Magister en Bioquímica área de especialización en Toxicología / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas. / Un gran número de intoxicaciones agudas letales se producen en el país debido al uso indebido de métodos químicos para el control de plagas. Sin embargo, no se encuentran implementados protocolos confiables para establecer el diagnóstico de intoxicaciones agudas producidas por agentes de control de plagas como los fitosanitarios, que contribuyan a brindar información a los tribunales de justicia para establecer la etiología tóxica. En respuesta a lo anteriormente descrito, en el presente trabajo se implementaron protocolos analíticos para la investigación de productos fitosanitarios en muestras biológicas postmortem. Se establecieron protocolos y se implementaron metodologías analíticas para la determinación cualitativa o cuantitativa de un grupo de pesticidas organofosforados (paration, metil paration y diazinon) y del tipo carbamatos (carbaril, methomil y aldicarb) en muestras ingresadas en el departamento de laboratorios del Instituto Médico Legal de Santiago de Chile, y procedentes del departamento de Tanatología. Las metodologías analíticas se basaron en un pre-tratamiento de las muestras de acuerdo a su naturaleza, extracción en fase sólida (SPE) y análisis cromatográfico con detectores de nitrógeno-fósforo (GC-NPD) y de espectrometría de masas (GC-MS). Estas metodologías fueron validadas y favorablemente comparadas en su eficiencia con respecto a aquellas existentes en el servicio. Este nuevo pre-tratamiento, asociado ahora con SPE, permitió obtener muy buenos resultados tras la aplicación de cromatografía en placa fina (TLC) con derivatización post-cromatografica, para identificar pesticidas organofosforados en contenido gástrico y carbamicos en sangre y contenido gástrico. Al mismo tiempo se implementó un método analítico adecuado para la cuantificación de pesticidas organofosforados en la matriz sangre (paration, metilparation y diazinon), mediante la aplicación de SPE y GC-NPD. Se obtuvieron las curvas de calibración para determinar los pesticidas organofosforados en la matriz sangre, en el intervalo de concentraciones comprendido entre 0,1 y 4,0 mg/L, lográndose coeficientes de determinación superiores a 0,99 para los tres pesticidas organofosforados. Los limites de detección (LOD) y cuantificación (LOQ) obtenidos con esta metodología se encuentran entre 0,05-0,06 mg/L y 0,17-0,19 mg/L respectivamente. Estos valores son adecuados de acuerdo a las concentraciones que se logran obtener en sangre luego de una intoxicación aguda por pesticidas, según la experiencia forense mundial. La recuperación de los pesticidas organofosforados desde las muestras de sangre fue superior o igual al 95%, con valores de repetibilidad menores o iguales a 6,5%, indicando un bajo grado de dispersión para el método. Al mismo tiempo se evaluó la precisión intermedia obteniéndose valores inferiores o iguales a 6,9% (RSD), siendo menores al máximo de 15% establecido como límite. Los parámetros de calidad del método analítico desarrollado se enmarcan dentro de los valores aceptados para una metodología destinada al análisis de muestras de sangre del tipo post-mortem, avalados por literatura internacional. La importancia del desarrollo e implementación de esta metodología de trabajo para el Servicio Médico Legal tiene un alto impacto debido a que se trata de los compuestos (pesticidas organofosforados y carbamicos) que estadísticamente se presentan con mayor frecuencia en las causas de muerte por intoxicación aguda por pesticidas (IAP). En consecuencia, esta metodología será una valiosa contribución al informe tanatológico final que debe presentar el médico ante los tribunales de justicia, cuando se encuentra frente a un caso por muerte por intoxicación por pesticidas. / A great number of lethal acute intoxications take place in the country due to the undue use of chemical methods for the control of plagues. However, reliable protocols are not implemented to establish the diagnosis of acute intoxications taken place by agents of control of plagues, as the phytosanitary, that contribute to offer information to the tribunals of justice to establish the toxic etiology. In answer to these facts, in this work were implemented analytical protocols for the investigation of products phytosanitary in biological postmortem samples. It were established and implemented analytical methodologies for the qualitative or quantitative detection of a group of organophosphorus pesticides (parathion, parathion methyl and diazinon) and carbamates (carbaril, methomil and aldicarb) in samples entered in the department of laboratories of the Legal Medical Institute of Santiago from Chile, and coming from the department of Tanatology. The analytical methodologies were based on a pre-treatment of the samples according to their nature, solid phase extraction and chromatographic analysis with nitrogen-phosphorus (GC-NPD) and mass spectrometry detectors (GC_MS). These methodologies were validated and favorably compared in their efficiency with regard to those existent ones in the service. This new sample treatment, associate now with SPE, allowed to obtain very good results after the application of thin layer chromatography (TLC) with postchromatographic derivatization, to identify organophosphorus pesticides in gastric content and carbamates in blood and gastric content. At the same time a suitable analytical method for the quantification of organophosphorus pesticides in blood samples was implemented (parathion, metilparathion and diazinon), by means of the application of SPE and GC-NPD. The calibration curves for determining the organophosphorus pesticides in blood samples were obtained between 0.1 and 4.0 mg/L, with coefficients of determination higher than 0.99 for the three organophosphorus pesticides. The limit of detection (LOD) and quantification (LOQ) obtained with this methodology ranged 0.05-0.06 mg/L and 0.17-0.19 mg/L, respectively. These values are adequate taking into account the concentrations reached in blood after an acute poisoning by pesticides, according to world-wide forensic experience. The recovery of the organophosphorus pesticides from the blood samples was higher or equal than 95% with values of repeatability lower or equal than 6.5% indicating a low degree of dispersion for the method. At the same time the intermediate precision showed values lower or equal than 6.9% (RSD), being lower than the maximum of 15% establishes as the limit. The quality parameters of the analytical method developed are within the ranges of acceptance for a methodology aimed to the analysis of blood samples of the type post-mortem examination, and are warranted by international literature. The importance of the development and implementation of this methodology of work for Legal Medical Service has a high impact because it is the compounds (organophosphorus and carbamates pesticides) that statistically appear most frequently in the death causes by acute poisoning by (IAP). As a consequence, this methodology will be a valuable contribution to the report that it must present the doctor before the justice courts, when as opposed to a case by death by poisoning by pesticides.

Unidad de Práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / El presente trabajo de investigación fue realizado en el Departamento de Asuntos Regulatorios en la empresa ANASAC S.A.C. e I como parte de la actividad final de titulación para optar al título de Químico Farmacéutico. Se desarrolló un documento, en el cual, luego de introducir los datos necesarios, es posible obtener la clasificación toxicológica de los plaguicidas químicos de uso agrícola y su evaluación de riesgo en el ámbito de aplicación. Para el desarrollo de este documento se buscó información de fuentes bibliográficas reconocidas internacionalmente para definir conceptos y fórmulas necesarias para el proceso. En cuanto a la estructura y las exigencias planteadas, se tomó como base el Manual Técnico Andino (MTA), normativa por la cual se rigen los países de la Comunidad Andina del Norte (CAN). Finalmente, este documento quedó disponible para ser utilizado cada vez que se realice un registro nuevo de plaguicida

El presente trabajo reporta la actividad antimicrobiana y antifúngica de extractos obtenidos de hojas y flores de Nicotiana paniculata L, especie endémica del Perú cuyas muestras fueron colectadas en las Lomas de Lachay, en el Departamento de Lima. Se estudió la actividad antimicrobiana comparando los métodos de Kirby Bauer o disco difusión y el método de excavación placa cultivo encontrando que el método de excavación es más sensible para evaluar actividad antimicrobiana. Las cepas utilizadas fueron Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 6538-P Candida albicans ATCC 10231 y una muestra hospitalaria de Pseudomonas aeruginosa, mostrando actividad antimicrobiana frente a cepas como Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus (16 a 30mm) y ligera inhibición del crecimiento para Escherichia coli y Candida albicans (11 a 15mm). / This study report the bacterial and mycotic activity of the extracts from leaves, and flowers from the Nicotiana paniculata L (NPL) samples collected at Lomas de Lachay, Lima region, Perú. The antibacterial activity of the standard strains Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 6538-P, Candida albicans ATCC 10231, and a wild Pseudomona aeruginosa strain was determined by comparison of sensitivity tests using a plate dilution method in which the drugs were provided by impregnated filter papers, and the culture plate hole method recommended by Standard Microbiological Methods (2001). The standard Straits Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Staphylococcus aureus ATCC 6538-P showed to be susceptibility to the NPL extracts with inhibitory zone from 16 mm to 30 mm; while the Escherichia coli ATCC 10536, and Candida albicans ATCC 10231 displayed intermediate sensitivity (from 11 to 15 mm) to the testing extracts.

El presente trabajo reporta la actividad antimicrobiana y antifúngica de extractos obtenidos de hojas y flores de Nicotiana paniculata L, especie endémica del Perú cuyas muestras fueron colectadas en las Lomas de Lachay, en el Departamento de Lima. Se estudió la actividad antimicrobiana comparando los métodos de Kirby Bauer o disco difusión y el método de excavación placa cultivo encontrando que el método de excavación es más sensible para evaluar actividad antimicrobiana. Las cepas utilizadas fueron Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 6538-P Candida albicans ATCC 10231 y una muestra hospitalaria de Pseudomonas aeruginosa, mostrando actividad antimicrobiana frente a cepas como Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus (16 a 30mm) y ligera inhibición del crecimiento para Escherichia coli y Candida albicans (11 a 15mm). / This study report the bacterial and mycotic activity of the extracts from leaves, and flowers from the Nicotiana paniculata L (NPL) samples collected at Lomas de Lachay, Lima region, Perú. The antibacterial activity of the standard strains Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 6538-P, Candida albicans ATCC 10231, and a wild Pseudomona aeruginosa strain was determined by comparison of sensitivity tests using a plate dilution method in which the drugs were provided by impregnated filter papers, and the culture plate hole method recommended by Standard Microbiological Methods (2001). The standard Straits Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Staphylococcus aureus ATCC 6538-P showed to be susceptibility to the NPL extracts with inhibitory zone from 16 mm to 30 mm; while the Escherichia coli ATCC 10536, and Candida albicans ATCC 10231 displayed intermediate sensitivity (from 11 to 15 mm) to the testing extracts. / Tesis

Diazinon es uno de los pesticidas organofosforados de mayor uso alrededor del mundo. Al igual que otros organofosforados, ejerce su acción tóxica a través de la inhibición de la enzima acetilcolinesterasa lo cual ocasiona que la acetilcolina se acumule en los espacios presinápticos y sobre-estimule diversos tejidos y órganos -entre ellos, los músculos respiratorios- llegando a producir muerte por asfixia en casos de sobredosis. A nivel reproductivo, en mamíferos, puede afectar las gónadas masculinas, disminuyendo así la calidad espermática. Se desconocen sus efectos a nivel de gónadas femeninas y sobre la progenie. El objetivo de la presente tesis fue evaluar la toxicidad producida por el pesticida organofosforado Diazinon mediante la observación y análisis de los embriones preimplantacionales de ratón obtenidos a partir de hembras y machos tratados independientemente. Para ello, se trataron intraperitonealmente por 5 días consecutivos, cuatro grupos de diez individuos, tanto para el tratamiento paterno como materno. Tres de los grupos recibieron las dosis de 5,25, 10,5 y 21 mg/kg de peso corporal de Diazinon diluido en aceite de maíz, respectivamente; el cuarto grupo, usado como control negativo, fue tratado sólo con el vehículo. Luego de terminado el tratamiento, cada macho fue apareado semanalmente con una hembra no tratada durante 6 semanas, mientras que las hembras fueron apareadas por una sola vez con un macho no tratado. Al cuarto día de preñez todas las ratonas fueron sacrificadas para evaluar la cantidad, calidad, morfología, desarrollo y proliferación celular de los embriones preimplantacionales obtenidos. Durante el tratamiento paterno, los parámetros embrionarios resultaron afectados de forma variable a lo largo de las seis semanas de evaluación. El efecto tóxico de Diazinon fue más evidente durante las semanas 1 y 5, poniendo así en evidencia que los espermatozoides, espermátides tardías, espermatocitos tempranos y espermatogonias tipo B son los tipos celulares más sensibles al tratamiento. Durante el tratamiento materno sólo se incrementó el número de embriones retrasados y con morfología de grado 3 y 4. En ambos tratamientos se encontraron embriones con defecto en la formación del blastocele, lo que demostraría el potencial estrogénico de Diazinon sobre los embriones. Diazinon actúa de forma diferente en machos y hembras debido a las características biológicas de cada sexo y ello se ve reflejado en los resultados. En conclusión, Diazinon afecta la calidad gamética masculina y femenina, siendo este efecto heredable y evidente durante el desarrollo embrionario preimplantacional del ratón. / Diazinon is one of the most widely used organophosphate pesticides worldwide. Similar to other organophosphorates, it exerts its toxic action through the inhibition of the enzyme acetylcholinesterase, which induces acetylcholine accumulation in presynaptic spaces and thus overstimulating several tissues and organs -amongst them, the respiratory musculature- leading to death by asphyxia in case of an overdose. At the reproductive level, in mammals, Diazinon may affect the male gonads, hence decreasing sperm quality. Its effects over the female gonads and over the progeny of affected individuals are currently unknown The objective of the present thesis was to evaluate the toxicity produced by the organophosphate pesticide Diazinon thru the observation and analysis of mouse preimplantation embryos recovered from independently exposed male and female mice. In order to do that, four groups of mice each composed of ten individuals were intraperitonealy treated during 5 consecutive days, both for paternal and maternal treatments. Three of those groups received doses of 5.25, 10.5, and 21 mg/kg of body weight of Diazinon, respectively, diluted on corn oil; the fourth group, regarded as the negative control, only received the vehicle. After finishing the treatment, each treated male mouse was caged and breaded with an untreated female mouse on a weekly basis during 6 weeks, while treated female mice were breaded with untreated males only once. On the fourth day of pregnancy, all pregnant female mice were sacrificed to assess the number, quality, morphology, stage of development and cell proliferation status in recovered preimplantation embryos. During paternal treatment, the embryo parameters were affected on a variable basis along the six-week evaluation period. The toxic effect of Diazinon showed to be more evident on weeks 1 and 5, thus resulting that spermatozoa, late spermatids, early spermatocytes and type B spermatogonia are the most sensitive-to-treatment cell types. On the other hand, during maternal treatment, only the number of developmentally delayed and morphological grade 3 and 4 embryos augmented. In both treatments, embryos with defective blastocoele formation, a feature that demonstrates the estrogenic potential of Diazinon on preimplantation embryos. Diazinon acts differentially on males and females due to the biological characteristics of each gender, a fact that became reflected in our results. In conclusion, Diazinon affects the male and female gamete quality, being this effect heritable and evident during preimplantation embryo development in the mouse.

Se realizó el análisis toxicológico de identificación y cuantificación del residuo de plaguicida organofosforado METHAMIDOPHOS en 20 muestras de papa en diferentes puestos de venta en el Departamento de Lima. El análisis cualitativo se realizó por cromatografía en capa fina (CCF) y el cuantitativo por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Se determinó presencia de Methamidophos en la totalidad de muestras analizadas. De los 10 muestreos realizados en mercados mayoristas: 7 muestreos (70%) exceden el Límite Máximo Residual (LMR) mostrando una concentración máxima de 2,7055 ppm de Methamidophos. De los 10 muestreos realizados en mercados minoristas: 2 muestreos (20%) exceden el LMR mostrando una concentración máxima de 0,1753 ppm de Methamidophos. Se concluyó que dichas concentraciones exceden el LMR establecido por el Codex Alimentarius (LMR iguala a 0,05 ppm). Palabras clave: Residuo Methamidophos, plaguicida, organofosforado, LMR, CCF, HPLC.

En el presente trabajo, realizamos la cuantificación de los niveles de ácido hipúrico en relación a la creatinina urinaria en 50 maquinistas varones, que laboran en imprentas de Lima cercado, en donde hacen uso de tintas que contienen tolueno (técnicas de flexografía y huecograbado). La cuantificación de acido hipúrico en orina fue realizada por el método perteneciente al manual de métodos analíticos de la NIOSH. Los niveles de Ácido Hipúrico en orina fueron menores a 1.6g ácido hipúrico/g creatinina, límite máximo permitido, dado por la AMERICAN CONFERENCE OF GOVERNMENTAL INDUSTRIAL HYGIENSTS. El promedio de la concentración de ácido hipúrico en orina del grupo expuesto es de 0.758 ± 0.275 g ácido hipúrico/g creatinina. sin embargo, estos valores están ligeramente elevados con respecto al grupo control, cuyo promedio es 0.422 ± 0.036 g ácido hipúrico/ g creatinina. El análisis toxicológico se realizó en el Laboratorio de Toxicología y Química Legal de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. / -- In this present research, it was carried out the quantitative determination of hippuric acid levels in relation to urinary creatinine in fifty male workers, who work in prints of center of Lima, where they make use of inks containing toluene (Flexography and Rotogravure techniques), The quantitative determination of hippuric acid was carried out by the method belongs to the Manual of Analytical Methods according to the NIOSH (The National Institute for Occupational Safety and Health). Hippuric acid levels in urine were less than 1.6g hippuric acid/g creatinine, the maximum permissible limit given by the AMERICAN CONFERENCE OF GOVERNMENTAL INDUSTRIAL HYGIENSTS. The average concentration of hippuric acid in urine in the exposed group was 0.758 ± 0.275 g hippuric acid/g creatinine. The toxicological analysis was carried out in the Toxicology and Legal Chemistry Laboratory of the Faculty of Pharmacy and Biochemistry of San Marcos Major National University.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina la concentración de plomo en 30 muestras de sombras compactas para ojos provenientes de 6 marcas diferentes comercializadas en Lima Metropolitana. La presencia y concentración de este metal se determinó por el método de Espectrofotometría de Absorción Atómica de Horno de Grafito. Las muestras fueron adquiridas en diferentes centros comerciales de Lima Metropolitana: Centro Comercial Mega Plaza (Independencia), Galería Tradición (Cercado de Lima), Mall Aventura Plaza (Santa Anita) y Centro Comercial Garzón (Jesús María). Al comparar la concentración promedio de plomo con los límites establecidos por la FDA y también según las marcas, se obtuvo diferencias significativas entre dichos valores. Como resultado estadístico se obtuvo una concentración media de plomo de 6.7462, con un valor máximo de 31.11 ppm y mínimo de 0.45 ppm. Del total de muestras el 13% superan los límites establecidos por la FDA (≤ 10 ppm). Se concluye que la concentración media de plomo no supera el límite establecido por la FDA. Se recomienda que las entidades competentes en el país establezcan normas nacionales para el control de las concentraciones de metales pesados en los productos cosméticos ya que en la actualidad estos no se analizan con frecuencia, y solo existen ciertas normas técnicas en materia de información y rotulado que deben de cumplir los productos cosméticos. / Tesis

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Compara las concentraciones de arsénico y cadmio en agua embotellada de consumo humano comercializada en Lima Metropolitana tomando 5 distritos de referencia. Para dicho estudio se decidió trabajar con la marca de agua embotellada de mayor aceptación por la población, para tomar esta decisión nos apoyamos en estudios de mercados de entidades reconocidas como IPSOS APOYO (Opinión y mercado), adicionalmente se hizo una encuesta de preferencia de aguas embotelladas. Se tomaron 40 unidades de agua embotellada de consumo humano comercializada en 5 distritos de Lima Metropolitana. Estudio realizado en total de las unidades muestreadas 20 fueron provenientes de la venta en supermercado y 20 de la venta ambulatoria de los 5 distritos de Lima Metropolitana. La concentración media de arsénico y cadmio en agua embotellada proveniente de venta ambulatoria fue de 1,7 ppb y 0,9 ppb respectivamente. La concentración media de arsénico y cadmio en agua embotellada proveniente de venta en supermercado fue de 1,8 ppb y 1,0 ppb respectivamente. No se encontró diferencias significativas entre las medias de la concentración de arsénico y cadmio en las aguas embotelladas de venta ambulatoria y venta en supermercados. Los resultados indican que las concentraciones de arsénico y cadmio presentes en las aguas embotelladas de consumo humano que se comercializan en cinco distritos de Lima Metropolitana, no superan los límites máximos permisibles dados por la Organización Mundial de la Salud y el Ministerio de Salud del Perú en el Reglamento de la Calidad del Agua para Consumo Humano 2010 (Decreto Supremo Nº 031-2010-SA). / Tesis

Se realizó el análisis toxicológico de identificación y cuantificación del residuo de plaguicida organofosforado METHAMIDOPHOS en 20 muestras de papa en diferentes puestos de venta en el Departamento de Lima. El análisis cualitativo se realizó por cromatografía en capa fina (CCF) y el cuantitativo por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Se determinó presencia de Methamidophos en la totalidad de muestras analizadas. De los 10 muestreos realizados en mercados mayoristas: 7 muestreos (70%) exceden el Límite Máximo Residual (LMR) mostrando una concentración máxima de 2,7055 ppm de Methamidophos. De los 10 muestreos realizados en mercados minoristas: 2 muestreos (20%) exceden el LMR mostrando una concentración máxima de 0,1753 ppm de Methamidophos. Se concluyó que dichas concentraciones exceden el LMR establecido por el Codex Alimentarius (LMR iguala a 0,05 ppm). Palabras clave: Residuo Methamidophos, plaguicida, organofosforado, LMR, CCF, HPLC.