Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / ntroducción: Se ha documentado ampliamente en la bibliografía internacional sobre las manifestaciones orales y máxilofaciales asociadas a la infección por VIH/SIDA y cuál es su frecuencia de aparición en este tipo de pacientes. Sin embargo, en nuestro país, los datos epidemiológicos de este tipo de manifestaciones son escasos y desactualizados. Contar con esta información es esencial para optimizar los recursos involucrados en el tratamiento integral de estos pacientes. Objetivo: Determinar frecuencia de manifestaciones orales, asociadas y no asociadas a infección por VIH, en pacientes adultos VIH/SIDA del Hospital San Juan de Dios y describirlas según género y edad. Materiales y métodos: Estudio observacional descriptivo de corte transversal en adultos diagnosticados con VIH/SIDA en atención en el Hospital San Juan de Dios, en un periodo de 18 meses. Se realizó examen intraoral y el diagnóstico de las lesiones fue basado en el criterio clínico de la European Comunity Clearing Clearinghouse (ECC), y en estudios histopatológicos e imagenológicos complementarios al diagnóstico. Todos los pacientes incluidos en el estudio aceptaron participar voluntariamente y firmaron el consentimiento informado. Resultados: 68 pacientes, 52 hombres (76,5%) y 17 mujeres (23,5) cumplieron los criterios de inclusión. 23 pacientes presentaron al menos una lesión oral relacionada a la infección por VIH (33,8%), en donde las lesiones más prevalentes fueron las Úlceras mayores y el Papiloma oral (8,8%), seguida de la Candidiasis oral (5,9%), la Queilitis Angular (5,9), Sarcoma de Kaposi (4,4%), Linfoma no Hodgkin (2,94%), Gingivitis Ulceronecrotizante y Leucoplasia Pilosa (1,47%). Mientras que las lesiones no asociadas a VIH como Caries y Enfermedad Periodontal se presentaron en 31 pacientes (45,5%). 4 Conclusión: Un 33,8% de los pacientes estudiados presentaron al menos una lesión asociada a VIH/SIDA, en donde la lesión oral asociada a la infección por VIH más frecuente corresponde a Papiloma oral y Úlceras orales mayores. Las lesiones orales no asociadas a VIH/SIDA más frecuentes fueron la Caries y la Enfermedad Periodontal.

Trabajo de investigación requisito para optar al título de Cirujano-Dentista / Introducción: Lesiones bucomaxilofaciales conocidas se asocian con estados de inmunosupresión en pacientes VIH/SIDA. La presencia de estas lesiones puede ser el primer signo clínico de la infección y ser una importante herramienta para monitorizar la progresión y pronóstico de ésta. Objetivo: Determinar la asociación entre las lesiones bucomaxilofaciales y diferentes niveles de inmunosupresión determinados por el recuento de linfocitos TCD4+ en: Ausente (≥ 500 células/ml), Moderada (entre 201 células/ml y 499 células/ml) y Severa (≤200 células/ml) en pacientes adultos VIH/SIDA en atención en el Hospital San Juan de Dios. Materiales y Método: Estudio observacional analítico de corte transversal en adultos diagnosticados con VIH/SIDA en atención en el Hospital San Juan de Dios, durante un periodo de 17 meses. Se realizó examen intraoral y el diagnóstico de las lesiones bucomáxilofaciales fue de acuerdo al criterio clínico de EEC clearing house y a estudios imagenológicos e histopatológicos. El grado de inmunosupresión se basó en el recuento de linfocitos TCD4+ más cercano al momento del examen odontológico. Pacientes con diabetes, alcoholismo u otra condición que provoque inmunosupresión fueron excluidos, al igual que las pacientes embarazadas que pueden presentar manifestaciones orales propias de su condición. Todos los pacientes incluidos en el estudio aceptaron participar voluntariamente y firmaron el consentimiento informado. Los datos fueron analizados mediante el test paramétrico T-Student para variables continuas y en el caso de variables dicotómicas o categóricas se utilizó el test de chi cuadrado de Pearson y Odds Ratio. Se utilizó un nivel de confianza de 95% cuando correspondió. Resultados: 60 pacientes cumplieron con los criterios de inclusión. Dentro del grupo, 11 pacientes correspondieron a individuos del sexo femenino (18,3%) y 49 del sexo masculino (81,6%). La edad promedio fue de 40 ±1,44 años. 2 El 35% de los pacientes presentaba lesiones orales asociadas a infección por VIH con un recuento promedio de linfocitos TCD4+ de 299 células/ml y el 65% restante presentaba un recuento promedio de 348 células/ml, sin existir diferencia estadísticamente significativa (p=0,38). Por otro lado, se observó que es 3,275 veces más probable presentar una lesión asociada a VIH/SIDA cuando el paciente se encuentra en inmunosupresión determinado por recuentos de linfocitos TCD4+ menores a 500 células/ml. (OR=3,275). Las lesiones orales asociadas a VIH/SIDA más comúnmente observadas fueron las úlceras orales (10%) y el papiloma (0,8%). El Sarcoma de Kaposi se relacionó con recuentos de linfocitos TCD4+ bajos (p=0,061). Conclusión: Los pacientes con lesiones orales asociadas a infección por VIH presentaron un recuento de linfocitos TCD4+ promedio menor (299 cél/ml) que los que no presentaban lesiones asociadas (348 cél/ml) y existe mayor probabilidad de presentar lesiones asociadas a VIH/SIDA cuando existe inmunosupresión determinado por recuentos de linfocitos TCD4+ <500 cél/ml. (OR=3,275). Los pacientes que presentaron sarcoma de Kaposi se relacionaron con recuentos de linfocitos TCD4+ muy bajos (<50 cél/ml), lo que podría relacionarse con inmunosupresión severa.

O HHV-8 (herpesvírus 8 humano) é o agente etiológico do sarcoma de Kaposi (SK). Diferentemente dos outros herpesvírus, o HHV-8 é distribuído de modo não ubíquo ao redor do mundo. São sete os principais genótipos de HHV-8, de acordo com o padrão de variabilidade da ORF K1: A, B, C, D, E, F e Z. Estudos da variabilidade genética do HHV-8 poderão trazer melhores interpretações sobre o potencial patogênico dos genótipos de HHV-8 e das variações genotípicas funcionais. Dados sobre a variabilidade genética do HHV-8 no Brasil, em que o SK é associado ao HIV, permanecem escassos. Pelo nosso conhecimento, esse é o primeiro estudo que compara a variabilidade genética de HHV-8 em indivíduos infectados por HIV com SK e sem SK no Brasil. Objetivo. O estudo visou analisar a variabilidade genética do HHV-8 entre indivíduos infectados por HIV com SK e sem histórico de SK. Métodos. Sequências de DNA de HHV-8 foram investigadas em amostras criopreservadas de células mononucleares do sangue periférico a partir de 37 indivíduos infectados por HIV com SK (grupo 1); e de amostras de saliva de indivíduos sem SK (grupo 2), as quais foram selecionadas por meio da detecção positiva de DNA/ORF73/HHV-8 a partir de um total de 751 indivíduos. Dados demográficos e clínicos do estadio e evolução do SK, assim como parâmetros laboratoriais foram caracterizados. As análises moleculares e reconstruções filogenéticas foram baseadas nas ORFs K1 e K12 do HHV-8. Resultados. Foram obtidas sequências de DNA dos loci K1 e/ou K12 de 75 indivíduos, 34 indivíduos do grupo 1 e 41 do grupo 2. O sistema de primers empregado foi capaz de detectar os genótipos A, B, C, F e amplo perfil de subgenótipos de K1/HHV-8. Os dados não mostraram associação de genótipos de HHV-8 com a presença de SK ou estadio de SK. Todavia, o subgenótipo B1 predominou naqueles em que não houve registro de piora de SK (p=0,04). Os subgenótipos B1 e C3 foram igualmente predominantes em ambos os grupos. As frequências do genótipos A foram de 24% e 12,2% e dos genótipos B e C foram de 34,1 e 35,3%, nos grupos 1 e 2, respectivamente. O genótipo F foi descrito pela primeira no Brasil, um caso de cada grupo. Um amplo perfil de subgenótipos de C no grupo 2 sem SK foi encontrado (C1, C2, C3, C5 e C7). Subgenótipos K1 C5 e C7, exclusivos do grupo 2 (7%), foram confirmados como recombinantes. Não houve variabilidade genotípica de HHV-8 em amostras biológicas diferentes do mesmo indivíduo em oito casos estudados. Sítios polimórficos (6/59) em regiões codificadoras de miRNA do locus K12 foram observados, sendo 70% presentes exclusivamente em sequências de HHV-8 do grupo com SK e protótipos de SK. Conclusão. Embora não houvesse associação entre genótipos de HHV-8 e presença ou estadio de SK, o subgenótipo B1 foi significativamente relacionado ao melhor prognóstico de SK. Alguns recombinantes foram observados no locus K1 de HHV-8 em indivíduos do grupo 2 sem SK. A presença de SNPs em regiões codificadoras de miR12-12 e miR12-10 predominou em sequências de HHV-8 de indivíduos com SK, grupo 1, e protótipos de SK epidêmico, endêmico e clássico. A escoha de primers foi importante para garantir a amplificação de todos os genótipos e amplo perfil de subgenotipos de HHV-8. / HHV-8 (Human Herpes Virus 8) is the etiological agent of Kaposi\'s sarcoma (KS). Unlike other herpesviruses, the distribution of HHV-8 is not so ubiquitous around the world. There are seven major HHV-8 genotypes, according to the variability pattern of the ORF K1: A, B, C, D, E, F and Z. Studies on the genetic variability of HHV-8 may help to better understand the pathogenic potential of HHV-8 genotypes and their functional genotypic variations. Data on the genetic variability of HHV-8 in Brazil, where KS is associated with HIV infected people, remain scarce. To our knowledge, this is the first study comparing the genetic variability of HHV-8 among HIV-infected individuals with KS and without KS in Brazil. Objective. The study aimed to analyze the genetic variability of HHV-8 among HIV-infected individuals with and without KS. Casuistry and Methods. HHV-8 DNA sequences were obtained from samples of cryopreserved peripheral blood mononuclear cells from 37 individuals infected with HIV-KS (group 1); and saliva from individuals without KS (group 2) who were selected by means of detection of positive DNA/ORF73/HHV-8 from a total of 751 individuals. Demographic and clinical data (stage and progression of KS), as well as laboratory parameters were characterized. Molecular analysis and phylogenetic reconstructions were based on sequences of the ORFs K1 and/or K12 of HHV-8. Results. K1 and/or K12 DNA sequences of HHV-8 were obtained from 75 subjects, 34 from group 1 and 41 from group 2. The primer system used was able to detect the genotypes A, B, C, F and a wide profile of HHV- 8 K1 subgenotypes. Data showed no association of genotypes with the occurrence of KS or with visceral KS either. However, subgenotype B1 predominated in individuals who did not report any progression of KS (p=0.04). Subgenotypes B1 and C3 were equally prevalent in both groups. Genotype A frequencies were 24 % and 12.2% and genotypes B and C were 34.1 and 35.3 % in groups 1 and 2, respectively. We also described here for the first time the genotype F of HHV-8 in Brazil. A wide profile of subgenotypes C (C1, C2, C3, C5 and C7) in the group without KS was found. HHV-8 K1 DNA sequences of group 2 (7%) belonging to subgenotypes C5 and C7 were confirmed as recombinants. Our findings did not show virus variability in the same patient in samples collected at different times or from different biological material in the eight cases studied here. There was no statistical difference regarding the presence/absence of a given SNP from locus K12 between groups with and without KS. However, there were a total of 6/59 polymorphic sites in coding regions of miRNA, 70% of which present only in the HHV-8 DNA sequence of group with KS and KS prototypes. Conclusion. Although there was no association between HHV-8 genotypes and the presence of KS and KS clinical stage, subgenotype B1 was significantly related to the absence of progression of KS. Some recombinants in K1/HHV-8 locus were observed in the group without KS. The presence of SNPs in coding regions of miR12-12 and miR12- 10 predominated in sequences of HHV- 8 of SK cases (group 1) and of epidemic, endemic and classic KS prototypes. The choice of primers was essential to ensure amplification of all HHV- 8 genotypes and wide profile de subgenotypes.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-02-25T18:43:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Catarina Tenorio de Lima.pdf: 1482710 bytes, checksum: 33aa99ed5deb74e6d960dbda8fec8282 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-25T18:43:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Catarina Tenorio de Lima.pdf: 1482710 bytes, checksum: 33aa99ed5deb74e6d960dbda8fec8282 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / O sarcoma de Kaposi (SK) é uma neoplasia maligna multifocal resultante da proliferação anormal do endotélio vascular, que ocorre principalmente em indivíduos com deficiência do sistema imunológico, sendo o câncer mais comumente associado à aids. Nos países emergentes, o SK permanece ainda como um grave problema de saúde pública e elevada taxa de mortalidade mesmo em pacientes que apresentam a forma cutânea da doença. Outros fatores agravantes nestes países são: o acesso tardio à terapia antirretroviral (TARV), o diagnóstico do SK em fase avançada da neoplasia e a não disponibilidade aos agentes antineoplásicos. Em Pernambuco, apesar da elevada taxa de detecção (22/100.000 habitantes) de casos de aids registrados no Siscel/Siclon, não existem dados do SK publicados. Este estudo objetiva descrever as principais características clínico-laboratoriais, o estadiamento inicial e o desfecho do SK em pacientes com aids atendidos em Centro de Referência de Recife-PE no período de 2004 a 2014, além de descrever quais as infecções oportunistas mais frequentes. Trata-se de um estudo descritivo com caráter analítico, retrospectivo, do tipo série de casos, onde foram analisados os prontuários de pacientes maiores 18 anos com aids e que apresentaram o diagnóstico histopatológico de SK. Foram incluídos 22 indivíduos, sendo 20 homens e 2 mulheres. Setenta e dois por cento dos indivíduos eram jovens e adultos jovens com idade que variava entre 18-39 anos. Muitos destes pacientes (54,4%) tiveram diagnóstico recente de HIV, com contagem de células T-CD4+ <200 cél/mm3 (77,3%) e 15 dos 22 pacientes não faziam uso de TARV. Quanto à classificação das lesões: 36,4% apresentavam lesões exclusivamente cutâneas, algumas disseminadas; 54,5% além do envolvimento da pele, a doença se estendia para mucosas, linfonodos e órgãos; e apenas 9% dos indivíduos durante a investigação tinham acometimento exclusivamente visceral, sem lesões de pele ou mucosas. O órgão mais acometido foi o estômago (53,3%), e na maioria das vezes, os pacientes eram assintomáticos. O estadiamento inicial foi baseado no AIDS Clinical Trial Group Oncology Committee, onde a descrição de Alto Risco foi mais frequente (86,4%). Não observamos associação significativa na relação entre o estadiamento inicial e o uso de TARV. Dos 22 pacientes, apenas cinco (22,7%) tratou o SK exclusivamente com TARV, enquanto 17 (77,3%) realizaram tratamento com quimioterapia. Quanto ao desfecho dos casos de SK, 40,9% dos pacientes obtiveram remissão completa. Entre os casos estudados, oito tiveram desfecho letal (36,5%). A despeito do diagnóstico tardio do SK associado à aids na população estudada, inclusive com risco desfavorável no momento do estadiamento, encontrou-se mortalidade menor do que a reportada em outros estudos e que pode estar relacionado ao acesso a serviço de saúde especializado. / The Kaposi sarcoma (KS) is a malignant multifocal neoplasm that results from the abnormal proliferation of the vascular endothelium occurs mainly in immunocompromised individuals. This type of cancer is most commonly associated with acquired immune deficiency syndrome (AIDS). In developing countries, KS remains a serious public health problem, with a high mortality rate even in patients presenting with the cutaneous variant of the disease. Other aggravating factors in these countries are late access to antiretroviral therapy (ART), diagnosis of KS in advanced stages of the cancer, and unavailability of antineoplastic agents. Despite the high rate of detection (22/100.000 inhabitants) of AIDS cases recorded in Siscel/Siclon in Pernambuco, there is not published data of the SK .The aims of this study were to describe the main clinical and laboratory characteristics, initial staging, and outcome of KS in AIDS patients examined at the Reference Center of Recife-PE between 2004 and 2014, and to describe the most frequent opportunistic infections. This case series is a descriptive, character analitico, retrospective study in which the medical records of older than 18 years AIDS patients who presented with a histopathological diagnosis of KS were reviewed. Twenty-two individuals (20 men and 2 women) were included in this study. Seventy-two percent of the individuals were youngs and young adults aged between 18 and 39 years. Many of these patients (54.4%) had been recently diagnosed with human immunodeficiency virus (HIV) infection, with CD4+ T-cell counts <200 cells/mm3 (77.3%) and 15 of the 22 patients did not undergo ART. Regarding the classification of lesions, 36.4% of the patients presented with exclusively cutaneous lesions, some of which were dispersed. In 54.5% of the patients, the disease had spread beyond the skin to include mucous membranes, lymph nodes, and organs; only 9% of the subjects presented with an exclusively visceral involvement, without skin or mucosal lesions, during the course of this research. The most frequently affected organ was the stomach (53.3%), in which case most of the patients were asymptomatic. The initial staging was in accordance with the AIDS Clinical Trial Group Oncology Committee staging system, whereby 5 of 7 patients who were undergoing ART and 14 of 15 patients who were not undergoing ART were classified to be at high risk of KS. No significant association between initial staging and the use of ART was observed. Of the 22 patients, only 5 (22.7%) were treated exclusively with ART for KS, whereas 17 (77.3%) underwent chemotherapy. Regarding the outcome of KS, 40.9% of the patients achieved complete remission. Among the patients studied, oito (36,5%)had fatal outcomes. Despite the late diagnosis of KS associated with AIDS in the population under study, including the unfavorable risk at the time of staging, the mortality was lower than that reported in other studies, which can be related to the current patients having access to a specialized health service.

O Sarcoma de Aplicação Felino (SAF) possui características específicas pouco estudadas. A agressividade, com invasão profusa de tecidos adjacentes, bem como a presença de células anaplásicas em sua composição fazem do SAF um obstáculo a ser transposto, para obtenção do melhor tratamento. Sua etiologia e etiopatogenia ainda permanecem obscuras. O objetivo deste estudo consistiu em determinar fatores prognósticos para o paciente portador de SAF, caracterizando-o quanto ao seu peso e escore de condição corporal (ECC), à origem e diferenciação da neoplasia por ele apresentada, bem como caracterizar o microambiente perineoplásico quanto à presença de células inflamatórias. Foram selecionados 46 casos de SAF, sendo 31 casos novos de pacientes e 22 casos reavaliados. Foi encontrada diferença significativa entre o ECC (p=0,001) e peso (p<0,001) de pacientes que apresentaram SAF e os do grupo controle. Não foram encontradas diferenças entre gênero e raça. A localização mais comumente acometida foi a tóraco-abdominal (78%). Quanto à origem, a maioria dos SAF apresentou-se como originada em células fibroblastos. Enquanto não houve marcação para componentes inflamatórios (CD3 e CD68), houve para receptor de quinase (c-kit), para Cox-2 e FelV. Não houve influencia dos parâmetros avaliados com as variáveis clínicas e com a sobrevida total. Houve influencia estatisticamente significante quando comparamos a invasão observada no exame de tomografia computadorizada e a escolha do tratamento instituído (p=0,019). / The feline injection-site sarcoma (FISS) has specific characteristics which are little studied. FISS treatment is a hurdle to getting because of their aggressiveness, with profuse invasion of adjacent tissue, as well as the presence of anaplastic cells in its composition. Its etiology and pathogenesis remain obscure. This research aims to determine prognostic factors for patients with FISS, characterizing it as their weight and body condition score (BCS) and by the origin and differentiation of the tumor presented, along with characterizing the microenvironment peri-neoplastic for the presence of inflammatory cells. 46 cases of cats that presented FISS were assisted, with 31 new cases and 22 cases of patients reassessed. Statistical difference was found between the BCS (p=0,001) and weight (p<0,001) of FISS group and control group. No differences were found between gender and race. The region most commonly affected was the toraco-abdominal (78%). The FISS majority presented as fibroblasts origin, while no marking for inflammatory components (CD3 and CD68). There was marking for kinases cascade (c-KIT), for COX-2, and for FelV. There was no influence of the parameters evaluated with clinical variables and overall survival. There was a statistically significant influence when comparing the invasion observed in computerized tomographic examination and choice of the treatment (p = 0.019).

Oncolytic viruses (OV) are an emerging class of anticancer bio-therapeutics that induce antitumor immunity through selective replication in cancer cells. However, the efficacy of OVs as single agents remains limited. We postulate that resistance to oncolytic virotherapy results in part from the failure of tumor cells to be sufficiently infected. In this study, we provide evidence that in the context of sarcoma, a highly heterogeneous malignancy, the infection of tumors by different oncolytic viruses varies greatly. Similarly, for a given oncolytic virus, productive infection of tumors across patient samples varies by many orders of magnitude. To overcome this issue, we hypothesize that the infection of resistant tumors can be achieved through the use of selected small molecules. Here, we have identified two novel drug classes with the ability to improve the efficacy of OV therapy: fumaric and maleic acid esters (FMAEs) and vanadium compounds. FMAEs are enhancing infection of cancer cells by several oncolytic viruses in cancer cell lines and human tumor biopsies. The ability of FMAEs to enhance viral spread is due to their ability to inhibit type I IFN production and response, which is associated with their ability to block nuclear translocation of transcription factor NF-κB. Vanadium-based phosphatase inhibitors enhance OV infection of RNA viruses in vitro and ex vivo, in resistant cancer cell lines. Mechanistically, this involves subverting the antiviral type I IFN response towards a death-inducing and proinflammatory type II IFN response, leading to improved OV spread, increased bystander killing of cancer cells, and enhanced anti-tumor immune-stimulation. Both FMAEs and vanadium compounds improve therapeutic outcomes of OV treatment in syngeneic tumor models, leading to durable responses, even in models otherwise refractory to OV and drug alone. Overall, we showcased novel avenues for the development of improved immunotherapy strategies.

Soft tissue sarcomas (STS) are rare human malignant neoplasms, arising mostly from stem cells within non-skeletal connective tissues. They account for approximately 1% of all human malignancies. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes involved in degradation of the extracellular matrix and their expression by cancer cells allows the cells to penetrate basement membranes and tissue matrix, thereby invading and metastasising. The most studied malignant tumours from the perspective of MMP expression and its relationship to malignant behaviour are epithelial-derived carcinomas. MMPs role in invasion and metastasis of sarcomas has been very little investigated. This is in part because of the difficulty in accumulating sufficient tumour tissue to enable statistically relevant analysis of sufficient tumours. The purpose of this thesis was to examine the expression of key MMPs - MMP-2, MMP-7, MMP-9, and MMP-14 and their inhibitors (TIMP-1 and TIMP-2) at the invasive/subcapsular edge of human malignant and benign connective tissue tumours using immunohistochemistry, a technique that allows a very high level of reaction product localisation within tumours. In three different STS types and appropriate benign equivalents, the expression of MMPs -2, -7, -9, and -14 and their inhibitors (TIMPs -1 and -2) were measured using intensity of staining and the percentage area of staining by image analysis. The results were compared between tumour types and against histological grading that is widely used as a prognostic factor. The findings from this research indicated that metalloproteinases were commonly expressed in STS and benign equivalents. There were differences in expression of some benign versus malignant neoplasms of the same group. No uniform pattern of expression of any of MMPs was observed across the tumours, but some of the data, most notably that for expression of MMP-2 and -9 indicate, a role for MMPs in malignant behaviour and some showed (e.g. MMPs -7 and -14) change in expression with the grade of malignant tumours in the same broad category. There is some evidence of an inverse relationship between MMP and appropriate TIMP expression suggesting that a failure of inhibition, as much as increased expression, is a feature of malignancy.

Synovial sarcoma is a soft tissue tumor defined by the presence of t(X;18)(p11.2;q11.2), fusing the SYT (SS18) gene on chromosome 18 and one of three SSX genes on chromosome X. T(X;18) results in production of a fusion protein (SYT-SSX) that is thought to underlie synovial sarcoma pathogenesis through aberrant targeting of both activating (trithorax, SWI/SNF) and repressing (Polycomb) transcription factors when expressed in a stem or progenitor-like cellular background. Clinically, synovial sarcomas present considerable diagnostic and therapeutic challenges. Whereas the classical biphasic histology is distinctive, the more common monophasic histology can be difficult to differentiate from other spindle cell tumors. In these situations, detection of t(X;18) is the gold standard for diagnosis, but it is a specialized and time-consuming process. Immunohistochemistry can be helpful, but no marker that is both highly sensitive and specific is available. Here I describe a fluorescence in situ hybridization based method employing an SYT break-apart probe set that can expedite detection of t(X;18). I also report that TLE1, which was identified in gene expression studies as a good discriminator of synovial sarcoma from other mesenchymal tumors, is a highly sensitive and specific immunohistochemical marker for synovial sarcoma. Both of these novel diagnostic techniques are applicable to small tissue samples such as core needle biopsies and are now being used clinically. The diagnosis of synovial sarcoma carries a poor prognosis and the 10-year overall survival rate is approximately 50%, most of whom are young adults. The addition of chemotherapy to surgical resection (the mainstay of treatment) does not appear to improve overall survival. Thus, there is a strong need for development of a clinically effective systemic therapy to improve patient outcome. I describe preclinical studies that demonstrate the Hsp90 inhibitor 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (17-AAG) inhibits proliferation of synovial sarcoma by inducing apoptosis and that this is associated with degradation of multiple receptor tyrosine kinases and disruption of the SYT-SSX-β-catenin interaction. I also identify a subset of synovial sarcoma cells, typified by expression of CD133, which exhibit stem-like properties and are relatively resistant to doxorubicin but susceptible to 17-AAG at clinically relevant concentrations. / Medicine, Faculty of / Pathology and Laboratory Medicine, Department of / Graduate

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Universidade de Pernambuco / Índigo e Indirubina são derivados da oxidação e dimerização do indoxil e isatan e liberados pelo composto precursor, Indican ou Isatan B. A Indirubina inibe a síntese de DNA de algumas linhagens celulares. Este trabalho experimental foi desenvolvido para avaliar os efeitos dos compostos químicos identificados e isolados de folhas de Indigofera suffruticosa sobre as linhagens celulares neoplásicas (Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich). O material utilizado foi obtido a partir screening fitoquímico onde foram evidenciados através de protocolos extrativos de identificação e isolamento de constituintes ativos de folhas I. suffruticosa. O protocolo do ensaio biológico foi realizado utilizando 8 grupos de 6 camundongos para implantação dos tumores e a quimioterapia foi realizada com indican, índigo e indirubina. No oitavo dia, os animais foram pesados, eutanaziados, seus tumores retirados e os pesos corporais e tumorais foram analizados. Os compostos químicos identificados e isolados foram: indican, indigo e indirubina de folhas de I. suffruticosa. O indican e o índigo não reduziram significativamente o peso corporal dos animais, no entanto, a indirubina reduziu significativamente o peso corporal dos animais portadores de Sarcoma 180. O índigo e a indirubina não reduziu significativamente o peso corporal dos animais portadores do Carcinoma de Ehrlich. O indican não reduziu significativamente o peso do tumor Sarcoma 180 na dose de 25mg/Kg por via i.p. O índigo e a indirubina de folhas de I. suffruticosa na concentração de 25&#956;g/Kg sobre as linhagens celulares (Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich) não reduziram significativamente o crescimento dos tumores. Esse estudo in vitro sugere investigação dos indigóides derivados das folhas de I. suffruticosa

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4561_1.pdf: 1350064 bytes, checksum: 52c939fb023c05799c2a57c7a4a2034c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Universidade de Pernambuco / Índigo e Indirubina são derivados da oxidação e dimerização do indoxil e isatan e liberados pelo composto precursor, Indican ou Isatan B. A Indirubina inibe a síntese de DNA de algumas linhagens celulares. Este trabalho experimental foi desenvolvido para avaliar os efeitos dos compostos químicos identificados e isolados de folhas de Indigofera suffruticosa sobre as linhagens celulares neoplásicas (Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich). O material utilizado foi obtido a partir screening fitoquímico onde foram evidenciados através de protocolos extrativos de identificação e isolamento de constituintes ativos de folhas I. suffruticosa. O protocolo do ensaio biológico foi realizado utilizando 8 grupos de 6 camundongos para implantação dos tumores e a quimioterapia foi realizada com indican, índigo e indirubina. No oitavo dia, os animais foram pesados, eutanaziados, seus tumores retirados e os pesos corporais e tumorais foram analizados. Os compostos químicos identificados e isolados foram: indican, indigo e indirubina de folhas de I. suffruticosa. O indican e o índigo não reduziram significativamente o peso corporal dos animais, no entanto, a indirubina reduziu significativamente o peso corporal dos animais portadores de Sarcoma 180. O índigo e a indirubina não reduziu significativamente o peso corporal dos animais portadores do Carcinoma de Ehrlich. O indican não reduziu significativamente o peso do tumor Sarcoma 180 na dose de 25mg/Kg por via i.p. O índigo e a indirubina de folhas de I. suffruticosa na concentração de 25&#956;g/Kg sobre as linhagens celulares (Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich) não reduziram significativamente o crescimento dos tumores. Esse estudo in vitro sugere investigação dos indigóides derivados das folhas de I. suffruticosa