Orientadores: Alba Regina Monteiro Souza Brito, Regina Celia Spadari-Bratfisch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T11:59:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marinho_EduardoAryVillela_M.pdf: 3614003 bytes, checksum: 9257f5def2cccc168c60369b0461d4d5 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Neste trabalho foram investigadas as respostas da camada muscular interna do dueto deferente humano a agonistas colinérgicos e adrenérgicos na ausência e na presença de antagonistas. Os duetos foram obtidos de homens saudáveis com idade entre 25 e 45 anos, em cirurgia de vasectomia, e imediatamente colocados em solução de Krebs-Henseleit, onde foram mantidos sob refrigeração, até o momento da realização do experimento. Os experimentos ocorreram no máximo 48 horas após a cirurgia. Os duetos foram preparados de três maneiras distintas: tiras em espiral, anéis ou cortes transversais alternados, para definição da preparação mais sensível, a qual seria utilizada nos experimentos subseqüentes. Foi definido anteriormente que seria mais sensível aquela preparação que mostrasse maior resposta máxima e maior valor pD2 para a noradrenalina. Após a definição da técnica, os duetos foram submetidos à ação de agonistas colinérgicos. Não foram obtidas respostas contráteis a estes agonistas. Em seguida foram realizadas curvas dose-efeito a agonistas adrenérgicos, com os quais foram obtidas respostas que permitiram o estudo da população de adreno-receptores, assim como estudos dos sistemas de metabolização de catecolaminas nesta região do tecido. Para o estudo das populações específicas de receptores, foram utilizados agonistas e antagonistas seletivos. Os resultados obtidos permitiram concluir que: preparação mais sensível e, portanto, a ser utilizada no estudo da contração da camada muscular circular interna do dueto deferente humano, é a preparação em espiral; a preparação em estudo é insensível a agonistas colinérgicos, sugerindo ausência ou população restrita de receptores na região estudada; a contração da camada circular é fundamentalmente adrenérgica, verificando-se principalmente a presença de receptores do tipo a1; os sistemas de metabolização de catecolaminas são ativos, atuando de maneIra conjunta (recaptação neuronal ecaptação extraneuronal); estudos funcionais permitiram ainda sugerir que parte da resposta pode estar associada a receptores do sub-tipo a1a, os quais utilizam o cálcio extracelular como segundo mensageiro / Abstract: The objective of this work was to investigate the response of the circular smooth muscle layer of the human vas deferens to cholinergic and adrenergic agonists in the absence and in the presence of antagonists. The vas deferens were obtained from 25 to 45 years old men in vasectomy surgeries. Tissues were kept in Krebs-Henseleit solution, under refrigeration, for no longer than 48 hours. Vas deferens were prepared in three different ways: spiral strips, rings or alternate transversal cuts, in order to determine the most sensitive preparation for the subsequent experiments. The tissues were exposed to cholinergic agonists but no contractile responses were observed. Tissue exposure to adrenergic agonists resulted in correspondent dose-effect curves, obtained in the absence or in the presence of selective antagonists. The results indicated that: the most sensitive preparation was the spiral strip; the contraction of the circular smooth inner layer is mostly adrenergic with major presence of the a1 adrenoceptor; functional studies suggested that a significant part of the response can be associated to a1a adrenoceptors / Mestrado / Fisiologia e Biofisica / Ciencias Biologicas

Orientadores: Luis Antonio Violin Dias Pereira, Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:42:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arroteia_KelenFabiola_M.pdf: 4085296 bytes, checksum: b16df432ee68b5350004243c026c3866 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O processo de fecundação em mamíferos depende de uma seqüência de eventos que culminam na ativação do oócito pelo espermatozóide. A diferenciação completa das células germinativas testiculares em células com capacidade fecundativa envolve não somente o testículo, mas também o epidídimo, ducto deferente e trato reprodutor feminino. No epidídimo acontece a maturação epididimária dos espermatozóides, pela qual ocorrem alterações no padrão molecular da superfície do gameta, visando a capacidade de fecundação. Diversas proteínas sintetizadas pelas células epiteliais do epidídimo, inicialmente liberadas na luz deste órgão, parecem ser posteriormente localizadas na superfície ou mesmo no interior da vesícula acrossômica do espermatozóide. A aquisição da capacidade de fertilização pelo espermatozóide tem sido correlacionada com a nova organização molecular da membrana adquirida durante o fluxo do mesmo a partir da cabeça em direção à cauda do epidídimo. A obtenção de anticorpos monoclonais que reconhecem os antígenos expressos pelas células germinativas testiculares durante seus processos contíguos de diferenciação, bem como aqueles expressos pelas células dos ductos pelos quais os espermatozóides transitam durante o processo de maturação têm constituído importante estratégia para permitir a geração de um mapa das moléculas que atuam na preparação do espermatozóide para a fecundação. O anticorpo monoclonal (Amc) TRA (testicular germ cells immunized to rat- monoc/onal antibody) 54 reconhece um antígeno localizado em espermatócitos e espermátides dos túbulos seminíferos de camundongos C57 BL/6 com idade superior a 24 dias pós-parto (d.p.p.). Resultados preliminares mostraram que o mesmo Amc -reconhece um antígeno nas células epiteliais da cabeça do epidídimo, bem como espermatozóides da luz deste órgão. Este estudo teve por objetivo caracterizar a expressão do antígeno reconhecido pelo Amc TRA 54 nas células epiteliais do epidídimo quanto à ontogenia, características bioquímicas e regulação da expressão. Em conjunto, os dados obtidos com o desenvolvimento deste trabalho poderão auxiliar no esclarecimento do modelo da expressão do antígeno identificado em células germinativas e em células somáticas epiteliais e, adicionalmente, poderão permitir inferências acerca do papel funcional desta molécula na biologia da reprodução / Abstract: In mammals, fertilization depends on a sequence of events that culminates in the activation of the oocyte by the spermatozoa. The complete differentiation of the testicular germ cells in cells with fertilization ability involves the testis, epididymis, vas deferens and female reproductive organs. In the epididymis, the membrane surface of the spermatozoa may be modified, t hrough a process k nown as epididymal maturation. S everal proteins synthesized and secreted by the epididymal epithelial cells can be further located on the spermatozoa membrane surface or even though inside its acrosomal vesicle. The acquisition of the fertilization ability by the spermatozoa has been related with a new molecular organization of the membrane provided during the epididymal transit. The production of monoclonal antibodies (mAb) that recognizes antigens exclusively expressed by testicular germ cells or by the cells of the ducts through the spermatozoa passes during its maturation have been important approach to permit the elaboration of the molecular map involved in the spermatozoa preparation. The mAb TRA 54 recognizes an antigen located in spermatocytes and spermatids of the seminiferous tubules of C57 BU6 mice more than 24 days old. Preliminary results showed that this mAb also recognizes an antigen in the epithelial cells of the caput of the epididymis and in the luminal spermatozoa. This work was performed in order to obtain additional information about the antigen recognized by the mAb TRA 54 in the epididymal epithelial cells for ontogenic expression, biochemical characteristics and expression regulation. The results obtained with the development of this work could contribute to elucidate the expression pattem of the antigen recognized by the antigen identified in both germinative and somatic cells and, -additionally, could permit the formulation of hypothesis around the functional role of this molecule in the reproductive biology / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sidney Glina, Paulo Cesar Rodrigues Palma / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T16:27:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maciel_LuizCarlos_M.pdf: 1549076 bytes, checksum: f3d6484f2a41fafdf24e583249442169 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Introdução: As operações para correção das hérnias inguinais podem ocasionar lesões nos ductos deferentes levando à infertilidade, sendo que a incidência destas lesões varia de 6,65% a 26,7%. As telas de polipropileno têm sido utilizadas em indivíduos jovens nas últimas décadas. Este material induz processo inflamatório e fibrose adjacente conferindo maior reforço à parede posterior do canal inguinal, entretanto não se conhece claramente a repercussão desta reação sobre a histologia e fisiologia do ducto deferente. Objetivo: Este estudo avaliou o comprometimento ou não do ducto deferente de ratos expostos à tela de polipropileno. Método: Quarenta ratos, wistar, machos com três meses de idade, foram submetidos à dissecação bilateral dos ductos deferentes seguidos do implante da tela de polipropileno em um dos lados, tomando-se o lado contra-lateral como seu controle. Os animais foram sacrificados após 90 (Grupo I) e 120 (Grupo II) dias de pós-operatório, e os ductos deferentes, epidídimos e testículos avaliados histopatologicamente por microscopia óptica. Na análise estatística foram utilizados os testes de ?t? de Student e comparação de proporções. Resultados: Houve reação inflamatória tipo corpo estranho em todos os segmentos do ducto deferente exposto à tela e a montante desta, mas em nenhum no lado controle. Não houve obstrução completa do lúmen dos ductos deferentes expostos à tela de polipropileno em nenhum dos animais. O lúmen do ducto deferente apresentou dilatação a montante da tela em relação ao lado controle tanto no grupo I, que apresentou área média de 0,46441 mm², quanto no grupo II, área média de 0,37052 mm², no segmento controle do grupo I a área média foi de 0,2394 mm² e grupo II de 0,20789 mm², e as diferenças entre estes segmentos foram significativas (grupo I: p=0,002 / grupo II: p=0,044). Nos segmentos à montante da tela dos grupos I e II evidenciou-se a presença de espermatozóides no lúmen em 100% dos cortes histológicos, e nos controles de ambos os grupos a presença de espermatozóides ocorreu em 73,68%, sendo estas diferenças significativas (grupo I: p=0,009 / grupo II: p=0,022). A espessura da parede do ducto deferente foi significativamente menor nos segmentos expostos à tela (média de 0,15952 mm / p=4,348E-5) e a montante destes (média de 0,08348 mm / p=9,719E-10) em relação ao ducto deferente controle (média de 0,29968 mm) no grupo I. No grupo II, a espessura média foi de 0,294 mm e 0,1553 mm respectivamente nos segmentos exposto à tela e a montante desta, e 0,3034 mm no controle, apresentando significância apenas entre o segmento a montante da tela e o controle neste grupo (p=0,001). Houve perda do aspecto festonado da mucosa do ducto deferente em todos os segmentos à montante e nenhum no lado controle em ambos os grupos. Nenhum animal apresentou alterações significativas dos epidídimos e testículos, exceto um que apresentou atrofia testicular por provável torção do cordão espermático durante o ato operatório. Conclusão: A tela de polipropileno induz reação inflamatória, a qual resulta em alterações histológicas do ducto deferente que levam à dilatação e represamento de espermatozóides à montante da tela, assim como diminuição da espessura da parede do ducto deferente nos segmentos expostos à tela e à montante dela / Abstract: Background: Vas deferens lesions, leading to infertility, may occur in 6.65% to 26.7% of inguinal herniorraphy. Tension-free herniorraphy using polypropylene mesh, which induces an inflammatory process and adjacent fibrosis, strengthening the posterior inguinal wall, has become very popular. However its histological and physiological effects are not completely known. Objective: This study intended to evaluate the effects of polypropylene mesh in the rat vas deferens. Method: Forty, three-month-old male Wistar rats underwent bilateral vas deferens dissection, followed by mesh implantation on one side. The contra-lateral side was the control. The animals were sacrificed after 90 (Group I) and 120 (Group II) postoperative days. The vas deferens, epididymis and testicles underwent histopathological assessment. Statistics methods used were the ?t? test and the compare proportion. Results: A foreign body reaction occurred after implantation in all animals. Control presented no reaction. The mean lumen dilation in regions before mesh was 0.46441mm² and 0.37052mm², in Group I and II, respectively, and all sections presented spermatozoids. The mean dilation in control rats of Groups I and II was 0.2394mm² and 0.20789mm², respectively and spermatozoids were present in 73,68%. Those differences, between experimental and control animals were significant (group I: p=0,002 / group II: p=0,044). In Group I the average wall thickness of vas deferens segments exposed to mesh was 0.15952mm and the average wall thickness segments before mesh was 0.08348mm while the average wall thickness of control vas deferens was 0.29968mm (p=9,719E-10). In Group II, the mean wall thickness of vas deferens exposed to mesh and before mesh segments was 0.294mm and 0.1553mm, respectively, while the control was 0.3034mm (p=0,001). Mucosal fold loss occurred in all segments before mesh but none in the control. The epididymis and testicles presented no alterations. Conclusion: Polypropylene mesh induces a foreign body reaction with histological alterations in the vas deferens that cause functional obstruction with dilation and spermatozoid repression / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

Orientadores: Antonio Marcos Orsi, Sergio Luis Felisbino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T10:45:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Domeniconi_RaquelFantin_D.pdf: 10868266 bytes, checksum: 8bdfe8a912508f6afd1b6131f9f8934e (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Estudos recentes têm identificado família de proteínas denominadas aquaporinas (AQP), relacionadas à alta permeabilidade de água em várias membranas biológicas. As AQP1, AQP2, AQP7, AQP8 e AQP9 são as principais AQPs identificadas no sistema genital masculino, sendo a sua localização espécie-específica e região-específica. Em vista da importância do fluido luminal na via espermática para a integridade morfofuncional dos espermatozóides, bem como dos componentes que os constituem, tais como a água e proteínas, é importante estudar a distribuição das AQPs ao longo da via espermática. Assim, este trabalho teve como objetivos principais estudar no cão as AQP1, AQP2, AQP7, AQP8 e AQP9, visando identificá-las e localizá-las, através de imuno-histoquímica e ¿Western blotting¿ na via espermática. No cão, a AQP1 foi notada na rede testicular, ductos eferentes e em vasos, sugerindo sua importância na rápida absorção de fluido testicular. Pela primeira vez a AQP2 foi detectada na rede testicular, ductos eferentes e epidídimo, e a AQP7 no epitélio epididimário e ducto deferente em mamíferos. Porém, o papel funcional dessas AQPs no sistema genital masculino do cão permanece desconhecido. A AQP8 não foi detectada ao longo dos ductos extratesticulares do cão. A AQP9 foi abundantemente expressada ao longo da via espermática do cão, que representa um importante caminho apical para o fluxo transmembrana de água e solutos. Portanto, os resultados confirmam o padrão de expressão espécie-específica e região-específica das AQPs, sugerindo variações de atividades de absorção de fluidos e solutos ao longo da via espermática. O conhecimento destas variações torna-se relevante para estudos clínicos de infertilidade, bem como para tecnologias de reprodução assistida / Abstract: Recent studies have identified proteins called aquaporins (AQP) related to the fast water permeability in some biological membranes. AQPs are small, intrinsic membrane proteins that are present in many cell types involved in fluid transport. AQP1, AQP2, AQP7, AQP8 and AQP9 had been the main AQPs identified in the male reproductive tract, being their localization species-specific and region-specific. In view of the importance of the luminal fluid to sperm maturation and integrity of the spermatozoa, it is important to study the distribution of the AQPs throughout the spermatic way. Thus, the aim of this study was to examine the expression of AQP1, AQP2, AQP7, AQP8 e AQP9 in epithelial cells in the adult dog efferent ducts, epididymis and vas deferens, using immunohistochemistry and estern blotting methods to characterize the aquaporins in male reproductive tract. In dog, AQP1 was noted in rete testis, efferent ducts and in vessels in intertubular space, suggesting that AQP1 is important for rapid absorption of testicular fluid. For the first time the AQP2 was detected in rete testis, efferent ducts and epididymis and the AQP7 was expressed in the epithelium epididymidis and in vas deferens in mammals. But its functional role in the male dog reproductive tract, remain unknown. No specific staining for AQP8 was detected in epithelial cells of excurrent ducts in dog testis. AQP9 was abundantly expressed in dog male reproductive tract, in which it is an important apical pathway for transmembrane flow of water and neutral solutes. Thus the results confirm that the AQPs are species-specific and region-specific, suggesting activity variations related with the fluid and solute absorption throughout male excurrent ducts. Investigations of AQP biology could be relevant to clinical studies of the male reproductive tract, as well as to technologies for assisted procreation / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural