Made available in DSpace on 2012-09-05T18:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 280.pdf: 7325304 bytes, checksum: 61ad14053178decbcae3fe9ec2c9a1a9 (MD5) Previous issue date: 2005 / Um dos maiores problemas enfrentados pelas instâncias tomadoras de decisão, no que diz respeito à implementação de programas de vigilância e prevenção nestas áreas relaciona-se com a real quantificação ou dimensionamento do problema. Dentro desta fundamentação, o objetivo geral desta Tese foi desenvolver um Sistema de Informações toxicológicas forense no âmbito do Estado do Rio de Janeiro, avaliar o perfil epidemiológico (estudo descritivo) das exposições/intoxicações envolvendo a utilização de substâncias químicas, e diagnosticar/quantificar qualquer enventual fenômeno de subnotificação. (...) Destes, mais de um terço dos casos concluídos (36,96 por cento) foram considerados positivos. (...) Analgésicos obtiveram um espectro mais amplo de casos positivos (20 a 59 anos - 77,5 por cento). Em relação ao álcool, os municípios mais afetados foram Marica, Ioraí, Saquarema, Rio Bonito, Araruama, Silva Jardim, Armação de Búzios, São José do Vale do Rio Preto, Teresópolis, Sumidouro, Cordeiro e Trajano de Morais -- 22 a 49 casos: 100.000 hab. Rio de Janeiro, Niterói, Nova Iguaçu, Duque de Caxias, São João de Meriti, Mesquita, Nilópolis e Belford Roxo respondem pelos maiores prevalências relacionadas a praguicidas - 10 a 191 casos: 100.000 hab. Maiores ocorrências para Medicamentos, foram localizadas em Angra dos Reis; Itaguaí, Rio das Flores, Teresópolis e Cantagalo -- 3 a 5 casos:100.000 hab. Drogas de abuso apresentaram maiores índices de subnotificação em relação ao Sistema Nacional de Informações sobre Mortalidade - SIM e Sistema Nacional de Informações Tóxicofarmacológicas - SINITOX (99,40 por cento e 100,00 por cento, respectivamente). (...) Praguicidas foi a categoria de substâncias que apresentaram o menor grau de não registros SIM (12,93 por cento) e SINITOX (69,09 por cento).

Submitted by Morgana Andrade (morgana.andrade@ufes.br) on 2016-04-06T20:58:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação Fernando.pdf: 3408650 bytes, checksum: 8e6f48a8678d513330c4dbecc0a5c9bb (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-05-17T16:10:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação Fernando.pdf: 3408650 bytes, checksum: 8e6f48a8678d513330c4dbecc0a5c9bb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T16:10:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação Fernando.pdf: 3408650 bytes, checksum: 8e6f48a8678d513330c4dbecc0a5c9bb (MD5) / FAPES / Popularmente conhecida como maconha, a Cannabis sativa é a mais usada de todas as drogas ilícitas e seu comércio, em conjunto com outras drogas, é uma das atividades criminosas que mais consomem recursos públicos e está intimamente associado aos homicídios. No Estado do Espírito Santo (ES), 70% dos homicídios tem relação com o tráfico de entorpecentes, apresentando atualmente o segundo maior índice dos país. A despeito da atuação policial, não existem estudos detalhados sobre plantio, distribuição e consumo de Cannabis no Brasil, de uma forma geral, sabe-se apenas que a maior parte da droga é produzida no Paraguai ou cultivada dentro do próprio país e acredita-se que o Paraguai seja responsável pelo abastecimento das regiões sul, sudeste e centro-oeste do Brasil. A identificação genética de Cannabis apreendidas pela Polícia Civil pode auxiliar na determinação geográfica de plantios e possíveis rotas do tráfico, informação essencial para a ação da polícia no combate ao tráfico de drogas. Com objetivo de caracterizar as amostras de Cannabis apreendidas pela Polícia Civil do ES e verificar correlações que pudessem indicar origens comuns, foram analisados 18 loci STR de 165 amostras oriundas de 71 dos 78 municípios do Estado. Foram encontrados 89 alelos, variando de 2 (loci A501 e 9269) a 12 alelos (locus A301). Os loci H06 e A305 apresentaram 3 alelos cada e o locus B05 apresentou 4 alelos, similar ao encontrado em amostras do Paraguai. Os dados alélicos dos loci A305, B05 e H06 sugerem que a região sudeste do Brasil pode estar sendo abastecida por Cannabis de origem Paraguaia. Também foi verificado que 4 alelos apareceram apenas nas amostras 176 e 230. A amostra 230 era proveniente de uma apreensão realizada na cidade de Aracruz, onde a Polícia verificou a ligação do proprietário com o tráfico internacional de entorpecentes, e demonstrou ser geneticamente mais próxima de amostras da Alemanha, sugerindo que sua matriz tem origem no exterior podendo, dentre outras possibilidades, ter chegado ao ES através do tráfico pela internet. Os resultados obtidos fornecem mais informações a respeito da maconha comercializada no Brasil, podendo ser utilizados em estudos futuros para elaboração de um banco de dados baseado em STR para aplicação forense. / Popularly known as marijuana, Cannabis sativa is the most used of all illicit drugs and, with other drugs, its trade is one of the criminal activities that most consume public resources and is closely related to homicides. In the Espírito Santo State (ES), 70% of homicides is related to drug trafficking, currently presenting the second highest rate in the country. Despite the police action, there is no detailed studies of planting, distribution and Cannabis consumption in Brazil, in general, we only know that most drug is produced in Paraguay or grown within the country and it is believed that Paraguay is responsible for supplying the Brazil’s south, southeast and centerwest region. Genetic analysis of Cannabis seized by the police can assist in determining, geographically, plantations and possible routes of trafficking, essential information for police’s action in drug trafficking combat. In order to characterize the Cannabis samples seized by the police at ES and verify correlations that could indicate common origins, we analyzed 18 STR loci in 165 samples from 71 of 78 municipalities in the State. We have found 89 alleles ranging from 2 (A501 loci and 9269) to 12 alleles (A301 locus). The loci H06 and A305 presented each, 3 alleles and the locus B05, 4 alleles, similar to that found in Paraguayan samples. The allelic data of loci A305, B05 and H06 suggest that Brazil 's southeast region can be being supplied by Paraguayan Cannabis. We also found four alleles that appeared only in samples 176 and 230. Sample 230 was seized in Aracruz city, where the police found owner's connection with international trafficking, and demonstrated to be genetically nearest to German samples, suggesting a foreign origin what could be explained by internet trafficking. The obtained results provide more information about marijuana’s market in Brazil and could be used in future studies to develop a STR database for forensic application.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-02-14T03:07:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343684.pdf: 3983252 bytes, checksum: 9c21e57851242970d9839907700965a0 (MD5) Previous issue date: 2016 / A utilização intencional de substâncias modificadoras do estado de consciência é prática milenar entre as civilizações. O consumo abusivo na sociedade contemporânea cresce vertiginosamente, disseminado por todas as esferas sociais, fomentando um rentável e disputado mercado ilegal. A íntima relação do uso de drogas e mortes violentas é tema amplamente debatido em levantamentos e estudos científicos. O conhecimento do perfil destes óbitos e as substâncias mais recorrentes alicerçam o desenvolvimento técnico-científico para atender às especificidades desta demanda. O Instituto Geral de Perícias de Joinville (IGP/Joinville) conta com software institucional que armazena dados relacionados aos atendimentos e os respectivos laudos das ocorrências, viabilizando levantamentos desta natureza. No âmbito forense a realização de exames toxicológicos é importante ferramenta para auxiliar na determinação da causa morte. Todavia, o estado do cadáver pode ser fator limitante para a coleta de espécimes de referência. O humor vítreo (HV) figura como matriz alternativa de grande aplicabilidade por apresentar boa correlação com os níveis sanguíneos. A microextração em fase sólida (SPME) destaca-se pela alta sensibilidade, fácil execução, viabiliza a análise de pequenos volumes e integração automatizada ao cromatógrafo gasoso com espectrômetro de massas (GC/MS). O presente estudo efetuou levantamento do perfil de óbitos atendidos pelo IGP/Joinville no período de 2013 a 2015, ponderando a natureza jurídica das mortes distribuídas em homicídios, suicídios, acidentes de trânsito e outras formas, o gênero e a idade das vítimas, a coleta de amostras biológicas e as substâncias mais detectadas. Os acidentes de trânsito compreenderam o maior número de óbitos, abrangendo 40,9% dos casos, seguidos por homicídios com 29%, enquanto os suicídios contabilizaram 9,1% e outras formas de morte 21%. Entre as amostras não coletadas as justificativas se alternaram entre óbitos em ambiente hospitalar (54,1%), cadáveres putrefeitos (7,7%), carbonizados (0,6%), politraumatizados (1,3%), ossadas (0,9%) e não justificados (35,4%). Os homicídios abarcaram o maior percentual de toxicológicos detectados (70,5%). Os suicídios apresentaram detecção em 51,6%, acidentes de trânsito em 50% e outras formas de morte em 51,9% dos casos. A cocaína (COC) foi a substância ilícita mais recorrente entre as classificações de morte com exposição concomitante ao álcool. A exposição associada leva a formação do cocaetileno (CE), composto mais tóxico que os precursores. Diante deste cenário, foi validado método para a detecção de COC e CE em HV por SPME e GC/MS. A técnica compreendeu a análise de 0,5 mL de HV, adicionados de 1,0 mL de tampão borato, extração por SPME (fibra DVB/PDMS) sob temperatura (60ºC) e agitação constantes durante 20 min., exposição da fibra no injetor a 250ºC por 5 min e limpeza a 250ºC por 5 min. O método demonstrou precisão sob repetibilidade, apresentando coeficientes de variação (CVs) dos tempos de retenção de 0,4% e 0,3% para COC e CE respectivamente, limite de detecção estipulado em 5 ng/mL com CVs de triplicatas inferiores a 20%, ausência de interferentes na detecção dos analitos de interesse, considerando-se os compostos nicotina, lidocaína e cafeína, e procedimento de limpeza eficaz para a eliminação do efeito carryover. A aplicação do método em amostras post mortem de HV reproduziu os resultados de detecção obtidos em sangue e urina, assim como confirmou a não detecção dos analitos nos casos negativos testados. Os achados demonstraram a viabilidade de emprego do HV na ausência das matrizes de referência e a importância da coleta de matrizes diversificadas visando ampliar a janela de detecção dos analitos de interesse.<br> / Abstract : The intentional use of substances that modify the state of consciousness has been happening for thousands of years among civilizations. The abusive use in the contemporary society has grown wildly, is has been spread by all social spheres, fostering a profitable and disputed illegal market. The close relation between the use of drugs and violent deaths is an issue widely discussed in surveys and scientific researches. The knowledge about the profile of these deaths and the most recurrent substances, anchors the scientific development to meet the needs of these demands. The Instituto Geral de Perícias de Joinville (IGP/Joinville) has institutional software that store data related to the attendance and respective occurrence reports, making surveys of this kind feasible. In the forensic scope, the procedure of toxic exams is a very important tool to determine the cause of death. Nevertheless, the state of the corpse may be a limiting factor when it comes to collecting reference specimen. The vitreous humor (VH) features as alternative matrix of big applicability for showing good correlation with blood levels. The extraction by solid phase microextraction (SPME) stands out for high sensibility, easiness to use, making feasible the analysis of small volumes and automated integration to gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). The presented study has carried out a survey about the profile of deaths assisted by IGP/Joinville between the years 2013 and 2015, considering the legal status of the deaths among homicide, suicides, traffic accidents and others, gender, victims age, collection of biological samples and the most detected substances. Traffic accidents make the highest number of deaths, comprehending 40,9% of occurrences, followed by homicides with 29%, other forms of deaths with 21% and suicides with 9,1%. Among the cases not collected the reasons are deaths in hospitals (54,1%), putrefied corpses (7,7%), burned corpses (0,6%), multiple-injured bodies (1,3%), bones (0,9%) and non justifies (35,4%). The homicides comprised the biggest percentage of positive toxicological (70,5%) followed by others (51,9%), suicides (51,6%) and traffic accidents (50%). The cocaine (COC) was the most detected compound in all deaths classification with concomitantly consumption of alcohol. They lead to formation of cocaethylene (CE), compound that is more toxic than the former ones. In this situation, the method for detection of COC and CE was validated in VH by SPME and GC/MS. The technique includes the addiction of 0,5 mL of VH and 1,0 mL of borax buffer, exposed to SPME (DVB/PDMS fiber) for 20 min at 60ºC and constant agitation. After the fiber was exposed in the inlet (250ºC) for 5 min and then cleaned for 5 min at 250ºC. The method has shown precision on repeatability with coefficient of variation (CVs) of retention time by 0,4% (COC) and 0,3% (CE), limit of detection estimated in 5 ng/mL with CVs of triplicates lower than 20%, absence of interfering compounds in the detection of analytes of interest, considering the compounds nicotine, lidocaine and caffeine, and procedures of effective cleaning in order to eliminate the carryover effect. The application of this method in post mortem samples of VH has shown correlation with the positive results obtained by COC and CE in blood and urine, as well as it has confirmed the non-detection of analytes in tested negatives. The findings have shown the importance of varied matrix collection in order to enlarge the window of detection and the feasibility of the use of VH in the absence of reference matrixes.

A análise de fluidos biológicos para detecção de usuários de Cannabis não é rotina em nossos serviços de toxicologia forense pela falta de um método aplicável às condições de trabalho desses laboratórios. Neste trabalho foi estudado um método que utiliza a cromatografia de camada delgada de alta eficiência (CCDAE) como técnica de identificação. Cinco mililitros de urina são submetidos à hidrólise alcalina e à extração Iíquido/líquido, com posterior aplicação do resíduo obtido na cromatoplaca. O limite de detecção em estudo realizado com adicionados foi de 5ng/ml. Urina de usuários de Cannabis quando submetidas a esta metodologia apresentaram resultado semelhante ao do padrão de THCCOOH, principal produto de biotransformação do THC. As amostras utilizadas como branco de referência não apresentaram mancha semelhante. Na análise das amostras de usuários por imunoensaio de fluorescência polarizada (\"cutoff\' 50ng/ml) obteve-se resultado negativo para usuários moderados e ocasionais. Com auxilio de curva-padrão observou-se que a concentração provável de canabinóides nessas amostras estaria entre 20-50ng/ml. No estudo comparativo dos resultados obtidos nas duas técnicas, foi verificada uma correspondência de 100% para as amostras de usuários com padrão de uso intenso. Nos usuários moderados e ocasionais não foi observada boa correspondência entre os resultados. / Abstract not available.

A análise de fluidos biológicos para detecção de usuários de Cannabis não é rotina em nossos serviços de toxicologia forense pela falta de um método aplicável às condições de trabalho desses laboratórios. Neste trabalho foi estudado um método que utiliza a cromatografia de camada delgada de alta eficiência (CCDAE) como técnica de identificação. Cinco mililitros de urina são submetidos à hidrólise alcalina e à extração Iíquido/líquido, com posterior aplicação do resíduo obtido na cromatoplaca. O limite de detecção em estudo realizado com adicionados foi de 5ng/ml. Urina de usuários de Cannabis quando submetidas a esta metodologia apresentaram resultado semelhante ao do padrão de THCCOOH, principal produto de biotransformação do THC. As amostras utilizadas como branco de referência não apresentaram mancha semelhante. Na análise das amostras de usuários por imunoensaio de fluorescência polarizada (\"cutoff\' 50ng/ml) obteve-se resultado negativo para usuários moderados e ocasionais. Com auxilio de curva-padrão observou-se que a concentração provável de canabinóides nessas amostras estaria entre 20-50ng/ml. No estudo comparativo dos resultados obtidos nas duas técnicas, foi verificada uma correspondência de 100% para as amostras de usuários com padrão de uso intenso. Nos usuários moderados e ocasionais não foi observada boa correspondência entre os resultados. / Abstract not available.

Aproximadamente 5,6% da população mundial, entre 15 e 64 anos de idade, usaram algum tipo de droga pelo menos uma vez, no ano de 2016. Estimativas indicam que no ano de 2015 aproximadamente 450 mil pessoas morreram em todo o mundo por motivos diversos, porém todos relacionados de alguma forma às drogas. Além disso, o consumo de cannabis e cocaína estão entre os mais associados aos prejuízos advindos dos transtornos relacionados ao uso de drogas ilícitas na América Latina. Dessa forma, este trabalho teve como objetivos avaliar a prevalência do consumo de cannabis e cocaína por vítimas de causas externas (acidentes e violências), necropsiadas no Instituto Médico Legal de São Paulo (IML-SP). Além disso, foi proposto também o desenvolvimento e validação de um método em Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada à Espectrometria de Massas sequencial (UHPLC-MS/MS) para quantificação de cocaína, benzoilecgonina, cocaetileno e anidroecgonina metil éster (AEME) em sangue, empregando-se a técnica de extração líquido-líquido com solventes não clorados, que permite a distinção das diferentes vias de administração da cocaína. Foi utilizado um método de amostragem probabilística para a coleta das amostras de sangue postmortem, entre os meses de junho de 2014 a dezembro de 2015. A etapa de triagem das análises toxicológicas foi feita por Ensaio de Imunoabsorção Enzimática e as amostras positivas foram confirmadas pelas técnicas de Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massas sequencial e Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas. Ao longo de 19 meses consecutivos, foram coletadas 365 amostras de sangue postmortem, as quais apresentaram positividade de quase um terço para cannabis e/ou cocaína. Indivíduos do sexo masculino, jovens (<= 30 anos de idade) e que apresentavam algum registro de antecedentes criminais foram os mais prováveis (P <= 0,05) de terem feito uso de alguma substância pesquisada. Entre as causas do óbito estudadas, o uso de cannabis foi mais prevalente entre as vítimas de acidentes de trânsito, enquanto o consumo de cocaína ou de pelo menos uma das drogas foi maior entre as vítimas de homicídio. Utilizou-se uma mistura de éter metil terc-butílico e 2-propanol como solventes orgânicos para a extração da cocaína e produtos de biotransformação e detecção por UHPLC-MS/MS, método que se mostrou preciso, exato, robusto e sensível para a determinação dos analitos de interesse. Acredita-se que o estudo dos resultados toxicológicos em ocorrências com desfechos fatais é de grande importância pois fornece informações que podem auxiliar políticas de prevenção e o combate ao uso de substâncias psicoativas / Approximately 5.6% of the world\'s population aged 15-64 years used some type of drug at least once in 2016. Estimates indicate that in 2015 approximately 450,000 people died worldwide for different reasons, but all of them related in some way to drugs. In addition, the consumption of cannabis and cocaine are among the most associated with the damages resulting from illicit drug use disorders in Latin America. The aim of this study was to evaluate the prevalence of consumption of cannabis and cocaine by victims of external causes (accidents and violence), necropsied at the Legal Medical Institute in the city of Sao Paulo (IML/SP). In addition, the aim of this study was to develop and validate an Ultra-High-Performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry (UHPLC-MS/MS) for quantification of cocaine, benzoylecgonine, cocaethylene and anhydroecgonine methyl ester (AEME) in blood, using Liquid-Liquid Extraction with non-chlorinated solvents, which allows distinguishing among different routes of administration of cocaine. A probabilistic sampling method was used to collect postmortem blood samples from June 2014 to December 2015. The screening step of the toxicological analyzes was done by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay and the positive samples were confirmed by Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry and Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry. Over a period of 19 consecutive months, 365 postmortem blood samples were collected, which were positive for almost one third for cannabis and / or cocaine. Males, young (<= 30 years old) and those who had some criminal history record were the most likely (P <= 0.05) to have used any substance searched. Among the causes of death, the use of cannabis was more prevalent among victims of traffic accidents, while cocaine use or the consumption of at least one of the drugs was higher among homicide victims. A mixture of methyl tert-butyl ether and 2-propanol as organic solvents for the extraction of cocaine and metabolites and detection by UHPLC-MS/MS was used and the developed method was precise, accurate, robust and sensitive for the determination of analytes of interest. The study of toxicological results in occurrences with fatal outcomes is of great importance because it provides information that can aid in prevention policies and in the fight against the use of psychoactive substance

No contexto analítico forense, questões relacionadas à estabilidade química dos compostos a serem avaliados podem acarretar desvios analíticos consideráveis, o que pode gerar conclusões equivocadas a respeito da composição da amostra. Dessa forma, diante das estratégias para conservação da composição química em amostras biológicas atualmente disponíveis, buscou-se, com o presente trabalho, avaliar a aplicabilidade da técnica de DBS (Dried Blood Spot) para o contexto forense, uma vez que vem sendo sugerido que esta técnica promove maior estabilidade química e, ainda, não interfere na composição da amostra, dentre outras vantagens. Assim, no presente estudo foi avaliada a estabilidade da cocaína, éster metilecgonina, benzoilecgonina, clonazepam, diazepam e alprazolam em amostras de sangue total post mortem aplicadas ou não em DBS, para que se pudesse comparar os resultados obtidos, e, então, verificar a viabilidade do acondicionamento das amostras em cada uma dessas matrizes. Concomitantemente, foi avaliado o impacto da temperatura sobre a estabilidade química dessas substâncias nas diferentes matrizes. Para alcançar o objetivo final, foram desenvolvidas e validadas metodologias analíticas por LC/MS-MS, segundo parâmetros sugeridos em guias de validação internacionais. Posteriormente, foram incubadas amostras contendo concentrações conhecidas das substâncias de interesse em DBS e em sangue total, as quais foram acondicionadas em diversas temperaturas e analisadas em diferentes intervalos de tempo. Os dados obtidos para estudo de estabilidade da cocaína e metabólitos sugerem que, apesar das amostras de sangue total acondicionadas em freezer não apresentarem redução na concentração acima de 20%, de maneira geral, amostras de DBS promoveram maior estabilidade química aos compostos monitorados. O estudo sugere, ainda, que a temperatura apresenta grande impacto sobre a estabilidade desses compostos, em consonância com outros estudos publicados na literatura. Já os dados de estudo de estabilidade obtidos para os benzodiazepínicos selecionados apresentaram maior uniformidade que os dados obtidos para cocaína e metabólitos. Assim, para todas as condições avaliadas, ou seja, para as duas diferentes matrizes e para as diferentes temperaturas, foi observado que os compostos, de maneira geral, não apresentaram queda na concentração acima de 20% durante o período de estudo. A análise estatística indica não haver, em termos gerais, diferença significativa entre as diferentes formas de acondicionamento. Por fim, o estudo realizado mostra a compatibilidade da técnica de DBS com aplicações forenses, e, em alguns casos, sugere qualidade técnica superior em relação àanálise em sangue total, já que é capaz de manter a estabilidade de compostos considerados instáveis em meio aquoso. / In the forensic context, instability of chemical compounds may result in considerable analytical errors that could lead to inaccurate conclusions regarding the composition of the sample. Thus, given the available chemical composition conservation strategies for biological samples, this work aims to assess the applicability of the DBS (Dried Blood Spot) technique to the forensic context, considering that this approach improves the chemical stability, and does not interfere with the composition of the sample. Therefore, this study investigated the chemical stability of cocaine, methylecgonine ester, benzoylecgonine, diazepam and alprazolam in post mortem whole blood samples. The DBS method was used for the processing of part of the samples, in order to compare results, and then evaluate the storage conditions on the viability of each blood matrix (whole blood in relation to DBS). Concurrently, the effects of temperature on the stability of those chemical substances were also evaluated. Analytical methodologies based on LC/MS-MS were developed and validated, according to parameters suggested by international guidelines. Afterward, samples containing known concentrations of the analytes were incubated in two distinct matrices (DBS and whole blood) at several temperatures, and were analyzed at different time intervals. Although whole blood samples stored in freezer do not present concentration decay above 20 per cent, results suggest that DBS samples promoted greater chemical stability of the compounds of interest. Furthermore, temperature appears to affect greatly the stability of those analytes, consonant with previous studies. Regarding the stability study data obtained for the selected benzodiazepines, they presented greater uniformity than the data obtained for cocaine and metabolites. Therefore, considering all the described conditions, i.e., the two distinct matrices and the different temperatures, the compounds of interest did not present a decrease in concentration above 20 per cent during the study period. The statistical analysis indicate that there is no significant differences between the deployed storage methods. Thus, further studies, with a greater number of samples, are recommended in order to corroborate the statistical findings for the benzodiazepine compounds presented in this study. This study shows the compatibility of the DBS technique with forensic applications, and, in some cases, suggests its superior technical quality in relation to the whole blood analysis, since it preserves the chemical stability of compounds.

Os barbitúricos são fármacos com atividade depressora do sistema nervoso central e estão relacionados com elevados números de casos de intoxicações e uso não-médico em vários países. No Brasil, a droga antiepiléptica mais encontrada em casos de intoxicação é o fenobarbital, pois os pacientes relatam que \"essa é uma substância com ação forte no cérebro\". De fato, os barbitúricos estão altamente relacionados com tentativa de suicídio e homicídio. Nesses casos existe a necessidade da quantificação dessas substâncias para correlacionar com a causa mortis. No entanto, as análises toxicológicas postmortem são de difícil execução e interpretação, pois a concentração de agentes tóxicos encontrados é bastante complexa e afetada não só pela condição de deterioração do corpo, mas também por um processo conhecido como redistribuição postmortem. Em geral, concentrações mais elevadas são encontradas no sangue situado nos sítios centrais (como o sangue coletado da cavidade cardíaca) em comparação aos níveis verificados nos vasos periféricos (como a veia femoral). Em outros casos, o tempo entre a morte e o exame postmortem é suficiente para que algumas substâncias que normalmente estariam presentes no sangue não estejam mais disponíveis neste fluido biológico. Há ainda um agravante, pois não existem valores de referências para a maioria das amostras biológicas não-convencionais, dificultando assim a interpretação dos resultados. Os exames toxicológicos devem ser realizados em amostras biológicas e tem como objetivo a avaliação da intoxicação como circunstância qualificadora do delito, como causa de periculosidade ou imputabilidade. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e aplicação de métodos de identificação de barbitúricos (butalbital, secobarbital, pentobarbital e fenobarbital) em amostras postmortem (sangue cardíaco, sangue femoral e fígado). Os analitos foram extraídos das amostras utilizando a micro extração em fase líquida (LPME), identificados e quantificados por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). Após o desenvolvimento e validação, os métodos analíticos foram aplicados em amostras postmortem de onze cadáveres necropsiados pelo Serviço de Verificação de Óbito da Cidade de São Paulo (SVO (SVO-USP), com suspeita de envolvimento de barbitúricos. Nove casos apresentaram resultado positivo para fenobarbital. A média da razão sangue femoral/sangue cardíaco foi de 0,91 com o desvio padrão de 0,23. Para a correlação fígado/sangue femoral a média foi de 1,17 com desvio padrão de 1,29. Os barbitúricos foram escolhidos como modelo de estudo devido à grande incidência de casos de intoxicação aguda com estes fármacos no Brasil. / Barbiturates are a class of drugs that act as central nervous system depressant and are associated with high numbers of poisoning cases and non-medical use in several countries. In Brazil, phenobarbital is the most related antiepileptic drug involved in intoxication cases. Patients report that \"this drug is a substance with strong action in the brain.\" In fact, barbiturates are highly related to attempted suicide and homicide cases, in which quantification of these substances to correlate with the possible cause of death is necessary. However, postmortem toxicological analyses are difficult to perform and interpret, because the concentration of toxic agents found is quite complex and affected not only by deterioration condition of the body but also by a process known as postmortem redistribution. In general, higher concentrations are found in the blood located in central sites (e.g. heart cavity) compared with the levels found in peripheral vessels (such as the femoral vein). In other cases, the time between death and postmortem examination is enough for some substances that would normally be present in the blood are no longer available in this biological fluid. Besides, there are few reference values for most non-conventional biological samples, making it difficult to interpret the results. The objective of this work was the development and application of methods for identification of barbiturates (butalbital, secobarbital, pentobarbital and phenobarbital) in postmortem samples (heart blood, femoral blood and liver). The analytes were extracted by using liquid-phase micro extraction (LPME) and quantified by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). After the development and validation, analytical methods were applied in real cases of eleven corpses autopsied by Death Verification Service of São Paulo City (USP-SVO), with suspected of barbiturates involvement. Nine cases were positive for phenobarbital. The mean ratio of blood femoral / cardiac blood was 0.91 with a standard deviation of 0.23. For the correlation liver / femoral blood the average was 1.17 with a standard deviation of 1.29. Barbiturates were chosen as model for this study because the high incidence of cases of acute poisoning with these drugs in Brazil.

Orientador: Noeme Souza Rocha / Banca: Elan Cardozo Paes de Almeida / Banca: Alexandre Hataka / Resumo: Os casos de intoxicações não intencionais ou intencionais são comuns na história da Medicina Veterinária principalmente em animais de companhia como cães e gatos. A Medicina Veterinária Legal utiliza amplo conhecimento para fundamentar laudos técnicos que tem como função auxiliar processos judiciais. De acordo com o artigo 32 da Lei de Crimes Ambientais 9.605 de 12 de fevereiro de 1998, intoxicar animais é crime de maus tratos. O reconhecimento adequado dos sinais clínicos, lesões anatomopatológicas características dos casos de intoxicação que levam á óbito associados com os métodos de identificação laboratorial de toxicologia forense, são fundamentais para estabelecer um diagnóstico definitivo do agente tóxico. No presente trabalho objetivou-se ampliar os estudos na área de Medicina Veterinária Legal e identificar lesões anatomopatológicas decorrentes de intoxicação em cães e gatos. No período de 2009 a 2014 foram selecionados do arquivo da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP - Universidade Estadual Paulista, Campus de Botucatu, Departamento de Clínica Veterinária, Serviço de Patologia Veterinária, 42 casos, sendo 31 (73,8%) cães e 11 (26,2%) gatos. Destes casos 21 (50%) apresentaram Boletim de Ocorrência e 22 (52,4%) realizaram exame toxicológico. A maior prevalência foi de intoxicações por carbamato. O exame necroscópico revelou que a as principais causa mortis foram insuficiência cardiorrespiratória e choque hipovolêmico. No exame histopatológico de fígado, rim e encéfalo as principais lesões observadas foram congestão, degeneração e hemorragia. Os órgãos apresentaram sinais de autólise e putrefação. As técnicas diagnósticas utilizadas são complementares e auxiliam o Médico Veterinário a elaborar laudos técnicos para processos judiciais nos casos de intoxicações criminais / Abstract: The cases of poisoning no intentional or intentional are common in the history of the Veterinary Medicine mainly in animals of company as dogs and cats. The Legal Veterinary Medicine use these tools in the base of technical decisions to aid processes, involving crimes with animals. According to the Law of Environmental Crimes 9.605 of February 12 of 1998, poisoning in animals is considered crime of mistreatments. The appropriate recognition of the clinical signs, lesions anatomical pathological that characterizes the cases of intoxication that take to death associated with the methods of identification laboratorial of forensic toxicology is fundamental to establish a definitive diagnosis of the toxic agent. In the present work was made analysis of lesions relation of toxic agents and context of Veterinary Forensic Medicine in these situations. In period 2009 to 2014 are selected from the archive of Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP - Universidade Estadual Paulista, Campus de Botucatu, Departamento de Clínica Veterinária, Serviço de Patologia Veterinária 42 cases, 31 (73,8%) dogs and 11 (26,2%) cats. These cases 21 (50%) feature Boletim de Ocorrência and 22 (52,4%) are made toxicologycal exam. The highest prevalence ware intoxication for carbamate. The necropsy revealed that main causa mortis were cardiac respiratory insufficiency and hypovolemic shock. In histopathology of liver, kidney and brain the main lesions are congestion, degeneration and bledding. The organs show signs of autolysis and putrefaction. The diagnostic technics used are additional and help veterinarion to make reports for litigation in cases of criminal intoxication / Mestre

Os barbitúricos são fármacos com atividade depressora do sistema nervoso central e estão relacionados com elevados números de casos de intoxicações e uso não-médico em vários países. No Brasil, a droga antiepiléptica mais encontrada em casos de intoxicação é o fenobarbital, pois os pacientes relatam que \"essa é uma substância com ação forte no cérebro\". De fato, os barbitúricos estão altamente relacionados com tentativa de suicídio e homicídio. Nesses casos existe a necessidade da quantificação dessas substâncias para correlacionar com a causa mortis. No entanto, as análises toxicológicas postmortem são de difícil execução e interpretação, pois a concentração de agentes tóxicos encontrados é bastante complexa e afetada não só pela condição de deterioração do corpo, mas também por um processo conhecido como redistribuição postmortem. Em geral, concentrações mais elevadas são encontradas no sangue situado nos sítios centrais (como o sangue coletado da cavidade cardíaca) em comparação aos níveis verificados nos vasos periféricos (como a veia femoral). Em outros casos, o tempo entre a morte e o exame postmortem é suficiente para que algumas substâncias que normalmente estariam presentes no sangue não estejam mais disponíveis neste fluido biológico. Há ainda um agravante, pois não existem valores de referências para a maioria das amostras biológicas não-convencionais, dificultando assim a interpretação dos resultados. Os exames toxicológicos devem ser realizados em amostras biológicas e tem como objetivo a avaliação da intoxicação como circunstância qualificadora do delito, como causa de periculosidade ou imputabilidade. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e aplicação de métodos de identificação de barbitúricos (butalbital, secobarbital, pentobarbital e fenobarbital) em amostras postmortem (sangue cardíaco, sangue femoral e fígado). Os analitos foram extraídos das amostras utilizando a micro extração em fase líquida (LPME), identificados e quantificados por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). Após o desenvolvimento e validação, os métodos analíticos foram aplicados em amostras postmortem de onze cadáveres necropsiados pelo Serviço de Verificação de Óbito da Cidade de São Paulo (SVO (SVO-USP), com suspeita de envolvimento de barbitúricos. Nove casos apresentaram resultado positivo para fenobarbital. A média da razão sangue femoral/sangue cardíaco foi de 0,91 com o desvio padrão de 0,23. Para a correlação fígado/sangue femoral a média foi de 1,17 com desvio padrão de 1,29. Os barbitúricos foram escolhidos como modelo de estudo devido à grande incidência de casos de intoxicação aguda com estes fármacos no Brasil. / Barbiturates are a class of drugs that act as central nervous system depressant and are associated with high numbers of poisoning cases and non-medical use in several countries. In Brazil, phenobarbital is the most related antiepileptic drug involved in intoxication cases. Patients report that \"this drug is a substance with strong action in the brain.\" In fact, barbiturates are highly related to attempted suicide and homicide cases, in which quantification of these substances to correlate with the possible cause of death is necessary. However, postmortem toxicological analyses are difficult to perform and interpret, because the concentration of toxic agents found is quite complex and affected not only by deterioration condition of the body but also by a process known as postmortem redistribution. In general, higher concentrations are found in the blood located in central sites (e.g. heart cavity) compared with the levels found in peripheral vessels (such as the femoral vein). In other cases, the time between death and postmortem examination is enough for some substances that would normally be present in the blood are no longer available in this biological fluid. Besides, there are few reference values for most non-conventional biological samples, making it difficult to interpret the results. The objective of this work was the development and application of methods for identification of barbiturates (butalbital, secobarbital, pentobarbital and phenobarbital) in postmortem samples (heart blood, femoral blood and liver). The analytes were extracted by using liquid-phase micro extraction (LPME) and quantified by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). After the development and validation, analytical methods were applied in real cases of eleven corpses autopsied by Death Verification Service of São Paulo City (USP-SVO), with suspected of barbiturates involvement. Nine cases were positive for phenobarbital. The mean ratio of blood femoral / cardiac blood was 0.91 with a standard deviation of 0.23. For the correlation liver / femoral blood the average was 1.17 with a standard deviation of 1.29. Barbiturates were chosen as model for this study because the high incidence of cases of acute poisoning with these drugs in Brazil.