Os metais podem causar efeitos adversos de grande amplitude na função reprodutiva de animais, principalmente em organismos aquáticos. Eles podem alterar o sistema endócrino, atuando na esteroidogênese, afetando o processo reprodutivo dos peixes. Nosso objetivo foi investigar os efeitos dos metais alumínio (Al) e manganês (Mn) em pH ácido sobre a esteroidogênese de machos de Astyanax bimaculatus, sexualmente maduros, após uma exposição aguda de 96 horas e avaliar se os animais foram capazes de recuperar dos possíveis efeitos destes metais em água livre de metais. Esses animais foram expostos a uma concentração nominal de 0,5 mg.L-1 de Al e Mn (isolados ou combinados), e os grupos experimentais foram mantidos em pH ácido (5,5) para manter os metais biodisponíveis. Foi realizada uma exposição aguda de 96 horas, com amostragens em 24h e 96h, e depois também um período de 96h em água livre de metais, com amostragens em 120h e 192h, a partir do o início do experimento. Foram determinadas as concentrações plasmáticas de testosterona (T), 11-cetotestosterona (11-KT), 17β-estradiol (E2) e cortisol (C) por ELISA. Além disso, foram realizadas análises histológicas dos testículos e avaliação da concentração espermática. Os metais estudados, além do pH ácido, foram capazes de aumentar as concentrações plasmáticas dos androgénos T e 11-KT. Também foi observado um aumento transitório de E2 em 24h, mas apenas em animais expostos ao Mn e depois uma diminuição em 96h. A exposição ao pH ácido e metais, sozinhos ou combinados não provocou alterações nos níveis de C. Sendo assim, Al e Mn , assim como a acidez da água podem atuar como desregulador endócrino em machos de A. bimaculatus, principalmente por estimulação da síntese de androgénos, causando alterações no sistema fisiológico. No entanto, 96 horas não foram suficientes para que os animais se recuperassem. Os testículos encontravam-se em estágio avançado de maturação, enquanto que a concentração espermática não apresentou alterações significativas que indicassem a atuação dos metais em conjunto ao pH ácido. Táticas reprodutivas podem ter sido utilizadas pela espécie para desencadear alterações na esteroidogênese testicular, principalmente acelerando o processo de espermatogênese e espermiogênese, o que pode interferir com a dinâmica reprodutiva / Metals can cause adverse wide range effects on reproductive function of animals, mostly in aquatic organisms. They can alter the endocrine system, acting on gonadal steroidogenesis, affecting the reproductive process of fish. We aimed to investigate the effects of the metals aluminum (Al) and manganese (Mn) in acidic pH on the steroidogenesis of Astyanax bimaculatus males, sexually mature, after an acute exposure of 96 hours and evaluate if the animals were able to recover of the possible effects of these metals in the water free of metals. Mature males were exposed to a concentration of 0.5 mg.l-1 of Al and Mn (isolated or combined) and the experimental groups were maintained at acidic pH (5.5) to keep the metals bioavailable. We performed an acute exposure of 96 hours, with samplings at 24h and 96h, and then also a period of 96h in water free of metals, with samplings at 120h and 192h from the beginning of the experiment. We measured the plasma levels of testosterone (T), 11-ketotestosterone (11-KT), 17?-estradiol (E2) and cortisol (C) by elisaimmunoassay. Furthermore, histological analysis of testes and evaluation of the sperm concentration were performed. The metals studied, in addition to acidic pH, were able to alter the plasma concentration of the androgens T and 11KT. A transitory increase (24h) of E2 levels was also observed, but only in animals exposed to Mn and then a decrease in 96h occurred. Exposure to acidic pH and metals, alone or combined did not trigger changes in C plasma levels. Generally, Al and Mn as well as the acidity of water can act as endocrine disruptor in A. Bimaculatus males, mainly by stimulating the androgens synthesis, causing changes on physiological system. However, 96 hours in water free of metals were not enough for the animals to recover from the effects of the metals. The testes were in the advanced stage of maturation, while sperm concentration was not significantly changed to suggest any influence of metals together with acidic pH in altering this variable. Reproductive tactic could be used by the species to trigger changes in testicular steroidogenesis, mainly accelerating the process of spermatogenesis and spermiogenesis, what may interfere with the reproductive dynamics

As dislipidemias apresentam elevada prevalência em todo o mundo e estão fortemente associadas com a ocorrência de doenças cardiovasculares. Embora a etiologia das dislipidemias seja complexa e multifatorial, a patogênese dessas condições tem sido associada ao perfil de ingestão alimentar. Em modelos animais, a exposição a dietas hiperlipídicas/hipercalóricas é extremamente relevante para investigar o efeito do perfil dietético sobre o metabolismo e estrutura de múltiplos órgãos e tecidos. Além de interferir no metabolismo energético celular, a utilização de doses suprafisiológicas de esteroides anabolizantes tem sido frequentemente associada à elevada toxicidade, causando doenças renais, cardiovasculares e hepáticas de complexidade variável. Está bem estabelecido que o perfil de ingestão alimentar possa aumentar ou atenuar a toxicidade induzida diversas drogas, inclusive hormônios, oferecendo um fator de risco ou proteção ao organismo. Assim, o presente estudo investigou o efeito da dieta rica em gordura trans e esteroide anabolizante sobre o perfil lipídico, estrutura e função hepática em camundongos. Sessenta camundongos C57BL/6 fêmeas com 12 semanas de idade foram igualmente randomizados em 5 grupos: Grupo 1: Dieta padrão; Grupo 2: Dieta padrão + cipionato de testosterona (20 mg/kg); Grupo 3: Dieta hiperlipídica; Grupo 4: Dieta hiperlipídica + cipionato de testosterona (10 mg/kg); Grupo 5: Dieta hiperlipídica + cipionato de testosterona (20 mg/kg). Quando administrado em animais alimentados com a dieta padrão (normolipídica e normocalórica), o anabolizante não induziu alterações morfofuncionais hepáticas e metabólicas deletérias. Ao contrário, o anabolizante foi benéfico ao reduzir os níveis circulantes de LDL colesterol e das enzimas de função hepática nesses animais. Em combinação com a DHH, o anabolizante agravou a dislipidemia, reduzindo os níveis circulantes de HDL colesterol, aumentando os níveis de triglicérides e a gravidade da esteatose hepática em camundongos. Considerados em conjunto, os resultados permitiram concluir que o perfil dietético é capaz de interagir de forma complexa com os esteroides anabolizantes, modificando as características de susceptibilidade e resistência ao dano morfofuncional hepático e metabólico sistêmico em camundongos. / Dyslipidemias exhibit high prevalence worldwide and are strongly associated with the occurrence of cardiovascular diseases. Although the etiology of dyslipidemia is complex and multifactorial, the pathogenesis of these conditions has been associated to the food intake profile. In animal models, exposure to high-fat diets (HFD) constitutes robust experimental models to investigate the effect of dietary profile on metabolism, organ structure and function. Beyond interfere with cellular energy metabolism, use of supraphysiological doses of anabolic steroids has been often associated with high toxicity, causing renal, cardiovascular and liver diseases. It is well established that the food intake profile can increase or reduce the toxicity induced by several drugs, including hormones, offering a risk or protection factor to the organism. The present study investigated the effect of a HFD and anabolic steroid on body composition, lipid profile, liver function and structure in mice. Sixty C57BL/6 female, 12 weeks of age were randomized equally into 5 groups: Group 1: Standard Diet; Group 2: Standard Diet + testosterone cypionate (20 mg / kg); Group 3: HFD; Group 4: HFD + testosterone cypionate (10 mg / kg); Group 5: HFD + testosterone cypionate (20 mg / kg). When administered in animals fed a standard diet (normolipidic and normocaloric), the anabolic did not induce deleterious metabolic or morphofunctional changes in liver tissue. Conversely, anabolic was beneficial in reducing the circulating levels of LDL cholesterol and liver function enzymes in these animals. In combination with HFD, anabolic steroid worsened dyslipidemia, reducing circulating levels of HDL cholesterol, increasing triglycerides levels and the severity of hepatic steatosis in mice. Taken together, the results showed that HFD was able to interact with anabolic steroids in a complex way, modifying the characteristics of susceptibility and resistance to morphofunctional liver damage and systemic lipid metabolism dysfunction in mice.

Made available in DSpace on 2015-12-06T22:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1939 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Os metais podem causar efeitos adversos de grande amplitude na função reprodutiva de animais, principalmente em organismos aquáticos. Eles podem alterar o sistema endócrino, atuando na esteroidogênese, afetando o processo reprodutivo dos peixes. Nosso objetivo foi investigar os efeitos dos metais alumínio (Al) e manganês (Mn) em pH ácido sobre a esteroidogênese de machos de Astyanax bimaculatus, sexualmente maduros, após uma exposição aguda de 96 horas e avaliar se os animais foram capazes de recuperar dos possíveis efeitos destes metais em água livre de metais. Esses animais foram expostos a uma concentração nominal de 0,5 mg.L-1 de Al e Mn (isolados ou combinados), e os grupos experimentais foram mantidos em pH ácido (5,5) para manter os metais biodisponíveis. Foi realizada uma exposição aguda de 96 horas, com amostragens em 24h e 96h, e depois também um período de 96h em água livre de metais, com amostragens em 120h e 192h, a partir do o início do experimento. Foram determinadas as concentrações plasmáticas de testosterona (T), 11-cetotestosterona (11-KT), 17β-estradiol (E2) e cortisol (C) por ELISA. Além disso, foram realizadas análises histológicas dos testículos e avaliação da concentração espermática. Os metais estudados, além do pH ácido, foram capazes de aumentar as concentrações plasmáticas dos androgénos T e 11-KT. Também foi observado um aumento transitório de E2 em 24h, mas apenas em animais expostos ao Mn e depois uma diminuição em 96h. A exposição ao pH ácido e metais, sozinhos ou combinados não provocou alterações nos níveis de C. Sendo assim, Al e Mn , assim como a acidez da água podem atuar como desregulador endócrino em machos de A. bimaculatus, principalmente por estimulação da síntese de androgénos, causando alterações no sistema fisiológico. No entanto, 96 horas não foram suficientes para que os animais se recuperassem. Os testículos encontravam-se em estágio avançado de maturação, enquanto que a concentração espermática não apresentou alterações significativas que indicassem a atuação dos metais em conjunto ao pH ácido. Táticas reprodutivas podem ter sido utilizadas pela espécie para desencadear alterações na esteroidogênese testicular, principalmente acelerando o processo de espermatogênese e espermiogênese, o que pode interferir com a dinâmica reprodutiva / Metals can cause adverse wide range effects on reproductive function of animals, mostly in aquatic organisms. They can alter the endocrine system, acting on gonadal steroidogenesis, affecting the reproductive process of fish. We aimed to investigate the effects of the metals aluminum (Al) and manganese (Mn) in acidic pH on the steroidogenesis of Astyanax bimaculatus males, sexually mature, after an acute exposure of 96 hours and evaluate if the animals were able to recover of the possible effects of these metals in the water free of metals. Mature males were exposed to a concentration of 0.5 mg.l-1 of Al and Mn (isolated or combined) and the experimental groups were maintained at acidic pH (5.5) to keep the metals bioavailable. We performed an acute exposure of 96 hours, with samplings at 24h and 96h, and then also a period of 96h in water free of metals, with samplings at 120h and 192h from the beginning of the experiment. We measured the plasma levels of testosterone (T), 11-ketotestosterone (11-KT), 17?-estradiol (E2) and cortisol (C) by elisaimmunoassay. Furthermore, histological analysis of testes and evaluation of the sperm concentration were performed. The metals studied, in addition to acidic pH, were able to alter the plasma concentration of the androgens T and 11KT. A transitory increase (24h) of E2 levels was also observed, but only in animals exposed to Mn and then a decrease in 96h occurred. Exposure to acidic pH and metals, alone or combined did not trigger changes in C plasma levels. Generally, Al and Mn as well as the acidity of water can act as endocrine disruptor in A. Bimaculatus males, mainly by stimulating the androgens synthesis, causing changes on physiological system. However, 96 hours in water free of metals were not enough for the animals to recover from the effects of the metals. The testes were in the advanced stage of maturation, while sperm concentration was not significantly changed to suggest any influence of metals together with acidic pH in altering this variable. Reproductive tactic could be used by the species to trigger changes in testicular steroidogenesis, mainly accelerating the process of spermatogenesis and spermiogenesis, what may interfere with the reproductive dynamics

A exibição do comportamento vocal em muitas espécies de anfíbios anuros é relacionada aos níveis de hormônios esteroides gonadais e interrenais. Esses hormônios poderiam mediar a relação entre intensidade de sinais e imunidade, pois estão envolvidos no desenvolvimento das características sexuais secundárias, comportamento de corte e mobilização de reservas energéticas durante a atividade reprodutiva, enquanto apresentam também efeitos imunomoduladores. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi explorar as relações entre comportamento reprodutivo, imunidade e níveis plasmáticos de testosterona e corticosterona em machos do sapo do semiárido brasileiro, Rhinella granulosa, em atividade reprodutiva e após manipulação hormonal. A precipitação foi o principal determinante ambiental para o aumento dos níveis de testosterona e corticosterona circulantes em machos de R. granulosa, estimulando o comportamento de vocalização. As relações fisiológicas encontradas indicam que os altos níveis plasmáticos de testosterona nos primeiros dias após a chuva devem promover o início do turno vocal, porém a corticosterona deve modular o esforço de vocalização. De forma geral, a exacerbação do comportamento vocal de R. granulosa tem efeitos negativos sobre a imunocompetência, porém alguns indivíduos que apresentam maiores concentrações plasmáticas de corticosterona apresentam concomitantemente alto esforço vocal e alta imunidade. De acordo, a aplicação transdérmica de corticosterona promoveu elevação aguda dos níveis plasmáticos deste glicocorticoide, bem como um aumento da função imune. Assim, apesar de a atenção principal ser comumente colocada no papel da testosterona na mediação de sinais honestos, nossos resultados corroboram a importância da corticosterona na mediação da expressão do comportamento de corte e imunocompetência em machos R. granulosa / In most anuran species, vocal behavior is usually related to plasmatic levels of gonadal and interrenal steroid hormones. These hormones could mediate the relationship between signal intensity and immunocompetence, since they are involved in the development of sexual traits, courtship behavior and energetic mobilization during reproductive activity and also exert immunomodulatory effects. The aim of this study was to explore relations among vocal behavior, immunity and plasmatic levels of testosterone and corticosterone in males of a toad species from Brazilian semi-arid, Rhinella granulosa, during reproductive activity and after hormonal manipulation. Precipitation was the main environmental determinant to increase circulating levels of testosterone and corticosterone in R. granulosa males, stimulating vocal behavior. Physiological relations indicate that high circulating testosterone levels in the days right after rain may promote the initiation of vocal behavior, while corticosterone may modulate vocal effort. In general, exacerbation of vocal behavior in R. granulosa has negative effects on immunocompetence, however, some individuals with higher plasmatic levels of corticosterone can present both high vocal effort and good immunocompetence. Corroborating this interpretation, acute increase in glucocorticoid plasmatic levels after hormonal manipulation was accompanied by raised immune function. Despite the emphasis on androgens influence on sexual selected male traits, our results corroborate greater influence of corticosterone in the mediation of expression of courtship behavior and immunocompetence in R. granulosa

A síntese dos hormônios esteroides é feita através da ação de um complexo enzimático chamado citocromo P450. As enzimas 3β-HSD (3β-hidroxiesteroide desidrogenase), P450c17 (citocromo P450 17α-hidroxilase/17,20-liase) e P450arom (citocromo P450 aromatase), fazem parte desse complexo e são responsáveis pela síntese dos hormônios progestágenos, andrógenos e estrógenos, espectivamente. Essas enzimas já foram identificadas em inúmeros tecidos, inclusive em embriões em período pré-implantação. Por isso, acredita-se que o blastocisto seja uma fonte de produção de progesterona e estrógeno, hormônios essenciais para implantação e manutenção da gestação. Em roedores, as informações sobre a capacidade esteroidogênica dos embriões são controversas e também restritas apenas a estudos com espécies laboratoriais. Para trazer mais informações sobre a capacidade esteroidogênica em blastocistos de roedores utilizamos o preá (Galea spixii), uma espécie de roedor silvestre encontrada nas regiões de Caatinga e Semiárido do Nordeste brasileiro e muito utilizado na alimentação de famílias de baixa renda como fonte proteica. Diante o exposto, o objetivo deste trabalho é fazer um apanhado histórico sobre os dados publicados a cerca da capacidade dos embriões de diversas espécies de produzir os hormônios esteroides além de identificar e quantificar a expressão das enzimas esteroidogênicas em embriões de preá através das técnicas de imunohistoquímica e PCR em tempo real. As análises morfológicas indicam que o desenvolvimento inicial do preá se assemelha com os demais roedores, porém o tempo de desenvolvimento difere das espécies usadas em laboratório. As marcações da imunohistoquímica foram positivas nos tecidos maternos, mas os embriões não tiveram marcação para nenhuma das três enzimas do estudo. No entanto, os dados obtidos pelo PCR indicam que os genes CYP11, CYP17 e CYP19 foram expressos nos embriões e, portanto, o concepto de G. spixii tem capacidade de produzir hormônios esteroides, assim como visto em várias outras espécies que já foram estudadas / The synthesis of steroid hormones is made through the action of an enzyme complex called cytochrome P450. 3β-HSD (3β-hydroxysteroid dehydrogenase), P450c17 (cytochrome P450 17 α-hydroxylase/17,20-lyase) and P450arom (cytochrome P450 aromatase), are present in this complex and are are responsible for the synthesis of progestins, androgens and estrogens hormones, respectively. These enzymes have been identified in numerous tissues, including embryos in pre-implantation period. Therefore, it is believed that the blastocyst is a source of production of progesterone and estrogen, hormones essential for the implementation and maintenance of pregnancy. In rodents, the information about the steroidogenic capacity of embryos are controversial and confined to studies with laboratory species. To get more information about the steroidogenic capacity in blastocysts of rodents we used the spix yellow-toothed cavy (Galea spixii), a species of wild rodent found in the northeastern of Brazil, and used in the feeding of low-income families as a source of protein. On the above, the aim of this work is to make a historic about the data published about the ability of embryos of various species to produce steroid hormones and identify and quantify the expression of steroidogenics enzymes in embryos of spix yellow-toothed cavy by immunohistochemical and real-time PCR techniques. The morphological analyses indicate that the G. spixii early development resembles other rodents, but development time differs from the species used in laboratory. The immunohistochemical stainning was positive in maternal tissues, but the embryos did not have stainnig for any of the three enzymes of the study. However, the data obtained by PCR indicate that CYP11, CYP17 and CYP19 genes were expressed in embryos and, therefore, the concept of G. spixii has capacity to produce steroid hormones, as seen in several other species that have been studied

Orientador: Sergio Ricardo Batlouni / Resumo: Nosso objetivo foi avaliar o efeito das diferentes densidades de estocagem e proporções sexuais sobre o desempenho reprodutivo da espécie Astyanax altiparanae em sistema semi-natural. Foram realizados dois experimentos distintos, para o primeiro objetivo testamos quatro densidades de estocagem (3; 6; 12; 24 indivíduos) com quatro réplicas, mantendo sempre a proporção sexual de dois machos para uma fêmea. Quando o efeito da proporção sexual foi avaliado, utilizamos cinco proporções diferentes (1:1; 2:1; 3:1; 1;2; 1:3; macho: fêmea) e dois controles com três repetições, respeitando a densidade de 12 indivíduos em cada unidade experimental. Em ambos os experimentos os tratamentos foram comparados pelo desempenho reprodutivo por meio de variáveis como: a sobrevivência dos reprodutores, a proporção de réplicas com desovas, o volume de desova, percentual médio de fêmeas desovadas por réplica, taxas de fertilidade e eclosão, número de embriões obtidos por tratamento, histologia dos ovários e concentrações plasmáticas dos esteroides sexuais. A densidade não influenciou de forma negativa no desempenho reprodutivo da espécie, sendo observados os melhores desempenhos para as variáveis: volume médio de desova considerando apenas as réplicas onde houve desova 131,50±33,17ml e no número médio de embriões viáveis 73819,2±20462,1, nas unidades com maior densidade (24) animais. Notamos desempenhos muito semelhantes quando as diferentes proporções foram testadas, sendo a variável volume relati... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Our objective was to evaluate the effect of different storage densities and sexual proportions on the reproductive performance of the species Astyanax altiparanae in a semi-natural system. Two different experiments were carried out. For the first objective, we tested four stocking densities (3; 6; 12; 24 individuals) with four replicates, always maintaining the sex ratio of two males to one female. When the sex ratio effect was evaluated, we used five different ratios (1: 1, 2: 1, 3: 1, 1, 2, 1: 3, male: female) and two controls with three replicates, respecting the density of 12 individuals in each experimental unit. In both experiments the treatments were compared by reproductive performance using variables such as: reproductive survival, proportion of replicates with spawning, spawning volume, mean percentage of spawned females per replicate, fertility and hatching rates, number treatment embryos, ovarian histology, and plasma steroid plasma concentrations. The density did not negatively influence the reproductive performance of the species, with the best performances for the variables: average spawning volume considering only spawning replicates of 131.50 ± 33.17 ml and the average number of viable embryos 73819.2 ± 20462.1, in the units with higher density (24) animals. We observed very similar performances when the different proportions were tested, being the relative variable spawning volume in which the proportion of (3 males: 1 female) was more efficient than the oth... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A exibição do comportamento vocal em muitas espécies de anfíbios anuros é relacionada aos níveis de hormônios esteroides gonadais e interrenais. Esses hormônios poderiam mediar a relação entre intensidade de sinais e imunidade, pois estão envolvidos no desenvolvimento das características sexuais secundárias, comportamento de corte e mobilização de reservas energéticas durante a atividade reprodutiva, enquanto apresentam também efeitos imunomoduladores. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi explorar as relações entre comportamento reprodutivo, imunidade e níveis plasmáticos de testosterona e corticosterona em machos do sapo do semiárido brasileiro, Rhinella granulosa, em atividade reprodutiva e após manipulação hormonal. A precipitação foi o principal determinante ambiental para o aumento dos níveis de testosterona e corticosterona circulantes em machos de R. granulosa, estimulando o comportamento de vocalização. As relações fisiológicas encontradas indicam que os altos níveis plasmáticos de testosterona nos primeiros dias após a chuva devem promover o início do turno vocal, porém a corticosterona deve modular o esforço de vocalização. De forma geral, a exacerbação do comportamento vocal de R. granulosa tem efeitos negativos sobre a imunocompetência, porém alguns indivíduos que apresentam maiores concentrações plasmáticas de corticosterona apresentam concomitantemente alto esforço vocal e alta imunidade. De acordo, a aplicação transdérmica de corticosterona promoveu elevação aguda dos níveis plasmáticos deste glicocorticoide, bem como um aumento da função imune. Assim, apesar de a atenção principal ser comumente colocada no papel da testosterona na mediação de sinais honestos, nossos resultados corroboram a importância da corticosterona na mediação da expressão do comportamento de corte e imunocompetência em machos R. granulosa / In most anuran species, vocal behavior is usually related to plasmatic levels of gonadal and interrenal steroid hormones. These hormones could mediate the relationship between signal intensity and immunocompetence, since they are involved in the development of sexual traits, courtship behavior and energetic mobilization during reproductive activity and also exert immunomodulatory effects. The aim of this study was to explore relations among vocal behavior, immunity and plasmatic levels of testosterone and corticosterone in males of a toad species from Brazilian semi-arid, Rhinella granulosa, during reproductive activity and after hormonal manipulation. Precipitation was the main environmental determinant to increase circulating levels of testosterone and corticosterone in R. granulosa males, stimulating vocal behavior. Physiological relations indicate that high circulating testosterone levels in the days right after rain may promote the initiation of vocal behavior, while corticosterone may modulate vocal effort. In general, exacerbation of vocal behavior in R. granulosa has negative effects on immunocompetence, however, some individuals with higher plasmatic levels of corticosterone can present both high vocal effort and good immunocompetence. Corroborating this interpretation, acute increase in glucocorticoid plasmatic levels after hormonal manipulation was accompanied by raised immune function. Despite the emphasis on androgens influence on sexual selected male traits, our results corroborate greater influence of corticosterone in the mediation of expression of courtship behavior and immunocompetence in R. granulosa

A síntese dos hormônios esteroides é feita através da ação de um complexo enzimático chamado citocromo P450. As enzimas 3β-HSD (3β-hidroxiesteroide desidrogenase), P450c17 (citocromo P450 17α-hidroxilase/17,20-liase) e P450arom (citocromo P450 aromatase), fazem parte desse complexo e são responsáveis pela síntese dos hormônios progestágenos, andrógenos e estrógenos, espectivamente. Essas enzimas já foram identificadas em inúmeros tecidos, inclusive em embriões em período pré-implantação. Por isso, acredita-se que o blastocisto seja uma fonte de produção de progesterona e estrógeno, hormônios essenciais para implantação e manutenção da gestação. Em roedores, as informações sobre a capacidade esteroidogênica dos embriões são controversas e também restritas apenas a estudos com espécies laboratoriais. Para trazer mais informações sobre a capacidade esteroidogênica em blastocistos de roedores utilizamos o preá (Galea spixii), uma espécie de roedor silvestre encontrada nas regiões de Caatinga e Semiárido do Nordeste brasileiro e muito utilizado na alimentação de famílias de baixa renda como fonte proteica. Diante o exposto, o objetivo deste trabalho é fazer um apanhado histórico sobre os dados publicados a cerca da capacidade dos embriões de diversas espécies de produzir os hormônios esteroides além de identificar e quantificar a expressão das enzimas esteroidogênicas em embriões de preá através das técnicas de imunohistoquímica e PCR em tempo real. As análises morfológicas indicam que o desenvolvimento inicial do preá se assemelha com os demais roedores, porém o tempo de desenvolvimento difere das espécies usadas em laboratório. As marcações da imunohistoquímica foram positivas nos tecidos maternos, mas os embriões não tiveram marcação para nenhuma das três enzimas do estudo. No entanto, os dados obtidos pelo PCR indicam que os genes CYP11, CYP17 e CYP19 foram expressos nos embriões e, portanto, o concepto de G. spixii tem capacidade de produzir hormônios esteroides, assim como visto em várias outras espécies que já foram estudadas / The synthesis of steroid hormones is made through the action of an enzyme complex called cytochrome P450. 3β-HSD (3β-hydroxysteroid dehydrogenase), P450c17 (cytochrome P450 17 α-hydroxylase/17,20-lyase) and P450arom (cytochrome P450 aromatase), are present in this complex and are are responsible for the synthesis of progestins, androgens and estrogens hormones, respectively. These enzymes have been identified in numerous tissues, including embryos in pre-implantation period. Therefore, it is believed that the blastocyst is a source of production of progesterone and estrogen, hormones essential for the implementation and maintenance of pregnancy. In rodents, the information about the steroidogenic capacity of embryos are controversial and confined to studies with laboratory species. To get more information about the steroidogenic capacity in blastocysts of rodents we used the spix yellow-toothed cavy (Galea spixii), a species of wild rodent found in the northeastern of Brazil, and used in the feeding of low-income families as a source of protein. On the above, the aim of this work is to make a historic about the data published about the ability of embryos of various species to produce steroid hormones and identify and quantify the expression of steroidogenics enzymes in embryos of spix yellow-toothed cavy by immunohistochemical and real-time PCR techniques. The morphological analyses indicate that the G. spixii early development resembles other rodents, but development time differs from the species used in laboratory. The immunohistochemical stainning was positive in maternal tissues, but the embryos did not have stainnig for any of the three enzymes of the study. However, the data obtained by PCR indicate that CYP11, CYP17 and CYP19 genes were expressed in embryos and, therefore, the concept of G. spixii has capacity to produce steroid hormones, as seen in several other species that have been studied

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-01-22T14:30:44Z No. of bitstreams: 1 hudsoncaetanopolonini.pdf: 5158429 bytes, checksum: e80426644833041649bdb5efa0029dcc (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-01-25T18:54:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 hudsoncaetanopolonini.pdf: 5158429 bytes, checksum: e80426644833041649bdb5efa0029dcc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-25T18:54:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 hudsoncaetanopolonini.pdf: 5158429 bytes, checksum: e80426644833041649bdb5efa0029dcc (MD5) Previous issue date: 2014-04-16 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / No capítulo primeiro, objetivou-se avaliar o desempenho de permeação do veículo transdérmico magistral Pentravan para sistemas de distribuição transdérmica contendo Progesterona (P), Estradiol (E2) e Estriol (E3), isoladamente ou em associação de E2 + E3 (Biest). Um modelo experimental de pele humana feminina excisada foi utilizado para prever a permeação e a retenção das substâncias ativas em todas as camadas da pele. Além disso, o processo de fabricação para as formulações foi avaliado quanto à uniformidade de conteúdo das emulsões. Os métodos analíticos eco-friendly desenvolvidos para quantificação de hormônios sexuais femininos em emulsões transdérmicas foram adequados aos objetivos, o que foi comprovado através da validação dos mesmos. A avaliação do processo de manipulação das emulsões revelou que as embalagens à vácuo atualmente utilizadas por farmácias magistrais foram adequadas ao uso, e a utilização de moinho de rolos desempenhou papel fundamental na uniformidade de conteúdo de Eemuls e Biest. As taxas de liberação in vitro dos fármacos a partir de suas formulações foram adequadamente altas, e todas as formulações seguiram cinética de pseudo-primeira ordem, típica de produtos semissólidos. O estudo de permeação ex vivo demonstrou que todos as formulações foram capazes de promover a absorção transdérmica dos hormônios em quantidades comparáveis às praticadas atualmente por produtos industrializados. No capítulo segundo, duas partículas de titanato de bário (BT), da ordem micrométrica e manométrica, foram avaliadas quanto ao seu impacto em ambientes aquáticos. Uma caracterização dos materiais foi realizada. A seguir, utilizou-se duas algas (Chlorella vulgaris e Euglena gracilis) e uma cianobactéria (Anabaena flos-aquae) como organismos-modelo para avaliação da toxicidade. Tanto BT MP (micropartícula) quanto BT NP (nanopartícula) se mostraram carregadas negativamente, facilmente agregáveis, com uma taxa de liberação de íons Ba2+ para os meios de cultura que não ultrapassa 1,5%. BT mostrou um efeito tóxico estatisticamente significativo (p<0,05) no crescimento e na viabilidade celular de C. vulgaris desde 1 ppm, o que parece ser mediado por um estresse oxidativo induzido pelas próprias partículas ou pelos íons Ba2+ liberados no meio de cultura. BT tem um efeito tóxico muito baixo no crescimento de A. flos-aquae, porém ambas partículas afetam a viabilidade celular desde a menor concentração testada, o que ocorre por efeito indireto das mesmas no estresse oxidativo das células. BT apresentou um efeito tóxico estatisticamente significativo (p<0,05) no crescimento e na viabilidade celular de E. gracilis desde 1 ppm, efeito relacionado à endocitose das partículas numa quantidade tal que levou a uma ruptura de suas membranas. BT induziu estresse em todos os organismos-teste, o que foi evidenciado pelo aumento na atividade da superóxido dismutase, pela diminuição da eficiência fotossintética e pela dimuição dos níveis intracelulares de ATP. O comportamento de BT em meios de cultura sintéticos e naturais são diferentes, sendo os efeitos tóxicos mais pronunciados quando o crescimento é dado em água do Rio Sena. O tamanho de BT parece não influenciar os efeitos produzidos sobre o crescimento dos micro-organismos – embora a inibição do crescimento tenha sido pronunciada com o nanomaterial. / In Chapter 1, we aimed to evaluate the performance of the transdermal permeation of Pentravan vehicle for transdermal delivery of coumpounded systems containing progesterone (P), estradiol (E2) and estriol (E3), alone or as a combination of E2 + E3 (Biest). An experimental model of female excised human skin was used to predict the permeation and the retention of the active substances in all skin layers. Moreover, the manufacturing process for formulations were evaluated for content uniformity of the emulsions. The eco-friendly methods developed for quantification of female sex hormones in transdermal emulsions were appropriate, which has been proven through validation studies. The evaluation of the coumpounding process for the emulsions showed that the vacuum packaging currently used by pharmacies are suitable for use, and the use of roll mill played a key role in the uniformity of content for Eemuls and Biest. The in vitro release rates of the drugs from their formulations were adequately high, and all formulations followed pseudo-first order kinetics, typical of semisolid product. The ex vivo permeation study showed that all the formulations were able to promote transdermal absorption of hormones comparable to those currently practiced by industrialized products. In chapter 2, two particles of barium titanate (BT), micro- and nanosized, were evaluated for their impact on aquatic environments. A detailed characterization of the materials was carried out. We used two algae (Chlorella vulgaris and Euglena gracilis) and a cyanobacterium (Anabaena flos-aquae) as model-organisms for assessing toxicity. Both BT MP (microparticle) and BT NP (nanoparticle) were negative, easily aggregated, with a release rate of Ba2+ ions to media that did not exceed 1.5%. BT has a statistically significant toxic effect on cell growth and viability of C. vulgaris, from 1 ppm, which appears to be mediated by oxidative stress induced by the particles themselves or by Ba2+ ions released into the culture medium. BT has a very low toxic effect on the growth of A. flos-aquae, but both particles affect cell viability since the lowest concentration tested, which occurs by indirect effect on the cells. BT has a statistically significant toxic effect on cell growth and viability of E. gracilis, from 1 ppm, related to the effect of endocytosed particles in such an amount that a rupture of their membranes was caused. BT was able to stress all test-organisms, which was evidenced by the increase in superoxide dismutase activity, decreased photosynthetic efficiency and the decreased intracellular ATP levels. The behavior of BT in means of synthetic and natural culture was different, and the most pronounced toxic effects occurred when growth was given in water from the River Seine. The size of BT did not influence the effects on the growth of microorganisms - although growth inhibition has been more pronounced with the nanomaterial.