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Estudo comparativo de protocolos de extração de hormônios esteróides fecais em diferentes espécies de animais / Comparative study of methods for extracting steroid hormones from feces of several animal species

Marie Odile Monier Chelini 10 February 2006 (has links)
Desde as primeiras dosagens de hormônios esteróides efetuadas em fezes por Adlercreuetz em 1976, os estudos baseados no uso desta técnica se multiplicaram com animais selvagens, como também em algumas espécies domésticas e, mais recentemente, em animais de laboratório. Diversos protocolos para a extração dos esteróides fecais foram elaborados e estão disponíveis na literatura. A eficiência dos mesmos pode ser avaliada medindo a sua capacidade de recuperar uma quantidade conhecida de hormônio marcado radioativamente e incorporado a algumas amostras fecais antes de submetê-las ao processo de extração. O presente trabalho teve por objetivo a determinação da capacidade de recuperação de três protocolos de extração de esteróides fecais dentre os mais freqüentemente empregados no nosso meio. São eles os protocolos descritos respectivamente por Brown et al. (1994), Graham et al. (2001) e Schwarzenberger et al. (1991). O estudo abrange sete espécies: hamster Sírio (Mesocricetus auratus), cutia (Dasyprocta aguti), lobo guará (Chrysocyon brachyurus), cabra doméstica (Capra hircus), ovelha doméstica (Ovis aries), chimpanzé (Pan troglodytes), gorila (Gorilla gorilla) e orangotango (Pongo pygmaeus) e três hormônios: progesterona, testosterona e cortisol. O protocolo de Graham alcançou maiores índices de recuperação da progesterona e da testosterona triciada. O protocolo de Schwarzenberger mostrou-se mais eficiente, do ponto de vista numérico, na recuperação do cortisol triciado. Os resultados obtidos sugerem, porém, que a metodologia empregada para avaliação da capacidade de recuperação dos três protocolos subestimou a eficiência do protocolo de Brown. / Adlercreutz performed the first quantifications of steroid hormones in human feces in 1976. Since then, studies based on this technique have been applied to wildlife, domestic animals, and recently to laboratory animals. Several procedures for extracting fecal steroids were established and are available in the literature. It is possible to assess the efficiency of these techniques measuring how they recover known amounts of radio-labelled hormones added to some fecal samples just before extraction. The aim of this study was to determine the recovery of three procedures for fecal steroid extraction that are commonly used in our laboratory. We assessed, then, how the techniques described by Brown et al. (1994), Graham et al. (2001) and Schwarzenberger et al. (1991) recover 3H-progesterone, 3H-testosterone and 3H-cortisol in the feces from eight animal species: Syrian hamster (Mesocricetus auratus), agouti (Dasyprocta aguti), maned wolf (Chrysocyon brachyurus), goat (Capra hircus), sheep (Ovis aries), chimpanzee (Pan troglodytes), gorilla (Gorilla gorilla) e orangutan (Pongo pygmaeus). Average recovery of Graham et al. (2001) procedure was higher for progesterone and testosterone and Schwarzenberger et al. (1991) procedure recovered more cortisol. However, our results suggested that the efficiency of the method established by Brown et al. (1994) was underestimated.
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Avaliação da capacidade esteroidogênica dos embriões de preá (Galea spixii): imunomarcação e expressão gênica das enzimas do complexo citocromo P450 / Steroidogenic capacity evaluation of spix yellow-toothed cavy embryos (Galea spixii): immunostaining and gene expression of cytochrome P450 complex enzymes

Franceliusa Delys de Oliveira 04 November 2016 (has links)
A síntese dos hormônios esteroides é feita através da ação de um complexo enzimático chamado citocromo P450. As enzimas 3β-HSD (3β-hidroxiesteroide desidrogenase), P450c17 (citocromo P450 17α-hidroxilase/17,20-liase) e P450arom (citocromo P450 aromatase), fazem parte desse complexo e são responsáveis pela síntese dos hormônios progestágenos, andrógenos e estrógenos, espectivamente. Essas enzimas já foram identificadas em inúmeros tecidos, inclusive em embriões em período pré-implantação. Por isso, acredita-se que o blastocisto seja uma fonte de produção de progesterona e estrógeno, hormônios essenciais para implantação e manutenção da gestação. Em roedores, as informações sobre a capacidade esteroidogênica dos embriões são controversas e também restritas apenas a estudos com espécies laboratoriais. Para trazer mais informações sobre a capacidade esteroidogênica em blastocistos de roedores utilizamos o preá (Galea spixii), uma espécie de roedor silvestre encontrada nas regiões de Caatinga e Semiárido do Nordeste brasileiro e muito utilizado na alimentação de famílias de baixa renda como fonte proteica. Diante o exposto, o objetivo deste trabalho é fazer um apanhado histórico sobre os dados publicados a cerca da capacidade dos embriões de diversas espécies de produzir os hormônios esteroides além de identificar e quantificar a expressão das enzimas esteroidogênicas em embriões de preá através das técnicas de imunohistoquímica e PCR em tempo real. As análises morfológicas indicam que o desenvolvimento inicial do preá se assemelha com os demais roedores, porém o tempo de desenvolvimento difere das espécies usadas em laboratório. As marcações da imunohistoquímica foram positivas nos tecidos maternos, mas os embriões não tiveram marcação para nenhuma das três enzimas do estudo. No entanto, os dados obtidos pelo PCR indicam que os genes CYP11, CYP17 e CYP19 foram expressos nos embriões e, portanto, o concepto de G. spixii tem capacidade de produzir hormônios esteroides, assim como visto em várias outras espécies que já foram estudadas / The synthesis of steroid hormones is made through the action of an enzyme complex called cytochrome P450. 3β-HSD (3β-hydroxysteroid dehydrogenase), P450c17 (cytochrome P450 17 α-hydroxylase/17,20-lyase) and P450arom (cytochrome P450 aromatase), are present in this complex and are are responsible for the synthesis of progestins, androgens and estrogens hormones, respectively. These enzymes have been identified in numerous tissues, including embryos in pre-implantation period. Therefore, it is believed that the blastocyst is a source of production of progesterone and estrogen, hormones essential for the implementation and maintenance of pregnancy. In rodents, the information about the steroidogenic capacity of embryos are controversial and confined to studies with laboratory species. To get more information about the steroidogenic capacity in blastocysts of rodents we used the spix yellow-toothed cavy (Galea spixii), a species of wild rodent found in the northeastern of Brazil, and used in the feeding of low-income families as a source of protein. On the above, the aim of this work is to make a historic about the data published about the ability of embryos of various species to produce steroid hormones and identify and quantify the expression of steroidogenics enzymes in embryos of spix yellow-toothed cavy by immunohistochemical and real-time PCR techniques. The morphological analyses indicate that the G. spixii early development resembles other rodents, but development time differs from the species used in laboratory. The immunohistochemical stainning was positive in maternal tissues, but the embryos did not have stainnig for any of the three enzymes of the study. However, the data obtained by PCR indicate that CYP11, CYP17 and CYP19 genes were expressed in embryos and, therefore, the concept of G. spixii has capacity to produce steroid hormones, as seen in several other species that have been studied
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Concentração sérica de íons e hormônios sexuais femininos e sua relação com os sintomas da síndrome pré-menstrual em mulheres jovens

Santos, Larissa Almenara Silva dos 11 April 2017 (has links)
Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-04-11T17:31:12Z No. of bitstreams: 1 Santos, Larissa Almenara Silva dos [Dissertação, 2011].pdf: 692855 bytes, checksum: 153140a6b56a719a5213e3977c23a824 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-11T17:31:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos, Larissa Almenara Silva dos [Dissertação, 2011].pdf: 692855 bytes, checksum: 153140a6b56a719a5213e3977c23a824 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Os hormônios sexuais femininos influenciam alterações metabólicas durante o ciclo menstrual. Estas, são estudadas em mulheres com síndrome pré-menstrual (SPM) porém, no Brasil há poucas informações em mulheres sadias. O objetivo foi avaliar a concentração sérica de eletrólitos e hormônios esteróides femininos em mulheres jovens, na fase lútea do ciclo menstrual, e sua relação com os sintomas da SPM. Noventa e três voluntárias foram acompanhadas durante três meses. O estado nutricional foi avaliado baseado no Índice de massa corporal (IMC), percentual de gordura e água corporal. Foram utilizados 3 “mapas de sintomas diários” para investigar a frequência de ansiedade, edema, depressão, constipação intestinal, diarréia, mastalgia e náuseas. No 1º mês, foi coletado 10 mL de sangue, após jejum noturno de 12 horas, na fase lútea (FL), para determinar hematócrito, hemoglobina, sódio, potássio, cálcio, magnésio, estrogênio, progesterona, hormônio folículo estimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH) e prolactina. Os dados foram analisados por meio da estatística descritiva através do programa GraphPad Instat®. A ingestão alimentar (energética, macro e micronutrientes) foi avaliada através de 6 registros: 03 na FL e 03 na fase folicular (FF) e utilizou-se o Software NutWin®- Programa de Apoio à Nutrição. O estado nutricional manteve-se inalterado porém, na FL, mais da metade (>62%) das voluntárias apresentavam água corporal acima da referência (>500mL/Kg). Os sintomas ansiedade, edema, depressão e mastalgia foram mais percebidos na fase menstrual do ciclo, de forma leve. Foi constatado voluntárias com hiponatremia (4,22%) e hipernatremia (7,04%); hipocalcemia (86,49%); hipocalemia (2,70%), hipomagnesemia (14,08%), hipermagnesemia (5,08%) e a presença de anemia em 24% delas. Quanto aos hormônios: Estrogênio (<25,00%; >2,08%); Progesterona (<22,54%; >14,08%); FSH (<10,17%; >30,51%); LH (<6,12%; >14,28%); Prolactina (>22,53 %). Foi verificado maior (p<0,05) ingestão de energia (Kcal) (FL:1652,50 ± 408,08; FF:1550,99 ± 334,87), carboidrato (g) (FL: 223,54 ± 58,29; FF: 210,75 ± 49,17), proteína (g) (FL: 69,00 ± 18,64; FF: 65,08 ± 17,57) e lipídios (g) (FL: 52,67 ± 17,44; FF: 50,90 ± 14,51) na FL comparado com a FF (p<0,05). A ingestão dos micronutrientes foi inadequada: Sódio (>27,14% FL; >21,74% FF), Potássio (<100,00% FL e FF), Cálcio (<90,00% e >10,00% FL; <97,10% e >2,89% FF) e Magnésio (<90,00% FL; <92,75% FF). Apesar de o estado nutricional estar adequado, foi constatada grande freqüência de voluntárias anêmicas e conclui-se que o ciclo menstrual parece alterar o equilíbrio eletrolítico e hormonal, provoca aumento da ingestão de energia e macronutrientes na fase lútea e favorece a exacerbação de sintomas pré-menstruais na fase menstrual do ciclo, em mulheres jovens / Female hormones influence metabolic changes during the menstrual cycle. These are studied in women with premenstrual syndrome (PMS) but in Brazil there is little information on healthy women. The aim was to evaluate serum electrolytes and female steroid hormones in young women in the luteal phase of the menstrual cycle and its relation to the symptoms of PMS. Ninety-three subjects were followed for three months. Nutritional status was assessed based on body mass index (BMI), percentage of body fat and water. We used 3 "maps of daily symptoms" to investigate the frequency of anxiety, edema, depression, enteric costiveness, diarrhea, nausea and breast tenderness. At 1 month was 10 mL of blood collected after an overnight fast of 12 hours in the luteal phase (LP) to determine hematocrit, hemoglobin, sodium, potassium, calcium, magnesium, estrogen, progesterone, follicle stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and prolactin. Data were analyzed using descriptive statistics through the GraphPad Instat ®. Dietary intake (energy, macro and micronutrients) was assessed by 6 records: 03 in LP and 03 in the follicular phase (FP) and used the Software NutWin ® - Nutrition Support Programme. Nutritional status remained unchanged but in LF, more than half (>62%) of the volunteers had body water above the reference (> 500mL/Kg). The anxiety symptoms, edema, depression and breast tenderness were more perceived during the menstrual cycle, lightly. It has been found volunteers with hyponatremia (4,22%) and hypernatremia (7,04%), hypocalcemia (86,49%), hypokalemia (2,70%), hypomagnesemia (14,08%), hypermagnesemia (5,08%) and the presence of anemia in 24% of them. As for the hormones: estrogen (<25,00%; >2,08%), progesterone (<22,54%; >14,08%), FSH (<10,17%; >30,51%), LH (<6,12%; >14,28%), prolactin (>22,53%). It was found higher (p<0,05) energy intake (kcal) (LP: 1652,50 ± 408,08; FP: 1550,99 ± 334,87), carbohydrate (g) (LP: 223,54 ± 58,29; FP: 210,75 ± 49,17), protein (g) (LP: 69,00 ± 18,64; FP: 65,08 ± 17,57) and lipids (g) (LP: 52,67 ± 17,44; FP: 50,90 ± 14,51) in LP compared to FP (p<0,05). The intake of micronutrients was inadequate: Sodium (>27,14% LP; >21,74% FP), potassium (<100,00% LP and FP), calcium (<90,00% and >10,00% LP; <97,10% and >2,89% FP) and magnesium (<90,00% LP; <92,75% FP). Although the nutritional status to be adequate, was found high frequency of voluntary anemic and conclude that the menstrual cycle seems to alter the electrolyte balance and hormonal causes an increase in energy and macronutrient intake in the luteal phase and favors the exacerbation of symptoms pre-menstrual phase of the menstrual cycle in young women.
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Endocrine function and growth in young patients with childhood- or adolescence-onset epilepsy

Mikkonen, K. (Kirsi) 03 September 2004 (has links)
Abstract Endocrine disorders are common in adults with epilepsy on antiepileptic drugs (AEDs). This study aimed to evaluate endocrine function, lipid metabolism and growth in patients with childhood- or adolescence-onset epilepsy. Altogether 148 patients with epilepsy on carbamazepine (CBZ), oxcarbazepine (OXC), valproate (VPA) or lamotrigine monotherapy during pubertal maturation and 124 healthy controls participated in this population-based cohort study. Boys and young men (n = 140) underwent cross-sectional evaluation once, and girls and young women (n = 132) twice at an approximate interval of 6 years. Gonadal structure and serum reproductive and thyroid hormone and lipid concentrations were evaluated and growth data were gathered. Elevated serum testosterone and androstenedione levels and polycystic ovary syndrome (PCOS) were common in female subjects whose medication, especially VPA, continued into young adulthood. Serum reproductive hormone concentrations and ovarian structure were similar in patients off medication and controls in young adulthood. CBZ was associated with elevated serum sex hormone binding globulin and decreased dehydroepiandrosterone sulfate levels and VPA with elevated serum androstenedione concentrations in male patients. Testicular structure was similar in patients and controls. CBZ, OXC and VPA were associated with changes in serum thyroid hormone, thyrotropin and lipid levels during pubertal maturation in female patients, but these levels returned to normal after withdrawal of medication. Linear growth and final height were normal in female patients, but overweight was common if they had been obese and on VPA medication during pubertal maturation. Elevated serum androgen levels, PCOS and overweight are common if epilepsy and AED use, especially VPA, continue into young adulthood. These untoward changes or alterations in serum thyroid hormone or lipid concentrations are not present in young women with medication withdrawn. CBZ and VPA are associated with changes in serum sex hormone levels in boys and young men with epilepsy. Epilepsy and AED use during pubertal maturation does not seem to affect growth.
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Repercussões histopatologicas na prostata ventral do gerbilo da Mongolia (Merinones unguiculatus) apos suplementação por hormonios esteroides

Scarano, Wellerson Rodrigo 21 July 2006 (has links)
Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T17:58:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scarano_WellersonRodrigo_D.pdf: 4897591 bytes, checksum: ce5fe2f21b6836d646532424d518315c (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O tecido prostático é susceptível aos desníveis hormonais provocados, principalmente pelo processo de envelhecimento. A hiperplasia benigna prostática e o câncer de próstata são doenças que acometem uma grande parcela da população masculina, e parecem estar envolvidas com alterações hormonais. Por isso, o esclarecimento dos processos celulares e teciduais envolvendo os hormônios sexuais: testosterona e estradiol são, sem dúvida, importantes para o entendimento da etiologia desses processos patológicos. O gerbilo (Meriones unguiculatus) foi utilizado como modelo experimental pois, segundo a literatura, é susceptível ao aparecimento de lesões autóctones e responde bem à carcinogênese experimental, mostrando-se um bom modelo experimental. Numa primeira etapa, foram utilizados animais de três idades diferentes: púbere, adulta e senil. Esses animais foram submetidos à suplementação androgênica e as próstatas ventrais foram destinadas a análises histopatológicas, quantitativas, imunocitoquímicas e ultraestruturais. Foi observado aumento no peso da glândula e também na altura das células epiteliais em todas as idades. Tal aumento reflete o aumento da capacidade sintética observada pela dilatação das organelas de síntese, às vezes de aspecto vesiculoso, ocupando toda a região supranuclear. Nos animais adultos e velhos foram notadas regiões hiperplásicas e displásicas freqüentemente associadas a Neoplasias Intraepiteliais de diferentes graus e a adenocarcinomas. Houve aumento na espessura da camada de células musculares lisas (CML) ao redor dos ácinos nos animais púberes e adultos, enquanto nos animais velhos houve diminuição dessa camada. Além disso, as CML se mostraram aparentemente hipertróficas e com maior atividade sintética nos animais púberes e adultos. Foi notado aparente aumento da vascularização periacinar, onde se observou a presença de freqüentes vasos sanguíneos em todas as idades após o tratamento. Ademais, em todas as idades foi observado aumento da densidade de marcação de receptores androgênicos após o tratamento, evidenciando a possível relação desses receptores com os efeitos observados. Em uma segunda etapa experimental, avaliou-se o efeito do estradiol sobre o tecido prostático intacto e hipoandrogênico em animais adultos, tentando com isso simular situações de descompensação hormonal, típicas da senilidade. As alterações epiteliais foram freqüentes nos animais tratados com estradiol onde se observou aumento na altura das células epiteliais, aparecimento de regiões de intensa displasia e hiperplasia, e a formação de PINs. Outro aspecto que independe da presença da testosterona é o arranjo dos elementos fibrilares e não fibrilares da matriz extracelular entre as CML, apontando para um possível papel dessas células no rearranjo e na síntese desses componentes após os tratamentos estrogênicos. Nos animais castrados observou-se acúmulo de elementos da matriz extracelular sob o epitélio e em animais intactos presença desses elementos dispersos e escassos. Em ambos os grupos: intactos e castrados, notou-se que as CML e os fibroblastos apresentam fenótipo secretor acentuado após o tratamento com estradiol. Houve aumento na densidade de marcação ERa e AR positivos em regiões de hiperplasia apontando para um possível papel desses receptores na formação de lesões pré-malígnas e malignas. Portando, conclui-se que o gerbilo é susceptível a ação da testosterona e do estradiol, os quais provocam desarranjos estruturais e ultraestruturais de cunho patológico e funcional, mostrando-se um ótimo modelo para o estudo das doenças prostáticas de etiologia hormonal / Abstract: Not informed. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural
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Senescência e próstata : interações dos hormônios esteroides e dos fatores de crescimento no microambiente glandular / Senescence and prostate : steroid hormone and growth factors interactions in the glandular microenvironment

Hetzl, Amanda Cia, 1984- 22 August 2018 (has links)
Orientador: Valeria Helena Alves Cagnon Quitete / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T09:05:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hetzl_AmandaCia_D.pdf: 39910159 bytes, checksum: 9f69d8623d48f1fccdc9aebc181573a3 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A senescência é fator determinante para a ocorrência de alterações morfofuncionais da próstata. O objetivo desse estudo foi caracterizar e correlacionar as interações entre os receptores dos fatores de crescimento fibroblásticos (FGFR2, FGFR7, FGFR8), fator de crescimento epidermal (EGFR), ?-actina e vimentina e os receptores androgênicos (AR), estrogênicos ? e ? (ER?, ER?) e de prolactina (PR) nos compartimentos epiteliais e estromal frente à condição de senilidade e variações hormonais. Além disso, caracterizar e correlacionar o AR, ER?, ER? e PR com os FGFs nos compartimentos epitelial e estromal de amostras humanas com adenocarcinoma de alto grau e baixo grau. 50 ratos machos senis (10 meses de idade) e 10 ratos machos jovens (4 meses de idade) foram divididos em grupos: Jovem (JOV) e Senil (SE): óleo de amendoim por 30 dias; Castrado (CAS): castração cirúrgica e química; Tamoxifeno-Letrozol (TAM): tamoxifeno e de letrozol por 30 dias; Castrado+estrógeno (REEST): tratamento similar ao CAS, e posteriormente recebeu injeções de 17?-estradiol por 30 dias; Tamoxifeno-Letrozol+Andrógeno (RETEST): após tratamento similar ao grupo TAM, os animais receberam injeções de Cipionato de Testosterona por 30 dias. Os animais foram sacrificados e amostras do lobo ventral foram coletadas e submetidas às análises de Microscopia de Luz, imunohistoquímicas, western blotting e dosagem hormonal. 30 amostras prostáticas humanas foram divididas em grupos: Adenocarcinoma de alto grau e Adenocarcinoma de baixo grau. As amostras foram submetidas às análises de Microscopia de luz e imunohistoquímicas. Após a administração estrogênica, presença de microácinos, células inflamatórias e hipertrofia do estroma prostático foram observados. A hiperandrogenização levou à recuperação epitelial. No SE houve aumento de vimentina, ER? e PR em relação ao JOV. No CAS observou-se localização diferencial da prolactina e ?-actina em relação ao SE. No RETEST, observou-se recuperação do padrão de distribuição de reatividade da ?-actina e da prolactina em relação ao SE. No REEST foi observado aumento de ER? e ER? e localização diferencial destes, somando-se a diminuição da ?-actina e vimentina em relação ao SE. No TAM foi observada diminuição de ER? e ?-actina, e aumento de prolactina no compartimento estromal, em relação ao SE. Em humanos, os FGFR2 e FGFR8 apresentaram-se aumentados no estágio inicial do câncer prostático, sugerindo essas moléculas como bons alvos terapêuticos. Pode-se concluir que o envolvimento do ER? na ativação do estroma reativo tornou o microambiente favorável à progressão do câncer, devido à potencialização do desequilíbrio estromal, e o ER? contribuíram para a inibição das lesões précancerosas em homens na senescência. Já, o desequilíbrio causado pela ablação e/ou reposição hormonal não somente alterou o feedback entre os hormônios esteróides como modificou a localização da reatividade das moléculas nos compartimentos prostáticos, provavelmente interferindo nas sinalizações autócrinas e parácrinas dos estrógenos, EGF e prolactina, apontando esses como deflagradores da formação do estroma reativo. A ablação hormonal nos animais senis levou ao aumento da reatividade dos FGFs, sugerindo interações entre os hormônios e suas vias de sinalização e o microambiente prostático senil. As vias dos FGFs podem ser ativadas também de maneira andrógeno-independente, uma vez que os FGFs apresentaram níveis de detecção aumentados mesmo diante da intensa depleção androgênica imposta pela castração / Abstract: Senescence is a determining factor for morphological and functional prostatic alterations. The objective of this study was to characterize and correlate the interactions among fibroblast growth factor receptors (FGFR2, FGFR7, FGFR8), epidermal growth factor (EGFR), ?-actin and vimentin and the androgen receptor (AR), estrogen ? and ? (ER?, ER?) and prolactin (PR) in epithelial and stromal prostatic compartments in elderly rats on hormonal variation. Also, the objective was to characterize and correlate the AR, ER?, ER? and PR with the FGFs in the human prostatic samples, presenting high grade and low grade adenocarcinoma. Fifty male rats (10 months old) and 10 young male rats (4 months old) were divided into groups: Young (JOV) and Senile Groups (SE)- peanut oil injections for 30 days, Castrated Group (CAS)- surgical and chemical castration; Tamoxifen-Letrozole Group (TAM)- tamoxifen and letrozole injections in period of 48 hours for 30 days; Castrated + estrogen Group (REEST)- surgical and chemical castration and subsequently the animals received 17?-estradiol injections for 30 days; Tamoxifen- Letrozole + Androgen Group (RETEST): after treatment similar to the TAM group, the animals received testosterone cypionate injections for 30 days. After the treatment, the animals were sacrificed and the ventral lobe samples were collected and analyzed for the Light Microscopy, immunohistochemistry and Western blotting. Thirty human prostatic samples were collected from elderly men and divided into High-grade and Low-grade Adenocarcinoma Groups. The samples were submitted to light microscopy and immunohistochemical analyses. After estrogen administration, epithelial atrophy, microacini, inflammatory cells and stromal hypertrophy were observed. The hyperandrogenization led to the recovery of epithelium. The vimentin, ER? and PR increase was verified in the SE group in relation to JOV one. Differential localization of PR and ?-actin was seen in the CAS group in relation to SE one. Recovery of the distribution pattern of ?-actin and prolactin reactivities was observed in the RETEST group in relation to SE. In the REEST group, it was observed the ER? and ER? increase and differential localization of these receptors, and the ?-actin and vimentin decrease in relation to SE. In the group TAM, it was observed the ER? and ?-actin decrease and the prolactin increase in the stromal compartment in relation to SE group. Regarding to human samples, increased FGFR2 and FGFR8 were observed in the early stages of prostate cancer, suggesting these molecules as good therapeutic targets. Thus, it can be concluded that the involvement of ER? in activation of reactive stromal led to the favorable microenvironment to cancer progression considering the strong stromal imbalance, and the ER? contributed to the inhibition of precancerous lesions in elderly men. The imbalance caused by ablation and/or hormone therapy not only changed the feedback between steroid hormones but also changed the reactivity localization of molecules in prostatic compartments, probably interfering in the autocrine and paracrine signaling of estrogen, prolactin and EGF, and pointing these molecules as possible triggers of the formation of reactive stroma. The present results demonstrated that hormone ablation in senile rats led to increased reactivities of the FGFs, suggesting interactions among hormones and their signaling pathways and senile prostatic microenvironment. Furthermore, it can be concluded that the ways of FGFs can be activated also androgen-independent manner, considering that the FGFs showed increased levels in the severe androgen depletion characterized by castration / Doutorado / Anatomia / Doutora em Biologia Celular e Estrutural
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Effects of Exogenous Steroids on the Adrenal Plasma Membrane Alteration of Steroidogenesis and Cell Morphology

Mattson, Mark Paul 08 1900 (has links)
Using cultured Y-1 mouse adrenal tumor cells which produce the steroid 20(-hydroxypregn-4-en-3-one (20-DHP), it was found that 10-5 M corticosterone and deoxycorticosterone increased basal and inhibited ACTH-induced 20-DHP production. The steroid effects were concentration-dependent, reversible, and specific since six other steroids did not stimulate steroidogenesis and varied in their ability to inhibit ACTH-induced steroidogenesis. Cytochalasin D inhibited steroid-stimulated 20-DHP production, suggesting a mechanism of steroid stimulation similar to that of ACTH. Steroidogenesis stimulated by cholera toxin, (Bu) 2 cAMP, or pregnenolone was not inhibited by exogenous steroid; corticosterone increased basal and inhibited ACTH-induced intracellular cAMP production. Steroids altered cell surface morphology. These findings suggest that steroids alter adrenal steroidogenesis by acting within the plasma membrane.
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Analýza mozkomíšního moku u pacientů s hydrocefalem / The analysis of cerebrospinal fluid in patients with hydrocephalus

Chlupáčová, Tereza January 2016 (has links)
Normotensive hydrocephalus (NPH) is a neurodegenerative disease that occurs mainly in patients of high age. The disorder causes accumulation of cerebrospinal fluid (CSF), which leads to enlargement of ventricles and pressure exerted on cerebral structures. Clinical manifestations (gait disorders, development of dementia, incontinence) can be easily confused with symptoms of other neurodegenerative diseases; unlike other such disorders, however, NPH can be treated by surgery, if diagnosed in time. Patients are indicated for the procedure by a lumbar drainage test. There are currently no reliable laboratory biomarkers known that could be the basis of NPH diagnostics. In the past, steroids proved to be linked to neuronal activity in neurodegenerative diseases with the help of specific diagnostic markers. An instrumental method has been developed for the purposes of this thesis and it was used to gauge the level of certain steroids in CSF in a sample group of NPH patients and a control sample group of healthy individuals. A significant difference has been found in levels of aldosterone and cortisone. Aldosterone was higher in NPH sufferers, while cortisone levels were higher in the control group. It is crucial to differentiate patients with NPH from patients with similar clinical manifestations during...
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Molecular Mechanism of Action of Steroid Hormone Receptors

Nawaz, Zafar 05 1900 (has links)
A novel bacterial expression system that is capable of producing high levels of soluble, stable, biologically active human vitamin D3 and estrogen receptors has been developed. The method utilizes ubiquitin fusion technology and a low temperature nalidixic acid induction of the lambda PL promoter. This system can produce large quantities of receptor antigen, but only a small fraction displays wild-type DNA and hormone binding properties. Therefore, the use of this system to overproduce receptors for crystallization studies is not practical. To overcome these problems, a 2 um based ubiquitin fusion system which allows regulated expression of the estrogen receptor in yeast (Saccharomyces cerevisiae) was developed. This system produces the estrogen receptor to a level of 0.2% of the total soluble protein. Moreover, this protein is undegradable, soluble, and biologically active. To test the transcriptional activity of the estrogen receptor produced in yeast, a cis-trans transcription assay was developed. This assay revealed that the transcriptional activity of the human estrogen receptor expressed in yeast was similar to that observed in transfected mammalian cells. This reconstituted estrogen transcription unit in Saccharomyces cerevisiae was utilized to examine the regulation of estrogen receptor functions by antiestrogens, to develop a random and rapid approach for identifying novel estrogen response elements, to characterize estrogen receptor variants cloned from human breast tumors, and to examine the effect of estrogen receptor on the regulation of osteocalcin gene.
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Cytosol binding of steroid hormones in sheep brains and pituitaries

Marcusen, David Carl 19 March 1977 (has links)
The uptake and binding of tritiated cortisol, corticosterone, and dexamethasone in cytosols isolated from various regions of non-adrenalectomized (intact) and adrenalectomized sheep brains and pituitaries were studied. [3H]-cortisol and [3H]-corticosterone were bound preferentially by cytosols from the hippocampal and septal regions of the brain, whereas, [3H]-dexamethasone was preferentially bound by cytosol from the pituitary. Cytosols isolated from the brains of adrenalectomized sheep bound significantly more [3H]-corticosterone than did cytosol from the brains of intact animals. Pre-incubation of cytosols from the hippocampus of adrenalectomized animals with non-radioactive testosterone or estradiol did not significantly block the subsequent binding of [3H]-cortisol. Results of pre-incubations with non-radioactive progesterone were non-reproducable with a large standard deviation among replicates. These findings provide evidence that the sites of feedback inhibition are the same in the sheep as described for other mammalian systems, and that in the sheep as in other mammals the principle site of localization of cortisol and corticosterone is in limbic structures of the brain, whereas, the principle site of uptake of dexamethasone is in the pituitary.

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