Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-11Bitstream added on 2014-06-13T18:53:24Z : No. of bitstreams: 1 castro_mgmt_me_jabo.pdf: 2415473 bytes, checksum: c2ac1404977205c00708d980ff1db437 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A correta orientação do Médico Veterinário, aos proprietários de cães, usados com finalidades reprodutivas, submetidas à quimioterapia com cisplatina, é importante na medida que este agente citostático age nas células em constante divisão, podendo ser citotóxico para as células germinativas testiculares. O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade espermática através do espermograma, ultra-som e avaliação de ultraestruturas do testículo de cães que receberam cisplatina em diferentes momentos de análise espermática. A dose utilizada foi de 70 mg/m², dose terapêutica, em intervalos de 21 dias, totalizando 4 infusões. Os cães foram divididos em dois grupos de 4 animais cada, sendo que um dos grupos recebeu a quimioterapia e o protocolo de diurese para proteção renal, já o grupo controle não recebeu a cisplatina, estando sujeito apenas aos fatores ambientais e ao tratamento suporte. Os resultados obtidos demonstraram que a cisplatina influenciou na qualidade espermática de cães, pois elevou as patologias maiores e totais acima do aceitável para cães aptos a reprodução, além de alterações de volume testicular observados pelo exame ultra-sonográfico ao longo dos tratamentos e constatação da degeneração testicular em variados graus observados pela análise ultraestrutural. Portanto, infere-se que este citostático possa acarretar alterações morfofuncionais nos túbulos seminíferos / The Veterinary Doctor's correct orientation, to the proprietors of dogs, used with reproductive purposes, submitted to the chemotherapy with cisplatin, it is important in the measure that this citostatic agent acts in the cells in constant division, could be toxicity for the testicle germ cells . The objective of that work was to evaluate the spermatic quality through the spermogram, ultra-sound and evaluation of ultrastructures of the testicle of dogs that received cisplatin in different moments of spermatic analysis. The used dose was of 70 mg/m², therapeutic dose, in intervals of 21 days, totaling 4 infusions. The dogs were divided in two groups of 4 animals each, and one of the groups received the chemotherapy and the diuresis protocol for renal protection, the group control didn't already receive the cisplatin, being just subject to the environmental factors and the treatment supports. The obtained results demonstrated that the cisplatin influenced in the spermatic quality of dogs, because it elevated the larger and total pathologies above the acceptable for capable dogs the reproduction, besides alterations of volume testicular observed by the ultra-sound exam along the treatments and verification of the degeneration testicular in varied degrees observed by the analysis ultrastructural. Therefore, it is inferred that this citostatic agent can cart alterations morphofunctional in the seminiferous tubules

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Márcia Rita Fernandes Machado / Banca: Andrigo Barboza De Nardi / Resumo: A correta orientação do Médico Veterinário, aos proprietários de cães, usados com finalidades reprodutivas, submetidas à quimioterapia com cisplatina, é importante na medida que este agente citostático age nas células em constante divisão, podendo ser citotóxico para as células germinativas testiculares. O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade espermática através do espermograma, ultra-som e avaliação de ultraestruturas do testículo de cães que receberam cisplatina em diferentes momentos de análise espermática. A dose utilizada foi de 70 mg/m², dose terapêutica, em intervalos de 21 dias, totalizando 4 infusões. Os cães foram divididos em dois grupos de 4 animais cada, sendo que um dos grupos recebeu a quimioterapia e o protocolo de diurese para proteção renal, já o grupo controle não recebeu a cisplatina, estando sujeito apenas aos fatores ambientais e ao tratamento suporte. Os resultados obtidos demonstraram que a cisplatina influenciou na qualidade espermática de cães, pois elevou as patologias maiores e totais acima do aceitável para cães aptos a reprodução, além de alterações de volume testicular observados pelo exame ultra-sonográfico ao longo dos tratamentos e constatação da degeneração testicular em variados graus observados pela análise ultraestrutural. Portanto, infere-se que este citostático possa acarretar alterações morfofuncionais nos túbulos seminíferos / Abstract: The Veterinary Doctor's correct orientation, to the proprietors of dogs, used with reproductive purposes, submitted to the chemotherapy with cisplatin, it is important in the measure that this citostatic agent acts in the cells in constant division, could be toxicity for the testicle germ cells . The objective of that work was to evaluate the spermatic quality through the spermogram, ultra-sound and evaluation of ultrastructures of the testicle of dogs that received cisplatin in different moments of spermatic analysis. The used dose was of 70 mg/m², therapeutic dose, in intervals of 21 days, totaling 4 infusions. The dogs were divided in two groups of 4 animals each, and one of the groups received the chemotherapy and the diuresis protocol for renal protection, the group control didn't already receive the cisplatin, being just subject to the environmental factors and the treatment supports. The obtained results demonstrated that the cisplatin influenced in the spermatic quality of dogs, because it elevated the larger and total pathologies above the acceptable for capable dogs the reproduction, besides alterations of volume testicular observed by the ultra-sound exam along the treatments and verification of the degeneration testicular in varied degrees observed by the analysis ultrastructural. Therefore, it is inferred that this citostatic agent can cart alterations morphofunctional in the seminiferous tubules / Mestre

As células-tronco mesenquimais humanas derivadas de tecido adiposo, do inglês human adipose-derived stem cells (hADSC), são células progenitoras que residem entre adipócitos e armazenam lipídios neutros, principalmente triglicerídeos e ésteres de colesterol (TG e EC), em gotas lipídicas citoplasmáticas (GLC), contribuindo para o turnover do tecido adiposo. As GLC são organelas que desempenham um papel crucial na homeostasia energética e no metabolismo dessas células. Caveolas são invaginações de 50-100 nm que foram inicialmente caracterizadas por microscopia eletrônica. A forma e a organização estrutural das caveolas deve-se a proteínas especificas da família das caveolinas (caveolina-1, -2 e -3) que se associam em oligômeros para formar cavidades/invaginações na membrana plasmática. A função das caveolinas na formação das GLC está relacionada com a captação de ácidos graxos e seu metabolismo, e a relação existente entre estes dois componentes celulares parece ser crucial para manutenção da homeostasia celular. Muitas organelas que são funcionalmente conectadas ao metabolismo de lipídeos são encontradas justapostas as GLC. Distinções morfológicas observadas reforçam diferenças que podem existir na maneira pelas quais as GLC interagem com outras organelas em adipócitos. Sítios de contatos entre membranas, do inglês membrane contact sites (MCS), são descritos para muitas organelas e parecem funcionalmente importantes nos processos de interações entre as GLC e outras organelas celulares. O presente trabalho avaliou as diferenças ultraestruturais entre hADSC diferenciadas ou não para pré-adipócitos, comparando com células 3T3-L1. Também foram avaliadas, através de microscopia eletrônica de transmissão, as interações das GLC com outras organelas celulares durante a diferenciação adipogênica, pois apesar de sua importância no metabolismo energético e em várias doenças, as GLC são pouco compreendidas como organelas celulares. De fato, o tamanho, a composição e a regulação das GLC variam consideravelmente entre organismos e tipos celulares. A complexidade das interações das GLC com outras organelas também varia consideravelmente em adipócitos e não adipócitos. Este trabalho mostrou a importância de estudos que visam esclarecer como as GLC são formadas, modificadas e reguladas. Através destes estudos poderemos ter uma melhor compreensão acerca da relação existente entre o acúmulo excessivo de lipídios no organismo e a chamada síndrome metabólica (obesidade, diabetes e aterosclerose). / Human adipose-derived stem cells (hADSC) are progenitor cells that reside between adipocytes, store neutral lipids, especially triglycerides and cholesterol esters (TG and CE) into cytoplasmic lipid droplets (CLD), contributing to the turnover of the adipose tissue. The CLD are organelles that play a crucial role in energy homeostasis and cell metabolism. Caveolae are invaginations of 50-100 nm that were initially characterized by transmission electron microscopy. The shape and structural organization of caveolae are held by specific proteins of the family of caveolinas (caveolin-1, -2 and -3) that associate to form oligomers in cavities/invaginations on the plasma membrane. The caveolin functions on the CLD development are related to the fatty acid uptake and its metabolism. The relationship between these cell components seems to be pivotal for the cellular homeostasis maintenance. Many organelles that are functionally connected to lipid metabolism are found juxtaposed to the CLD. Morphologic distinctions reveal the differences that may exist in the way through which the CLD interact with other organelles within adipocytes. The membrane contact sites (MCS) have been described for many organelles and seems to be functionally important in the interaction processes with CLD. This work evaluated the ultrastructural differences between hASDC differentiated or not to pre-adipocyte compared to the 3T3-L1 cells. It was also evaluated through transmission electron microscopy, the CLD interactions to the others cellular organelles in hASDC during adipogenesis induction because, despite its importance in energy metabolism and in various diseases, the CLD are poorly understood as cell organelles. Indeed, the size, composition and regulation of GLC vary considerably between organisms and cell types. The complexity of CLD interactions with other organelles also ranged considerably between adipocytes and undifferentiated. This work showed the importance of studies that aim the clarify how the CLD are formed, modified and regulated. Through these studies it is possible to get a better understanding of the relationship between the excessive accumulation of body lipids and the metabolic syndrome (obesity, diabetes and atherosclerosis).

As células-tronco mesenquimais humanas derivadas de tecido adiposo, do inglês human adipose-derived stem cells (hADSC), são células progenitoras que residem entre adipócitos e armazenam lipídios neutros, principalmente triglicerídeos e ésteres de colesterol (TG e EC), em gotas lipídicas citoplasmáticas (GLC), contribuindo para o turnover do tecido adiposo. As GLC são organelas que desempenham um papel crucial na homeostasia energética e no metabolismo dessas células. Caveolas são invaginações de 50-100 nm que foram inicialmente caracterizadas por microscopia eletrônica. A forma e a organização estrutural das caveolas deve-se a proteínas especificas da família das caveolinas (caveolina-1, -2 e -3) que se associam em oligômeros para formar cavidades/invaginações na membrana plasmática. A função das caveolinas na formação das GLC está relacionada com a captação de ácidos graxos e seu metabolismo, e a relação existente entre estes dois componentes celulares parece ser crucial para manutenção da homeostasia celular. Muitas organelas que são funcionalmente conectadas ao metabolismo de lipídeos são encontradas justapostas as GLC. Distinções morfológicas observadas reforçam diferenças que podem existir na maneira pelas quais as GLC interagem com outras organelas em adipócitos. Sítios de contatos entre membranas, do inglês membrane contact sites (MCS), são descritos para muitas organelas e parecem funcionalmente importantes nos processos de interações entre as GLC e outras organelas celulares. O presente trabalho avaliou as diferenças ultraestruturais entre hADSC diferenciadas ou não para pré-adipócitos, comparando com células 3T3-L1. Também foram avaliadas, através de microscopia eletrônica de transmissão, as interações das GLC com outras organelas celulares durante a diferenciação adipogênica, pois apesar de sua importância no metabolismo energético e em várias doenças, as GLC são pouco compreendidas como organelas celulares. De fato, o tamanho, a composição e a regulação das GLC variam consideravelmente entre organismos e tipos celulares. A complexidade das interações das GLC com outras organelas também varia consideravelmente em adipócitos e não adipócitos. Este trabalho mostrou a importância de estudos que visam esclarecer como as GLC são formadas, modificadas e reguladas. Através destes estudos poderemos ter uma melhor compreensão acerca da relação existente entre o acúmulo excessivo de lipídios no organismo e a chamada síndrome metabólica (obesidade, diabetes e aterosclerose). / Human adipose-derived stem cells (hADSC) are progenitor cells that reside between adipocytes, store neutral lipids, especially triglycerides and cholesterol esters (TG and CE) into cytoplasmic lipid droplets (CLD), contributing to the turnover of the adipose tissue. The CLD are organelles that play a crucial role in energy homeostasis and cell metabolism. Caveolae are invaginations of 50-100 nm that were initially characterized by transmission electron microscopy. The shape and structural organization of caveolae are held by specific proteins of the family of caveolinas (caveolin-1, -2 and -3) that associate to form oligomers in cavities/invaginations on the plasma membrane. The caveolin functions on the CLD development are related to the fatty acid uptake and its metabolism. The relationship between these cell components seems to be pivotal for the cellular homeostasis maintenance. Many organelles that are functionally connected to lipid metabolism are found juxtaposed to the CLD. Morphologic distinctions reveal the differences that may exist in the way through which the CLD interact with other organelles within adipocytes. The membrane contact sites (MCS) have been described for many organelles and seems to be functionally important in the interaction processes with CLD. This work evaluated the ultrastructural differences between hASDC differentiated or not to pre-adipocyte compared to the 3T3-L1 cells. It was also evaluated through transmission electron microscopy, the CLD interactions to the others cellular organelles in hASDC during adipogenesis induction because, despite its importance in energy metabolism and in various diseases, the CLD are poorly understood as cell organelles. Indeed, the size, composition and regulation of GLC vary considerably between organisms and cell types. The complexity of CLD interactions with other organelles also ranged considerably between adipocytes and undifferentiated. This work showed the importance of studies that aim the clarify how the CLD are formed, modified and regulated. Through these studies it is possible to get a better understanding of the relationship between the excessive accumulation of body lipids and the metabolic syndrome (obesity, diabetes and atherosclerosis).

As células-tronco mesenquimais humanas derivadas de tecido adiposo, do inglês human adipose-derived stem cells (hADSC), são células progenitoras que residem entre adipócitos e armazenam lipídios neutros, principalmente triglicerídeos e ésteres de colesterol (TG e EC), em gotas lipídicas citoplasmáticas (GLC), contribuindo para o turnover do tecido adiposo. As GLC são organelas que desempenham um papel crucial na homeostasia energética e no metabolismo dessas células. Caveolas são invaginações de 50-100 nm que foram inicialmente caracterizadas por microscopia eletrônica. A forma e a organização estrutural das caveolas deve-se a proteínas especificas da família das caveolinas (caveolina-1, -2 e -3) que se associam em oligômeros para formar cavidades/invaginações na membrana plasmática. A função das caveolinas na formação das GLC está relacionada com a captação de ácidos graxos e seu metabolismo, e a relação existente entre estes dois componentes celulares parece ser crucial para manutenção da homeostasia celular. Muitas organelas que são funcionalmente conectadas ao metabolismo de lipídeos são encontradas justapostas as GLC. Distinções morfológicas observadas reforçam diferenças que podem existir na maneira pelas quais as GLC interagem com outras organelas em adipócitos. Sítios de contatos entre membranas, do inglês membrane contact sites (MCS), são descritos para muitas organelas e parecem funcionalmente importantes nos processos de interações entre as GLC e outras organelas celulares. O presente trabalho avaliou as diferenças ultraestruturais entre hADSC diferenciadas ou não para pré-adipócitos, comparando com células 3T3-L1. Também foram avaliadas, através de microscopia eletrônica de transmissão, as interações das GLC com outras organelas celulares durante a diferenciação adipogênica, pois apesar de sua importância no metabolismo energético e em várias doenças, as GLC são pouco compreendidas como organelas celulares. De fato, o tamanho, a composição e a regulação das GLC variam consideravelmente entre organismos e tipos celulares. A complexidade das interações das GLC com outras organelas também varia consideravelmente em adipócitos e não adipócitos. Este trabalho mostrou a importância de estudos que visam esclarecer como as GLC são formadas, modificadas e reguladas. Através destes estudos poderemos ter uma melhor compreensão acerca da relação existente entre o acúmulo excessivo de lipídios no organismo e a chamada síndrome metabólica (obesidade, diabetes e aterosclerose). / Human adipose-derived stem cells (hADSC) are progenitor cells that reside between adipocytes, store neutral lipids, especially triglycerides and cholesterol esters (TG and CE) into cytoplasmic lipid droplets (CLD), contributing to the turnover of the adipose tissue. The CLD are organelles that play a crucial role in energy homeostasis and cell metabolism. Caveolae are invaginations of 50-100 nm that were initially characterized by transmission electron microscopy. The shape and structural organization of caveolae are held by specific proteins of the family of caveolinas (caveolin-1, -2 and -3) that associate to form oligomers in cavities/invaginations on the plasma membrane. The caveolin functions on the CLD development are related to the fatty acid uptake and its metabolism. The relationship between these cell components seems to be pivotal for the cellular homeostasis maintenance. Many organelles that are functionally connected to lipid metabolism are found juxtaposed to the CLD. Morphologic distinctions reveal the differences that may exist in the way through which the CLD interact with other organelles within adipocytes. The membrane contact sites (MCS) have been described for many organelles and seems to be functionally important in the interaction processes with CLD. This work evaluated the ultrastructural differences between hASDC differentiated or not to pre-adipocyte compared to the 3T3-L1 cells. It was also evaluated through transmission electron microscopy, the CLD interactions to the others cellular organelles in hASDC during adipogenesis induction because, despite its importance in energy metabolism and in various diseases, the CLD are poorly understood as cell organelles. Indeed, the size, composition and regulation of GLC vary considerably between organisms and cell types. The complexity of CLD interactions with other organelles also ranged considerably between adipocytes and undifferentiated. This work showed the importance of studies that aim the clarify how the CLD are formed, modified and regulated. Through these studies it is possible to get a better understanding of the relationship between the excessive accumulation of body lipids and the metabolic syndrome (obesity, diabetes and atherosclerosis).

<p>U radu je ispitana zastupljenost azotofiksirajućih cijanobakterija, ukupnog broja algi i ukupnog broja bakterija u različitim tipovima zemlji&scaron;ta na jedanaest lokaliteta u Vojvodini, od čega se sedam nalaze u za&scaron;tićenim prirodnim dobrima. Ispitana je brojnost u zavisnosti od dubine pedolo&scaron;kog profila, kao i od godi&scaron;njeg doba. Izvr&scaron;ena je izolacija sojeva azotofiksirajućih cijanobakterija, određena njihova taksonomska pripadnost i osnovne citolo&scaron;ke karakteristike. Ispitana je ultrastruktura vegetativnih ćelija, heterocista i spoljnih struktura na ćelijama fimbrije i pili, transmisionim elektronskim mikroskopom. Izvr&scaron;ena je genetička karakterizacija izolovanih sojeva azotofiksirajućih cijanobakterija PCR metodom analizom STRR fragmenata DNA.<br />Brojnost azotofiksirajućih cijanobakterija i ukupna brojnost algi je bila znatno veća kod hidromorfnih i halomorfnih zemlji&scaron;ta, nego kod automorfnih zemlji&scaron;ta. Najveća prosečna godi&scaron;nja brojnost azotofiksirajućih cijanobakterija, u povr&scaron;inskom sloju 0-5cm, je utvrđena kod zemlji&scaron;ta fluvisol u SRP &ldquo;Koviljsko petrovaradinskom ritu&rdquo;, 150864 jedinki po gramu apsolutno suvog zemlji&scaron;ta. Zemlji&scaron;te sa najnižom brojno&scaron;ću azotofiksirajućih cijanobakterija, je gajnjača u NP Fru&scaron;ka gora, 1582 jed./gr zemlji&scaron;ta u povr&scaron;inskom sloju.<br />Kod svih ispitivanih zemlji&scaron;ta brojnost azotofiksirajućih cijanobakterija je bila najveća u povr&scaron;inskom sloju zemlji&scaron;ta, 0-5 cm dubine, opadala je sa dubinom zemlji&scaron;ta i bila najmanja u najdubljem sloju, 30 - 60 cm. Kod najvećeg broja ispitivanih zemlji&scaron;ta brojnost azotofiksirajućih cijanobakterija je bila najveća tokom zimskog perioda. Azotofiksirajuće cijanobakterije su dominantne u na&scaron;im zemlji&scaron;tima i zastupljene sa 56.27% u odnosu na druge grupe algi.Izolovano je 30 sojeva azotofiksirajućih cijanobakterija: 19 sojeva Nostoc-a, 4 soja Anabaena, 4 Cylindrospermum, i po jedan soj Calothrix, Tolypothrix i Phormidium. Prosečna zastupljenost heterocista, ćelija koje vr&scaron;e azotofiksaciju, kod roda Nostoc je iznosila 8.28%, Anabaena 4.25%, Cylindrospermum-a 2.93%, Calotrix elenkinii 6.19% i Tolypothrix 7.76%.</p><p>Ultrastrukturnim ispitivanjem, TEM mikroskopom, vegetativnih ćelija azotofiksirajućih cijanobakterija uočili smo inkluzije redovnog pojavljivanja: karboksizome (Cs), cijanoficinkse granule (CG), polifosfatne granule (PG), ribozome (R), lipidne granule (&szlig; &ndash;granule) i tilakoide (T), kao i inkluzije neredovnog pojavljivanja: membranom ograničene kristalne inkluzije.<br />Koristeći TEM i tehniku bojenja ćelija sa RR i ultratankih preseka utvrdili smo prisustvo omotača od fimbrija kod tri soja (A.314, A.azollae i N.302) i tipične fimbrije kod dva soja (N.311 i N.9229). Metodom negativnog bojenja NS PTA uočili smo takođe tipične fimbrije, igličastog-dlakastog izgleda, jasnih granica niti kod tri soja (N.302, N.7901 i N.9229), međutim uočili smo i atipične sluzne fimbrije, koje nemaju jasno izražene granice, ali su veoma moćno ra&scaron;irene oko vegetativnih ćelija, kod tri soja (A.314, A.azollae, N.311).<br />Kod simbiotskih-infektivnih sojeva N.7901 i N.9229 javljaju se samo tipične fimbrije iz prve klase, a kod diazotofnih sojeva i simbiotskog - neinfektivnog soja A.azollae javljaju se atipične-sluzne fimbrije iz druge klase.<br />Za ispitivanje sličnosti cijanobakterija metodom PCR-a pomoću STRR konzervativnih sekvenci DNA genoma kori&scaron;ćeno je 39 sojeva azotofiksirajućih cijanobakterija i kod 38 je utvrđeno njihovo prisustvo. Svi sojevi se mogu podeliti u tri grupe, klastera. Prvi klaster je najveći i obuhvata 24 soja i deli se na dva podklastera: Ia koji obuhvata 12 sojeva gde dominiraju sojevi Nostoc-a (8), i podklaster Ib koji obuhvata takođe 12 sojeva, od čega 6 sojeva pripada rodu Anabaena. Podklaster Ia i podklaster Ib pokazuju različitost od 90%. Sva tri simbiozna, infektivna, soja Nostoc-a se nalaze u klasteru I: N.7901, N.9229 i N. 8001. Svaki simbiozni soj Nostoc-a ima genetske sličnosti sa po jednim diazotrofnim sojem Nostoc-a izolovanim iz zemlji&scaron;ta Vojvodine.<br />Klaster II obuhvata sedam (7) sojeva među kojima dominiraju sojevi Cylindrospermum-a, dok klaster III obuhvata 7 sojeva od čega 6 pripadaju rodu Nostoc, a jedan rodu Rivularia.Detaljno poznavanje svojstava izolovanih azotofiksirajućih cijanobakterija doprineće njihovoj budućoj primeni kako u proizvodnji ratarskih i povrtarskih kultura, tako i u biotehnolo&scaron;koj proizvodnji</p> / <p>In this study examined is the frequency of nitrogen-fixing cyanobacteria, total number of algae and total number of bacteria in different soil types on eleven localities in the Vojvodina Province. Seven out of those eleven localities are found in protected nature reserves. Actually, studied was the number of the cyanobacteria and algae depending on the depth of pedological characterization as well as on season. First, isolated were the types of nitrogen-fixing cyanobacteria, determined was their taxonomic origin and basic cytological characteristics. Also examined was the ultrastructure of vegetative cells, heterocysts and other outer structures on fimbriae and pili cells using TEM, transmission electron microscope. Finally, performed was the genetic characterization of isolated types of nitrogen-fixing cyanobacteria using the PCR method and analyzing STRR fragments of DNA.<br />The presence of nitrogen-fixing cyanobacteria and total number of algae was significantly higher with hydromorphic and halomorphic soils than with authomorphic ones. Highest annual average number of nitrogen-fixing cyanobacteria in the topsoil (0-5 cm) was reported with fluvisol soil in Special Nature Reserve &bdquo;Koviljsko petrovaradinski rit&rdquo; (Swamp) and there were 150864 units of bacteria per gram of absolutely dry soil. The soil with the lowest presence of nitrogen-fixing cyanobacteria recorded was cambisol in National Park &ldquo;Fruska gora&rdquo; with 1582 units per gram of soil in the topsoil.<br />With all the researched types of soils the number of nitrogen-fixing cyanobacteria was in the topsoil, 0-5 cm of depth and decreased in line with the depth<br />of soil and lowest was at the deepest layer, 30-60cm. The highest frequency of nitrogen-fixing cyanobacteria was found during the winter season with most of the examined soils. Nitrogen-fixing cyanobacteria are the dominant type of bacteria in our soils and are presented with 56, 27% compared to other types of algae.<br />30 strains of nitrogen-fixing cyanobacteria were isolated: 19 types of Nostoc sp., 4 of Anabaena sp. and one in each genus of Calothrix, Tolypothrix and Phormidium.<br />Using ultrastructural examination and TEM microscope when studying vegetative cells of nitrogen-fixing cyanobacteria observed were the inclusions of regular frequency: carboxysomes (Cs), cyanophycin granules (CG) , polyphosphate granules (PG), ribosomes (R), lipid granules (SS -granule ) and thylakoids ( T ) as well as the inclusion of irregular occurrence: a membrane-bound crystal inclusions.<br />Using TEM technique and staining the cells with the RR and ultra thin cross section, we determined the presence of depletion of the fimbriae with three strains (A.314, A.azollae and N.302) and typical fimbriae with the two strains (N.311 and N.9229). Applying the method of negative staining NS PTA also noticed were a typical fimbriae, needle-hairy like looks with clear boundaries with the three strains (N.302, N.7901, N.9229). However, also observed were atypical mucous fimbriae, which do not have clearly expressed borders, but they are very strongly spread around the vegetative cells, with the three strains (A.314, A.azollae, N.311).<br />With symbiotic - infective strains N.7901 and N.9229 only typical fimbriae of first class occurred, and in diazotroph strains and symbiotic &ndash; non infectious strain A. azollae found were atypical mucous fimbriae of second class.<br />To test the similarity of cyanobacteria by PCR method and using a STRR - conservative DNA sequence of the genome used were 39 strains fixing cyanobacteria and with 38 established was their presence. All strains can be divided into three groups of clusters. The first cluster is the largest and covers 24 strains, and is divided into two subclusters: Ia which includes 12 strains,where predominant are Nostoc strains ( 8 ) , and subcluster Ib , which also implies 12 strains , out of which 6 strains belong to the genus Anabaena. Subcluster Ia and Ib show a difference of 90 %. All three symbiotic , infectious Nostoc strains are classified in a cluster I: N.7901, N.9229 and N. 8001. Each symbiotic Nostoc strain has a genetic similarity with one di-nitrogen Nostoc strain isolated from a lot of different soils in Vojvodina.<br />Cluster II includes seven (7) strains , including strains among which the predominant are Cylindrospermum ones , while cluster III includes 7 strains of which 6 belong to the genus Nostoc and one to genus Rivularia.<br />Detailed knowledge of the properties of isolated fixing cyanobacteria could contribute to their future application both in the production of field crops and vegetables, as well as in biotechnological production.</p>