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Histoquímica com lectinas empregando criptatos de lantanídeos conjugados à Con A como marcador luminescente de tecidos de próstata humana

Kelly Guimarães Medeiros, Janielle January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4551_1.pdf: 792198 bytes, checksum: 66dc0ae441af627e69db8dd1d8cfdc94 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Criptatos de lantanídeos são amplamente usados como marcadores luminescentes e lectinas têm sido utilizadas para investigar e caracterizar resíduos de carboidratos em glicoconjugados. Neste trabalho Con A foi conjugada ao criptato de Európio (crip(Eu)) para ser usado como marcador em histoquímica para a identificação de resíduos de glicose/manose em tecido prostático humano transformado (hiperplasia prostática benigna e carcinoma prostático). Os resultados indicaram que a Con A-crip(Eu) apresentou o mesmo padrão de marcação da Con A-FITC para o estroma e células epiteliais de glândulas prostáticas observadas por microscopia confocal de fluorescência. Os tecidos foram previamente incubados com solução de Azul de Evans para supressão da fluorescência intrínseca do tecido depois da incubação com a lectina advinda, confirmando que a fluorescência deve-se ao crip(Eu) ou FITC. A manutenção das propriedades luminescentes e o padrão de marcação da Con A-crip (Eu) quando comparada aos da Con A-FITC, indicaram que o crip(Eu) pode ser utilizado como um marcador histoquímico eficiente para tecido prostático
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Efeitos da inclusão de rutenio vermelho em 3 soluções de preservação celular sobre a viabilidade de ilhotas pancreaticas murinas recem-isoladas e preservadas a frio por 24 e 48 horas

Delfino, Vinicius Daher Alvares 20 December 2000 (has links)
Orientador: Jose Francisco Figueiredo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T09:16:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Delfino_ViniciusDaherAlvares_D.pdf: 15188514 bytes, checksum: c1ca0e326bf6f230fc65ce041c2d0f10 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Existe a necessidade de se aumentar o número de ilhotas isoladas a partir de um único pâncreas e de se preservar ao máximo a viabilidade destas para permitir que alotransplantes pancreáticos hwnanos possam ser feitos na base de 1 doador: 1 receptor. Nós estudamos se a adição de rutênio vermelho (RV), um metal de transição complexo relatado como capaz de reduzir o dano pós reperfusão, para algumas soluções de preservação poderia melhorar o número de ilhotas isoladas por pâncreas e/ou a viabilidade de ilhotas pancreáticas murinas após preservação a frio. RV, 5 Ilmol/L, foi adicionado a solução balanceada de sais de Hanks (HBSS), solução da Universidade de WlSCOnsin (UW), e solução de Euro-Collins (EC) para dar origem a HBSS-RV, UW-RV, e EC-RV, respectivamente. A viabilidade das ilhotas foi avaliada após 24 e 48 horas de preservação a frio por coloração supravital e por azul tripano e pela redução de tetrazolina a formazan. Não se observou aumento no número de ilhotas obtidas por pâncreas pela adição de RV à HBSS utilizada para o isolamento. Preservação em HBSS/HBSS-RV diminuiu significativamente a viabilidade pós preservação das ilhotas do rato. Para 24 horas de preservação, EC/EC-RV conseguiram manter a viabilidade das ilhotas comparável à das ilhotas controles e preservadas em UW/UW-RV. Ilhotas preservadas por 48 horas em UWIUW-RV e EC-RV apresentaram viabilidade semelhante à das ilhotas controles. A viabilidade de ilhotas pancreáticas após 48 horas foi melhorada pela administração de RV para os ratos doadores de ilhotas e sua inclusão em EC, embora abordagem clínica semelhante pareça improvável devido a pobre penetração celular e toxicidade sistêmica do RV. Preservação em HBSS foi muito deletéria para ilhotas de rato. EC pode vir a ser um alternativa a HBSS para isolamento e preservação a mo de ilhotas pancreáticas humanas se os resultados destes estudos puderem ser repetidos em experimentos in vivo em roedores e animais de experimentação de maior porte. Modelos de diabetes mellitus químico e de transplante intraportal isogênico de ilhotas pancreáticas em ratos foram implementados localmente para o prosseguimento destes estudos / Abstract: There is a need to increase islets yields and to preserve to the maxnnum islet viability to allow human islet transplants to be done in aI: 1 donor: recipient basis. We studied if inc1usion of ruthenium red (RR), a transitional metal complex reported to decrease reperfusion injury, to some preservation solutions could improve rat pancreatic islet yields and/or islet viability afier cold storage. RR, 5 J.1moVL, was added to Hanks' based salt solution (HBSS), University of Wisconsin (UW), and Euro-Collins (EC) solutions to generate HBSS-RR, UW-RR and EC-RR. Islet viability afier 24 to 48-hr cold¬ storage was tested with supravital and trypan blue staining, and reduction of tetrazolium to formazan. Islet yields were not increased by inc1usion of RR to HBSS used for islet isolation. Preservation in HBSS/HBSS-RR significantly decrease islet viability. For 24-hr, EC/EC-RR kept islet viability similar to control and cold-stored islets in UWIUW-RR. Similarly to UWIUW-RR, EC-RR maintained islet viability comparable to control islets even afier 48-hr cold storage. Rat islet viability afier 48-hr preservation was improved by administration of RR to islét donors and its addition to EC, although similar clinical approach seems impropable mainly due to poor cell penetration and systemic toxicity of RR. Preservation in HBSS was very noxious to rat islets. EC could be an alternative to HBSS for islet isolation and short-term cold storage ofhuman pancreatic islets ifthe results of the~e studies could be repeated in in vivo experiments with rodents and larger experimentation animals. Models of rat chemical diabetes mellitus and intraportal transplantation of pancreatic islets were deveIoped locally to allow prosecution of these studies / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica
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Diferentes tipos de reconstrução da veia cava supra-hepatica no transplante ortotopico de figado pela tecnica de piggyback

Zanotelli, Maria Lucia 11 August 2000 (has links)
Orientador : Luiz Sergio Leonardi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T04:00:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zanotelli_MariaLucia_D.pdf: 26872542 bytes, checksum: 6975c4712bd44542658a9f202285198a (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Introdução: A preservação da veia cava retro-hepática durante a hepatectomia do receptor no transplante hepático é uma modificação da técnica clássica, tendo sido empregada pela primeira vez por Sir Roy Calne em 1968. Porém veio a ser difundida posteriormente, em 1989, por Andreas Tzakis com o nome de piggyback. As vantagens desse procedimento são inúmeras. Entretanto parece haver uma potencialidade para causar obstrução da drenagem venosa hepática, sendo discutida na literatura a melhor forma de reconstrução da veia cava supra-hepática quando essa técnica é adotada. Objetivos: Comparar três diferentes tipos de anastomose da veia cava suprahepática no transplante hepático pela técnica depiggyback. Métodos: Foram estudados prospectivamente, de forma randomizada, 29 pacientes adultos portadores de hepatopatia crônica e submetidos ao transplante hepático no período de agosto/98 a outubro/99. Os receptores foram distribuídos em três grupos de acordo com o tipo de anastomose da veia cava supra-hepática realizada: 1 - término-terminal com o óstio comum entre as veias hepáticas direita, média e esquerda - 10 pacientes; 2 - término-terminal com o óstio comum entre as veias hepáticas média e esquerda - 9 pacientes; 3 - cava-cava látero-lateral - 10 pacientes. Os cuidados perioperatórios foram realizados de maneira semelhante entre os grupos. Foram estudados o tempo de cirurgia e isquemia total do enxerto, consumo de hemoderivados, comportamento hemodinâmico intra-operatório em quatro fases distintas - durante a hepatectomia, na fase anepática, após a reperfusão e no final do procedimento e pós-operatório até 48 horas, evolução laboratorial nos dois primeiros dias após o transplante, assim como complicações venosas relacionadas à formação de ascite. Resultados: A técnica de piggyback pôde ser empregada em todos os casos. As reconstruções da veia cava supra-hepática foram de acordo com as propostas pelo estudo, com exceção de um paciente sorteado para a anastomose com as três veias e que foi excluído por ser inviável a realização da mesma sem o clampeamento total da veia cava inferior, devido à localização anatômica da veia hepática direita. Os três grupos foram homogêneos em relação às características demográficas e clínicas, embora tenha ocorrido um predomínio de mulheres na anastomose com as veias hepáticas média e esquerda. Os tempos cirúrgico e de isquemia total do enxerto foram maiores nos pacientes com anastomose com as três veias, mas sem relevância clínica. O consumo de sangue e derivados foi similar. Independentemente da técnica adotada, os distúrbios hemodinâmicos foram toleráveis, entretanto os pacientes submetidos à anastomose com as três veias apresentaram pressão arterial média diminuída na fase anepática. Após a reperfusão, a pressão venosa central foi menor no grupo cava-cava, permanecendo em níveis mais baixos até o término do transplante. A pressão da artéria pulmonar mostrou-se elevada na fase final do procedimento nos pacientes que fizeram anastomose com as três veias. No pósoperatório, ascite volumosa foi mais freqüente nos receptores com anastomose cava-cava e com as três veias. Um paciente do grupo cava-cava necessitou tratamento cirúrgico para resolução da ascite. Conclusão: Os três tipos de reconstrução da veia cava supra-hepática tiveram resultados semelhantes, embora não tenha sido possível incluir a veia hepática direita na anastomose em um caso. Apesar do clampeamentoparcial da veia cava inferior, a manutenção hemodinâmica foi adequada entre os grupos, no entanto os pacientes com anastomose com as veias hepáticas média e esquerda que permaneceram com a veia cava inferior livre apresentaram menos distúrbios hemodinâmicos. Ascite volumosa foi mais freqüente nas anastomoses cava-cava e com as três veias, apesar do diâmetro maior / Abstract: Introduction: The retrohepatic vena cava preservation during the recipient hepatectomy on liver transplantation is a variant of the classical technique. It was reported at the first time by Sir Roy Calne in 1968 but was popularized by Andreas Tzakis in 1989 with the name of piggyback. There are many advantages to use this technique. However the best way to reconstruct the recipient suprahepatic vein is still discussed due the potentiality of the procedure cause obstruction to the hepatic outflow. Purpose: Comparison of three different types of vena cava reconstruction in piggyback technique Methods: Twenty nine adults patients with chronic liver disease were prospectively studied and randomized at the moment of the surgery in 3 groups according to different types ofvena cava reconstruction during the period of august/98 to october/99: 1 - donor suprahepatic vena cava end-to-end to the recipient right, middle and left suprahepaticvein cuff - 10patients; 2 - donor suprahepatic vena cava end-to-end to the recipient middle and left suprahepatic vein cuff - 9 patients; 3 - donor retrohepatic vena cava side-to-side to the recipient inferior vena cava - 10patients. All patients had the same care during the perioperative course. The groups were compared in relation to the surgical and total graft ischemic time, blood component requirements, hemodynamic alterations, laboratories files and venous complications with ascites presentation. Results: Piggyback technique could be used in alI cases. Except in one patient of group 1 the vena cava reconstruction was possible according to previous selection. The recipients were similar in relation of demography and clinical characteristics excluding the majority of women in group 2. Surgical and total graft ischemic time was higher in the patients with three veins anastomosis but without clinical significance. The blood components requirements were homogeneous between the groups. The hemodynamic alterations were tolerable but the recipients with three veins anastomosis had median arterial pressure decreased at anhepatic phase. The central venous pressure was lower in the ( cavacaval reconstruction at the time of reperfusion and kept this until the end of the transplant. The pulmonary arterial pressure was higher at the end of the surgery in the group 2. Voluminous postoperative ascites was more frequently in the three veins and cavacaval reconstruction. One patient of Group 3 had to be operated to treat ascites. Conclusions: The three types of vena cava reconstruction had similar results. One patient randomized to three veins anastomosis was exc1udedbecause the right hepatic vein couldn't be use due anatomicallimits. The hemodynamic alterations were acceptable in all recipients despite partial inferior vena cava occ1usion during the anhepatic phase. However the patients ofmiddle and left hepatic vein group had more stability. Voluminous ascites was more often in the cavacaval and three veins anastomosis despite of the bigger size of them / Doutorado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia
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Influencia da temperatura de incubação sobre a morfologia e o crescimento do tecido muscular no Pacu (Piaractus mesopotamicus)

Assis, Jeane Marlene Fogaça de 21 November 2002 (has links)
Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:41:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Assis_JeaneMarleneFogacade_M.pdf: 9096464 bytes, checksum: 99d6a7e0ddd4990547e4d85fc2ec401d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Esse trabalho teve como objetivo avaliar a influência da variação da temperatura de incubação dos ovos sobre a morfologia e o crescimento do tecido muscular no pacu (Píaractus mesopotamícus) durante as fases iniciais do desenvolvimento. Os ovos do pacu foram incubados em três temperaturas: 25°C, 27°C e 29°C. Após cinco dias da eclosão as larvas foram transferidas para caixas individuais de cimento amianto (500L) abasteci das com água corrente em temperatura ambiente (25°C a 28°C). Na eclosão e com 5,25 e 60 dias exemplares de pacu foram sacrificados e amostras de músculo estriado esquelético foram congeladas em nitrogênio líquido, outras foram fixadas em paraformaldeído a 4% ou em glutaraldeído a 2,5% para análise morfológica, histoquímica, imunohistoquímica e morfométrica. Na eclosão observou-se uma monocamada de células colunares superficiais adjacente ao tegumento, envolvendo várias camadas de células com aspecto arredondado. A partir de 5 dias foram observadas duas populações distintas de fibras musculares distribuídas em compartimentos. O vermelho, localizado na região superficial, com fibras de metabolismo oxidativo e contração lenta e o branco, constituindo a maior parte da musculatura, formado por fibras com metabolismo glicolítico e contração rápida. Um compartimento intermediário foi evidenciado 25 dias após a eclosão juntamente com as zonas de proliferação celular no ápice da região dorsal. No decorrer do experimento observou-se um espessamento da massa muscular. Esse foi decorrente do aparecimento de novas fibras na zona de proliferação celular e entre as fibras das musculaturas vermelha, intermediária e branca. Fato melhor observado a partir de 25 dias da eclosão, sendo mais acentuado na temperatura de incubação de 29<'C. O aumento do diâmetro das fibras demonstrou o processo de hipertrofia desde a eclosão até 60 dias, sendo predominante no período entre 5 e 25 dias. O número de núcleos em proliferação aumentou no decorrer do experimento, sendo maior na temperatura de 2_C aos 60 dias. Os resultados mostram que nas temperaturas de incubação de 25°C, 2'?C e 29°C, a hipertrofia foi o mecanismo de crescimento predominante na fase inicial (até 25 dias) e a partir desse período a hiperplasia ocorre de forma mais intensa. A interação dos processos hipertrófico e hiperplásico das fibras musculares dos peixes que eclodiram na temperatura de 29°C resultou no maior tamanho desses ao final do experimento / Abstract: development on morphology and musc1e growth characteristics in pacu (f'íaractus mesopotamícus). Pacu eggs were incubated at 25°C, 27°C, and 29°C until hatching. After day five the fish from each temperature were transferred to 500L tanks. Tank water temperature varied between 25°C to 28°C for ali treatments. At hatching and after 5, 25 and 60 days, musc1e samples were collected, some were frozen in liquid nitrogen and others fixed in 4% paraformaldehyde or 2.5% glutaraldehyde. These samples were used for morphological, histochemical, immunohistochemical and morphometric analysis. At hatching, we observed a superficial monolayer of small and column cells, lying just beneath the skin surrounding several round cells. From 5 days, we observed two distinct populations of musc1e fibers distributed in two layers or compartments: red, in a superficial region presenting fibers with oxidative metabolism and slow contraction and white with fibers presenting glycolytic metabolism and fast contraction. Twenty five days after hatching, intermediate compartments and cell proliferating zones could be seen in the dorsal apex region.. Throughout the experimental period, there was an increase in muscle mass due to the arising of new fibers in the cell proliferating zones and between the more differentiated fibers in red, intermediate, and white musc1es. It was more obvious from 25 days after hatching, and it was better observed to 29°C than at 25°C and 2T'C. From hatching to 60 days, fiber diameter increase was correlated to hypertrophy and it was more evident from 5 to 25 days. The number of proliferating nuc1ei (pCNA-labeling) increased from hatching to 60 days, what was better observed at 2goC in 60 days. Ours results show that at incubation temperatures of 25°C, 2T'C and 29°C, hypertrophy was predominant1y from hatching to 25 days, after this musc1e growth by hyperplastic mechanism increased. The interaction of the hypertrophic and hyperplastic process of the musc1e fiber of the fish hatched at 29°C resulted in the largest size themself at the end of the experiment / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Celula progenitora de sangue de cordão umbilical humano : viabilidade para reconstituir linhagem hematopoietica e terapia genica

Luzo, Angela Cristina Malheiros 24 July 2018 (has links)
Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T18:02:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luzo_AngelaCristinaMalheiros_M.pdf: 5297367 bytes, checksum: d3b52afb5390f0980ee7b267c74e7bfe (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Nos últimos anos, o sangue de cordão umbilical humano (scuh) vem se tornando fonte alternativa viável, para obtenção de célula precursora de linhagem hematopoiética devido à facilidade em ser obtido, manipulado e rico em células precursoras. Estas células são mais imaturas que as da medula óssea, tendo grande capacidade de proliferação, replicação e transfecção. Apresenta, quando transfectada, maior expressão do material introduzido. No intuito de estudar a viabilidade destas células para reconstituir linhagem hematopoiética, analisamos sua capacidade de proliferação em cultura em meio de metilcelulose, antes e após criopreservação e transplantando-as em camundongos portadores de imunodeficiência severa combinada (SCID), irradiados. Foram coletadas, no período de junho de 1996 a agosto de 1998, 75 bolsas de scuh. Houve uma variação no volume de sangue coletado de 1 a 120 ml com média de 57 ml. O número médio de células viáveis foi de 119 x105 /ml de sangue de cordão. Nos estudos clonogênicos as médias observadas foram 216 colônias de CFU/BFU-E, 134 colônias de CFU-GM e 22 colônias de CFU-GEMM. Durante o estudo notamos uma proliferação intensa nas culturas de sangue de cordão de prematuros quando comparados com os neonatos de termo. Os prematuros apresentaram um maior número de células precursoras viáveis (371 x 105/ ml de sangue de cordão) que os de termo (74 células. x 105/ ml de sangue de cordão) Na leitura feita no 8° dia de cultura, encontramos 284 CFU/BFU-E nos prematuros e 19 colônias nos de termo (p=0,003). Em relação às CFU-GM os prematuros apresentaram 196 colônias/ml de sangue de cordão e os de termo 15 colônias Iml (p=0,003). Foram encontradas 29 colônias de CFU-GEMMM nos prematuros e nenhuma colônia nos de termo (p=0,003) No 14° dia, os prematuros apresentaram 358 colônias de CFU/BFU-E e os de termo 216 colônias (p=0,061); 219 colônias de CFU-GM e os de termo 120 colônias (p=0,075); 41 colônias de CFU-GEMM e os de termo 23 colônias (p=0,040). Tal fato poderia estar relacionado com o maior número de células precursoras existente em prematuros que se relaciona com a ontogenia da hemopoiese. Entretanto a diferenciação nos diferentes tipos de colônia se encontra também acelerado. As culturas dos prematuros no 8° dia foram semelhantes às de termo no 14° dia, já apresentando grande quantidade de CFU-GEMM. As culturas do 14° dia já apresentavam BFU-E, as quais, só aparecem nas de termo no 21° dia, apresentando também, intensa proliferação celular, dificultando a contagem. Provavelmente as células dos prematuros analisados (idade gestacional entre 20 e 32 semanas) devem entrar em ciclo celular antes que as de termo. Este achado está sendo objeto de estudo o estudo da viabilidade das células após o congelamento demonstrou que elas permaneceram viáveis após a crio preservação, mantendo, nos estudos clonogênicos, sua capacidade proliferativa e na imunofenotipagem, a proporção de células CD34+ foi semelhante à realizada pré- congelamento. O transplante foi realizado em 20 camundongos de linhagem SCID/SCID, após terem sido irradiados com 300 rads de fonte de Césio, injetando-se 1,0 x 10 7 células mononucleares de scuh em veia orbitária. Concomitantemente, num dos experimentos foi sacrificado um animal sem ser irradiado e transplantado, sendo feita a avaliação do mesmo modo que para avaliar a pega dos transplantados. Para avaliação da pega, os camundongos foram sacrificados 8 semanas após transplante, sendo feita cultura de lavado de medula óssea dos camundongos em meio sem i-sólido de metilcelulose com fatores estimulantes de crescimento recombinantes, específicos para linhagem celular humana e análise através de imunofenotipagem por citometria de fluxo com anticorpos monoclonais para células humanas. Foram obtidas amostras de sangue periférico, macerado de pulmão, baço e de lavado de medula óssea A pega na 8a semana pós transplante ocorreu em 6 dos 21 camundongos; 15 animais morreram na 1 a semana pós, irradiação, o que pode acontecer pois a linhagem SCID é mais sensível que as outras linhagens. Houve intensa proliferação nas culturas, dificultando a contagem das CFU-C. A análise através da citometria de fluxo foi positiva em 3 dos 6 casos. Foram analisados 6.000 a 10.000 eventos. A porcentagem encontrada de células captadas pelos anticorpos foi expressa em relação ao campo de linfócitos. Foram encontradas, no sangue periférico, 400 células com 26,03% de CD45, 4,50% de CD2, 30,14% de CD3, 1,03% de CD19. No pulmão, 2500 células com 18,65% de CD45, 16,32% de CD3 e 0,37% de CD19. Na medula óssea, 1000 células, com 12,80% de CD45, 4,45% de CD3, 0,855 de CD8, 0,03% de CD34. No baço, haviam 2300 células sendo 36,84% de CD45, 28,27% de CD3, e 1,62% de CD19. No camundongo sem transplante não houve marcação para células humanas. Mediante os dados apresentados, que se relacionam com os da literatura, as células precursoras do sangue de cordão são capazes de reconstituir a linhagem hematopoiética após ablação da medula e devido às suas caracteristicas, imaturidade, grande capacidade de proliferação e autogeração podem ser adequadas para terapia gênica / Abstract: During the past 14 years, human umbilical cord blood (UCB) has become an important source of hematopoietic stem cells The collection and manipulation of UCB is easy and due to the rich content of progenitors cells, when cultured, these cells provide a high enough number of GM-CSF colonies to allow recovery of the hematopoietic lineage. UCB progenitor cells display a great ability to proliferate and self-renewal and are capable of multilineage expression in secondary colony cultures. In addition, UCB cells can be efficiently infected with retroviruses and provide a high level of expression of the introduced sequence. So, UCB cells can also be used in gene therapy. To evaluate the proliferative potential of UCB stem cells to recover hematopoietic lineage, we collected between june, 1996 to august 1998, 75 UCB bags and analyzed, before and after cryopreservation, their viability and proliferative capacity in methylcellulose culture, we also performed transplantation of these cells into SCIO mice in order to recover bone marrow after ablative irradiation. The collected volume medium was 57ml, the medium viable number of mononuclear cells was 119 x105/ml of cord blood. The medium CFU-C founded in clonogenic studies were: 216. CFU-E, 134 CFU-GM and 22 CFU-GEMM. During our study we discovered that cultures from UCB cells of premature neonates had an early growth of CFU-E/BFU-E, CFU-GM and CFU-GEMM, on the 8th day of culture, and that the number and morphological characteristics of these colonies were comparable to those from fuI! term neonates obtained on the 14th day. The prematures presented, on the 8th day of culture, 284 CFU/BFU-E while, in full term neonates there were 19 colonies (p=O,003). We found 196 CFU-GM colonies in the premature group and 15 colonies in the full term group (p=O,OO3), 27 CFU-GEMM colonies in the premature group and none in the full term group (p=O,OO3). On the 14th day of culture the results were as following: CFU/BFU-E - premature 358 x full term 216 (p=O,061), CFU-GM - premature 219 x full term 120 (p=O,075) and CFU-GEMM - premature 41 x fuIl term 23 (p=0,040). These results indicated that premature UCB cells have a higher proliferative potential, this capacity may not be only related to their higher concentration of primitive hematopoietic progenitor cells, but rather to a different timing to entry into the cell cycle. The study about cryopreservation demonstrated that the viability and clonogenic results were comparable with the results before cryopreservation. In order to evatuate the viabiity of UCB cells to recover hematopoieic lineage, fractioned UCB cells were transplanted' into sublethaly irradiated severe combined immunodeficient (SCIO) mice. We transplanted 21 mice, 6 engrafted and 15 dead during the fist week post transplantation, probably by the fact that SCIO lineage had great irradiation sensibiliy than the others mice lineages, even when we use 300 rads .The engrafted group demonstrated multilineage engraftment, analyzed by fluorescenceactivated-cell sorting (FACS) with monoclonal antibody for human cells, and clonogenic studies with mice bone marrow cells, in methylcellulose culture with human recombinant stimulating factors. Our FACS results were: peripheral blood, 400 cells with 26,03% of C045, 4,50% of C02, 30,14% of CD3, 1,03% of CD19; lung, 2500 cells with 18,65% of C045, 16,32% C03 and 0,37% of CD19; bone marrow,1000 cells with 12,80% of C045, 4,45% of C03, 0,855 of C08 and 0,03% of C034; spleen, 2300 cells with 36,84% of C045, 28,27% of C03, and 1,62% of CD19. We had done the same analysis with one untransplanted mouse. There was not any positive cell in the F ACS analysis with monoclonal antibody for human cells. These results demonstrated that umbilical cord blood cells were capable to recover bone marrow after ablative. therapies and might be in the future, the ideal source of progenitors cells for transplantation and gene therapy / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Ciências Médicas
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Estudo da eficiencia das soluções de Collins e Euro-collins na conservação da função de pars recta (P3) do tubulo proximal de coelho isolado e perfundido "in vitro"

Silva, Lilia Aparecida Coletto Vieira da 23 April 1991 (has links)
Orientador: Jose Francisco Figueiredo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:35:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_LiliaAparecidaColettoVieirada_M.pdf: 2117253 bytes, checksum: cc7c809ea85efdf54cfcf971b6aee284 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Neste trabalho, estudamos o efeito das soluções de Collins e Euro-Collins sobre as pars recta do túbulo proximal de coelhos isolados e perfundidos ¿in vitro¿, empregando-se várias manobras de conservação. Esta técnica permite avaliar diretamente a ação dos constituintes químicos de soluções conservadoras sobre aspectos de interesse da fisiologia tubular. Em uma de nossas manobras experimentais, o estado funcional do túbulo é previamente determinado, antes da conservação, de tal modo que cada experimento se torna seu próprio controle ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Efeitos do 2,4 dinitrofenol, carnosina e tiroxina sobre o desenvolvimento do tecido de granulação

Maia, Almir de Souza 14 July 2018 (has links)
Orientador : Mario Roberto Vizioli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T18:22:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maia_AlmirdeSouza_M.pdf: 2460624 bytes, checksum: b89febedad8f99cd6392117a86b0a559 (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: O presente trabalho se propôs a estudar o desenvolvimento do tecido de granulação induzido artificialmente em ratos, bem como os efeitos de drogas anabolizantes (2,4 dinitrofenol, carnosina e tiroxina) na evolução do tecido,durante o periodo de 25 dias. Essas drogas foram injetadas subcutaneamente, diariamente, apos a implantação das esponjas de PVC, nas seguintes proporções: 2,4 dinitrofenol (5mg/100g/peso), carnosina (3mg!100g/peso) e tiroxina (5~g/100g/peso). Os animais foram sacrificados aos 5, 10, 15, 20 e 25 dias e forneceram material para observações microscopicas e fotomicrografias utilizadas para documentação dos resultados. Os resultados conferidos pelo presente trabalho permitem concluir que o 2,4 dinitrofenol é um potente inibidor da sintese do colãgeno. Constatou-se que essa droga reduz sensivelmente o numero de células mesenquimais e de caPilares. Como consequência. houve uma redução de desenvolvimento do tecido de granulação.A explicaçiopara tal fato deve-se ã propriedade do 2,4 dinitrofenol ser ativador das vias "catabõlicas, consequentemente, inibindo a sintese. A tiroxina acarretou ligeira queda da população de células mesenquimais e fibroblãsticas, reduzido fibrosamento, conseqüentemente uma evolução discretamente menor do tecido de granulação. Sugere-se que a tiroxina, na dose empregada (5~/lOOg/dia) , possua um mecanismo de ação semelhante aquela descrita em relação ao 2,4 dinitrofenol, ou seja, inibindo o anabolismo. Por outro lado, o mesmo não ocorreu com a carnosina. Esta, confirmando vãrios"trabalhos anteriores, acelerou o desenvolvimento do tecido de granulação, interferindo positivamente na proliferação do tecido, tanto quantitativa como qualitatl vamente propiciando melhores condições de evolução tecidual. A partir desses resultados, pode-se concluir que o 2,4 dinitrofenol não deve ser indicado para acelerar o processo de reparo dos tecidos. Nas condições da presente pesquisa, a tiroxina revelou-se ligeiramente inibidora do processo de reparo tecidual. Ao contrãrio, a carnosina mostrou-se aceleradora da atividade da fibrogenese no tecido de granulação / Abstract: This research had the purpose to study the iopment of granulation tissue artificially induced in deverats, as well as the effects of anabolic drugs (i.e., 2-4 dinitrophenol, carnosine and thyroxine) under the evo1ution of such a kind of tissue, during a period of 25 days. These drugs were injected subcutaneously after , PVC sponge implantation, in the following way: 2-4 dinitrophenol (5mg/100g daily); carnosine (3mg/100g dai1y) and thyroxiITe(5~g/100g daily). The anima1s were sacrificed at 5 , 10, 15, 20 and 25 days after the sponge imp1antation and prvided material for microscopic observations and photomicr graphs that were utilized for the documentation of the su1ts. The resu1ts obtained by this study permit the conclusion that 2-4 dinitropheno1 )S a powerfu1 inhibitor of the co11agen synthesis. It was found that this drug great1y reduced the number of mesenquimal and of ce11s and of capi11aries. As a result, there was a reduction in the growth of granulation tissue. The explanation for this fact is the property of 2-4 dinitrophenol as an activator of the catabolic path ways and therefore an inhibitor of the synthesis. Thyrxine slightly reduced the population of mesenchimal and fibroblastic cells, therefore causing a slight decrease in the granulation tissue. It is suggested that thyroxine, in a 5~g/100g daily dose contains a type of action similar to that already described in relation to 2-4 dinitrophenol; that is, an inhibitor of anabolism. On the other hand, the same phenomenon did not occur with carnosine. This drug, confirming several other previous studies, increased the growth of granulation tissues and interfered positively in the proliferation of the tissue both quantitatively and qualitatively, ding better conditions for the tissue growth. From these results it is possible to conclude 2-4 dinitrophenol should not be indicated as an accelerator of the tissue-recuperation processo Under the research conditions of thisastudy thyroxine has been revealed to be a slight inhibitor in the tissue-recuperation processo On the contrary, arnosine was revealed to be an accelerator of the fibrogenesis activity in the granulation tissue / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental
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Avaliação das lesões teciduais hepaticas durante isquemia fria apos perfusão com analogo de prostaglandina E1 : estudo experimental em ratos

Silveira, Henrique Jose Virgili 28 February 2003 (has links)
Orientador: Luiz Sergio Leonardi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_HenriqueJoseVirgili_M.pdf: 2334565 bytes, checksum: fc216aab3ea21925ca90860edd40f40c (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Foi estudado o efeito de análogo de prostaglandina El sobre as lesões teciduais hepáticas que ocorrem durante o período de isquemia fria com o objetivo de verificar se sua utilização em solução de perfusão proporciona maior proteção ao parênquima hepático. Utilizou-se 30 ratos machos, divididos em dois grupos: controle, perfundido com solução de WISCOnsin e o segundo grupo perfundido com solução de Wisconsin acrescida de análogo de prostaglandina El (misoprostol). Foram colhidas biópsias imediatamente após a perfusão e depois com intervalos de 12, 18 e 24 horas após a perfusão. As variáveis estudadas em cada biópsia foram edema intersticial, degeneração hidrópica, degeneração gordurosa, lesão endotelial, lesão do epitélio biliar, necrose celular e infiltrado inflamatório. Essas variáveis foram comparadas em cada grupo com o teste de Mann-Whitney, para variáveis não paramétricas. Nos períodos de 12 e 18 horas não observou-se diferença significativa em nenhuma variável entre os grupos. No período de 24 horas foi observado uma diferença significativa (p<0,001) nas variáveis necrose celular, lesão endotelial e infiltrado inflamatório. Conclui-se que a utilização de análogo de prostaglandina E 1 na perfusão hepática confere proteção ao tecido hepático quando submetido a um período de isquemia mais prolongado / Abstract: The effect of prostaglandin El analogue in hepatic injury during cold ischenúa were evalueted in this study. The objective to verifY if occur attenuation in the ischemic liver damage. Thirty male rats were divided in two groups of 15 animaIs each: control, where was perfunded with University of Wisconsin solution and test group, which was perfunded with this solution added of prostaglandin El analogue (misoprostol). Biopsies were obtained immediately after perfusion and with 12, 18 and 24 hours after the perfusion. The variables analysed were tissular edema, hidropic changes, fatty changes, endothelium injury, bile duct injury, necrosis and inflammatory processo The Mann- Whitney test for non-parametric variables was used to compare the samples. In the period of 12 and 18 hours no statistical difIerences were found in biopsies. In the period of 24 hours necrosis, endothelium injury and inflammatory process were significant1y more (p < 0,001) in control group. The author conc1ued that utilization of prostaglandin E 1 analogue in hepatic perfusion has a protective effect ofhepatic tissue injury during prolongated storage. The effect of prostaglandin El analogue in hepatic injury during cold ischenúa were evalueted in this study. The objective to verifY if occur attenuation in the ischemic liver damage. Thirty male rats were divided in two groups of 15 animaIs each: control, where was perfunded with University of Wisconsin solution and test group, which was perfunded with this solution added of prostaglandin El analogue (misoprostol). Biopsies were obtained immediately after perfusion and with 12, 18 and 24 hours after the perfusion. the variables analysed were tissular edema, hidropic changes, fatty changes, endothelium injury, bile duct injury, necrosis and inflammatory processo The Mann- Whitney test for non-parametric variables was used to compare the samples. In the period of 12 and 18 hours no statistical difIerences were found in biopsies. In the period of 24 hours necrosis, endothelium injury and inflammatory process were significant1y more (p < 0,001) in control group.The author conc1ued that utilization of prostaglandin E 1 analogue in hepatic perfusion has a protective effect ofhepatic tissue injury during prolongatedstorage / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia
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Atividade respiratoria de tecido nervoso em suspensão em soro sanguineo de "Sus scrofa domesticus, Gray" : investigção sobre fator controlador

Sahade, William 18 July 2018 (has links)
Orientadores: Decio Bardin, Andres Jose Tumang / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-18T02:12:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sahade_William_D.pdf: 1578766 bytes, checksum: 7a9f767273ac8fefc99f99bd8aea82ed (MD5) Previous issue date: 1970 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências
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Efeito concorrente entre massa livre de gordura e tecido adiposo sobre os ganhos de densidade mineral óssea de membros inferiores de adolescentes esportistas : abcd-growth study /

Marco, Rafael Luiz de. January 2019 (has links)
Orientador: Romulo Araújo Fernandes / Banca: Luis Alberto Gobbo / Banca: Robson Chacon Castoldi / Resumo: A saúde óssea tem recebido crescente atenção da comunidade acadêmica e sociedade por conta do grande peso social e econômico que a osteoporose representa. Por outro lado, o desenvolvimento da osteoporose na velhice é fortemente determinado por eventos que ocorrem na juventude, neste caso os baixos ganhos de massa óssea. Nesse sentido, a ação do tecido muscular no fortalecimento da estrutura óssea tem sido investigada em jovens, mas muitas lacunas ainda existem. Objetivo: Discriminar o impacto de modificações na massa livre de gordura (MLG) e gordura corporal (GC) sobre o ganho ósseo de adolescentes de ambos os sexos, bem como, identificar o efeito de ambos tecidos sobre os ganhos ósseos em condições envolvendo diferentes níveis de impacto mecânico, em ambiente de hipogravidade (natação), em ambiente sem prática esportiva (grupo controle) e ambiente com prática esportiva com impacto (futebol, basquetebol e artes marciais). Métodos: Estudo longitudinal com doze meses de seguimento (dois momentos de coleta de dados) que foi conduzido na cidade de Presidente Prudente - SP. A amostra foi composta por 262 jovens classificados como: Controle, Natação e Esportes de impacto (modalidades combinadas: caratê, judô, kung-fu, futebol, basquetebol e voleibol). A densidade mineral óssea (DMO), MLG e GC foram estimados por meio da absortiometria de Raio-X de Dupla energia nos i) membros inferiores, ii) perna esquerda e iii) perna direita. Foram tratados como variáveis de confusão: idade crono... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bone health has received increasing attention from the academic community and society because of the great social and economic weight that osteoporosis represents. On the other hand, the development of osteoporosis in old age is strongly determined by events that occur in youth, in this case the low gains of bone mass. In this sense, the action of the muscular tissue in the strengthening of the bone structure has been investigated in young people, but many gaps still exist. Objective: To discriminate the impact of changes in lean soft tissue (LST) and body fat (BF) on the bone gain of adolescents of both sexes, as well as to identify the effect of both tissues on the bone gains in conditions involving different levels of impact mechanic, in environment of hypogra-phy (swimming), environment without sports (control group) and environment with sports practice with impact (soccer, basketball and martial arts). Methods: A longitudinal study with twelve months of follow-up (two moments of data collection) that was conducted in the city of Presidente Prudente - SP. The sample consisted of 262 young people classified as: Control, Swimming and Impact Sports (combined forms: karate, judo, kung-fu, soccer, basketball and volleyball). Bone mineral density (BMD), LST and BF were estimated by means of the dual energy X-ray absorptiometry in the i) lower limbs, ii) the left leg and iii) the right leg. Confounding variables were: chronological age, biological maturation, and vitamin D intak... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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