Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-10T20:45:08Z No. of bitstreams: 1 2017_MariaGeaneFontes.pdf: 4573833 bytes, checksum: ab50d2e6f2ab5d5e3f1d2ee9a669ced0 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-07-27T20:33:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MariaGeaneFontes.pdf: 4573833 bytes, checksum: ab50d2e6f2ab5d5e3f1d2ee9a669ced0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-27T20:33:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MariaGeaneFontes.pdf: 4573833 bytes, checksum: ab50d2e6f2ab5d5e3f1d2ee9a669ced0 (MD5) Previous issue date: 2017-07-27 / O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é uma das hortaliças mais importantes no Brasil e no mundo. A doença comumente conhecida como ‘vira cabeça’ (causada por espécies de Tospovirus) é uma das mais importantes afetando o tomateiro a nível mundial. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo estudar a interação tomateiro-tospovírus através da análise transcritômica na interação compatível Solanum lycopersicum–Groundnut ringspot virus (GRSV), da avaliação da resistência a tospovírus na cv. ‘Rey de Los tempranos’ (=‘PI 203230’) e da caracaterização de novas espécies hospedeiras de GRSV. No CAPÍTULO II foi realizado um estudo do transcritoma na interação compatível entre a cultivar de tomate ‘Santa Clara’ e GRSV com a finalidade de identificar genes inibidos ou induzidos após inoculação do vírus. Amostras foliares de plantas da cv. ‘Santa Clara’ (mecanicamente inoculadas com um isolado de GRSV e mock-inoculadas) foram coletadas a 0, 3, 5, 7 e 10 dias após a inoculação. Um ‘pool’ equimolar entre os períodos 3-5 (3-5DAI) e 7-10 (7-10DAI) foi estabelecido após a extração do RNA, análise da concentração e da qualidade. Um total de 12 bibliotecas de cDNA foram sequenciadas gerando um total de 396 milhões reads que foram mapeados no genoma de referência do tomateiro. Cerca de 9.206 genes foram diferencialmente expressos na interação S. lycopersicum ‘Santa Clara’ – GRSV. Dentre esses genes 5.562, 5.283 e 3.924 foram identificados como diferencialmente expressos nos períodos 0DAI, 3-5DAI e 7-10DAI, respectivamente. O espectro de eficiência da resistência identificada na cultivar de tomate ‘Rey de Los Tempranos’ foi investigada em bioensaios envolvendo a inoculação mecânica com uma coleção de isolados de Tospovirus (CAPÍTULO III). Plantas da linhagem resistente ‘LAM 147’ (portadora do gene Sw-5) também foram avaliadas e a cv. ‘Santa Clara’ (isolinha suscetível de ‘LAM 147’) foi utilizada como controle suscetível. Os resultados indicaram que a resistência do acesso ‘Rey de Los Tempranos’ se caracteriza como sendo do tipo espécie-específica (funciona somente contra isolados de TSWV) e isolado-específica (alguns isolados de TSWV são capazes de ‘quebrar’ a resistência). Plantas híbridas (F1) resultante de cruzamentos realizados entre ‘Rey de Los Tempranos’ e cv. ‘Santa Clara’ (inoculadas com o isolado TSWV #523) não exibiram sintomas, indicando que esta seria uma resistência conferida por fator(es) dominante(s). No CAPÍTULO IV, amostras foliares com sintomas similares aos induzidos por espécies de Tospovirus (clorose, necrose foliar intensa, mosqueado, anéis concêntricos e deformação foliar) foram coletadas em campos de soja [Glycine max (L.) Merrill], ervilha (Pisum sativum L.), jiló (Solanum aethiopicum L. var. gilo Raddi), almeirão (Cichorium intybus L.) e jurubeba vermelha (S. stramonifolium Jacq.) em Brasília–DF, Brasil. Para a identificação do agente causal dessas doenças foram realizados testes sorológicos, moleculares e bioensaios examinando o círculo de plantas hospedeiras. Resultados dos testes moleculares e sorológicos (ELISA) mostraram que as plantas sintomáticas foram positivas apenas para a espécie GRSV. Todos os isolados foram capazes de induzir sintomas característicos de tospoviroses nos ensaios de círculos de hospedeiras. Desta forma, o presente trabalho também relata pela primeira vez cinco novas espécies como hospedeiras naturais de GRSV em condições brasileiras. / The tomato (Solanum lycopersicum L.) is one of the most important vegetables in Brazil and around the world. The disease universally known as ‘spotted wilt’ is caused by species of Tospovirus and it is one of the most important problems affecting tomato crops worldwide. The main objectives of the present work were to study the tomato–tospovirus interaction via transcriptional analysis of a compatible interaction Solanum lycopersicum–Groundnut ringspot virus (GRSV), to evaluate the spectrum of resistance to tospovirus in the cultivar ‘Rey de Los Tempranos’ (=‘PI 203230’ ) and to characterize new GRSV hosts. A transcriptome study on the compatible interaction between the tomato cultivar ‘Santa Clara’ and GRSV (CHAPTER II) was conducted in order to identify genes inhibited and/or induced after virus infection in ‘Santa Clara’ (a highly susceptible tomato accession). Leaf samples of ‘Santa Clara’ plants mechanically inoculated with one GRSV isolate as well as mockinoculated plants were collected at 0, 3, 5, 7 and 10 days after inoculation (DAI). Equimolar pools of the periods 3-5 (3-5DAI) and 7-10 (7-10DAI) were established after RNA extraction and concentration and quality assessement. Twelve cDNA libraries were sequenced and a total of 396.2 millions reads were mapped into the tomato reference genome. About 9,206 genes were differentially expressed in the interaction S. lycopersicum ‘Santa Clara’–GRSV. Among these genes, 5,283; 5,562 and 3,924 genes were identified as differential expressed in the periods 0DAI, 3-7-5DAI, and 10DAI, respectively. The resistance spectrum of the cultivar ‘Rey de Los Tempranos’ was investigated in bioassays involving mechanical inoculation with 22 tospovirus isolates (CHAPTER III). Plants of the resistant inbred line ‘LAM 147’ (carrying the Sw-5 gene in homozygous condition) were also evaluated and the susceptible cultivar ‘Santa Clara’ (the near isogenic line of ‘LAM 147’) was used as susceptible control. The results indicated that the resistance of ‘Rey de Los Tempranos’ might be characterized as being species-specific (i.e. effective only against TSWV isolates) and isolated-specific (i.e. a subgroup of TSWV isolates was able to overcome the resistance). Hybrid plants (F1) derived from the crosses between ‘Rey de Los Tempranos’ and ‘Santa Clara’ (inoculated with the TSWV #523 isolate) did not exhibit symptoms, indicating that the resistance could be conferred by dominant factor(s). In CHAPTER IV, foliar samples displaying symptoms similar to those induced by Tospovirus species (chlorosis, necrosis, leaf mottling, concentric rings and leaf deformation) were collected in production fields of soybean [Glycine max (L.) Merrill], field pea (Pisum sativum L.), chicory (Cichorium intybus L.), scarlet eggplant (Solanum aethiopicum L. var. gilo Raddi), and red jurubeba (S. stramonifolium Jacq.) in Brasília-DF, Brazil. Serological tests, molecular assays, and host range studies were carried out in order to identify the causal agents of these diseases. Serological tests (ELISA) showed that symptomatic plants were positive only for GRSV. PCR analyses of the soybean, field pea, scarlet eggplant, chicory, and red jurubeba were conducted using primers specific for the nucleocapsid protein (N). The sequence analyses of the tospovirus-derived amplicons displayed high identity with GRSV isolates. All isolates were able to induce characteristic symptoms of tospoviroses in all plant species employed in the host range studies. Thus, the present work also reports for the first time five new plant species as natural hosts of GRSV under Brazilian conditions.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2000-09-29Bitstream added on 2014-06-13T21:00:03Z : No. of bitstreams: 1 storti_dc_me_ilha.pdf: 438021 bytes, checksum: dc88c1c130d9f83ab5b30b6b17a83b51 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Entre os fatores que limitam o potencial produtivo da cultura do tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) estão às pragas. A mosca-branca, Bemisia tabaci biótipo B, a traça-do- tomateiro, Tuta absoluta e a broca-pequena-do-fruto, Neoleucinodes elegantalis causam danos consideráveis à cultura, requerendo pulverizações sequenciais de inseticidas durante todo o ciclo da cultura, podendo alcançar 20 ou mais pulverizações. Na busca por alternativas que possibilitem a redução dessas pulverizações, avaliou-se a atividade de nova molécula química de perfil toxicológico favorável (chlorantraniliprole), associado ao tiametoxam, no manejo de pragas do tomateiro. O experimento foi instalado em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições. Cada parcela foi constituída de uma linha, com dez plantas do híbrido Débora Plus, espaçadas em 0,5 m. Os tratamentos e doses (g i.a. ha−1) foram: testemunha, chlorantraniliprole + tiametoxam a 40 + 80, 60 + 120 e 80 + 160 aplicados sobre a bandeja de mudas um dia antes do transplante (DAT), chlorantraniliprole + tiametoxam a 40 + 80 aplicados sobre a bandeja 1 DAT e em esguicho na planta e no solo (drench) 14 dias pós-transplante (DPT), chlorantraniliprole + tiametoxam a 60 + 120 aplicados sobre a bandeja de mudas 1 DAT e a 40 + 80 em drench 14 DPT, chlorantraniliprole + tiametoxam a 80 + 160 aplicados sobre a bandeja de mudas 1 DAT e a 40 + 80 em drench 14 DPT, chlorantraniliprole a 80 aplicado sobre a bandeja de mudas 1 DAT e tiametoxam a 160 em drench 14 DPT, imidacloprid a 210 aplicado sobre a bandeja de mudas 1 DAT e imidacloprid a 90 aplicado em três pulverizações foliares sequenciais aos 7, 14 e 21 dias pós-transplante, utilizando-se um pulverizador costal, propelido por CO2 comprimido. Semanalmente foram contados o número de ninfas de mosca-branca em 10 folíolos por parcela, número de folíolos com sintomas... / Among the factors limiting the yield potential of tomato crop (Lycopersicon esculentum Mill.) are the pests. The whitefly, Bemisia tabaci biotype B, the tomato pinworm, Tuta absoluta, and the fruit small borer, Neoleucinodes elegantalis cause considerable damage to crop, mainly due to sequential spraying of insecticides during the growing cycle and it can reach 20 or more sprays. Searching for alternatives that enable the reduction of these sprays, it was evaluated the activity of new molecule chemistry of favorable toxicological profile (chlorantraniliprole), associated with thiamethoxam and applied in different modes, on the pest management of tomato crop. The experiment was conducted in completely randomized design with four replications. Each plot consisted of one row with ten plants of the Debora Plus hybrid, spaced at 0,5 m. The treatments and doses (g a.i. ha−1) were: control, chlorantraniliprole + thiamethoxam at 40 + 80, 60 + 120 e 80 + 160, applied on the tray of seedlings one day before transplant (DBT), chlorantraniliprole + thiamethoxam at 40 + 80, applied on the tray of seedlings 1 DBT and in squirt on the plant and on the soil (drench) 14 days post transplant (DPT), chlorantraniliprole + thiamethoxam at 60 + 120 applied on the tray of seedlings 1 DBT and chlorantraniliprole + thiamethoxam at 40 + 80 in drench 14 DPT; chlorantraniliprole + thiamethoxam at 80 + 160 applied under the tray of seedlings 1 DBT and chlorantraniliprole + thiamethoxam at 40 + 80 in drench 14 DPT, chlorantraniliprole at 80 applied on the tray of seedlings 1 DBT and thiamenthoxam at 160 in drench 14 DPT, imidacloprid at 210 applied on the tray of seedlings 1 DBT and imidacloprid at 90 applied in three sequential foliar sprays at 7, 14 and 21 days post-transplant, using a backpack sprayer, propelled by CO2. Weekly were counted the number of whitefly nymphs on 10 leaves per plot, number of leaves,,, (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-30T11:29:30Z No. of bitstreams: 1 Shenia Santos Silva.pdf: 344038 bytes, checksum: 508c2ab377afd0196d74635e41168915 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-30T11:29:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Shenia Santos Silva.pdf: 344038 bytes, checksum: 508c2ab377afd0196d74635e41168915 (MD5) Previous issue date: 2008-02-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The tomato leafminer, Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) is one of the major tomato pest in Brazil. Mass trapping technique was tested as an alternative control of this pest, and although it provided a reduction of male population, no control below the economic injury level was attained. Therefore, this work tested the potential effect of reproductive and behavior factors on the low performance of T. absoluta mass trapping. A decrease in the fecundity and fertility, as well as an increment in the female longevity was observed after female mating delays. Calling activities changed with mating delays depending on the weight and feeding. Upon feeding, light females showed an increase in the calling intensity. Unlike these, heavy females showed a higher intensity and maintenance of calling. Apparently, females are still able of keeping the population growth, despite of the reproductive potential reduction. Males of tomato leafminer are polygynic and can mate up to 12 consecutive times, but they mated 6.5 times intheir lifespan on average. Males that mates consecutively and many times cause not only a reduction in the fecundity and fertility but also an increase of longevity of their females. Females of T. absoluta are, on minor scale, polyandric and this contributed only to increase the females longevity. In general, there is an asymmetry of multiple mating potential between males and females of T. absoluta, and males are more promiscuous than females. Males that escape the masstrapping may compensate part of the trapped male population and upon waiting; the females may mate with these males with almost no loss of reproductive potential. In conclusion, success of pheromone use depends on the capacity of competition among traps to eliminate as many males as possible, hence reducing the mating chance of this species in the field. / A traça-do-tomateiro, Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) é a principal praga da cultura do tomate nas principais regiões produtoras do Brasil e várias táticas de controle foram usadas com resultados variados. A técnica da coleta massal foi uma das táticas utilizadas, e apesar da redução da população dos machos, não se obteve controle abaixo do nível de dano econômico. Deste modo este estudo foi realizado para esclarecer se aspectos da reprodução deste inseto podem contribuir para o baixo desempenho da coleta massal. Nesse sentido, verificou-se que quando ocorre o retardo do acasalamento das fêmeas, há redução da sua fecundidade e fertilidade, e incremento da sua longevidade. O chamamento das fêmeas altera-se ao longo do retardo dos acasalamentos de acordo com o peso e alimentação. A alimentação para as fêmeas leves influencia no aumento da intensidade de chamamento. As fêmeas pesadas são superiores em termos de intensidade e manutenção do chamamento. Desta forma, as fêmeas da T. absoluta reduzem seu potencial reprodutivo, mas ainda continuam capazes de promover o crescimento populacional. Os machos são poligínicos, sendo capazes de realizar até 12 cópulas consecutivas, apresentando em média 6,5 acasalamentos durante sua vida. Machos que realizam acasalamentos múltiplos e consecutivos promovem reduções de fecundidade, fertilidade e aumento de longevidade das suas fêmeas. As fêmeas desta espécie são em pequena escala poliândricas e a sua ocorrência promove apenas aumento da sua longevidade. Existe uma assimetria do potencial de acasalamentos múltiplos entre machos e fêmeas em T. absoluta, sendo os machos mais promíscuos. Os machos que sobrevivem à ação da coleta massal podem compensar parte da população masculina que é aniquilada nas armadilhas, sendo as fêmeas capazes de esperar pelos sobreviventes com pequena perda do seu potencial reprodutivo. Neste contexto, para o sucesso do emprego do feromônio, alterações da capacidade de competição das armadilhas devem ser visadas para eliminar o maior número possível de machos, reduzindo as chances da ocorrência do acasalamento deste inseto em campo.

O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é uma das hortaliças mais cultivadas no mundo. No Brasil, a cultura está entre as de maior importância econômica e social. Nos últimos anos, foi detectada a incidência de uma espécie de crinivirus, Tomato clorosis virus (ToCV), nos principais estados produtores dessa hortaliça no país. O ToCV é transmitido por Bemisia tabaci biótipo B de maneira semi-persistente. O objetivo deste trabalho foi identificar hospedeiros alternativos do isolado brasileiro do ToCV, que podem atuar como fonte primária de inóculo do patógeno. Um isolado brasileiro (A JQ952600) foi inoculado em plantas sadias de 73 espécies, pertencentes a 14 famílias, por meio de B. tabaci biótipo B, em testes com e sem chance de escolha do vetor. Também foi avaliada a preferência para oviposição do vetor em testes com chance de escolha. Por último, foi feita a recuperação do vírus das hospedeiras suscetíveis infectadas para plantas de tomate por meio do vetor, em teste sem chance de escolha. A detecção do ToCV foi feita por nested- PCR a partir de RNA total extraído das amostras foliares. Foram usados os pares de oligonucleotídeos iniciadores HS-11 / HS-12 e TOC-5 / TOC-6. O amplicon específico do ToCV de 463 pb esperado foi detectado no RNA total extraído de 19 espécies pertencentes às famílias Solanaceae e Amaranthaceae. A identidade do isolado viral foi confirmada por sequenciamento de nucleotídeos de alguns amplicons. Confirmou-se a suscetibilidade de Chenopodium album, Datura stramonium, Gomphrena globosa, Nicotiana benthamiana, N. clevelandii, N. edwarsonii, N. glutinosa, N. tabacum, Solanum americanum, S. pimpinellifolium e Spinacea oleracea à infecção com o ToCV. As espécies Capsicum annuum, Physalis angulata, P. peruviana e S. tuberosum var. Asterix, relatadas como suscetíveis ao vírus no campo, foram infectadas experimentalmente. Beta vulgaris var. cicla, Chenopodium quinoa, S. aculeatissimum, S. melongena e S. sessiliflorum foram identificadas pela primeira vez como espécies suscetíveis ao ToCV. No teste de transmissão com chance de escolha do vetor, verificou-se alta suscetibilidade de quase todas as espécies à infecção com o ToCV. Também se encontrou que a grande maioria das espécies suscetíveis ao vírus exibiu boa preferência à oviposição de B. tabaci biótipo B. Porém, as espécies da família Amaranthaceae mostraram os menores valores para estas duas variáveis. No teste de recuperação do ToCV para plantas de tomate, todas as espécies identificadas como suscetíveis ao vírus mostraram ser boas fontes de inóculo do patógeno. A eliminação de hospedeiros alternativos do vírus presentes na vegetação espontânea, restos de culturas e plantas voluntarias infectadas deve ser parte das estratégias de manejo do amarelão do tomateiro. / The tomato (Solanum lycopersicum L.) is one of the most cultivated plants in the world. In Brazil, tomato crops are among the most economic and social crops. In recent years, the incidence of a crinivirus species, Tomato chlorosis virus (ToCV), in the main tomato producing states in the country has been constantly observed. The ToCV is transmitted by Bemisia tabaci biotype B in a semi-persistent manner. The aim of this study was to identify alternative hosts of the Brazilian isolate of ToCV, which can act as a primary source of inoculum of the pathogen in the field. A Brazilian isolate of the crinivirus (A JQ952600) was inoculated in healthy plants of 73 species, belonging to 14 families, through B. tabaci biotype B, in tests with and without chance of choice for the vector. It was also evaluated the preference for vector oviposition on plants used for the free choice transmission test. Finally, the recovery of the virus from susceptible species to tomato plants was carried out by B. tabaci biotype B in tests without chance of choice for the vector. The detection of ToCV was done by nested PCR from total RNA extracted from leaf samples. Primer pairs HS-11 / HS-12 and TOC-5 / TOC-6 were used. The specific amplicon of 463 bp of the ToCV was detected in total RNA extracted from 19 species of the Solanaceae and Amaranthaceae families. The identity of the virus isolate was confirmed by nucleotide sequencing of some amplicons. The results confirmed that Chenopodium album, Datura stramonium, Gomphrena globosa, Nicotiana benthamiana, N. clevelandii, N. edwarsonii, N. glutinosa, N. tabacum, Solanum americanum, S. pimpinellifolium, and Spinacea oleracea were susceptible to ToCV infection. Capsicum annuum, Physalis angulata, P. peruviana, and S. tuberosum var. Asterix, reported as susceptible to ToCV in the field, were experimentally infected. Beta vulgaris var. cicla, Chenopodium quinoa, S. aculeatissimum, S. melongena e S. sessiliflorum were for the first time identified as susceptible to infection with ToCV. The high susceptibility of the above-mentioned species was confirmed in the free choice transmission test with B. tabaci biotype B. It was also found that the vast majority of the susceptible species to the virus exhibited good preference for oviposition of B. tabaci biotype B. Except the species of the Amaranthaceae family, which showed the lowest values for both variables. For ToCV recovery test to tomato plants, all species identified as susceptible to the virus proved to be good sources of inoculum of the pathogen. The elimination of alternative hosts of the virus present in natural vegetation, abandoned crops and voluntary infected plant debris should be part of the management strategies of tomato yellowing.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcos F Oliveira.pdf: 565936 bytes, checksum: 18bd41ea7085a64e38785d2f152d4eab (MD5) Previous issue date: 2008-02-26 / Bemisia tabaci biotype B presently constitutes a great threat not only for the tomato crop but to several other cultures. The objective of this research was to evaluate the influence of the nutrition of tomato in the resistance induction for shelter, feeding and oviposition of B. tabaci biotype B. The experiments were driven in Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos (EA/UFG), Goiânia, Goiás, Brasil. Three experiments were accomplished outdoors in temperature conditions, humidity and natural photoperiod. In the first different sources of nitrogen were tested, in the second different ratios nitrogen/potassium and in the third party different associations between corrected soil and earthworm manure. Each experiment was subdivided in: with choice chance and without chance of choice of the insect, the first one was carried out on randomized blocks design and the second one completely randomized design. Each treatment had four replications, with one plant per pot. In the first experiment the treatments used were: corrected soil (without addition of fertilizers); potassium saltpeter; urea; phosphate monoamonic; nitrate of calcium; sulfate of ammonium; chicken manure; bone flour; castor oil plant pie; composed organic; and earthworm manure. In the second experiment the ratios were compared N/K: 1/1; 2/1; 4/1; 8/1; 1/2; 1/4; and 1/8. In the third experiment the associations corrected soil were compared + earthworm manure: 100% + 0%; 80% + 20%; 60% + 40%; 40% + 60%; 20% + 80%; 0% + 100%. Five evaluations on the observation of the behavior of B. tabaci biotype B in relation to the feeding preference and shelter were accomplished: 3, 27, 51, 75 and 99 hours after the insect infestation. Leaves were collected at four days after the insect infestation, and appraised in laboratory for oviposition analysis. The different sources of nitrogen, ratios nitrogen/potassium, and associations between corrected soil and earthworm manure used in the tomato fertilization did not induce any effect at the feeding or oviposition of B. tabaci biotype B behavior. / A Bemisia tabaci biótipo B constitui-se atualmente uma grande ameaça não só a cultura do tomateiro mais a diversas outras culturas. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar a influência da nutrição do tomateiro na indução de resistência para abrigo, alimentação e oviposição de B. tabaci biótipo B. Os experimentos foram conduzidos na Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos (EA/UFG), Goiânia, Goiás, Brasil. Foram realizados três experimentos ao ar livre em condições de temperatura, umidade e fotoperíodo naturais. No primeiro foram testadas diferentes fontes de nitrogênio, no segundo diferentes relações nitrogênio (N)/potássio (K) e no terceiro diferentes associações entre solo corrigido e esterco de minhoca. Cada experimento foi subdividido em: com chance de escolha e sem chance de escolha do inseto, para o primeiro foi utilizado o delineamento de blocos casualizados e para o segundo o delineamento inteiramente casualizado. Cada tratamento foi composto por quatro repetições, com uma planta por vaso. No primeiro experimento os tratamentos utilizadas foram: solo corrigido (sem adição de adubos); salitre de potássio; uréia; fosfato monoamônico; nitrato de cálcio; sulfato de amônio; esterco de galinha; farinha de osso; torta de mamona; composto orgânico; e esterco de minhoca. No segundo experimento foram comparadas as relações nitrogênio/potássio: 1/1; 2/1; 4/1; 8/1; 1/2; 1/4; e 1/8. No terceiro experimento foram comparadas as associações solo corrigido + esterco de minhoca: 100% + 0%; 80% + 20%; 60% + 40%; 40% + 60%; 20% + 80%; 0% + 100%. Para observação do comportamento de B. tabaci biótipo B em relação à preferência alimentar e abrigo foram realizadas cinco avaliações às 3, 27, 51, 75 e 99 horas após a infestação dos insetos. Para a análise da oviposição, foram coletadas folhas quatro dias após a infestação dos insetos, e avaliadas em laboratório. As diferentes fontes de nitrogênio, relações nitrogênio/potássio e associações entre solo corrigido e esterco de minhoca, utilizadas na adubação de plantas de tomateiro, não foram capazes de induzir a expressão de nenhum efeito inibidor de alimentação, abrigo ou oviposição de B. tabaci biótipo B.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-19T13:51:31Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 481806 bytes, checksum: 719ba3466811da8459b6597dd508ae83 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-19T13:51:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 481806 bytes, checksum: 719ba3466811da8459b6597dd508ae83 (MD5) Previous issue date: 2001-11-24 / Avaliou-se a eficiência de diferentes indutores de resistência nas espécies de tomateiro Lycopersicon esculentum cv. Miller (suscetível) e L. hirsutum v. glabratum introdução CNPH 417 (resistente) ao agente etiológico da “pinta preta” do tomateiro, Alternaria solani. Os indutores de resistência testados foram quitosana, ácido salicílico, benzotiadiazol e ácido acetil salicílico tamponado. Verificou-se que somente o ácido salicílico e o benzotiadiazol foram capazes de induzir resistência. Em todos os ensaios, a espécie resistente apresentou um número médio de lesões por folíolos inferior ao da espécie suscetível, tratada ou não tratada. O número médio de lesões por folíolos apresentados pela espécie resistente não foi, em nenhum dos ensaios, afetado por quaisquer tipos de indutores de resistência. Realizou-se a histopatologia comparativa da interação hospedeiro suscetível x A. solani, tratado ou não com os indutores de resistência ácido salicílico, benzotiadiazol e ácido acetil salicílico tamponado e da interação hospedeiro resistente x A. solani, não induzido. Coletaram-se os materiais para exame 24, 48 e 72 horas após a inoculação. Este estudo foi realizado com o material diafanizado em cloral hidratado saturado. Verificou-se que as substâncias indutoras de resistência interferiram na adesão foliolar dos esporos e, ou, tubos germinativos, reduzindo o número médio de lesões de esporos nas primeiras 48 horas. Em CNPH 417, observou-se que o número médio de lesões era menor até o último intervalo estudado, de 72 horas. As barreiras morfológicas observadas por contraste diferencial de interferência Nomarski, como modificações de paredes, modificações citoplasmáticas e modificações morfológicas observadas em pontos distantes aos do sítio de penetração, de modo geral, foram as mesmas observadas na testemunha. Entretanto, o contraste diferencial não fornece nenhum indicativo sobre a composição química das barreiras. Portanto, é possível afirmar que, apenas como estruturas físicas, as modificações estruturais da parede e do citoplasma não foram eficientes para reduzir a penetração do fungo e não diferiram entre plantas induzidas e testemunha, embora pudessem apresentar efeito de retardamento da penetração e da colonização. / The synthetic chemicals chitosan, salicylic acid, benzothiadiazol and buffered acetyl salicylic acid were evaluated as inducers of resistance to Alternaria solani in Lycopersicon esculentum cv. Miller (susceptible) and L. hirsutum var. glabratum CNPH 417 (resistant). The treatments with salicylic acid and benzothiadiazol reduced lesion numbers in susceptible tomato. There was no addititional effect of the chemical treatments in reducing lesion numbers in the resistant species. Chitosan and buffered acetylsalicylic acid were ineffective as resistance inducers. For histological study, leaflets of susceptible tomato L. esculentum cv. Miller were treated with salicylic acid, buffered acetylsalicylic acid or benzothiadiazol, and sample tissues were cleared in chloral hydrate and examined by differential interference contrast microscopy. The chemical treatments reduced numbers of spore and of germtubes attached to the cell epidermis. Cytoplasmic aggregation, changes in the cell wall and other modifications of the host cell were also observed. These modifications might contribute as structural defense mechanisms impeding host cell penetration and retarding fungal growth. No differences in frequency were found in treated and nontreated tomato tissues. However, these structural modifications as inducing mechanisms of resistance cannot be discarded yet since further clarifications are needed, such as those provided by cytological and biochemical studies. / Tese importada do Alexandria

Os tricomas são estruturas de origem epidérmicas que podem ser classificados em dois tipos: glandulares e não glandulares (tectores) e estão relacionados, principalmente, com estratégias de defesas de plantas. Pouco se conhece sobre a via de desenvolvimento dos tricomas glandulares, já que a maior parte dos estudos é em Arabidopsis thaliana, modelo no qual os tricomas glandulares são ausentes. O gênero Solanum possui uma grande diversidade de tricomas, em especial glandulares (tipos I, IV, VI e VII). O estudo de tais estruturas vem ganhando cada vez mais destaque, já que são fontes de diversos metabólitos secundários de importância econômica e ecológica. Espécies selvagens são consideradas recursos genéticos para o tomateiro (S. lycopersicum), tais como S. galapagense, a qual possui variações genéticas naturais que lhe confere maior resistência ao ataque de herbívoros. Entre essas variações está a presença de tricomas glandulares do tipo IV, uma fonte do aleloquimico acilaçúcar. A ausência de tricomas glandulares do tipo IV é considerada uma das causas da suscetibilidade do tomateiro cultivado a insetos. No presente trabalho, foi demonstrado que o tomateiro cultivado na verdade forma tricomas do tipo IV, mas estas estruturas estão presentes somente até o primeiro par de folhas, além dos cotilédones. Desse modo, a presença de tricomas tipo IV em espécies selvagens seria considerada uma neotenia, ou seja, a manutenção de estruturas juvenis na fase adulta. Além de se determinar que mutantes de tomateiro afetando a juvenilidade (e.g. Mouse ears e fasciated) apresentam tricomas tipo IV na fase adulta, a formação dessas estruturas correlacionou se com a expressão de miR156, sendo também presentes em grandes quantidades em uma linhagem transgênica superexpressando esse micro RNA relacionado à juvenilidade. Quanto à base genética da presença de tricomas tipo IV nas espécies selvagens, no presente trabalho foi criada uma linhagem quase isogênica ao modelo genética Micro-Tom (MT) contendo a variação genética natural por nós denominada Galapagos enhanced trichomes (Get). Tal variação é derivada de S. galapagense e condiciona a presença de tricomas tipo IV em folhas adultas, quando introgredida em tomateiro cultivado (cv. Micro-Tom). O mapeamento preliminar de Get no cromossomo 2 de tomateiro também foi realizado através do mapa de \"single nucleotide polymorphism\" (SNPs) entre MT e a linhagem MT-Get. A eventual clonagem de GET irá contribuir não somente para se desvendar a base genética da formação de tricomas glandulares, como também contribuir para se criar variedades resistentes a insetos, reduzindo o uso de agrotóxicos. / Trichomes are epidermal structures that can be classified into two types: glandular or non-glandular, and they are mainly related to plant defense strategies. Little is known about the glandular trichome development pathway, since most of the studies are in Arabidopsis thaliana, a model in which this kind of trichome is absent. The Solanum genus has a wide variety of trichomes, especially glandular ones (Types I, IV, VI and VII). The study of these structures are gaining more prominence, since they are sources of several secondary metabolites of economic and ecological importance. Wild species are considered genetic resources for tomato (S. lycopersicum), such as S. galapagense which has natural genetic variations that gives resistance to herbivores attack. Among these variations is the presence of type IV glandular trichomes, a source of the acyl sugar allelochemical. The absence of type IV glandular trichomes is considered to be one of the causes of tomato susceptibility to insects. In this study, it was determined that tomato actually has type IV trichomes, but these structures are present only in the cotyledons and the first pair of leaves. Thus, the presence of type IV trichomes in wild species would be considered a neotenic feature, i.e. the maintenance of juvenile structures in adulthood. In addition, it was determined that tomato mutants affecting youthfulness (e.g. Mouse ears and fasciated) have type IV trichomes in adulthood. Moreover, the presence of these structures was correlated with the expression of miR156, besides the increased formation of type IV trichomes in a transgenic line overexpressing this micro RNA related to youthfulness. On the genetic basis of type IV trichomes presence in wild species, in this work it was created a near isogenic line (NIL) containing the natural genetic variation here named Galapagos enhanced trichomes (Get). This variation is derived from S. galapagense and harbors type IV trichomes in adult leaves, when introgressed in cultivated tomato (cv. Micro-Tom). The preliminary genetic map of Get in the tomato chromosome 2 was conducted through the analysis of \"single nucleotide polymorphism\" (SNPs) between MT and MT-Get. The eventual cloning of GET will contribute not only to unravel the genetic basis of glandular trichomes formation, but will also contribute to create varieties resistant to insects, reducing the pesticides use.

Ao longo dos últimos anos, o radical livre gasoso óxido nítrico (NO) vem ganhando destaque como uma importante molécula sinalizadora em respostas fotomorfogênicas em plantas. Sua produção e dagradação parecem incluir uma diversificada gama de rotas bioquímicas, entretanto, a importância relativa de cada um dos sistemas capazes de regular sua disponibilidade e toxidade nos tecidos vegetais ainda permanece pouco compreendida. Dentre as possíveis rotas de conjugação e degradação do NO em tecidos vegetais, postula-se que a glutationa (GSH) desempenhe um papel de destaque no armazenamento desse radical livre por meio da formação reversível da S-nitrosoglutationa (GSNO), sendo possível sua subsequente degradação através da ação da enzima S-nitrosoglutationa redutase (GSNOR). No presente trabalho investigamos a influência da luz sobre o metabolismo de NO em duas etapas de desenvolvimento vegetal caracterizados pela ocorrência de eventos de diferenciação plastidial: (I) o desestiolamento de plântulas e (II) o amadurecimento de frutos carnosos de tomateiro (Solanum lycopersicum). Além do genótipo selvagem Micro-Tom (MT), também foram utilizados os mutantes fotomorfogênicos aurea (au) e high pigment 1 e 2 (hp1 e hp2). Durante o desestiolamento das plântulas de tomateiro constatou-se um incremento progressivo tanto nos teores endógenos quando nas taxas de degradação de NO, bem como na atividade da enzima GSNOR. Sob condições luminosas similares, mutantes com respostas exageradas à luz apresentaram incrementos ainda mais evidentes nesses parâmetros do que aqueles observados no genótipo selvagem. A aplicação de inibidores de S-nitrosilação de proteínas, bem como a avaliação do conteúdo de espécies reativas de oxigênio (ROS) indicaram que tanto a formação de S-nitrosotiois quanto a interação do NO com ROS contribuíram para a determinação da capacidade de remoção de NO nos tecidos fotossinteticamente ativos de tomateiro. Em frutos, observou-se uma correlação positiva entre a atividade da enzima nitrato redutase (NR) e o padrão temporal de produção de NO, uma vez que ambos os parâmetros apresentaram maiores níveis em frutos imaturos. O amadurecimento desses frutos foi acompanhado por uma diminuição transitória dos conteúdos de NO ao passo que as taxas de degradação de NO mantiveram-se bastante reduzidas durante todo o processo de amadurecimento, sugerindo a existência de um estoque de NO na forma de GSNO ou algum outro S-nitrosotiol. A sinalização luminosa influenciou positivamente tanto a produção quanto a degradação de NO em frutos imaturos de tomateiro. Em conjunto, os resultados obtidos permitem concluir que o metabolismo do NO em tomateiro é fortemente controlado pela luz, a qual é capaz de modular conjuntamente as taxas de produção e degradação desse importante composto sinalizador. / In recent years, the gaseous free radical nitric oxide (NO) has emerged as an important signaling molecule in plant photomorphogenic response. NO production and degradation seems to include a wide range of biochemical routes; however, the relative importance of which one of the systems capable of regulating NO availability and toxicity in plant tissues remains elusive. Among all potential NO degradation and conjugation routes in plant tissues, it has been suggested that gluthathione (GSH) plays a key role in NO storage due to the formation of S-nitrosogluthathione (GSNO), being possible its subsequent degradation by the action of enzyme S-nitrosoglutathione reductase (GSNOR). In this work, we have investigated the light influence on NO metabolism during two plant developmental events characterized by the occurrence of plastidial differentiation: (I) seedling de-etiolation and (II) fruit ripening of tomato (Solanum lycopersicum). Besides the wild-type Micro-Tom (MT) genotype, the tomato photomorphogenic mutants aurea (au) and high pigment 1 and 2 (hp1 and hp2) were also employed in this study. During the de-etiolation of tomato seedlings, a progressive increment was observed in the NO endogenous levels and degradation rates as well as in the GSNOR activity. Under similar light conditions, light hypersensitive mutants exhibited more conspicuous increases in these parameters than those detected in the wild-type genotype. Feeding protein S-nitrosylation inhibitors and measurements of reactive oxygen species (ROS) production indicated that both S-nitrosothiols formation and NO interaction with ROS may to contribute for determining the NO removal capacity in photosynthetically active tissues of tomato. In fruits, a positive correlation was observed between nitrate reductase (NR) activity and the temporal pattern of NO production since both parameters exhibited increased levels in immature fruits. The ripening of theses fruits was accompanied by a transitory reduction in endogenous NO levels whereas its degradation rates were maintained reduced all over the ripening process, thereby suggesting the existence of a more stable NO reservoir such as GSNO or some other S-nitrosothiol. In general light signaling positively influenced both NO production and degradation in mature green tomato fruits. Altogether, the data obtained indicated that tomato NO metabolism is significantly influenced by light, which is able to simultaneous modulate both the production and degradation of this important signaling compound.

O metal pesado cádmio (Cd) é um contaminante ambiental de grande relevância devido aos vários problemas que pode causar para a agricultura, como perdas na produção e na qualidade dos alimentos, podendo oferecer riscos à saúde humana através do consumo de vegetais contaminados. Neste trabalho abordamos duas formas diferentes e independentes para o estudo do estresse oxidativo. Exploramos métodos para compreender melhor: a interação do Cd com o sistema antioxidante de pimentas; bem como os mecanismos responsáveis pela tolerância ao metal utilizando tomateiros com diferentes graus de tolerância em diferentes combinações de enxertia. Resultados interessantes foram obtidos para a combinação de uma variedade sensível enxertada em uma variedade tolerante ao Cd, que apresentou melhor crescimento enxertada em relação a cada uma das variedades enxertadas como controle, inclusive na presença de Cd. Tais resultados podem indicar novos caminhos de pesquisa. No estudo com a pimenta também encontramos respostas notáveis com relação ao sistema antioxidante, em especial, na resposta do ciclo ascorbato-glutationa, cujos compostos antioxidantes foram os principais protagonistas na defesa da planta contra o estresse por Cd. / The heavy metal cadmium (Cd) is an environmental contaminant of great relevance because this element can cause several problems to agriculture, such as production decrease and poor food quality, thereby posing risk to human health through consumption of contaminated vegetables. In this research, we used two different and independent approaches to study the oxidative stress. We explored methods: to better understand Cd interaction with the antioxidant system of pepper; as well as the mechanisms responsible for conferring tolerance to this metal, using tomatoes with different degrees of tolerance grafted in different combinations. Interesting results were obtained, especially when the sensitive tomato line was grafted onto the most tolerant one, presenting a better growth index even in the presence of Cd. These results might lead to new research alternatives and approaches. The results from the study with pepper revealed noteworthy responses regarding the antioxidant system, especially in the ascorbate-glutathione cycle response, whose antioxidant compounds were the main protagonists in the plant defense against stress by Cd.

Os hormônios auxina e citocininas são essenciais ao desenvolvimento das plantas, pois controlam os processos de divisão, expansão e diferenciação celular, os quais, por sua vez, influenciam desde a formação do embrião até o amadurecimento dos frutos e senescência. Auxinas e citocininas regulam respostas fisiológicas comuns, sugerindo haver múltiplos mecanismos de interação. Neste trabalho, um modelo para estudar a interação entre auxinas e citocininas no controle do desenvolvimento é proposto, sendo baseado em plantas mutantes e transgênicas, além de duplos mutantes, com alterações na sensibilidade ou metabolismo de auxina e citocinina. O mutante bushy root (brt) foi caracterizado como pouco sensível à citocinina e sugere uma importante função da citocinina no desenvolvimento da semente e na determinação da dominância apical em tomateiro. Os mutantes potato leaf (c) e entire (e) foram introgredidos no background Micro-Tom (MT), caracterizados e utilizados para verificar como eles afetam a sensibilidade à auxina e como interferem no desenvolvimento da planta. Esses mutantes foram comparados com MT, com o mutante diageotropica (dgt), que é pouco sensível à auxina, e com os duplos mutantes c dgt e dgt e. A mutação c não alterou a sensibilidade à auxina e estaria influenciando apenas a arquitetura foliar. O mutante e parece ser mais sensível à auxina com relação à capacidade de formar raízes in vitro e partenocarpia. O duplo mutante dgt e mostrou fenótipo aditivo (intermediário), sugerindo que DGT e E agem em vias paralelas na resposta à auxina. Foram criadas linhagens transgênicas com superexpressão da enzima citocinina oxidase de Arabidopsis (35S:AtCKX2), que resulta em plantas com baixos níveis endógenos de citocinina. As linhagens transgênicas (MT CKX2 e dgt CKX2) foram comparadas com MT, brt, dgt e brt dgt. A maioria dos parâmetros que estavam relacionados com o desenvolvimento vegetativo, e todos os parâmetros relacionados ao desenvolvimento reprodutivo, foram associados ao efeito dos níveis absolutos de auxina e citocinina, sendo provavelmente resultantes de alterações nos processos de divisão e expansão celular. A dominância apical e a morfogênese in vitro (formação de gemas caulinares e raízes) foram associadas ao efeito do balanço auxina/citocinina, sendo esses processos conhecidamente regulados pelo efeito dessas classes hormonais na diferenciação celular / The plant hormones auxin and cytokinin are crucial for plant development, since they control cell division, expansion and differentiation, which regulate developmental processes starting from embryo formation to fruit ripening and senescence. Auxins and cytokinins usually regulate the same physiological responses, suggesting multiple mechanisms of interaction between these hormones. In this work, a model to study auxin and cytokinin interaction in the control of plant development is proposed, based on mutants, transgenic lines and double mutants with alterations on the auxin and cytokinin sensitivity or metabolism. The bushy root (brt) mutant was characterized as having low cytokinin sensitivity and suggested a relevant function to cytokinin in the seed development and apical dominance in tomato. The potato leaf (c) and entire (e) mutants were introgressed in the Micro-Tom background, characterized and used to check how they affect the auxin sensitivity and the plant development. The responses from these mutants were compared to MT and diageotropica (dgt), which is a low sensitive auxin mutant, and also compared to c dgt and dgt e double mutants. The c mutation did not alter the auxin sensitivity and was only related to leaf architecture. The e mutant seemed to be more sensitive to auxin in the in vitro root induction and parthenocarpy. The double mutant dgt e showed an additive phenotype, suggesting that DGT and E act in parallel pathways controlling auxin sensitivity. Transgenic lines were generated overexpressing the cytokinin oxidase from Arabidopsis (35S:AtCKX2), which renders plants with low endogenous cytokinin levels. Transgenic lines (MT CKX2 and dgt CKX2) were compared to MT, brt, dgt and brt dgt. Most of the traits related to vegetative development and all traits related to reproductive development were linked to the effect of auxin and cytokinin absolute levels, probably reflecting to the effect of these hormones in cell division and expansion. Apical dominance and in vitro morphogenesis (shoot and root formation) were linked to the auxin-to-cytokinin ratio, since these processes are well known to be regulated by the effect of these two hormones in cell differentiation