparado antecipadamente uma dilui??o de Ddithiothreitol? - DTT (Invitrogen) em ?gua destilada -- 10mg/ml, a qual foi mantida congelada a -20?C em tubos de Eppendorf at? ser usada. A amostra foi acondicionada em um tubo de teste contendo a dilui??o DTT em uma propor??o de 1 parte de aspirado traqueal para 6 partes de DTT. A amostra foi agitada durante 10s e o material foi aspirado pelo contador de c?lulas. A CCL foi realizada atrav?s do canal de plaquetas. Todos os resultados obtidos foram multiplicados por 7. O teste de microbolhas est?veis foi feito para compara??o. Resultados: A mediana e o intervalo interquartil (IQR) da CCL para o grupo SDR foi 38500/&#956;L (14000- 112000), e, para o grupo NSDR foi 826000 (483000- 2866500), p<0.001. Utilizando-se um ponto de corte de 200.000corpos lamelares/&#956;L para predi??o do diagn?stico de SDR a CCL mostrou uma sensibilidade de 89,5% (IC95%: 76,5-96,6) e uma especificidade de 95,7% (IC95%: 80,4-99,8). Em rela??o a curva ROC, a ?rea sob a curva foi 0.96(95%IC 0.91-0.99). Conclus?o: a CCL em aspirado traqueal pode ser rapidamente e facilmente realizada e poderia ser usada para diagnosticar SDR, auxiliando na decis?o de administrar surfatante.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000402198-Texto+Completo-0.pdf: 1075449 bytes, checksum: 7bb48cb5cb3fd7514b495fe5127c6449 (MD5) Previous issue date: 2008 / Objectives: To evaluate the usefulness of the stable microbbuble test in gastric aspirate to predict the need for a second dose of surfactant in a group of preterm infants who received selective surfactant prophylaxis based on a low microbbuble count, and to study the association between other variables and the need of retreatment in the same group of patients. Methods: A retrospective cohort study was preformed from October 2002 to November 2006 by reviewing 114 charts of the inborn preterm babies T 31 weeks admitted to Hospital São Lucas da PUCRS neonatal intensive care unit, who had Stable Microbubble Test count under 25 microbbubles/mm2 and received prophylactic (or early) surfactant treatment. Results: From the babies studied, 32% received two or more doses of surfactant. The main conditions associated with retreatment was respiratory distress syndrome, high necessity of oxygen and pneumothorax. Thirty six percent of the neonates which received more than one dose of surfactant had a microbubbles count under 10 microbubble/mm2 (sensivity 93%; 95% CI 77- 99%), a negative predictive value o 91% (95% CI 68-98%). However, the specificity of the test was low. Low gestational age was the main risk factor associated with the necessity of a second (or more) doses of surfactant. Conclusions: The re-dosing of surfactant is very unlikely with stable microbbuble test in gastric fluid above 10 microbubbles/mm2 and gestational ages above 27 weeks. However, low positive predictive values suggest that stable microbbuble test has little clinical aplicability to predict the need for retreatment in this low count range. / Objetivos: Avaliar a utilidade do teste de microbolhas estáveis no aspirado gástrico para predição da necessidade de segunda dose de surfactante em um grupo de prematuros que receberam surfactante profilático baseado em uma baixa contagem de microbolhas. Estudar a associação entre outras variáveis e a necessidade de retratamento no mesmo grupo de pacientes. Métodos: Foi realizado um estudo retrospectivo analisando 114 prontuários de prematuros ≤31 semanas de gestação nascidos no hospital São Lucas da PUCRS e internados em sua Unidade de Tratamento Intensivo Neonatal entre outubro de 2002 e novembro de 2006. Todos os neonatos tiveram uma contagem de microbolhas inferior a 25 microbolhas/mm² e receberam profilaxia seletiva com surfactante. Resultados: Trinta e seis pacientes (32%) receberam duas ou mais doses de surfactante. As principais condições associadas com o retratamento foram a síndrome do desconforto respiratório, a elevada necessidade de oxigênio e o pneumotórax. Trinta e seis por cento dos bebês que receberam mais de uma dose de surfactante tinham uma contagem de microbolhas ≤10μb/mm². A sensibilidade foi 93% (IC 95%: 77-99%) e o valor preditivo negativo foi 91% (IC 95%: 68-98%). Contudo, a especificidade do teste foi pouco expressiva. A baixa idade gestacional foi o fator de risco mais fortemente associado com a necessidade de segunda dose de surfactante. Conclusões: A necessidade de mais de uma dose de surfactante é muito pouco provável com um resultado do teste de microbolhas estáveis acima de 10 microbolhas/mm² e idade gestacional acima de 27 semanas de gestação. Contudo, o baixo valor preditivo positivo sugere que o teste de microbolhas estáveis tenha pouca aplicabilidade clínica para predizer a necessidade de retratamento nesta baixa contagem.

Alguns estudos sugerem que as pequenas vias aéreas têm um papel importante na fisiopatologia da lesão pulmonar aguda/ síndrome do desconforto respiratório agudo (LPA/SDRA). O epitélio respiratório que reveste as vias aéreas é capaz de liberar mediadores inflamatórios e está relacionado ainda com a produção de surfactante nas vias aéreas. Até o presente momento, existem poucos estudos que avaliaram se estas funções do epitélio que reveste as pequenas vias aéreas encontram-se alteradas na SDRA. No presente estudo, nós mensuramos a expressão da proteína de surfactante (PS) A e PS-B, a expressão de citocinas inflamatórias interleucina (IL)-6 e IL-8, e um índice de apoptose do epitélio que reveste as pequenas vias aéreas de pacientes com SDRA que foram submetidos a autópsia e comparamos estes resultados com os de indivíduos controle. Foram incluídos no estudo pulmões de autópsia de 31 pacientes com SDRA (PaO2/FiO2200, 45±14 anos, 16 homens) e 11 controles (52±16 anos, 7 homens). A expressão de IL-6, IL-8, PS-A e PS-B no epitélio das pequenas vias aéreas (diâmetro2.0mm) foi verificada através de reações de imunohistoquímica e análise de imagem. O índice de apoptose epitelial das vias aéreas foi avaliado através do método de TUNEL e da expressão de FAS/FASL. Avaliou-se ainda a densidade de células inflamatórias positivas para IL-6 e IL-8 na parede das pequenas vias aéreas. As vias aéreas dos pacientes com SDRA apresentaram maior expressão epitelial de IL-8 (p=0,006) e maior densidade de células inflamatórias expressando IL-6 (p=0,004) e IL-8 (p<0,001) quando comparadas com o grupo controle. Não houve diferenças na expressão epitelial de PS-A e PS-B ou no índice de apoptose epitelial entre os grupos SDRA e controle. Nossos resultados mostram que as pequenas vias aéreas participam da inflamação pulmonar de pacientes com SDRA, caracterizada pelo aumento na expressão de interleucinas próinflamatórias tanto em células inflamatórias da parede da via aérea quanto no epitélio. Nossos resultados sugerem ainda que a apoptose não é um mecanismo importante de morte de células epiteliais das vias aéreas de pacientes com SDRA / Recent studies suggest a role for distal airway injury in the pathophysiology of human ALI/ARDS. The epithelium lining the airways modulates airway function secreting a large number of molecules such as surfactant components and inflammatory mediators. So far, there is little information on how these secretory functions of the small airways are altered in ARDS. In the present study we assessed the airway expression of surfactant protein (SP) A and SP B, the expression of inflammatory cytokines IL-6 and IL-8, and an index of airway epithelial apoptosis of patients with ARDS submitted to autopsy and compared the results with those of control subjects. We studied autopsy lungs of 31 ARDS patients (PaO2/FiO2200, 45±14 years, 16 males) and 11 controls (52±16 years, 7 males). Using immunohistochemistry and image analysis, we quantified the expression of IL-6, IL-8 and SP-A and SP-B in the epithelium of small airways (diameter2.0mm). Airway epithelial apoptosis index was obtained with the TUNEL assay and FAS/FASL expression. We also quantified the density of inflammatory cells expressing IL-6 and IL-8 within the small airway walls. ARDS airways showed an increase in the epithelial expression of IL-8 (p=0.006) and an increased density of inflammatory cells expressing IL-6 (p=0.004) and IL-8 (p<0.001) when compared to controls. There were no differences in SP-A and SP-B epithelium expression or in epithelial apoptosis index between ARDS and controls. Our results show that the distal airways are involved in ARDS lung inflammation with higher expression of pro-inflammatory interleukins in both airway epithelial and inflammatory cells. Our results also suggest that apoptosis is not a major mechanism of airway epithelial cell death in ARDS

INTRODUÇÃO: A Síndrome do Desconforto Respiratório (SDR) é uma das principais causas de morbi-mortalidade no período neonatal, acometendo predominantemente os recém-nascidos prematuros, devido a uma está deficiência de surfactante pulmonar. O Instituto Butantan desenvolveu um surfactante de origem porcina com objetivo de torná-lo disponível a todo Sistema Único de Saúde. O objetivo deste estudo foi avaliar, em um modelo experimental de SDR (coelho), a estabilidade do Surfactante Butantan (SB) um ano após sua produção e armazenamento a 2 a 8ºC.. MÉTODOS: 94 coelhos prematuros foram randomizados em dois grupos de tratamento: grupo Butantan e grupo Curosurf (controle), e foram analisados em seis momentos de avaliação: momento zero (imediatamente após a retirada do refrigerador ao final de 1 ano de armazenamento), momento 1 (24 horas após ter sido mantido a 24ºC), momento 2 (após 30 dias de armazenamento a 20º C), momento 3 (após 60 dias de armazenamento a 20º C), momento 4 (após 90 dias de armazenamento a 20º C) e momento 5 (após 180 dias de armazenamento a 20º C). Após receberem o surfactante, os animais foram ventilados por 15 minutos para avaliação da pressão ventilatória e complacência pulmonar dinâmica e curva pressão-volume pulmonar, seguindo-se à avaliação histopatológica dos pulmões. RESULTADOS: A eficácia do SB foi semelhante à do Curosurf, um ano após a sua produção e armazenamento a 2 a 8ºC. Neste momento de avaliação, não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos de estudo quanto a: pressão ventilatória, complacência pulmonar dinâmica e curva pressão-volume pulmonar. Ao longo dos seis meses de armazenamento inadequado do SB, demonstrou-se a redução de sua eficácia durante a fase expiratória da curva pressão-volume pulmonar. No entanto, a análise histopatológica, demonstrou não haver diferença significante entre os dois grupos de estudo em nenhum dos momentos de avaliação. CONCLUSÕES: As propriedades bioquímicas do SB foram preservadas após um ano de sua produção e armazenamento em refrigeração de 2 a 8ºC. Condições inadequadas de armazenamento resultam em alterações das propriedades bioquímicas do SB e, conseqüentemente, de sua função, o que foi demonstrado por parâmetros de mecânica ventilatória, mas não pela análise histopatológica dos pulmões / INTRODUCTION: Respiratory Distress Syndrome (RDS) is one of the major causes of death among premature newborns, and its development results from surfactant deficiency. The Butantan Institute has recently produced a porcine-derived surfactant preparation in order to make it available nationwide for RDS treatment in the near future. The aim of this study was to evaluate, in an animal model of surfactant deficiency (premature rabbits), the stability of the Butantan Surfactant (SB) one year after its production and storage in the refrigerator, at 2 to 8ºC. METHODS: 94 premature newborn rabbits were randomized into two treatment groups: SB or Curosurf®(control surfactant), and were assessed in six different time-points: time-point zero (immediately after removal of surfactant from the refrigerator after one year of storage); time-point 1 (after 24h of storage at 24ºC), time-point 2 (after 30 days of storage at 20ºC), time-point 3 (after 60 days of storage at 20ºC), time-point 4 (after 90 days of storage at 20ºC) and time-point 5 (after 180 days of storage at 20ºC). The animals were artificially ventilated for 15 minutes for lung mechanics assessment (ventilatory pressure, dynamic lung compliance and pressure-lung volume curve), followed by removal of the lungs for histopathologic analysis. RESULTS: After one year of its production and storage at 2 to 8ºC, SB was as efficient as Curosurf. At this time-point, The Butantan Surfactant showed no significant differences with Curosurf® regarding the ventilatory pressure, dynamic lung compliance and pressure-lung volume curve. Throughout the six month period of warming, SB showed a decreasing efficiency, as revealed by the expiratory phase of the pressure-lung volume curve. However, the histopathologic analysis revealed no significant differences between the two groups, in any of the study time-points. CONCLUSIONS: The Butantan Surfactant preserved its biochemical properties one year after its production and storage at 2 to 8ºC. On the other hand, adverse storing conditions can lead to alterations in the SB biochemical properties that result in deterioration of its function, which was demonstrated in this study by changes in lung mechanics, but not in the histopathologic analysis

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 402198.pdf: 1075449 bytes, checksum: 7bb48cb5cb3fd7514b495fe5127c6449 (MD5) Previous issue date: 2008-01-28 / Objetivos: Avaliar a utilidade do teste de microbolhas est?veis no aspirado g?strico para predi??o da necessidade de segunda dose de surfactante em um grupo de prematuros que receberam surfactante profil?tico baseado em uma baixa contagem de microbolhas. Estudar a associa??o entre outras vari?veis e a necessidade de retratamento no mesmo grupo de pacientes. M?todos: Foi realizado um estudo retrospectivo analisando 114 prontu?rios de prematuros &#8804;31 semanas de gesta??o nascidos no hospital S?o Lucas da PUCRS e internados em sua Unidade de Tratamento Intensivo Neonatal entre outubro de 2002 e novembro de 2006. Todos os neonatos tiveram uma contagem de microbolhas inferior a 25 microbolhas/mm? e receberam profilaxia seletiva com surfactante. Resultados: Trinta e seis pacientes (32%) receberam duas ou mais doses de surfactante. As principais condi??es associadas com o retratamento foram a s?ndrome do desconforto respirat?rio, a elevada necessidade de oxig?nio e o pneumot?rax. Trinta e seis por cento dos beb?s que receberam mais de uma dose de surfactante tinham uma contagem de microbolhas &#8804;10&#956;b/mm?. A sensibilidade foi 93% (IC 95%: 77-99%) e o valor preditivo negativo foi 91% (IC 95%: 68-98%). Contudo, a especificidade do teste foi pouco expressiva. A baixa idade gestacional foi o fator de risco mais fortemente associado com a necessidade de segunda dose de surfactante. Conclus?es: A necessidade de mais de uma dose de surfactante ? muito pouco prov?vel com um resultado do teste de microbolhas est?veis acima de 10 microbolhas/mm? e idade gestacional acima de 27 semanas de gesta??o. Contudo, o baixo valor preditivo positivo sugere que o teste de microbolhas est?veis tenha pouca aplicabilidade cl?nica para predizer a necessidade de retratamento nesta baixa contagem.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 422804.pdf: 1388068 bytes, checksum: 46ed542c6211d43c59728550953b54e0 (MD5) Previous issue date: 2010-01-28 / Introdu??o: a s?ndrome da aspira??o de mec?nio (SAM) ? uma das doen?as respirat?rias mais importantes no per?odo neonatal. O tratamento com surfactante ex?geno apresenta uma resposta muito modesta. O mec?nio ? um potente inibidor da fun??o surfactante. Pol?meros n?o i?nicos adicionados ao surfactante neutralizam a inibi??o causada pelo mec?nio in vitro. Os resultados do uso de surfactante em modelos experimentais n?o apresentam respostas consistentes. Objetivo: avaliar o efeito de pol?meros n?o i?nicos na fun??o surfactante in vitro e em modelo experimental de s?ndrome de aspira??o de mec?nio. M?todo: a medidas da adsor??o e da tens?o superficial m?nima de solu??es de surfactante contendo dextran e polietilenoglicol (PEG) foram avaliados pelo surfact?metro da bolha cativa. O experimento in vivo, foi realizado com 16 porcos rec?m-nascidos nos quais a aspira??o de mec?nio foi provocada pela instila??o de 5 ml/kg de mec?nio a 20%. Os animais foram divididos em tr?s grupos: l. controle (n=5); ll. surfactante 100mg/kg (n=5); lll. surfactante-polietilenoglicol 7,5% (n=6). O per?odo de observa??o foi de 6 horas. A resposta aos diversos tratamentos foi avaliada por gasometrias arteriais seriadas. Resultados: a adi??o de dextran e PEG melhorou o desempenho do surfactante avaliado pelo surfact?metro da bolha cativa. Os valores da PaO2 (m?dia ? desvio padr?o) aos 30 minutos ap?s o tratamento da SAM foram: Grupo l= 66,8 ? 21,12 mmHg; Grupo ll= 68,12 ? 19,41 mmHg; e no Grupo lll= 61,33 ? 16,18 mmHg (P= 0,817 ). Com 3 horas ap?s tratamento os valores foram: Grupo l= 90,60 ? 68,12 mmHg; Grupo ll= 72,18 ? 34,83 mmHg; Grupo lll= 69,00 ? 24,46 (P= 0,711 ). Com 6 horas ap?s tratamento, os valores foram: Grupo l= 76,60 ? 48,04 mmHg; Grupo ll= 99,00 ? 94,17 mmHg; Grupo lll= 60,83 ? 19,18 mmHg (P= 0,586). ANOVA multivariada xvi modificada para medidas repetidas n?o demonstrou diferen?a significativa entre os tr?s grupos (P= 0,560). Conclus?o: adi??o de PEG ao surfactante n?o modificou o quadro de insufici?ncia respirat?ria hipox?mica grave causada pela SAM, apesar de melhorar o desempenho do surfactante in vitro.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 438704.pdf: 1089872 bytes, checksum: 26e9b82adb7d51a185543e38c2cdc8d2 (MD5) Previous issue date: 2011-12-20 / BACKGROUND: Due to meconium's obstructive effect on the airways and its inhibitory action over the surfactant system, treatment with bronchoalveolar lavage and surfactant replacement are currently under evaluation. OBJECTIVE: To evaluate, in an experimental model, the effect on the arterial blood gases and pulmonary mechanics of the treatment of meconium aspiration syndrome with exogenous surfactant, preceded or not of bronchoalveolar lavage with diluted surfactant in low volumes. DESIGN/METHODS: 21 newborn piglets were mechanically ventilated with predetermined settings. Meconium aspiration syndrome was induced by instillation of 5 ml/kg of meconium 20% diluted in isotonic saline, and afterwards the piglets were randomly allocated to: group I (n=7) - control; group II (n=7) - surfactant (Curosurf?) 200mg/kg; group III (n=7) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant 5mg/ml (15 ml/kg in 2ml aliquots), followed by a supplementary dose of surfactant 125mg/kg. Arterial blood gases, compliance, resistance, and tidal volume were measured five times at specific intervals during the six hours of the study. RESULTS: After instillation of meconium, before treatment, the PaO2 fell to a mean of 50mmHg and the PaCO2 increased to 76mmHg (no statistically difference among groups). Mean PaO2 (mmHg) in groups I, II and III were 72, 106 and 172 (p=0,01); 70, 95 and 198 (p<0.01); 79, 110 and 217 (p=0.01) at 30 minutes, 3 and 6 hours after treatment, respectively. Mean PaCO2 (mmHg) in Groups I, II and III were 81, 65 and 35 (p=0.01); 82, 59 and 37 (p=0.01); 82, 75 and 32 (p<0.01) at 30', 3 and 6 hours after treatment, respectively. Mean Compliance (ml/cmH2O) in Groups I, II, III were 0.76, 1.01 and 1.57 (p<0.05); 1.02, 0.69, e 1.79(p<0.05) at 30 minutes and 6 hours after treatment, respectively. Mean resistance (cmH2O/L/S) in Groups I, II, III were 422.57, 385.29 and 268.86 (p<0.05); 408.83, 564.86 e 248.43(p<0.05) at 30 minutes and 6 hours after treatment, respectively. CONCLUSIONS: Bronchoalveolar lavage with diluted surfactant, with low volumes and small aliquots, followed by a supplementary dose of surfactant, significantly improved arterial blood gases and pulmonary function measurements when compared to the administration of a single dose of surfactant in an experimental model of meconium aspiration syndrome. / INTRODU??O: devido ao efeito obstrutivo do mec?nio nas vias a?reas e a a??o inibit?ria sobre o sistema surfactante, o lavado broncoalveolar e a reposi??o de surfactante est?o sendo avaliados nos ?ltimos tempos para o tratamento da s?ndrome da aspira??o de mec?nio. OBJETIVO: Avaliar, em modelo experimental, o efeito sobre os gases sangu?neos arteriais e a mec?nica pulmonar do tratamento da s?ndrome de aspira??o de mec?nio grave com surfactante ex?geno, precedido ou n?o de lavado broncoalveolar com surfactante dilu?do em pequenos volumes. M?TODOS: 21 porcos rec?m-nascidos eram ventilados mecanicamente com par?metros respirat?rios predeterminados. Para induzir a s?ndrome de aspira??o de mec?nio foi instilado 5ml/kg de mec?nio dilu?do a 20% em solu??o salina isot?nica. Ap?s, os porcos foram randomizados em 3 grupos: grupo I (n=7) - controle; grupo II (n=7) - surfactante (Curosurf?) 200mg/kg; grupo III (n=7) - lavado broncoalveolar com surfactante dilu?do 5mg/ml (15ml/kg em al?quotas de 2ml) seguido de uma dose suplementar de surfactante 125mg/kg. Gases arteriais sangu?neos, complac?ncia, resist?ncia e volume corrente foram avaliados durante as 6 horas do estudo em 5 momentos espec?ficos. RESULTADOS: ap?s a instila??o de mec?nio, antes do tratamento, a PaO2 caiu para uma m?dia em torno de 50mmHg e a PaCO2 aumentou para uma m?dia em torno de 76mmHg, n?o havendo diferen?a significativa entre os grupos. Ap?s o tratamento a m?dia da PaO2(mmHg) nos grupos I, II e III aos 30 minutos, 3 e 6 horas foi de 72, 106 e 172 (p=0,01) - 70, 95 e 198 (p<0,01) e 79, 110 e 217 (p=0,01), respectivamente. A m?dia da PaCO2 (mmHg) nos grupos I, II e III foi 81, 65 e 35 (p=0,01) - 82, 59 e 37 (p=0,01) e 83, 75 e 33 (p<0,01), respectivamente. Ap?s o tratamento a m?dia da complac?ncia (ml/cmH2O) aos 30 minutos e 6 horas nos grupos I, II, III foi de 0,76, 1,01 e 1,57(p<0,05) e de 1,02, 0,69 e 1,79 (p<0,05), respectivamente. A m?dia da resist?ncia (cmH2O/L/S) nos grupos I, II e III foi de 422,57, 385,29 e 268,86(p<0,05) e de 408,83, 564,86 e 248,43 (p<0,05) aos 30 minutos e 6 horas, respectivamente. CONCLUS?O: o lavado broncoalveolar com surfactante dilu?do, com baixos volumes e pequenas al?quotas, seguido por uma dose suplementar de surfactante, melhorou significativamente os gases sangu?neos arteriais e a mec?nica pulmonar quando comparado com uma dose de surfactante sem lavado broncoalveolar e com um grupo controle, em um modelo experimental de s?ndrome de aspira??o de mec?nio.

Alguns estudos sugerem que as pequenas vias aéreas têm um papel importante na fisiopatologia da lesão pulmonar aguda/ síndrome do desconforto respiratório agudo (LPA/SDRA). O epitélio respiratório que reveste as vias aéreas é capaz de liberar mediadores inflamatórios e está relacionado ainda com a produção de surfactante nas vias aéreas. Até o presente momento, existem poucos estudos que avaliaram se estas funções do epitélio que reveste as pequenas vias aéreas encontram-se alteradas na SDRA. No presente estudo, nós mensuramos a expressão da proteína de surfactante (PS) A e PS-B, a expressão de citocinas inflamatórias interleucina (IL)-6 e IL-8, e um índice de apoptose do epitélio que reveste as pequenas vias aéreas de pacientes com SDRA que foram submetidos a autópsia e comparamos estes resultados com os de indivíduos controle. Foram incluídos no estudo pulmões de autópsia de 31 pacientes com SDRA (PaO2/FiO2200, 45±14 anos, 16 homens) e 11 controles (52±16 anos, 7 homens). A expressão de IL-6, IL-8, PS-A e PS-B no epitélio das pequenas vias aéreas (diâmetro2.0mm) foi verificada através de reações de imunohistoquímica e análise de imagem. O índice de apoptose epitelial das vias aéreas foi avaliado através do método de TUNEL e da expressão de FAS/FASL. Avaliou-se ainda a densidade de células inflamatórias positivas para IL-6 e IL-8 na parede das pequenas vias aéreas. As vias aéreas dos pacientes com SDRA apresentaram maior expressão epitelial de IL-8 (p=0,006) e maior densidade de células inflamatórias expressando IL-6 (p=0,004) e IL-8 (p<0,001) quando comparadas com o grupo controle. Não houve diferenças na expressão epitelial de PS-A e PS-B ou no índice de apoptose epitelial entre os grupos SDRA e controle. Nossos resultados mostram que as pequenas vias aéreas participam da inflamação pulmonar de pacientes com SDRA, caracterizada pelo aumento na expressão de interleucinas próinflamatórias tanto em células inflamatórias da parede da via aérea quanto no epitélio. Nossos resultados sugerem ainda que a apoptose não é um mecanismo importante de morte de células epiteliais das vias aéreas de pacientes com SDRA / Recent studies suggest a role for distal airway injury in the pathophysiology of human ALI/ARDS. The epithelium lining the airways modulates airway function secreting a large number of molecules such as surfactant components and inflammatory mediators. So far, there is little information on how these secretory functions of the small airways are altered in ARDS. In the present study we assessed the airway expression of surfactant protein (SP) A and SP B, the expression of inflammatory cytokines IL-6 and IL-8, and an index of airway epithelial apoptosis of patients with ARDS submitted to autopsy and compared the results with those of control subjects. We studied autopsy lungs of 31 ARDS patients (PaO2/FiO2200, 45±14 years, 16 males) and 11 controls (52±16 years, 7 males). Using immunohistochemistry and image analysis, we quantified the expression of IL-6, IL-8 and SP-A and SP-B in the epithelium of small airways (diameter2.0mm). Airway epithelial apoptosis index was obtained with the TUNEL assay and FAS/FASL expression. We also quantified the density of inflammatory cells expressing IL-6 and IL-8 within the small airway walls. ARDS airways showed an increase in the epithelial expression of IL-8 (p=0.006) and an increased density of inflammatory cells expressing IL-6 (p=0.004) and IL-8 (p<0.001) when compared to controls. There were no differences in SP-A and SP-B epithelium expression or in epithelial apoptosis index between ARDS and controls. Our results show that the distal airways are involved in ARDS lung inflammation with higher expression of pro-inflammatory interleukins in both airway epithelial and inflammatory cells. Our results also suggest that apoptosis is not a major mechanism of airway epithelial cell death in ARDS

INTRODUÇÃO: A Síndrome do Desconforto Respiratório (SDR) é uma das principais causas de morbi-mortalidade no período neonatal, acometendo predominantemente os recém-nascidos prematuros, devido a uma está deficiência de surfactante pulmonar. O Instituto Butantan desenvolveu um surfactante de origem porcina com objetivo de torná-lo disponível a todo Sistema Único de Saúde. O objetivo deste estudo foi avaliar, em um modelo experimental de SDR (coelho), a estabilidade do Surfactante Butantan (SB) um ano após sua produção e armazenamento a 2 a 8ºC.. MÉTODOS: 94 coelhos prematuros foram randomizados em dois grupos de tratamento: grupo Butantan e grupo Curosurf (controle), e foram analisados em seis momentos de avaliação: momento zero (imediatamente após a retirada do refrigerador ao final de 1 ano de armazenamento), momento 1 (24 horas após ter sido mantido a 24ºC), momento 2 (após 30 dias de armazenamento a 20º C), momento 3 (após 60 dias de armazenamento a 20º C), momento 4 (após 90 dias de armazenamento a 20º C) e momento 5 (após 180 dias de armazenamento a 20º C). Após receberem o surfactante, os animais foram ventilados por 15 minutos para avaliação da pressão ventilatória e complacência pulmonar dinâmica e curva pressão-volume pulmonar, seguindo-se à avaliação histopatológica dos pulmões. RESULTADOS: A eficácia do SB foi semelhante à do Curosurf, um ano após a sua produção e armazenamento a 2 a 8ºC. Neste momento de avaliação, não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos de estudo quanto a: pressão ventilatória, complacência pulmonar dinâmica e curva pressão-volume pulmonar. Ao longo dos seis meses de armazenamento inadequado do SB, demonstrou-se a redução de sua eficácia durante a fase expiratória da curva pressão-volume pulmonar. No entanto, a análise histopatológica, demonstrou não haver diferença significante entre os dois grupos de estudo em nenhum dos momentos de avaliação. CONCLUSÕES: As propriedades bioquímicas do SB foram preservadas após um ano de sua produção e armazenamento em refrigeração de 2 a 8ºC. Condições inadequadas de armazenamento resultam em alterações das propriedades bioquímicas do SB e, conseqüentemente, de sua função, o que foi demonstrado por parâmetros de mecânica ventilatória, mas não pela análise histopatológica dos pulmões / INTRODUCTION: Respiratory Distress Syndrome (RDS) is one of the major causes of death among premature newborns, and its development results from surfactant deficiency. The Butantan Institute has recently produced a porcine-derived surfactant preparation in order to make it available nationwide for RDS treatment in the near future. The aim of this study was to evaluate, in an animal model of surfactant deficiency (premature rabbits), the stability of the Butantan Surfactant (SB) one year after its production and storage in the refrigerator, at 2 to 8ºC. METHODS: 94 premature newborn rabbits were randomized into two treatment groups: SB or Curosurf®(control surfactant), and were assessed in six different time-points: time-point zero (immediately after removal of surfactant from the refrigerator after one year of storage); time-point 1 (after 24h of storage at 24ºC), time-point 2 (after 30 days of storage at 20ºC), time-point 3 (after 60 days of storage at 20ºC), time-point 4 (after 90 days of storage at 20ºC) and time-point 5 (after 180 days of storage at 20ºC). The animals were artificially ventilated for 15 minutes for lung mechanics assessment (ventilatory pressure, dynamic lung compliance and pressure-lung volume curve), followed by removal of the lungs for histopathologic analysis. RESULTS: After one year of its production and storage at 2 to 8ºC, SB was as efficient as Curosurf. At this time-point, The Butantan Surfactant showed no significant differences with Curosurf® regarding the ventilatory pressure, dynamic lung compliance and pressure-lung volume curve. Throughout the six month period of warming, SB showed a decreasing efficiency, as revealed by the expiratory phase of the pressure-lung volume curve. However, the histopathologic analysis revealed no significant differences between the two groups, in any of the study time-points. CONCLUSIONS: The Butantan Surfactant preserved its biochemical properties one year after its production and storage at 2 to 8ºC. On the other hand, adverse storing conditions can lead to alterations in the SB biochemical properties that result in deterioration of its function, which was demonstrated in this study by changes in lung mechanics, but not in the histopathologic analysis

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-10-10T17:48:51Z No. of bitstreams: 1 TES_MANOEL_ANTONIO_DA_SILVA_RIBEIRO_PARCIAL.pdf: 688919 bytes, checksum: 8a56a70e578bd3446bdbd3b5c916e884 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-10T17:48:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_MANOEL_ANTONIO_DA_SILVA_RIBEIRO_PARCIAL.pdf: 688919 bytes, checksum: 8a56a70e578bd3446bdbd3b5c916e884 (MD5) Previous issue date: 2016-07-08 / BACKGROUND: The stable microbubbles test on the gastric aspirate has been used for the diagnosis of respiratory distress syndrome of the newborn. However, its use in the preterm newborn oral aspirate was not determined. OBJECTIVE: To evaluate the performance of the stable microbubbles test done on oral aspirate from preterm newborns to predict of respiratory distress syndrome. METHOD: In the study were included infants with gestational age < 34 weeks. Oral secretion sample was obtained immediately after birth and gastric secretion was collected within 30 minutes of life. The samples were frozen and tested within 72 hours. RESULTS: The sample was composed of paired secretion of 70 newborns. The median (interquartile range) of the stable microbubbles count in the oral samples of infants with respiratory distress syndrome was significantly lower than those who did not develop or had respiratory symptoms from other causes: 12 (8 - 22) versus 100 (48 - 230) versus 70 (44 - 208) (p <0.01). The correlation between microbubble count in gastric and bucal aspirates was 0.88 (95%CI: 0,72 ? 0,93; p <0.01). Taking a cut-off point of 15 microbubbles/mm2, the sensitivity of test was 95.4%, the specificity 66.7%, and the agreement of the oral fluid with the gastric fluid was 0.76. CONCLUSION: The study suggests that the stable microbubbles test in gastric aspirate made at birth is a reliable alternative to the gastric fluid in the prediction of respiratory distress syndrome of the newborn. / INTRODU??O: O teste das microbolhas est?veis no aspirado g?strico tem sido utilizado para o diagn?stico de s?ndrome do desconforto respirat?rio do rec?m-nascido. Entretanto, a sua utiliza??o no fluido bucal em rec?m-nascidos pr?-termo ainda n?o foi avaliada. OBJETIVO: Avaliar o desempenho do teste das microbolhas est?veis no aspirado bucal de neonatos pr?-termo para a predi??o da s?ndrome do desconforto respirat?rio. M?TODO: Foram inclu?dos no estudo, rec?m-nascidos com menos de 34 semanas de idade gestacional. A secre??o bucal foi obtida imediatamente ap?s o nascimento e a secre??o g?strica at? 30 minutos de vida. As amostras foram congeladas e testadas em at? 72 horas. RESULTADOS: A amostra foi constitu?da de secre??o pareada de 70 rec?m-nascidos. A mediana (amplitude interquartil) da contagem das microbolhas est?veis no fluido bucal dos rec?m-nascidos com s?ndrome do desconforto respirat?rio foi significativamente menor do que os que n?o desenvolveram ou dos tiveram sintomas respirat?rios por causas indeterminadas: 12 (8-22) versus 100 (48 - 230) versus 70 (44 - 208) (p<0,01), respectivamente. A correla??o entre o teste das microbolhas nos aspirados g?strico e bucal foi 0,88 (IC95%: 0,72 ? 0,93; p <0.01). O melhor ponto de corte para predizer a s?ndrome do desconforto respirat?rio foi 15 microbolhas/ mm2, apresentando sensibilidade de 95,4%, especificidade de 66,7% e concord?ncia com o aspirado g?strico de 0,76. CONCLUS?O: O estudo sugere que o teste das microbolhas est?veis no aspirado bucal ao nascimento ? uma alternativa confi?vel ao fluido g?strico na predi??o da s?ndrome do desconforto respirat?rio do rec?m-nascido.