Made available in DSpace on 2014-06-12T18:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3566_1.pdf: 7927294 bytes, checksum: add9c73fe4506901113309a0dc549513 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O diagnóstico da neurotoxoplasmose em portadores de aids pode ser difícil, requerendo distinção com outras neuroinfecções e lesões tumorais. Os exames complementares disponíveis trazem limitações para a confirmação da doença. A tese esteve composta por uma revisão da literatura, abordando o estado de arte dos métodos disponíveis para diagnóstico de neurotoxoplasmose, e por dois artigos: No primeiro, sob título Lesão cerebral única de origem toxoplásmica, foram analisados aspectos de ressonância magnética convencional de 10 pacientes com neurotoxoplasmose e lesão cerebral única, uma vez que essa forma de apresentação impõe maior dificuldade diagnóstica sendo pouco explorada na literatura. As imagens foram avaliadas quanto à localização das lesões, intensidade de sinal, tipo de realce após contraste, presença de alvo excêntrico e captação meníngea, em aparelho Phillips 1,5 Tesla, modelo Achieva®. As lesões não tiveram localização preferencial e ocorreram igualmente em regiões córtico-subcorticais e profundas. Na seqüência T2, houve variabilidade de sinal, porém, no T1, predominaram padrões de iso ou hipossinal, edema perilesional e realce anelar após contraste, aspectos similares aos de lesões múltiplas, descritos na literatura. Concluiu-se que a presença desses padrões em lesões únicas pode ser sugestiva da neurotoxoplasmose. O segundo artigo, sob título Influência de características da neurotoxoplasmose na sensibilidade da PCR em tempo real em pacientes com aids, consistiu de estudo de validação fase III da reação em cadeia da polimerase em tempo real para detecção do gene B1 em sangue e líquor de pacientes com aids e diagnóstico presuntivo de neurotoxoplasmose. O DNA foi extraído com kit QiAmp DNA®, marca Qiagen®; amplificado com uso de primers da marca Applied Biosystem®, com seqüência específica de 98 pares de bases do gene B1. As amostras foram processadas em termociclador Icicle®, marca Biorad®, operado pelo programa PrimerExpress. Foram incluídos 135 pacientes com sintomatologia neurológica encefálica, distribuídos em dois grupos: grupo I - 85 casos de neurotoxoplasmose e grupo II - 50 pacientes com manifestações neurológicas não toxoplásmicas. A PCR em tempo real em sangue revelou sensibilidade de 1,5% (IC 95% 0,1% - 9%), especificidade igual a 100% (IC 95% 87,7% - 100%), valor preditivo positivo de 100% (IC 95% 5,5% - 100%) e valor preditivo negativo de 34,3% (IC 95% 25,4% - 44,4%). No líquor, houve sensibilidade igual a 35,8% (IC 95% 25,7% - 47,3%), especificidade igual a 100,0% (IC 95% 89,6% - 100,0%), valor preditivo positivo de 100.0% (IC 95% 85,4% - 100,0%) e valor preditivo negativo de 44,7% (IC 95% 34,5% - 55,3%). Nos pacientes do grupo I com pleocitorraquia e quatro ou mais lesões encefálicas pelo T gondii, a positividade liquórica da PCR foi significantemente maior do que a daqueles com normocitorraquia (p=0,021) e com até três lesões encefálicas (p=0,026). Concluiu-se que a PCR em tempo real no sangue não se mostrou útil ao diagnóstico; no LCR, o teste demonstrou baixa sensibilidade, mas alta especificidade para o diagnóstico da neurotoxoplasmose. Maior número de lesões e maior celularidade liquórica podem melhorar a sensibilidade do método. Sugerem-se novas pesquisas que correlacionem esses aspectos com os parâmetros de acurácia do método

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Encefalite causada por Toxoplasma gondii e a causa mais frequente de lesao em Sistema Nervoso Central no paciente com sindrome da imunodefiCiência adquirida (aids) (LUFT et ai, 1992). Toxoplasma pode infectar qualquer celula cerebral. Portanto, a clinica da neurotoxoplasmose (NT) nao e especifica e pode incluir sinais e sintomas focais ou nao de disfuncao do sistema nervoso central. A apresentacao clinica varia de uma apresentacao insidiosa, que envolve semanas, a um estado confusional agudo ou mesmo fulminante. A toxoplasmose ocorre em estagios avancados da doenca e a ausencia de anticorpos anti-toxoplasma pelo metodo da imunotluorescencia nao exclui o diagnostico (PORTER et ai, 1992). O tratamento geralmente e baseado no diagnostico presuntivo e a terapia padrao e a combinacao de sulfadiazina, pirimetamina e leucovorim (LUFT et al, 1992). Apos o inicio da terapia especifica, a resposta clinica e radiologica e utilizada como confirmacao diagnostica. Ha uma grande dificuldade de metodos diagnosticos acurados para confirmacao dos casos. O objetivo do presente estudo e apresentar um metodo para deteccao do DNA de T.gondii por PCR-Multiplex em tempo real. Resultados: Entre as 51 amostras de liquores colhidos, obtivemos uma sensibilidade de 68,8 por cento, especificidade de 100 por cento, valor preditivo positivo de 100 por cento e um valor preditivo negativo de 87,8 por cento. Conclusao: O PCR em tempo real em LCR apresentou uma elevada especificidade e sensibilidade em pacientes com suspeita de toxoplasmose cerebral. Sendo um metodo pouco invasivo, poderia ser incluido no algoritmo diagnostico em pacientes com sida com lesao em SNC / Toxoplasmosis Encephalitis (TE) is the main cause of focal disease in Central Nervous System in patients with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) (LUFT et al, 1992). Toxoplasma can infect any brain cell. However, the clinical signs aren’t specific and present or not signs and focal symptoms of central nervous system dysfunction. Clinical presentation varies from insidiousis forms to an acute mental status change or to a fulminant form. Toxoplasmosis occurs in advanced stages of human immunodeficiency virus infection, and the absence of antitoxoplasma antibodies on immunofluorescence assay does not exclude the diagnosis (PORTER et al, 1992). Treatment is often based in presumptive diagnosis and the standard treatment is the combination of pyrimethamine plus sulfadiazine plus folinic acid (LUFT et al, 1992). After the beginning of the specific therapy, the clinic and radiologic response is the way to confirm the diagnosis. However, there is a great difficult in diagnosis method to confirm the cases. In this study, we‘ve aim to present a method to detect T.gondii DNA by Real-Time polymerase chain reaction (PCR) Multiplex. Results: Among 51 cerebrospinal fluid samples, we had 68,8% of sensibility, 100% of specificity, 100% of positive predictive value and 87,8% of negative predictive value. Conclusions: The real time PCR in LCR presented a high specificity and sensibility in patients under suspicion of encephalitis toxoplasmosis. Being a less invasive method, we could include it in the algorithmic diagnosis in HIV-infected patients with CNS focal lesion. / CNPq: 132682/2004 -4 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:03:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8814_1.pdf: 2523258 bytes, checksum: 8f9afcd9ea0efdb5541dcd5fa2e2b7af (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Objetivos: O objetivo desse estudo foi fundamentar, do ponto de vista histopatológico, as principais alterações da RM nas lesões dos pacientes com neurotoxoplasmose. Pacientes e métodos: Vinte pacientes com SIDA e sintomatologia neurológica foram examinados em dois equipamentos de RM com 1,0 e 1,5T. Utilizamos critérios de diagnóstico presuntivo clínico-radiológico-terapêutico. Realizamos imagens em diferentes planos ortogonais, antes e após o contraste venoso. Avaliamos os exames quanto a presença de lesão focal; número e localização; tipo de realce após o contraste venoso, a presença do sinal do alvo excêntrico. Foram selecionados 2 dentre 23 casos de arquivo de necropsias, baseados na sobreposição das representações macro e microscópica das lesões com as imagens de RM mais representativas da doença. O critério diagnóstico histológico foi a presença do pseudocisto parasitário. Resultados: A análise comparativa das características histopatológicas das lesões da neurotoxoplasmose com as observadas nas imagens de RM, permitiram fundamentar os componentes dessas lesões. A zona central das lesões, hipointensas em T1 na RM e que não impregnavam pelo contraste venoso, correspondia a área de necrose coagulativa. A zona intermediária de sinal variável em T1 e T2 e que impregnava pelo contraste venoso correspondia a reação inflamatória, observando-se também alguns focos de hemorragia. A zona periférica, hipointensa em T1 e hiperintensa em T2, relacionava-se a edema (espongiose). Observamos uma reentrância do halo hiperêmico na área de necrose, correspondendo histologicamente a zona intermediária. Esse detalhe correlacionou-se com o sinal do alvo excêntrico descrito nas imagens de RM e chamado nesse artigo de sinal da península. Conclusão: A análise descritiva das alterações observadas nas imagens de ressonância magnética, confrontadas com os fundamentos histopatológicos que as justificam, possibilitaram sugerir um padrão lesional mais representativo da lesão da neurotoxoplasmose, permitindo maior acurácia no seu diagnóstico

Orientador: Lenice do Rosário de Souza / Resumo: Introdução: A aids caracteriza-se por comprometimento do sistema nervoso central, cujas células são importantes alvos para o vírus da imunodeficiência humana (HIV). Alterações neurológicas acometem cerca de 40% a 70% das pessoas que vivem com HIV/aids, chegando a 90% ou mais em estudos de necropsia. A toxoplasmose cerebral é a infecção mais comum, acomete cerca de 3% a 40% dos pacientes com aids e é a causa mais comum de lesão expansiva focal. Alguns critérios clínicos e radiológicos são utilizados para definição de seu diagnóstico. Objetivo: avaliar os dados epidemiológicos, clínicos, terapêuticos e as alterações cerebrais tomográficas no diagnóstico presuntivo de toxoplasmose cerebral em indivíduos com aids. Casuística e métodos: foram estudados, retrospectivamente, 28 pacientes com diagnóstico presuntivo de toxoplasmose cerebral, que realizaram exames de imagem a partir da suspeita clínica, atendidos no período de junho de 2012 a dezembro de 2018 e que realizaram tratamento específico para a infecção oportunista. A coleta de dados foi realizada por meio de consulta aos prontuários médicos dos pacientes que apresentaram critérios de inclusão para o estudo. Os exames de imagem foram avaliados com auxílio de médico radiologista do Serviço. As análises foram descritivas com cálculo de médias e desvios padrão para variáveis quantitativas e frequências e percentuais para variáveis categorizadas. Os sintomas pré e pós-tratamento foram comparados pelo teste qui-quadrado. Resultado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: AIDS is characterized by impairment of the central nervous system, whose cells are important targets for the human immunodeficiency virus (HIV). Neurological changes affect about 40% to 70% of people living with HIV / AIDS, reaching 90% or more in necropsy studies. Cerebral toxoplasmosis is the most common infection, affecting about 3% to 40% of AIDS patients and is the most common cause of focal expansive lesion. Some clinical and radiological criteria are used to define its diagnosis. Objective: to evaluate epidemiological, clinical, therapeutic and tomographic brain changes in the presumptive diagnosis of cerebral toxoplasmosis in individuals with AIDS. Patients and Methods: 28 patients with a presumptive diagnosis of cerebral toxoplasmosis, who underwent imaging from the clinical suspicion, were studied retrospectively from June 2012 to December 2018 and who underwent specific treatment for the opportunistic infection. The data collection was done by consulting the medical records of the patients who presented inclusion criteria for the study. The imaging exams were evaluated with the assistance of the radiologist of the Service. The analyzes were descriptive with calculation of means and standard deviations for quantitative variables and frequencies and percentages for categorized variables. Pre and post-treatment symptoms were compared by the chi-square test. Results: the majority of the patients were men (53.6%), with a mean age of 39.8 years. Headache wa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Cláudio Lúcio Rossi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T13:51:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nascimento_FernandaSantos_D.pdf: 5313856 bytes, checksum: fd526ebe03ae5465c13afe95ffe8df9a (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A neurotoxoplasmose é considerada uma grave complicação em pacientes com comprometimento do sistema imune e em crianças congenitamente infectadas pelo Toxoplasma gondii. O presente estudo abordou três aspectos da neurotoxoplasmose, o diagnóstico molecular, a resposta imune e a relação desta infecção com transtornos mentais. Com relação ao diagnóstico molecular, a eficiência das técnicas de nested-PCR (nPCR) e PCR convencional (PCRc) em detectar DNA do T. gondii foi avaliada em nove amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com neurotoxoplasmose, cinco amostras de LCR de pacientes com outras desordens neurológicas (dois com neurocriptococose, dois com neurosífilis e um com neurocisticercose) e amostras artificiais contendo diferentes concentrações do parasito. A nPCR foi positiva em todos os nove pacientes com neurotoxoplasmose, enquanto a PCRc foi positiva em somente cinco casos. As duas técnicas de PCR foram negativas em LCR de pacientes com outras desordens neurológicas. Nas amostras artificiais, a concentração de taquizoítos detectada por nPCR foi dez vezes menor do que aquela detectada por PCRc. Para avaliar a resposta imune, anticorpos das subclasses da IgG anti-T. gondii foram pesquisados em 19 amostras de LCR de pacientes com neurotoxoplasmose, utilizando ELISA padronizada com uma preparação antigênica de cistos do parasito. Os anticorpos IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 foram detectados em 84,2%, 73,7%, 36,8% e 36,8% dos pacientes, respectivamente. Não foram encontradas diferenças significativas entre as sensibilidades e as médias das absorbâncias das reações ELISA para IgG1 e IgG2, porém, as sensibilidades e as médias das absorbâncias das reações para essas duas subclasses foram significativamente maiores do que as encontradas nas reações ELISA para IgG3 e IgG4. A associação entre toxoplasmose e transtornos mentais foi investigada comparando as prevalências e/ou as concentrações dos anticorpos IgG, IgM e IgA anti-T. gondii, detectados por reações imunoenzimáticas, em amostras de soro de 41 pacientes com esquizofrenia, 38 pacientes com transtornos do humor e 95 voluntários sadios. Os anticorpos IgG foram detectados em 43,9% dos pacientes com esquizofrenia, 52,6% dos pacientes com transtornos do humor e 28,4% dos voluntários sadios. A prevalência da IgG e as concentrações desse anticorpo nos pacientes com transtornos do humor foram significativamente maiores do que as encontradas em voluntários sadios (p=0,0204 e p=0,0059, respectivamente). Por outro lado, não foram encontradas diferenças significativas nesses dois parâmetros entre pacientes com esquizofrenia e voluntários sadios ou entre os pacientes com esquizofrenia e transtornos do humor. Os anticorpos IgA foram detectados em um paciente (2,6%) com transtorno do humor e em um (1,1%) voluntário sadio, enquanto os anticorpos IgM foram detectados em dois pacientes (5,2%) com transtornos do humor. O presente estudo indica que a nPCR pode ser uma ferramenta potencialmente útil para a confirmação diagnóstica da infecção do sistema nervoso central pelo T. gondii e sugere que esse parasito poderia ser um dos possíveis fatores causais dos transtornos do humor. Estudos adicionais são necessários para compreender melhor a fisiopatologia da neurotoxoplasmose e sua associação com outras doenças / Abstract: Neurotoxoplasmosis is considered a serious complication in patients with an impaired immune system and in children congenitally infected by Toxoplasma gondii. The present study addressed three aspects of neurotoxoplasmosis, namely, the molecular diagnosis, the immune response and the relationship of this infection to mental disorders. With regard to molecular diagnosis, the ability of nested-PCR (nPCR) and conventional PCR (cPCR) to detect T. gondii DNA was assessed in nine cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients with neurotoxoplasmosis, five CSF samples from patients with other neurological disorders (two with neurocryptococcosis, two with neurosyphilis and one with neurocysticercosis) and artificial samples containing different concentrations of the parasite. The nPCR was positive in all nine patients with neurotoxoplasmosis whereas the cPCR was positive in only five cases. Both PCR procedures were negative in CSF from patients with other neurologic disorders. In the artificial samples, the tachyzoite concentrations detected by nPCR were ten times lower than those detected by cPCR. To assess the immune response, 19 CSF samples from patients with neurotoxoplasmosis were screened for IgG subclass antibodies to T. gondii using an ELISA standardized with an antigenic preparation from parasite cysts. IgG1, IgG2, IgG3 and IgG4 antibody subclasses were detected in 84.2%, 73.7%, 36.8% and 36.8% of the patients, respectively. There were no significant differences in the ELISA sensitivities and mean absorbances for IgG1 and IgG2, whereas the sensitivities and mean absorbances for these two IgG subclasses were significantly higher than for IgG3 and IgG4. The association between toxoplasmosis and mental disorders was investigated by comparing the prevalences and/or the concentrations of anti-T. gondii IgG, IgM and IgA antibodies screened by immunoenzymatic reactions in serum samples from 41 patients with schizophrenia, 38 patients with mood disorders and 95 healthy volunteers. IgG antibodies were detected in 43.9% of patients with schizophrenia, 52.6% of patients with mood disorders and 28.4% of healthy individuals. The prevalence of IgG and the concentration of this antibody in patients with mood disorders were significantly greater than in healthy volunteers (p=0.0204 and p=0.0059, respectively). In contrast, there were no significant differences in these two parameters between patients with schizophrenia and healthy volunteers, or between patients with schizophrenia and patients with mood disorders. IgA antibodies were detected in one patient (2.6%) with mood disorders and in one (1.1%) healthy volunteer, whereas IgM antibodies were detected in two patients (5.2%) with mood disorders. The present study indicates that nPCR may be a potentially useful tool for the diagnosis of T. gondii infection of the central nervous system and suggests that this parasite could be a possible cause of mood disorders. Further studies are necessary to improve our understanding of the physiopathology of neurotoxoplasmosis and its association with other diseases / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas