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Bactérias láticas: avaliação da resistência ao trato gastrintestinal simulado e encapsulamento com soros lácteos

Eckert, Camila 27 October 2016 (has links)
Submitted by FERNANDA DA SILVA VON PORSTER (fdsvporster@univates.br) on 2017-06-29T18:22:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016CamilaEckert.pdf: 2023285 bytes, checksum: f674c42a62e9aa153c1c16a5e33f2284 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2017-07-04T20:19:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016CamilaEckert.pdf: 2023285 bytes, checksum: f674c42a62e9aa153c1c16a5e33f2284 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-04T20:19:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016CamilaEckert.pdf: 2023285 bytes, checksum: f674c42a62e9aa153c1c16a5e33f2284 (MD5) Previous issue date: 2017-06 / CAPES / Muitas bactérias láticas (BALs) são classificadas como probióticas, provendo benefícios à saúde quando ingeridas em quantidades adequadas. Para serem assim consideradas, um dos critérios é sua capacidade de tolerar as condições adversas do trato gastrintestinal humano (TGI). Entretanto, algumas cepas apresentam baixa resistência, sendo necessário proporcionar uma barreira física externa como proteção. Uma das metodologias mais propostas para esta finalidade é o encapsulamento. A técnica de spray drying é um dos métodos mais difundidos na indústria de alimentos para este fim. Ainda, outra forma da obtenção de encapsulados é a extrusão por tecnologia de vibração. Os subprodutos da indústria de laticínios são uma alternativa como material encapsulante na aplicação às condições adversas, em função de sua composição e por apresentarem potencial para a proteção dos microrganismos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi selecionar BALs tolerantes às condições ambientais do TGI simulado, visando o encapsulamento por spray drying e extrusão por tecnologia de vibração, empregando soros lácteos como material de parede. Desta forma, bactérias láticas isoladas de leite e queijo, disponíveis comercialmente e de coleções de cultura foram estudadas quanto ao potencial de sobrevivência às condições ambientais do TGI simulado. Bactérias com elevados níveis de viabilidade (acima de 70% de sobrevivência) às condições ácidas (pHs 2,5 e 3) e de alta concentração de sais biliares (0,5% (m/v)) foram selecionadas para encapsulamento. No microencapsulamento por spray drying, soro de queijo, permeado de soro e retentado de soro foram utilizados como material encapsulante para proteção de L. plantarum ATCC 8014. Soro de queijo e retentado de soro provaram ser o melhores materiais encapsulantes para proteger L. plantarum da alta temperatura aplicada no processo. As microcápsulas foram armazenadas por 56 dias a 20 ºC, ou inseridas em leite por 42 dias a 4 ºC, mantendo, ainda assim, a alta viabilidade célular. Quando expostas ao TGI simulado, apresentaram viabilidade acima de 8 UFC.mL-1. As microcápsulas formadas não apresentaram diferenças na morfologia e diâmetro de 7,0 ± 1,0 μm. No encapsulamento por tecnologia de vibração, soro de queijo e permeado de soro foram combinados com alginato de sódio 1,5% e pectina 1,25%, para proteção de L. plantarum ATCC 8014 e isolados L. paracasei ML33 e L. pentosus ML82. Não houve perda na viabilidade dos microrganismos após este processo de encapsulamento. Quando armazenadas por 28 dias a 4 ºC, apresentaram uma redução de 1 ciclo log, indiferente do isolado ou material encapsulante aplicado. Ainda, forneceu proteção na exposição ao TGI simulado, sendo o soro de queijo com melhor efeito protetor. Os encapsulamentos por spray drying e extrusão por tecnologia de vibração, assim como os soros lácteos, materiais encapsulantes aplicados, mostraram-se eficientes na proteção de BALs. São uma alternativa de aplicação, visando o aumento da vida de prateleira e proteção às condições adversas, num produto de alto valor agregado. / Many lactic acid bacteria (BALs) are classified as probiotic, providing health benefits when ingested in suitable amounts. To be thus considered, one of the criteria is its ability to tolerate the adverse conditions of the human gastrointestinal tract (GIT). However, some strains have low resistance, being necessary to provide an external physical barrier as protection. One of the most proposed methodologies for this purpose is encapsulation. The spray drying technique is one of the most widespread methods in the food industry for this. Still another way of obtaining encapsulations is the extrusion by vibration technology. Dairy by-products are an alternative as encapsulating material in application to adverse conditions, depending on their composition and potential for protection of microorganisms. Therefore, the objective of this work was to select BALs tolerant to the environmental conditions of the simulated GIT, aiming the encapsulation by spray drying and extrusion by vibration technology, employing dairy whey as a wall material. In this way, commercially available milk and cheese isolated lactic bacteria and culture collections were studied for the potential survival of the simulated GIT environmental conditions. Bacteria with high levels of viability (above 70% survival) to acid conditions (pH 2.5 and 3) and high concentration of bile salts (0.5% (w / v)) were selected for encapsulation. In microencapsulation by spray drying, whey, permeate and retentate were used as encapsulating material to protect L. plantarum ATCC 8014. Whey and retentate proved to be the best encapsulating materials to protect L. plantarum from high temperature applied in the process. The microcapsules were stored for 56 days at 20 ° C, or inserted into milk for 42 days at 4 ° C, while still maintaining high cell viability. When exposed to the simulated GIT, they presented viability above 8 CFU.g-1. The microcapsules formed did not present differences in morphology and diameter of 7.0 ± 1.0 μm. In the encapsulation by vibration technology, whey and permeate were combined with 1.5% sodium alginate and 1.25% pectin, to protect L. plantarum ATCC 8014, L. paracasei ML33 and L. pentosus ML82 isolates. There was no loss in viability of the microorganisms after this encapsulation process. When stored for 28 days at 4 ° C, they showed a reduction of 1 log cycle, regardless of the isolate or encapsulating material applied. Furthermore, it provided protection in the simulated GIT exposure, being whey with the best protective effect. Spray drying and extrusion by vibration technology, as well as dairy whey, applied encapsulating materials, have proved to be effective in protecting BALs. They are an alternative of application, aiming the increase of the shelf life and protection to the adverse conditions, in a product of high added value.
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Transition in Post-soviet Art: "Collective Actions" before and after 1989

Esanu, Octavian January 2009 (has links)
<p>For more than three decades the Moscow-based conceptual artist group "Collective Actions" has been organizing actions. Each action, typically taking place at the outskirts of Moscow, is regarded as a trigger for a series of intellectual activities, such as analysis, interpretation, narration, and description. The artists have systematically recorded and transcribed these activities, collecting and assembling texts, diagrams, and photographs in a ten-volume publication entitled "Journeys Outside the City." Five volumes of this publication concern the activities of the group before, and five after, 1989. Over the years the "Journeys Outside the City" became an idiosyncratic, self-sufficient aesthetic discourse arrayed along a constellation of concepts developed by those engaged in "Collective Actions." In its elusive hermeticism and self-referentiality the aesthetic framework constructed by these artists formed a closed system, gathering bundles of signs that seldom referred to anything concrete outside the horizon of Moscow Conceptualism. It is in this regard that the early volumes of the "Journeys Outside the City" can be compared to the similarly closed ideological discourse of the Soviet Politburo. After 1989, however, with the transition from socialism to capitalism, the aesthetic and artistic language of this group began to change as its text-based self-sufficient system began to open up under pressure from new socioeconomic conditions introduced by the processes of democratization and liberalization. </p><p> My dissertation "Transition in Post-Soviet Art: `Collective Actions' Before and After 1989" is neither a history of nor a monographical work on "Collective Actions," but rather an analytical exploration of aesthetic, artistic and institutional changes that have transpired in the "Journeys Outside the City" during the transition from socialism to capitalism. As the artists migrated from one art historical category into another (from the status of "unofficial artists" to that of "contemporary artists"), their aesthetics and art revealed a series of stylistic, technical, formal, textual, and aesthetical transformations and metamorphoses that paralleled broader cultural conversions taking place in post-Soviet and Eastern European art during the transition to capitalism.</p> / Dissertation
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Complexity perspectives and investment decisions

Bana, Mohammed 03 1900 (has links)
Thesis (MPhil (Information Science))--University of Stellenbosch, 2010. / ENGLISH ABSTRACT: This thesis investigates investment theory in the light of complexity theory. These insights from diverse fields contain powerful images, metaphors and ways of thinking that allows one to seek new ways of comprehending the nature of the economy and therefore the nature of investment and the related issues of uncertainty and decision making. Complexity theory views the economy as being a dynamic, continuously adaptive, nonlinear system. This is in contrast to traditional or classical economic theory that views the economy as being a simple, linear, equilibrium deterministic system. This thesis is a conceptual study exploring the implications of a complexity worldview for investment decisions by looking at the nature and characteristics of complexity and then overlaying it on the characteristics of the economy. It is argued that complexity is caused by three elements: the structure of the system, human behaviour and exogenous factors. Thereafter follows an analysis of how investment decisions are made in the light of complexity by illustrating the investment models of two very successful, yet different investors: Warren Buffet and George Soros. Buffet’s model hinges on value. He realises that emergent phenomenon driven by irrational behaviour of investors leads to intrinsic values of shares to differ widely from perceived value. When quoted or perceived values are low than it is advisable to purchase as you have a margin of safety. Over the long term the market recognises the real value of the share. He tries to ignore the vagaries of the market and to focus on fundamentals. His list of fundamentals include; the franchise value of the company, quality of management and industry dynamics. George Soros in contrast utilises emergence patterns to locate potential investments. His model is that systems are flawed, human thinking and decision making is flawed and the interaction of the two lead to perturbations and oscillations. He focuses in trying to understand the flaw in systems and in human behaviour and to find some kind of pattern that he could utilise to make a profit. It is shown that both investment models can be understood from a complexity perspective and that these two investors built aspects from complexity into their decision models. / AFRIKAANSE OPSOMMING: Die tesis ondersoek investeringsteorie in die lig van kompleksiteitsteorie. Met die hulp van metafore en insigte vanuit kompleksiteitsdenke word gesoek na nuwe maniere om die aard van die mark en investering verwante aspekte van onsekerheid en besluitneming te verstaan. Die kompleksiteitsperspektief sien die ekonomie as’n dinamiese en aanpassende nie-lineêre sisteem. Dit word gedoen deur die implikasies wat kompleksiteit vir investeringsbesluite inhou konseptueel te ondersoek. Die aard en eienskappe van komplekse sisteme word verduidelik en dan op die ekonomie toegepas. Daar word geargumenteer dat kompleksiteit deur drie elemente veroorsaak word: die struktuur van die sisteem, menslike gedrag en eksogene faktore. Daarna word die praktyk van investeringsbesluite geanaliseer in terme van kompleksiteit duer investeringsmodelle van twee suksesvolle, maar uiteenlopende, investeerders te ondersoek, naamlik Warren Buffet en George Soros. Buffet se model draai rondom waarde. Hy sien die irrasionele gedrag van investeerders as ‘n ontvouende fenomeen wat lei tot ‘n gaping tussen intrinsieke en verwagte waarde. Sy investering word gebaseer op die aanname dat oor die langer termyn die mark die intrinsieke waarde herken. Hy ignoreer dus korttermyn skommelinge in die verwagte waarde en fokus op die fundamentele, waaronder die maanwaarde van die besigheid, die kwaliteit van die bestuur, en industrie-dinamika tel. Soros se model daarenteen gebruik ontvouende patrone en potensiële investeringsgeleenthede te ontbloot. Sy model is dat sisteme inherente teenstrydighede het as ook menslike gedrag en besluitneming. Dit lei tot ossilasies en versteurings. Sy fokus is gerig daarop om hierdie versteurings in die sisteem tot voordeel aan te wend. Daar word getoon hoedat beide investeringsmodelle vanuit ‘n kompleksiteitsperspektief verstaan kan word en dat die twee investeerders sulke aspekte in hulle investeringsbesluite inbou.
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Padronização e validação do método de inibição de ligação da toxina (ToBI) para determinação da potência de vacinas e soros antidiftéricos e antitetânicos / Implementation and validation the toxin inhibition binding (ToBI) test to evaluate the potency of antidiphtheric and antitetanic sera and combined bacterial vaccines

Melandri, Vanessa Cristina Rezende January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 47.pdf: 882272 bytes, checksum: 401f86c677016c9683a9566630f091be (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Produtos biológicos, tais como soros hiperimunes e vacinas, podem ser definidos como produtos derivados ou produzidos a partir de organismos vivos. Isso implica que suas características podem variar de um lote para outro. Conseqüentemente, um minucioso controle da qualidade na liberação de lotes é requerido para garantir que esses produtos sejam seguros e eficazes. O ensaio de potência com animais é um dos ensaios preconizados para garantir a qualidade das vacinas e soros hiperimunes. Somente para realização do ensaio de potência para o produto final de vacinas e soros antidiftéricos (SAD) e antitetânicos (SAT), são utilizados no INCQS cerca de 5.000 animais por ano, desses aproximadamente 4.500 animais são utilizados na etapa de soroneutralização e o restante na etapa de imunização. Neste contexto, e baseado nos princípios dos 3Rs, o objetivo deste trabalho foi padronizar e validar o método imunoenzimático de inibição da ligação da toxina (ToBI) capaz de avaliar a potência de SAD, SAT e de vacinas bacterianas combinadas: tétano-difteria uso adulto (dT) e uso infantil (DT) e tétano-difteria-pertussis (DTP), como alternativa da etapa de soroneutralização do ensaio de controle de potência. Os resultados encontrados indicam que o método proposto apresenta linearidade, especificidade e precisão (intra e inter-ensaio) satisfatórias e que é um ensaio confiável, rápido e conveniente para avaliar a potência de componentes diftérico e tetânico presentes em vacinas e soros hiperimunes. Além disso, reduz drasticamente o número de animais usados, o tempo na liberação de laudos e os custos associados ao controle da qualidade destes produtos. O método ToBI apresenta potencial para a substituição do ensaio em animais na determinação de potência de vacinas e soros antidiftéricos e antitetânicos... / Produtos biológicos, tais como soros hiperimunes e vacinas, podem ser definidos como produtos derivados ou produzidos a partir de organismos vivos. Isso implica que suas características podem variar de um lote para outro. Conseqüentemente, um minucioso controle da qualidade na liberação de lotes é requerido para garantir que esses produtos sejam seguros e eficazes. O ensaio de potência com animais é um dos ensaios preconizados para garantir a qualidade das vacinas e soros hiperimunes. Somente para realização do ensaio de potência para o produto final de vacinas e soros antidiftéricos (SAD) e antitetânicos (SAT), são utilizados no INCQS cerca de 5.000 animais por ano, desses aproximadamente 4.500 animais são utilizados na etapa de soroneutralização e o restante na etapa de imunização. Neste contexto, e baseado nos princípios dos 3Rs, o objetivo deste trabalho foi padronizar e validar o método imunoenzimático de inibição da ligação da toxina (ToBI) capaz de avaliar a potência de SAD, SAT e de vacinas bacterianas combinadas: tétano-difteria uso adulto (dT) e uso infantil (DT) e tétano-difteria-pertussis (DTP), como alternativa da etapa de soroneutralização do ensaio de controle de potência. Os resultados encontrados indicam que o método proposto apresenta linearidade, especificidade e precisão (intra e inter-ensaio) satisfatórias e que é um ensaio confiável, rápido e conveniente para avaliar a potência de componentes diftérico e tetânico presentes em vacinas e soros hiperimunes. Além disso, reduz drasticamente o número de animais usados, o tempo na liberação de laudos e os custos associados ao controle da qualidade destes produtos. O método ToBI apresenta potencial para a substituição do ensaio em animais na determinação de potência de vacinas e soros antidiftéricos e antitetânicos. Entretanto, para efeitos regulatórios, se faz necessária a realização de um estudo colaborativo, envolvendo laboratórios de diversos segmentos, para conclusão da validação da metodologia considerando os parâmetros já avaliados nessa etapa.
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Estudo das fosfatases ácidas e fosfatase alcalina na saliva e no soro de crianças

Chaves Neto, Antonio Hernandes [UNESP] 16 December 2005 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-16Bitstream added on 2014-06-13T20:56:53Z : No. of bitstreams: 1 chavesneto_ah_me_araca.pdf: 216462 bytes, checksum: a077ffffb43a7f52121fc844bcf5ba50 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A saliva é coletada através de métodos simples e não invasivos, além de ser facilmente armazenada. A coleta não-traumática é atrativa especialmente para crianças e quando repetidas coletas são requeridas. A desvantagem da saliva como uma ferramenta de diagnóstico é a variabilidade, que ocorre em decorrência dos fatores fisiológicos e do modo de coleta. Numa primeira etapa o trabalho teve por objetivo estudar as atividades das enzimas fosfatase alcalina (FAlc), fosfatase ácida total (FAT) e fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) na saliva total não estimulada de crianças, investigando as influências de fatores como sexo, faixa etária e horário de coleta, bem como a correlação das enzimas com a taxa de fluxo salivar. Nesta etapa, 120 crianças saudáveis de ambos os sexos, nas faixas etárias de 1-5 e 6-12 anos de idade tiveram as amostras de saliva coletada entre 8:00-10:00 horas ou entre 14:00-16:00 horas. A segunda parte do trabalho teve por objetivo avaliar a correlação das atividades enzimáticas da FAT, TRAP, proteína tirosina fosfatase de baixa massa molecular relativa (PTP-BMr) e FAlc na saliva e no soro de crianças, além de analisar a influência do sexo e da faixa etária na atividade das enzimas, no soro e na saliva total. Para tanto 32 crianças de ambos os sexos, nas faixas etárias de 1-5 anos e 6-12 anos de idade tiveram as amostras de saliva e sangue coletadas entre 8:00-10:00 horas. Os resultados da primeira etapa sugerem que as atividades da FAT, TRAP e FAlc são influenciadas, de formas distintas, pelos fatores sexo, faixa etária e horário de coleta e que não existe correlação entre as atividades das enzimas e a taxa de fluxo salivar. / Saliva can be collected by simple, non-invasive methods and is easily stored. The non-traumatic collection is specially appealing for children and when repeated collections are required. The main disadvantage of the saliva as a diagnosis tool is the variability that happens due to the physiologic factors and dependence on mode of the collection. In a first stage the work had for objective to study the activities of the enzymes alkaline phosphatase (ALP), total acid phosphatase (TAP) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) in the whole unstimulated saliva of children, investigating the influences of factors as sex, age group and time of collection, as well as the correlation of the enzymes with the salivary flow rate. In this stage, 120 healthy children of both sexes, in the age groups of 1-5 and 6-12 years of age had the saliva samples collected between 8:00-10:00 hours or between 14:00-16:00 hours. In a second stage, the work had for objective to evaluate the correlation of the enzymatic activities of TAP, TRAP, low molecular weight protein tyrosine phosphatase (LMW-PTP) and ALP in the saliva and in the children's serum, besides analyzing the influence of the sex and of the age group in the activity of the enzymes, in the serum and in the whole unstimulated saliva. For so much 32 children of both sexes, in the 1-5 year-old age groups and 6-12 years of age had the saliva samples and blood collected between 8:00-10:00 hours. The results of the first stage suggest that the activities of TAP, TRAP and ALP are influenced, in different ways, for the factors sex, age group and time of collection and that correlation doesn't exist between the activities of the enzymes and the salivary flow rate.
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Avaliação da ação neutralizante e da reatividade de anticorpos IgA e IgG anti-rotavírus SA-11 em soro de adultos saudáveis. / Evaluation of neutralizing ability and reactivity of anti-rotavirus SA-11 IgA and IgG antibodies in serum samples from healthy adults.

Thalita Lopes Ferreira 17 May 2011 (has links)
O rotavírus é a principal causa de diarréia em crianças em todo o mundo. Infecta também adultos, mas não há dados completos sobre a sua incidência nesse grupo nem sobre o papel de anticorpos preexistentes na proteção contra o vírus. O objetivo do trabalho foi avaliar a presença de anticorpos IgA e IgG anti-rotavírus SA-11, por ELISA, em amostras de soro de adultos saudáveis e sua ação neutralizante frente ao vírus, em ensaios de neutralização. Por Immunoblotting foi avaliado o reconhecimento de proteínas virais pelos anticorpos séricos. Observou-se que os títulos das amostras foram muito variáveis, sendo os de IgG superiores aos de IgA. Todas as amostras mostraram-se capazes de neutralizar o vírus em diferentes níveis, porém não foi possível estabelecer uma correlação com os títulos de anticorpos. Foi observado que anticorpos da classe IgG reconhecem mais proteínas virais que os da classe IgA. Este trabalho pode ser considerado mais um passo na elucidação do papel dos anticorpos séricos IgA e IgG anti-rotavírus na infecção em adultos. / Rotavirus has been considered the leading cause of diarrhea in children worldwide. The virus also infects adults but there is no conclusive data neither on the incidence of infection on this group nor on the role of pre-existing antibodies. The aim of the work was to evaluate the presence of anti-rotavirus SA-11 IgA and IgG by ELISA in serum samples of healthy adults and the serum neutralizing ability against the virus by neutralization assays. Immunoblotting was used to evaluate viral proteins recognition by serum antibodies. The antibody titers were extremely variable where IgG titers are greater than IgA ones. All samples were able to neutralize the virus in different levels but it was not possible to establish a correlation between antibody titers and neutralization ones. Immunoblotting assays revealed that IgG antibodies recognize more viral proteins than IgA did. This work can be considered a valuable step for elucidating the role of serum anti-rotavirus IgG and IgA antibodies in adults infection.
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Ocorrência de anticorpos anti-hantavírus (IgG) em populações humanas na região Amazônica e no estado de São Paulo (Mata Atlântica), utilizando proteína recombinante (nucleocapsídio) do vírus Araraquara. / Detection of antibodies (IgG) against hantavirus in human population of Amazon region and the state of Sao Paulo (Atlantic Forest), using recombinant antigen of Araraquara virus.

Morais, Felipe Alves 11 November 2010 (has links)
A hantavirose (infecção por Hantavírus) é uma das zoonoses que vem preocupando as autoridades sanitárias de todo o mundo. Sua ocorrência se deve principalmente os distúrbios ecológicos é transmitida ao homem através de inalação de partículas virais contida na excreta de roedores. São conhecidas duas doenças humanas distintas causadas pelo Hantavírus: a Febre Hemorrágica com Síndrome Renal (FHSR) e a Síndrome Pulmonar e Cardiovascular (SPCVH). O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de anticorpos IgG anti-hantavírus, através do ELISA, em populações da Amazônia e Sudeste brasileiro, que vivem em contato com os roedores silvestres, utilizando a proteína recombinante do vírus Araraquara expressa em Escherichia coli. Do total de estudados 1308 soros humanos estudados, na Amazônia (1078) encontramos 59 soros positivos (5%). Na cidade Machadinho do OesteRO os soros coletados durante o ano 2003, foram analisados 638, onde foram encontrados 20 soros positivos (4,5%); e no Rio Machado RO. foram analisados 435 soros da população ribeirinha onde foram encontrados 39 (5%) soros positivos, respectivamente. Após análise realizada em 151 soros humanos provenientes do Vale do Ribeira, em 2007; e 84 no Pontal do Paranapanema, em 2008, foram observados 14 positivos (9%) e 6 (7%) das amostras, respectivamente. / The genus Hantavirus of the family Bunyaviridae includes a large number of rodent-borne viruses that are distributed worldwide. The occurrence is due mainly to ecological disturbances and it is transmitted to the humans through inhalation of virus particles contained in the excreta of wild rodents. Two different human diseases known to be caused by Hantavirus: are Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome (HFRS) and Hantavirus Cardiopulmonary Syndrome (HPS). The main objective of this study was detected antibody against hanatavirus (IgG) by ELISA, in Amazon region and Brazilian Southwest populations who live in contact with the wild rodents, using recombinant protein (antigen) of the Araraquara virus expressed in Escherichia coli. We study 1308 human sera (1078 from Amazon region) and there were found 59 (5%) positive sera. From the city of Machadinho do Oeste RO (2003 year), 633 sera were analysed, where there were found to be 20 positive (4.5%) serums. In Machado river RO (2005 year), 435 sera of the river-dwelling population were analysed where there were found 39 (5%) positive sera, respectively. After analysis was accomplished for 151 human sera coming from the Vale do Ribeira - SP, in 2007, and 84 from the Pontal do Paranapanema - SP, in 2008, 14 (9%) and 6 (7%) of the samples were observed to be positive, respectively.
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Ocorrência de anticorpos anti-hantavírus (IgG) em populações humanas na região Amazônica e no estado de São Paulo (Mata Atlântica), utilizando proteína recombinante (nucleocapsídio) do vírus Araraquara. / Detection of antibodies (IgG) against hantavirus in human population of Amazon region and the state of Sao Paulo (Atlantic Forest), using recombinant antigen of Araraquara virus.

Felipe Alves Morais 11 November 2010 (has links)
A hantavirose (infecção por Hantavírus) é uma das zoonoses que vem preocupando as autoridades sanitárias de todo o mundo. Sua ocorrência se deve principalmente os distúrbios ecológicos é transmitida ao homem através de inalação de partículas virais contida na excreta de roedores. São conhecidas duas doenças humanas distintas causadas pelo Hantavírus: a Febre Hemorrágica com Síndrome Renal (FHSR) e a Síndrome Pulmonar e Cardiovascular (SPCVH). O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de anticorpos IgG anti-hantavírus, através do ELISA, em populações da Amazônia e Sudeste brasileiro, que vivem em contato com os roedores silvestres, utilizando a proteína recombinante do vírus Araraquara expressa em Escherichia coli. Do total de estudados 1308 soros humanos estudados, na Amazônia (1078) encontramos 59 soros positivos (5%). Na cidade Machadinho do OesteRO os soros coletados durante o ano 2003, foram analisados 638, onde foram encontrados 20 soros positivos (4,5%); e no Rio Machado RO. foram analisados 435 soros da população ribeirinha onde foram encontrados 39 (5%) soros positivos, respectivamente. Após análise realizada em 151 soros humanos provenientes do Vale do Ribeira, em 2007; e 84 no Pontal do Paranapanema, em 2008, foram observados 14 positivos (9%) e 6 (7%) das amostras, respectivamente. / The genus Hantavirus of the family Bunyaviridae includes a large number of rodent-borne viruses that are distributed worldwide. The occurrence is due mainly to ecological disturbances and it is transmitted to the humans through inhalation of virus particles contained in the excreta of wild rodents. Two different human diseases known to be caused by Hantavirus: are Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome (HFRS) and Hantavirus Cardiopulmonary Syndrome (HPS). The main objective of this study was detected antibody against hanatavirus (IgG) by ELISA, in Amazon region and Brazilian Southwest populations who live in contact with the wild rodents, using recombinant protein (antigen) of the Araraquara virus expressed in Escherichia coli. We study 1308 human sera (1078 from Amazon region) and there were found 59 (5%) positive sera. From the city of Machadinho do Oeste RO (2003 year), 633 sera were analysed, where there were found to be 20 positive (4.5%) serums. In Machado river RO (2005 year), 435 sera of the river-dwelling population were analysed where there were found 39 (5%) positive sera, respectively. After analysis was accomplished for 151 human sera coming from the Vale do Ribeira - SP, in 2007, and 84 from the Pontal do Paranapanema - SP, in 2008, 14 (9%) and 6 (7%) of the samples were observed to be positive, respectively.
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Avaliação da pureza de soros antiofídicos brasileiros e desenvolvimento de nova metodologia para essa finalidade / Evaluation of the purity and Brazilian sera antiophidic develop a new method for this purpose

Silva, Filipe Soares Quirino da January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-26T17:15:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 11.pdf: 2987494 bytes, checksum: 91278cbfb140a22e4c4ae00434713079 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Nesse trabalho, analisou-se a pureza de soros antiofídicos utilizados no Programa Nacional de Imunizações. Fez-se a avaliação com base no teor e composição de proteínas por eletroforese em gel de poliacrilamida, de soro antibotrópico. O principal componente identificado foi o fragmento F(ab)´2 – fração relevante para o efeito protetor do soro. Também se verificou a presença de proteínas contaminantes. Estas proteínas foram caracterizadas por western blot e espectrometria de massas, após a separação por eletroforese bidimensional. Os contaminantes identificados foram a IgG, albuminas eqüina e de asno, fragmentos da região variável da cadeia pesada e fragmentos de albumina. A concentração desses contaminantes varia bastante de um produtor para o outro, sendo que um dos produtores apresentou uma pureza substancialmente melhor que os demais. Desenvolveu-se um anticorpo para um método que visa a avaliação do conteúdo de imunoglobulina eqüina íntegra nos soros. Iniciou-se o desenvolvimento pela predição de epítopos na cadeia pesada da imunoglobulina eqüina, utilizando modelagem molecular. Nove prováveis epítopos foram identificados. O mapeamento dos epítopos utilizando a técnica de spot síntese confirmou a maioria das predições e possibilitou a identificação dos três mais reativos frente ao soro de coelho imunizado com IgG eqüina. Com base nesses resultados preparou-se um conjugado do peptídeo correspondente ao epítopo mais reativo com o toxóide tetânico. A imunização de coelhos com esse conjugado levou à obtenção de soro que apresentou reatividade frente à imunoglobulina eqüina, confirmando a possibilidade de seu uso como reativo para esse fim. Nenhum lote avaliado foi considerado insatisfatório frente à legislação vigente para soros antiofídicos. Da comparação da legislação em vigor com o estado da arte das indústrias de biotecnologia inferiu-se a necessidade de adequação desta lei, de maneira a considerar especificações que garantam uma melhor qualidade dos soros nacionais. Em função das diferenças nos resultados da avaliação de pureza das amostras de diferentes produtores, sugere-se a adoção de um programa de investimento para a nivelação tecnológica dos fabricantes. / A purity evaluation of antivenoms used in the Brazilian National Immunization Program was performed in this work. The main parameters used were total amount of protein and protein composition by SDS PAGE. The most important identified component was F(ab´)2 fragment, the relevant molecule for antivenom effect. Contaminant proteins were also present. These contaminants were characterized by western blot and mass spectrometry, after two dimensional electrophoresis separation. Identified contaminants were IgG, albumin horse and donkey, fragments from antibodies chains and albumin fragments. The amount of contaminants had a great variation from one producer to the other, and one manufacture had a better purification process than the others. A reagent for IgG identification in antivenoms was also developed. First, epitopes in horse IgG heavy chain were predicted using different molecular modeling methods. Eleven epitope candidates were identified. Epitope mapping confirmed most of the predicted sequences and the three most reactive epitopes were identified. With theses results, a conjugate between tetanus toxoid and a synthetic peptide was prepared. Rabbits were immunized with this conjugate, and after a second buster a high titer of antibodies against horse immunoglobulin was obtained. This serum has the potential applicalility to detect IgG in antivenoms. None of the batches was unsatisfactory to Brazilian guidelines for antivenom production. This guideline must be up dated, because it is old and the biotechnology industry had a lot of advances in last years. New regulatory specifications are the first step for better quality products. An investment program for the manufactures is also necessary, to adequate the purification process to most rigorous specifications.
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Comparação interlaboratorial entre metodologias e estabilidade da amostra na dosagem do perfil lipídico e PCR-US / Interlaboratory comparison of methodologies and sample stability in the dosage of the lipid profile and hsCRP

Vania Penha Pinto Castro 26 February 2015 (has links)
Segundo O`Kane et al, em 2008, foi demonstrado que 88,9% dos erros laboratoriais são realizados na fase pré-analítica. No laboratório de análises clínicas, o sistema de controle da qualidade pode ser definido como toda a ação sistemática necessária para dar confiança e segurança em todos os exames e prevenir a ocorrência de erros. O tempo de armazenamento pode variar de dias a meses ou mesmo anos, influenciando na definição da temperatura de estocagem. O armazenamento de longo prazo pode resultar na criopreservação inadequada para determinados analitos e pode desnaturar as lipoproteínas. Objetivos: Este trabalho teve como objetivo avaliar a fase pré-analítica, controle da qualidade interno e também avaliar o efeito do congelamento (- 80C) quanto ao tempo de armazenamento do soro e plasma de sangue colhido com ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA). As dosagens foram realizadas no Laboratório de Lípides LabLip, e estocadas em - 80 C por três anos, as mesmas foram redosadas no Serviço de Patologia Clínica da Policlínica Piquet Carneiro da UERJ com metodologias iguais e realizada a comparabilidade dos resultados. Foram analisados o perfil lipídico (CT, HDLc e TG) e PCR-US de 103 amostras, 73 no soro e 30 no plasma em dois laboratórios altamente qualificados. Discussão: Após redosagem foram encontrados nas dosagens de HDLc e CT resultados diminuídos respectivamente (correlação coeficiente no soro 0,48 e 0,62) teste t pareado no soro (CT p 0,0012 e HDLc p 0,0001). Conclusões: Os dados obtidos nas avaliações dos resultados de diferentes laboratórios e tempo de estocagem revelaram que as amostras quando armazenadas por um longo período após redosagem no soro, apresentaram diferenças em certos analitos, tais como CT e HDLc, no qual obteve-se resultados significativamente diminuídos, diferentemente no plasma, que após três anos de estocagem a -80C foram redosados e aplicados no teste t pareado, os analitos CT e PCR-US mantiveram a estabilidade. / According O`Kane et al in 2008, it was demonstrated that 88.9% of the laboratory errors are made in the pre-analytical phase. In the clinical laboratory, quality control system can be defined as any systematic action needed to give confidence and security in all examinations and prevent the occurrence of errors. The storage time can vary from days to months or even years, influencing the definition of storage temperature. The long-term storage can result in inadequate cryopreservation for certain analytes can denature and lipoproteins. This study aimed to evaluate the pre-analytical phase, internal quality control and also evaluate the effect of freezing (- 80 C) and the serum storage time and plasma blood collected with ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) . The measurements were performed in Lipids Laboratory - LabLip, and stored in - 80 C for three years, they were re-dosed at the Clinical Pathology Department of Polyclinic Piquet Carneiro da UERJ with the same methodologies and held the comparability of results. We analyzed the lipid profile (TC, HDL-C and TG) and hsCRP 103 samples, 73 serum and 30 plasma in two highly qualified laboratories. After redosagem were found in dosages of HDL-C and CT results decreased respectively (correlation coefficient serum 0.48 and 0.62) paired t test serum (CT p 0.0012 and HDLc p 0.0001). The data obtained in the evaluation of results of different laboratories and storage time showed that the samples kept for a long period after redosagem serum, showed differences in certain analytes, such as CT and HDLc, which gave results significantly decreased, unlike in the plasma, which after three years of storage at -80 C were applied in redosados and paired t-test analytes CT and hsCRP maintained stability.

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