Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5318.pdf: 2120275 bytes, checksum: 195991f57b16646d738d331400f4262b (MD5) Previous issue date: 2011-07-14 / Financiadora de Estudos e Projetos / The objective of this study was to develop automatic flow analyzers for the determination of pharmaceutical analytes using a micro-device based on LTCC (Low Temperature Co-fired Ceramics) and a mini-photometer as the detection system. To perform this task, the following devices were developed: 1) A mini-photometer based on RGB-LED (Red Green Blue- Light Emitting Diode) which wavelengths of maximum emission are 465, 525, and 640 nm, respectively, was used as the radiation source. A photodiode (PD) was used as a detector; 2) An optical cell for flowing analysis. A software was developed in graphic language using LabView® 7.0 in order to control and acquire analytical data. The mini-photometer for flowing analysis and software were developed for the determination of N-acetylcysteine (NAC), captopril (CAP), adrenaline (DNA), dopamine (DPN) and ascorbic acid (AAc) in pharmaceutical formulations. First, the mini-photometer was developed and used as a photometric detector. Then, a labmade valve actuator (VA) connected to a computer interface for data acquisition (National Instruments USB 6008) was used to switch on/off the solenoid valves. This interface also enabled to control the mini-photometer as well as the acquisition and processing of transient signals generated in the LTCC. In all determinations, the miniphotometer, the LTCC and the flow system with multicommutation employing threeway solenoid valves were used, except for NAC and CAP where an analyzer with manual injector was used. Solid-phase reactors were also used due to lower reagents consumption. The results from the developed system were compared with reference and validated methods (found in the literature) and there were no significant differences at 95% confidence level. The developed system with LTCC employs low volume of reagents and samples and can be used to determine several analytes in different matrices. applied in any other used (due to), along with a system of universal (able to be applied in any other application in flow) were other good features of this developed system. The good stability and sensibility of the developed mini-photometer (4 x 4 cm) enabled an adequate performance during the determinations. / O presente trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de analisadores automáticos em fluxo para a determinação de analitos de interesses farmacêutico utilizando um micro-dispositivo LTCC (Low Temperature Co-fired Ceramics) e um minifotômetro como sistema de detecção. Para tal, foram desenvolvidos os seguintes componentes: 1) minifotômetro a base de LED-RGB (Light Emitting Diode Red Green Blue) cujos comprimentos de onda de máxima emissão são 472, 525 e 640 nm respectivamente como fonte de radiação e um fotodiodo (FD) como detector; 2) uma célula óptica para análise em fluxo baseada em LTCC. Um software foi criado em linguagem gráfica LabView® 7.0, para controle e aquisição de dados do sistema analítico. O minifotômetro para análise em fluxo e o software foram desenvolvidos para a determinação de N-acetilcisteína (NAC), captopril (CAP), adrenalina (ADN), dopamina (DPN) e ácido ascórbico (AAc) em formulações farmacêuticas. Primeiramente foi desenvolvido um minifotômetro baseado em LED-RGB como detector fotométrico. Em seguida, foi construído um acionador de válvulas (AV), o qual foi utilizado para controlar o tempo de acionamento das válvulas solenóides. Este controle foi executado utilizando um programa desenvolvido em Labview o qual foi acoplado a uma interface de aquisição de dados, USB 6008 da National Instruments, acoplada a um microcomputador. Com esta interface foi possível controlar também o minifotômetro construído bem como a aquisição e tratamento dos sinais gerados no LTCC*. Em todos os casos, o minifotômetro, o LTCC e o sistema em fluxo com multicomutação empregando válvulas solenóides de três vias (Thee-way) e reatores em fase sólida foram utilizados, exceto para a determinação de NAC e CAP onde um analisador com injetor comutador manual foi empregado. Os resultados obtidos com o sistema desenvolvido foram sempre comparado com métodos de referência ou validados na literatura, e não houve uma diferença significativa a um nível de confiança de 95%. Além disso, um baixo volume de reagentes e amostras utilizados (devido ao uso do LTCC), juntamente com um sistema de caráter universal (apto a ser aplicado em qualquer outra aplicação em fluxo) foram outros diferenciais deste trabalho. O minifotômetro desenvolvido, de apenas 4 x 4 cm apresentou uma boa estabilidade e corroborou para os bons resultados obtidos neste trabalho.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-20T13:09:53Z No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-20T13:10:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-20T13:10:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T13:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2010-09-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Traditionally, confirmatory diagnosis of malaria is made by microscopic examination of blood. Therefore, the diagnosis of the disease may be complicated by the lack of people or equipment necessary to obtain a fast and reliable diagnosis, especially in areas of difficult access. For these and other reasons, rapid, practical and sensitive methods have been developed, such as immunochromatographic strips. Therefore, this work aimed to develop a lateral flow system for the diagnosis of malaria caused by Plasmodium falciparum. So, polyclonal and monoclonal antibodies against the protein HRP2 (Histidine rich protein 2) of Plasmodium falciparum were produced using a recombinant protein that it fused to a glutathione-S-transferase (rHRP2-GST, obtained in previous work). After hibridomas production, only 20 responded against the protein rHRP2-GST, and of these only four showed some react ivity against the native protein. The monoclonal antibody that reacted better on this last ELISA test and in an immunofluorescence was used on a lateral flow system standardized here. For this standardization, the system was first mounted in lateral flow competitive format followed by a sandwich system using polyclonal anti-rHRP2-GST. In assays using red blood cells parasitized by P. falciparum, positive results were obtained (detection of the infection in the immunochromatographic strip) using polyclonal antibodies. The system was stable within the test period, thus demonstrating that possibly in a controlled product ion environment, this lateral flow system could remain stable for a time suitable for marketing / Tradicionalmente, o diagnóstico confirmatório da malária é feito pelo exame microscópico do sangue. Logo, o diagnóstico da doença pode ser complicado com a falta de pessoas ou equipamentos necessários para a obtenção de um diagnóstico confiável e rápido. Por esta e outras razões, métodos rápidos, práticos e sensíveis vêm sendo desenvolvidos, como, por exemplo, as fitas imunocromatográficas. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um sistema em fluxo lateral para o diagnóstico de malária causada por Plasmodium falciparum. Logo, anticorpos policlonais e monoclonais contra a proteína HRP2 (“Histidine rich protein 2”) de Plasmodium falciparum foram produzidos utilizando para isso uma proteína recombinante desta fusionada a uma cauda de glutationa-S-transferase (rHRP2-GST, obtida em trabalhos anteriores). Após a obtenção dos hibridomas, apenas 20 responderam contra a proteína rHRP2-GST, e dentre estes apenas 4 apresentaram alguma reatividade contra a proteína nativa. O anticorpo monoclonal que melhor reagiu a este ultimo ELISA e em um ensaio de imunofluorescencia foi utilizado em um sistema de fluxo lateral padronizado nesta tese. Para esta padronização, foi montado primeiramente um sistema em fluxo lateral em formato competitivo seguido de um sistema em sanduíche utilizando anticorpos policlonais anti-rHRP-GST. Nos ensaios utilizando hemácias parasitadas por P. falciparum, foram obtidos resultados positivos (detecção da infecção na fita imunocromatográfica) usando os anticorpos policlonais. O sistema apresentou estabi l idade dentro do período de teste, demonstrando assim que possivelmente, em um ambiente de produção controlado, este sistema em fluxo lateral poderia permanecer estável por um tempo satisfatório para sua comercialização.

Submitted by ANA KARLA PEREIRA RODRIGUES (anakarla_@hotmail.com) on 2017-07-31T12:10:23Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5468289 bytes, checksum: dc45efa53e8cc6251d00164b611309f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-31T12:10:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5468289 bytes, checksum: dc45efa53e8cc6251d00164b611309f9 (MD5) Previous issue date: 2016-05-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In the last decade, the extraction magnetic solid phase (MSPE) has been intense study target in Analytical Chemistry, mainly because of its potential application in sample preparation. Recently, with the development motivation automatic analytical methods, this technique has been combined with flow systems. However, the synergistic integration of MSPE with these systems is still a challenge, especially when it involves the handling of viscous matrices. In this perspective, this thesis proposes the development of an effective automated method to perform the MSPE in aqueous and oily matrices. For be applied as magnetic adsorbent nanoparticles of Fe3O4 coated with alumina and functionalized with sodium dodecyl sulfate (SDS) and 1-(2-pyridylazo)-2-naphthol (PAN) were synthesized. The nanoparticles were characterized by diffraction analysis X-ray and scanning electron microscopy, where it was confirmed that the method used to obtain the particles was adequate. Secondly, the automatic system to run the MSPE was developed. To this end an extraction chamber was made of Teflon with a quartz window on the side, where all steps of MSPE was performed without the need for any auxiliary apparatus for immobilizing the adsorbent. For generating the magnetic field in the extraction chamber, a robotic device has been developed. After these steps, the applicability of the method was demonstrated in the extraction and preconcentration of Cd and Pb in drinking water samples and Cd in edible oils, using as detection atomic absorption spectrometry graphite furnace. Factors affecting MSPE, such as pH, the amount of adsorbent, the type and concentration of the eluent and the elution time were studied. In the best experimental conditions to the sample water, the detection limit was 0.004, and 0.043 ug L-1 for Cd and Pb, respectively. Even in this array, relative standard deviations less than 3.5% were achieved with a 15-fold enrichment factor for both analytes. In the case of determination of Cd in edible oils, detection limit (0.006 ug L-1) and standard deviation (< 3.3%) was obtained satisfactorily with a 9-fold enrichment factor. Interfering studies have been performed successfully for the two determinations, not revealing significant percentage interference in determinations. The developed automatic method is simple and robust since it does not require immobilization of the adsorbent, and was successfully applied in the determination of Cd and Pb in drinking water samples and Cd in edible oils. / Na última década, a extração em fase sólida magnética (MSPE) tem sido alvo de intenso estudo na Química Analítica, principalmente em virtude do seu potencial de aplicação no preparo de amostras. Recentemente, tendo como motivação o desenvolvimento de métodos analíticos automáticos, essa técnica vem sendo combinada aos sistemas em fluxo. Contudo, a integração sinérgica da MSPE com esses sistemas ainda é um desafio, principalmente quando envolve a manipulação de matrizes viscosas. Nessa perspectiva, a presente tese propõe o desenvolvimento de um eficiente método automático para realização da MSPE em matrizes aquosas e oleosas. Para serem aplicadas como adsorvente magnético foram sintetizadas nanopartículas de Fe3O4 revestidas com alumina e funcionalizadas com dodecil sulfato de sódio (SDS) e 1-(2-piridilazo)-2-naftol (PAN). As nanopartículas foram caracterizadas através da análise de difratometria de raios-X e da microscopia eletrônica de varredura, onde confirmou-se que o método empregado para obtenção das partículas foi adequado. Num segundo momento, o sistema automático para executar a MSPE foi desenvolvido. Para isso, uma câmara de extração foi confeccionada em Teflon, com uma janela de quartzo na lateral, onde todos os passos da MSPE foram realizados sem a necessidade de qualquer aparato auxiliar para imobilizar o adsorvente. Para geração do campo magnético, na câmara de extração, um dispositivo robótico foi desenvolvido. Depois de estabelecida essas etapas, a aplicabilidade do método foi demonstrada na extração e preconcentração de Cd e Pb em amostras de água de abastecimento e de Cd em óleos comestíveis, empregando como detecção a espectrometria de absorção atômica em forno de grafite. Fatores que afetam a MSPE, tais como o pH, a quantidade de adsorvente, o tipo e a concentração do eluente e o tempo de eluição foram estudados. Nas melhores condições experimentais, para a amostra água, o limite de detecção foi 0,004 e 0,043 μg L-1 para o Cd e o Pb, respectivamente. Ainda nessa matriz, desvios padrão relativos menores que 3,5 % foram alcançados com um fator de enriquecimento de 15 vezes para ambos os analitos. No caso da determinação de Cd em óleos comestíveis, limite de detecção (0,006 μg L-1) e desvio padrão relativo (< 3,3 %) satisfatório foi obtido com um fator de enriquecimento de 9 vezes. Os estudos de interferentes foram realizados com êxito para as duas determinações, não revelando interferência percentual significativa nas determinações. O método automático desenvolvido é simples e robusto, uma vez que não requer a imobilização do adsorvente, e foi aplicado com sucesso na determinação de Cd e Pb em amostras de água de abastecimento e de Cd em óleos comestíveis.