Orientador: João Domingos Rodrigues / Coorientador : Bárbara França Dantas / Banca: Elizabeth Orika Ono / Banca: Valtemir Gonçalves Ribeiro / Banca: Teresinha Costa Silveira de Albuquerque / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Resumo: A vitivinicultura é uma atividade econômica, relativamente, recente no Brasil e a região semiárida do Submédio do Vale do São Francisco, utilizando-se de irrigação localizada, tem atraído muitos investidores internacionais para a produção de uvas e vinhos. O presente trabalho teve o objetivo de avaliar a fisiologia e o metabolismo da videira 'Syrah', sob três estratégias de irrigação (Irrigação com Défice Controlado-IDC, Irrigação Deficitária-ID e Irrigação Plena-IP,) no Submédio do Vale do São Francisco. A pesquisa foi desenvolvida na Embrapa Semiárido, especificamente, no Campo Experimental de Bebedouro, localizado no município de Petrolina-PE. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, em três esquemas fatoriais: 3 x 5, três estratégias de irrigação e cinco avaliações para potencial hídrico foliar de base (Ψb), teor SPAD da clorofila e atividade da enzima nitrato redutase (NR); 3 x 6, três estratégias de irrigação e seis avaliações para trocas gasosas, açúcares solúveis totais, açúcares redutores, proteína solúvel total e atividade das invertases e 3 x 3, três estratégias de irrigação e três avaliações para as análises químicas de sólidos solúveis, acidez titulável, relação sólidos solúveis/acidez titulável e pH, sendo nove repetições para cada tratamento. A imposição da deficiência hídrica controlada a partir da fase fenológica de 'cacho fechado' em videira cv. Syrah resultou em plantas ao longo do ciclo com maior eficiência no uso da água e economia no recurso hídrico. O porta-enxerto 'Paulsen 1103' demonstra tolerância e/ou resistência ao défice hídrico e a cultivar copa Syrah, comportamento anisohídrico. A maior disponibilidade hídrica na irrigação plena promoveu as maiores... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Viticulture is a relatively recent economic activity in Brazil and the semiarid region of the Submedium of the San Francisco Valley, using drip irrigation, has attracted many international investors to grapes and wine production. The study aimed to evaluate the physiology and metabolism of grapevine 'Syrah' under three irrigation strategies (Regulated Deficit Irrigation-RDI, Deficit Irrigation-DI and Full Irrigation-FI,) in the Submedium of the San Francisco Valley. The research was conducted at Embrapa Semiarid, specifically in the Bebedouro Experimental Field, located in Petrolina, Pernambuco-Brazil. The statistical design was in randomized blocks, factorial in three regimens: 3 x 5, three irrigation strategies and five evaluations of leaf water potential (Ψb), SPAD chlorophyll content and activity of the nitrate reductase enzyme (NR); 3 x 6, three irrigation strategies and six evaluations for gas exchange, soluble sugars, reducing sugars, total soluble protein and invertase activity, and 3 x 3, three irrigation strategies and three evaluations for the chemical variables: soluble solids, titratable acidity, soluble solids / titratable acidity and pH, nine replicates for each treatment. The imposition of water deficit from the phenological phase of 'closed lock' in grapevine 'Syrah' results in the plant cycle with greater efficiency in water use and savings on water resources. The rootstock '1103 Paulsen' demonstrates tolerance and / or resistance to water deficit and scion 'Syrah', anisohydric behavior. The greater water availability in the full irrigation promotes the highest rates of assimilation, transpiration and stomatal conductance at 73 and 87 days after pruning. It also provides the highest activity of nitrate reductase at... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Vanildo Luiz Del Bianchi / Coorientador: Ana Carolina Conti e Silva / Banca: Waldemar Gastoni Venturini Filho / Banca: Roberto da Silva / Resumo: A atividade vitivinícola do estado de São Paulo é caracterizada pela produção de vinhos de mesa. Nesse contexto, este trabalho objetivou desenvolver e caracterizar os vinhos, de duas safras, das uvas Bordô e Isabel, provenientes da região noroeste do estado de São Paulo, obtidos de três tratamentos: tradicional, pré-secagem e bagaço estático e suas avaliações sensoriais frente a marcas comerciais de grande aceitação. Todos os vinhos apresentaram propriedades físico-químicas conformes à legislação, exceto os vinhos do tratamento pré-secagem que apresentaram índice de acidez além do limite máximo. Os vinhos pré-secagem apresentaram elevados teores de extrato seco, teor de fenólicos totais e índices de cor, pressupondo a concentração desses compostos pela ação do calor. Sensorialmente, os vinhos produzidos foram mais aceitos que os vinhos comerciais, em ambas as safras. Os vinhos pré-secagem foram mais aceitos na primeira safra, em contrapartida, os vinhos do tratamento bagaço estático foram mais aceitos na segunda safra. As propriedades físico-químicas e sensoriais mostraram uma intensa relação do teor alcoólico com o aroma e o corpo, assim como a influência do teor de fenólicos totais e índices de cor com a aparência e a aceitação global. Além disso, em alguns casos, o extrato seco foi relacionado com o corpo dos vinhos e da acidez com o sabor. O teor de açúcares redutores também influenciou na aceitação do aroma. Os resultados físico-químicos mostraram que os aspectos inerentes às safras influenciaram algumas determinações físico-químicas como acidez, extrato seco e teor de fenólicos totais. A maior aceitação sensorial dos vinhos desenvolvidos no estudo em relação às marcas comerciais e a qualidade físico-química e sensorial comprovaram o potencial dos tratamentos alternativos de vinificação / Abstract: The wine production in São Paulo, considered, nowadays, as an ascending region in vitiviniculture, is characterized by the production of table wines. In this context, this study aimed to develop and characterize the wines, from two vintages, of Bordô and Isabel grapes from the northwest region of São Paulo state, regarding to three treatments: traditional, pre-drying and static pomace and their sensory evaluations when compared to commercial wines with high acceptance. All wines presented physicochemical in accordance to law, and the pre-drying wines showed the highest levels of acidity, dry extract, total phenolic content and color indexes, assuming the concentration of these compounds by the action of the heat. In sensory approach, the studied wines were more accepted when compared to commercial wines in both seasons. The wines from pre-drying process presented higher acceptance in first vintage and static pomace wines were more accepted in second season. It was possible to observe intense relationship between alcoholic content with aroma and body, as well as the influence of the total phenolic content and color indexes in the appearance and overall acceptance. Moreover, in some cases, dry extract and acidity showed relationship with body and flavor acceptance, respectively. Reducing sugar content also influenced the acceptance of the aroma. All these relationships were reported in several scientific studies that researched wines from American and European grapes. Physicochemical results revealed that the inherent characteristics of the seasons affected some chemicals as acidity, dry extract and total phenolic content. The highest sensory acceptance of studied wines in comparison to commercial ones, and the physicochemical profile demonstrated the potential of these vinification processes as alternative in wine industry / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-02Bitstream added on 2014-06-13T18:39:34Z : No. of bitstreams: 1 smarsi_rc_me_ilha.pdf: 1998876 bytes, checksum: e4139d71b2bc7e1e9b5e8df6135487dc (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As perdas de áreas com uvas finas, decorrentes de altos custos de implantação e produção, entre outros, reforçam a importância de uma boa gestão que os produtores devem exercer na busca por resultados econômicos positivos. Com essa perspectiva, esta pesquisa teve por objetivo estimar custos e lucratividades e realizar análise de investimentos na produção de uvas finas na região noroeste do Estado de São Paulo. Os dados foram realizados a partir de entrevistas junto a 25 produtores de uvas finas. Foram estimados os custos de implantação e de produção, os indicadores de lucratividade e de investimentos. O investimento necessário para implantação de um hectare de uva fina Redimeire no sistema latada foi de R$ 67.391,90 e para a cultivar Benitaka apresentou R$ 67.004,00, valores bem similares apesar de serem produtores diferentes. Os custos operacionais totais de produção por hectare da cultivar Redimeire e Benitaka foi de R$ 33.766,74 e R$34.638,67, respectivamente. A produção na região em estudo ocorre no período de entressafra das demais regiões produtoras (junho a novembro), permitindo que os produtores obtenham maiores valores nas negociações da fruta. Apesar do alto investimento na viticultura no EDR de Jales, nos últimos anos vem apresentando resultados econômicos satisfatórios; os índices de lucratividade foram de 63% e 58% para as cultivares Redimeire e Benitaka, respectivamente; o maior lucro operacional foi obtido pela cultivar Redimeire R$ 56.633,26 e pela Benitaka de R$ 48.761,75. Os resultados foram altamente satisfatórios para as cultivares Redimeire e Benitaka. Os resultados obtidos na pesquisa pode não contribuir para diminuição dos custos de produção, sem perdas na qualidade da fruta e aumento na produtividade sendo relevantes para tornar as unidades produtivas mais competitivas e economicamente viáveis / The loss of areas with fine grapes, due to high costs of implementation and production, among others, emphasize the importance of good management that producers must play in the search for positive economic results. With this perspective, this study aimed to estimate costs and profitabilities and perform analysis of investments in the production of fine grapes in the northwest region of São Paulo. Data were gathered from interviews with 25 producers of fine grapes. We estimated the costs of deployment and production indicators of profitability and investment. The investment required for implementation of a hectare of fine Redimeire grape trellis system was R $ 67,391.90 and to cultivate Benitaka presented $ 67,004.00 R values are very similar despite different producers. Total operating costs of production per hectare of the cultivar Redimeire and Benitaka was R$ 33,766.74 and R$ 34,638.67 respectively. The production in the study area occurs in the off-season to the other regions (June-November), allowing producers to obtain higher values in the negotiations of the fruit. Despite the high investment in viticulture in the EDR Jales in recent years has shown satisfactory economic results, profitability rates were 63% and 58% for the cultivars Redimeire and Benitaka respectively, the highest operating profit was obtained from cultivar Redimeire (R$ 56,633.26) and Benitaka (R$ 48,761.75). the results were highly satisfactory for the cultivars Redimeire and Benitaka. The results obtained in the study may help to reduce production costs without loss of fruit quality and productivity are increased to make the material more competitive production units and economically feasible

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-09-29Bitstream added on 2014-06-13T20:39:09Z : No. of bitstreams: 1 jorge_jll_me_ilha.pdf: 609537 bytes, checksum: d3adf512e87ccaca306fa9fe715f201c (MD5) / A produção de uvas da região Noroeste paulista tem preferência em atender a entressafra, com podas entre os meses de maio e junho. Nesse período as condições climáticas são desfavoráveis à brotação das gemas; solucionada com a aplicação de cianamida hidrogenada (CH2N2). Mesmo eficiente na quebra de dormência, a utilização da CH2N2 tem sido questionada pela alta toxicidade, cujo registro está sob revisão pelas autoridades da União Européia, preconizando a utilização de produtos alternativos que não agridam o aplicador. Pelo exposto o objetivo do trabalho foi testar substâncias alternativas na superação de dormência de gemas, produção e qualidade dos frutos de ‘Niagara Rosada’. O experimento foi realizado em duas etapas. A primeira, de 24/07/2009 a 17/09/2009, para verificar eficiência na quebra de dormência de gemas pelos tratamentos: 1) Sem aplicação de produto; 2) Óleo mineral (OM) (2%); 3) OM (3%); 4) OM (4%); 5) Extrato de alho (EA) (2%); 6) EA (4%); 7) EA (6%); 8) OM (2%) + KNO 3 (3%); 9) OM (3%) + KNO3 (3%); 10) OM (4%) + KNO 3 (3%); 11) EA (2%) + KNO 3 (3%); 12) EA (4%) + KNO 3 (3%); 13) EA (6%) + KNO3 (3%) e 14) CH2N2 (5%). A segunda etapa se deu na ocasião da colheita dos frutos dia 09/12/2009 na qual foram avaliadas as variáveis: número de cachos por ramos, massa de cachos, massa média de bagas, diâmetro de bagas, comprimento de bagas, número médio de bagas, massa do engaço e teor de sólidos solúveis totais. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com três repetições, uma planta por parcela. Em todos os tratamentos ocorreram brotações de forma proporcional no decorrer das avaliações. Não houve efeito das doses dos produtos nos tratamentos, apresentando diferença significativa apenas pelo teste de Tukey para a CH2N2 com melhor antecipação... / The production in the northwest of São Paulo has a preference to attend the offseason, with pruning between the months of May and June. During this period the climatic conditions are unfavorable to shoot buds; solved with the application of hydrogenated cyanamide (CH 2N2). Although effective in breaking dormancy, the use of CH2N2 has been questioned by its high toxicity, that is under review by EU officials, suggesting the use of alternative products that do not harm the applicator. For these reasons the objective of this study was to test alternative products for breaking bud dormancy, production and fruit quality of ‘Niagara Rosada’. The experiment was conducted in two stages. the first one, from 07/24/2009 to 09/17/2009, to check efficiency of buds break dormancy by the treatments: 1) No product application; 2) mineral oil (MO) (2%); 3) MO (3%); 4) MO (4%); 5) Garlic extract (GE) (2%); 6) GE (4%); 7) GE (6%); 8) MO (2%) + KNO 3 (3%); 9) MO (3%) + KNO3 (3%); 10) OM (4%) + KNO 3 (3%); 11) GE (2%) + KNO 3 (3%); 12) GE (4%) +KNO3 (3%); 13) GE (6%) + KNO 3 (3%); and 14) CH2N2 (5%). The second stage was at the time of fruit harvest day 09/12/2009 in which the variables were evaluated: number of clusters per branch, the mass of clusters, average weight of berries, average berry diameter, average berry length, average number of berries, average mass of the stalk and soluble solids. The experimental design was in randomized blocks with three replications, one plant per plot. In all treatments the budding occurred in similar proportions during the evaluations. There was no effect of doses of the products in the treatments, only significant differences by Tukey test for CH2N2 with better anticipation on the 7th day after pruning (DAP), an average of 2.26 sprouted buds per branch, superior budding at 14 th... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-09Bitstream added on 2014-06-13T21:00:05Z : No. of bitstreams: 1 tabet_vg_me_ilha.pdf: 296081 bytes, checksum: c03f5ec675d051d3c1f3fdad607d8f60 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A videira é uma cultura de elevada importância econômica, e assim como outras culturas, sofre o ataque de diversas pragas e doenças. Videiras da região do município de Jales, Estado de São Paulo, tem sido intensamente infestadas pelo ácaro-rajado, Tetranychus urticae Koch (Tetranychidae), gerando aumento na utilização de acaricidas. O uso indiscriminado destes acaricidas pode contaminar o meio ambiente, os agricultores e os consumidores dos alimentos. Na busca por um controle alternativo, o presente trabalho teve por objetivo testar o efeito acaricida de produtos naturais sobre os ácaros dessa espécie. Para isso, fêmeas de T. urticae, criadas em laboratório a partir de espécimes coletados em videiras daquele local, foram pulverizadas em torre de Potter. Foram testados três produtos a base de nim (Azadirachta indica Juss.) e extrato pirolenhoso em diferentes concentrações, extratos aquosos e hidroetanólicos de dez plantas e óleos essenciais de seis plantas. Cada tratamento foi testado duas vezes, para confirmação dos resultados. A parcela experimental consistiu de uma placa de Petri com um disco de folha de feijão-de-porco (Canavalia ensiformes L.) contendo cinco fêmeas adultas de T. urticae, utilizando-se dez placas por tratamento. As avaliações foram realizadas após 24, 48, 72, 96 e 120 horas, para contagem do número de fêmeas mortas no disco e fêmeas encontradas no algodão umedecido, utilizado como barreira. As maiores mortalidades foram registradas nos tratamentos com Natuneem, óleo emulsionado de sementes de nim, extrato hidroetanólico de camomila (Matriacaria chamomilla L.) e extrato aquoso de erva doce (Pimpinella anisum L.). Óleos essenciais não tiveram efeito acaricida sobre T. urticae. Extratos aquosos de hortelã (Mentha x piperita L.), melissa (Melissa officinalis L.) e losna (Artemisia absinthium L.) e hidroetanólicos... / The vine is a culture of high economic importance, and as other cultures, it is attacked by various pests and diseases. Vines of the municipality of Jales, Sao Paulo State, there has been heavy infestations by two spotted spider mite, Tetranychus urticae Koch (Tetranychidae), generating an use of acaricides increased. The indiscriminate use of acaricides can contaminate the environment, farmers and food consumers. In the search for an alternative control, this study aimed to test the acaricidal effect of natural products on mites of this species. For this, T. urticae females, reared in the laboratory from specimens collected in vines that place, were sprayed in tower Potter. We tested three products based on neem (Azadirachta indica Juss.) and pyroligneous acid in different concentrations, aqueous and hydroethanolic extracts of ten plants and essential oils of six plants. Each treatment was tested twice to confirm the results.The experimental plot consisted of a Petri dish with a Canavalia ensiformis L. leaf disk containing five T. urticae female, using ten plates per treatment. The evaluations were realized after 24, 48, 72, 96 and 120 hours, with counting of females killed in the disk and in cotton wool barrier. The highest mortalities were recorded in Natuneem, emulsified oil from neem seeds, chamomile (Matricaria chamomilla L.) aqueous extract and fennel (Pimpinella anisum L.) hydroethanolic extract treatments. Essential oils have no acaricide effect on T. urticae. High mortalities were recorded with peppermint (Mentha x piperita L.), lemon balm (Melissa officinalis L.) and wormwood (Artemisia absinthium L.) aqueous extracts and with pacari (Lafoensia pacari Saint-Hilaire) and oregano (Origanum vulgare L.) hydroethanolic extract... (Complete abstract click electronic access below)

A natamicina é um antifúngico produzido por Streptomyces natalensis, cujo emprego como aditivo alimentar está principalmente relacionado ao tratamento de superfície de queijos e embutidos. Foi avaliada a presença deste composto em 138 amostras (16 sucos de uva, 118 vinhos e quatro derivados) pelo método quantitativo de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) com Detector de Arranjo de Diodos (DAD). A resposta da natamicina não foi influenciada pelo efeito das matrizes avaliadas e o método apresentou linearidade na faixa de trabalho de 0,1 a 5,0 mg L-1. Os limites de detecção e quantificação foram, respectivamente, 0,04 e 0,13 mg L-1. Foi verificada a ausência de natamicina em todas as amostras analisadas por CLAE-DAD. No desenvolvimento do método de confirmação (qualitativo) por CLAE acoplado à Espectroscopia de Massas (EM/EM) foram considerados os parâmetros de ionização e fragmentação da natamicina de forma a se obter a máxima sensibilidade; os íons de m/z 503,5 e 485,3 foram selecionados para avaliar a presença dessa substância em dez amostras (sete vinhos suaves e três sucos de uva), encontrando três provavelmente positivas (valores abaixo do limite de detecção do método CLAE-DAD). Na melhor condição de armazenamento testada, amostra protegida da luz e sob refrigeração, a concentração inicial (4,96 mg L-1) de natamicina na matriz vinho diminuiu em 28% (3,55 mg L-1), em 60 dias. / Natamycin is an antifungal agent produced by Streptomyces natalensis, its use as a food additive is mainly related to the surface treatment of cheeses and sausages. The presence of natamycin was evaluated in 138 samples (16 grape juices, 118 wines and four grape and wine derivatives), by the quantitative method of High Performance Liquid Chromatography (HPLC) with Diode Array Detector (DAD). The response of natamycin was not influenced by the effect of the evaluated matrices and the method was linear in the range of work from 0.1 to 5.0 mg L-1. The detection and quantification limits were, respectively, 0.04 and 0.13 mg L-1. The absence of natamycin was verified in all samples analyzed by HPLC-DAD. In the confirmation method (qualitative) by HPLC coupled with mass spectrometry (MS/MS) natamycin ionization and fragmentation parameters were considered in order to obtain maximum sensitivity; m/z 503.5 and 485.3 ions were selected to evaluate the presence of this substance on ten samples (seven sweet wines and three grape juice), three of them probably positive (values below the limit of detection by HPLC-DAD). In the best storage conditions tested, sample protected from light and under refrigeration, the initial natamycin concentration (4,96 mg L-1) in the wine decreased 28% (3,55 mg L-1) in 60 days.

Para a produção de vinhos de qualidade torna-se necessário a seleção de locais que tenham condições de clima e solo que proporcionem um balanço hídrico adequado para o crescimento e a maturação da uva. Este trabalho teve como objetivos avançar na caracterização física e química do solo e da demanda hídrica atmosférica, visando a definição do balanço hídrico em diferentes vinhedos da região e os impactos destes fatores sobre o vigor de crescimento, a produção e a qualidade enológica. Os experimentos foram conduzidos em seis vinhedos localizados nos municípios de Santana do Livramento, Dom Pedrito, Bagé e Candiota, nas safras de 2013, 2014, 2015 e 2016. Foram adotadas duas estratégias de pesquisa: 1) com enfoque mais amplo e envolvendo seis áreas de ‘Cabernet Sauvignon’/SO4, denominada de Ação Horizontal, monitorado por estações meteorológicas do INMET; e 2) com variações específicas de manejo e com um maior detalhamento de análise em um único vinhedo de ‘Merlot’ /SO4(Santa Colina), denominada de Ação Vertical, monitorado com uma estação meteorológica automática Campbell® . O balanço hídrico diário foi calculado segundo método de Thornthwaite & Mather (1955). Para os seis vinhedos experimentais foram feitas as curvas de retenção de água no solo e a caracterização de cada perfil de solo. Ao longo de cada ciclo foram avaliadas as condições meteorológicas, as disponibilidades hídricas (balanço hídrico), a fenologia e os parâmetros de crescimento, rendimento, maturação, qualidade enológica da uva e do vinho. As condições meteorológicas dos últimos ciclos foram diferentes da normal climática, com o maior acúmulo de precipitação. No balanço hídrico dos vinhedos da Campanha ocorreram restrições hídricas no início da maturação da uva, que podem favorecer a qualidade enológica, mas não comprometem a sobrevivência de videiras adultas em produção. As condições climáticas, o tipo de solo e o manejo dos vinhedos influenciaram a qualidade enológica da uva e do vinho. Os municípios de Santana do Livramento, Dom Pedrito, Bagé e Candiota apresentam condições de solo e clima que podem favorecer a maturação e a qualidade das uvas e vinhos de 'Merlot' e 'Cabernet Sauvignon’, principalmente nas áreas com argissolos e luvissolos. / For the production of quality wines it is necessary to select sites that have climate and soil conditions to provide an adequate water balance for the growth and maturation of grapes. This study aimed to advance in the physical and chemical characterization of soil and atmospheric water demand, in order to define the water balance in different vineyards and the impact of these factors on the vigour, the production and the wine quality. The experiments were conducted in six vineyards located in counties of Santana do Livramento, Dom Pedrito, Bagé and Candiota, during vintages of 2013, 2014, 2015 and 2016. In this work were adopted two research strategies: 1) with a broad approach, involving six areas of Cabernet Sauvignon / SO4, called Horizontal Action and monitored by weather stations INMET; and 2) with specific variations in the management and more detailed analysis in a single vineyard of 'Merlot' / SO4, called the Vertical Action and monitored with an automatic weather station Campbell®. The diary water balance was calculated according to Thornthwaite & Mather (1955) method. For the six experimental vineyards were determined the water retention curves and the characterization of each soil profile. Throughout each cycle were evaluated weather conditions, water availability (water balance), phenology and parameters of growth, yield, maturity, enological quality of grapes and wine. The meteorological conditions of all growth cycles were different from normal weather with the greatest volume of precipitation. However, in the water balance of the vineyards was observed water restrictions at the beginning of the grape maturation, which may favor the wine quality, but do not compromise the survival of adult vines in production. Weather conditions, soil type and management of vineyards influenced the quality of grapes and wine. The counties of Santana do Livramento, Dom Pedrito, Bagé and Candiota presents soil and weather conditions that can improve the maturation and quality of grapes and wines of 'Merlot' and 'Cabernet Sauvignon, especially in areas with argisols and luvisols.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-07-19T20:22:18Z No. of bitstreams: 1 2012_AnnaCristinadeFreitas.pdf: 2030875 bytes, checksum: 8e3c0630c707b786907b6adba46bb9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-08-09T12:42:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_AnnaCristinadeFreitas.pdf: 2030875 bytes, checksum: 8e3c0630c707b786907b6adba46bb9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-09T12:42:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_AnnaCristinadeFreitas.pdf: 2030875 bytes, checksum: 8e3c0630c707b786907b6adba46bb9c7 (MD5) / O cancro bacteriano da videira, causado por Xanthomonas campestris pv. viticola (Xcv) Nayudu ( (Dye), foi detectado no Brasil pela primeira vez em 1998, em plantas de Vitis vinifera, variedade Red Globe, em Petrolina, Pernambuco. A doença é responsável por prejuízos ao cultivo da videira no Vale do Submédio São Francisco, apresentando incidência expressiva e importância econômica. Uma das medidas mais eficazes para conter sua disseminação para novas áreas é o uso de material de propagação livre do patógeno. Este estudo teve como objetivo geral otimizar a técnica de PCR (Reação da Polimerase em Cadeia) para detecção de Xcv em tecidos assintomáticos de videira. Foram objetivos específicos: determinar o limite mínimo de detecção por BIO-PCR aliado ao uso de meio semi-seletivo NYDAM e por Nested-PCR em frutos e folhas inoculados e assintomáticas; desenvolver um controle interno para falsos negativos e validar a BIO-PCR e a Nested-PCR em mudas de viveiros e em plantas sintomáticas e assintomáticas de áreas de produção no Vale do Submédio São Francisco. A determinação do limite mínimo de detecção de Xcv por BIO-PCR e Nested-PCR foi realizada com a inoculação de Xcv em frutos e folhas de videira nas concentrações de 102 a 108 ufc/ml. O limite mínimo de detecção por BIO-PCR em frutos e folhas foi de 102 ufc/ml. Com a Nested-PCR o limite mínimo de detecção em frutos foi de 102 ufc/ml e de 103 ufc/ml em folhas. Para o desenvolvimento do controle interno, foram incluídos iniciadores universais para o gene do 16S rRNA de bactérias (F984/1492) em reações multiplex com os iniciadores Xcv1F/Xcv3R. Amplificação dos dois fragmentos esperados ocorreu com DNA purificado de Xcv e com amostras positivas (lavados de folhas) por BIO-PCR e Nested-PCR. Contudo, em 16 amostras negativas por Nested-PCR, apenas em uma ocorreu a amplificação do fragmento correspondente ao gene de 16SrRNA. Na validação dos métodos em áreas de produção com histórico da doença, 97% das amostras coletadas com sintomas foram positivas por BIO-PCR e 69,7% positivas por Nested-PCR. Entre as amostras sem sintomas, a detecção de Xcv só foi possível por BIO-PCR (29,7 % das amostras). De 60 amostras de mudas assintomáticas coletadas em dois viveiros na região, detectou-se Xcv por BIO-PCR em três amostras (5%) de um dos viveiros. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Bacterial canker of grapevine, caused by Xanthomonas campestris pv. viticola (Xcv) Nayudu (Dye), was detected in Brazil in 1998, affecting plants of Vitis vinifera, cultivar Red Globe, in Petrolina, Pernambuco State. This disease is responsible for economic losses in vineyards in the São Francisco river valley, northeastern Brazil. One of the most effective measures to prevent its dissemination to new areas is the use of pathogen-free propagating material. The objective of the present study was to optimize the PCR (polymerase chain reaction)-based method to detect Xcv in asymptomatic grapevine tissues. The specific objectives were: to determine the minimum detection limits of BIO-PCR combined with the use of the semi-selective medium NYDAM and of Nested-PCR in inoculated and asymptomatic fruits and leaves; to develop an internal control for false negatives; and to validate the BIO-PCR and Nested-PCR methods by testing asymptomatic plants from nurseries and symptomatic and asymptomatic plants from grapevine-producing areas in the São Francisco river valley. The detection limit of BIO-PCR and Nested-PCR was performed by inoculating Xcv in grapevine fruits and leaves, at concentrations from 102 to 108 cfu/ml. The lower detection limit of BIO-PCR in fruits and leaves was 102 cfu/ml. Using Nested-PCR, the detection limit in fruits was 102 cfu/ml, and 103 cfu/ml in leaf samples. To develop the internal control for PCR, universal primers for bacterial 16S rRNA gene (F984/1492) were included in multiplex reactions with primer pair Xcv1F/Xcv3R. Amplification of the two expected fragments occurred with purified Xcv DNA and with samples (washes from leaves) tested positive by BIO-PCR and Nested-PCR. However, only one out of 16 samples tested negative by nested-PCR yielded the 16SrRNA amplicon. When validating the methods in production areas with a history of the disease, 97% of the symptomatic samples were positive by BIO-PCR and 69.7% positive by Nested-PCR. Among asymptomatic samples, detection of Xcv was possible only by BIO- PCR (29.7% of samples). Among 60 samples from asymptomatic plants collected in two nurseries in the region, Xcv was detected by BIO-PCR in three samples (5%) from one of the nurseries.

Lipofuscin is an autofluorescent pigment progressively accumulated during cellular aging, in several tissues, such as heart, muscle and retina, especially in the postmitotic period. That phenomenon may result from oxidative stress, when biomolecules and organelles (mainly mitochondria) are damaged, generating non-degradable products inside lysosomes. Lipofuscin can be photosensitized, promoting photoxidative processes in cellular components. Many studies on lipofuscin were made using the human retinal pigment epithelial cells, but very little is known about lipofuscin from human skin. In this work we investigated the photoinduced formation (UVA and visible light) of lipofuscin and the consequence of its photosensitization by visible light. We also established an efficient protocol for the induction of lipofuscinogenesis, through specific damage in mitochondria and lysosomes. Cells that accumulated lipofuscin, after exposure to UVA and blue light, became sensitive to visible light (400-750 nm). We characterized the absorption and fluorescence emission of lipofuscin, as well as its fluorescence lifetime through the time resolved fluorescence microscopy (FLIM). We observed that lipofuscin in keratinocytes has absorption maximum in the blue region of light spectrum (420-450 nm), and maximum emission in the red. When photosensitized at 466 nm, lipofuscinloaded HaCaT cells had reduced cell viability, which was related with singlet oxygen generation, accumulated 8-oxo-dG premutagenic lesions and breaks in the DNA strand. Besides, we investigated the efficiency of different wavelengthsin visible light spectrum (408, 466, 522 and 650 nm) to promote lipofuscin formation due to damages in both mitochondria and lysosomes. Blue (408 and 466 nm) and green light (522 nm), but not red light (650 nm), promoted damage in mitochondria (membrane and DNA integrity) and lysosomes (membrane integrity and autophagic activity), effectively inducing lipofuscinogenesis. Thus, in addition to UVA, visible spectrum itself increases the sensitivity of keratinocytes to the visible light, through the generation of lipofuscin. Finally, we tested the carcinogenic potential of high-energy blue light (408 nm), by chronically irradiating HaCaT cells. For the first time in the literature, the formation of pyrimidine cyclobutane (CPD) dimers in the nuclear DNA of HaCaT cells was observed immediately or after several cycles of irradiation at 408 nm. We identified four major changes involved with the process of malignant transformation: genomic instability, decrease in the expression of tumor suppressor protein p16INK4a, increase in the proliferation rate and resistance to UVA-induced apoptosis / A lipofuscina é um pigmento autofluorescente acumulado progressivamente durante o envelhecimento celular em diversos tecidos, como o músculo cardíaco e retina, principalmente no período pós-mitótico. Esse fenômeno pode ocorrer em decorrência do estresse oxidativo, quando biomoléculas e organelas (principalmente mitocôndrias) sofrem danos, gerando produtos não degradáveis no interior dos lisossomos. A lipofuscina pode ser fotossensibilizada promovendo processos fotoxidativos nos componentes celulares. Muitos estudos de lipofuscina foram feitos em células do epitélio pigmentar da retina de olho humano, mas conhece-se muito pouco sobre a lipofuscina de pele humana. Neste trabalho nós investigamos a formação fotoinduzida (UVA e luz visível) de lipofuscina e as consequências da sua fotossensibilização pela luz visível. Nós também estabelecemos protocolos eficazes na indução de lipofuscinogênese, por meio de dano específico em mitocôndrias e lisossomos. Células que acumularam lipofuscina, após exposição à UVA ou luz azul, tornaram-se sensíveis à luz visível (400-750 nm). Caracterizamos as propriedades de absorção e de emissão da lipofuscina e seu tempo de vida de fluorescência, utilizando a microscopia de fluorescência resolvida no tempo (FLIM). Observamos que lipofuscina em queratinócitos tem máximo de absorção na região do azul (420-450 nm), com emissão máxima de fluorescência no vermelho. As células HaCaT carregadas com lipofuscina efotossensibilizadas no visível, tiveram redução da viabilidade celular, que foi relacionada com a geração de oxigênio singlete, bem como acumularam lesões pré-mutagênicas 8-oxo-dG e quebras na fita de DNA. Também, investigamos a eficiência de diferentes comprimentos de onda da luz visível (408, 466, 522 e 650 nm) em promover a formação de lipofuscina em consequência de lesões em mitocôndrias e lisossomos. Tanto a luz azul (408 e 466 nm) quanto a luz verde (522 nm), mas não vermelha (650 nm) promoveram dano em mitocôndrias (integridade de membrana e DNA) e lisossomos (integridade de membrana e atividade autofágica), induzindo eficientemente lipofuscinogênese. Logo, além de UVA, o próprio espectro do visível aumenta a sensibilidade de queratinócitos à luz visível, através da geração de lipofuscina. Por fim, testamos o potencial carcinogênico da luz azul de alta energia (408 nm), irradiando células HaCaT cronicamente. Identificamos quatro mudanças principais envolvidas com o processo de transformação maligna: instabilidade genômica, redução da expressão de proteína supressora de tumor p16INK4a, aumento da taxa de proliferação, e resistência à apoptose. Além disso, a formação de dímeros de pirimidina ciclobutano (CPD) no DNA nuclear de células HaCaT logo após ou depois de vários ciclos de irradiação com 408 nm foi observada pela primeira vez na literatura.

Com o objetivo de avaliar o impacto de diferentes práticas agrícolas sobre as comunidades de FMA, foi realizado um levantamento no município de Urussanga/SC, no qual foram estudados diferentes vinhedos conduzidos com manejo orgânico e convencional.