A osteoporose é uma doença sistêmica caracterizada pela perda de conteúdo mineral do osso propiciando fraturas críticas. A regeneração óssea guiada e a terapia de fotobiomodulação (PBMT do inglês photobiomodulation therapy) favorecem a regeneração óssea. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da PBMT no reparação óssea guiada de lesões críticas de 36 ratas com osteoporose induzida por ooforectomia. Foram realizadas lesões ósseas estandardizadas nos ossos parietais e então tratadas de acordo com os seguintes grupos experimentais (n=12 lesões por grupo): Controle: sem tratamento adicional; Membrana - Colocação de uma membrana de colágeno suíno comercial (Bio-Gide®) dentro do leito cirúrgico; PBMT1- membrana e aplicação da PBMT1; PBMT2- membrana e aplicação da PBMT2. A PBMT foi realizada com laser de diodo infravermelho no modo contínuo, pontual e em contato (808nm, 40mW, 1,42W/cm2; PBMT1: 3s, 4J/cm2, 0,12J por ponto e PBMT2: 10s, 14J/cm2, 0,4J por ponto) imediatamente, 48 e 96 horas após a cirurgia. Quatro e oito semanas após a cirurgia os animais foram eutanasiados, a calota craniana dissecada, fixada e submetida à análise por microtomografia computadorizada. Foram coletados os seguintes dados: volume ósseo relativo (razão entre o volume ósseo e o volume total), número, espessura e separação de trabéculas, conectividade por densidade e índice de estrutura de modelo (SMI do inglês structure model index). Os dados de cada análise foram comparados pelo teste ANOVA dois critérios/Tukey ou Kruskal Wallis/Dunn e os dados de análises diferentes pelo teste de correlação de Spearman (p<0,05). Diferenças significativas foram observadas em 8 semanas. A PBMT, em especial nos parâmetros de menor energia (0,12J), acelerou o reparo ósseo resultando na obtenção de maior volume ósseo, com grande número de trabéculas, de espessura média, próximas e interconectadas e com valores baixos de SMI. Dentro das limitações deste trabalho in vivo, concluímos que a PBMT acelera a formação e maturação do tecido ósseo neoformado em lesões ósseas críticas de ratas osteoporóticas. / Osteoporosis is a systemic disease characterized by loss of bone mineral content leading to critical fractures. Guided bone regeneration and photobiomodulation therapy (PBMT) favor bone regeneration. The objective of the study was to evaluate the effect of PBMT on the guided bone repair of critical lesions of 36 rats with osteoporosis induced by oophorectomy. Standardized bone lesions were performed on the parietal bones and then treated according to the following experimental groups (n = 12 lesions per group): Control: no additional treatment; Membrane - Placement of a commercial swine collagen membrane (Bio-Gide®) within the surgical bed; PBMT1 membrane and PBMT1 application; PBMT2-membrane and PBMT2 application. PBMT was performed with continuous wave infrared diode lasers in punctual and contact mode (808nm, 40mW, 1.42W / cm2, PBMT1: 3s, 4J / cm2, 0,12J per ponit and PBMT2: 10s, 14J / cm2, 0.4J per point) immediately, 48 and 96 hours after surgery. Four and eight weeks after surgery, the animals were euthanized, the skulls dissected, fixed and submitted to the analysis by computerized microtomography. The following data were collected: bone volume, relative bone volume (ratio of bone volume to total volume), number, thickness and separation of trabeculae, density connectivity and model structure index (SMI). The data from each analysis were compared using the ANOVA two criteria / Tukey or Kruskal Wallis / Dunn test and the different analysis data by the Spearman correlation test (p <0.05). Significant differences were observed at 8 weeks. PBMT, especially in the lower energy parameters (0.12J), accelerated bone repair resulting in higher bone volume, with a large number of trabeculae, medium thickness, close to each other and interconnected, and with low SMI values. Within the limitations of this in vivo study, we concluded that PBMT accelerates the formation and maturation of neoformed bone tissue in critical bone lesions of osteoporotic rats.

A remodelação do processo alveolar após a exodontia é um fenômeno fisiológico que resulta em alterações das dimensões ósseas e que podem interferir na reabilitação protética. Para minimizar a perda óssea, estratégias de preservação do rebordo vêm sendo empregadas e a terapia por fotobiomodulação (TFBM) se destaca como uma opção de baixo custo e morbidade. Estudos prévios evidenciaram o impacto positivo da TFBM no reparo ósseo. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito TFBM no reparo alveolar. Vinte pacientes com indicação clínica de exodontia dos primeiros ou segundos molares bilateralmente foram selecionados e os lados direito e esquerdo de cada paciente distribuídos em um dos grupos experimentais: (1) TFBM, tratado com laser de baixa frequência, e (2) Controle, que recebeu o mesmo tratamento com o equipamento desligado; a aplicação foi realizada no pós-operatório imediato, 1, 2, 3, 4, 7 e 15 dias. Aos 45 dias pós-exodontia, espécimes de tecido do interior dos alvéolos foram coletados para análise microtomográfica e histológica. Os dados foram comparados utilizando o Teste-t pareado e o nível de significância foi de 5%. A análise morfométrica evidenciou diferenças estatisticamente significante entre os grupos para os seguintes parâmetros: superfície óssea (p=0,029), superfície óssea/volume total (p=0,028), número de trabéculas (p=0,025) e densidade de conectividade (p=0,029), maiores no grupo TFBM em relação ao Controle. O volume ósseo, volume ósseo/total, espessura e separação trabecular não apresentaram diferenças estatisticamente significantes (p=0,054; p=0,082; p=0,598 e p=0,109, respectivamente). Esses dados foram confirmados na análise histológica, onde foi identificado maior quantidade de tecido trabecular no grupo TFBM, enquanto no Controle fica evidente maior quantidade de tecido conjuntivo. Os resultados evidenciaram que a terapia de fotobiomodulação tem efeito positivo no reparo de alvéolos humanos. / The process of bone repair after tooth extraction is a physiological phenomenon which results in alterations of the bone dimensions and could interfere in prosthetic rehabilitation. To minimize bone loss, strategies for border preservation have been used and photobiomodulation therapy (TFBM) stands out as a low cost option and morbidity. Previous studies have shown the positive impact of TFBM on bone repair. The aim of this study was to evaluate the effect of TFBM on alveolar repair. Twenty patients with exodontia indication of the first or second molar bilaterally were chosen, right and left sides were distributed in one of the following experimental groups: (1) TFBM, treated with low frequency laser, and (2) Control group, who received the same treatment with the equipment off; besides, laser application was applied right after the post-operatory, after 1, 2, 3, 4, 7 and 15 days. After 45 days from the extraction, tissue samples from the alveoli were collected for micro-tomographic and histological analysis. Data were compared using the paired t-test and the accuracy level was 5%. A morphometric analysis showed statistically significant differences between the groups regarding the following parameters: bone surface (p = 0.029), bone surface / total volume (p = 0.028), trabeculae number (p = 0.025) and connectivity density (p = 0.029), higher in the TFBM group than in Control. The bone volume, bone / total volume, trabecular thickness and separation did not present statistically significant differences (p = 0.054, p = 0.082, p = 0.598 and p = 0.109, respectively). These data were confirmed in the histological analysis, where a greater amount of trabecular tissue was identified in the TFBM group, while in control group, a high amount of connective tissue was evident. The results showed that photobiomodulation therapy has a positive effect on the repair of human alveoli.

O objetivo deste estudo clinico duplo-cego, randomizado, controlado foi avaliar a resposta pós-operatória de pacientes após cirurgia de extração de terceiros molares inclusos que receberam a irradiação com diferentes protocolos do terapia de fotobiomodulação. Sessenta pacientes foram recrutados de acordo com os critérios de inclusão e exclusão previamente estabelecidos e distribuídos nos 2 grupos experimentais (irradiados) e no grupo placebo (não-irradiado); n=20. Para o grupo 1: ? 660nm, 100mW, 36J/cm2, 1J por ponto, 10 segundos/por ponto (3 pontos intra-oral 6 extra oralmente). Para o grupo 2: ? 808nm, 100mW, 107 J/cm2, 3J por ponto, 30 segundos/por ponto (3 pontos intra-oral 6 extra oralmente). Para todos os grupos os pacientes foram irradiados imediatamente após o procedimento cirúrgico e às 48h. No grupo placebo foi utilizado um laser com o recobrimento da ponta, não permitindo a saída da luz no tecido alvo. Depois da cirurgia todos os participantes foram orientados quanto as recomendações pós-operatórias de rotina. Os pacientes foram instruídos a preencher um diário para avaliação da intensidade da dor pós-operatória em uma escala numérica de dor do máximo ao mínimo após o término do efeito do anestésico, nos períodos de 4, 6, 8, 24 e 48 horas. Para avaliar o processo inflamatório foram usados dois parâmetros: trismo (avaliado mediante a máxima abertura inter-incisiva) e edema (avaliada mediante três medições extra-orais, por meio de uma fita métrica flexível). Para avaliar a deiscência foi realizada uma escala analógica visual e com um medidor de ponta seca com 4 escores (não existe deiscência, leve 5 mm, moderada 10 mm e grave 20 mm ou mais). As variáveis de inflamação e deiscência foram avaliadas em tres momentos diferentes por um observador calibrado no: pré-operatório, às 48 horas e aos 7 dias. Os valores obtidos foram submetidos à análise estatística para determinação da homogeneidade e normalidade da amostra. A partir desta análise foi escolhido o teste estatístico mais adequado para a comparação entre os grupos experimentais realizados. Os resultados revelaram uma correlação positiva entre a irradiação com terapia de fotobiomodulação e as variáveis estudadas. O laser infravermelho apresentou melhores resultados em termos de dor, trismo, edema e deiscência em relação ao laser vermelho, embora os resultados não forneçam dados estatisticamente significativos quando comparados ao grupo placebo. No entanto, os efeitos do laser após a cirurgia de terceiros molares requer mais estudos devido à grande aplicabilidade na área. / The objective of this random controlled double-blind clinical study, is to assess the post-operatory response of patients after a surgery of extraction of included third molars; that received radiation with different protocols of Low Level Laser. Sixty patients were recruited according to the inclusion and exclusion criteria previously established and distributed into two experimental groups (radiated) and into a placebo group (not radiated); n=20. For group 1: ? 660nm, 100mW, 36J/cm2, 1J per point, 10 seconds/per point (3 points intra-oral 6 extra orally). For group 2: ? 808nm, 100mW, 107 J/cm2, 3J per point, 30 seconds/per point (3 points intra-oral 6 extra orally). For all the groups the patients were irradiated immediately after the surgical process and 48 hours after. In the control group a covered tip laser was used; not allowing the exit of the light towards the alveoli tissue. After the surgery all the participants were learnt about the current post operatory recommendations. Patients were instructed to complete a diary to evaluate postoperative pain intensity on a numerical scale of pain from the maximum to the lowest after the end of the anesthetic effect, in the periods of 4, 6, 8, 24 and 48 hours. To assess the inflamatory process, two parameters were used: Trismus (a measure of the maximum inter-incisor separation) and edema (assessed by three extra-oral measurements done with a flexible measuring tape). To assess the dehiscence, an analogue scale with 4 data fields was used (nonexistent dehiscence, slight 5 mm, moderate 10 mm and severe 20 mm or more). The variables of inflamation and dehiscence were assessed in three different moments by a qualified observer in: pre-operatory, after 48 hours and after 7 days. The values obtained were subjected to a statistic analysis for determination of homogeneity and normality of the sample. From this analysis, the most suitable statistic test was chosen for comparison between experimental groups. The outcome showed a positive correlation between photobiomodulation therapy and the studied variables. The infrared laser showed better results in terms of pain, trismus, edema and dehiscence in comparison to the red laser, although the results did not provide meaningful statistic data when comparing to the control group. Nevertheless, the effects of laser after a surgery of third molars require further studies due to the wide application in the area.

A terapia de fotobiomodulação (PBMT do inglês photobiomodulation therapy) exerce efeitos benéficos em processos relevantes para a regeneração tecidual. A técnica de membranas celulares (CSs; cell sheets) pode gerar grande quantidade de células organizadas em uma matriz extracelular (MEC) produzida por essas células. A constituição de MEC das CSs pode ser de importância para a regeneração de tecidos. O colágeno tipo I, a fibronectina e a tenascina são proteínas da MEC já detectadas em CSs de células-tronco da polpa dentária humana. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos de diferentes parâmetros de PBMT sobre a arquitetura (histologia), composição proteica (Western blotting e imunoistoquímica) e ultraestrutura (MEV e MET) da MEC de CSs de células-tronco da polpa dental humana. As células-tronco foram descongeladas e recaracterizadas através da análise de seu perfil imunofenotípico avaliado pela expressão de moléculas de superfície utilizando citometria de fluxo para marcadores associados a células-tronco mesenquimais (MSC do inglês mesenchymal stem cells; CD105, CD146 e CD44) e não associados (CD45, CD34 e CD14). As CSs foram formadas em placas de cultivo celular após 15 dias em cultura em meio clonogênico suplementado com vitamina C (20 ?g/ml). As culturas celulares foram alocadas em 3 grupos experimentais diferentes, como segue: Controle: nenhum tratamento adicional; PBMT1 e PBMT2. A PBMT foi realizada com um laser diodo vermelho contínuo, aplicando-se os seguintes parâmetros gerais: 660nm, 20mW, 0,028cm2 e 0,71W/cm2. Os parâmetros do PBMT1 foram: 4s, 3J/cm2 e 0,08J por ponto, e o PBMT2: 7s, 5J/cm2 e 0,14J por ponto. As irradiações foram realizadas em dias alternados durante todo o período do experimento, em modo pontual (5 pontos / poço ou 13 por placas de 100 mm de diâmetro) em contato com a base da placa. Após a formação das CSs, 15 dias após o plaqueamento, estas foram submetidas a análises histológica, imunoistoquímica, Western blotting, microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. Comparações estatísticas foram realizadas (p <0,05). As células apresentaram perfil imunofenotípico clássico de MSCs, mostrando a expressão de marcadores associados a MSCs, enquanto a expressão dos marcadores não associados a MSCs estavam ausentes. O colágeno tipo I, colágeno tipo III e fibronectina estavam presentes no MEC das CSs. Western blotting revelou maior síntese de fibronectina nas CSs submetidas ao PBMT1. A ultraestrutura geral dos CSs foi diversa nos 3 grupos experimentais. As CSs do grupo PBMT1 apresentaram aspecto epitelióide, enquanto no grupo PBMT2 as CSs apresentaram células isoladas e fusiformes dispostas em feixes unidirecionais. MET identificou uma MEC mais madura e sinais de apoptose nos grupos submetidos à PBMT. A PBMT influenciou a composição e ultraestrutura da MEC de CSs de células-tronco da polpa dentária. Assim, a PBMT pode ser importante na determinação da qualidade mecânica das CSs, o que pode favorecer a terapia celular, facilitando o transplante das células-tronco. / Photobiomodulation therapy (PBMT) improves processes relevant to tissue regeneration. The technique of cell sheets (CSs) can generate large amount of cells organized in an extracellular matrix (ECM) produced by these cells. The constitution of the ECM of CSs could be of importance for tissue regeneration. Type I collagen, fibronectin and tenascin are ECM proteins already detected in CSs of human dental pulp stem cells. The aim of this study was to investigate the effects of different PBMT parameters on the architecture (histology), protein composition (Western blotting and immunohistochemistry) and ultrastructure (SEM and MET) of the MEC of CSs of human dental pulp stem cells. Dental pulp stem cells were thawed and recharacterized by the expression profile of the surface molecules using flow cytometry for mesenchymal stem cells (MSC) -associated (CD105, CD146 and CD44,) and non associated (CD45, CD34 and CD14) markers. The CSs were formed in cell culture plates after 15 days in culture in clonogenic medium supplemented with vitamin C (20 ?g/ml). The cell cultures were allocated in 3 different experimental groups, as follows: Control: no further treatment; PBMT1 and PBMT2. PBMT was performed with CW red diode laser applying the following general parameters: 660nm, 20mW, 0.028cm2 spot size and 0.71W/cm2. The PBMT1 parameters were: 4s, 3J/cm2 and 0.08J per point, and the PBMT2: 7s, 5J/cm2, and 0.14J per point. The irradiations were done on alternate days throughout the experimental time, in a punctual mode (5 points/well or 13 points/100mm-diameter dishes) in contact at the base of the plate. After the CSs formation, 15 days after plating, they were submitted to histology, immunohistochemistry, Western blotting, transmission electron microscopy and scanning electron microscopy analyses. Statistical comparisons were performed (p<0.05). The cells presented the classical immunoprofile of MSCs showing the expression of MSCs-associated markers, whereas the expression of the MSCs non-associated markers were absent. The type I collagen, type III collagen and fibronectin were present in the MEC of the CSs. Western blotting revealed a higher amount of fibronectin in the CSs submitted to PBMT1. The overall ultrastructure of the CSs was diverse in the 3 experimental groups. PBMT1 leads to epithelial-like CS, whereas the PBMT2 leads to a CSs with isolated fusiform cells arranged in unidirectional bundles. MET identified a more mature ECM and signs of apoptosis in the PBMT groups. PBMT may influence the composition and ultrastructure of the ECM of CSs of dental pulp stem cells. Thus, PBMT could be of importance in the determination of the mechanical quality of CSs, which may favor cell therapy by improving the CS transplantation approach.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-20T20:03:38Z No. of bitstreams: 1 Ediléa Monteiro de Oliveira.pdf: 896757 bytes, checksum: 8bbece5b716734756bc80dba68d50aa2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T20:03:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ediléa Monteiro de Oliveira.pdf: 896757 bytes, checksum: 8bbece5b716734756bc80dba68d50aa2 (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / OBJECTIVE: To evaluate the effects of Photobiomodulation Therapy (PBMT) applied immediately before resistance training in type 2 diabetic women. METHODS: Study 1 consisted of a systematic review registered in PROSPERO (CRD42017060857), with controlled and randomized studies based on PRISMA, in which databases such as LILACS, IBECS, Pubmed / MEDLINE, Cochrane Library, SciELO, PEDro, ScienceDirect and Bireme were consulted, combining the descriptors diabetes mellitus type 2 (T2DM), resistance training, aerobic exercise and oxidative stress in Portuguese, English and Spanish. The methodological quality of the articles was evaluated by the PEDro scale. Data were read, analyzed, extracted and synthesized. Study 2 consisted of a clinical, controlled, randomized, double-blind trial. 32 volunteers were selected between 60 and 75 years old, with a diagnosis of T2DM, following the pre-established inclusion / exclusion criteria. The quadriceps muscle strength was verified by the test of 10 maximal repetitions, the distance walked on the 6MWT and the oxidative metabolism through TBARs and TEAC. The volunteers were randomized into LED group (LTG) and placebo group (TG). The final sample consisted of 26 volunteers, being LTG (n = 13) and TG (n = 13). The intervention consisted of the 30 J PMBT and irradiation of 3 min and 48 s per area in the quadriceps of the dominant lower limb, immediately before the resistance training, for 8 weeks, 2 times a week, on non-consecutive days. The exercises were performed in 2 sets of 8 to 12 repetitions, with 1 to 2 minutes of interval between sets and exercises. All variables were collected pre and post resistance training. The data were analyzed by the GraphPad Prism 5 software and considered statistically significant p <0.05. RESULTS: In study 1 of a total of 746 articles, only 4 met the inclusion criteria. The synthesis of the four selected articles was done, which consisted of randomized controlled clinical trials, that were classified as having a high methodological quality according to an evaluation performed by PEDro Scale, as they obtained a score 6, in a scale from 0 to 10. It was submitted to the Brazilian Journal of Sports Medicine. In the study 2 for muscle strength in the pre and post-intervention LED group (26 ± 9.66 kg, 42.50 ± 7.90 kg, p <0.0001), for the pro-oxidant activity (TBARs) in the pre-LED group and post-intervention (3.76 ± 0.85 mg / ml, 2.52 ± 0.76 mg / ml, p <0.0001) and for antioxidant activity (TEAC) in the pre and post intervention LED group (1, 66 ± 0.13 μmol / L, 2.17 ± 0.23 μmol / L, p <0.0001) there was a statistically significant difference. Only the distance covered in the 6MWT did not present a statistically significant difference. CONCLUSION: For study 1, aerobic physical training seems to be the most effective in reducing glycemic levels and oxidative stress in sedentary individuals with T2DM. For study 2 there was improvement of muscle strength and oxidative metabolism of the group of elderly diabetic type 2 who underwent photobiomodulation therapy applied immediately before the resistance training. / OBJETIVO: Avaliar os efeitos da terapia por fotobiomodulação (TFBM) aplicado imediatamente antes do treinamento resistido em idosas diabéticas do tipo 2. MÉTODOS: O estudo 1 consistiu em uma revisão sistemática registrada no PROSPERO (CRD42017060857), com estudos controlados e randomizados, baseado no PRISMA, no qual foram utilizadas as bases de dados LILACS, IBECS, Pubmed/MEDLINE, Cochrane Library, SciELO, PEDro, ScienceDirect e Bireme sendo pesquisadas pela combinação dos descritores diabetes mellitus tipo 2 (DM2), treinamento de resistência, exercício aeróbio e estresse oxidativo em português, inglês e espanhol. A qualidade metodológica dos artigos foi avaliada pela escala PEDro. Procedeu-se a leitura, análise, extração e síntese dos dados. O estudo 2 consistiu em um ensaio clínico, controlado, randomizado e duplo-cego. 32 voluntárias foram selecionadas entre 60 e 75 anos, com diagnóstico de diabetes mellitus tipo 2, seguindo os critérios de inclusão/exclusão pré-estabelecidos. Foram verificadas a força muscular de quadríceps pelo teste de 10 repetições máximas, a distância percorrida por meio do TC6 e o metabolismo oxidativo por meio do TBARs e TEAC. As voluntárias foram aleatorizadas em grupo LED (GLT) e grupo placebo (GT). A casuística final consistiu em 26 voluntárias, sendo GLT (n=13) e GT (n=13). A intervenção consistiu na TFBM com a dose de 30 J e irradiação de 3 min e 48 s por área, no quadríceps do membro inferior dominante, imediatamente antes do treinamento resistido, durante 8 semanas, 2 vezes por semana, em dias não consecutivos. Os exercícios foram realizados em 2 séries de 8 a 12 repetições, com 1 a 2 minutos de intervalo entre séries e exercícios. Todas variáveis foram coletadas em situação de pré e pós treinamento resistido. Os dados foram analisadas pelo software GraphPad Prism 5 e considerado estisticamente significante p <0,05. RESULTADOS: No estudo 1 de um total de 746 artigos, apenas 4 atenderam aos critérios de inclusão. Foi realizada a síntese dos 4 artigos selecionados, que consistem em ensaios clínicos controlados e randomizados que foram classificados como de alta qualidade metodológica de acordo com avaliação realizada pela Escala PEDro, pois obtiveram como resultado a nota 6, em uma graduação de 0 a 10. Foi submetido à Brazilian Journal of Sports Medicine. No estudo 2 para a força muscular no grupo LED pré e pós-intervenção (26±9,66 Kg; 42,50±7,90 Kg; p<0.0001), para a atividade pró-oxidante (TBARs) no grupo LED pré e pós-intervenção (3,76±0,85 mg/ml; 2,52±0,76 mg/ml; p<0.0001) e para a atividade antioxidante (TEAC) no grupo LED pré e pós-intervenção (1,66±0,13 µmol/L; 2,17±0,23 µmol/L; p<0.0001) houve diferença estatisticamente significante. Somente a distância percorrida no TC6 não apresentou diferença estatisticamente significante. CONCLUSÃO: Para o estudo 1 o treinamento físico aeróbio parece ser o mais eficaz na diminuição dos níveis glicêmicos e do estresse oxidativo nos indivíduos sedentários com DM2. Para o estudo 2 houve melhora da força muscular e do metabolismo oxidativo do grupo de idosas diabéticas tipo 2 que foi submetida à terapia por fotobiomodulação aplicado imediatamente antes do treinamento resistido.