Orientador: Walkiria Hanada Viotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-25T10:26:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fachin_Luciano_M.pdf: 3258348 bytes, checksum: 41aa0c2257cba9a3a9b5b8ec01e7ec54 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O objetivo do trabalho foi estudar a influência de pré-tratamentos do soro no desempenho da membrana e nas propriedades emulsificantes do CPS. Os pré-tratamentos do soro foram o ajuste de pH entre 6 e 7, antes do tratamento térmico que variou de 70 até 80°C/2 minutos. O desempenho da membrana foi determinado pelo fluxo de permeado e pelo coeficiente de retenção proteica, e as propriedades emulsificantes pelo índice de atividade da emulsão (EAI) e pelo índice de estabilidade (SR). A ultrafiltração foi realizada em uma membrana cerâmica Carbosep, com peso molecular de corte de 20.000 Daltons e área de permeação de 74,6 cm2. O aumento do tratamento térmico diminuiu levemente o fluxo de permeado. O efeito do pH apresentou um comportamento quadrático sobre o fluxo de permeado, sendo que a região de pH entre 5,90 e 6,55, aliada à um tratamento térmico mínimo de 68°C/2 minutos, apresentou os maiores fluxos. O fluxo máximo foi obtido à pH 6,22 e 68°C/2 minutos. A queda no fluxo foi correlacionada com a solubilidade das proteínas do soro e com o teor de cinzas dos CPS. No pH 7, o teor de cinzas foi extremamente alto, mostrando uma maior deposição de sais de cálcio nos tratamentos de maior pH e maior tratamento térmico. Nesse pH, os valores do fluxo foram muito baixos. A medida que o pH diminuiu, o fluxo foi determinado pela solubilidade das proteínas. O coeficiente de retenção proteica variou entre 94 e 96% e foi uma característica da membrana e não dos pré-tratamentos utilizados. O aumento dos níveis de pH e de tratamento térmico resultaram em uma diminuição da solubilidade do CPS. O aumento do pH melhorou sensivelmente as propriedades emulsificantes. O aumento da intensidade do tratamento térmico diminuiu o índice de estabilidade (SR), principalmente à pH 7, provavelmente devido à uma maior interação entre grupos hidrofóbicos expostos. A melhor combinação para as propriedades emulsificantes foi com pH 7 e 70°C/2 minutos. / Abstract: Not informed / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Jose Luiz Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-19T06:55:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yoshimoto_Yuko_M.pdf: 3012278 bytes, checksum: ced1881a2c13827665e16f720cb5c047 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O principal objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de um método (modificação do método de Chang e Bergdoll (29)) para a purificação da enterotoxina estafilocócia tipo D (EED); assim como um método de obtenção de antissoro especifico, modificação do método recomendado pelo Food Research Institue (FRI). o método proposto de purificação permitiu uma maior recuperação de toxina em relação ao método de Chang e Bergdoll. O método de imunização de coelhos diminui sensivelmente tanto a quantidade de toxina utilizada como o período de inoculação necessário para atingir o valor pico de anticorpos específicos; em relação ao método do FRI. A enterotoxina foi produzida pela linhagem Staphylococcus aureus 1151m obtido do FRI incubada em frascos de Fernbach de 2,8 litros contendo o meio caldo de triptona 3%, adicionado de extrato de levedura a 1%, sendo o pH final do meio 6,8. o processo de purificação foi monitorado pelo método de eletroforese vertical em gel e pelos métodos sorológicos de precipitação em gel simples (Oudin) e dupla (Ouchterlony modificado - OSP). O método de eletroforese, através do uso de padrões de peso molecular conhecido permitiu constatar em cada etapa de purificação que a proteína purificada era efetivamente a enterotoxina D. Os métodos de precipitação em gel foram utilizados para a quantificação da toxina juntamente com a determinação de proteína pelo método de Lowry. A primeira cromatografia em Amberlite CG-50 teve um rendimento de 72%. A modificação da metodologia foi introduzida na segunda cromatografia onde a CM-Celulose foi substituída por CM-Sepharose CL-6B. Nesta etapa o rendimento foi de 46%. A terceira cromatografia em Sephadex G-75, apresentou um rendimento de 77%. O rendimento final de toxina após o processo completo de purificação foi de 25%. Para a obtenção de antissoro especifico utilizou-se um grupo de 5 coelhos, inoculados em duas etapas com um total de 100µg de toxina durante um período de 35 dias. Pelo método do FRI seria gasta uma quantidade maior que 230µg de toxina, e um período de 3 meses, para se atingir o nível máximo de anticorpos. A toxina foi administrado na coxa posterior por via subcutânea em duas etapas, sendo a primeira com adjuvante completo e a segunda, 21 dias após com adjuvante incompleto de Freund. Os animais foram submetidos à sangria branca por punção cardíaca na segunda semana após a ultima injeção - quando o titulo do soro atingiu valores compreendidos entre 1:16 e 1:32. A atividade imunológica do soro foi monitorada pelo método de 05P que permitiu além da dosagem do anticorpo a determinação da pureza da toxina, evidenciada pelo aparecimento de uma única linha de precipitação em presença do soro polivalente. / Abstract: In this work at was development a new method - modification of the method of Chang and Bergdoll (29) - for de purification of staphylococcal enterotoxin D (SED), and a new method of rabbit's immunization for the preparation of specific SED antisserum. The proposed immunization procedure is faster and uses considerably less toxin than the method used by the Food Research Institute (FRIJ. The enterotoxin was produced by Strain Staphylococcus aureus 1151m, from the FRI, incubated in Fernbach flasks of 2,8 liters of capacity, containing tryptone broth 3%, added of yeast extrat to a final concentration of 1%. The medium final pH was adjusted to 6,8. The enteroroxin purification was monitored by vertical gel eletroforesis in the presence of molecular weight standards. This procedure allowed to control each stage of the purification process. On the others side serological method of the precipitation simple (Oudin) and double (modified Ouchterlony - OSP) allowed to determine toxin concentration. The total protein was determined by the Lowry method. The first chromatography through Amberlite CG-50 had a yield of 72%. The modification introduced in this work was at the second chromatography, where CM-Celulose was substituted by CM-Sepharose CL-6B, and the toxin recovery in this step was 46%. The third chromatography through Sephadex G-75 had ayield of 77%. The total yield of SED purification was 25%. To obtain the specific antisserum, a lot of 5 rabbits was inoculated, each animal in two steps, with a total toxin concentration of 100 µg, for a total 35 days period. This procedure has the advantage of using less oxin and less time that the procedure recommended in the literature. The antiserum titers are lower than the titers obtained by the traditional methodology, but high enough to be used as reagents for the sorological quantification of the toxin. The toxin was inoculated in the rabbit tight by the subcutaneous route in two steps, in the first injection 50 µg toxin was inoculated with complete Freund adjuvant, and 21 days later, 50 µg of toxin with incomplete Freund adjuvante. The animals were bleeded to death by cardiac puncture on the second week after the second injection or after the level of antibodies was high enough (above 16) to follow the procedure. The highers titer obtained was 32. The serum titer was determined by the OSP method which allowed al so to determine the toxin purity, this one by the appearance of a single precipitation line - against antisserum produced with crude toxin. / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador : Prof. Dr. Carlos Ricardo Soccol / Coorientadora : Profa. Dra. Vanete Thomaz Soccol / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa: Curitiba, 29/10/2012 / Inclui referências : f.53-55 / Área de concentração: Saúde humana e animal / Resumo: Soro animal é usado em cultivo celular por causa de seus fatores nutricionais, porém, seu uso é um risco potencial à saúde, devido a possível presença de agentes adventícios, tais como vírus e príons, e também é um dos principais responsáveis por reações alérgicas em cães. Células BHK-21 adaptadas à suspensão crescendo em meio de cultura padrão com 3% de soro fetal bovino foram submetidas à adaptação em meio de cultura livre de soro. Os meios de cultura livre de soro usados neste estudo foram VP-SFM, Ex-Cell 302 e Cellvento BHK-200. As células foram adaptadas ao VP por trocada direta do meio de cultura, ao Ex-Cell por troca direta e gradual do meio. Adaptação a Cellvento só foi possível usando células previamente adaptada a VP-SFM. As células adaptadas ao meio de cultura Ex Cell 302 apresentaram melhores resultados de crescimento. Todas as células adaptadas são capazes de produzir vírus da raiva. Porém, células adaptadas em VP-SFM apresentaram a melhor produtividade viral. Entretanto, produção de vírus utilizando Cellvento BHK-200 apresenta o melhor potencial econômico. Palavras chaves: vacina antirrábica veterinária, meio de cultura livre de soro, BHK-21, adaptação celular. / Abstract: Animal serum is used in cell culture because of its nutritional factors, however, their use not only is a potential risky for health, due to possible presence of adventitious agents, such as virus and príons, but also is the major responsible of allergic reactions in dogs. BHK-21 cells adapted to suspension growing in standard culture media with 3% of fetal bovine serum were submitted to adaptation to serum free culture media. Serum free culture media used in this study were VP-SFM, EX-CELL 302 and Cellvento BHK-200. Cells were adapted to VP by direct media change, to Ex Cell by direct and gradual media change. Adaptation to Cellvento was only possible by using cells priory adapted to VP-SFM. Cells adapted to Ex Cell culture media presented best growth results. All adapted cells have ability to produce rabies virus. Although, cells adapted to VP-SFM presented best virus productivity. However, virus production using Cellvento BHK-200 presents best economic potential. Keywords: veterinary rabies vaccine, serum free media, BHK-21, cell adaptation.

Orientador : Sonia Presa Caggiani de Salzberg / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T12:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ueno_Mariko_M.pdf: 40336742 bytes, checksum: cf07c0e0941be2d7d54bd24cf2f08fe1 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: O principal objetivo deste trabalho foi a produção, purificação e obtenção de anti-soro da enterotoxina estafilocócica tipo B (EEB). Com os reagentes obtidos (antígeno e anticorpo) procedeu-se ao levantamento de S. aureus produtores de enterotoxina B em portadores assintomáticos. A enterotoxina foi produzida pela linhagem S. aureus S-6, conhecida como altamente produtora de EEB. O método de purificação foi o de SCHANTZ e colaboradores, e para a produção de anti-soro, utilizou-se o esquema de imunização de coelhos, otimizado pelo Food Research Institute (FRI), Wisconsin, USA. O processo de purificação foi avaliado pela difusão dupla em gel "Optimal Sensitivity Plate", OSP (Ouchterlony modificado) para a identificação da toxina, o método de difusão simples em gel de "Oudin" para a dosagem da toxina, e a dosagem de proteína total foi realizada pelo método de Lowry. Na produção de toxina foi utilizado como meio de cultura o hidrolisado de caseína N-Z-Amine NAK suplementado com tiamina (0,00005%) e niacina (0,001%). A quantidade de toxina produzida neste meio foi de 0,33mg/mL. Na primeira cromatografia em Amberlite CG-50 obteve-se um rendimento de 79,9% em relação à quantidade total adsorvida, na segunda cromatografia em Amberlite CG-50 obteve-se um rendimento de 73,3% em relação à primeira cromatografia e na terceira cromatografia em carboximetil celulose o rendimento foi de 80% era relação à segunda cromatografia. O rendimento através de todo o processo de purificação, ou seja toxina total produzida no meio de cultura e toxina total após a terceira cromatografia foi de 44,2%. A toxina purificada apresentou um alto grau de pureza já que houve formação de apenas uma linha de precipitação quando ensaiada contra anti-soro polivalente. Para a produção de anti-soro utilizou-se um lote de cinco coelhos, sendo um inoculado com toxina bruta, sem purificar e quatro com toxina purificada. Para a inoculação seguiu-se o esquema de imunização utilizado no FRI, que abrange um período de 70 dias e doses compreendidas entre 1 e 300 µg administradas em oito seções. O soro foi retirado entre uma e oito semanas após a última injeção através de punção cardíaca. O soro do animal imunizado com preparação bruta de enterotoxina apresentou, através do método de ÜSP, maior variedade de anticorpos, evidenciados através das linhas de precipitação formadas, que os soros dos animais inoculados com enterotoxina purificada. Estes últimos apresentaram ainda alguns interferentes, porém as linhas de precipitação correspondentes foram tênues em relação à linha principal de enterotoxina B. O número de portadores humanos assintomáticos de S. aureus 53% está dentro dos valores apresentados na literatura, 18 a 82%. O valor encontrado para as linhagens produtoras de enterotoxina B, 70,8%, foi ligeiramente superior aos valores apresentados na literatura norte americana / Abstract: The principal goal of this work was the production, purification and antiserum production of Staphylococcal enterotoxin B (SEB). With these reagents, antigen and antiserum, a survey of enterotoxin B producing S. aureus strains in assintomatic carriers was conducted. The enterotoxin was produced by the S-6 strain of S. aureus, a well-known enterotoxin B producer. The purification procedure was that of SCHANTZ and co-workers and for the antiserum production, the Food Research Institute (FRI), Wisconsin, USA immunization schedule was followed. The purification procedure was monitored through the Lowry method for total protein, double diffusion in gel Optimal Sensitivity Plate, OSP (a double diffusion Ouchterlony modification) for toxin identification and single gel diffusion of Oudin for toxin quantification. The casein hydrolysate N-Z-Amine NAK supplemented with thiamine (0,00005%) and niacin (0,001%) was used for toxin production. The enterotoxin concentration in the supernatant was 0,33mg/mL. The toxin yield in the first chromatography using the resin Amberlite CG-50 was 79,9% of the total adsorbed in the resin. In the second chromatography, using the same resin, the yield was 73,3% with respect to the first chromatography and in the third chromatography, using Carboximethyl Celulose; the yield was 80% with respect to the second chromatography. The yield for the entire purification procedure, total toxin after the third chromatography and and total toxin in the broth culture, was 44,2%. The purified enterotoxin showed high purity since only one precipitin line was formed against polivalent antiserum. Five animals were used for the antiserum production, one inoculated with the crude toxin and four with the purified toxin. For inoculation, the FRI recommended schedule was used, with doses ranging between 1 and 300 µg given in eight different sections during a 70 day period. The animals were bled through cardiac puncture after one to eight weeks following the last injection. The antisera obtained from the crude extract immunized animals showed higher number of antibodies, by the OSP method as displayed through precipitin lines, than the antisera from rabbits inoculated with the purified toxin, the latter showed a few very weak secondary lines related to the main line due to enterotoxin B. The number of S. aureus assyntomatic carriers 53% was within the range of values found in the literature, between 18 to 82%. Among them, the number of enterotoxin B producers 70,8% was slightly higher than the 68% reported by North American literature / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Rodolfo D. Reyna / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-16T07:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VerdaletGuzman_Inigo_M.pdf: 2749117 bytes, checksum: 94880dd0d146d85ab2b3686628fae7bb (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Realizou-se um estudo para a recuperação da lactose do soro de queijo da fabricação de ricota. Na tentativa de preservar o soro, encontrou-se que, adição de 0,01% de peróxido de hidrogênio (70 volumes) e estocagem a uma temperatura de 4-6ºC davam bom resultado. Após, encontrou-se. também que, aquecendo o soro a 93ºC e ajustando o pH a 4,7 com ácido acético, a desproteinização foi maior que com outros reagentes. Já desproteinizado o soro, foi concentrado até 65% de sólidos num evaporador de película rotatório e a lactose foi cristalizada em duas etapas: primeiro, rapidamente a 300C e, depois, em forma gradativa 15ºC em 6 h. Os cristais foram separados em uma centrífuga até de cesto e aí lavados, com aproximadamente 1,5 kg água/kg de lactose. Depois, foi secada a 800C e denominada Lactose Bruta, obtendo-se um rendimento de 76,9%. Para a obtenção de uma lactose refinada, a lactose. Bruta foi dissolvida em água quente, agregando-se 3% de carvão ativo, filtrada e novamente cristalizada. O rendimento global da lactose, a partir do soro, foi de 62,3%. Os resultados das análises mostraram que, a lactose obtida comparou-se em qualidade com a lactose importada e, foi melhor que a lactose nacional / Abstract: A study of lactose recovery from whey resulting from ricotta cheese manufacture was carried auto Experiments aimed at the preservation of whey showed that addition of 0.01% hydrogen peroxide (70 vol.) and storage at 4-6 °C produced good results. It was also found that heating the whey to 93ºC adjusting pH to 4.7 with acetic acide made possible a greater degree of deproteinization than that obtained with other gents. After deproteinization the whey was concentrated to 65% of solids in a rotating film evaporator and the lactose was crystallized in 2 steps: firts, rapidly at 30°C and afterwards gradually till l5°C in 6 h. The crystals were separated in abasket centrifuge and washed with 1.5 kg of water/ kg of lactose. The product was dried at 80°C and denoted as Crude Lactose, its yield being 76.9%. In order to obtain Refined Lactose, The Crude Lactose was dissolved in hot water, bleached with 3% of active carbon, filtered and re-crystallized.The overall yield of lactose the basis of its contents in the whey was 62.3%. Analytical results showed that the lactose thus obtained was comparable in quality with the imported product and of better quality than lactose produced locally / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Valdemiro Carlos Sgarbieri / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-25T00:36:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacobucci_HelaineBeatriz_M.pdf: 5172979 bytes, checksum: 47a9f345dc58e48f5ff7f495e3b19c56 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivos: produzir um concentrado protéico de soro doce (CSD) utilizando-se ultrafiltração e diafiltração, e caseinato de sódio (CasNa); verificar o efeito das proteínas do lactosoro e do caseinato de sódio (CasNa), comparativamente ao isolado protéico de soja (IPS) e a caseína comercial (CC) nos níveis séricos e hepáticos de colesterol total e triacilgliceróis, bem como sobre as proteínas séricas totais. O CSD apresentou a seguinte composição, expressa em base seca: 83,84% de proteína, 4,48% de lipídios, 2,77% de cinzas, 8,88% de lactose, 96,37% de sólidos totais. A solubilidade foi 93,09% em tampão citrato-fosfato, pH 4,6. Para o CasNa obteve-se 76,88% de proteína; 1,66% de lipídios, 9,01% de cinzas, 19,91% de lactose, 93,85% de sólidos totais. A solubilidade em água, pH ajustado a 7, foi de 98,2%. Foram feitos dois ensaios biológicos com ratos Wistar normolipidêmicos, cada ensaio com os tratamentos CSD, IPS, CasNa e CC. Os animais receberam dieta e água "ad libitum". Todas as dietas foram isoprotéicas e isocalóricas com base nas recomendações de Reeves et ai., (1993), substituindo-se o óleo vegetal por 6% de gordura de coco e acrescentando-se 1 % de colesterol. No primeiro ensaio utilizou-se 20% de proteína para todas as dietas. Foram utilizados 106 animais recém-desmamados, sendo que 10 foram separados e sacrificados para obtenção dos valores de referência (TO) e os demais divididos em 4 grupos com 24 ratos cada. Nos tempos 15, 30, 45 e 60 dias, foram sacrificados 6 animais de cada grupo, efetuando-se análises para verificar o efeito das dietas, principalmente do CSD, na redução dos níveis séricos e hepáticos de colesterol total e triacilgliceróis. Notou-se um efeito positivo na redução dos níveis de colesterol do CSD e IPS, mais evidente para os níveis séricos do que para os hepáticos. Um segundo ensaio foi feito com 123 animais de 57 dias de idade, onde todas as dietas continham 30% de proteína. Quinze animais foram sacrificados para a obtenção dos valores de referência (TO) e os demais foram divididos em 4 grupos com 27 animais em cada grupo. Nos tempos 15, 30 e 45 dias os animais foram sacrificados e as análises foram feitas da mesma maneira que no primeiro ensaio. A hipocolesterolemia foi mais notada quanto aos níveis hepáticos, apresentando menores valores para o tratamento com CSD e com o IPS, respectivamente. Os resultados para triacilgliceróis não permitiram concluir sobre os efeitos dos tratamentos sobre a lipidemia, no soro sangüíneo e no fígado, tanto no primeiro quanto no segundo ensaios / Abstract: The present work had the following objectives: to produce whey protein concentrate (WPC) using ultrafiltration and infiltration, and sodium caseinate (CasNa); to verify the effect of milk whey protein on serum and liver total cholesterol and total blood serum protein, comparatively to soy bean protein isolate (SPI) and commercial casein (CC). The WPC presented the following composition (dry basis): protein 83.84%, total lipids 4.48%, ash 2.77%, lactose 8.88% and total solids 96.37%. Solubility in citrate-phosphate buffer, (pH 4.6) was 93.09%. For the sodium caseinate the composition was: protein 76.88%, total lipids 1.66%, ash 2.77%, lactose 8.88% and total solids 93.85%. The solubility in water, pH adjusted to.7.0, was 98.2%. Two biological assays with rats were performed with the treatments WPC, SPI, CasNa and CC. During the assays the animals received diet and water ad libitum. All the diets were isoproteic and isocaloric, based on recommendations of Reeves et aI., (1993), by 6% coconut replacing the oil plus 1% cholesterol. In the first assay, 20% protein was utilized in all diets. One hundred and six weaning fats were used, 10 rats were sacrificed at the beginning for reference (TO) and the remaining animals divided in 4 groups of 24 rats each. Six animals were sacrificed from each group after 15, 30, 45 and 60 days of experiment. Analysis were performed to verify the influence of the treatments on blood serum and liver levels of colesterol and triacylglyceroIs. A positive reduction of cholesterol was demonstrated for the rats fed WPC and SPI. Cholesterol reduction was more evident in the blood serum than in the liver. A second assay was performed using 123 animals with 57 days of age and all diets were prepared with 30% protein. Fifteen animals were sacrificed at the beginning for reference value, the remaining were divided in 4 groups of 27 rats per group. After 15, 30 and 45 days of experiment animals were sacrificed and analysis were performed in the blood serum and liver, as in the first assay. Hypocholesterolemia was noticed mainly in the liver, which presented lower values for the treatments with WPC and SPI. The results for triacylglicerols did not permit any conclusion as to the effect of the treatments on blood serum and liver lipidemia for both, the first and second assays / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador: Sonia Maria Alves Bueno / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T20:52:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Acconci_Cesar_M.pdf: 4878752 bytes, checksum: e676df1bdd00cf82ca88caa85c4d33f2 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Apesar das medidas preventivas serem tomadas durante as etapas de produção ou purificação de soros hiperimunes, esses podem vir a ser contaminados com endotoxinas (ET), um tipo de pirogênio liberado pela parede de bactérias Gram-negativas. Endotoxinas produzem uma reação febril quando injetado em humanos ou outros mamíferos., podendo ocasionar a morte em alguns casos. Desta forma, a sua concentração em soluções a serem administradas parenteralmente deve ser reduzida a níveis toleráveis pelo organismo. Neste trabalho, para a remoção de ET de soros antiofidicos, utilizou-se o método de filatrção em membranas de afinidade com o aminoácido histidina imobilizado em fibras ocas de álcool poli etileno vinílico (PEV A). Histidina imobilizada neste tipo de suporte apresentou pseudo-bioafinidade por anticorpos (IgG) do soro e ET. Para evitar competições entre estas duas moléculas pelo ligante imobilizado, foi avaliada a adsorção de anticorpos do soro nestas membranas de afinidade a fim de determinar as melhores condições nas quais ET pudessem ser removidas sem implicar em adsorção significativa de anticorpos do soro antiofidico. As condições menos favoráveis para a adsorção de anticorpos ocorreram nas soluções tamponantes acetato a pH 6,0 e fosfato pH 6,5. Testes foram realizados para determinar qual destas soluções promoveria uma maior remoção de ET, porém em presença de tampão acetato, obteve-se uma redução mais significativa. Encontrada a solução que favoreceu a remoção deste pirogênio, estudou-se a influência das variáveis QF/Qr (vazão do filtrado/vazão da alimentação) e da concentração inicial de ET na etapa de retenção através de um planejamento estatístico experimental. A razão QF/QI não apresentou efeito significativo na retenção de ET e a quantidade deste pirogênio retida nas membranas aumentou de acordo com a sua concentração inicial na solução (quanto maior a concentração de ET (1000 EU/rnL), maior a quantidade retida por unidade de área de membrana (190 EU/cm2». A remoção média de ET alcançada no processo foi de 92%, sequida de uma recuperação total de anticorpos em tomo de 90%. Constatou-se também que a quantidade máxima de adsorção das membranas de afinidade não foi atingida e que para baixas concentrações de pirogênios, a remoção foi quase total (99%), enquanto que o aumento na concentração de anticorpos na solução não provocou alterações na quantidade de ET removida / Abstract: Contamination by pyrogens may occur during the production and purification of hiperimum serum. Endotoxins (ET) or lipopolysaccharides (LPS) are a kind of pyrogens present at the cell wall of gram-negative bacteria. LPS are able to induce fever reaction when injected in to mammals. In some cases, even death may occur. Thus, endotoxins should be removed to be reduced to tolerable levels for the host organismo There are several methods for ET removal as ultrafiltration, adsorption on activated charcoal and on ion-exchange resins, and chromatography. In the present study, adsorption on histidine-linked hollow fiber membrane (His-PEVA) was used to remove ET from anti snake serum. Immobilized histidine presents pseudobioaffinity to horse antibodies (IgG) and to ET. The adsorption of serum IgG in the His-PEV A membranes was analysed to determine the best conditions for ET removal without a significant adsorption of antibodies. The lowest adsorption of IgG was obtained with acetate (pH 6,0) and phosphate (pH 6,5) buffers. Both conditions removed LPS, but the highest efficient was found to acetate buffer. This buffer was used to determine the optimal combination of ET concentration and ratio (QF,/QI) to reach high LPS removal without significant loss of IgG. Removal of 92% of ET and recuperation of90% of IgG was obtained with this processo In low pirogen concentrations, the remotion was 99% and higher antibodies concentrations didn't induce changes in the quantity of removed ET / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Orientadores: Decio Bardin, Andres Jose Tumang / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-18T02:12:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sahade_William_D.pdf: 1578766 bytes, checksum: 7a9f767273ac8fefc99f99bd8aea82ed (MD5) Previous issue date: 1970 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador: Humberto de Araujo Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T14:00:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dawood_FawziAhmedMoustafa_M.pdf: 2521546 bytes, checksum: 97d2cb21773d0a2beacb5885ac3aa0ac (MD5) Previous issue date: 1973 / Resumo: Os estudos apresentados nesse trabalho mostraram que: 1. A cat D, extraída a partir de baço de coelho, pode ser obtida em alto grau de pureza, utilizando-se as técnicas de precipitação ao ponto isoelétrico e cromatografia em celulose modificada. 2. A imunização de cobaias com a cat D purificada permitiu a obtenção de um soro monoespecífico anti-cat D de coelho / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2012-10-22T00:58:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 200115.pdf: 451474 bytes, checksum: 7c058f0d3adc5d1afb032739528296a9 (MD5) / O Trypanosoma cruzi Chagas, 1909 agente etiológico da doença de Chagas e o T. rangeli Tejera, 1920 são parasitas hemoflagelados pertencentes à Ordem Kinetoplastida, Família Trypanosomatidae, que infectam animais domésticos, silvestres e seres humanos nas Américas Central e do Sul. A presença simultânea desses parasitas em uma mesma região geográfica possibilita a ocorrência de infecções únicas ou mistas, tanto em hospedeiros invertebrados como em vertebrados. Embora o T. rangeli não seja considerado patogênico para seres humanos, a infecção por este parasita induz uma resposta imune humoral com elevados títulos de anticorpos, determinando reações sorológicas cruzadas com o T. cruzi e dificultando, desta maneira, o diagnóstico da doença de Chagas, especialmente em sua fase crônica. Nesse sentido, o presente trabalho avaliou comparativamente esta imunoreatividade cruzada, através da análise por Imunofluorescência Indireta, utilizando amostras de soros de pacientes chagásicos crônicos apresentando as formas cardíaca e indeterminada da doença frente a formas epimastigotas e tripomastigotas de cultura de ambos os parasitas. Os resultados de reatividade sorológica cruzada obtidos com a utilização de formas epimastigotas de T. cruzi e T. rangeli corroboram os dados da literatura. Entretanto, com a utilização das formas tripomastigotas ocorreu uma redução significativa da reatividade cruzada. Estas diferenças na reatividade podem ser decorrentes da constituição antigênica distinta nestas formas evolutivas do parasita.