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Caractérisation des cellules souches mésenchymateuses du sang placentaire et de la gelée de Wharton / Caracterization of mesenchymal stem cells from cord blood and Wharton's jelly

Margossian, Talar 25 March 2013 (has links)
Les cellules souches suscitent de grands espoirs pour la thérapie cellulaire et l'ingénierie tissulaire. Les CSM du tissus foetaux (sang placentaire et gelée de Wharton du cordon ombilical), à l'origine d'épiblaste embryonnaire, sont considérées comme plus primitives que les CSM provenant de sources adultes. Les conditions de culture ayant un impact sur le comportement des cellules, dans notre étude, nous avons exploré l'effet de la concentration de l'oxygène sur l'expansion, l'immunophénotypage et la différenciation de ces cellules. L'objectif de ce travail est d'identifier la méthode optimale d'isolation des CSM issues de tissus foetaux. Compte tenu du faible taux de succès dans l'isolement des CSM extraites du sang placentaire, nous nous sommes dirigés vers les CSM-GW. Nous y avons déterminé in situ, les marqueurs spécifiques exprimés dans la gelée de Wharton et à la périphérie. Des études sur la morphologie, la cinétique de croissance, et sur l'expression phénotypique des marqueurs de surface, des CSM-GW, ont été effectuées sur une longue durée (7 passages) à différentes conditions de culture. Nous avons montré que la GW est composée d'une abondante matrice extracellulaire riche en collagènes et glycosaminoglycannes et que les cellules possèdent un phénotype variable selon leur localisation dans la gelée. Ce tissu est capable de fournir une quantité importante de CSM (6,7x105 Cs/cm de cordon) qui gardent une morphologie constante. Enfin, quel que soit le passage, la concentration de l'oxygène ne semble pas avoir d'effet sur le phénotype des cellules. En revanche, une faible teneur en oxygène durant l'expansion semble diminuer le temps de doublement des cellules, favoriser la chondrogénèse et inhiber la différenciation ostéogénique. Enfin, quelles que soient les conditions de culture, la différenciation adipogénique des CSM-GW semble difficile à obtenir / Stem cells are the hopes for cell therapy and tissue engineering. MSCs from fetal tissue (umbilical cord blood and WJ), which are a source of embryonic epiblast grow relatively faster comparing to other adult sources. The culture condition can affect cell behavior. In our study, we explored the effect of oxygen concentration on the expansion, immunophenotyping, and differentiation of these cells. The aim of this work is to identify the optimal method for isolation of MSCs derived from fetal tissue. Given the low rate of success in the isolation of MSCs from cord blood, we headed to WJ-MSCs. We have determined in siu, the specific markers expressed in the WJ and in the perivascular region. Studies on the morphology growth kinetics, and phenotypic expression of surface makers of MSCs isolated from WJ were made over a long period (7 passages) in different culture conditions. We have shown that WJ is composed of an abundant extracellular matrix rich in collagen and glycasominoglycans and have variable phenotype depending from their localization in the jelly. This tissue is able to provide a large amount of MSCs (6.7x105 Cs/cm of cord) that maintain a constant morphology. Finally, regardless of the passage, the oxygen concentration does not effect on the phenotype of the cells. In contrast, a low oxygen concentration during expansion appears to decrease the doubling time of MSCs, promote chondrogenesis and inhibit osteogenic differentiation. Finally, whatever the culture conditions, adipogenic differentiation of WJ-MSC seems difficult to obtain
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Générativité : nouvelle conceptualisation et examen du rôle médiateur de l'imagerie mentale et de la générativité situationnelle dans le processus persuasif prosocial : application au don du sang placentaire / Generativity : new conceptualization and examination of the mediator role of mental imagery and situational generativity in the persuasive prosocial process : application to the umbilical blood cord donation

Assaf, Cynthia 06 December 2018 (has links)
De nombreux facteurs environnementaux et/ ou de santé publique amènent à se poser aujourd’hui la question du devenir des générations futures. Plusieurs fléaux touchent notre société et sont de nature à affecter les générations suivantes à l’instar de nombreuses maladies dégénératives, de cancers, de maladies génétiques et diverses maladies de sang et de la moelle osseuse. Cependant, un élément d’optimisme a vu le jour grâce à la possibilité de prélever le sang placentaire et de conserver les cellules souches du cordon ombilical du nouveau-né à des fins de greffes ultérieures, beaucoup moins lourdes que celles de moelle osseuse. Des actions de communication seraient donc utiles pour informer les parents de cette possibilité, les sensibiliser et les encourager à prendre la décision de conserver les cellules souches du cordon pour le bien des générations futures. Ce besoin de communication et la nécessité de se préoccuper des générations futures ont attiré notre attention sur un concept issu de la psychologie sociale et introduit récemment en marketing : la générativité, définie par son auteur pionnier comme étant « la préoccupation quant à l’établissement et au conseil des générations futures » (Erikson, 1950). Par conséquent, la problématique centrale de cette recherche s’articule comme suit : Comment construire des messages prosociaux incitatifs, favorables aux générations futures, - en l’occurrence de conservation des cellules souches du sang du cordon ombilical -, efficaces pour agir sur les attitudes et intentions des femmes enceintes par une stimulation de leur générativité situationnelle ? Les objectifs de cette recherche imposent avant tout de mener une phase primordiale de meilleure compréhension du concept de générativité et de sa mesure. À cet effet, deux études préliminaires (étude qualitative suivie d’une étude quantitative) ont permis de mieux cerner ce concept du point de vue de ses conceptualisation, opérationnalisation et mesure. Une nouvelle conceptualisation de la générativité fondée sur une générativité situationnelle, venant compléter l’unique vision dispositionnelle de préoccupation générative, est proposée. Ensuite, une expérimentation auprès de femmes enceintes, cible de la décision de don du sang placentaire, souligne le rôle de l’imagerie mentale et de la générativité situationnelle dans le processus persuasif, confirmant la pertinence de cette nouvelle conceptualisation. Enfin, les résultats sont discutés ; des voies de recherches sont développées, notamment pour pallier les limites de la présente recherche. / Many environmental and/ or public health factors lead to questioning the future of generations. Many plagues affect our society and are likely to influence future generations such as numerous degenerative or genetic diseases, cancers, blood and bone marrow disorders. However, an optimistic element has emerged due to the ability to collect placental blood and to preserve the umbilical cord stem cells of the newborn for subsequent grafts, less heavier than those of bone marrow. Communication actions would therefore be useful to inform parents of this possibility, raise awareness and encourage them to decide to conserve cord stem cells for the benefit of future generations. This need for communication as well as the concern toward future generations have drawn our attention to a concept that emerged from social psychology and has been recently introduced into marketing: generativity. Erikson (1950), its pioneer, defined it as « primarily the concern in establishing and guiding the next generation ». Our central research question is articulated as follows: How to construct incentive prosocial messages, favorable to future generations, - in our case the conservation of umbilical cord stem cells -, effective in influencing the attitudes and intentions of pregnant women by stimulating their situational generativity? The objectives of this research require, first and foremost, a crucial phase of better understanding the concept of generativity and its measurement. To this end, two preliminary studies (qualitative followed by a quantitative study) made possible to perceive the conceptualization, operationalization and measurement of this concept. A new conceptualization of generativity based on a situational vision, in addition to the dispositional vision of generative concern, is proposed. Afterwards, an experiment among pregnant women, potential decision makers in donating placental blood, highlights the role of mental imagery and situational generativity in the persuasive process, confirming the relevance of this new conceptualization. Finally, the results are discussed ; research perspectives are developed, particularly to overcome the limitations of this research.
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Nouvelles stratégies thérapeutiques des affections articulaires du cheval : évaluation du potentiel thérapeutique des chondrocytes autologues et des cellules souches de cordon ombilical (sang et gelée de Wharton) : vers l'industrialisation de cellules médicaments. / New therapeutic strategies for articular disorders in the equine model : therapeutic potential evaluation of autologous chondrocytes and umbilical cord stem cells (from umbilical cord blood and Wharton jelly) : toward industrialization of drug cells

Rakic, Rodolphe 05 September 2017 (has links)
Les affections articulaires touchant le cartilage, telles que les lésions focales et l’arthrose, correspondent aux principales causes de baisse de performance et d’arrêt prématuré de la carrière sportive du cheval. Ainsi, le traitement des affections du cartilage représente un enjeu vétérinaire majeur dans le monde équin, du fait des importantes pertes financières qu’elles occasionnent à la filière. Les faibles capacités de réparation intrinsèque du cartilage, ainsi que l’absence de thérapie à long terme des dommages cartilagineux, nécessitent le recours à des thérapies de nouvelles générations telle que l’ingénierie tissulaire du cartilage. Dans ce cadre, notre étude s’est attachée à comparer différents types cellulaires pour la génération de cartilage in vitro, afin d’envisager une implantation pour traiter les atteintes cartilagineuses chez le cheval. Une technique initialement développée chez l’Homme, la transplantation de chondrocytes autologues, représente toujours un « gold standard » en ingénierie tissulaire du cartilage. Dans ce travail de thèse, après avoir développé une nouvelle génération de substitut cartilagineux de haute qualité biologique, à partir de chondrocytes articulaires équins, des limites techniques et biologiques inhérentes au type cellulaire persistent. Ainsi, nos travaux se sont tournés vers la recherche de types cellulaires alternatifs. Les cellules souches/stromales mésenchymateuses (CSM) néonatales issues de cordon ombilical telles que les CSM de sang placentaire (CSM-SPL) et les CSM de gelée de Wharton (CSM-GW) pourraient représenter un avantage thérapeutique du fait de leur isolement non-invasif, de leur forte prolifération cellulaire et de leur capacité de différenciation en chondrocyte. Il est néanmoins indispensable de définir le meilleur candidat thérapeutique, parmi ces deux sources cellulaires, pour l’obtention d’un substitut cartilagineux de qualité biologique optimale. Ces résultats de thèse ont montré d’importantes différences dans le processus de chondrogenèse de ces deux sources de CSM néonatales et plaident en faveur de l’utilisation des CSM-SPL dans le cadre d’une stratégie thérapeutique d’ingénierie tissulaire du cartilage équin. Ces travaux ont permis une meilleure compréhension de la biologie du chondrocyte et des CSM. De surcroît, ces travaux permettent d’envisager de futurs essais cliniques chez le cheval, afin de traiter les affections articulaires de ce modèle gros animal. / Articular cartilage disorders, such as focal defects and osteoarthritis, are the main causes of decreased performance or early retirement of sport- and racehorses. Thus, cartilage disorders represent a major veterinary issue in the equine industry, due to significant financial losses. Poor intrinsic cartilage repair properties and the absence of long- term therapy for cartilage defects lead to the development and use of new generation therapies such as autologous chondrocytes implantation. In this context, our study aimed to compare different cell types for the in vitro cartilage generation, in order to implant the biological substitute to treat cartilage defects in the horse. A therapeutic strategy initially developed in human medicine, the autologous chondrocytes transplantation, always represents a "gold standard" in cartilage tissue engineering. In the present study, after developing a new generation of cartilaginous substitute of high biological quality, composed of equine articular chondrocytes, technical and biological limits inherent to the cell type persist. Thus, we have used alternative cell types such as neonatal mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) from umbilical cord, such as umbilical cord blood MSC (UCB-MSCs) and umbilical cord matrix or Wharton jelly MSCs (UCM- MSCs). These MSCs sources could represent a therapeutic advantage due to their non-invasive isolation, their high cell proliferation and their ability to differentiate into chondrocytes. Nevertheless, it is essential to define the best therapeutic candidate between these two MSCs sources, to obtain an optimal quality for the neocartilaginous substitute. Our data highlighted important differences in the chondrogenesis process of these two neonatal MSCs sources, allowing us to consider UCB-MSCs as the best therapeutic candidate for equine cartilage tissue engineering. This work allows a better understanding of the chondrocyte and MSCs biology. Moreover, this work leads the way to setting-up future clinical trials in the horse, in order to treat articular defects of this large animal model.

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