nÃo hà / Lectinas sÃo glicoporteÃnas que interagem de forma reversÃvel e especificamente com carboidratos. A lectina Vatairea macrocarpa (VML) à uma lectina ligadora de galactose pertencente à famÃlia de leguminosas da tribo Dalbergiae. No presente estudo, nÃs investigamos os efeitos da lectina Vatairea macrocarpa (VML) no modelo de rim isolado de rato, bem como as alteraÃÃes histolÃgicas. O rim isolado a partir de ratos Wistar, pesando entre 240 e 280g foram perfundidos com soluÃÃo de Krebs-Henseleit contendo 6% de albumina bovina sÃrica. Os parÃmetros estudados incluem: pressÃo de perfusÃo (PP), resistÃncia vascular renal (RVR), ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG), fluxo urinÃrio (FU), percentual de transporte tubular de sÃdio (%TNa), percentual de transporte tubular de potÃssio (%TK), e percentual de transporte tubular de cloro (%TCl). A lectina Vatairea macrocarpa (10 Âg/ml) aumentou a pressÃo de perfusÃo, a resistÃncia vascular renal, o fluxo urinÃrio e o ritmo de filtraÃÃo glomerular. Por outro lado, a Vatairea macrocarpa (VML) nÃo alterou o percentual de transporte dos Ãons sÃdio, potÃssio e cloro. O complexo Galactose-Lectina (Gal-VML) quando utilizado nÃo causou qualquer alteraÃÃo nos parÃmetros avaliados, ou seja, bloqueou significativamente o aumento dos parÃmetros PP, RVR, UF e RFG, observados pela aÃÃo da lectina Vatareia macrocarpa (VML). No grupo controle a histologia apresentou um pequeno aumento de material proteinÃceo nos espaÃos urinÃrios, no entanto, nÃo foram detectadas alteraÃÃes a nÃvel de tÃbulos renais. A administraÃÃo de galactose sozinha nÃo modificou os parÃmetros funcionais renais. Os rins prÃ-tratados com Gal-VML teve apenas um pequeno acÃmulo de material proteinÃceo nos espaÃos urinÃrios, mas nenhuma anormalidade foi nos tÃbulos renais. Estes resultados sugerem que a lectina obtida a partir de semestres de Vatairea macrocarpa apresenta importante efeito sobre o sistema renal relacionado com o sÃtio carboidrato-ligante, tendo em vista observamos reversÃo dos efeitos renais quando se utilizou o inibidor especÃfico. O presente trabalho à a primeira demonstraÃÃo de atividade biolÃgica da VML em rim isolado de rato. / Lectins are glycoproteins that interact reversibly and specifically with carbohydrates. The Vatairea macrocapa lectin (VML) is a galactose-binding lectin present in the family leguminosae and in the tribe Dalbergieae. ln the present study, we investigated the effect of Vatairea macrocarpa lectin (VML) in the isolated rat kidneys, as well as histological changes. Isolated kidneys from Wistar rats, weighing 240 to 280g, were perfused with Krebs-Henseleit solution containing 6% of bovine serum albumin. The parameters studied included perfusion pressure (PP), renal vascular resistance (RVR), glomerular filtration rate (GPR), urinary flow (UF), percent of sodium tubular transport (%TNa+), percent of potassium tubular transport (%TK+) and percent of chloride tubular transport (%TCl-). The latairea macrocarpa lectin (10 Âg/mL) increased the PP, RVR, UF and GPR. On the other hand, VML did not change the %TNa+, %TK+ and % TCl-. The lectin plus galactose complex (Gal-VML) signihcantly blocked the increase in the PP, RVR, UF and RFG. ln the control group showed a small amount of a proteinaceous material in the urinary space, although no alteration in the renal tubules was detected. The administrated of galactose alone did not modify the functional kidney parameters. The kidneys perfused with /ML showed moderate deposit of proteinaceous material in the tubules and urinary space. ln the kidneys pretreated with Gal-VML had only small amount of a proteinaceous material in the urinary space. But no abnormalities were seen in renal tubules. These results suggest that lectin from Vatairea macrocarpa seeds presents important effect on renal system reported carbohydrate-binding site, taken into account that showed the reversion of renal effects using the inhibitor specific. The current experiments are first demonstration of biological action of VML in the isolated kidney.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / No presente trabalho à feita a descriÃÃo de trÃs genes distintos que codificam lectinas ou proteÃnas relacionadas à lectina de Vatairea macrocarpa. As sequÃncias foram obtidas pela amplificaÃÃo de DNA genÃmico e cDNA de folhas utilizando primers semi-degenerados construÃdos a partir da informaÃÃo da sequÃncia de aminoÃcidos da lectina VML depositada no GenBank. O resultado do sequenciamento revelou a presenÃa de trÃs contigs. O contig1 corresponde à lectina VML desde que se assuma que a lectina depositada VML contenha heterogeneidades ou ambiguidades decorrentes na degradaÃÃo de Edman. A traduÃÃo dos contigs 2 e 3 mostram identidade de sequÃncia de 77% quando comparadas com VML. As sequÃncias, apesar de apresentar regiÃes conservadas, mostram diferenÃas de aminoÃcidos nos sÃtios de N-glicosilaÃÃo, sÃtios de ligaÃÃo a carboidrato e metais alÃm da presenÃa de resÃduos de cisteÃna sugerindo que tais proteÃnas podem ter outras atividades biolÃgicas. A anÃlise da sequÃncia obtida pelo 3â RACE se mostrou complementar ao contig3. Sendo assim, a sequÃncia hÃbrida contig3/contigA possui 2 resÃduos de cisteÃna alÃm de revelar diferenÃas de aminoÃcidos na regiÃo C-terminal quando alinhada com outras lectinas de leguminosas. AnÃlises filogenÃticas revelaram que os contigs observados formam um grupo monofiletico e tem alta similaridade com as lectinas de Sohora japonica e Robinia pseudoacacia, alÃm da proteÃna relacionada à lectina de Cladrastis lutea. / In this paper is made a description of three distinct genes that encode Vatairea macrocarpa lectin and related proteins. The sequences were obtained by amplification of genomic DNA and cDNA of leaves using semi - degenerate primers constructed from the information of the amino acid sequence of VML lectin deposited in GenBank. The result of sequencing rev eals the presence of three different genes, called contig 1, 2 and 3 . The VML lectin corresponds to contig1 long as one assumes that the lectin contains heterogeneities deposited VML or ambiguities arising in the Edman degradation . The translation of cont igs 2 and 3 show sequence identity of 77% compared to VML. Sequences, despite having conserved regions show differences in amino acid N - glycosylation sites, carbohydrate binding sites and metals and the presence of cysteine residues suggests that these pro teins may have other biological activities . The analysis of the sequence obtained by 3 'RACE proved complementary to contig3. Thus, the sequence contig3/contigA hybrid has two cysteine residues in addition to revealing differences in amino acid C - terminal region when aligned with other legume lectins. Phylogenetic analysis revealed that the observed contigs form a monophyletic group and has high similarity with lectins from Robinia pseudoacacia Sohora japonica and, in addition to the lectin - related protein Cladrastis lutea .

ALVES FILHO, João Garcia. Clonagem, sequenciamento e caracterização parcial dos genes relacionados à lectina de Vatairea macrocarpa. 2008. 81 f. Dissertação (Mestrado)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2008. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-05-25T14:10:53Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_jgalvesfilho.pdf: 1626131 bytes, checksum: fbd1ed851edb7139baaf9677e39e516a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-05T20:59:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_jgalvesfilho.pdf: 1626131 bytes, checksum: fbd1ed851edb7139baaf9677e39e516a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T20:59:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_jgalvesfilho.pdf: 1626131 bytes, checksum: fbd1ed851edb7139baaf9677e39e516a (MD5) Previous issue date: 2008 / In this paper is made a description of three distinct genes that encode Vatairea macrocarpa lectin and related proteins. The sequences were obtained by amplification of genomic DNA and cDNA of leaves using semi - degenerate primers constructed from the information of the amino acid sequence of VML lectin deposited in GenBank. The result of sequencing rev eals the presence of three different genes, called contig 1, 2 and 3 . The VML lectin corresponds to contig1 long as one assumes that the lectin contains heterogeneities deposited VML or ambiguities arising in the Edman degradation . The translation of cont igs 2 and 3 show sequence identity of 77% compared to VML. Sequences, despite having conserved regions show differences in amino acid N - glycosylation sites, carbohydrate binding sites and metals and the presence of cysteine residues suggests that these pro teins may have other biological activities . The analysis of the sequence obtained by 3 'RACE proved complementary to contig3. Thus, the sequence contig3/contigA hybrid has two cysteine residues in addition to revealing differences in amino acid C - terminal region when aligned with other legume lectins. Phylogenetic analysis revealed that the observed contigs form a monophyletic group and has high similarity with lectins from Robinia pseudoacacia Sohora japonica and, in addition to the lectin - related protein Cladrastis lutea. / No presente trabalho é feita a descrição de três genes distintos que codificam lectinas ou proteínas relacionadas à lectina de Vatairea macrocarpa. As sequências foram obtidas pela amplificação de DNA genômico e cDNA de folhas utilizando primers semi-degenerados construídos a partir da informação da sequência de aminoácidos da lectina VML depositada no GenBank. O resultado do sequenciamento revelou a presença de três contigs. O contig1 corresponde à lectina VML desde que se assuma que a lectina depositada VML contenha heterogeneidades ou ambiguidades decorrentes na degradação de Edman. A tradução dos contigs 2 e 3 mostram identidade de sequência de 77% quando comparadas com VML. As sequências, apesar de apresentar regiões conservadas, mostram diferenças de aminoácidos nos sítios de N-glicosilação, sítios de ligação a carboidrato e metais além da presença de resíduos de cisteína sugerindo que tais proteínas podem ter outras atividades biológicas. A análise da sequência obtida pelo 3’ RACE se mostrou complementar ao contig3. Sendo assim, a sequência híbrida contig3/contigA possui 2 resíduos de cisteína além de revelar diferenças de aminoácidos na região C-terminal quando alinhada com outras lectinas de leguminosas. Análises filogenéticas revelaram que os contigs observados formam um grupo monofiletico e tem alta similaridade com as lectinas de Sohora japonica e Robinia pseudoacacia, além da proteína relacionada à lectina de Cladrastis lutea.