Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-28T11:50:50Z No. of bitstreams: 1 francislenejulianamartins.pdf: 1737993 bytes, checksum: 27ec207170bc8ac0b2a6304d77c95420 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-28T12:15:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 francislenejulianamartins.pdf: 1737993 bytes, checksum: 27ec207170bc8ac0b2a6304d77c95420 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T12:15:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 francislenejulianamartins.pdf: 1737993 bytes, checksum: 27ec207170bc8ac0b2a6304d77c95420 (MD5) Previous issue date: 2016-04-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O tratamento farmacológico da onicomicose é, geralmente, prolongado, pouco efetivo, de custo elevado e pode acarretar reações adversas. Em 25 % dos casos, essa terapia não apresenta resposta satisfatória. Todos esses fatores levam à busca por novos compostos para uso terapêutico. Dessa forma, este trabalho teve por objetivo avaliar a atividade antifúngica de cinamaldeído, eugenol e α-metil-transcinamaldeído e desenvolver uma formulação para o tratamento contra os principais fungos causadores da onicomicose. Para tanto, foi avaliada a atividade antifúngica dos compostos, na concentração de 1000 µg/mL frente a Trichophyton mentagrophytes ATCC 11481; Fusarium oxysporum ATCC 48112, Fusarium solani ATCC 36031, Microsporum canis ATCC 32903, Microsporum gypseum ATCC 14683, Trichophyton rubrum URM 1666 e Epidermophyton floccosum CCF-IOC-3757. Além disso, foi estabelecida a concentração inibitória mínima (CIM), entre 0,12 a 1000 µg/mL para fungos filamentosos citados e T. mentagrophytes isolado clínico e 2,44 a 5000 µg/mL para Candida albicans ATCC 10231 e C. albicans isolado clínico e a concentração fungicida mínima (CFM) frente as mesmas espécies. O cetoconazol, a terbinafina, o itraconazol e a anfotericina B foram utilizados como fármacos de referência. Para estes fármacos e o composto mais promissor, foram verificadas as alterações morfológicas provocadas sobre as linhagens testadas por meio de microscopia eletrônica de varredura. Além disso, foi avaliada a interferência com a atividade de fosfolipase em C. albicans e foi realizado o ensaio de toxicidade aguda com a utilização do bioindicador Daphnia magna. Do mesmo modo, foi avaliado o percentual de viabilidade celular sobre fibroblastos L 929, realizada a citometria de fluxo para avaliar as alterações sobre F. oxysporum e foi elaborada uma formulação com cinamaldeído a 2 %. Os resultados mostraram que o cinamaldeído foi eficaz contra todos os micro-organismos testados, sendo mais ativo que os demais compostos avaliados. Foi ativo contra F. oxysporum, F. solani e E. floccosum, que não foram inibidos pelos fármacos de referência e mais ativo frente a T. rubrum. As eletromicrografias mostraram que o cinamaldeído provocou alterações nas estruturas dos fungos filamentosos e da levedura, as quais podem ser indicativas de seu mecanismo de ação e provocou redução na atividade de fosfolipase em C. albicans. Nos ensaios de toxicidade aguda, o cinamaldeído foi considerado moderadamente tóxico à D. magna e, abaixo de 1 µg/mL, não interferiu com a viabilidade celular em fibroblastos L 929. A citometria de fluxo mostrou que o cinamaldeído causou a redução na concentração de lipídios neutros, viabilidade celular e interferiu com a atividade mitocondrial de F. oxysporum. A formulação elaborada foi testada in vitro e inibiu T. mentagrophytes, F. oxysporum, M. gypseum e C. albicans. Os resultados obtidos são promissores, mas faz-se necessário verificar a permeabilidade do ativo na formulação e realizar os ensaios in vivo. / Pharmacological treatment of onychomycosis is usually extended, halfhearted, high cost and can brings adverse reactions. In 25 % of cases, this therapy has no satisfactory answer. All of these factors lead to the search for new compounds for therapeutic use. Thus, this study aimed to evaluate the antifungal activity of cinnamaldehyde, eugenol, and α-methyl-trans-cinnamaldehyde and develop a formulation for the treatment against the main causative fungi of onychomicosis. It was evaluated the antifungal activity of compounds, at concentration of 1000 µg/mL against Trichophyton mentagrophytes ATTC 11481; Fusarium oxysporum ATCC 48112, Fusarium solani ATCC 36031, Microsporum canis ATCC 32903, Microsporum gypseum ATCC14683, Trichophyton rubrum URM 1666 and Epidermophyton floccosum CCF-IOC-3757. In addition, it was established the minimum inhibitory concentration (MIC), between the 0.12 to 1000 µg/mL for filamentous fungi cited and Trichophyton mentagrophytes clinical strain and 2.44 to 5000 µg/mL for C. albicans ATCC 10231 and C. albicans clinical strain and minimum fungicide concentration (MFC) against the same strains. Ketoconazole, terbinafine, itraconazole and amphotericin B were used as reference drugs. For these drugs and the most promising compound, were observed morphological changes caused on the tested strains by means of scanning electron microscopy. Furthermore, interference with phospholipase activity in C. albicans was evaluated and the acute toxicity test was developed with the use of bio-indicator Daphnia magna. As well, cell viability percentage was measured on L 929 fibroblast, flow cytometry was performed to assess the changes of F. oxysporum and a formulation with 2 % cinnamaldehyde was developed. The results show that cinnamaldehyde was effective against all tested microorganisms, being more active than the other compounds evaluated. It was active against F. oxysporum, F. solani and E. floccosum, which were not inhibited by the reference drugs and more active against T. rubrum. The micrographs showed that cinnamaldehyde caused changes in the structure of filamentous fungi and yeast, which may be indicative of their mechanism of action and caused reduction of phospholipase activity in C. albicans. In acute toxicity tests, the cinnamaldehyde was considered moderately toxic to D. magna and below 1 µg/mL did not interfere with cell viability in L 929 fibroblasts. Flow cytometry showed that cinnamaldehyde caused reduction in the concentration of neutral lipids, cell viability and interfered with mitochondrial activity of F. oxysporum. The formulation prepared was tested in vitro and inhibited T. mentagrophytes, F. oxysporum, M. gypseum and C. albicans. The results are promising, but it is necessary to check the permeability of the active in the formulation and conduct in vivo testing.

O consumo de frutas minimamente processadas tem crescido consideravelmente nos Ãltimos anos devido suas vantagens nutricionais e por estarem prontos para o consumo. PorÃm, a presenÃa de microrganismos patogÃnicos nestes produtos à um risco para a saÃde dos consumidores, pois sÃo consumidos crus. O foco principal desta pesquisa foi avaliar in vivo a eficiÃncia de uma cobertura de quitosana adicionada de trans-cinamaldeÃdo em melÃo (Cucumis melo L.) minimamente processado, sobre a microbiota prÃpria do melÃo e do melÃo inoculado com Escherichia coli (ATCC 25922TM) e Listeria innocua (ATCC 33090). Inicialmente determinou-se a concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) e bactericida (CBM) do trans-cinamaldeÃdo a nÃvel in vitro para obter-se a concentraÃÃo efetiva como antimicrobiano. Posteriormente, os melÃes foram minimamente processados e divididos em trÃs partes, sendo uma sem inoculaÃÃo, outra inoculada com E. coli e outra com L. innocua, sendo em seguida imersos em dois tipos de cobertura: cobertura de quitosana de mÃdio peso molecular (2%) e em cobertura de quitosana de mÃdio peso molecular (2%) com 0,05% de trans-cinamaldeÃdo. Como controles foram utilizados o melÃo inoculado com Ãgua; inoculado com E. coli e inoculado com L. innocua. Foram realizadas determinaÃÃo de bactÃrias mesÃfilas, psicrÃfilas, coliformes, bolores e leveduras nos melÃes nÃo inoculados e contagem de E. coli e L. innocua nos melÃes inoculados, nos tempos: 0, 3, 7, 14 e 21 dias de armazenamento a 4 ÂC. Ambas coberturas apresentaram atividade antimicrobiana sobre E. coli, L. innocua, bactÃrias mesÃfilas, psicrÃfilas, coliformes, bolores e leveduras, nÃo ocorrendo entre elas uma diferenÃa estatÃstica significativa (P>0,001). A cobertura com trans-cinamaldeÃdo nÃo apresentou maior eficiÃncia na aÃÃo antimicrobiana com relaÃÃo aos microrganismos pesquisados. / The consumption of fresh-cut fruits have grown considerably in recent years due to its nutritional advantages and because these are ready-to-eat products. However, the potential presence of pathogenic microorganisms in these products is a health risk for consumers, as they are eaten raw. The main purpose of this research was to evaluate in vivo the efficiency of a chitosan edible coating added with trans-cinnamaldehyde applied to fresh-cut melon (Cucumis melo L.), against fresh-cut melonâs own microflora and against Escherichia coli (ATCC 25922TM) and Listeria innocua (ATCC 33090). Firstly, in order to obtain the effective antimicrobial concentration, the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) were obtained in vitro. Subsequently, the melons were minimally processed and divided into three parts, the first part without inoculation, the second part inoculated with E. coli and the third part inoculated with L. inocua; immediately, the fresh-cut melon was immersed in two types of edible coating: a medium molecular weight chitosan edible coating (2%) and a chitosan edible coating added with trans-cinnamaldehyde (0.05%). Fresh-cut melon inoculated with water, inoculated with E. coli and inoculated with L. inocua, was used as controls. The determination of mesophilic bacteria, psychrophilic, coliform, yeasts and moulds was realized in non inoculated fresh-cut melon. In the other hand, the counting of E. coli and L. innocua was realized in inoculated fresh-cut melon; these microbiological analysis were done, in times: 0, 3, 7, 14 and 21 days of storage at 4 ÂC. Both edible coatings showed antimicrobial action against E. coli and L. innocua, mesophilic, psychrophilic, coliform bacterias, yeasts and moulds, no statistically significant difference was found between them (P>0,001). The chitosan edible coating added with trans-cinnamaldehyde (0.05%) do not show improved efficiency in its antimicrobial action, regarding the microorganisms used in this research.

UGARTE, Sheila Dayanna Milan. Atividade antimicrobiana da cobertura comestível de quitosana adicionada com trans-cinamaldeído sobre Escherichia coli E Listeria innocua em melão cantaloupe (Cucumus melo, L.) minimamente processado. 2012. 96 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Tecnologia de Alimentos, Fortaleza-CE, 2012 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-27T13:37:34Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_sdmugarte.pdf: 3028823 bytes, checksum: 631442b469207df51398ae6e1ded8c92 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-27T13:37:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_sdmugarte.pdf: 3028823 bytes, checksum: 631442b469207df51398ae6e1ded8c92 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-27T13:37:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_sdmugarte.pdf: 3028823 bytes, checksum: 631442b469207df51398ae6e1ded8c92 (MD5) Previous issue date: 2012 / The consumption of fresh-cut fruits have grown considerably in recent years due to its nutritional advantages and because these are ready-to-eat products. However, the potential presence of pathogenic microorganisms in these products is a health risk for consumers, as they are eaten raw. The main purpose of this research was to evaluate in vivo the efficiency of a chitosan edible coating added with trans-cinnamaldehyde applied to fresh-cut melon (Cucumis melo L.), against fresh-cut melon’s own microflora and against Escherichia coli (ATCC 25922TM) and Listeria innocua (ATCC 33090). Firstly, in order to obtain the effective antimicrobial concentration, the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) were obtained in vitro. Subsequently, the melons were minimally processed and divided into three parts, the first part without inoculation, the second part inoculated with E. coli and the third part inoculated with L. inocua; immediately, the fresh-cut melon was immersed in two types of edible coating: a medium molecular weight chitosan edible coating (2%) and a chitosan edible coating added with trans-cinnamaldehyde (0.05%). Fresh-cut melon inoculated with water, inoculated with E. coli and inoculated with L. inocua, was used as controls. The determination of mesophilic bacteria, psychrophilic, coliform, yeasts and moulds was realized in non inoculated fresh-cut melon. In the other hand, the counting of E. coli and L. innocua was realized in inoculated fresh-cut melon; these microbiological analysis were done, in times: 0, 3, 7, 14 and 21 days of storage at 4 °C. Both edible coatings showed antimicrobial action against E. coli and L. innocua, mesophilic, psychrophilic, coliform bacterias, yeasts and moulds, no statistically significant difference was found between them (P>0,001). The chitosan edible coating added with trans-cinnamaldehyde (0.05%) do not show improved efficiency in its antimicrobial action, regarding the microorganisms used in this research. / O consumo de frutas minimamente processadas tem crescido consideravelmente nos últimos anos devido suas vantagens nutricionais e por estarem prontos para o consumo. Porém, a presença de microrganismos patogênicos nestes produtos é um risco para a saúde dos consumidores, pois são consumidos crus. O foco principal desta pesquisa foi avaliar in vivo a eficiência de uma cobertura de quitosana adicionada de trans-cinamaldeído em melão (Cucumis melo L.) minimamente processado, sobre a microbiota própria do melão e do melão inoculado com Escherichia coli (ATCC 25922TM) e Listeria innocua (ATCC 33090). Inicialmente determinou-se a concentração inibitória mínima (CIM) e bactericida (CBM) do trans-cinamaldeído a nível in vitro para obter-se a concentração efetiva como antimicrobiano. Posteriormente, os melões foram minimamente processados e divididos em três partes, sendo uma sem inoculação, outra inoculada com E. coli e outra com L. innocua, sendo em seguida imersos em dois tipos de cobertura: cobertura de quitosana de médio peso molecular (2%) e em cobertura de quitosana de médio peso molecular (2%) com 0,05% de trans-cinamaldeído. Como controles foram utilizados o melão inoculado com água; inoculado com E. coli e inoculado com L. innocua. Foram realizadas determinação de bactérias mesófilas, psicrófilas, coliformes, bolores e leveduras nos melões não inoculados e contagem de E. coli e L. innocua nos melões inoculados, nos tempos: 0, 3, 7, 14 e 21 dias de armazenamento a 4 ºC. Ambas coberturas apresentaram atividade antimicrobiana sobre E. coli, L. innocua, bactérias mesófilas, psicrófilas, coliformes, bolores e leveduras, não ocorrendo entre elas uma diferença estatística significativa (P>0,001). A cobertura com trans-cinamaldeído não apresentou maior eficiência na ação antimicrobiana com relação aos microrganismos pesquisados.