Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-08-18T14:47:42Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Leonardo de Araújo Melo.pdf: 1484624 bytes, checksum: f3ede85bed6a663ebad60c8f5126c11a (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-08-23T14:40:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Leonardo de Araújo Melo.pdf: 1484624 bytes, checksum: f3ede85bed6a663ebad60c8f5126c11a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-23T14:40:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Leonardo de Araújo Melo.pdf: 1484624 bytes, checksum: f3ede85bed6a663ebad60c8f5126c11a (MD5) / Stat3 é um fator de transcrição que está envolvido em diversos processos fisiológicos incluindo proliferação e sobrevivência celular. Expressão elevada da Stat3 tem sido encontrada em diversos tipos de neoplasias de mama, pulmão, próstata, esófago, fígado e ovário. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão da Stat3 em uma série de tumores odontogênicos para adicionar mais informações ao conhecimento do perfil biológico deste grupo de neoplasias. Para isto, nós quantificamos a expressão do gene Stat3 por qPCR em 30 amostras de tumores odontogênicos sendo 23 casos de tumor odontogênico queratocístico (TOQ) e 7 casos de ameloblastoma (AB) e comparamos esta expressão com a mucosa bucal não-neoplásica. Nós também mensuramos a expressão da proteína Stat3 por imuno-histoquímica em 43 casos de TOQ e 47 casos de AB. Transcritos de Stat3 foram encontrados em 96,6% dos tumores estudados, no entanto este gene foi subexpresso nos TOQ e AB comparado a amostra bucal não-neoplásica. TOQs esporádicos apresentaram maiores níveis de transcritos de Stat3 em relação aos TOQs sindrômicos (p=0,04). Não foi observada diferença na expressão do gene Stat3 entre TOQ e AB (p=0,88). Na imunomarcação da Stat3, não foi observada diferença estatística na proporção de células positivas, intensidade de marcação e escore final entre os TOQs esporádicos e associados a SCBCN (p=0,31; p=0,39; p=0,65, respectivamente), bem como não foi observada diferença entre ABs sólidos e unicísticos (p=0,35; p=0,13; p=0,37, respectivamente). ABs apresentaram uma significativa maior imunomarcação da Stat3 em relação aos TOQs (p=0,03). Foi evidenciado que os TOQs com inflamação tiveram uma maior proporção de células marcadas pela Stat3 (p=0,001). Em TOQs e ABs, a marcação da Stat3 foi predominantemente citoplasmática não sendo observada diferença na localização celular da Stat3 entre estes tumores (p-0,58). Nossos achados mostraram uma baixa expressão de Stat3 nos TOQs e ABs. No entanto, foi observada uma maior imunomarcação da Stat3 nos ABs em comparação aos TOQs demonstrando que Stat3 pode contribuir no comportamento mais agressivo dos ABs. A presença de inflamação parece ter influenciado numa maior imunomarcação da Stat3 nos TOQs.

Submitted by Programa de Pós-Graduação em Odontologia Saúde (mestrodo@ufba.br) on 2017-04-03T14:12:58Z No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 4765427 bytes, checksum: ae3f93ce46ff32b7ce466869740090de (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-29T14:28:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 4765427 bytes, checksum: ae3f93ce46ff32b7ce466869740090de (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T14:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 4765427 bytes, checksum: ae3f93ce46ff32b7ce466869740090de (MD5) / FAPESB / O presente trabalho teve como objetivo estudar, por meio da imunohistoquímica, a participação de componentes celulares estromais a exemplo dos mastócitos (mast cell triptase), miofibroblastos (alfa-SMA) e macrófagos (CD163) e componentes vasculares (CD34 e D2-40) em uma série de tumores odontogênicos queratocísticos (TOQ), na tentativa de fornecer subsídios para compreender a interação entre esses componentes e o comportamento biológico distinto desta lesão. Para fins comparativos, cistos radiculares (CRs) e folículos pericoronários (FPs) também foram incluídos. A amostra foi composta por 30 TOQs, 15 CRs e 07 FPs. Para a avaliação dos mastócitos, miofibroblastos e macrófagos, foram quantificadas as células imunorreativas aos marcadores mast cell triptase, alfa-SMA e CD163, respectivamente, em 10 campos (400x). Os índices angiogênico e linfangiogênico foram avaliados por meio da densidade microvascular (MVD) e densidade microvascular linfática (MVDL) dos microvasos marcados, respectivamente, pelos marcadores CD34 e D2- 40. Foi utilizado o teste ANOVA com pós-teste de correção de Tukey, para análise estatística entre os marcadores segundo o tipo de lesão. Para a análise da correlação entre os marcadores dentro da mesma lesão, utilizamos a correlação de Pearson. Para a associação, no TOQ, entre os marcadores e a presença de inflamação, utilizamos o Teste T de Student. A análise da expressão do marcador mast cell triptase revelou existir diferenças significativas (p<0,05) entre a densidade de células mastocitárias presentes nos CRs (22,7) em relação aos FPs (1,23) e TOQs (7,39), e entre a densidade de mastócitos presentes no TOQs e FPs. Houve também diferença significativa (P<0,05) entre a densidade de miofibroblastos em TOQs (29,25) em relação aos CRs (4,66) e os FPs (1,50). A diferença da densidade de miofibroblastos entre os CRs e FPs não foi significativa (p>0,05). A respeito dos macrófagos, não houve diferenças significativas (p= 0,084) entre as densidades de macrófagos presentes nos TOQs (2,31), CRs (1,42) e FPs (0,14). Na avaliação do índice angiogênico, não houve diferenças significativas da MVD entre as três lesões estudadas. No entanto, para o índice linfangiogênico, houve diferença significativa (p<0,05) entre a MVDL presentes nos TOQs (11,64) em relação aos CRs (4,19) e aos FPs (0,167). A diferença entre a MVDL dos CRs em relação aos FPs não foi estatisticamente significante (p>0,05). Não foi encontrada associação significativa (p>0,05) entre os marcadores estudados com a presença de inflamação no TOQ. No presente trabalho, encontramos uma correlação positiva e moderada entre os marcadores mast cell triptase e o CD34 nos TOQ (p = 0,025). Já nos CRs encontramos uma correlação inversa e moderada entre os marcadores SMA x CD34 (p = 0,017). Nos FPs também encontramos uma correlação inversa entre os mesmos marcadores anteriores, porém forte (p=0,049). Embora os componentes celulares estromais e microvasculares aqui representados por mastócitos, miofibroblastos, macrófagos CD163 positivos e vasos CD34 e D240, respectivamente, sejam importantes para manutenção do arcabouço estrutural do TOQ e CR, existiu uma interação significante entre mast cell triptase e CD34 no TOQ e entre CD34 e o alfa –SMA no CR. / The present study aimed to investigate, by immunohistochemistry, the participation of stromal cell components such mast cell (mast cell tryptase), myofibroblasts (alpha- SMA) and macrophages (CD163) and vascular components (CD34 and D2-40) in a series of keratocysts odontogenic tumors (OKT) in an attempt to provide information to understand the interaction between these components and the biological behavior of this lesion. For comparative purposes, radicular cysts (RCs) and pericoronal follicles (PFs) were also included. The sample comprised 30 OKTs, 15 RCs and 07 PFs. For the evaluation of mast cells, myofibroblasts and macrophages, the cells immunoreactive with biomarkers mast cell tryptase, alpha- SMA and CD163 were quantified, respectively, in 10 fields (400x). The angiogenic and lymphangiogenic index were assessed by microvessel density (MVD) and lymphatic microvessel density (MVDL) of microvessels marked respectively by for CD34 and D2-40. ANOVA with post-test Tukey correction for statistical analysis between markers was used according to the type of injury. To analyze the correlation between markers within the same lesion, we used the Pearson correlation. For the association, the OKT between markers and the presence of inflammation, we used the Student's t test. The analysis of expression of mast cell tryptase shows any significant differences (p < 0.05) between the density of mast cells present in RCs (22.7) than FPs (1.23) and TOQs (7.39) and the density of mast cells present in TOQs and FPs. There was also a significant difference (P < 0.05) between the density of myofibroblasts in TOQs (29.25) compared to CRs (4.66) and FPs (1.50). The difference in density between the RCs of myofibroblasts and PFs was not significant (p> 0.05). With respect to macrophages, no significant differences (p = 0.084) between the densities of macrophages present in TOQs (2.31), CR (1.42) and FPs (0.14). With respect to the angiogenic index, there were no significant differences in MVD between the three lesions studied. However, for the lymphangiogenic index, a significant difference (p < 0.05) between MVDL present in TOQs (11.64) compared to CRs (4.19) and FPs (0.167). The difference between MVDL of CRs compared to FPs was not statistically significant (p > 0.05). No significant association (p > 0.05) between the biomarkers studied in the presence of inflammation in the OKT was found. In the present study, we found a moderate positive correlation between mast cell tryptase and CD34 markers in OKT (p = 0.025). Have the CR and found an inverse correlation between moderate SMA x CD34 (p = 0.017). In PFs also found an inverse correlation between the SMA x CD34, but strong (p = 0.049). Although stromal microvascular and cellular components represented here by mast cells, myofibroblasts, and CD163 positive macrophages and vessels CD34 and D240 are important for maintaining the structural framework of the OKT and RC, a significant interaction between mast cell tryptase x CD34 existed in OKT and between CD34 x alpha- SMA in RC.

Os tumores odontogênicos são um grupo heterogéneo de lesões formadas a partir de tecidos que dão origem ao dente. A metilação do ADN, uma adição covalente de um grupo metilo na posição 5 de carbono de um nucleótideo de citosina, é considerado um importante regulador da expressão génica. A adição do radical metil é catalisada por ADN metiltransferases (DNMTs). Embora alguns estudos epigenéticos tenham sido realizados em tumores odontogênicos, um estudo com os três tipos de DNMTs em vários membros desse grupo está em falta. Este estudo analisa a expressão de DNMTs em tumores odontogênicos. Amostras de vinte ameloblastomas, dez Calcificante tumores odontogênicos císticos, dez calcificados tumores epiteliais, dez tumor odontogênico adenomatóide, dez tumores odontogênicos queratocísticos, quatro fibromas ameloblásticos, dois fibro-odontoma ameloblástico, quatro fibroma centrais odontogênicos, sete tecidos de fibromas odontogênicos periféricos e dez mixomas odontogênicos foram incluídos. DNMT1, 3A e 3B foram expressas no núcleo e / ou citoplasma de todos os tumores odontogênicos. A alta expressão de DNMTs em células de tumor odontogênico sugere metilação como um mecanismo importante para este grupo de tumores. / Odontogenic tumours are a heterogeneous group of lesions formed from tissues that give rise to the tooth. DNA methylation, a covalent addition of a methyl group to the 5-carbon position of a cytosine nucleotide, is considered an important regulator of gene expression. The addition of the methyl radical is catalyzed by DNA methyltransferases (DNMTs). Although some epigenetic studies have been conducted in odontogenic tumours, a study with the three types of DNMTs in several different members of this group is missing. This study analyzes the expression of DNMTs in odontogenic tumours. Formalin-fixed and paraffin-embedded tissue samples of twenty ameloblastomas, ten calcifying cystic odontogenic tumors, ten calcifying epithelial tumors, ten adenomatoid odontogenic tumors, ten keratocystic odontogenic tumors, five ameloblastic fibromas, two ameloblastic fibro-odontoma, four central odontogenic fibroma, seven peripheral odontogenic fibroma and ten odontogenic mixoma were included. DNMT1, 3A and 3B were expressed in the nucleus and/or cytoplasm of all odontogenic tumours. The high expression of DNMTs in odontogenic tumour cells suggests methylation as an important mechanism for this group of tumours.

Os tumores odontogênicos compõem um grupo de lesões incomuns, porém interessantes, que se forma a partir dos tecidos que dão origem aos dentes. Esses tumores vêm sendo estudados há décadas por patologistas e cirurgiões que buscam entender seus mecanismos de formação e desenvolvimento, assim como desenvolver técnicas adequadas de tratamento. Inúmeras foram as tentativas realizadas até hoje para classificar esses tumores odontogênicos, sendo a última a nova Classificação de Tumores Odontogênicos da Organização Mundial da Saúde, publicada em 2005. Assim sendo, este trabalho teve por objetivo determinar a prevalência dos tumores odontogênicos diagnosticados nos Serviços de Anatomia Patológica das Faculdades de Odontologia de Bauru (USP) e de Araçatuba (UNESP) no Brasil, e das Faculdades de Odontologia da UNAM, da UAM-X e do Laboratório privado Peribact no México, compará-las e definir um perfil da ocorrência desses tumores nessas instituições e países seguindo essa nova classificação. Todos os casos diagnosticados como tumores e cistos odontogênicos passíveis de reanálise diagnóstica foram selecionados dos arquivos dessas instituições. Os dados demográficos e os aspectos clínicos de cada lesão foram obtidos a partir dos laudos e das fichas de requisição de exame anatomopatológico e as lâminas examinadas por um avaliador. Os resultados demonstraram que a inclusão do queratocisto no grupo de tumores provocou uma alteração significante na prevalência dessas lesões. O tumor odontogênico queratocístico foi a lesão mais prevalente, seguida pelo odontoma, ameloblastoma e mixoma no Brasil e no México. Quanto aos dados demográficos e localização, nossos achados corroboram com aqueles descritos na maior parte dos trabalhos realizados em todo o mundo, com diferenças pontuais em países como a China. Entretanto, a falta de maiores conhecimentos biomoleculares e genéticos dificulta a compreensão dessas diferenças. / Odontogenic tumors constitute a group of uncommon and particularly interesting lesions, arising from the odontogenic tissues. These tumors have been studied for decades by pathologists and surgeons seeking understand the mechanisms of formation and development, and trying to develop appropriate techniques of treatment. Many were the attempts made so far to classify these odontogenic tumors, the most recent being the new classification of odontogenic tumor of the World Health Organization, published in 2005. Therefore, this study aimed to determine the prevalence of odontogenic tumors diagnosed in five centers of diagnostic pathology: Laboratory of Oral Pathology, Faculty of Dentistry of Bauru USP; Laboratory of Oral Pathology, Faculty of Dentistry of Araçatuba UNESP, in Brazil; and Department of Oral Pathology, Faculty of Dentistry UNAM; Laboratory of Oral Pathology, Faculty of Dentistry of UAM-Xochimilco and Peribact Laboratory, a private laboratory of oral pathology, in Mexico; compare them and develop a profile of the occurrence of these tumors in these institutions and countries, following this new classification. All cases diagnosed as odontogenic cysts and tumors were selected for diagnostic review. The demographic and clinical features were obtained from the records when available. The cases were re-evaluated, and the diagnosis in each case was confirmed or modified when necessary. The results showed that the inclusion of keratocyst in the group of tumors caused a significant change in the prevalence of these lesions. The keratocyst odontogenic tumor was the most prevalent lesion, followed by odontoma, ameloblastoma and myxoma in Brazil and Mexico. Our findings corroborate with those reported arround the world, with occasional differences in countries, such as China. However, the lack of molecular and genetic knowledge precludes a better comprehension of these differences.

Os tumores odontogênicos compõem um grupo de lesões incomuns, porém interessantes, que se forma a partir dos tecidos que dão origem aos dentes. Esses tumores vêm sendo estudados há décadas por patologistas e cirurgiões que buscam entender seus mecanismos de formação e desenvolvimento, assim como desenvolver técnicas adequadas de tratamento. Inúmeras foram as tentativas realizadas até hoje para classificar esses tumores odontogênicos, sendo a última a nova Classificação de Tumores Odontogênicos da Organização Mundial da Saúde, publicada em 2005. Assim sendo, este trabalho teve por objetivo determinar a prevalência dos tumores odontogênicos diagnosticados nos Serviços de Anatomia Patológica das Faculdades de Odontologia de Bauru (USP) e de Araçatuba (UNESP) no Brasil, e das Faculdades de Odontologia da UNAM, da UAM-X e do Laboratório privado Peribact no México, compará-las e definir um perfil da ocorrência desses tumores nessas instituições e países seguindo essa nova classificação. Todos os casos diagnosticados como tumores e cistos odontogênicos passíveis de reanálise diagnóstica foram selecionados dos arquivos dessas instituições. Os dados demográficos e os aspectos clínicos de cada lesão foram obtidos a partir dos laudos e das fichas de requisição de exame anatomopatológico e as lâminas examinadas por um avaliador. Os resultados demonstraram que a inclusão do queratocisto no grupo de tumores provocou uma alteração significante na prevalência dessas lesões. O tumor odontogênico queratocístico foi a lesão mais prevalente, seguida pelo odontoma, ameloblastoma e mixoma no Brasil e no México. Quanto aos dados demográficos e localização, nossos achados corroboram com aqueles descritos na maior parte dos trabalhos realizados em todo o mundo, com diferenças pontuais em países como a China. Entretanto, a falta de maiores conhecimentos biomoleculares e genéticos dificulta a compreensão dessas diferenças. / Odontogenic tumors constitute a group of uncommon and particularly interesting lesions, arising from the odontogenic tissues. These tumors have been studied for decades by pathologists and surgeons seeking understand the mechanisms of formation and development, and trying to develop appropriate techniques of treatment. Many were the attempts made so far to classify these odontogenic tumors, the most recent being the new classification of odontogenic tumor of the World Health Organization, published in 2005. Therefore, this study aimed to determine the prevalence of odontogenic tumors diagnosed in five centers of diagnostic pathology: Laboratory of Oral Pathology, Faculty of Dentistry of Bauru USP; Laboratory of Oral Pathology, Faculty of Dentistry of Araçatuba UNESP, in Brazil; and Department of Oral Pathology, Faculty of Dentistry UNAM; Laboratory of Oral Pathology, Faculty of Dentistry of UAM-Xochimilco and Peribact Laboratory, a private laboratory of oral pathology, in Mexico; compare them and develop a profile of the occurrence of these tumors in these institutions and countries, following this new classification. All cases diagnosed as odontogenic cysts and tumors were selected for diagnostic review. The demographic and clinical features were obtained from the records when available. The cases were re-evaluated, and the diagnosis in each case was confirmed or modified when necessary. The results showed that the inclusion of keratocyst in the group of tumors caused a significant change in the prevalence of these lesions. The keratocyst odontogenic tumor was the most prevalent lesion, followed by odontoma, ameloblastoma and myxoma in Brazil and Mexico. Our findings corroborate with those reported arround the world, with occasional differences in countries, such as China. However, the lack of molecular and genetic knowledge precludes a better comprehension of these differences.

Os tumores odontogênicos são um grupo heterogéneo de lesões formadas a partir de tecidos que dão origem ao dente. A metilação do ADN, uma adição covalente de um grupo metilo na posição 5 de carbono de um nucleótideo de citosina, é considerado um importante regulador da expressão génica. A adição do radical metil é catalisada por ADN metiltransferases (DNMTs). Embora alguns estudos epigenéticos tenham sido realizados em tumores odontogênicos, um estudo com os três tipos de DNMTs em vários membros desse grupo está em falta. Este estudo analisa a expressão de DNMTs em tumores odontogênicos. Amostras de vinte ameloblastomas, dez Calcificante tumores odontogênicos císticos, dez calcificados tumores epiteliais, dez tumor odontogênico adenomatóide, dez tumores odontogênicos queratocísticos, quatro fibromas ameloblásticos, dois fibro-odontoma ameloblástico, quatro fibroma centrais odontogênicos, sete tecidos de fibromas odontogênicos periféricos e dez mixomas odontogênicos foram incluídos. DNMT1, 3A e 3B foram expressas no núcleo e / ou citoplasma de todos os tumores odontogênicos. A alta expressão de DNMTs em células de tumor odontogênico sugere metilação como um mecanismo importante para este grupo de tumores. / Odontogenic tumours are a heterogeneous group of lesions formed from tissues that give rise to the tooth. DNA methylation, a covalent addition of a methyl group to the 5-carbon position of a cytosine nucleotide, is considered an important regulator of gene expression. The addition of the methyl radical is catalyzed by DNA methyltransferases (DNMTs). Although some epigenetic studies have been conducted in odontogenic tumours, a study with the three types of DNMTs in several different members of this group is missing. This study analyzes the expression of DNMTs in odontogenic tumours. Formalin-fixed and paraffin-embedded tissue samples of twenty ameloblastomas, ten calcifying cystic odontogenic tumors, ten calcifying epithelial tumors, ten adenomatoid odontogenic tumors, ten keratocystic odontogenic tumors, five ameloblastic fibromas, two ameloblastic fibro-odontoma, four central odontogenic fibroma, seven peripheral odontogenic fibroma and ten odontogenic mixoma were included. DNMT1, 3A and 3B were expressed in the nucleus and/or cytoplasm of all odontogenic tumours. The high expression of DNMTs in odontogenic tumour cells suggests methylation as an important mechanism for this group of tumours.

Submitted by Programa de Pós-Graduação em Odontologia Saúde (mestrodo@ufba.br) on 2017-05-19T13:51:09Z No. of bitstreams: 1 Defesa de tese Gardênia.pdf: 37790525 bytes, checksum: 0ab1c619ff6642a89267aaee7ee90cee (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-03T14:58:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Defesa de tese Gardênia.pdf: 37790525 bytes, checksum: 0ab1c619ff6642a89267aaee7ee90cee (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-03T14:58:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Defesa de tese Gardênia.pdf: 37790525 bytes, checksum: 0ab1c619ff6642a89267aaee7ee90cee (MD5) / CAPES / Tumor Odontogênico Queratocístico (TOQ) e Ameloblastoma (AM) são tumores odontogênicos benignos comuns que apresentam comportamento localmente invasivo e altas taxas de recorrência. A via de sinalização Wnt desempenha papel no desenvolvimento e progressão destes tumores, mas os mecanismos moleculares envolvidos na gênese e comportamento tumoral ainda são pouco conhecidos. O objetivo deste estudo foi avaliar em TOQ e AM a expressão imuno-histoquímica de proteínas Wnt1, Wnt5a, β-catenina e Sufu, envolvidas na via de sinalização Wnt, na tentativa de contribuir com a melhor compreensão da patogênese destes tumores. Foram utilizados 37 amostras teciduais parafinizadas e fixadas em formalina de tumores odontogênicos, sendo 18 TOQs e 19 AMs, os quais foram submetidos à técnica imuno-histoquímica. A análise do perfil imuno-histoquímico demonstrou que ambos os tumores apresentaram similaridade na imunoexpressão de Wnt1 e Wnt5a (p=0,571 e p=0,157, respectivamente). Os TOQs apresentaram imunoexpressão de β-catenina significativamente maior que os AMs (p=0,000). Quanto ao Sufu, apesar de sua expressão ter sido maior nos TOQs, não houve diferença estatisticamente significante entre os tumores (p=0,216). Dentre os biomarcadores avaliados, a β- catenina (p=0,014) e o Wnt5a (p=0,014) apresentaram imunomarcação significativamente maior em TOQs, já nos AMs, a imunoexpressão foi maior principalmente para o Wnt5a (p=0,003). Houve predominância da imunomarcação nucleocitoplasmática do Wnt1 e citoplasmática da β-catenina e do Sufu em TOQs e AMs. Quanto à Wnt5a, os TOQs demonstraram maior imunomarcação nucleocitoplasmática, enquanto nos AMs houve predominância da marcação citoplasmática. Os altos índices de marcação da β-catenina em TOQs e da Wnt5a em TOQs e AMs sugere que estas proteínas tenham maior contribuição com o desenvolvimento, progressão e agressividade destes tumores, e que a Wnt5a atue em receptores diferentes nestes tumores. / Keratocystic Odontogenic Tumor (KCOT) and Ameloblastoma (AM) are common benign odontogenic tumors with locally invasive behavior and high recurrence rates. The Wnt signaling pathway plays a role in the development and progression of these tumors, but the molecular mechanisms involved in the genesis and tumor behavior are still unknown. The aim of this study was to evaluate the immunohistochemical expression of Wnt1, Wnt5a, β-catenin and Sufu proteins involved in the Wnt signaling pathway in KCOT and AM, in an attempt to contribute to a better understanding of the pathogenesis of these tumors. Thirty seven odontogenic tumor cases were paraffin embedded and fixed in formalin for proceeding immunohistochemical technique. Eighteen tumors were KCOT and 19 cases were AMs. Both tumors resembled the immunohistochemical profile for Wnt1 and Wnt5a (p= 0.571 and p=0.157, respectively). KCOTs presented significantly greater immunostaining of β- catenin than AMs (p=0.000). Although, KCOTs expressed more Sufu than AMs, there was no statistically significant difference between tumors (p=0.216). Among the evaluated biomarkers, β-catenin (p=0.014) and Wnt5a (p=0.014) had significantly higher immunostaining in all KCOT cases, meanwhile, the AMs expressed greater immunostaining for Wnt5a (p=0.003). Both tumors immunostaining of Wnt1 was predominantly nucleus/cytoplasmic, and of β-catenin and Sufu were cytoplasmic. KCOTs demonstrated greater immunostaining of Wnt5a in the nucleus/cytoplasm zone, while AMs showed greater predominance of this protein in the cytoplasm. The high intensity staining of β-catenin in KCOTs, and Wnt5a in KCOTs and AMs suggest that these proteins have greater contribution to the development, progression and aggressiveness of these tumors. Furthermore, Wnt5a acts on different receptors in these tumors.

Os cistos e tumores odontogênicos sempre tiveram grande importância dentro da Odontologia, seja pela grande prevalência clínica seja pelo grande acometimento do indivíduo afetado pela lesão. A nova classificação da Organização Mundial de Saúde trouxe a mudança de categoria do queratocisto, que recebe agora a nômina de tumor odontogênico queratocístico, e que figura não mais na categoria de cisto odontogênico de desenvolvimento, mas sim de tumor odontogênico. Certa precipitação nessa mudança levou alguns autores a sugerirem a necessidade de estudos que esclareçam as características clínicas e histopatológicas dessa lesão para que se tenha uma classificação realmente precisa. O grande paradigma dessa lesão é: ao mesmo tempo em que apresenta características histológicas de um cisto, possui um comportamento clínico agressivo mais comumente observado nos tumores. O que realmente difere esta lesão das outras lesões que se inseriam no mesmo grupo é o padrão de crescimento diferenciado do tumor odontogênico queratocístico em relação às outras lesões císticas. Sendo assim, poderia se suspeitar que essa lesão possua um potencial proliferativo maior do que as outras que anteriormente pertenciam ao mesmo grupo, denotando uma regulação diferenciada do mecanismo proliferação-apoptose. Este estudo teve como objetivo comparar o tumor odontogênico queratocístico com uma lesão cística - o cisto dentígero - e com uma lesão tumoral - o ameloblastoma ? por meio de marcadores imunoistoquímicos para supressão tumoral e anti-apoptose. Os resultados demostraram que a maior diferença entre essas lesões está principalmente na atividade apoptótica, já que somente o resultado de bcl2 foi estatisticamente significante entre essas lesões. / Odontogenic cysts and tumors have always had a great importance in Dentistry, for its high clinical prevail and for its noticeable invasive behavior. The new classification released by WHO rearranged keratocyst, that is named now odontogenic keratocystic tumor, classifying it no longer as a development cyst, but now as odontogenic tumor. Certain haste in this change brought some authors to suggest the necessity of more studies to clarify the feautures of such lesions to determine a more accurate classification. The greatest paradigm of this lesion is that it shows cyst-like histological characteristics and simultaneuosly it has an aggressive clinical behavior, which is more commonly observed in tumors. The main difference between this lesion and the others cystic lesions is the growth pattern, which suggests that the odontogenic keratocystic tumor has higher proliferative potential than other cystic lesions. The aim of this research was to compare odontogenic keratocystic tumor with a cystic lesion ? dentigerous cyst ? and with a tumoral lesion ? ameloblastoma ? using tumor suppressor and anti-apoptosis immunohistochemical expression. Results show that the more important difference among the analysed lesions is apoptosis activity, since only bcl2 staining was significantly different among them.

A matriz extracelular (MEC) pode ser definida como um complexo de proteínas e glicoproteínas que envolve as células nos mais diversos tecidos e tem papel importante na diferenciação e atividade celular, bem como no processo de mineralização e nos processos neoplásicos. Os componentes não colágenos da MEC têm sido abundantemente estudados, visando conhecer os minuciosos detalhes da biologia dos tecidos e assim entender os mecanismos envolvidos em suas patologias. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo estudar a expressão e distribuição dos seguintes componentes não colágenos da MEC dos tecidos dentais: biglican, decorin, fibromodulin, osteonectina (ONC), osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BSP) e osteocalcina (OCC) no ameloblastoma e no tumor odontogênico cístico calcificante (cisto de Gorlin). Para ta nto foi utilizada a técnica da imunoistoquímica, com o método da estreptavidina-biotina-peroxidase, e anticorpos contra as proteínas anteriormente citadas. Os resultados mostraram que o biglican, o decorin e a BSP foram expressos somente nas células epiteliais metaplásicas, nas células fantasmas e células fantasmas em processo de calcificação, no estroma dos ameloblastomas e no ectomesênquima neoplásico do tumor odontogênico cístico calcificante. Já o fibromodulin e a OC foram predominantemente negativos no componente epitelial e no mesenquimal, com exceção para as células fantasmas, células fantasmas em processo de calcificação e áreas de hialinização próximas ao epitélio. A ONC foi positiva na maioria das células epiteliais, com exceção das células estrelárias dos ameloblastomas folicular e acantomatoso, e também no componente mesenquimal de ambas neoplasias. Já a OPN apresentou positividade somente nos focos de calcificação presentes no tumor odontogênico cístico calcificante. As proteínas estudadas apresentaram distribuição semelhante em neoplasias caracterizadas por padrões de crescimento diferentes, levando a crer que, apesar de participarem ativamente do mecanismo de crescimento neoplásico intra-ósseo, isoladamente não exercem papel decisivo na determinação do tipo de padrão de crescimento. Outro fato digno de relevância é a baixa expressão dessas proteínas nas células epiteliais neoplásicas quando comparada com a expressão no estroma e ectomesênquima, levando-nos a crer que as células epiteliais atuem principalmente como estimuladores da expressão dessas proteínas, que, por sua vez, podem atuar de forma agonista ou antagonista ao crescimento neoplásico. / The extracellular matrix (ECM) can be defined as a complex of proteins and glycoproteins that involves the cells in all tissues. It has a key role in cell differentiation and activity, as well as in mineralization and neoplastic processes. The non-collagenous components of the ECM have been abundantly studied to know the details of the biology of tissues and thus to understand the mechanisms involved in its pathologies. The aim of the present work is to study the expression and distribution of the following noncollagenous components of the ECM of dental tissues: biglycan, decorin, fibromodulin, osteonectin (ONC), osteopontin (OPN), bone sialoprotein (BSP) and osteocalcin (OCC) in ameloblastoma and the calcifying cystic odontogenic tumour. The streptavidin-biotinperoxidase method of immunohistochemistry was used with antibodies against the antigens previously cited. The results show that biglican, decorin and BSP had been expressed only in metaplastic epithelial cells, in ghost cells and ghost cells in calcification process, stroma of ameloblastomas and neoplastic ectomesenchyma of the calcifying cystic odontogenic tumour. The fibromodulin and the OCC showed predominantly negative expression in the epithelial and mesenchymal components, with exception for the ghost cells, ghost cells in calcification process and hyalinization areas next to the epithelium. The ONC was positive in the majority of the epithelial cells, with exception of the central cells of follicular and acanthomatous ameloblastomas, and also in the mesenchymal component of both tumours. OPN presented positivity only in the calcification focus of the calcifying cystic odontogenic tumour. The proteins studied presented similar distribution in tumours characterized by different patterns of growth, leading to believe that although they participate actively of the mechanism of intraosseous growth, separately they do not exert a key role in the determination of the type of growth pattern. Another relevance fact is the low expression of these proteins in the neoplastic epithelial cells when compared to the expression in stroma and ectomesenchyma, which make us believe that the epithelial cells act mainly as stimulators of the expression of these proteins, which in turn can act as agonist or antagonist to the tumour growth.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-15T13:08:48Z No. of bitstreams: 1 PDF - Rafaella Bastos Leite.pdf: 1326501 bytes, checksum: 57e6fffb3bbe74433cba4f469a5b6545 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-21T21:05:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Rafaella Bastos Leite.pdf: 1326501 bytes, checksum: 57e6fffb3bbe74433cba4f469a5b6545 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-21T21:05:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Rafaella Bastos Leite.pdf: 1326501 bytes, checksum: 57e6fffb3bbe74433cba4f469a5b6545 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-21T21:05:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Rafaella Bastos Leite.pdf: 1326501 bytes, checksum: 57e6fffb3bbe74433cba4f469a5b6545 (MD5) Previous issue date: 2014-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The keratocystic odontogenic tumor (KOT) stands out among the other odontogenic lesions in view of the potentially aggressive biological behavior and its association in some cases, with the Gorlin syndrome. Some studies have suggested a more aggressive biological behavior for KOTs associated with Gorlin syndrome, compared to isolated KOTs, characterized by greater growth capacity and bone infiltration and higher tendency to recur. The present study aimed to evaluate, descriptively and comparatively, by means of immunohistochemistry, the expression of glucose transporter-1 (GLUT-1) and -3 (GLUT-3) and the angiogenic index (CD34) in isolated primary and recurrent KOTs and in KOTs associated with Gorlin syndrome. The sample was composed by 21 isolated KOTs (14 primary and 7 recurrent) and 14 KOTs associated with Gorlin syndrome. The expression of GLUTs was evaluated in the epithelial component of the lesions, establishing the percentage of immunopositive cells, according to the scores: score 0 (negative), score 1 (≤ 25% of positive cells), score 2 (26% - 50% of positive cells), score 3 (51% - 75% of positive cells), and score 4 (≥ 76% positive cells). For the angiogenic index, the microvessel count (MVC) technique was applied, quantifying the microvessels immunoreactive to anti-CD34 antibody. Regarding the median scores for immunopositivity for GLUT-1 and the angiogenic index, comparisons between groups were performed using the nonparametric Kruskal-Wallis test. For GLUT-3, the data obtained from the evaluation of epithelial expression of this protein were submitted to descriptive statistical analysis. Possible correlations between the scores of immunopositivity for GLUT-1 and angiogenic index in the lesions were evaluated using the Spearman correlation test. The level of significance was set at 5% (p <0.05). The analysis of epithelial GLUT-1 immunoreactivity revealed predominance of score 4 in isolated primary KOTs (n = 9, 64.3%) and in KOTs associated with Gorlin syndrome (n = 8; 57.1%). In isolated recurrent KOTs, it was identified a slightly higher frequency of cases with scores 4 (n = 3; 42.9%) and 2 (n = 2; 28.6%). The nonparametric Kruskal-Wallis test showed no statistically significant difference between groups (p = 0.406). Regarding the GLUT-3, all groups showed higher frequency of negative cases. The few KOTs positive for GLUT-3 were classified as score 1 (≤ 25% of positive cells), showing a low expression of this protein in the epithelial component. The mean number of microvessels was 63.80 in isolated primary KOTs, 61.11 in KOTs associated with the Gorlin syndrome, and 65.88 in isolated recurrent KOTs, without significant differences between groups (p = 0.965). The results of this study suggest that the differences in biological behavior of isolated KOTs and KOTs associated with Gorlin syndrome may not be related to the expression of GLUTs-1 and -3, or to the angiogenic index in the lesions. The high expression of GLUT-1 in KOTs suggests an important role for this protein in glucose uptake by the epithelial cells of these tumors. / O tumor odontogênico ceratocístico (TOC) se destaca entre as demais lesões odontogênicas em virtude do comportamento biológico potencialmente agressivo e por sua associação, em alguns casos, à síndrome de Gorlin. Pesquisas tem sugerido um comportamento biológico mais agressivo para os TOCs associados à síndrome de Gorlin, em comparação aos TOCs isolados, caracterizado por maior capacidade de crescimento e infiltração óssea e maior tendência a recorrência. O presente estudo se propôs a avaliar, descritiva e comparativamente, a imunoexpressão dos transportadores de glicose-1 (GLUT-1) e -3 (GLUT-3) e o índice angiogênico (CD34) em TOCs isolados primários e recorrentes e TOCs associados à síndrome de Gorlin. A amostra foi composta por 21 TOCs isolados (14 primários e 7 recorrentes) e 14 TOCs associados à síndrome de Gorlin. A expressão dos GLUTs foi avaliada no componente epitelial das lesões, estabelecendo-se o percentual de células imunopositivas, de acordo com os escores: escore 0 (negativo), escore 1 (≤ 25% das células positivas), escore 2 (26% - 50% das células positivas), escore 3 (51% - 75% das células positivas) e escore 4 (≥76% das células positivas). Para o índice angiogênico, foi empregada a técnica da contagem microvascular (MVC), quantificando-se os microvasos imunomarcados pelo anticorpo anti-CD34. Em relação às medianas para os escores de imunopositividade para GLUT-1 e para o índice angiogênico, as comparações entre os grupos foram realizadas por meio do teste não paramétrico de Kruskal-Wallis. Para o GLUT-3, os dados obtidos com a avaliação da expressão epitelial desta proteína foram submetidos apenas à análise estatística descritiva. Possíveis correlações entre os escores de imunopositividade para GLUT-1 e o índice angiogênico nas lesões foram avaliadas por meio do teste de correlação de Spearman. O nível de significância foi estabelecido em 5% (p < 0,05). A análise da imunoexpressão epitelial de GLUT-1 revelou predomínio de casos com escore 4 nos TOCs isolados primários (n = 9; 64,3%) e nos TOCs associados à síndrome de Gorlin (n = 8; 57,1%). Nos TOCs isolados recorrentes, foi identificada frequência discretamente maior para os casos com escores 4 (n = 3; 42,9%) e 2 (n = 2; 28,6%). O teste não paramétrico de Kruskal-Wallis revelou ausência de diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p = 0,406). Em relação ao GLUT-3, todos os grupos estudados revelaram maior frequência de casos negativos. Os poucos TOCs positivos para GLUT-3 foram classificados como escore 1 (≤ 25% das células positivas), revelando uma baixa expressão desta proteína no componente epitelial. O número médio de microvasos foi de 63,80 nos TOCs isolados primários, 61,11 nos TOCs associados a síndrome de Gorlin e 65,88 nos TOCs isolados recorrentes, sem diferenças significativas entre os grupos (p = 0,965). Os resultados do presente estudo sugerem que as diferenças no comportamento biológico de TOCs isolados e TOCs associados à síndrome de Gorlin não foram relacionadas com a expressão de GLUTs-1 e -3 ou com o índice angiogênico (CD34) nas lesões. A alta expressão de GLUT-1 em TOCs sugere um importante papel para esta proteína na captação de glicose pelas células epiteliais destes tumores.